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NK细胞耗竭与卡控点免疫治疗 预览
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作者 毕嘉成 田志刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期129-134,共6页
天然杀伤细胞(NK细胞)作为宿主免疫的第一道防线,通过直接抗肿瘤或辅助T细胞等方式,在抗肿瘤免疫应答过程中发挥重要作用。然而NK细胞在肿瘤微环境中往往处于功能低下的免疫耗竭状态,伴随着异常表达的细胞表面受体谱系,限制着NK细胞效... 天然杀伤细胞(NK细胞)作为宿主免疫的第一道防线,通过直接抗肿瘤或辅助T细胞等方式,在抗肿瘤免疫应答过程中发挥重要作用。然而NK细胞在肿瘤微环境中往往处于功能低下的免疫耗竭状态,伴随着异常表达的细胞表面受体谱系,限制着NK细胞效应功能的发挥。NK细胞的卡控点免疫治疗作为肿瘤治疗的崭新思路,主要通过阻断NK细胞表面抑制性受体,解除NK细胞在肿瘤局部接收到的抑制性信号,逆转NK细胞的肿瘤免疫耗竭状态,从而触发抗肿瘤效应。随着研究的深入,我们将进一步揭示NK细胞特定卡控点分子的作用机理、适应证及生物标志物,从而充分发挥NK细胞卡控点免疫治疗的潜力。 展开更多
关键词 免疫耗竭 肿瘤免疫 单克隆抗体
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肿瘤免疫学在垂体瘤发病机制中的研究进展
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作者 袁仙仙 朱惠娟 潘慧 《国际内分泌代谢杂志》 2019年第1期61-64,共4页
肿瘤免疫逃逸是肿瘤发生、发展的重要机制之一。垂体瘤组织局部有不同程度的固有免疫细胞和适应性免疫细胞的浸润,且与垂体瘤的侵袭性相关。研究发现,垂体瘤组织表达免疫检验点包括程序性细胞死亡蛋白-1(PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞相关... 肿瘤免疫逃逸是肿瘤发生、发展的重要机制之一。垂体瘤组织局部有不同程度的固有免疫细胞和适应性免疫细胞的浸润,且与垂体瘤的侵袭性相关。研究发现,垂体瘤组织表达免疫检验点包括程序性细胞死亡蛋白-1(PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4),提示免疫检验点介导的肿瘤免疫逃逸可能在垂体瘤的发生、发展中发挥一定的作用。此外,垂体瘤患者存在白细胞介素(IL)-6、IL4等免疫调节因子的表达异常。研究肿瘤免疫在垂体瘤发病中的作用,有助于探索治疗侵袭性垂体瘤和垂体癌的新靶点。 展开更多
关键词 垂体瘤 肿瘤免疫学 免疫检验点
siRNA靶向抑制4-1BBL基因表达在HL-60细胞对淋巴细胞增殖和凋亡的影响 预览
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作者 王慧 吴俊英 《蚌埠医学院学报》 CAS 2018年第9期1121-1124,共4页
目的:观察4-1BB配体(4-1BBL)-siRNA对HL-60细胞细胞因子分泌的影响;对比观察4-1BBL基因被干扰前后,HL-60细胞培养上清液对淋巴细胞增殖、凋亡诱导作用的影响;探讨肿瘤细胞的免疫逃逸机制。方法: 采用化学合成法人工合成靶向人4-1... 目的:观察4-1BB配体(4-1BBL)-siRNA对HL-60细胞细胞因子分泌的影响;对比观察4-1BBL基因被干扰前后,HL-60细胞培养上清液对淋巴细胞增殖、凋亡诱导作用的影响;探讨肿瘤细胞的免疫逃逸机制。方法: 采用化学合成法人工合成靶向人4-1BBL基因的siRNA,脂质体转染法转染HL-60细胞;半定量RT-PCR和流式细胞术检测干扰前后HL-60细胞4-1BBL-mRNA和表面蛋白的表达水平;ELISA法检测4-1BBL干扰前后HL-60细胞培养上清液转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)分泌水平。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,收集4-1BBL干扰后的HL-60细胞培养上清液与体外分离的人淋巴细胞共培养,MTT法检测机体淋巴细胞增殖水平;流式细胞术检测淋巴细胞凋亡比率的变化。结果: 靶向4-1BBL-siRNA转染HL-60后,4-1BBL-mRNA和蛋白的表达水平明显降低( P 〈0.01); ELISA结果显示,4-1BBL基因被干扰后,HL-60细胞培养上清液中TGF-β和VEGF分泌水平明显降低( P 〈0.01和 P 〈0.05)。与干扰前比较,干扰后的HL-60细胞培养上清液对机体淋巴细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用均下降( P 〈0.05)。结论: HL-60细胞高表达的4-1BBL信号具有反向调节作用,通过促进其分泌TGF-β、VEGF,使肿瘤细胞培养上清液对淋巴细胞活性的抑制作用增强并促进淋巴细胞凋亡,可能是肿瘤细胞逃避宿主免疫监视的机制之一。 展开更多
关键词 肿瘤免疫 4-1BB配体 SIRNA HL-60细胞 增殖 凋亡 免疫逃逸
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香菇C91-3菌LP1蛋白在小鼠体内的抗肿瘤免疫作用
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作者 矫继龙 张美珊 +3 位作者 房宇坤 宁安红 钟民涛 黄敏 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2018年第8期895-899,共5页
目的通过观察注射C91-3菌LP1蛋白对H22荷瘤小鼠的影响,探讨LP1蛋白在小鼠体内的抗肿瘤免疫作用。方法使用鼠肝癌H22细胞接种于BALB/C小鼠右腋下,建立小鼠H22实体瘤模型。取上述建立成功的H22实体瘤模型小鼠64只,体重20~25g;分为A、B两组... 目的通过观察注射C91-3菌LP1蛋白对H22荷瘤小鼠的影响,探讨LP1蛋白在小鼠体内的抗肿瘤免疫作用。方法使用鼠肝癌H22细胞接种于BALB/C小鼠右腋下,建立小鼠H22实体瘤模型。取上述建立成功的H22实体瘤模型小鼠64只,体重20~25g;分为A、B两组,每组32只。A组再分为LP1实验Ⅰ组(300μg/只)、LP1实验Ⅱ组(100μg/只)、PBS对照组和顺铂对照组(4 mg/kg),每组8只,各组隔日给药1次,共给药5次。A组用于检测LP1蛋白作用后在小鼠体内对H22肿瘤的抑瘤作用、血清中IL-2含量以及脾中NK细胞活性等生理指标。B组按同样的方法分组,隔日给药1次,直至荷瘤小鼠死亡,记录各组小鼠的生存期,计算生命延长率。结果 LP1蛋白可以延长H22荷瘤小鼠的生存期,LP1实验组生存期达16.6d,较PBS对照组13.2d有明显提高。LP1蛋白在体内对H22实体瘤具有一定的抑制作用,对H22实体瘤进行病理切片、HE染色观察后发现,LP1实验组中H22肿瘤组织较PBS对照组肿瘤组织内出现炎性细胞浸润,局部可见坏死现象。使用ELISA法和LDH法分别检测H22荷瘤小鼠血清中IL-2含量以及NK细胞活性,发现LP1实验组IL-2水平和NK细胞活性较PBS对照组和顺铂对照组显著提高。结论 LP1蛋白可延长H22荷瘤小鼠的生存期限,提高小鼠的生存质量,具有一定的肿瘤抑制作用。其抑制作用主要是由增强H22荷瘤小鼠自身免疫力,提高NK细胞活性,发挥机体自身肿瘤免疫功能造成的。 展开更多
关键词 香菇C91-3LP1蛋白 抑瘤率 肿瘤免疫 IL-2
恶性实体瘤患者外周血T淋巴细胞亚群变化规律与放射性损伤及预后分析及其临床意义 预览
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作者 王玉婷 杨杰 +2 位作者 古丽米拉木·艾热提 马苗苗 哈斯也提·外里 《临床医学进展》 2018年第4期408-415,共8页
目的:本文旨在探讨部分实体肿瘤患者T细胞亚群异常变化规律,了解肿瘤患者自身机体的免疫动态,及其与预后及放化疗毒性反应的关系。方法:采用流式细胞技术(FCM)检测并记录94例实体瘤患者放化疗前T淋巴细胞亚群的基线水平,利用相同的技术... 目的:本文旨在探讨部分实体肿瘤患者T细胞亚群异常变化规律,了解肿瘤患者自身机体的免疫动态,及其与预后及放化疗毒性反应的关系。方法:采用流式细胞技术(FCM)检测并记录94例实体瘤患者放化疗前T淋巴细胞亚群的基线水平,利用相同的技术检测同时期44例正常体检者外周血T淋巴细胞亚群水平。随访6个月以上,观察及评价恶性实体瘤组的预后及放射性损伤情况。结果:1)实体瘤患者放化疗后其T淋巴细胞亚群水平较治疗前基线水平有所下降,差异具有统计学意义;2)放化疗前T淋巴细胞亚群中淋巴细胞总数、CD3总T细胞计数、CD4辅助/诱导T细胞计数与不同预后组(CR, PR, SD, PD)之间存在统计学差异,进一步两两比较显示组间差异仍具有统计学意义;3)合并化疗的实体瘤患者其T淋巴细胞亚群水平较未合并化疗者下降明显,差异具有统计学意义。结论:1)恶性实体肿瘤患者初始治疗前即存在免疫受损;2)放化疗杀伤肿瘤细胞的同时可能导致患者机体免疫功能减低;3)淋巴细胞总数、CD3总T细胞计数、CD4辅助/诱导T细胞计数基线水平低下者其预后较差。 展开更多
关键词 恶性实体瘤 肿瘤免疫 T细胞亚群 放射性损伤 预后
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CD4+CD25+调节性T细胞在肿瘤免疫中的研究进展
6
作者 胡子龙 何长征 +5 位作者 邢晓伟 胡时栋 李宇轩 宋林杰 王玉锋 杜晓辉 《川北医学院学报》 CAS 2018年第1期134-137,共4页
调节性T细胞(regulatory T cells,Treg细胞)是一类控制体内自身免疫反应的具有免疫抑制功能的T细胞亚群,与自身免疫性疾病的发生、移植耐受、肿瘤的免疫抑制等关系密切。近年来,Treg细胞在肿瘤中的作用研究逐渐成为热点,受到广泛关注。... 调节性T细胞(regulatory T cells,Treg细胞)是一类控制体内自身免疫反应的具有免疫抑制功能的T细胞亚群,与自身免疫性疾病的发生、移植耐受、肿瘤的免疫抑制等关系密切。近年来,Treg细胞在肿瘤中的作用研究逐渐成为热点,受到广泛关注。研究发现Treg细胞在肿瘤的发生、发展和转移的过程中发挥重要作用,可通过细胞-细胞接触、分泌抑制性细胞因子、干扰细胞代谢等方式直接或间接影响CD4+CD8+效应T细胞的功能,从而抑制机体的抗肿瘤免疫。因此,针对Treg的免疫疗法对于治疗肿瘤具有广阔前景。本文就调节性T细胞的作用机制特点及其与肿瘤免疫的关系做一简要综述。 展开更多
关键词 CD4+CD25+调节性T细胞 肿瘤免疫 肿瘤治疗
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FAPα对上皮性卵巢癌调控T细胞的影响
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作者 李嘉瑶 韩伟 +2 位作者 曲雪梅 张健 李黎 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2018年第5期448-451,共4页
目的研究FAPα是否可以促进Tregs的产生及FAPα在肿瘤微环境中的免疫抑制作用。方法用免疫组化方法检测17例正常卵巢组织,23例交界性卵巢组织和35例上皮性卵巢癌组织FAPα、Foxp3阳性情况;p CMV6-AC-GFP-FAPα表达载体转染的NIH3T3细胞... 目的研究FAPα是否可以促进Tregs的产生及FAPα在肿瘤微环境中的免疫抑制作用。方法用免疫组化方法检测17例正常卵巢组织,23例交界性卵巢组织和35例上皮性卵巢癌组织FAPα、Foxp3阳性情况;p CMV6-AC-GFP-FAPα表达载体转染的NIH3T3细胞,表达FAPα蛋白,流式细胞术检测FAPα对CD4^+CD25^+Tregs分化的影响。结果在正常组,交界性卵巢肿瘤组和EOC组织中的FAPα阳性病例分别占0、52. 5%和74. 3%;Foxp3阳性病例分别为5. 9%、56. 5%、77. 1%;FAPα流式细胞仪显示FAPα可促进CD4^+CD25^+Tregs的产生。结论 FAPα通过促进CD4^+CD25^+Treg细胞的分化,促进卵巢癌细胞发生免疫逃逸反应。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 FAPα TREG细胞 肿瘤免疫
结直肠癌患者外周血G-MDSC和M-MDSC水平与疗效的相关性分析
8
作者 王永仿 许联红 +5 位作者 恽志华 楚鹰 法镇中 邓建忠 张颖 吴佳 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期546-551,共6页
目的检测结直肠癌患者外周血中髓源抑制细胞(MDSC)频数,分析MDSC变化与结直肠癌临床病理特征的关系。方法采用流式细胞术分别检测82例结直肠癌患者和30例健康志愿者外周血中粒细胞型MDSC(G-MDSC)和单核细胞型MDSC(M-MDSC)频数。... 目的检测结直肠癌患者外周血中髓源抑制细胞(MDSC)频数,分析MDSC变化与结直肠癌临床病理特征的关系。方法采用流式细胞术分别检测82例结直肠癌患者和30例健康志愿者外周血中粒细胞型MDSC(G-MDSC)和单核细胞型MDSC(M-MDSC)频数。使用方差分析和t检验分析结直肠癌患者外周血中MDSC频数与TNM分期、淋巴结转移、肿瘤部位、分化程度的关系以及常用治疗措施对MDSC的影响。用相关分析评价G-MDSC与M-MDSC频数之间的相关性。结果与健康志愿者相比,结直肠癌患者组外周血中G-MDSC和M-MDSC频数显著增高。TNMⅢ、Ⅳ期结直肠癌患者外周血G-MDSC与M-MDSC频数显著高于TNMⅠ、Ⅱ期患者,且发生淋巴结转移患者的G-MDSC和M-MDSC频数亦显著高于无淋巴结转移的患者。外周血G-MDSC和M-MDSC频数在不同肿瘤部位与分化程度的结直肠癌患者间无明显差异。施行根治性切除术以及经辅助化疗有效的结直肠癌患者外周血G-MDSC和M-MDSC频数显著下降。结直肠癌患者外周血G-MDSC与M-MDSC频数之间无相关性。结论结直肠癌患者外周血G-MDSC和M-MDSC频数均显著升高,并且其频数与TNM分期及淋巴结转移有关。根治性切除术及有效的辅助化疗可显著降低结直肠癌患者外周血G-MDSC和M-MDSC频数。 展开更多
关键词 结直肠癌 粒细胞型髓源抑制细胞 单核细胞型髓源抑制细胞 肿瘤免疫
树突状相关外泌体在肿瘤中的研究进展 预览
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作者 冯奇 郭鹏 +2 位作者 王东来 吕健 冯建刚 《临床与病理杂志》 2018年第3期654-658,共5页
树突状细胞相关外泌体(DC-derived exosomes,Dex)是由免疫系统的前哨抗原提呈细胞形成的微小囊泡。Dex表面拥有与树突状细胞(dendritic cell,DCs)部分相同的表面分子,如功能性MHC-抗原肽复合物(MHC/antigenic peptide)、共刺激分... 树突状细胞相关外泌体(DC-derived exosomes,Dex)是由免疫系统的前哨抗原提呈细胞形成的微小囊泡。Dex表面拥有与树突状细胞(dendritic cell,DCs)部分相同的表面分子,如功能性MHC-抗原肽复合物(MHC/antigenic peptide)、共刺激分子(costimulatory molecules)等,并参与机体免疫调节。近年来随着对Dex研究的不断深入,Dex在肿瘤免疫中的作用越来越受到重视。基于Dex抗肿瘤治疗的临床试验也显示其潜在的可行性。 展开更多
关键词 树突状相关外泌体 肿瘤免疫 免疫治疗
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基于癌睾抗原CTNNA2长肽疫苗免疫活性检测 预览
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作者 胡东昊 王乔新 +2 位作者 刘凤云 谢金枝 李伟宏 《解剖学杂志》 CSCD 2018年第6期640-645,共6页
目的:设计针对癌睾抗原CTNNA2的包含多个表位的长肽,并鉴定这些长肽的免疫活性。方法:通过NETCTL1.2、SYFPEITHI和BIMAS软件预测打分选取CTNNA2的HLA-A2限制性的表位;对包含多个优势CTL表位区域选取合适长度的长肽,通过体外活性实验验... 目的:设计针对癌睾抗原CTNNA2的包含多个表位的长肽,并鉴定这些长肽的免疫活性。方法:通过NETCTL1.2、SYFPEITHI和BIMAS软件预测打分选取CTNNA2的HLA-A2限制性的表位;对包含多个优势CTL表位区域选取合适长度的长肽,通过体外活性实验验证长肽是否具有免疫活性。酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测DC荷长肽诱导的外周血单个核细胞(PBMCs)中γ-干扰素(IFN-γ)的释放;细胞因子染色检测表位肽诱导CTL的能力;LDH法和CFSE法检测CTL对靶细胞的杀伤活性。结果:ELISPOT和细胞因子染色实验结果显示长肽P778-800、P857-880诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。CFSE和LDH细胞毒实验结果显示表位P778-800、P857-880对靶细胞有一定的杀伤作用。结论:成功筛选鉴定出针对癌睾抗原CTNNA2的2条长肽,可能对基于CTNNA2的癌症免疫疗法的未来临床试验具有意义。 展开更多
关键词 CTNNA2 肿瘤免疫 长肽
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调节性T细胞在肿瘤放射治疗中的作用
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作者 吴俊兰 范兴文 吴开良 《中华放射医学与防护杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期715-718,共4页
Treg细胞是机体维持免疫稳态的重要机制,也是肿瘤免疫抑制的重要原因。肿瘤内Treg细胞是免疫治疗启动免疫效应的首要障碍,也是放疗后肿瘤控制不良的机制之一。放疗后肿瘤细胞通过释放TGF-β、IL33增加瘤内Treg细胞的增殖,并通过巨噬... Treg细胞是机体维持免疫稳态的重要机制,也是肿瘤免疫抑制的重要原因。肿瘤内Treg细胞是免疫治疗启动免疫效应的首要障碍,也是放疗后肿瘤控制不良的机制之一。放疗后肿瘤细胞通过释放TGF-β、IL33增加瘤内Treg细胞的增殖,并通过巨噬细胞增加Treg细胞募集。剥夺放疗后瘤内Treg细胞可以提高放疗对肿瘤的局部控制,并增强放疗远隔效应。 展开更多
关键词 调节性T细胞 放疗 肿瘤免疫
非小细胞肺癌患者外周血Treg和Th17水平及意义
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作者 林昌海 黄露迷 +3 位作者 冀晓辉 王春梅 王东林 李代蓉 《肿瘤学杂志》 CAS 2018年第1期27-30,共4页
[目的]探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中Treg和Th17细胞的变化及其意义。[方法]收集40例NSCLC患者和20名健康对照的外周血样本,采用流式细胞术检测外周血中Treg和Th17细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附实验法检测TGF-β和IL-1... [目的]探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中Treg和Th17细胞的变化及其意义。[方法]收集40例NSCLC患者和20名健康对照的外周血样本,采用流式细胞术检测外周血中Treg和Th17细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附实验法检测TGF-β和IL-17水平。[结果]肺癌患者外周血中Treg细胞和Th17细胞比例均显著性高于健康对照组(分别为6.65%±3.70%vs 4.06%±1.23%和1.20%±1.19%vs 0.44%±0.13%,P〈0.05)。外周血Treg和Th17细胞表达与NSCLC患者分期等无相关性(P〉0.05)。肺癌患者外周血TGF-β和IL-17水平明显高于对照组(分别为25.05±3.19 vs 15.96±3.65和4.36±2.79 vs 2.01±1.83,P〈0.05)。[结论]NSCLC患者外周血中Treg和Th17细胞以及相关细胞因子均高表达,Treg细胞以及Th17细胞参与了肺癌的发生和发展。 展开更多
关键词 TREG细胞 TH17细胞 非小细胞肺癌 肿瘤免疫
程序性细胞死亡受体1配体在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义 预览
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作者 梁莉 夏瑞祥 葛健 《安徽医药》 CAS 2018年第9期1706-1709,共4页
目的检测程序性细胞死亡受体1配体(PD-L1)蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者肿瘤组织中的表达,分析其与患者临床特征和疗效的关系。方法收集安徽医科大学第一附属医院2012年2月至2015年6月期间80例DLBCL患者的肿瘤石蜡组织及其对... 目的检测程序性细胞死亡受体1配体(PD-L1)蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者肿瘤组织中的表达,分析其与患者临床特征和疗效的关系。方法收集安徽医科大学第一附属医院2012年2月至2015年6月期间80例DLBCL患者的肿瘤石蜡组织及其对应的临床病例资料,免疫组织化学染色法检测组织中PD-L1表达,分析其与患者临床特征及疗效的关系。结果 PD-L1阳性表达的患者31例(39%),PD-L1的阳性表达与患者non-GCB亚型(P=0.035),低缓解率有关(P=0.001),与患者的分期,B组症状,ECOG评分等无关。logistic多因素分析提示PD-L1阳性表达是影响DCBCL患者疗效不佳的危险因素(P=0.006)。结论 PD-L1在病理组织中高表达是DLBCL患者疗效不佳的危险因素,其可能为DCBCL患者提供潜在治疗方案的思路。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 程序性细胞死亡受体1配体 肿瘤免疫 疗效
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浆细胞样树突状细胞与肿瘤免疫 预览
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作者 陈桂思 王悦 +2 位作者 吴婉文 邹海玲 沈晗 《广东药科大学学报》 CAS 2018年第4期533-537,共5页
浆细胞样树突状细胞(pDCs)是树突状细胞(DCs)的亚群之一,主要功能是分泌Ⅰ型干扰素,借此在抗病毒免疫中起着至关重要的作用。而在肿瘤免疫方面,相比其他DCs亚群pDCs受到的关注较少。实际上pDCs桥接着先天免疫反应和适应性免疫反应,... 浆细胞样树突状细胞(pDCs)是树突状细胞(DCs)的亚群之一,主要功能是分泌Ⅰ型干扰素,借此在抗病毒免疫中起着至关重要的作用。而在肿瘤免疫方面,相比其他DCs亚群pDCs受到的关注较少。实际上pDCs桥接着先天免疫反应和适应性免疫反应,是肿瘤免疫治疗的潜在靶点。本文对近年来pDCs的研究进展及其在肿瘤免疫中的作用进行综述。 展开更多
关键词 浆细胞样树突状细胞 Ⅰ型干扰素 肿瘤免疫
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人IL-2与EB病毒LMP1融合基因重组BCG的构建与表达
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作者 裴杰 杨媛媛 +6 位作者 李运清 崔子宸 张茜 张惠 戴军 薛庆节 陈廷 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1301-1304,1309共5页
目的构建并鉴定人IL-2与EB病毒LMP1融合基因重组BCG(卡介苗)。方法利用RT-PCR从EB病毒阳性的B95-8细胞中获得去除致癌部分的LMP1基因,与扩增的IL-2通过overlap-PCR扩增获得融合基因。将融合基因连接到穿梭表达质粒pMV261,进行酶切、PCR... 目的构建并鉴定人IL-2与EB病毒LMP1融合基因重组BCG(卡介苗)。方法利用RT-PCR从EB病毒阳性的B95-8细胞中获得去除致癌部分的LMP1基因,与扩增的IL-2通过overlap-PCR扩增获得融合基因。将融合基因连接到穿梭表达质粒pMV261,进行酶切、PCR及测序鉴定。重组质粒经电转导入BCG,通过Western blot鉴定目标抗原在rBCG中的表达。结果 PCR扩增获得453bp IL-2和1 225bp LMP1,利用overlap-PCR获得1 623bp的融合基因,通过电转仪将重组质粒导入BCG感受态细胞,构建的重组质粒能够在BCG中表达相对分子质量为5.7×104的目的蛋白,Western blot显示该蛋白能被兔IL-2单抗及鼠LMP1单抗识别。结论构建的rBCG能稳定表达融合蛋白,为rBCG的抗肿瘤作用和抗肿瘤疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 白细胞介素2 EB病毒 潜伏膜蛋白 重组卡介苗 肿瘤免疫
瘤源性IDO2对黑色素瘤形成及生长的影响
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作者 刘燕玲 徐萍 +3 位作者 徐娜 陈晓燕 房春娟 闵卫平 《免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第3期193-199,共7页
目的研究B16-BL6细胞内IDO2基因表达对小鼠黑色素瘤生长、发展及抗肿瘤免疫的影响。方法通过G418药物筛选建立稳定细胞系B16-BL6/IDO2~+及B16-BL6/IDO2~+,q PCR法检测IDO2的表达,MTT实验检测IDO2表达对细胞增殖的影响;然后以构建的稳... 目的研究B16-BL6细胞内IDO2基因表达对小鼠黑色素瘤生长、发展及抗肿瘤免疫的影响。方法通过G418药物筛选建立稳定细胞系B16-BL6/IDO2~+及B16-BL6/IDO2~+,q PCR法检测IDO2的表达,MTT实验检测IDO2表达对细胞增殖的影响;然后以构建的稳定细胞在小鼠体内建立肿瘤模型,观察IDO2表达对黑色素瘤形成、生长的影响;最后在处死小鼠后通过流式细胞术检测引流淋巴结内Treg、CD4~+/CD8~+T细胞百分比及T淋巴细胞凋亡率,LDH法检测肿瘤特异性细胞毒反应来观察肿瘤组织内IDO2表达对引流淋巴结内肿瘤免疫的影响。结果成功建立B16-BL6/IDO2~+及B16-BL6/IDO2~-稳定细胞系:B16-BL6/IDO2~-细胞持续稳定低表达IDO2且不受LPS及IFN-γ的诱导;与B16-BL6/IDO2~+细胞相比,B16-BL6/IDO2~-细胞在体外增殖速度减慢,体内实验显示其肿瘤生长速度减慢、肿瘤质量减轻;进一步流式细胞术结果发现:引流淋巴结内Treg百分比下降、CD8~+T细胞数量增加、T淋巴细胞的凋亡率减少;LDH法检测CD8~+细胞特异性特异性杀伤肿瘤细胞反应增强。结论黑色素瘤细胞内IDO2的表达参与体内肿瘤的生长过程,且能影响其引流淋巴结内肿瘤免疫反应。 展开更多
关键词 吲哚胺2 3-双加氧酶2 黑色素瘤 稳定转染 肿瘤免疫
肺癌抗原COX-2长肽疫苗的设计及免疫活性检测
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作者 范双莉 任亚丽 赵志华 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期2283-2288,共6页
目的:设计针对肺癌抗原环加氧酶2(COX-2)的长肽,并鉴定这些长肽的免疫活性。方法:通过NetCTL1.2、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分来选取COX-2的HLA-A2限制性表位;对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位集中区域选取合适长度的长肽,通过体外活性实... 目的:设计针对肺癌抗原环加氧酶2(COX-2)的长肽,并鉴定这些长肽的免疫活性。方法:通过NetCTL1.2、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分来选取COX-2的HLA-A2限制性表位;对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位集中区域选取合适长度的长肽,通过体外活性实验验证长肽是否具有免疫活性。树突状细胞(DC)荷肽实验和ELISPOT检测荷长肽DC诱导的外周血单个核细胞(PBMCs)中干扰素γ(IFN-γ)的释放;胞内因子染色检测表位肽诱导CTL的能力;乳酸脱氢酶(LDH)实验和CFSE法检测CTL对靶细胞的杀伤活性。结果:ELISPOT和胞内因子染色实验结果显示,长肽P315-338和P375-401诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。CFSE和LDH细胞毒实验结果显示表位P315-338和P375-401对靶细胞有一定的杀伤作用。结论:成功筛选并鉴定出针对肺癌抗原COX-2的2条长肽。这2条长肽具有用作免疫治疗疫苗的潜能。 展开更多
关键词 环加氧酶2 长肽 肿瘤免疫 肺癌
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HSP110与肿瘤免疫
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作者 任发亮 任巧丽 +1 位作者 田志强 倪兵 《免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期641-644,共4页
热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是在细胞应激下显著高表达的蛋白质,对于蛋白质转运、折叠和解离起重要作用。其免疫学活性最引人注目,包括:作为分子伴侣来结合抗原多肽,经由抗原递呈细胞递呈给MHC分子进而诱导特异免疫;可作为... 热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是在细胞应激下显著高表达的蛋白质,对于蛋白质转运、折叠和解离起重要作用。其免疫学活性最引人注目,包括:作为分子伴侣来结合抗原多肽,经由抗原递呈细胞递呈给MHC分子进而诱导特异免疫;可作为危险信号启动固有免疫;是良好的免疫佐剂。比之其它HSP,HSP110做为一种效应显著的免疫佐剂,具有更强势的伴侣功能和多肽结合能力。近年较多基础研究提示HSP110增强了相关肿瘤表位多肽、肿瘤相关抗原的特异性肿瘤免疫和抗肿瘤效应。此外,关于肾癌、黑色素瘤的双盲多中心Ⅱ及Ⅲ期临床试验提示HSP抗原肽复合物在肿瘤免疫治疗中安全有效。在此我们综述了HSP110的免疫学功能和肿瘤免疫中的应用。 展开更多
关键词 热休克蛋白 肿瘤免疫 免疫佐剂
荷乳腺癌小鼠髓源抑制性细胞对B细胞功能的影响
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作者 刘敏 王建 +3 位作者 孙倩 于文文 魏枫 任秀宝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期772-777,共6页
目的:探讨荷乳腺癌小鼠髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)对B细胞功能的影响。方法:构建BABL/c小鼠4T1乳腺癌模型,磁珠分选出荷瘤小鼠脾脏的MDSC与正常小鼠脾脏的B细胞,将MDSC与B细胞共孵育后流式细胞术检测MDS... 目的:探讨荷乳腺癌小鼠髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)对B细胞功能的影响。方法:构建BABL/c小鼠4T1乳腺癌模型,磁珠分选出荷瘤小鼠脾脏的MDSC与正常小鼠脾脏的B细胞,将MDSC与B细胞共孵育后流式细胞术检测MDSC对B细胞表面分子PD-1、PD-L1、CTLA-4、CCR6、CD62L和MHCⅡ表达的影响,ELISA法检测B细胞分泌的Ig A、Ig M和Ig G的变化;Brd U试剂盒检测B细胞增殖情况;AnnexinⅤ/PI凋亡试剂盒检测B细胞凋亡。磁珠分选出共孵育体系中的B细胞,将其与T细胞共孵育,Brd U试剂盒检测T细胞增殖情况,AnnexinⅤ/PI凋亡试剂盒检测T细胞凋亡。结果:与B细胞对照组相比,B+MDSC组中B细胞表面PD-L1表达升高(P〈0.01),PD-1、CTLA-4、CCR6、CD62L和MHCⅡ的表达均降低(均P〈0.01);B细胞分泌的Ig A、Ig M和Ig G明显升高(均P〈0.01),B细胞增殖增高(P〈0.01)、凋亡降低(P〈0.01)。与T细胞对照组相比,B+MDSC(1∶5)+T组的T细胞增殖明显降低(P〈0.01),T细胞凋亡无明显变化。结论:荷乳腺癌小鼠MDSC促进B细胞增殖和抑制B细胞凋亡,并且MDSC诱导的B细胞可以抑制T细胞的增殖。 展开更多
关键词 髓源抑制性细胞 B细胞 乳腺癌 肿瘤免疫
准确把握肿瘤免疫治疗发展趋势,促进我国肿瘤免疫治疗规范健康发展 被引量:3
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作者 韩岩梅 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期2-5,共4页
从肿瘤免疫概念的提出到肿瘤免疫治疗的临床应用,经历了近百年的积累与沉淀,肿瘤免疫治疗终于从辅助性肿瘤治疗方式发展为目前公认的最有潜力治愈恶性肿瘤的手段。自2011年开始,多种免疫检测点阻断剂和靶向性免疫细胞药物在多种恶性... 从肿瘤免疫概念的提出到肿瘤免疫治疗的临床应用,经历了近百年的积累与沉淀,肿瘤免疫治疗终于从辅助性肿瘤治疗方式发展为目前公认的最有潜力治愈恶性肿瘤的手段。自2011年开始,多种免疫检测点阻断剂和靶向性免疫细胞药物在多种恶性肿瘤治疗中取得了良好的临床疗效,极大地推动了肿瘤免疫治疗的临床前研究和临床应用。笔者通过对世界以及中国的肿瘤免疫治疗现状分析,简要论述了肿瘤免疫治疗发展趋势、面对的问题和相应的应对措施。 展开更多
关键词 肿瘤免疫治疗 恶性肿瘤 肿瘤免疫 免疫检测点 过继细胞治疗
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