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香茅醇自乳化递送系统的制备及其体外抗肿瘤活性评价
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作者 杨佳佳 韦世权 +7 位作者 张科 陈妍 姜丰 周雪 肖婷 彭剑青 沈祥春 陶玲 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1196-1204,共9页
目的考察香茅醇(citronellol,CT)对人喉癌上皮细胞HEp-2和人乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响,并制备CT自乳化递送系统(self-emulsified drug delivery system,SMs),对HEp-2体外抗肿瘤活性和细胞摄取能力进行评价。方法采用MTT法考察CT对H... 目的考察香茅醇(citronellol,CT)对人喉癌上皮细胞HEp-2和人乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响,并制备CT自乳化递送系统(self-emulsified drug delivery system,SMs),对HEp-2体外抗肿瘤活性和细胞摄取能力进行评价。方法采用MTT法考察CT对HEp-2和MCF-7细胞增殖能力的影响;通过伪三元相图法优化香茅醇自乳化递送系统(CT-SMs)处方,进行外观形态、粒径和Zeta电位表征。采用MTT法检测CT-SMs对HEp-2细胞增殖能力的影响;荧光倒置显微镜定性和流式细胞仪定量考察HEp-2细胞对CT-SMs的摄取情况。结果经一定质量浓度CT处理后,MCF-7细胞增殖未受影响,差异无统计学意义(与对照组相比,P>0.05),而HEp-2细胞的增殖能力受到明显抑制(与对照组相比,P<0.05),呈剂量-时间依赖性;CT-SMs最佳处方是K_m(乳化剂与助乳化剂比例)为Kolliphor~?HS15-无水乙醇7∶3,CT-Km为3∶7。制备的微乳平均粒径为(354.0±9.5)nm,外观圆整呈类球形,分布均匀,Zeta电位为(-13.4±0.3)m V。细胞摄取实验结果表明,相同质量浓度的CT-SMs和CT处理HEp-2细胞后,CT-SMs较CT摄取量更多,分别为545.70±11.56、230.00±17.76。结论。采用滴加水法成功制备了CT-SMs,其处方工艺可行,制得的自微乳质量稳定可控。CT-SMs可明显抑制HEp-2细胞的增殖。 展开更多
关键词 香茅醇 自乳化递送系统 抗肿瘤 人喉癌上皮细胞 乳腺癌细胞 细胞摄取 细胞增殖 MTT法 伪三元相图
羽扇豆醇增强对沉默ST3GalⅢ基因的MDA-MB-231细胞侵袭转移的抑制作用
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作者 王明 崔红霞 刘吉成 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期26-31,共6页
目的探索羽扇豆醇(Lupeol)增强对沉默ST3GalⅢ基因的人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭转移的抑制作用。方法体外培养沉默ST3GalⅢ基因的MDA-MB-231细胞。采用细胞黏附实验,Transwell侵袭实验,细胞划痕实验检测羽扇豆醇对ST3GalⅢ沉默的MDA-MB... 目的探索羽扇豆醇(Lupeol)增强对沉默ST3GalⅢ基因的人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭转移的抑制作用。方法体外培养沉默ST3GalⅢ基因的MDA-MB-231细胞。采用细胞黏附实验,Transwell侵袭实验,细胞划痕实验检测羽扇豆醇对ST3GalⅢ沉默的MDA-MB-231细胞侵袭转移能力的作用。Western blotting检测各组细胞转移相关基质金属蛋白酶(MMP)-2、9和磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/核因子κB(PI3K/Akt/NF-κB)信号通路蛋白的表达情况。结果 ST3GalⅢ基因沉默及低浓度(5μmol/L)羽扇豆醇对MDA-MB-231细胞的增殖及凋亡无明显影响。羽扇豆醇对ST3GalⅢ沉默的MDA-MB-231细胞黏附、迁移和侵袭有明显的抑制作用,且相关蛋白MMP-2、-9和PI3K/Akt/NF-κB信号通路蛋白表达均下调。结论羽扇豆醇体外能增强对沉默ST3GalⅢ基因的人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭和转移的抑制作用,其机制可能与抑制MMP-2、-9的蛋白表达及影响了PI3K/Akt/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 羽扇豆醇 ST3GalⅢ 乳腺癌细胞 侵袭 迁移 免疫印迹法
微小RNA-10b调控乳腺癌MCF-7细胞中乳腺癌干细胞标记物乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白的表达 预览
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作者 韩明利 吕鹏威 +3 位作者 钱学珂 杨雪 杨云卿 谷元廷 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1349-1353,共5页
背景:miR-10b能够调控乳腺癌干细胞的相关特性,乙醛脱氢酶1是最重要的乳腺癌干细胞标记物之一,二者在乳腺癌细胞中的相互作用尚需进一步研究。目的:探讨miR-10b对乳腺癌MCF-7细胞中乳腺癌干细胞标记物乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白表达的影响... 背景:miR-10b能够调控乳腺癌干细胞的相关特性,乙醛脱氢酶1是最重要的乳腺癌干细胞标记物之一,二者在乳腺癌细胞中的相互作用尚需进一步研究。目的:探讨miR-10b对乳腺癌MCF-7细胞中乳腺癌干细胞标记物乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白表达的影响。方法:常规培养乳腺癌MCF-7细胞株,分别将miR-10b模拟物或其阴性对照转染进入乳腺癌MCF-7细胞;转染48 h,通过实时荧光定量PCR实验和Western blot实验检测乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白的表达。结果与结论:①将miR-10b模拟物转染进入MCF-7细胞之后,miR-10b在MCF-7细胞株中的表达显著高于对照组(P=0.003 47);②miR-10b过表达之后显著上调了MCF-7细胞株中乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白的表达(P=0.009 54和P=0.003 11);③结果表明,上调miR-10b表达能够诱导乙醛脱氢酶1阳性乳腺癌干细胞的产生,从而为miR-10b调控乳腺癌细胞侵袭、转移提供新的研究依据。 展开更多
关键词 乳腺癌 MIR-10B 乳腺癌细胞 乳腺癌细胞 乙醛脱氢酶1 细胞标记物 肿瘤干细胞 微RNAs 醛脱氢酶 组织工程
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四种乳腺癌细胞增殖及迁移能力测定 预览
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作者 胡平华 黄勤 +1 位作者 李志华 欧阳倩雯 《中国老年保健医学》 2019年第5期16-17,20共3页
目的测定腔面A型、腔面B型、HER-2阳性型和三阴性型四种乳腺癌细胞的增殖及迁移能力。方法通过组织样本进行原代细胞分离及培养获得四种乳腺癌细胞,并测定细胞活力及迁移能力。结果CCK8试验结果显示三阴性型人乳腺癌细胞的增殖效果最好... 目的测定腔面A型、腔面B型、HER-2阳性型和三阴性型四种乳腺癌细胞的增殖及迁移能力。方法通过组织样本进行原代细胞分离及培养获得四种乳腺癌细胞,并测定细胞活力及迁移能力。结果CCK8试验结果显示三阴性型人乳腺癌细胞的增殖效果最好;划痕实验试验结果显示除腔面B型细胞迁移失败外,HER-2型乳腺癌细胞的迁移速率最快,腔面A型次之,三阴性型最慢。结论4种乳腺癌细胞能力检测表明三阴性乳腺癌细胞迁移速率最慢;HER-2阳性迁移速率最快。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 细胞增殖 细胞迁移
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乳腺癌细胞条件培养基抑制成骨细胞增殖的作用研究 预览
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作者 李冲 文翔昊 +2 位作者 廖兰青 李海艳 郭玉 《贵州医药》 CAS 2019年第3期345-348,505共5页
目的以高转移恶性乳腺癌细胞MDA-MB-231和恶性程度较低的MCF-7乳腺癌细胞为研究对象,探讨两种乳腺癌细胞条件培养基对hFOB1.19细胞增殖作用的影响。方法收集MDA-MB-231、MCF-7和正常对照MCF-10的条件培养基用于hFOB1.19细胞的培养,并采... 目的以高转移恶性乳腺癌细胞MDA-MB-231和恶性程度较低的MCF-7乳腺癌细胞为研究对象,探讨两种乳腺癌细胞条件培养基对hFOB1.19细胞增殖作用的影响。方法收集MDA-MB-231、MCF-7和正常对照MCF-10的条件培养基用于hFOB1.19细胞的培养,并采用MTT法检测细胞的增殖效果,流式细胞术检测细胞的生长周期,Western blot检测其周期蛋白CyclinA2的表达。结果以加入不同用量的MDA-MB-231、MCF-7条件培养基培养hFOB1.19细胞和以60%各细胞条件培养基培养hFOB1.19细胞不同时间后,hFOB1.19细胞的增殖均受到抑制,且呈剂量和作用时间依赖性;两者明显影响hFOB1.19细胞的S期,其周期蛋白Cyclin A2的表达在低浓度出现上调,但随浓度的增加而表达下降,而正常对照MCF-10条件培养基对hFOB1.19细胞的增殖影响无显著差异。结论 MDA-MB-231、MCF-7条件培养基对hFOB1.19细胞的增殖具有抑制作用,可能与其影响hFOB1.19细胞周期的S期和Cyclin A2的表达有关。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 细胞条件培养基 成骨细胞 增殖
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颗粒蛋白前体(PGRN)敲除小鼠的巨噬细胞抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移的分子机制
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作者 岳妹君 甘德露 +6 位作者 钱胡孙 周婷 张典 石鬻 方文丽 姚梦俐 陈婷梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期769-775,共7页
目的探究颗粒蛋白前体基因敲除(PGRN-7-)小鼠的巨噬细胞与乳腺癌细胞侵袭和迁移的关系及机制。方法选择野生型和PGRN^-/-小鼠巨噬细胞条件培养基培养乳腺癌细胞,采用Transwell™实验、划痕实验检测癌细胞的侵袭、迁移能力,Western blot... 目的探究颗粒蛋白前体基因敲除(PGRN-7-)小鼠的巨噬细胞与乳腺癌细胞侵袭和迁移的关系及机制。方法选择野生型和PGRN^-/-小鼠巨噬细胞条件培养基培养乳腺癌细胞,采用Transwell™实验、划痕实验检测癌细胞的侵袭、迁移能力,Western blot法检测上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。通过细胞因子芯片、实时定量PCR和ELISA检测野生型和PGRN^-/-小鼠巨噬细胞分泌的细胞因子差异;用筛选出的差异表达细胞因子白细胞介素6(IL-6)处理乳腺癌细胞,采用上述方法检测对癌细胞侵袭迁移能力的影响并采用Western blot法检测核因子kB(NF-kB)信号通路和Janus激酶/信号转导子和转录激活子3(JAK/STAT3)信号通路在其中的作用。结果PGRN%小鼠的巨噬细胞NF-kB信号通路被阻断,减少IL-6分泌,抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移;IL-6激活JAK/STAT3信号通路促进乳腺癌细胞侵袭迁移。结论PGRN^-/-小鼠的巨噬细胞NF-kB信号通路被阻断,下调ILE表达,进而抑制JAK/STA13信号通路的激活,抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 颗粒蛋白前体(PGRN) 细胞介素6(IL-6) 巨噬细胞 乳腺癌细胞
乳腺癌细胞中microRNA的表达与乳腺癌化疗耐药的相关性研究 预览
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作者 丁思勤 田芬莉 +1 位作者 王建榜 汪振亮 《江西医药》 CAS 2019年第8期909-911,共3页
目的研究乳腺癌细胞中microRNA(miRNA)的表达与乳腺癌阿霉素化疗耐药性产生的相关性。方法选择人乳腺癌细胞株(MCF7)及人乳腺癌阿霉素耐药细胞株(MCF7/ADM)进行培养,提取其中的微小核糖核酸(microRNA)分子,运用RealTimeQ-PCR技术定量分... 目的研究乳腺癌细胞中microRNA(miRNA)的表达与乳腺癌阿霉素化疗耐药性产生的相关性。方法选择人乳腺癌细胞株(MCF7)及人乳腺癌阿霉素耐药细胞株(MCF7/ADM)进行培养,提取其中的微小核糖核酸(microRNA)分子,运用RealTimeQ-PCR技术定量分析miR-100的表达水平,比较两种细胞中的miR-100表达情况。结果MCF7细胞株中的miR-100表达量低于MCF7/ADM细胞株中的miR-100表达量,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-100的异常表达与乳腺癌化疗耐药性的发生存在正相关,本研究发现可以为乳腺癌的早期诊治与预后的生物标志物研究提供数据依据。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 MICRORNA 乳腺癌 化疗 耐药
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靶向调控TOX3基因对乳腺癌细胞增殖及周期的影响 预览
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作者 韩翠翠 刘立琨 +2 位作者 王玉春 杨莹 马立威 《医学研究杂志》 2019年第10期135-139,96共6页
目的研究TOX3基因对人乳腺癌细胞增殖能力及细胞周期的影响。方法采用Western blot法检测已构建的稳定沉默TOX3的ZR-75-1细胞和稳定过表达TOX3的MDA-MB-231细胞中TOX3蛋白的表达。MTT法检测过表达和干扰TOX3基因对乳腺癌细胞增殖活性的... 目的研究TOX3基因对人乳腺癌细胞增殖能力及细胞周期的影响。方法采用Western blot法检测已构建的稳定沉默TOX3的ZR-75-1细胞和稳定过表达TOX3的MDA-MB-231细胞中TOX3蛋白的表达。MTT法检测过表达和干扰TOX3基因对乳腺癌细胞增殖活性的影响。平板单克隆实验检测过表达TOX3对MDA-MB-231细胞单克隆形成能力的影响,流式细胞术检测沉默或过表达TOX3后ZR-75-1和MDA-MB-231细胞周期的变化。结果与阴性对照组比较,稳定沉默TOX3的乳腺癌ZR-75-1细胞TOX3蛋白表达明显下降,过表达TOX3的MDA-MB-231细胞TOX3蛋白表达明显上调。过表达TOX3后,MDA-MB-231细胞的增殖活性明显增强,单克隆形成能力增强,G 0/G 1期细胞所占比例明显减少,G 2/M期细胞比例增多。干扰TOX3后,ZR-75-1细胞增殖活性下降,G 0/G 1期细胞比例增加,G 2/M期细胞比例减少。结论靶向调控TOX3基因的表达可改变乳腺癌细胞增殖和单克隆形成能力,影响乳腺癌细胞周期。 展开更多
关键词 TOX基因 乳腺癌细胞 增殖 细胞周期
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氯氧喹对不同类型乳腺癌细胞系的抑制作用及机制 预览 被引量:1
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作者 孙燕 冯琳迤 +4 位作者 雷蕾 黄平 叶魏武 曾玲晖 王晓稼 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期347-353,共7页
目的探究氯氧喹对不同类型乳腺癌细胞增殖、凋亡及细胞周期阻滞的作用及其可能机制。方法采用不同浓度氯氧喹处理乳腺癌Bcap37、MDA-MB-231和MDA-MB-453细胞。MTT法检测细胞活力,AnnexinV-/PI双染法采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周... 目的探究氯氧喹对不同类型乳腺癌细胞增殖、凋亡及细胞周期阻滞的作用及其可能机制。方法采用不同浓度氯氧喹处理乳腺癌Bcap37、MDA-MB-231和MDA-MB-453细胞。MTT法检测细胞活力,AnnexinV-/PI双染法采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,蛋白印迹法检测凋亡和细胞周期相关蛋白水平的变化。结果氯氧喹在50mg·L^-1以上对3种细胞系的生长均有明显抑制作用(P<0.05),并呈剂量依赖性,且200mg·L^-1氯氧喹与40mg·L^-1紫杉醇作用相近。氯氧喹可明显诱导3种细胞凋亡(P<0.05),且对MDA-MB-231细胞凋亡的作用尤其明显(P<0.01),并与凋亡相关蛋白cleaved-PARP、cleaved-caspase的表达相一致。氯氧喹还可明显诱导3种细胞G2/M期的数目增加(P<0.05),但在Bcap37和MDA-MB-453细胞更明显,并伴随p21蛋白下调和CDC2蛋白的上调。结论氯氧喹能有效抑制乳腺癌细胞的增殖活力,在MDA-MB-231细胞以促进凋亡为主,而在Bcap37和MDA-MB-453细胞以细胞周期阻滞为主。 展开更多
关键词 氯氧喹 乳腺癌细胞 增殖 凋亡 细胞周期阻滞 化疗
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“红颜杀手”——揭秘乳腺癌背后的故事 预览
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作者 骆成玉 潘战和 侯叔霞(整理) 《家庭医药:就医选药》 2019年第9期50-53,共4页
乳腺并不是维持人体生命活动的重要器官,原位乳腺癌并不致命,但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性,细胞之间连接松散,容易脱落。癌细胞一旦脱落,游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身,形成转移,严重威胁患者的生命与健康。乳腺癌... 乳腺并不是维持人体生命活动的重要器官,原位乳腺癌并不致命,但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性,细胞之间连接松散,容易脱落。癌细胞一旦脱落,游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身,形成转移,严重威胁患者的生命与健康。乳腺癌目前是我国女性发病率最高的癌症,本期名医谈病,我们就来聊聊。 展开更多
关键词 女性发病率 乳腺癌细胞 淋巴液 生命与健康 正常细胞
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miRNA-628-3p调控乳腺癌细胞增殖的作用及机制研究 预览
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作者 董文珠 陈杭萍 +3 位作者 陈赛贞 夏哲林 章欣 姚立 《重庆医学》 CAS 2019年第18期3082-3086,共5页
目的探讨miRNA-628-3p对乳腺癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法以反转录PCR(RT-PCR)方法检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231)中miR-628-3p的表达水平,检测miRNA-628-3p在MCF-7细胞中的转染效率;噻唑蓝(... 目的探讨miRNA-628-3p对乳腺癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法以反转录PCR(RT-PCR)方法检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231)中miR-628-3p的表达水平,检测miRNA-628-3p在MCF-7细胞中的转染效率;噻唑蓝(MTT)法检测miRNA-628-3p对MCF-7细胞增殖的影响;生物信息学对miRNA-628-3p进行靶基因预测,并通过荧光素酶报告基因实验验证,Westernblot检测过表达miRNA-628-3p对靶基因多聚腺苷酸结合蛋白互作蛋白1(PAIP1)蛋白表达水平的影响;MTT法检测抑制靶基因PAIP1表达后对MCF-7细胞增殖的影响。结果乳腺癌细胞中miRNA-628-3p的表达水平明显低于人正常乳腺上皮细胞;与空载体阴性对照组(NC)比较,miRNA-628-3p过表达组细胞增殖能力明显降低;生物信息学分析表明PAIP1是miRNA-628-3p直接作用的靶基因,荧光素酶报告基因验证了该结果,并且过表达miRNA-628-3p可以明显下调PAIP1的蛋白表达水平;抑制靶基因PAIP1的表达能抑制MCF-7细胞的增殖。结论miRNA-628-3p在乳腺癌细胞中低表达,可以通过靶向调控PAIP1的表达进而抑制乳腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 miRNA-628-3p 乳腺癌细胞 细胞增殖 机制
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远离“红颜杀手”--乳腺癌 预览
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作者 本刊编辑部 何申申 《健康人生》 2019年第11期6-7,共2页
乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。虽然生长在乳房局部的乳腺癌并不直接致命,但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性,容易脱落,一旦脱落,游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身,形成转移,危及生命。本期杂志,特别邀请了浙江... 乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。虽然生长在乳房局部的乳腺癌并不直接致命,但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性,容易脱落,一旦脱落,游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身,形成转移,危及生命。本期杂志,特别邀请了浙江大学医学院附属妇产科医院外科副主任龙景培及其专家团队,为我们详细解答乳腺癌方面的相关问题。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 浙江大学医学院附属妇产科医院 专家团队 外科副主任 腺上皮 淋巴液 恶性肿瘤 正常细胞
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肿瘤干细胞的分离及耐双氧水模型的建立
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作者 刘庆喜 陈洪冉 +2 位作者 李惠 张同存 马文建 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1433-1438,共6页
目的从MCF-7细胞(人乳腺癌细胞)中培养、分离肿瘤干细胞(cancer stem cells,CST),并研究其对氧化性应激的敏感性。方法将MCF-7细胞在无血清悬浮成球培养基中进行成球悬浮培养,倒置相差显微镜观察细胞形态变化(以MCF-7细胞培养液培养的MC... 目的从MCF-7细胞(人乳腺癌细胞)中培养、分离肿瘤干细胞(cancer stem cells,CST),并研究其对氧化性应激的敏感性。方法将MCF-7细胞在无血清悬浮成球培养基中进行成球悬浮培养,倒置相差显微镜观察细胞形态变化(以MCF-7细胞培养液培养的MCF-7细胞作为对照)。取直径达100μm的CST细胞球(实验组)以及融合度达70%的MCF-7细胞(对照组),采用免疫细胞化学染色法检测CST标志物CD133的表达;取直径达150μm的第3代肿瘤球细胞,采用流式细胞仪检测其CD133阳性率;取直径达150μm的第2代肿瘤球细胞(实验组)以及相应代数的MCF-7细胞(对照组),采用50μmol/L H2O2损伤DNA 120 min,采用免疫细胞化学染色方法检测其DNA损伤标志物γH2AX表达。结果倒置相差显微镜观察示,MCF-7细胞最初形态以单细胞贴壁状态生长,经无血清悬浮成球培养基培养后细胞聚集生长,最后形成CST细胞球;而经MCF-7细胞培养液培养的对照MCF-7细胞呈伸展状贴壁生长,不能成球悬浮生长。荧光显微镜观察示,对照组MCF-7细胞CD133为阴性表达,而实验组肿瘤球CD133为阳性表达。流式细胞仪检测示,CST中CD133呈阳性表达,阳性率为92%。倒置荧光显微镜观察示,实验组CST肿瘤球经H2O2损伤120 min后,其γH2AX表达较对照组MCF-7细胞明显降低。结论无血清悬浮成球培养基能够从MCF-7肿瘤细胞系培养出成球生长的CST细胞,此类细胞具有很强的抗氧化损伤作用。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 靶向 抗癌药 乳腺癌细胞
人乳腺癌原代细胞组织块培养方法的改良及其鉴定 预览
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作者 王敏 陆祥 +3 位作者 曾峰 檀军 侯泽宇 陈伟 《遵义医学院学报》 2019年第4期448-454,共7页
目的通过对人乳腺癌原代细胞组织块培养方法进行改良,建立一种快速高效可获得高纯度的人乳腺癌细胞原代培养方法,为乳腺癌深入研究提供实验基础。方法取经临床病理诊断确诊为乳腺导管原位癌患者的癌组织标本,所有样本随机分为改良组(全... 目的通过对人乳腺癌原代细胞组织块培养方法进行改良,建立一种快速高效可获得高纯度的人乳腺癌细胞原代培养方法,为乳腺癌深入研究提供实验基础。方法取经临床病理诊断确诊为乳腺导管原位癌患者的癌组织标本,所有样本随机分为改良组(全程正置培养瓶进行培养,原代细胞铺满瓶底50%左右,用延长酶消化时间差法一次性纯化原代细胞)和传统组(翻转培养瓶倒置孵箱1~2 h后,再正置培养瓶培养,原代细胞铺满瓶底80%~100%时,用反复酶消化时间差法纯化原代细胞)。在倒置显微镜下观察,比较两组原代细胞爬出时间、爬出数量和贴壁生长情况;细胞计数比较两组组织块培养7 d后获得贴壁细胞总数;免疫组化和流式细胞术鉴定、比较两组纯化后原代细胞的纯度;MTT法检测两组纯化培养48 h后贴壁细胞的活性。结果经改良组织块培养法2 d后,见大量细胞从组织块四周爬出,培养3 d后见爬出原代细胞贴壁生长,胞质展开,培养5 d后见细胞融合贴壁生长,铺满瓶底50%左右;而传统组织块培养法培养2 d后见少量细胞爬出,培养5 d才见少量细胞贴壁生长,培养10d后原代细胞方可铺满瓶底50%左右;人乳腺癌原代细胞培养7 d贴壁细胞总量,改良组为(9.88±0.20)×10^5个,传统组为(4.88±0.21)×10^5个;纯化后改良组细胞纯度为(99.13±0.06)%,传统组为(75.72±4.96)%;纯化培养48 h后贴壁原代细胞活性改良组为(0.86±0.03),传统组为(0.47±0.01),以上观察指标均明显高于传统组织块培养方法,有统计学意义(P<0.05)。获得的贴壁人乳腺癌原代细胞胞质展开,多呈扁平多边形,细胞体积较大,细胞核多位于细胞中央,相互衔接后呈典型的“铺路石”状,细胞结合紧密,生长分裂旺盛。结论本实验成功建立了一种高效快速获得高纯度的人原代乳腺癌细胞原代培养的方法,为进一步的实验研究奠定基础。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 原代培养技术 原代细胞纯化 鉴定
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鹿茸间充质干细胞条件培养基对乳腺癌细胞系4T1的作用 预览
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作者 孙胜楠 孙铭泽 +6 位作者 杨春 丁尚红 张琦 郭佳 刘莹 杨敏 彭英华 《特产研究》 2019年第4期6-10,共5页
本试验主要探讨了鹿茸间充质干细胞条件培养基对乳腺癌细胞4T1的作用。分离、培养、鉴定了鹿茸间充质干细胞,采用MTT法检测了鹿茸间充质干细胞条件培养基对4T1细胞的增殖活性的影响,并通过Western blot检测了对4T1细胞凋亡的影响。结果... 本试验主要探讨了鹿茸间充质干细胞条件培养基对乳腺癌细胞4T1的作用。分离、培养、鉴定了鹿茸间充质干细胞,采用MTT法检测了鹿茸间充质干细胞条件培养基对4T1细胞的增殖活性的影响,并通过Western blot检测了对4T1细胞凋亡的影响。结果显示,鹿茸间充质干细胞条件培养基可抑制4T1细胞的增殖,并呈浓度依赖性,并伴有4T1细胞内Cleaved-caspase 3蛋白表达上调以及Bcl-xl蛋白表达的下调。这一结果表明,鹿茸间充质干细胞条件培养基可抑制4T1细胞增殖,其机制与细胞内凋亡信号通路有关。 展开更多
关键词 鹿茸间充质干细胞 条件培养基 乳腺癌细胞 增殖 凋亡
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四逆汤联合Imatinib抑制乳腺癌耐药细胞生长的研究 预览
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作者 林巾雄 赵华军 刘伦铭 《浙江临床医学》 2019年第12期1625-1627,共3页
目的以中医温阳法代表方四逆汤和c-Abl抑制剂Imatinib为研究对象,研究两药联用对氟维司群耐药乳腺癌细胞生长的影响,为临床中西医结合治疗氟维司群耐药乳腺癌提供实验依据.方法采用MTT法测定耐药细胞T47D/Ful对Fulvestrant的敏感性,用We... 目的以中医温阳法代表方四逆汤和c-Abl抑制剂Imatinib为研究对象,研究两药联用对氟维司群耐药乳腺癌细胞生长的影响,为临床中西医结合治疗氟维司群耐药乳腺癌提供实验依据.方法采用MTT法测定耐药细胞T47D/Ful对Fulvestrant的敏感性,用Western Blot测定ER、PR及HER2蛋白表达;用MTT法及CompuSyn软件确定四逆汤与Imatinib联合用药的最佳剂量及联合指数;用Annexin V-FITC/7-AAD双染法检测细胞凋亡,Western Blot测定Bid、Bcl-xl及Bcl-2蛋白表达,从分子水平研究细胞凋亡机制.结果氟维司群耐药细胞T47D/Ful对Fulvestrant敏感性显著下降,且ER、PR及HER2均为阴性表达.四逆汤与Imatinib能协同抑制耐药细胞T47D/Ful的生长(P<0.01,CI=0.865).流式细胞术检测凋亡细胞结果表明,四逆汤联合Imatinib相较于单独用药能显著诱导氟维司群耐药乳腺癌细胞凋亡.四逆汤联合Imatinib能上调促凋亡蛋白Bid、下调抗凋亡蛋白Bcl-xl和Bcl-2.结论四逆汤联合Imatinib能协同抑制氟维司群耐药乳腺癌细胞的生长,其机制可能是通过上调促凋亡蛋白Bid、下调抗凋亡蛋白Bcl-xl和Bcl-2诱导耐药细胞凋亡. 展开更多
关键词 四逆汤 伊马替尼 乳腺癌细胞 细胞凋亡
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青梅精对乳腺癌、肝癌细胞增殖抑制率的研究 预览
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作者 梁多 刘智均 《食品与营养科学》 2019年第1期75-79,共5页
青梅是重要的山区特色水果,青梅精是一种传统的加工食品,据报道有杀菌、抑制肿瘤等作用。本文研究了青梅精对乳腺癌细胞MCF-7和肝癌细胞HepG2的抑制作用,结果显示:青梅精各剂量组都能不同程度的抑制乳腺癌细胞MCF-7和肝癌HepG2细胞的增... 青梅是重要的山区特色水果,青梅精是一种传统的加工食品,据报道有杀菌、抑制肿瘤等作用。本文研究了青梅精对乳腺癌细胞MCF-7和肝癌细胞HepG2的抑制作用,结果显示:青梅精各剂量组都能不同程度的抑制乳腺癌细胞MCF-7和肝癌HepG2细胞的增殖,且呈现明显剂量–效应关系。青梅精浓度5mg?mL?1对乳腺癌MCF-7细胞和肝癌HepG2细胞抑制率分别达82.18%和81.22%。 展开更多
关键词 青梅精 乳腺癌细胞 肝癌细胞
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沉默长链非编码PCAT-1对乳腺癌细胞阿霉素耐药性的影响
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作者 丁秋勤 李婉莹 +1 位作者 吴苑苑 高社干 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第6期1369-1371,共3页
目的探究沉默长链非编码RNA (lncRNA) PCAT-1对乳腺癌细胞阿霉素(ADM)耐药性的影响。方法 qRTPCR实验检测PCAT-1的mRNA表达水平;通过小RNA干扰技术下调MCF7细胞中PCAT-1的表达,CCK-8和MTT实验检测MCF7、MCF7/ADM细胞增殖的活性;TUNEL实... 目的探究沉默长链非编码RNA (lncRNA) PCAT-1对乳腺癌细胞阿霉素(ADM)耐药性的影响。方法 qRTPCR实验检测PCAT-1的mRNA表达水平;通过小RNA干扰技术下调MCF7细胞中PCAT-1的表达,CCK-8和MTT实验检测MCF7、MCF7/ADM细胞增殖的活性;TUNEL实验检测MCF7/ADM细胞凋亡。结果 PCAT-1在乳腺癌组织和MCF7细胞中的mRNA表达水平明显高于癌旁组织和人乳腺上皮细胞MCF10A。PCAT-1在MCF7/ADM细胞的mRNA表达水平明显高于MCF7细胞。沉默PCAT-1可以促进ADM对MCF7、MCF7/ADM细胞增殖的抑制作用。沉默PCAT-1能够增强ADM诱导的MCF7/ADM细胞的凋亡。此外,沉默PCAT-1可以促进Bax的表达,抑制Bcl-2和PCNA的表达。结论沉默PCAT-1增强ADM对乳腺癌细胞的毒性作用。 展开更多
关键词 PCAT-1 阿霉素 乳腺癌细胞 增殖 凋亡
鹿角帽水溶性提取物双相调节乳腺癌细胞增殖 预览
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作者 邹伟 张若琳 +3 位作者 孙佳 李洪艳 张叶军 张炳强 《辽宁师范大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第2期223-228,共6页
初步探讨SAB抑制乳腺癌增殖的剂量特征和机制.采用MTT法检测不同浓度SAB对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,进一步利用RT-PCR、Western blot等方法观察细胞周期蛋白、细胞凋亡相关因子、ER-α36、ER-α66等表达的变化.结果显示,低剂量(0.25... 初步探讨SAB抑制乳腺癌增殖的剂量特征和机制.采用MTT法检测不同浓度SAB对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,进一步利用RT-PCR、Western blot等方法观察细胞周期蛋白、细胞凋亡相关因子、ER-α36、ER-α66等表达的变化.结果显示,低剂量(0.25mg/mL)的SAB促进MCF-7细胞的增殖,高剂量的SAB才能抑制MCF-7细胞的增殖,促进细胞凋亡,并且将细胞周期阻滞在S期.提示SAB通过影响不同ER亚型的表达介导不同的ER信号通路,从而起到对乳腺癌细胞的双相调节作用. 展开更多
关键词 鹿角帽 乳腺癌细胞 雌激素受体
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光甘草定和槲皮素对乳腺癌细胞能量代谢的调控作用
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作者 李璐佳 李国文 谢燕 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期3786-3791,共6页
据报道,能量代谢是肿瘤细胞的核心特征。该研究旨在探讨2种中药黄酮成分光甘草定、槲皮素对乳腺癌细胞能量供应、糖酵解的调控作用,为开发具有调控肿瘤能量代谢功能的抗肿瘤中药提供借鉴。该研究以三阴性乳腺癌肿瘤细胞(MDA-MB-231)为... 据报道,能量代谢是肿瘤细胞的核心特征。该研究旨在探讨2种中药黄酮成分光甘草定、槲皮素对乳腺癌细胞能量供应、糖酵解的调控作用,为开发具有调控肿瘤能量代谢功能的抗肿瘤中药提供借鉴。该研究以三阴性乳腺癌肿瘤细胞(MDA-MB-231)为研究对象,基于能量代谢各途径的特点,选取葡萄糖摄取、葡萄糖转运子1(GLUT1)的蛋白表达、细胞内三磷酸腺苷(ATP)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活力和乳酸(LD)浓度等5个潜在靶点来考察光甘草定和槲皮素对乳腺癌肿瘤细胞能量代谢的调控作用,并初步探讨其相关机制。结果显示,槲皮素和光甘草定均可下调GLUT1的蛋白表达,减少乳腺癌细胞对葡萄糖的摄取。其中槲皮素对LDH活力和LD浓度无明显影响,未影响其糖酵解过程,但可增加乳腺癌细胞内ATP水平;而光甘草定可减弱乳腺癌细胞中LDH活力,降低其LD浓度,从而抑制乳腺癌细胞的糖酵解过程。因此,槲皮素和光甘草定对乳腺癌细胞的能量代谢具有调控作用,可以作为潜在的抗癌剂或抗癌辅助剂。 展开更多
关键词 能量代谢 糖酵解 葡萄糖摄取 光甘草定 槲皮素 乳腺癌细胞
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