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转化生长因子-β1对肺成纤维细胞中lncRNA-ATB和纤维化因子mRNA水平的影响
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作者 孙林清 王发选 +1 位作者 周倩文 李玲 《环境与职业医学》 CSCD 北大核心 2019年第3期261-265,共5页
[目的]研究转化生长因子(TGF)-β1刺激肺成纤维细胞MRC-5后被TGF-β活化的长链非编码RNA(lncRNA-ATB)和I型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)以及纤连蛋白(FN)等纤维化因子基因mRNA水平的变化及其相关性。[方法]将成纤维细胞株MR... [目的]研究转化生长因子(TGF)-β1刺激肺成纤维细胞MRC-5后被TGF-β活化的长链非编码RNA(lncRNA-ATB)和I型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)以及纤连蛋白(FN)等纤维化因子基因mRNA水平的变化及其相关性。[方法]将成纤维细胞株MRC-5以5×103个/孔的密度种于96孔板中,分别经浓度为0、2.5、5.0、10.0 ng/mL的TGF-β1刺激24 h后,通过MTT法测定细胞增殖活性,采用实时荧光定量PCR法检测MRC-5细胞中lncRNA-ATB、Col Ⅰ、Col Ⅲ、FN的mRNA相对水平。采用Spearman秩相关检验分析lncRNA-ATB与Col Ⅰ、Col Ⅲ、FN 3个基因mRNA相对水平之间的相关性。[结果]随着TGF-β1刺激浓度的增加,MRC-5细胞增殖活性增高,5.0、10.0 ng/mL组的细胞增殖活性分别是0 ng/mL组的1.07倍和1.12倍(P <0.05)。随TGF-β1浓度的增加,2.5、5.0、10.0 ng/mL组中FN的mRNA水平分别是0 ng/mL组的2.11倍(P=0.018)、3.58倍(P=0.03)和6.51倍(P <0.01);2.5、5.0、10.0 ng/mL组中Col Ⅰ的mRNA水平分别是0 ng/mL组的1.28倍(P=0.324)、4.64倍(P <0.01)和3.97倍(P <0.01);2.5、5.0、10.0 ng/mL组中Col Ⅲ的mRNA水平分别是0 ng/mL组的1.21倍(P=0.400)、1.42倍(P=0.120)和4.23倍(P <0.01)。2.5、5.0、10.0 ng/mL组中lncRNA-ATB的mRNA水平分别是0 ng/mL组的1.80倍(P=0.073)、3.57倍(P <0.01)和4.55倍(P <0.01)。此外,相关性分析结果显示,lncRNA-ATB与FN(r=0.86)、Col Ⅰ(r=0.85)和Col Ⅱ(Ir=0.82)的mRNA相对水平呈正相关关系(均P <0.05)。[结论] TGF-β1可刺激成纤维细胞增殖,升高lncRNA-ATB、Col Ⅰ、Col Ⅲ、FN的mRNA相对水平。lncRNA-ATB与纤维化因子的表达呈正相关,提示其可能与肺纤维化的发生有关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 转化生长因子-Β1 纤维化 胶原蛋白 胶原蛋白 纤连蛋白
磁共振T1ρ和T2-mapping定量技术评估膝关节Ⅰ型胶原蛋白基质置入术后软骨修复
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作者 刘宇 黄勇 +2 位作者 郑穗生 陈其春 张佳 《临床放射学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第3期512-516,共5页
目的探讨MRI T1ρ和T2-mapping成像技术定量评估膝关节Ⅰ型胶原蛋白基质置入术后软骨修复的应用价值。方法纳入20例膝关节Ⅰ型胶原蛋白置入术后患者(24处软骨损伤)作为试验组,并纳入20名健康志愿者作为对照组,试验组在术后3、6及12个月... 目的探讨MRI T1ρ和T2-mapping成像技术定量评估膝关节Ⅰ型胶原蛋白基质置入术后软骨修复的应用价值。方法纳入20例膝关节Ⅰ型胶原蛋白置入术后患者(24处软骨损伤)作为试验组,并纳入20名健康志愿者作为对照组,试验组在术后3、6及12个月进行随访,所有患者均行MR检查,检查序列包括常规序列及T1ρ、T2-mapping序列。扫描结束后,通过工作站后处理,测量术区软骨的T1ρ和T2值。利用方差分析比较试验组各个时间段与对照组的T1ρ和T2值,用Pearson相关分析分析两者与术后修复时间的相关性。结果Ⅰ型胶原蛋白置入术后3个月,试验组软骨术区的T1ρ和T2值均显著高于正常对照组(P<0.05);术后6个月试验组术区T1ρ和T2值明显降低,但与正常对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);术后12个月术区T1ρ和T2值持续降低,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。T1ρ和T2值与术后时间无明显相关性,术后3个月与6个月,以及术后6个月与12个月相比,P值分别为0.827、0.105、0.35、0.332。结论 MRI T1ρ和T2-mapping定量技术可通过反映术区软骨内生化成分的变化,动态追踪术后软骨的修复情况,T1ρ和T2-mapping均为临床提供有效的评估手段,具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 胶原蛋白 软骨 T1ρ T2-mapping
激活蛋白1(AP-1)在豚鼠进展性近视巩膜重塑中与Ⅰ型胶原的表达关系研究 预览
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作者 展欣 朱子诚 +1 位作者 孙思勤 张楚 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第2期129-133,共5页
目的研究近视眼巩膜重塑中激活蛋白-1(activator protein1,AP-1)的动态表达变化以及与Ⅰ型胶原表达之间的关系。方法选取出生1周左右的三色豚鼠75只,随机抽取50只遮盖左眼建立形觉剥夺近视组(FDM组,50眼),其右眼作为自身对照组(50眼),其... 目的研究近视眼巩膜重塑中激活蛋白-1(activator protein1,AP-1)的动态表达变化以及与Ⅰ型胶原表达之间的关系。方法选取出生1周左右的三色豚鼠75只,随机抽取50只遮盖左眼建立形觉剥夺近视组(FDM组,50眼),其右眼作为自身对照组(50眼),其余25只豚鼠双眼均未做任何处理作为空白对照组(50眼),分别测量并记录空白对照组和FDM组豚鼠在遮盖前(0周)及遮盖后2周、4周、6周及遮盖4周去遮盖1周(4/-1周)时的双眼屈光度及眼轴长度。于上述5时间点分别处死豚鼠并制备巩膜组织切片,采用免疫组织化学染色法及逆转录PCR(RT-PCR)技术检测各组豚鼠巩膜中遮盖不同时间点AP-1和Ⅰ型胶原蛋白及mRNA的表达量并分析二者之间的关系。结果遮盖前空白对照组、自身对照组、FDM组的豚鼠屈光度均为远视,差异无统计学意义(P >0.05),FDM组由遮盖前(0周)时的远视眼(2.09±0.31)D到遮盖2周、4周、6周及4/-1周后逐渐变成近视眼[(-1.23±0.68)D、(-4.17±0.58)D、(-7.07±0.55)D、(-2.67±0.59)D],眼轴长度由遮盖0周(5.93±0.38)mm到遮盖2周、4周、6周及4/-1周后逐渐增加[(6.62±0.37)mm、(7.30±0.35)mm、(7.99±0.31)mm、(6.97±0.32)mm],与空白对照组、自身对照组比较,遮盖后各个时间点FDM组豚鼠近视屈光度明显升高,眼轴测量值明显增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。各组巩膜组织均有AP-1和Ⅰ型胶原蛋白与mRNA表达,遮盖前空白对照组、自身对照组与FDM组豚鼠巩膜组织中AP-1和Ⅰ型胶原蛋白及mRNA表达量的差异均无统计学意义(均为P >0.05),随着遮盖时间的延长,FDM组中AP-1和Ⅰ型胶原蛋白表达量均逐渐减弱(均为P<0.05),AP-1和Ⅰ型胶原的mRNA表达也相应逐渐下调(均为P<0.05),两者具有高度正相关性。结论在近视巩膜重塑过程中,AP-1可能作为转化生长因子-β1的下游信号转录因子参与调控Ⅰ型胶原的合成与降解。 展开更多
关键词 形觉剥夺性近视 巩膜重塑 转化生长因子-Β1 激活蛋白-1 胶原蛋白
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黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白及衰老相关基因的影响
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作者 崔力文 张加玲 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第3期710-714,共5页
目的研究黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)胶原蛋白合成及衰老相关基因的影响。方法体外培养HSF细胞,通过CCK-8(cell counting kit-8)法筛选黑咖啡提取物安全剂量;实验分为样品组和空白对照组,用ELISA技术检... 目的研究黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)胶原蛋白合成及衰老相关基因的影响。方法体外培养HSF细胞,通过CCK-8(cell counting kit-8)法筛选黑咖啡提取物安全剂量;实验分为样品组和空白对照组,用ELISA技术检测黑咖啡提取物对细胞中Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)含量的影响,用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测黑咖啡提取物作用后细胞中ColⅠ和MMP-1 mRNA的表达水平。结果与空白对照组比较,黑咖啡提取物可抑制HSF细胞中MMP-1合成(P<0.05),促进ColⅠ合成(P<0.05);使ColⅠmRNA表达水平升高(P<0.01),而MMP-1 mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论黑咖啡提取物通过促进ColⅠ和抑制MMP-1表达,对胶原蛋白代谢具有改善和调节作用,可延缓皮肤衰老。 展开更多
关键词 黑咖啡 人皮肤成纤维细胞 胶原蛋白 基质金属蛋白酶-1
活血通督汤对大鼠脊髓损伤后Ⅰ和Ⅳ型胶原蛋白表达的影响
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作者 汪今朝 范筱 张俐 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2018年第5期1-5,9共6页
目的:观察活血通督汤对大鼠脊髓损伤后Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)表达的影响,探讨该方对脊髓损伤后肢体运动功能恢复的作用机制。方法:将36只成年SD大鼠随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=12)及活... 目的:观察活血通督汤对大鼠脊髓损伤后Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)表达的影响,探讨该方对脊髓损伤后肢体运动功能恢复的作用机制。方法:将36只成年SD大鼠随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=12)及活血通督汤组(n=12)。假手术组行椎板切除术,不损伤脊髓,模型组和活血通督汤组采用NYU脊髓损伤打击器复制脊髓损伤模型。造模成功后,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,活血通督汤组给予活血通督汤灌胃,给药剂量为12.6mL/(kg·d),术后第1,3,5和7天行BBB肢体运动功能评分。采用Western blot检测CollagenⅠ和CollagenⅣ蛋白表达量,尼氏染色法观察神经细胞形态,免疫组织化学染色法检测脊髓组织中CollagenⅠ和CollagenⅣ定位表达。结果:1)术后第3天开始,活血通督汤组BBB评分高于模型组(P〈0.05);2)尼氏染色显示活血通督汤组神经元的结构形态优于模型组,神经元受损状况得到改善;3)免疫组化和Western blot显示,与假手术组比较,模型组和活血通督汤组可见较多CollagenⅠ和CollagenⅣ表达(P〈0.05),但模型组CollagenⅠ表达比活血通督汤组少,模型组CollagenⅣ表达多于活血通督汤组(P〈0.05)。结论:活血通督汤促进脊髓损伤后肢体运动功能的恢复,其机制可能与其促进CollagenⅠ的表达且抑制CollagenⅣ的表达有关。 展开更多
关键词 脊髓损伤 活血通督汤 胶原蛋白 胶原蛋白
大鼠脊髓损伤后TIMP-2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ的表达情况及其肢体运动功能的研究
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作者 李仁斌 余光书 林焱斌 《中国骨与关节杂志》 CAS 2018年第5期394-400,共7页
目的观察大鼠脊髓损伤后TIMP-2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ的表达情况,探讨其对大鼠肢体运动功能的影响。方法将60只雌性SD(2个月龄)大鼠按随机数表法随机分为假手术组、术后3天组、术后5天组、术后7天组和术后9天组,每组12只。假手... 目的观察大鼠脊髓损伤后TIMP-2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ的表达情况,探讨其对大鼠肢体运动功能的影响。方法将60只雌性SD(2个月龄)大鼠按随机数表法随机分为假手术组、术后3天组、术后5天组、术后7天组和术后9天组,每组12只。假手术组仅行椎板切除术,其余组采用NYU脊髓打击器建立脊髓损伤模型。术后1、3、5、7、9天应用BBB肢体运动功能评分对大鼠肢体运动功能进行评分;采用尼式染色观察脊髓神经元形态;采用免疫组织化学染色法检测脊髓组织TIMP-2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ表达;Western blot检测TIMP-2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ的蛋白表达量。结果 (1)脊髓损伤后,大鼠BBB肢体运动功能评分显著下降,随着时间延长,大鼠BBB肢体运动功能评分逐渐增高,与术后1天相比,术后7天和术后9天大鼠肢体BBB运动功能评分增高,差异有统计学意义(P〈0.05);(2)尼氏染色观察发现,假手术组脊髓和神经元结构完整,尼氏体饱满,脊髓损伤各组脊髓和神经元结构被破坏,但术后9天大鼠脊髓和神经元的形态有所改善;(3)免疫组化检测显示假手术组TIMP-2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ表达量不高,脊髓损伤各组TIMP-2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ表达均有不同程度升高,与假手术组相比差异有统计学意义(P〈0.05),术后5天TIMP-2的表达量最高且差异有统计学意义(P〈0.05),术后7天Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ的表达量最高且差异有统计学意义(P〈0.05)。结论脊髓损伤后大鼠肢体运动功能的变化可能与TIMP-2,Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白表达的变化有关。大鼠脊髓损伤后,脊髓组织中TIMP-2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ表达增高,TIMP-2表达量在伤后5天达到高峰,Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ表达量在伤后7天达到高峰,有助于促进脊髓损伤模型大鼠肢体运动功能恢复。 展开更多
关键词 大鼠 脊髓损伤 基质金属蛋白酶组织抑制因子 胶原蛋白 胶原蛋白
杜仲多糖对肝纤维化模型大鼠Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1,TIMP-1及TGF-β1 mRNA表达的影响
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作者 王乾宇 王文佳 +5 位作者 奚锦 蔡琨 王平 梁建东 韩洁 何光志 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第23期153-158,共6页
目的:探讨杜仲多糖治疗肝纤维化(HF)作用,并探讨其相关的作用机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分成2组,正常组(10只)和肝纤维化造模组(50只)。造模组采用40%四氯化碳(CCl4)腹腔注射制备HF动物模型,造模成功后将其随机分为5个... 目的:探讨杜仲多糖治疗肝纤维化(HF)作用,并探讨其相关的作用机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分成2组,正常组(10只)和肝纤维化造模组(50只)。造模组采用40%四氯化碳(CCl4)腹腔注射制备HF动物模型,造模成功后将其随机分为5个组,分别为模型组,杜仲多糖高、中、低剂量组及秋水仙碱组每组10只。秋水仙碱组(1.0×10^-4g·kg^-1),杜仲多糖高、中、低剂量组(0.14,0.07,0.035 g·kg^-1)分别连续灌胃给药8周后收集样本,测定法大鼠体质量及计算肝脏系数;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素-6(IL-6),高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1),脂多糖(LPS),肝组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)水平;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析各组大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1,TIMP-1及转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达情况。结果:与正常组比较,CCl4能显著降低实验大鼠体质量(P〈0.01),提高肝脏系数(P〈0.01);杜仲多糖能显著增加HF模型的体质量(P〈0.01),显著降低HF模型肝脏系数(P〈0.01);ELISA检测表明,杜仲多糖能显著降低肝纤维化大鼠血清IL-6,HMGB1及LPS含量(P〈0.01);RT-PCR检测结果显示,杜仲多糖及秋水仙碱能显著降低HF肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,TIMP-1及TGF-β1mRNA含量(P〈0.05),明显提高MMP-1含量(P〈0.05,P〈0.01),且呈量效关系。结论:杜仲多糖具有显著的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与抑制降低HF肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,TIMP-1及TGF-β1mRNA表达有关。 展开更多
关键词 杜仲多糖 肝纤维化大鼠 基质金属蛋白酶-1(MMP-1) 金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1) 胶原蛋白 胶原蛋白 转化生长因子-β1(TGF-β1)
皮肤创面无机诱导活性敷料对难愈合性创面I型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达的影响 预览
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作者 庄兢 林根辉 郑清健 《创伤与急诊电子杂志》 2018年第1期17-23,共7页
目的 通过观察难愈合性创面模型大鼠Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达情况,探讨皮肤创面无机诱导活性敷料促进难愈合性创面模型大鼠创面愈合的可能机制. 方法 将 18 只大鼠随机分为 3 组即非难愈合性创面的对照组、模型组和实验组,每组... 目的 通过观察难愈合性创面模型大鼠Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达情况,探讨皮肤创面无机诱导活性敷料促进难愈合性创面模型大鼠创面愈合的可能机制. 方法 将 18 只大鼠随机分为 3 组即非难愈合性创面的对照组、模型组和实验组,每组 6 只.对照组仅做皮肤全切手术;其余两组经皮肤全切后给予醋酸氢化可的松皮下注射,制备难愈合性创面模型.造模后第 4 天,实验组大鼠创面每日给予皮肤创面无机诱导活性敷料软膏干预;其余 2 组大鼠创面每日进行常规换药处理.干预后第 7 天取材,计算各组大鼠创面愈合率.每组大鼠的-侧创面用作免疫组化检测Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达情况,另外-侧用于 Western blot 和 qPCR 检测Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白和 mRNA 表达量.结果 对照组创面愈合率为(83.2±8.9) %,模型组创面愈合率为(68.7±7.3)%,实验组创面愈合率为(77.6±9.5) %,实验组创面愈合率显著高于模型组,差异具有统计学意义(P 〈0.05);免疫组化显示实验组的Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的平均光密度分别为0.067±0.003 和 0.299±0.001,显著多于模型组的 0.039±0.004 和 0.229±0.006,差异具有统计学意义(P=0.05); Western blot 结果显示实验组的Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的蛋白表达量分别为0.601±0.005和0.587±0.016,高于模型组的0.225±0.015和0.307±0.007,差异具有统计学意义(P〈0.05); qPCR 结果显示实验组的Ⅰ型胶原蛋白 mRNA 和Ⅲ型胶原蛋白 mRNA 表达量分别为 5.81±0.87 和 3.54±0.94,显著多于模型组的 1.77±0.42 和1.98±0.84,差异具有统计学意义(P 〈0.05).结论 皮肤创面无机诱导活性敷料对难愈合性创面模型大鼠的创面愈合有促进作用,其作用机制可能与其促进创面局部Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的表达有关. 展开更多
关键词 难愈合性创面 皮肤创面无机诱导活性敷料 胶原蛋白 胶原蛋白
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红芪多糖对db/db小鼠糖尿病心肌病的病理形态与胶原表达的影响
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作者 张花治 金智生 +5 位作者 王东旭 和彩玲 何流 贾龙 楚惠媛 邵晶 《中国临床药理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第16期1971-1974,共4页
目的研究红芪多糖(HPS)对db/db小鼠糖尿病心肌病的病理形态及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法用随机数表法将6周龄雄性db/db小鼠分为5组:正常组、模型组、对照组和高、中、低3个剂量实验组。模型组和正常组ab/m小鼠均给予0.9%Na Cl... 目的研究红芪多糖(HPS)对db/db小鼠糖尿病心肌病的病理形态及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法用随机数表法将6周龄雄性db/db小鼠分为5组:正常组、模型组、对照组和高、中、低3个剂量实验组。模型组和正常组ab/m小鼠均给予0.9%Na Cl 10μL·g^-1灌胃;对照组给予4 mg·kg^-1·d^-1罗格列酮混悬液灌胃;实验组分别给予200,100,50 mg·kg^-1·d^-1HPS混悬液灌胃,每组12只,均连续灌胃8周。Masson染色观察心肌组织病理改变,实时荧光定量核酸扩增法与蛋白质印迹法分别检测心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原α与mRNA与蛋白的表达。结果模型组、高、中2个剂量实验组和对照组的Ⅰ型胶原的mRNA分别为5.04±1.35,1.57±0.21,2.73±0.57,2.06±0.47;这4组的Ⅲ型胶原的mRNA分别为3.12±0.25,1.59±0.09,1.95±0.12,1.67±0.21;这4组的Ⅰ型胶原蛋白表达分别为1.29±0.05,0.87±0.03,0.96±0.04,0.89±0.02;这4组的Ⅲ型胶原蛋白表达分别为0.89±0.03,0.69±0.01,0.76±0.01,0.69±0.01。3个给药组与模型组比较,上述指标均明显降低,差异均有统计学意义(均P〈0.01;除了中剂量实验组的Ⅰ型胶原的mRNA为P〈0.05以外)。心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的蛋白表达与Masson染色胶原纤维阳性染色面积值呈正相关,相关系数分别为0.955,0.909(P〈0.01)。结论 HPS能抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达水平及Ⅰ/Ⅲ胶原蛋白的比值,其对糖尿病心肌病db/db小鼠的心肌保护作用可能是通过影响Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达而发挥作用。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 红芪多糖 病理形态 胶原蛋白 胶原蛋白
参草通脉颗粒影响慢性心衰大鼠心肌重构的作用机制研究 被引量:1
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作者 张秋梅 孙增玉 +1 位作者 张艳 王懿 《中华中医药学刊》 北大核心 2018年第4期808-811,共4页
目的:分析参草通脉颗粒对心力衰竭大鼠心肌重构的作用机制。方法:取80只大鼠,予左冠状动脉前降支结扎,同时配合力竭式游泳、节食等方法做成慢性心衰模型,设正常组20只,将成功造模的大鼠分为模型组、中药组、西药组3组,以灌胃给药或蒸... 目的:分析参草通脉颗粒对心力衰竭大鼠心肌重构的作用机制。方法:取80只大鼠,予左冠状动脉前降支结扎,同时配合力竭式游泳、节食等方法做成慢性心衰模型,设正常组20只,将成功造模的大鼠分为模型组、中药组、西药组3组,以灌胃给药或蒸馏水28 d。以实时荧光定量PCR技术及SABC免疫组化法分别检测MMP-1、MMP-2、MMP-9蛋白的基因表达情况,及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的蛋白表达情况。结果:相对于正常组,其余3组大鼠MMP-1、MMP-2及MMP-9蛋白的基因表达水平显著升高(P〈0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达中药组较西药组升高明显(P〈0.05)。结论:参草通脉颗粒抑制慢性心衰心肌重构的机制可能与Ⅰ、Ⅲ型胶原和基质蛋白酶的表达有关。 展开更多
关键词 参草通脉颗粒 慢性心衰 基质金属蛋白酶1 2 9 胶原蛋白 胶原蛋白
机械力对盆底成纤维细胞的双向作用
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作者 李秉枢 洪莉 +3 位作者 程丽薇 闵洁 刘耀丹 汤建明 《武汉大学学报:医学版》 CAS 2018年第3期365-368,共4页
目的:探讨机械力对盆底成纤维细胞双向作用。方法:收集2013年1月到2015年1月于我院因非盆腔器官脱垂患者行阴式全子宫切除的骶主韧带组织,原代培养成纤维细胞,根据机械力加载参数不同进行如下分组:(1)不加力对照组;(2)1mm 4h0.5Hz组;(3)... 目的:探讨机械力对盆底成纤维细胞双向作用。方法:收集2013年1月到2015年1月于我院因非盆腔器官脱垂患者行阴式全子宫切除的骶主韧带组织,原代培养成纤维细胞,根据机械力加载参数不同进行如下分组:(1)不加力对照组;(2)1mm 4h0.5Hz组;(3)4mm 4h0.5 Hz组。CCK-8法检测各组加力干预后细胞增殖活性,Western Blot检测各组细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果:不同力学参数加载人盆底成纤维细胞后,与对照组相比,1 mm 4h0.5 Hz组细胞增殖活性增强(188.22%±10.53%),4 mm 4h0.5 Hz组细胞增殖活性减弱(66.09%±4.06%),差异均有统计学意义(P<0.05)。Western Blot检测各组中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平的变化,与对照组相比,1mm 4h0.5 Hz组的人盆底成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达明显上调(P<0.05,P<0.001),而4mm 4h0.5Hz组的人盆底成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达明显下调(P<0.001,P<0.05)。结论:机械力对盆底组织有损伤或修复的双向调控作用,其机制可能为机械力对盆底成纤维细胞具有促增殖或损伤双向调控作用,并双向调控Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白代谢。 展开更多
关键词 机械力 成纤维细胞 盆腔器官脱垂 胶原蛋白 胶原蛋白
美洲大蠊提取液对慢性难愈合创面Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白调控研究 预览 被引量:1
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作者 李文华 伍伟明 +3 位作者 刘筱 杨敏 周雯婷 曾娟妮 《湖南中医药大学学报》 CAS 2018年第3期250-253,共4页
目的观察美洲大蠊提取液对大鼠慢性难愈合创面组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白的表达,探讨其促愈机制。方法将48只SPF大鼠随机分为急性创面对照组,慢性创面模型组、贝复济阳性组及美洲大蠊实验组,药物干预5、7、11 d后分批留取创面组织并处死... 目的观察美洲大蠊提取液对大鼠慢性难愈合创面组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白的表达,探讨其促愈机制。方法将48只SPF大鼠随机分为急性创面对照组,慢性创面模型组、贝复济阳性组及美洲大蠊实验组,药物干预5、7、11 d后分批留取创面组织并处死,运用PCR方法测定创面组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达。结果Ⅰ、Ⅲ型胶原在各组中的表达趋势曲线一致,第5天,对照组表达最高,模型组最低,从第5天开始,美洲大蠊实验组中Ⅰ、Ⅲ型胶原中表达呈上升趋势并高于阳性组,第7天达到高峰后逐渐稳定下降,第11天略低于阳性组(P<0.01)。结论美洲大蠊提取液能有效提高大鼠难愈合创面前中期Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白的表达从而促进创面愈合,并在后期能有效降低胶原蛋白的过度表达而减少瘢痕形成。 展开更多
关键词 美洲大蠊提取液 慢性难愈合创面 胶原蛋白 胶原蛋白
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重组缓释白介素4的克隆表达与鉴定 预览
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作者 张冲 黄子珂 李思光 《同济大学学报:医学版》 CAS 2018年第5期28-33,共6页
目的 重组表达可以缓释的抗炎因子白介素4(Interleukin 4,IL-4)。方法 根据小鼠IL-4的氨基酸序列,并基于大肠杆菌密码子偏爱性合成IL-4的基因,通过聚合酶链式反应(PCR)方法将胶原蛋白结合域(collagen binding domain,CBD)的编码... 目的 重组表达可以缓释的抗炎因子白介素4(Interleukin 4,IL-4)。方法 根据小鼠IL-4的氨基酸序列,并基于大肠杆菌密码子偏爱性合成IL-4的基因,通过聚合酶链式反应(PCR)方法将胶原蛋白结合域(collagen binding domain,CBD)的编码序列和组氨酸标签序列连接到IL-4基因上,运用无缝克隆技术将上述重组基因插入p ET-30a(+)载体。重组蛋白通过组氨酸标签进行纯化,纯化的蛋白被用于诱导M 0巨噬细胞分化成M 2巨噬细胞,同时检测M2巨噬细胞相关基因表达以及对白介素10(Interleukin 10,IL10)的分泌。与Ⅰ型胶原蛋白的联用验证胶原蛋白对重组因子的吸附和缓释功能。结果 带有CBD序列和组氨酸纯化标签的IL-4通过镍柱纯化,具有与商业化IL-4相似的生物活性。功能实验证实其能够被胶原蛋白吸附,并能脱离胶原蛋白缓释。结论 通过大肠杆菌表达纯化获得了能够缓释的抗炎因子IL-4. 展开更多
关键词 缓释 胶原蛋白结合域 白介素4 胶原蛋白
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肝纤维化的分子成像进展 预览
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作者 王彦姝 李金凝 汪登斌 《国际医学放射学杂志》 北大核心 2018年第5期572-575,共4页
肝纤维化是各种慢性肝损伤的共同转归,肝纤维化分子成像基于病程中异常表达的靶分子,在真实完整的生理环境中通过图像直接观察细胞和分子通路。通过对病变的发生、发展过程进行成像,可做到对肝纤维化的早期诊断、早期干预及疗效评估。... 肝纤维化是各种慢性肝损伤的共同转归,肝纤维化分子成像基于病程中异常表达的靶分子,在真实完整的生理环境中通过图像直接观察细胞和分子通路。通过对病变的发生、发展过程进行成像,可做到对肝纤维化的早期诊断、早期干预及疗效评估。迄今为止,以活化的星状细胞或细胞外基质某类成分为靶分子的肝纤维化分子成像已取得一定进展。综述基于不同成像靶点的分子成像在肝纤维化中的应用进展。 展开更多
关键词 肝纤维化 分子成像 整合素 胶原蛋白
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运动干预对骨Ⅰ型胶原蛋白含量的影响 预览
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作者 陈祥和 《体育科学研究》 2018年第3期24-27,共4页
骨作为机内的重要组织器官,相关信号途径或关键分子通过调控成骨细胞(Osteoblast,OB)合成Ⅰ型胶原蛋白,为钙、磷等矿物质沉积提供载体,使得骨量增加,改善骨质疏松。而运动作为影响骨代谢的重要手段,其促进OB分化及骨形成,使得骨中Ⅰ... 骨作为机内的重要组织器官,相关信号途径或关键分子通过调控成骨细胞(Osteoblast,OB)合成Ⅰ型胶原蛋白,为钙、磷等矿物质沉积提供载体,使得骨量增加,改善骨质疏松。而运动作为影响骨代谢的重要手段,其促进OB分化及骨形成,使得骨中Ⅰ型胶原蛋白及骨密度(Bone mineral density,BMD)增加。但目前有关运动影响骨中Ⅰ型胶原蛋白合成的研究较少,其分子机制尚不明确。TGF-β/BMPs、Notch、Hedgehog、miRNAs等途径或关键因子在调控OB分化产生和Ⅰ型胶原蛋白合成均具有重要作用。虽然,运动可显著激活或上调以上信号途径或关键因子表达,但目前有关运动通过以上信号途径或关键因子进而影响骨中Ⅰ型胶原蛋白表达,并改善骨质疏松的相关研究尚未见报道。通过分析国内外相关研究,对Ⅰ型胶原蛋白在改善骨质疏松中的作用和运动影响骨中Ⅰ型胶原蛋白合成的作用及分子机制进行综述。 展开更多
关键词 运动 胶原蛋白 骨质疏松 有机质 成骨细胞
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负压伤口疗法对糖尿病足不同程度缺血创面肉芽组织Ⅰ型胶原蛋白表达的影响 预览
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作者 杨少玲 朱旅云 +3 位作者 胡丽叶 刘洋 郭炳彦 窦京涛 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2018年第1期24-29,共6页
目的探讨负压伤口疗法(NPWT)对糖尿病足不同程度缺血创面肉芽组织Ⅰ型胶原蛋白表达的影响。方法选取2014年1月至2016年1月在解放军白求恩国际和平医院住院期间符合入组标准的糖尿病足患者30例,依据踝肱指数(ABI)把入组患者分为轻度... 目的探讨负压伤口疗法(NPWT)对糖尿病足不同程度缺血创面肉芽组织Ⅰ型胶原蛋白表达的影响。方法选取2014年1月至2016年1月在解放军白求恩国际和平医院住院期间符合入组标准的糖尿病足患者30例,依据踝肱指数(ABI)把入组患者分为轻度下肢缺血组(0.7≤ABI≤0.9)和中度下肢缺血组(0.5≤ABI〈0.7),每组各15例。两组患者均给予NPWT治疗,疗程14 d。分别于治疗前及治疗第14天取患者创面肉芽组织,将标本分成2份,1份固定在4%多聚甲醛中用于Ⅰ型胶原蛋白免疫组织化学染色,观察Ⅰ型胶原蛋白沉积情况;另1份于-80℃保存,用Western blotting法和Real-time PCR法定量测定Ⅰ型胶原蛋白及其mRNA表达情况。数据比较采用独立样本t检验。结果免疫组织化学染色分析显示,治疗第14天,两组Ⅰ型胶原蛋白平均面密度值较治疗前均明显升高,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);但与中度下肢缺血组(0.25±0.06)相比,轻度下肢缺血组胶原蛋白平均面密度值(0.35±0.07)升高更为明显,差异有统计学意义(t=4.71,P〈0.05)。Western blotting法分析显示,治疗第14天,两组Ⅰ型胶原蛋白相对表达水平较治疗前均明显升高,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);但与中度下肢缺血组(0.16±0.09)相比,轻度下肢缺血组Ⅰ型胶原蛋白相对表达水平(0.28±0.08)升高更为明显,差异有统计学意义(t=3.51,P〈0.05)。Real-time PCR法分析显示,治疗第14天,两组Ⅰ型胶原蛋白mRNA相对表达水平较治疗前均明显升高,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);与中度下肢缺血组(2.63±0.62)相比,轻度下肢缺血组Ⅰ型胶原蛋白mRNA相对表达水平(3.83±0.60)升高更为明显,差异有统计学意义(t=5.33,P〈0.05)。结论 NPWT对糖尿病足患者不同程度缺血创面Ⅰ型胶原蛋白表达的影响不同,对于轻度缺血创面肉芽组织的Ⅰ型胶原蛋� 展开更多
关键词 负压伤口疗法 糖尿病足 缺血 肉芽组织 胶原蛋白
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针刺对支气管哮喘大鼠肺组织Fibronection、CollagenⅠ表达的影响
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作者 张宇佳 李双 +4 位作者 虞跃跃 韩君萍 赵叶 杨金华 崔建美 《时珍国医国药》 CSCD 北大核心 2018年第9期2291-2293,共3页
目的探讨针刺对支气管哮喘大鼠肺组织Fibronection、CollagenⅠ表达的影响。方法将30只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组和哮喘针刺组,每组10只。各组分别给予相应干预后,采用HE染色观察各组大鼠肺组织病理形态学改变,免... 目的探讨针刺对支气管哮喘大鼠肺组织Fibronection、CollagenⅠ表达的影响。方法将30只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组和哮喘针刺组,每组10只。各组分别给予相应干预后,采用HE染色观察各组大鼠肺组织病理形态学改变,免疫组织化学染色法检测肺组织Fibronection、CollagenⅠ表达情况。结果针刺可以有效改善哮喘大鼠肺组织病理改变,哮喘针刺组大鼠肺组织Fibronection、CollagenⅠ的表达均较哮喘模型组降低(F=32.408,P=0.000; F=15.861,P=0.000)。结论针刺可降低哮喘大鼠肺组织中Fibronection、CollagenⅠ的过度表达以及改善哮喘大鼠肺组织的气道重塑程度。 展开更多
关键词 针刺 支气管哮喘 纤维连接蛋白 胶原蛋白
阿司匹林抑制血小板聚集行为的三维形态学分析
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作者 刘娟 丁玲 +3 位作者 何翠 陈丹 邓素容 李远 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期1757-1764,共8页
目的:发展一种通过三维形态学参数评价阿司匹林抑制血小板聚集行为的新方法。方法:将采集的12名健康志愿者枸橼酸钠抗凝外周血均分为二份,一份加入200μmol/L乙酰水杨酸(ASA)处理作为实验组,另一份为对照组,分别对两组血小板进行洗涤纯... 目的:发展一种通过三维形态学参数评价阿司匹林抑制血小板聚集行为的新方法。方法:将采集的12名健康志愿者枸橼酸钠抗凝外周血均分为二份,一份加入200μmol/L乙酰水杨酸(ASA)处理作为实验组,另一份为对照组,分别对两组血小板进行洗涤纯化。将纯化血小板加入Ⅰ型胶原蛋白修饰的反应池中在静态条件下诱导血小板活化聚集,通过形状测量激光显微系统观察分析形成的血小板聚集体三维形态。同时,通过光透射浊度法(LTA)分析血小板功能。结果:本技术可在无标记情况下获取血小板聚集体的形貌、高度及三维形态图像数据,并可量化血小板聚集体的体积参数; ASA处理能明显改变血小板聚集体的三维形态学特征;与对照组相比,实验组血小板聚集体体积显著降低(t=8.97,P<0.01),而横截面积改变不显著(t=1.94,P>0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示,血小板聚集体体积截断值为1 395μm3时鉴别ASA抑制功效的灵敏度和特异度分别为91.7%和75%,其准确度和灵敏度均优于LTA方法测试的聚集度参数。结论:本研究建立的ASA抑制血小板聚集行为的三维形态学分析方法将为后续研究和临床评价ASA抗血小板聚集效应提供新的分析策略。 展开更多
关键词 血小板聚集 阿司匹林 三维形态 胶原蛋白 血小板聚集体体积
miR-29c对矽肺纤维化中成纤维细胞COL1A1表达的影响 预览
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作者 王发选 许红霞 +1 位作者 张昱辉 周健 《宁夏医科大学学报》 2018年第12期1390-1394,共5页
目的探讨miR-29c在矽肺纤维化中的作用。方法原代培养大鼠肺成纤维细胞,分为阴性对照组(A组)、巨噬细胞培养液刺激组(B组)、miR-29c mimic+巨噬细胞培养液刺激组(C组)和miR-29c无义序列+巨噬细胞培养液刺激组(D组)4组,采用实时荧光定量... 目的探讨miR-29c在矽肺纤维化中的作用。方法原代培养大鼠肺成纤维细胞,分为阴性对照组(A组)、巨噬细胞培养液刺激组(B组)、miR-29c mimic+巨噬细胞培养液刺激组(C组)和miR-29c无义序列+巨噬细胞培养液刺激组(D组)4组,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中COL1A1 mRNA表达水平,Western blot法检测COL1A1蛋白表达水平。结果与A组比较,B组COL1A1基因与蛋白表达水平均增加(P均<0.05);与B组和D组相比较,C组COL1A1基因与蛋白表达水平明显降低(P均<0.01)。结论miR-29c可以减少巨噬细胞刺激液诱导的大鼠肺成纤维细胞COL1A1表达,对矽肺纤维化过程有潜在干预作用。 展开更多
关键词 miR-29c 大鼠 胶原蛋白 成纤维细胞 矽肺
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尿道狭窄瘢痕中CaMKⅡ、Smad2、CollagenⅠ表达的免疫组化研究
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作者 陈俊杰 高本敏 +4 位作者 王桂林 黄亮 薛睿智 向旭宇 唐正严 《临床泌尿外科杂志》 2018年第1期56-60,共5页
目的:运用免疫组化研究尿道狭窄瘢痕中钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ(calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)、Smad2、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达的差异。方法:本研究样本采集自2014年12月~2015年12月期间,中南大学湘雅医... 目的:运用免疫组化研究尿道狭窄瘢痕中钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ(calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)、Smad2、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达的差异。方法:本研究样本采集自2014年12月~2015年12月期间,中南大学湘雅医院泌尿外科收治的11例初发性尿道狭窄、10例复发性尿道狭窄患者标本和10例正常尿道组织(取自前尿道狭窄患者的少量正常组织标本)。开展针对正常尿道组织、初发性尿道狭窄瘢痕和复发性尿道狭窄瘢痕的免疫组化研究。结果:(1)通过分析正常尿道组织和尿道狭窄瘢痕组织的苏木精-伊红(HE)染色、VG染色结果发现,尿道狭窄瘢痕组织的HE染色、VG染色切片中成纤维细胞数量较正常尿道组织明显增加,排列较为紊乱。(2)在对比正常尿道组织组和尿道狭窄瘢痕组之间的免疫组化结果后发现尿道狭窄瘢痕组的钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/CaMKⅡ)、Smad2、CollagenⅠ的表达情况以及胶原蛋白表达量均显著高于尿道正常组(P〈0.01)。(3)比较同为尿道狭窄瘢痕组别之间的免疫组化结果发现,复发性尿道狭窄瘢痕组的CaMKⅡ、Smad2的表达量显著高于首发性尿道狭窄瘢痕组(P〈0.01)。复发性尿道狭窄瘢痕组的CollagenⅠ表达情况显著高于初发性尿道狭窄瘢痕组(P〈0.05)。结论:尿道狭窄瘢痕的发生与CaMKⅡ、Smad2、CollagenⅠ在尿道组织中的表达密切相关。 展开更多
关键词 尿道狭窄瘢痕 钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ Smad2信号传导蛋白 胶原蛋白
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