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2005年中国3个县1~6岁儿童人肠道病毒71型血清流行病学调查 被引量:57
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作者 郭学斌 祝双利 +7 位作者 王东艳 严冬梅 檀晓娟 朱晖 蒋小泓 唐浏英 杨朝辉 许文波 《中国疫苗和免疫》 CAS 2009年第2期141-144,共4页
目的了解2005年中国3个县儿童人肠道病毒71型(Human Enterovirus 71,HEV71)抗体水平及HEV71在儿童中的自然感染状况,为预防控制手足口病(Hand-foot-mouth Disease,HFMD)在儿童中的流行提供依据。方法利用2005年9月进行儿童麻疹抗体... 目的了解2005年中国3个县儿童人肠道病毒71型(Human Enterovirus 71,HEV71)抗体水平及HEV71在儿童中的自然感染状况,为预防控制手足口病(Hand-foot-mouth Disease,HFMD)在儿童中的流行提供依据。方法利用2005年9月进行儿童麻疹抗体水平调查时,在3个省各1个县共371名1~6岁儿童中所采集的血清标本,使用中和试验检测血清HEV71中和抗体,并对检测结果进行统计学分析。结果儿童HEV71中和抗体阳性164人,阳性率为44.2%。抗体阳性率分布与儿童年龄和所在地区有关,1岁儿童抗体阳性率最低,随着年龄的增长,抗体阳性率升高,各年龄抗体阳性率差异有显著的统计学意义(x2=25.73,P〈0.05)。3个县儿童HEV71中和抗体阳性率不同,但差异无显著的统计学意义(x^2=0.11,P〉0.05)。抗体几何平均滴度1岁较低,2、3岁升高,4~6岁下降。3个县儿童HEV71中和抗体水平构成一致,以抗体阴性或低抗体水平为主。结论2005年以前3个县儿童曾发生HEV71感染;1~6岁儿童尤其是≤3岁儿童,HEV71中和抗体阳性率低,是HEV71导致HFMD的易感人群,应加强预防由HEV71引起的HFMD在≤3岁儿童中的流行或传播。 展开更多
关键词 人肠道病毒71型 中和抗体 血清流行病学调查
安徽,江苏,广西部分地区水牛牛病毒性腹泻/粘膜病血清学监测 预览 被引量:37
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作者 邱昌庆 郭慧琛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第6期 453-454,共2页
用微量细胞中和试验,对安徽、江苏和广西的12个县部分水牛群血清样品(n=343)牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)中和抗体进行检测。结果从10个县的血清中检出了BVD/MD抗体,其中安徽水牛血清(n=150)BVD... 用微量细胞中和试验,对安徽、江苏和广西的12个县部分水牛群血清样品(n=343)牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)中和抗体进行检测。结果从10个县的血清中检出了BVD/MD抗体,其中安徽水牛血清(n=150)BVD/MD抗体平均阳性检出率为24.2%(范围10%~46.7%),江苏(n=143)BVD/MD平均阳性检出率为8.4%(0%~11.1%),广西(n=50)BVD/MD平均阳性检出率为10.0%(0%~15.4%)。本调查说明我国水牛群中BVD/MD流行在扩大。 展开更多
关键词 水牛 病毒性腹泻粘膜病 中和抗体 监测
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上海市手足口病患者肠道病毒71型的分离 被引量:37
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作者 李秀珠 胡家瑜 +1 位作者 丁晓光 张家琪 《中国计划免疫》 2003年第1期35-37,共3页
2000年10~11月,上海市杨浦区某幼儿园发生手足口病流行,采集了25例粪便标本分离病毒,用RD细胞分离出肠道病毒(EV),经用标准血清鉴定为EV71型13株,埃可病毒13型(ECHO13)1株,EV71型分离率为52%.病人血清与EV71型分离株的中和抗体滴度较高... 2000年10~11月,上海市杨浦区某幼儿园发生手足口病流行,采集了25例粪便标本分离病毒,用RD细胞分离出肠道病毒(EV),经用标准血清鉴定为EV71型13株,埃可病毒13型(ECHO13)1株,EV71型分离率为52%.病人血清与EV71型分离株的中和抗体滴度较高,多数>1∶256,而与柯萨奇病毒A组16型(Cox.A16)的中和试验滴度多数<1∶2.5例双份血清有1例EV71型抗体呈4倍升高,而Cox.A16型均无4倍升高,表明本次流行由EV71型引起. 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒71型 分离 病毒分离 RD细胞 中和抗体 致病因子 上海
重症手足口病免疫球蛋白治疗的机理探讨 被引量:37
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作者 曹瑞源 韩剑峰 +1 位作者 秦鄂德 秦成峰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期712-716,共5页
手足口病是由多种肠道病毒感染导致的一种急性儿科传染病。近年来,我国肠道病毒71型(EV71)手足口病发病率急剧上升,重症病例时有报道,严重威胁儿童健康。临床上对于重症手足口病的治疗缺乏有效手段,主要以对症治疗和支持疗法为主。静... 手足口病是由多种肠道病毒感染导致的一种急性儿科传染病。近年来,我国肠道病毒71型(EV71)手足口病发病率急剧上升,重症病例时有报道,严重威胁儿童健康。临床上对于重症手足口病的治疗缺乏有效手段,主要以对症治疗和支持疗法为主。静脉注射人免疫球蛋白由健康献血员血浆提取纯化而来,含有包括EV71在内的多种肠道病毒的中和抗体,可作为重症手足口病被动免疫和免疫调节的重要手段,值得关注。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 手足口病 免疫球蛋白 中和抗体
2004年全国计划免疫审评不同免疫覆盖率县的儿童脊髓灰质炎中和抗体水平调查 被引量:34
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作者 王华庆 陈丽娟 +12 位作者 郭欣 张合润 王玉梅 罗明 贺雄 周玉清 曹玲生 卢永 夏伟 殷大鹏 陈园生 李黎 梁晓峰 《中国计划免疫》 2006年第6期454-458,共5页
目的了解2004年全国计划免疫审评不同免疫覆盖率县的儿童脊髓灰质炎(脊灰)中和抗体水平。方法根据2004年全国计划免疫审评县四种疫苗[卡介苗、口服脊灰减毒活疫苗(OPV)、百白破联合疫苗、麻疹减毒活疫苗]免疫覆盖率不同分为3层,每... 目的了解2004年全国计划免疫审评不同免疫覆盖率县的儿童脊髓灰质炎(脊灰)中和抗体水平。方法根据2004年全国计划免疫审评县四种疫苗[卡介苗、口服脊灰减毒活疫苗(OPV)、百白破联合疫苗、麻疹减毒活疫苗]免疫覆盖率不同分为3层,每层随机抽取2个县,每个县随机调查10个村,每个村随机调查1992~2003年出生儿童42名;检测方法用微量组织培养法。结果①被调查儿童建卡率和建证率分别为66.5%和75.3%。②脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体阳性率分别为96.9%、98.6%、93.7%;几何平均滴度(GMT)分别为1:113.2、1:83.7、1:40.5。③各型抗体GMT均随年龄增长呈明显下降的趋势。④不同免疫覆盖率儿童与脊灰中和抗体阳性率无相关性。结论本次调查地区儿童脊灰中和抗体阳性率、GMT总体保持在较高水平,但是个别地区的个别年龄组儿童较低。儿童OPV的接种率不能客观反映儿童脊灰的抗体水平。 展开更多
关键词 口服脊髓灰质炎减毒活疫苗 接种率 中和抗体 阳性率 几何平均滴度
麻疹病毒抗原性变异及免疫保护效果研究 预览 被引量:24
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作者 张建华 卢亦愚 +5 位作者 严菊英 邵传森 徐宝祥 陆群英 龚黎明 周敏 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期 935-937,共3页
目的了解浙江省麻疹野毒株的抗原性变异状况以及麻疹疫苗的免疫保护效果.方法采用麻疹国际标准株Edmonston株、疫苗株沪191与近几年浙江省分离的麻疹野毒株(浙98-5和浙00-4)分别制备免疫血清,与各毒株进行交叉中和试验,并分别对不同来... 目的了解浙江省麻疹野毒株的抗原性变异状况以及麻疹疫苗的免疫保护效果.方法采用麻疹国际标准株Edmonston株、疫苗株沪191与近几年浙江省分离的麻疹野毒株(浙98-5和浙00-4)分别制备免疫血清,与各毒株进行交叉中和试验,并分别对不同来源的人群血清测定中和抗体滴度.结果麻疹野毒株浙98-5与疫苗株沪191和Edm株的抗原比分别为3.0和2.6,浙00-4与上述两毒株的抗原比分别为7.30和5.65,其抗原性存在着明显的差异.麻疹疫苗初免儿童和麻疹急性期病人血清对麻疹野毒株的中和抗体几何平均滴度(GMT)分别为15.03和5.04,明显低于疫苗株沪191,GMT分别为68.12和11.76.但健康人群血清对两毒株的中和抗体滴度无显著性差异.结论浙江省麻疹野毒株已出现较明显的抗原性变异,现行麻疹疫苗的免疫保护效果也受到一定影响. 展开更多
关键词 麻疹病毒 抗原性变异 中和抗体
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免疫刺激复合物(ISCOM)介导的传染性法氏囊病病毒多聚蛋白基因免疫的研究 预览 被引量:15
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作者 李建荣 于涟 +3 位作者 黄耀伟 梁雪芽 孟松树 谢荣辉 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期 341-348,共8页
将传染性法氏囊病病毒(IBDV)ZJ2000株的多聚蛋白(VP2/VP4/VP3)基因插入pCI质粒的CMV启动子下游,构建了真核表达质粒pCI-VP2/VP4/VP3,在Lipofectin介导下转染Vero细胞进行了多聚蛋白的瞬时表达.以免疫刺激复合物(ISCOM)为佐剂制备DNA疫苗... 将传染性法氏囊病病毒(IBDV)ZJ2000株的多聚蛋白(VP2/VP4/VP3)基因插入pCI质粒的CMV启动子下游,构建了真核表达质粒pCI-VP2/VP4/VP3,在Lipofectin介导下转染Vero细胞进行了多聚蛋白的瞬时表达.以免疫刺激复合物(ISCOM)为佐剂制备DNA疫苗,进行不同免疫剂量间、不同免疫途径间、一次免疫和二次免疫间的效果对比试验.结果表明:以肌内和皮内联合免疫法效果最好,而口服和点眼等途径未能诱导足够的免疫反应;大于200μg的剂量DNA疫苗才能产生良好的免疫力;二次免疫的效果明显优于一次免疫.与常规的弱毒疫苗B87和D78相比,DNA疫苗产生中和抗体的潜伏期长、效价相对较低,对强毒攻击的保护率相当.本试验还证实,免疫刺激复合物具有明显提高DNA疫苗免疫效果的作用.DNA疫苗能诱导产生保护性反应,为今后IBD疫苗的研究开创了一条新的途径. 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 多聚蛋白 DNA疫苗 免疫原性 中和抗体 免疫刺激复合物 ISCOM
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冻干流行性腮腺炎减毒活疫苗人体反应及免疫效果观察 被引量:23
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作者 郭绍红 徐天强 《中国计划免疫》 1997年第1期1-4,共4页
冻干流行性腮腺炎减毒活疫苗(腮腺炎疫苗),在我国系新近问世的预防制剂。我们选用了能够更为真实反映疫苗免疫原性的血清中和试验(SN)方法,对S79株腮腺炎疫苗的免疫效果及人体反应进行观察。检测了239份无腮腺炎显性感染... 冻干流行性腮腺炎减毒活疫苗(腮腺炎疫苗),在我国系新近问世的预防制剂。我们选用了能够更为真实反映疫苗免疫原性的血清中和试验(SN)方法,对S79株腮腺炎疫苗的免疫效果及人体反应进行观察。检测了239份无腮腺炎显性感染史及接种史的1 ̄4岁健康儿童的免疫前、后血清,结果显示,免疫前抗体阴性的158名儿童中,免疫后45天其中和抗体阳转率为85.4%,几何平均滴度倒数(GMRT)为5.53;免疫前抗体者其 展开更多
关键词 流行性腮腺炎 减毒活疫苗 中和抗体 免疫
检测狂犬病病毒中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方?… 预览 被引量:22
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作者 严家新 李承平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期 93-96,共4页
在制备出抗狂犬病病毒(RV)核蛋白(NP)荧光标记抗体的基础上,建立起检测RV中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法。经与小鼠中和试验(MNT)比较,其重复性、特异性和灵敏度差异均无显著意义。该方法在大多数需... 在制备出抗狂犬病病毒(RV)核蛋白(NP)荧光标记抗体的基础上,建立起检测RV中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法。经与小鼠中和试验(MNT)比较,其重复性、特异性和灵敏度差异均无显著意义。该方法在大多数需要检测RV中和抗体的情况下可取代MNT。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 中和抗体 荧光灶抑制试验
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5-M在大肠杆菌中的融合表达及其ELISA诊断方法的建立 预览 被引量:10
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作者 江云波 方六荣 +2 位作者 肖少波 谢甜甜 陈焕春 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期 259-264,共6页
利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5和ORF6基因依序串联于GST下游,并在大肠杆菌中成功表达,获得了大小约为60kD的融合蛋白GST-GP5-M,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性.... 利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5和ORF6基因依序串联于GST下游,并在大肠杆菌中成功表达,获得了大小约为60kD的融合蛋白GST-GP5-M,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性.以纯化的融合蛋白为抗原建立了猪繁殖与呼吸综合征P56-ELISA检测方法,与国外试剂盒IDEXX-ELISA总符合率为94.1%,表明建立的P56-ELISA检测方法具有很好的特异性和敏感性.进一步分析了P56-ELISA检测结果与血清中和试验的相关性,经回归函数分析,发现在临床送检猪血清中的抗融合蛋白GP5-M抗体水平(OD630nm)与中和抗体水平之间的相关性并不高. 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5-M融合蛋白 ELISA 中和抗体 相关性
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河南省肠道病毒71型(EV71)血清流行病学调查 被引量:18
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作者 黄学勇 刘国华 +8 位作者 陈豪敏 康锴 李幸乐 杜燕华 卫海燕 邓文斌 王海峰 许玉玲 许汴利 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第8期617-618,639共3页
目的通过检测河南省0~12岁健康儿童、手足口病痊愈病人、手足口病现症病人血清肠道病毒71型(EV71)抗体水平,了解手足口病优势病毒株EV71人群感染情况,为预防控制手足口病等提供科学依据。方法在河南省不同地区采集0~12岁健康儿童、... 目的通过检测河南省0~12岁健康儿童、手足口病痊愈病人、手足口病现症病人血清肠道病毒71型(EV71)抗体水平,了解手足口病优势病毒株EV71人群感染情况,为预防控制手足口病等提供科学依据。方法在河南省不同地区采集0~12岁健康儿童、手足口病痊愈病人和手足口病现症病人血清共226份,采用微量中和滴定法检测抗EV71抗体。结果健康儿童、手足口病痊愈病人和手足口病现症病人血清EV71中和抗体阳性率分别为51.46%、92.96%和55.77%,差异有统计学意义(P〈0.05),EV71几何平均滴度(GMT)分别为11.13(8.83~13.99)、66.51(52.09~84.97)和21.93(14.32~33.57),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论手足口病流行地区健康儿童血清EV71中和抗体阳性率较高,EV71阴性感染较普遍。手足口病康复病人能够产生较高滴度的免疫保护性抗体,对EV71病毒再次感染具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 人手足口病 中和抗体
人肠道病毒71型中和抗体检测方法的实验室评价 被引量:20
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作者 毛群颖 何鹏 +8 位作者 于祥 李楠 郝春生 高强 董承红 梁争论 李凤翔 沈心亮 王军志 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第8期885-888,共4页
目的对人肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)中和抗体检测方法进行实验室评价,为该方法的标准化提供依据。方法 5个实验室按照统一制定的EV71中和抗体检测操作细则(SOP),应用A、B和C基因型的10株EV71病毒株,分别测定10份人免疫球蛋白... 目的对人肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)中和抗体检测方法进行实验室评价,为该方法的标准化提供依据。方法 5个实验室按照统一制定的EV71中和抗体检测操作细则(SOP),应用A、B和C基因型的10株EV71病毒株,分别测定10份人免疫球蛋白、20份健康成人血浆和15份EV71动物高效价免疫血清样品中EV71中和效价,检测实验室内、实验室间重复性及不同EV71病毒株对中和抗体检测的影响。结果相同实验室应用各病毒株重复测定中和效价的最大值与最小值(Max-Min)倍数差均在4倍以内,3次重复试验结果间差异无统计学意义(P值均〉0.05);不同实验室应用相同病毒株检测结果的Max-Min倍数差在4倍以内;不同实验室应用不同病毒株检测结果为:A型株与其他基因型病毒株中和效价的Max-Min差在192倍以内,B3与C4亚型的病毒株中和效价的Max-Min倍数差在64倍以内,C4亚型不同病毒株之间中和效价的Max-Min倍数差在16倍以内。结论按统一SOP操作后,EV71中和抗体检测方法应用相同毒株在实验室内和实验室间具有较好的重复性,而不同病毒株对中和效价的测定结果有较大影响。 展开更多
关键词 肠道病毒A型 手足口病 中和抗体 基因型
三种丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备及初步应用研究 预览 被引量:17
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作者 张柯 谭文杰 +3 位作者 邓瑶 李津 吴小兵 阮力 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期 287-294,共8页
本研究构建携带HCV代表株H77(1a)、中国HeBei株(1b)以及JFH-1株(2a)丙型肝炎病毒完整的E1-E2包膜糖蛋白基因的表达质粒,间接免疫荧光法及Western blot验证了其在细胞膜(293细胞)上的正确表达。三种包膜质粒分别与慢病毒包装质... 本研究构建携带HCV代表株H77(1a)、中国HeBei株(1b)以及JFH-1株(2a)丙型肝炎病毒完整的E1-E2包膜糖蛋白基因的表达质粒,间接免疫荧光法及Western blot验证了其在细胞膜(293细胞)上的正确表达。三种包膜质粒分别与慢病毒包装质粒pHR’CMV△8.2及携带EGFP报告基因的自灭活(Self—Inactivating,SIN)转移质粒pCS-CG共转染293FT细胞,产生三种不同基因型的丙型肝炎包膜感染性假型(pseudotyped)病毒颗粒,免疫荧光与Western blot分析验证了E1/E2包膜糖蛋白在假病毒颗粒上的表达与掺人,利用p24 ELISA法及感染性实验对HCV假病毒进行滴定。从上清中获得的HCV假病毒可以在体外感染肝癌细胞系Huh7及Huh7-CD81(且后者上的感染效率约为前者上的2~3倍);利用针对HCVE2蛋白的具有广谱交叉中和活性的单克隆抗体AP33建立了基于上述假病毒颗粒的丙肝病毒体外中和抗体滴定方法,并应用于丙型肝炎患者体内的中和抗体水平的研究。本研究成功包装了包括中国流行株在内的3种不同基因型的HCV包膜感染性假病毒颗粒并建立了基于假病毒颗粒的HCV体外中和抗体检测方法,为研究HCV感染早期特性及特异抗病毒药物的体外筛选提供了有效模型,并可用于HCV感染者体内及HCV基因工程疫苗免疫后中和抗体水平的分析。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 中和抗体 假病毒
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家养犬、猫及野生动物中狂犬病病毒流行病学调查及我国不同类型狂犬病疫苗免疫效果观测研究 预览 被引量:17
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作者 董关木 徐葛林 +10 位作者 肖奇友 王定明 胡月梅 周敦金 王萍 张永振 杨晓明 朱凤才 王昭孝 罗述斌 罗同勇 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期 417-423,共7页
选择我国狂犬病高发地区(湖南、贵州)、低发地区(江苏、武汉)和无狂犬病报告地区(沈阳)等三种不同.类型的地区,开展针对家养犬、猫和啮齿类动物,以及蝙蝠等野生动物的狂犬病病毒带毒率的流行病学调查,对分离到的病毒株在抗原... 选择我国狂犬病高发地区(湖南、贵州)、低发地区(江苏、武汉)和无狂犬病报告地区(沈阳)等三种不同.类型的地区,开展针对家养犬、猫和啮齿类动物,以及蝙蝠等野生动物的狂犬病病毒带毒率的流行病学调查,对分离到的病毒株在抗原型别、基因变异以及与现行疫苗是否匹配等方面进行分析、比较研究。结果显示:我国狂犬病的主要宿主动物为犬,捕获犬总带毒率为2.56%;犬中狂犬病病毒的监测点最高阳性检出率达到20.0%;啮齿类动物及蝙蝠等野生动物在本次研究未检测到狂犬病病毒。我国自主研制成功的以aG株和CTN株为毒种的现行人用狂犬病疫苗,经应用研究发现,CTN株的糖蛋白基因与本研究分离到的街毒核酸序列更接近。为进一步评价现行疫苗的有效性,在5个观察点分别以aG株和CTN株毒种生产的疫苗接种两组人群(每组各约50人),结果显示均未出现中、强度反应,疫苗免疫后第7d和14d产生的中和抗体分别达到0.49IU/mL-0.52IU/mL和6.7IU/mL~7.53IU/mL;抗体阳转率分别为45.1%~47.9%和100%,表明这些疫苗具有良好的安全性和保护效果。 展开更多
关键词 狂犬病 家养动物 野生动物 动物带毒率 疫苗 中和抗体
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北京市2007年健康人群脊髓灰质炎抗体水平分析 被引量:16
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作者 李晓梅 张合润 +9 位作者 王玉梅 刘东磊 邹艳杰 王冬梅 徐若辉 刘方 王海红 蒋贵英 张曙光 纪文艳 《中国疫苗和免疫》 CAS 2009年第3期245-248,共4页
目的了解北京市2007年健康人群脊髓灰质炎(脊灰)抗体水平。方法采用分层多级抽样的方法,调查北京市7个区(县)的〈1、1~4、5~9、10~14、15~19、20-24、25-29、30-34、35-39、≥40岁健康人群共1552人,用微量细胞中和试验测定血... 目的了解北京市2007年健康人群脊髓灰质炎(脊灰)抗体水平。方法采用分层多级抽样的方法,调查北京市7个区(县)的〈1、1~4、5~9、10~14、15~19、20-24、25-29、30-34、35-39、≥40岁健康人群共1552人,用微量细胞中和试验测定血清脊灰中和抗体。结果脊灰中和抗体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型阳性率分别为97.04%、97.29%、91.04%:抗体几何平均滴度(Geometric Mean Titers,GMT)分别为1:70.05、1:54.60、1:31.83。抗体GMT随年龄增长和免疫后时间延长而逐渐下降。不同性别、户籍、地区间抗体水平差异无显著的统计学意义。多因素分析发现,年龄组和免疫后时间对抗体GMT的影响有统计学意义。结论北京市健康人群对脊灰形成了免疫屏障。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎 中和抗体 阳性率 几何平均滴度
牛副流感病毒3型的分离鉴定及感染牛抗体消长规律的研究 预览 被引量:15
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作者 周玉龙 吴海涛 +4 位作者 任亚超 耿静 王密 谢金鑫 朴范泽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期 23-28,共6页
目的针对黑龙江省近几年夏季奶牛经常发生以高热、气喘和流涎等症状为主的疾病,给畜牧业造成严重经济损失,本文旨在研究其病原因素及感染牛中和抗体的变化趋势。方法本研究采集爆发高热病的牛群中患病牛乳汁和鼻液进行病毒分离,经CPE和... 目的针对黑龙江省近几年夏季奶牛经常发生以高热、气喘和流涎等症状为主的疾病,给畜牧业造成严重经济损失,本文旨在研究其病原因素及感染牛中和抗体的变化趋势。方法本研究采集爆发高热病的牛群中患病牛乳汁和鼻液进行病毒分离,经CPE和扫描电镜观察、理化特性试验、血凝试验、病毒中和试验以及RT-PCR方法鉴定分离的病毒,最后应用病毒中和试验跟踪监测5头典型发病牛中和抗体13个月。结果从病料中分离到一种RNA病毒,能够产生典型的细胞融合样CPE,有囊膜和栅栏样纤突,但是没有血凝性,能够与参考毒株牛副流感病毒3型抗血清发生病毒中和反应,HN基因的序列分析发现与牛副流感病毒3型HN基因同源性最高达99.6%。发病牛中和抗体跟踪监测结果显示康复期抗体效价是急性期的4倍以上,同时可见感染牛的中和抗体效价在6-8个月内能够维持在1:25~1:27,然后开始下降,最后维持在1:22~1:23之间。结论综上所述确定分离毒株是牛副流感病毒3型,进一步证实该病毒是引起本牛群高热病的病因之一,而且感染后中和抗体效价至少在6个月以内能够维持在较高的水平。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型 分离鉴定 中和抗体
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人IL-2信号肽基因增强柯萨奇病毒B3型VP1 DNA疫苗诱导的中和抗体应答 预览 被引量:11
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作者 方艳辉 金玉怀 +3 位作者 王永祥 于丹军 金士香 谢立新 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期 202-205,共4页
目的将人白细胞介素2(hIL-2)信号肽基因与柯萨奇病毒B组3型(CVB3) 的VP1基因融合,构建分泌型VP1真核表达质粒pcDNA3/sVP1;免疫小鼠后,通过测定血清特异性中和抗体效价及对致死量CVB3攻击的保护作用,评价疫苗的免疫效果. 方法采用重叠区... 目的将人白细胞介素2(hIL-2)信号肽基因与柯萨奇病毒B组3型(CVB3) 的VP1基因融合,构建分泌型VP1真核表达质粒pcDNA3/sVP1;免疫小鼠后,通过测定血清特异性中和抗体效价及对致死量CVB3攻击的保护作用,评价疫苗的免疫效果. 方法采用重叠区基因扩增法,将hIL-2信号肽基因连同其下游11个氨基酸残基的基因与CVB3 VP1基因拼接,获得分泌型VP1(sVP1) 的基因;将sVP1基因克隆至真核表达载体pcDNA3,构建分泌型VP1真核表达质粒pcDNA3/sVP1;肌注免疫小鼠,测定血清中CVB3特异性中和抗体的效价;第3次免疫后2周,腹腔内注射1000 TCID50的CVB3,观察小鼠生存情况. 结果成功构建了分泌型VP1真核表达质粒pcDNA3/sVP1,插入的sVP1基因中含有hIL-2信号肽及其下游11个氨基酸残基的基因以及VP1基因;pcDNA3/sVP1可比对照质粒pcDNA3/VP1诱导小鼠产生更高水平的中和抗体. 结论 hIL-2信号肽基因增强了柯萨奇病毒B3型VP1 DNA疫苗诱导的中和抗体应答,为进一步研制高效的CVB3 DNA疫苗提供了实验基础. 展开更多
关键词 DNA疫苗 柯萨奇病毒 信号肽 基因克隆 中和抗体 白细胞介素-2 重叠区基因扩增法
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抗狂犬病病毒中和抗体效价快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的建立及应用 被引量:14
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作者 吴小红 李加 +5 位作者 唐建蓉 Herre Bourhy 刘景华 曲效民 曹守春 董关木 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第11期1145-1148,共4页
目的建立抗狂犬病病毒中和抗体效价的快速荧光灶抑制试验(RFFIT),验证其与小鼠脑内中和法(MNT)的相关性,并用于马抗狂犬病病毒血清(ERIG)和人狂犬病免疫球蛋白(HRIG)及狂犬病疫苗免疫后血清中和抗体效价的测定。方法待测血清或... 目的建立抗狂犬病病毒中和抗体效价的快速荧光灶抑制试验(RFFIT),验证其与小鼠脑内中和法(MNT)的相关性,并用于马抗狂犬病病毒血清(ERIG)和人狂犬病免疫球蛋白(HRIG)及狂犬病疫苗免疫后血清中和抗体效价的测定。方法待测血清或免疫球蛋白在96孔板中作3倍系列稀释,与能感染80%~95%细胞量的攻击病毒混合后,37℃体外中和1h,接种BSR细胞,培养24h后荧光染色,荧光显微镜下读取结果。用建立的RFFIT法与MNT法同时标定狂犬病免疫球蛋白国家标准品,并检测ERIG和HRIG以及疫苗免疫后血清样品的抗狂犬病病毒中和抗体效价,以比较两种方法的精密度和相关性。结果采用MNT法和RFFIT法检测我国抗狂犬病免疫球蛋白国家标准品的GMT分别为21.4和23.8IU/ml,两种方法的变异系数分别为62.3%和13.3%;两个实验室用RFFIT法测定我国国家标准品的结果分别为21.71和23.81IU/ml。两种方法测定ERIG和HRIG及疫苗免疫后血清中和抗体效价的结果差异无统计学意义,相关系数为0.976,两种方法的检测结果之间呈良好的正相关性。结论RFFIT法可替代MNT法检测抗狂犬病病毒中和抗体效价。 展开更多
关键词 狂犬病 中和抗体 快速荧光灶抑制试验 小鼠脑内中和
修饰的ORF5基因增强猪繁殖与呼吸综合征DNA疫苗的体液免疫 预览 被引量:5
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作者 江云波 方六荣 +3 位作者 肖少波 牛传双 张辉 陈焕春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期 1-3,共3页
为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因DNA疫苗的免疫效力,将通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)插入ORF5的中和表位和覆盖表位间,获得修饰后的ORF5基因ORF5M.在此基础上,进一步构建了ORF5M的真核表达质粒pCI-52M.间接免疫荧光... 为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因DNA疫苗的免疫效力,将通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)插入ORF5的中和表位和覆盖表位间,获得修饰后的ORF5基因ORF5M.在此基础上,进一步构建了ORF5M的真核表达质粒pCI-52M.间接免疫荧光证实体外表达后,免疫BALB/c小鼠,检测免疫后的ELISA抗体和中和抗体,并与未经修饰的ORF5基因真核表达质粒pCI-52进行比较.结果表明,修饰后的DNA疫苗pCI-52M诱导的ELISA抗体和中和抗体均明显优于未经修饰的DNA疫苗pCI-52,是一种具有良好开发前景的PRRS新型疫苗. 展开更多
关键词 ORF5基因 ELISA抗体 猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV 新型疫苗 免疫效力 覆盖 DNA疫苗 中和抗体 体液免疫
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猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA检测方法的建立及应用 预览 被引量:12
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作者 黄立平 刘长明 +2 位作者 危艳武 陆月华 郭龙军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期 779-785,共7页
利用PCV2-Cap蛋白中和性单克隆抗体建立了一种检测猪血清中PCV2中和抗体的阻断ELISA方法。用该方法与免疫过氧化物酶单层细胞试验对353份试验猪血清样品进行平行检测,结果两种方法的符合率为96.0%; 该方法的敏感性为97.9%,特异性为92.4%... 利用PCV2-Cap蛋白中和性单克隆抗体建立了一种检测猪血清中PCV2中和抗体的阻断ELISA方法。用该方法与免疫过氧化物酶单层细胞试验对353份试验猪血清样品进行平行检测,结果两种方法的符合率为96.0%; 该方法的敏感性为97.9%,特异性为92.4%,且与其他几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。该阻断ELISA与血清中和试验的检测结果呈显著正相关(r=0.997 0),其敏感性还优于血清中和试验。用阻断ELISA对PCV2灭活疫苗免疫与攻毒试验猪血清样品进行检测,结果显示,疫苗接种后第2周就能检测到PCV2中和抗体,4周后阳转率达100%。另外,用该方法对东北三省不同地区送检的703份血清样品进行检测,结果阳性检出率为73.0%。表明,东北三省猪场中的PCV2感染率较高,危害严重。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 中和抗体 单克隆抗体 阻断ELISA
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