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番茄SlWDR204基因正调控植物干旱胁迫 预览
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作者 张琳 李欢欢 +2 位作者 于淑坤 黄曼 苗敏 《安徽农业科学》 CAS 2019年第1期96-98,114共4页
为了进一步研究SlWDR204的功能,克隆了番茄的SlWDR204基因,通过亚细胞定位为研究其功能提供线索,并通过农杆菌介导法,利用RNAi技术获得SlWDR204基因下调的转基因植株。干旱胁迫试验表明,转基因番茄对干旱胁迫更加敏感,说明SlWDR204基因... 为了进一步研究SlWDR204的功能,克隆了番茄的SlWDR204基因,通过亚细胞定位为研究其功能提供线索,并通过农杆菌介导法,利用RNAi技术获得SlWDR204基因下调的转基因植株。干旱胁迫试验表明,转基因番茄对干旱胁迫更加敏感,说明SlWDR204基因正向调控植物对干旱的响应,这一发现为分子育种提供了新的靶标基因,并为阐明植物抗旱的分子机理奠定了基础。 展开更多
关键词 SlWDR204基因 WD40家族蛋白 转基因番茄 抗旱性
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番茄胞嘧啶甲基转移酶同源基因SlMET1功能研究 预览
2
作者 曹徐绿 唐晓凤 +1 位作者 苗敏 刘永胜 《合肥工业大学学报:自然科学版》 北大核心 2017年第6期829-834,共6页
真核生物中,DNA甲基化作为表观遗传学修饰的重要手段之一,影响了植物的大量生长发育过程。文章通过生物信息学分析确定番茄中的胞嘧啶甲基转移酶同源基因(SlMET1)并对其进行进化关系的分析;利用聚合酶链式反应(polymerase chain r... 真核生物中,DNA甲基化作为表观遗传学修饰的重要手段之一,影响了植物的大量生长发育过程。文章通过生物信息学分析确定番茄中的胞嘧啶甲基转移酶同源基因(SlMET1)并对其进行进化关系的分析;利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术从番茄cDNA中扩增出胞嘧啶甲基转移酶同源基因(SlMETl)全长,构建SlMET1与绿色荧光蛋白融合表达载体,通过在烟草瞬时表达系统,对其进行亚细胞定位;实时定量PCR分析SlMET1基因在番茄不同组织中的表达模式;同时,构建SlMET1与HA标签蛋白融合表达载体,通过免疫共沉淀分析其与DDBl的相互关系。研究结果表明:SIMETl基因在番茄各个时期和组织中都有表达,其中,叶片和花中表达量较高,在果实的变色期和红果时期表达量较低;通过绿色荧光融合蛋白载体的表达,确定SIMETl基因只在番茄细胞核中表达;通过免疫共沉淀分析确定S1METl和DDBl之间存在相互作用。该研究为研究DDBl以表观遗传学的方式调控植物生长发育过程奠定了理论基础。 展开更多
关键词 SlMET1基因 过量表达 转基因番茄 聚合酶链式反应(PCR) 亚细胞定位 免疫共沉淀
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番茄中一个抗病基因功能的研究 预览
3
作者 许伟 苗敏 +1 位作者 唐晓凤 刘永胜 《合肥工业大学学报:自然科学版》 北大核心 2017年第4期547-552,共6页
植物中最大的一类抗病基因(R)编码的蛋白质含有卷曲螺旋结构(coiled-coil,CC)、核苷酸结合位点(nucleotide-bindingsite,NBS)和富含亮氨基酸的重复序列(1eucine-richrepeat,LRR)结构域。R基因以抗病著称。文章通过酵母双杂... 植物中最大的一类抗病基因(R)编码的蛋白质含有卷曲螺旋结构(coiled-coil,CC)、核苷酸结合位点(nucleotide-bindingsite,NBS)和富含亮氨基酸的重复序列(1eucine-richrepeat,LRR)结构域。R基因以抗病著称。文章通过酵母双杂筛选方式获得了DDl3基因,该基因与番茄中重要功能基因DDBl具有相互作用,而又含有CC-NBS-LRR结构,预测具有R基因抗病性,参与植物抗病。研究中构建了DDl3过表达载体并通过根瘤农杆菌介导转化到野生型番茄中,筛选获得DDl3高表达的阳性转基因株系。通过病菌接种实验,观察植株发病情况和统计细菌菌落数,结果发现,转基因植株的抗病性明显高于野生型番茄。DDl3基因对提高番茄的抗病性有很高的价值,为采用基因工程方法改良番茄植株抗病性做出新的尝试,同时又与番茄DDBl基因具有相互作用,对研究DDBl基因在参与植物抗病途径中的功能研究提供新的方向。 展开更多
关键词 DD13基因 CC-NBS-LRR结构域 转基因番茄 抗病性
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提高番茄品质的番茄去泛素化酶基因AMSH3 预览 被引量:1
4
作者 刘艳红 李光伟 刘永胜 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期548-553,共6页
AMSH3酶是去泛素化酶中MPN(+)/JAMM蛋白酶家族的一员,能结合泛素化蛋白上的泛素分子。文章在番茄中发现了一去泛素化酶基因SlAMSH3,与拟南芥去泛素化酶基因AtAMSH3在核酸水平和蛋白水平分别有81%和71%的相似性。拟南芥中去泛素化酶At... AMSH3酶是去泛素化酶中MPN(+)/JAMM蛋白酶家族的一员,能结合泛素化蛋白上的泛素分子。文章在番茄中发现了一去泛素化酶基因SlAMSH3,与拟南芥去泛素化酶基因AtAMSH3在核酸水平和蛋白水平分别有81%和71%的相似性。拟南芥中去泛素化酶AtAMSH3会影响植物液泡的形成和液泡蛋白的运输途径。文章构建了SlAMSH3果实特异表达的过表达载体,并通过根瘤农杆菌介导转化到野生型番茄中,通过筛选获得SlAMSH3在果实中高表达阳性株系,实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分析显示,转基因番茄果实中SlAMSH3的表达量明显高于野生型果实(p〈0.05)。文章测定了阳性番茄株系绿熟期果实叶绿素质量浓度及红熟期果实的单果质量、果实糖度、果实硬度、番茄红素质量浓度和β-胡萝卜素质量浓度。结果表明,转基因番茄果实的叶绿素总质量浓度、番茄红素和β-胡萝卜素比野生型分别提高178.61%、40.53%和74.86%,其他指标无显著差异。因此,SlAMSH3果实特异过表达的方法能够改良番茄果实品质,为基因工程方法改良番茄果实品质做出了新尝试。 展开更多
关键词 AMSH3基因 果实特异过表达 遗传转化 转基因番茄 果实品质改良
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ZmBK2L3在番茄果实中的特异表达及其功能研究 预览
5
作者 杨潇怡 隋媛 +3 位作者 唐晓凤 曹徐绿 岳俊阳 刘永胜 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期410-414,共5页
文章通过构建玉米BK2L3基因果实特异表达的过量表达载体,对转基因番茄果实进行研究,实现以基因工程手段延长番茄果实货架期的目的。利用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术从玉米c... 文章通过构建玉米BK2L3基因果实特异表达的过量表达载体,对转基因番茄果实进行研究,实现以基因工程手段延长番茄果实货架期的目的。利用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术从玉米cDNA中扩增出ZmBK2L3基因全长,导入启动子为果实特异表达的TFM7植物表达载体pBll2l上,经农杆菌介导转入野生型番茄中,获得转基因阳性植株。分别以野生型番茄和转基因番茄为材料,分析BK2L3在果实中的表达情况,观察绿熟期果实果皮细胞壁结构,测定红熟期果实的硬度、货架期和果皮纤维素质量比。结果表明:转基因番茄果实中BK2L3的表达量明显高于野生型果实。转基因番茄果实的硬度、果皮纤维素质量比和果皮厚度均比野生型有所提高,果实货架期明显增长。因此,BK2L3基因的过量表达与细胞壁代谢和货架期有关,可改良果实的品质。 展开更多
关键词 BK2L3基因 货架期 过量表达 果实特异表达 转基因番茄 遗传转化
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猕猴桃AcGLK2a基因过表达载体的构建及在番茄中的遗传转化 预览 被引量:4
6
作者 周昂 牛向丽 刘永胜 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期246-249,共4页
文章构建猕猴桃AcGLK2a(Actinidia chinensis GOLDEN2-LIKE)基因过表达载体,转入番茄植株中对转基因番茄果实进行初步分析,可为采用基因工程方法转入外源基因对改良番茄果实品质做新的尝试。提取猕猴桃RNA基因,进行反转录得到猕猴桃cD... 文章构建猕猴桃AcGLK2a(Actinidia chinensis GOLDEN2-LIKE)基因过表达载体,转入番茄植株中对转基因番茄果实进行初步分析,可为采用基因工程方法转入外源基因对改良番茄果实品质做新的尝试。提取猕猴桃RNA基因,进行反转录得到猕猴桃cDNA,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获得猕猴桃AcGLK2a基因,将该基因序列导入带有CaMV35S启动子的植物表达载体pBI121上。将所构建的pBI121-35S-AcGLK2a表达载体采用农杆菌介导的方式转入番茄植株中,得到转基因番茄苗并做阳性鉴定。半定量分析转基因番茄中AcGLK2a的表达量,并测定转基因番茄和野生番茄的果实、叶片中叶绿素的质量比。半定量逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)分析显示,猕猴桃AcGLK2a基因在转基因植株中表达,转基因番茄果实、叶片中的叶绿素质量比均比野生型高。因此,将猕猴桃AcGLK2a基因在番茄植株中过表达有利于提高番茄果实品质。 展开更多
关键词 过表达 遗传转化 转基因番茄 果实品质改良
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RNAi和 GroEL 介导的双价转基因番茄对 TYLCV的抗性 预览
7
作者 杨玛丽 张保龙 +4 位作者 郭佳茹 赵统敏 余文贵 赵丽萍 王银磊 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期1102-1108,共7页
本研究将已构建的SUC2-GroEL和pBI121-AC1-AC2植物表达载体共转化番茄,共获得19株卡那霉素抗性再生植株。经过PCR和RT-PCR检测,初步获得转SUC2-GroEL载体的阳性植株5株,转pBI121-AC1-AC2载体的阳性植株3株以及转SUC2-GroEL/ pBI121-A... 本研究将已构建的SUC2-GroEL和pBI121-AC1-AC2植物表达载体共转化番茄,共获得19株卡那霉素抗性再生植株。经过PCR和RT-PCR检测,初步获得转SUC2-GroEL载体的阳性植株5株,转pBI121-AC1-AC2载体的阳性植株3株以及转SUC2-GroEL/ pBI121-AC1-AC2双载体的阳性植株2株。利用TYLCV侵染性克隆农杆菌注射接种法对T0代转基因阳性植株进行抗性鉴定,获得抗TYLCV的转基因植株7株。对T0代未扩出病毒条带的T1代植株进行抗性鉴定,结果发现转SUC2-GroEL、pBI121-AC1-AC2、SUC2-GroEL/pBI121-AC1-AC2不同载体的株系植株中平均带毒率依次是35%、25%和15%,推断转双基因的植株的抗病能力优于转单个基因植株的抗病能力。 展开更多
关键词 番茄黄化曲叶病毒 共转化 转基因番茄
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表达嵌合体蛋白PAcP/CTB的转基因番茄防龋疫苗口服免疫大白兔的研究 被引量:3
8
作者 白国辉 刘建国 +6 位作者 田源 陈筑 顾瑜 管晓燕 白朋元 韩琪 钱昱霏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期2006-2009,共4页
目的观察表达嵌合体蛋白PAcP/CTB转基因番茄防龋疫苗的免疫原性和免疫反应性。方法用PAc标准蛋白制作标准曲线,ELISA法检测番茄果实PAcP/CTB蛋白的浓度。实验动物按完全随机分组法分为3组,实验组喂食3个剂量(PAcP/CTB蛋白量相差1.5倍... 目的观察表达嵌合体蛋白PAcP/CTB转基因番茄防龋疫苗的免疫原性和免疫反应性。方法用PAc标准蛋白制作标准曲线,ELISA法检测番茄果实PAcP/CTB蛋白的浓度。实验动物按完全随机分组法分为3组,实验组喂食3个剂量(PAcP/CTB蛋白量相差1.5倍)的转基因番茄汁,阴性对照组喂食非转基因番茄汁,阳性对照组喂食变异链球菌灭活全菌疫苗。每周免疫1次,免疫4周,ELISA法检测大白兔唾液和血液样品中抗变异链球菌PAc的IgA、IgG抗体效价水平。结果转基因番茄中PAcP/CTB嵌合蛋白的浓度为9.37μg/mL。疫苗免疫动物后实验组与阳性对照组大白兔唾液和血液中的特异性抗PAc抗体升高,抗体水平可维持数周,而阴性对照组抗体水平变化不明显。结论表达嵌合体蛋白PAcP/CTB的转基因番茄免疫新西兰大白兔后,能有效的诱导唾液和血液中特异性抗体的产生,其具有较好的免疫原性。 展开更多
关键词 防龋疫苗 龋病 转基因番茄 变异链球菌 大白兔
RNAi介导的转基因番茄抗TYLCV研究 预览 被引量:1
9
作者 杨玛丽 彭宏 +4 位作者 陈天子 张保龙 赵统敏 余文贵 赵丽萍 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期2511-2516,共6页
本研究将TYLCV的AC1和AC2基因中的保守序列嵌合并构建反向重复序列的RNAi载体pBI121-AC1-AC2,通过农杆菌介导法转化番茄获得13株再生植株。结果表明,PCR及RT-PCR检测发现有3株转基因番茄成功表达T-DNA插入的外源基因片段。利用侵染性克... 本研究将TYLCV的AC1和AC2基因中的保守序列嵌合并构建反向重复序列的RNAi载体pBI121-AC1-AC2,通过农杆菌介导法转化番茄获得13株再生植株。结果表明,PCR及RT-PCR检测发现有3株转基因番茄成功表达T-DNA插入的外源基因片段。利用侵染性克隆农杆菌注射及烟粉虱传毒两种接种方法对其进行了抗性鉴定,表明2株转基因番茄植株对TYLCV表现抗性,为抗TYLCV育种提供了新的种质资源。 展开更多
关键词 番茄黄化曲叶病毒 RNAI载体 转基因番茄
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Expression of Epitope Vaccine CTB-UA against Helicobacter Pylori in Transgenic Tomato 预览
10
作者 Xiaokang Li Xinyang Li +3 位作者 Xuanquan Wang Le Guo Yingying Xing Tao Xi 《生物工程前沿:中英文版》 2013年第2期12-19,共8页
关键词 生物工程 CCM CIM CM
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中国野生华东葡萄芪合成酶基因启动子转化番茄的研究 预览
11
作者 肖宇 张剑侠 +3 位作者 周起 谢晓青 朱自果 王跃进 《北方园艺》 CAS 北大核心 2013年第1期89-94,共6页
中国野生华东葡萄"白河-35-1"中的芪合成酶基因启动子被证明具有病原菌和胁迫诱导表达活性。现将芪合成酶基因置于增添不同增强子的该启动子下,构建4个植物表达载体,通过农杆菌介导法进行了转化番茄的研究,并对转基因株系抗番茄灰霉... 中国野生华东葡萄"白河-35-1"中的芪合成酶基因启动子被证明具有病原菌和胁迫诱导表达活性。现将芪合成酶基因置于增添不同增强子的该启动子下,构建4个植物表达载体,通过农杆菌介导法进行了转化番茄的研究,并对转基因株系抗番茄灰霉病表现及其白藜芦醇含量变化进行了测定。结果表明:经PCR-Southern鉴定,获得转基因株系4个共54株;不同载体转化的番茄株系对灰霉病抗性均高于野生型,但抗性存在差异;添加增强元件enhancer启动子启动的芪合成酶基因表达的番茄株系,可使白藜芦醇含量提高4.4倍。 展开更多
关键词 中国野生葡萄 芪合成酶基因 启动子 增强子 转基因番茄
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转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因拷贝数的检测 被引量:6
12
作者 白国辉 刘建国 +6 位作者 田源 陈筑 白朋元 韩琪 顾瑜 管晓燕 王海慧 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期613-617,共5页
目的:采用SYBRGreen实时荧光定量PCR方法检测转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因的拷贝数。方法:用本课题组前期构建的重组质粒pEACl0、pEPCI0作为标准品,SYBRGreen实时荧光定量PCR法对含外源目的基因pacA—ctxB、pacP—ctxB的转基因... 目的:采用SYBRGreen实时荧光定量PCR方法检测转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因的拷贝数。方法:用本课题组前期构建的重组质粒pEACl0、pEPCI0作为标准品,SYBRGreen实时荧光定量PCR法对含外源目的基因pacA—ctxB、pacP—ctxB的转基因番茄植株总基因组样本重复检测,取平均值作为目的基因拷贝数。结果:含pacA—ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为1.3,含pacP—ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为3.2。结论:构建的转基因番茄植株属低拷贝转基因植物,具有较好的稳定性。 展开更多
关键词 转基因番茄 实时荧光定量PCR SYBR Green 拷贝数 CT值
PCR结合核酸斑点杂交技术检测转基因番茄研究 预览 被引量:1
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作者 梁彦君 陈文虎 +2 位作者 王梦娜 许爱霞 冯俊丽 《浙江理工大学学报》 2013年第5期747-752,共6页
基于转基因番茄的安全性评价,建立健全番茄转基因检测体系尤为迫切。文章采用转基因作物检测常用的传统定性PCR技术和核酸斑点杂交技术,针对转基因番茄中常用的35S(花椰菜花叶病毒启动子)、NOS(胭脂碱合成酶终止子),NPTII(新霉... 基于转基因番茄的安全性评价,建立健全番茄转基因检测体系尤为迫切。文章采用转基因作物检测常用的传统定性PCR技术和核酸斑点杂交技术,针对转基因番茄中常用的35S(花椰菜花叶病毒启动子)、NOS(胭脂碱合成酶终止子),NPTII(新霉素转移酶基因),35S-EFE(35S和番茄EFE基因的交联结构)、以及Lat52(番茄内参基因),检测了阳性对照质粒PBI121、华蕃一号样品和阴性对照合作903番茄。从华蕃一号中成功检出35S、NOS、NPTII、35S-EFE和内参基因Lat52,阴性对照番茄合作903中只有内参基因Lat52检出。试验重复性良好,检测灵敏度高,两种方法相互补充,排除假阳性。核酸斑点杂交一次可检出多个外源基因,增加了检测通量,为我国番茄转基因检测提供参考。 展开更多
关键词 转基因番茄 外源基因检测 定性PCR技术 核酸斑点杂交
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转基因番茄中外源目的蛋白提取液的筛选 预览 被引量:1
14
作者 钱昱霏 刘建国 +3 位作者 白国辉 管晓燕 韩琪 白朋元 《遵义医学院学报》 2013年第2期116-120,共5页
目的比较两种不同配方的蛋白提取液提取转基因番茄蛋白的效果。方法用A、B两种植物蛋白提取液提取相同防龋用转基因番茄蛋白,运用westernblot、BCA法和间接ELISA法对提取出的转基因番茄外源目的蛋白进行检测。结果两种提取液提取的蛋... 目的比较两种不同配方的蛋白提取液提取转基因番茄蛋白的效果。方法用A、B两种植物蛋白提取液提取相同防龋用转基因番茄蛋白,运用westernblot、BCA法和间接ELISA法对提取出的转基因番茄外源目的蛋白进行检测。结果两种提取液提取的蛋白样品均在相对分子质量约为60KDa处出现了低分子量蛋白条带,但植物蛋白提取液B所提取蛋白样品条带更清晰。蛋白提取液A、B分别提取的相同转基因番茄总蛋白为8.375mg/mL和12.838mg/mL,而其外源目的蛋白的含量分别是0.335μg/mL和1.16Ixg/mL,比值为2.25倍。经重复实验验证B液提取的目的蛋白在总蛋白含量的百分比较A液所提取的高,具有统计学意义(P〈0.05)。结论植物蛋白提取液B提取转基因番茄中外源目的蛋白较提取液A更为高效并且省时。 展开更多
关键词 转基因番茄 植物蛋白提取液 变异链球菌 外源目的蛋白
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转StBADH基因T1代番茄植株的耐盐性研究 预览 被引量:1
15
作者 殷武平 陈罡 +2 位作者 朱月林 杨立飞 陈国户 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期1-6,共6页
以转StBADH基因的T1代番茄植株(SBTT)和未转基因对照品种‘金棚一号’(WT)为材料,在200mmol/LNaCl的胁迫下,对番茄盐害级别、生长指标、相对叶绿素含量(SPAD值)、相对电导率、游离脯氨酸含量、抗氧化酶活性和活性氧代谢进行了... 以转StBADH基因的T1代番茄植株(SBTT)和未转基因对照品种‘金棚一号’(WT)为材料,在200mmol/LNaCl的胁迫下,对番茄盐害级别、生长指标、相对叶绿素含量(SPAD值)、相对电导率、游离脯氨酸含量、抗氧化酶活性和活性氧代谢进行了研究。结果表明:转基因番茄的生长量、相对叶绿素含量、游离脯氨酸含量和保护酶活性均显著高于对照,而O2生成速率、H2O2含量、膜脂过氧化产物MDA含量、相对电导率及盐害级别均显著低于对照。以上结果显示,在NaCl胁迫下,转基因番茄耐盐性的提高与其较高的抗氧化酶活性及较小的氧化损伤有关。 展开更多
关键词 转基因番茄 StBADH基因 耐盐性 盐害
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番茄ARF4基因果实特异RNAi载体的构建及遗传转化 被引量:2
16
作者 冯媛媛 李颖楠 +3 位作者 侯佩 张景荣 汪松虎 刘永胜 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 206-211,共6页
构建ARF4基因果实特异表达的RNA干涉载体,对转基因番茄果实进行初步分析,可为采用基因工程方法改良番茄果实品质做出新尝试.利用RT-PCR技术从番茄果实cDNA中扩增SlARF4基因全长,将番茄ARF4基因正反向重复序列片段导入到植物表达载体pBI... 构建ARF4基因果实特异表达的RNA干涉载体,对转基因番茄果实进行初步分析,可为采用基因工程方法改良番茄果实品质做出新尝试.利用RT-PCR技术从番茄果实cDNA中扩增SlARF4基因全长,将番茄ARF4基因正反向重复序列片段导入到植物表达载体pBI121上,启动子是番茄果实特异表达的TFM7.将构建的ARF4基因果实特异RNA干涉载体pBI121-TFM7-A4Ri通过根癌农杆菌介导转入到野生型番茄中,进而对转化获得的植株进行了阳性鉴定.分别以转基因番茄和野生型番茄为材料,分析ARF4在果实中的表达水平,测定绿熟期果实叶绿素含量、果实的单果重量和果皮厚度.酶切证实pBI121-TFM7-A4Ri果实特异表达载体构建成功,而且,PCR检测也得到阳性转基因株.半定量RT-PCR分析显示,转基因番茄果实中ARF4的表达量明显低于野生型果实.转基因番茄果实的叶绿素含量、单果重量和果皮厚度都比野生型有提高.因此,ARF4果实特异表达的RNAi方法能够改良番茄果实品质. 展开更多
关键词 ARF4 RNA干涉 果实特异表达 遗传转化 转基因番茄 果实品质改良
利用转基因番茄表达血管内皮生长因子的研究 预览
17
作者 李洪志 刘洁婷 +3 位作者 郭冉 金立波 李海燕 李校堃 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2012年第1期 141-146,共6页
【目的】应用基因工程技术,获得表达血管内皮生长因子(VEGF)的转基因番茄植株,为以番茄作为生物反应器生产药用蛋白奠定基础。【方法】利用植物偏好的密码子改造合成VEGF基因全长,构建植物表达载体p1390R-VEGF,通过农杆菌菌株EHA105... 【目的】应用基因工程技术,获得表达血管内皮生长因子(VEGF)的转基因番茄植株,为以番茄作为生物反应器生产药用蛋白奠定基础。【方法】利用植物偏好的密码子改造合成VEGF基因全长,构建植物表达载体p1390R-VEGF,通过农杆菌菌株EHA105介导将其T-DNA区转入到番茄细胞中,再生后获得转基因番茄植株,对其进行分子和蛋白水平检测。【结果】成功构建了植物整株表达载体p1390R-VEGF,建立了高频的番茄再生培养体系;PCR检测、Southern blot和Western blot检测结果表明,VEGF基因已经转入番茄中,并成功得到了表达。【结论】得到了转基因番茄植株和果实,且VEGF蛋白有良好的抗原性。 展开更多
关键词 转基因番茄 血管内皮生长因子 植物生物反应器 农杆菌
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转基因番茄鉴别模型维护方法 预览 被引量:5
18
作者 谢丽娟 应义斌 《江苏大学学报:自然科学版》 EI CAS 北大核心 2012年第5期538-542,共5页
利用光谱数据建立的校正模型存在着模型适用性差的问题,当这个模型已无法预测新样本或预测偏差较大的时候,就需要对模型进行维护.利用建立的转基因番茄鉴别模型,尝试用模型更新和吸光度值修正2种方法,对同一批次相同成熟度、不同... 利用光谱数据建立的校正模型存在着模型适用性差的问题,当这个模型已无法预测新样本或预测偏差较大的时候,就需要对模型进行维护.利用建立的转基因番茄鉴别模型,尝试用模型更新和吸光度值修正2种方法,对同一批次相同成熟度、不同批次相同成熟度及同一批次不同成熟度的样本进行预测并进行模型维护.结果表明:校正模型可用于预测同一批次相同成熟度的转基因番茄及其亲本;模型更新法对不同批次相同成熟度的转基因番茄样本预测效果较好,而吸光度值修正法对亲本样本预测效果更好;在预测同一批次不同成熟度的样本时,用吸光度值修正的方法更优于模型更新法. 展开更多
关键词 转基因番茄 模型维护 模型更新 吸光度值修正 光谱
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过量表达内质网小分子热激蛋白增强转基因番茄果实的耐冷藏性 预览 被引量:2
19
作者 赵春梅 张文彦 刘箭 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期 33-37,共5页
利用番茄内质网小分子热激蛋白(ERsHSP)特异性抗体,对番茄果实蛋白进行Western分析,以测定低温冷藏下番茄果实中ERsHSP的表达量,并测定果实硬度、腐烂度和失重率等指标,以比较中蔬4号转ERsHSP基因番茄和未转基因番茄果实在4℃低温下... 利用番茄内质网小分子热激蛋白(ERsHSP)特异性抗体,对番茄果实蛋白进行Western分析,以测定低温冷藏下番茄果实中ERsHSP的表达量,并测定果实硬度、腐烂度和失重率等指标,以比较中蔬4号转ERsHSP基因番茄和未转基因番茄果实在4℃低温下的耐冷藏性.结果表明:在4℃冷藏30 d期间,转基因番茄果实具有较高的ERsHSP表达水平,而未转基因番茄果实中没有ERsHSP的表达;相对于未转基因番茄果实,转基因番茄果实冷害症状轻,并具有较高的果实硬度(平均值为2.84 kg/cm2)、较低的果实腐烂度(平均值为21.03%)和失重率(平均值为6.33%). 展开更多
关键词 内质网小分子热激蛋白 转基因番茄 果实 冷藏
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多重PCR结合DHPLC方法检测番茄中转基因成分 预览 被引量:13
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作者 白月 才华 +1 位作者 栾凤侠 关学佳 《作物杂志》 CSCD 北大核心 2011年第2期 28-31,共4页
应用多重PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,检测转基因番茄华番1号中的转基因成分。对番茄中特异的PG内源基因、华番1号中含有的CAMV35S、NOS和NPTII外源基因进行多重PCR扩增,将扩增产物测序验证。利用DH-PLC分离多重PCR产物,建立... 应用多重PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,检测转基因番茄华番1号中的转基因成分。对番茄中特异的PG内源基因、华番1号中含有的CAMV35S、NOS和NPTII外源基因进行多重PCR扩增,将扩增产物测序验证。利用DH-PLC分离多重PCR产物,建立了多重PCR-DHPLC技术检测转基因番茄的方法;将样品进行稀释,确定了该方法的检测灵敏度。试验结果表明,所建立的多重PCR-DHPLC方法操作简便,快速准确,能够同时检测转基因番茄4个内、外源基因,检测限达0.5ng/μL,可用于番茄中转基因成分的检测。 展开更多
关键词 转基因番茄 多重PCR 变性高效液相色谱 检测
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