期刊文献+
共找到135篇文章
< 1 2 7 >
每页显示 20 50 100
高表达衰老标记蛋白30对高钙诱导人晶状体上皮细胞株SRA01/04氧化应激的影响 预览
1
作者 李松蔓 陈曦 +4 位作者 韩子豪 THU THU WIN AINT 衷昕 唐东永 梁皓 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期54-61,共8页
【目的】探讨在高钙诱导细胞氧化应激下,高表达衰老标记蛋白30(SMP30)对人晶状体上皮细胞(HLEC)株SRA01/04增殖活力及抗氧化能力的影响。【方法】实验分3组:SMP30高表达组(OE,实验组)、NCOE组(阴性对照组)及SRA01/04组(空白对照组)。用O... 【目的】探讨在高钙诱导细胞氧化应激下,高表达衰老标记蛋白30(SMP30)对人晶状体上皮细胞(HLEC)株SRA01/04增殖活力及抗氧化能力的影响。【方法】实验分3组:SMP30高表达组(OE,实验组)、NCOE组(阴性对照组)及SRA01/04组(空白对照组)。用OE及NCOE慢病毒载体分别转染SRA01/04细胞。15mmol/LCaCl2处理细胞24h建立高钙诱导模型。BrdU法检测细胞增殖、超氧化物歧化酶(SOD)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)/总谷胱甘肽(T-GSH)法检测细胞氧化指标。【结果】荧光显微镜下可见各组转染细胞有大量绿色荧光蛋白(GFP)表达,转染效率接近80%,提示SMP30高表达SRA01/04细胞模型构建成功。在高钙状态下,OE组细胞相对增殖活力(3.89±0.20)和SOD活力(U/mg,47.5±4.3)均高于NCOE组(2.82±0.34、30.6±4.2)及SRA01/04组(2.96±0.25、26.8±1.5),OE组GSSG/T-GSH比值(2.36±0.51)低于NCOE组(16.36±2.48)及SRA01/04组(20.12±2.54),上述差异均有统计学意义(n=3,P<0.05),NCOE组与SRA01/04组相比差异均无统计学意义(n=3,P >0.05)。【结论】高表达SMP30增加SRA01/04(HLEC)细胞增殖活力、SOD活力及下降GSSG/T-GSH水平,提示SMP30在一定程度上可缓解高钙诱导细胞氧化损伤的进程,可能对HLEC有保护作用。 展开更多
关键词 衰老标记蛋白30 晶状体上皮细胞 高钙 氧化应激 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽 细胞增殖
在线阅读 下载PDF
BHMT对同型半胱氨酸诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用 预览
2
作者 周海燕 薛雨顺 +2 位作者 严宏 李迪 王新川 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期1652-1656,共5页
目的:观察甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)在同型半胱氨酸(Hcy)环境下对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用。方法:构建BHMT基因过表达慢病毒载体,将体外培养的HLEC随机分为3组:正常组:正常培养的HLEC;对照组:感染了空载体的HLEC-B3,B... 目的:观察甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)在同型半胱氨酸(Hcy)环境下对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用。方法:构建BHMT基因过表达慢病毒载体,将体外培养的HLEC随机分为3组:正常组:正常培养的HLEC;对照组:感染了空载体的HLEC-B3,BHMT过表达组(OE):感染了过表达BHMT基因载体的HLEC-B3,均培养于10%FBS(胎牛血清)培养基+5mmol/L Hcy培养液中。应用EdU(5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷)试剂盒检测细胞的增殖能力,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量,可见分光光度计测算谷胱甘肽(GSH)活性,Western blotting检测内质网应激相关蛋白(GPR78,Nrf2)及凋亡相关酶Caspase-12的表达。结果:BHMT过表达组较对照组细胞增殖能力增长约30.0%(P<0.05)。ROS检测显示,正常组、对照组、过表达组荧光强度分别为(89.2043±0.3511)%、(91.4502±0.0606)%、(49.5625±0.4502)%,过表达组与正常组有差异(P<0.05);GSH活性检测显示:相比于正常组与对照组,BHMT高表达组GSH活性明显上升(P<0.05);Western blotting结果显示:GRP78的相对表达量在正常组及对照组中明显高于过表达组,Nrf2的相对表达量在正常组与对照组中明显低于过表达组。凋亡相关酶Caspase-12的相对表达量在过表达组中明显低于对照组。结论:BHMT可以抑制Hcy对HLEC的氧化损伤作用,降低ROS水平,升高GSH活性,减轻内质网应激反应,抑制细胞凋亡。BHMT对Hcy诱导的HLEC氧化损伤有重要的保护作用。 展开更多
关键词 甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶 同型半胱氨酸 晶状体上皮细胞 氧化损伤 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
核心蛋白多糖对高糖条件下人晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用及其机制 预览
3
作者 谢丹丹 杜珊珊 +2 位作者 祁颖 邵敬芝 张凤妍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期252-256,共5页
目的探讨核心蛋白多糖(DCN)对高糖条件下人晶状体上皮细胞(LECs)凋亡及氧化应激水平的影响。方法体外培养人LECs(HLE-B3),采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测不同浓度DCN对HLE-B3细胞存活力的影响,筛选出合适的DCN作用浓度。取对数期细胞... 目的探讨核心蛋白多糖(DCN)对高糖条件下人晶状体上皮细胞(LECs)凋亡及氧化应激水平的影响。方法体外培养人LECs(HLE-B3),采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测不同浓度DCN对HLE-B3细胞存活力的影响,筛选出合适的DCN作用浓度。取对数期细胞分为正常对照组、DCN单纯处理组、高糖组和DCN+高糖组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞内活性氧簇(ROS)表达水平,采用酶标仪检测细胞总超氧化物歧化酶(SOD)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值,采用Westernblot法检测凋亡蛋白bax和bcl-2的表达。结果对数生长期HLE-B3细胞呈梭形,大小均匀,细胞核居中,细胞排列整齐。CCK-8法检测结果显示,在0、10、50、100和200nmol/LDCN处理HLE-B3细胞后24h,各组HLE-B3的细胞存活率均大于90%,差异无统计学意义(P>0.05)。细胞培育48h,DCN单纯处理对HLE-B3细胞的凋亡率无影响,差异无统计学意义(P>0.05);高糖组细胞凋亡率明显高于正常对照组,DCN+高糖组细胞凋亡率明显低于高糖组,差异均有统计学意义(均P=0.000)。高糖组细胞内ROS平均荧光强度高于正常对照组,DCN单纯处理组ROS平均荧光强度较高糖组降低,差异均有统计学意义(均P=0.000)。高糖组总SOD酶活性比正常对照组和DCN单纯处理组低,差异均有统计学意义(P=0.007、0.004)。高糖组GSH/GSSG比值较正常对照组和DCN单纯处理组低,差异均有统计学意义(均P=0.000)。结论DCN可抑制高糖条件下HLE-B3的凋亡和氧化应激水平,为糖尿病性白内障的防治提供了依据。 展开更多
关键词 核心蛋白多糖 晶状体上皮细胞 高糖 氧化应激 细胞凋亡 抑制 机制
在线阅读 下载PDF
急性氧化应激初期人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30抗氧化作用的研究 预览
4
作者 韩子豪 李松蔓 +4 位作者 李艳玮 陈曦 张鸿侃 蒋林志 梁皓 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第2期109-112,共4页
目的初步探讨衰老标记蛋白30(senescence marker protein30,SMP30)的增加对处于急性氧化应激初期的人晶状体上皮细胞株SRA01/04的保护作用。方法将处于对数生长期的SRA01/04接种于96孔板,分别使用含150μmol·L^-1、200μmol·L... 目的初步探讨衰老标记蛋白30(senescence marker protein30,SMP30)的增加对处于急性氧化应激初期的人晶状体上皮细胞株SRA01/04的保护作用。方法将处于对数生长期的SRA01/04接种于96孔板,分别使用含150μmol·L^-1、200μmol·L^-1、250μmol·L^-1、300μmol·L^-1、350μmol·L^-1、400μmol·L^-1、450μmol·L^-1 H2O2的培养基作用2h,CCK-8法选取最佳H2O2浓度;使用慢病毒对SRA01/04进行转染建立SMP30高表达模型,实验分3组:SMP30过表达(over expression,OE)组、SMP30过表达相应空载(negative control over expression,NCOE)组及对照(control,CON)组。通过超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)定量检测试剂盒、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)/总谷胱甘肽(total glutathione,T-GSH)测定试剂盒测量细胞内SOD活力及GSSG/T-GSH比值的变化。结果经分析,建立模型的最佳H2O2浓度为300μmol·L^-1。在此浓度下,与CON组(5.783±0.192)U·mg^-1及NCOE组(5.837±0.182)U·mg^-1相比,OE组细胞内SOD活力升高,为(10.251±0.110)U·mg^-1;与CON组(29.943±0.241)及NCOE组(30.037±0.433)相比,OE组细胞内GSSG/T-GSH比值(20.990±0.342)降低;差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论当SRA01/04处于H2O2诱导的急性氧化应激初期时,SMP30表达的增加可通过增加SOD活力和降低GSSG/T-GSH比值,加强SRA01/04的抗氧化能力。 展开更多
关键词 急性氧化应激 晶状体上皮细胞 衰老标记蛋白30 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽
在线阅读 下载PDF
miR-29a抑制H2O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤 预览
5
作者 李海燕 郭琳 +2 位作者 张倩 唐莉 马波 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第3期233-237,共5页
目的探究miR-29a在H2O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤中的作用和机制。方法使用不同浓度(0 μmol·L^-1 、100 μmol·L^-1 、200 μmol·L^-1 、300 μmol·L^-1 、400 μmol·L^-1 )的H2O2处理人晶状体上皮细胞... 目的探究miR-29a在H2O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤中的作用和机制。方法使用不同浓度(0 μmol·L^-1 、100 μmol·L^-1 、200 μmol·L^-1 、300 μmol·L^-1 、400 μmol·L^-1 )的H2O2处理人晶状体上皮细胞HLE-B3,以确定后续实验中H2O2使用的浓度。将HLE-B3细胞随机分成4组:对照组、H2O2组、H2O2+模拟物对照组和H2O2+miR-29a模拟物组,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量,Real-time PCR检测miR-29a和Bcl2修饰因子(Bcl2 modifying factor,BMF)、Bcl2拮抗/杀伤因子1(Bcl2-antagonist/killer 1,BAK1) mRNA表达,Western blotting检测BMF和BAK1蛋白表达。结果 HLE-B3细胞活力随着H2O2浓度的增加而降低,呈现剂量依赖性,后续实验H2O2浓度选择200 μmol·L^-1 。与对照组相比,H2O2组中miR-29a的表达(0.56±0.12)下调,细胞活力[(59.67±10.09)%]和SOD含量[(52.97±6.64)U·mL^-1 ]降低,细胞凋亡率[(40.30±4.76)%]和ROS水平[(299.52±43.95)%]增加,BMF和BAK1 mRNA和蛋白表达均上调,差异均有统计学意义(均为 P <0.05)。与H2O2组相比,H2O2+miR-29a模拟物组中miR-29a的表达(4.49±0.55)上调,细胞活力[(92.83±8.09)%]和SOD含量[(84.03±6.31)U·mL^-1 ]增加,细胞凋亡率[(18.74±2.48)%]和ROS水平[(143.13±21.32)%]降低,BMF和BAK1 mRNA和蛋白表达均下调,差异均有统计学意义(均为 P <0.05);与H2O2组相比,H2O2+模拟物对照组上述指标变化均不大,差异均无统计学意义(均为 P > 0.05)。结论上调miR-29a可促进H2O2诱导的人晶状体上皮细胞的细胞增殖、抑制细胞凋亡、减少氧化损伤,这些作用可能与BMF和BAK1的表达下调相关。 展开更多
关键词 miR-29a H2O2 晶状体上皮细胞 氧化损伤
在线阅读 下载PDF
人晶状体上皮细胞BHMT基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定 预览
6
作者 周海燕 薛雨顺 +1 位作者 王新川 高宁宁 《陕西医学杂志》 CAS 2019年第8期963-967,共5页
目的:构建甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)基因过表达慢病毒载体,并检测其在人晶状体上皮细胞中的表达效果。方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增制备目的基因片段,构建BHMT慢病毒过表达载体,转染至293T细胞。运用免疫荧光法行病毒滴度检... 目的:构建甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)基因过表达慢病毒载体,并检测其在人晶状体上皮细胞中的表达效果。方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增制备目的基因片段,构建BHMT慢病毒过表达载体,转染至293T细胞。运用免疫荧光法行病毒滴度检测,并利用荧光显微镜观察细胞中绿色荧光蛋白的表达,运用RT-PCR、Western blot检测鉴定BHMT mRNA蛋白的表达水平。将构建成功的慢病毒载体BHMT-GV358感染人晶状体上皮细胞,观察目的基因表达。结果:重组慢病毒转染293T细胞后可观察到荧光,在稳定转染的细胞中BHMT及蛋白的表达水平较未转染细胞显著增高(P<0.05),体外转染人晶状体上皮细胞,荧光显微镜下可见BHMT表达。结论:成功构建过表达BHMT的慢病毒载体,并有效感染人晶状体上皮细胞,为进一步研究BHMT在白内障发生发展中的作用提供生物学基础。 展开更多
关键词 慢病毒载 晶状体上皮细胞 甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶 过表达 构建 鉴定
在线阅读 免费下载
Krüppel样因子6对于TGF-β1诱导的晶状体上皮细胞纤维化的调控作用研究 预览
7
作者 高美子 黄亮瑜 +2 位作者 东莉洁 杨光 田芳 《中国中医眼科杂志》 2018年第1期4-11,共8页
目的探讨Krüppel样因子6(KLF6)高表达对于转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人晶状体上皮细胞(HLECs)纤维化的促进作用。方法利用脂质体转染的方法将已成功构建的真核表达质粒pEGFP-C2-KLF6及pSilencer-KLF6转染到HLECs中,经... 目的探讨Krüppel样因子6(KLF6)高表达对于转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人晶状体上皮细胞(HLECs)纤维化的促进作用。方法利用脂质体转染的方法将已成功构建的真核表达质粒pEGFP-C2-KLF6及pSilencer-KLF6转染到HLECs中,经实时定量PCR反应(q-PCR)与反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞中KLF6蛋白的表达水平,以及上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达水平。经Transwell细胞迁移实验观察细胞迁移情况。结果 pEGFP-C2-KLF6转染72 h后可有效上调HLECs中KLF6的表达水平,pSilencer-KLF6转染72 h后可有效下调HLECs中KLF6的表达水平(P〈0.05),从而为后续实验奠定基础;与对照组相比较,KLF6高表达组细胞中E-cadherin表达水平显著下降,Vimentin表达水平显著增高,细胞迁移能力升高(P〈0.05);在0.5 ng/ml TGF-β1刺激72h后,随KLF6表达量的增加,E-cadherin表达水平进一步降低,而Vimentin表达水平进一步增高,细胞迁移能力进一步升高(P〈0.05)。结论高表达的KLF6通过调控E-cadherin和Vimentin的表达水平,促进了TGF-β1所诱导的人晶状体上皮细胞纤维化过程,KLF6基因表达与体外基础条件下的上皮-间充质转化(EMT)相关。通过生物学手段特异性下调KLF6的表达可在一定程度上发挥对晶状体上皮细胞的保护作用。 展开更多
关键词 Krüppel样因子6 晶状体上皮细胞 上皮-间充质转化 转化生长因子-β1 晶状体后囊膜混浊
在线阅读 下载PDF
TGF-β_2对人晶状体上皮细胞SPARC表达的影响 预览
8
作者 郭瑞 《现代医院》 2018年第4期557-560,共4页
目的研究TGF-β2对人晶状体上皮细胞酸性富含胱氨酸分泌型蛋白(SPARC)表达的影响,以期为白内障的发病机制提供确切的理论依据。方法用终浓度为10 ng/ml的TGF-β2培养HLECs-B3细胞,连续培养0h、6 h、16 h、24 h。0 h细胞为对照组,6 h、... 目的研究TGF-β2对人晶状体上皮细胞酸性富含胱氨酸分泌型蛋白(SPARC)表达的影响,以期为白内障的发病机制提供确切的理论依据。方法用终浓度为10 ng/ml的TGF-β2培养HLECs-B3细胞,连续培养0h、6 h、16 h、24 h。0 h细胞为对照组,6 h、16 h和24 h细胞为实验组。细胞免疫荧光法检测SPARC表达水平变化,Western blotting检测SPARC表达量的变化。结果细胞免疫荧光法检测结果显示,随着TGF-β2培养细胞时间的延长,SPARC表达的荧光逐渐增多增强,各实验组细胞SPARC表达的荧光均较对照组增多增强。Western blot法检测结果显示,随着TGF-β2培养细胞时间的延长,SPARC表达量逐渐增加,各实验组细胞SPARC表达量均较对照组明显增加,各实验组与对照组SPARC表达量的差异均具有统计学意义(P〈0.05)。结论 TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞SPARC表达增加。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 TGF-Β2 SPARC
在线阅读 下载PDF
雷帕霉素对高糖诱导人晶状体上皮细胞氧化应激的保护作用 预览 被引量:1
9
作者 齐鹏 孙丹宇 +1 位作者 包赫 姜仕先 《眼科新进展》 北大核心 2018年第3期235-238,共4页
目的探讨雷帕霉素对高糖诱导的人晶状体上皮细胞(humanlensepithelialcells,HLECs)氧化应激的影响。方法建立高糖诱导的HLECs氧化损伤模型,用不同浓度(10nmol·L-1、100nmol·L-1)雷帕霉素干预,CCK8比色法检测细胞存活率,倒置... 目的探讨雷帕霉素对高糖诱导的人晶状体上皮细胞(humanlensepithelialcells,HLECs)氧化应激的影响。方法建立高糖诱导的HLECs氧化损伤模型,用不同浓度(10nmol·L-1、100nmol·L-1)雷帕霉素干预,CCK8比色法检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态并拍照,H2DCFDA检测细胞内活性氧水平,WesternBlotting检测各组凋亡相关蛋白Bcl2及Bax的表达情况。结果CCK8检测结果显示,用10nmol·L-1、100nmol·L-1雷帕霉素处理后,HLECs存活率分别提高到6286%±3.45%和7747%±4.21%,与高糖组(42.32%±3.10%)比较差异均有统计学意义(均为P<0.05);H2DCFDA荧光探针染色结果显示,雷帕霉素处理后HLECs内活性氧生成量下降,氧化损伤细胞减少;此外,雷帕霉素可以抑制高糖诱导的HLECs内凋亡蛋白Bax、Bcl2的表达,抑制效应与剂量正相关。结论雷帕霉素可以抑制高糖诱导的HLECs氧化损伤及凋亡的发生,对糖尿病性白内障具有预防作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 高糖 晶状体上皮细胞 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
葡萄籽原花青素调节MAPK对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞的保护作用 被引量:1
10
作者 张华 冯媛 +1 位作者 席玉慧 贾智艳 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2018年第6期521-524,共4页
目的探讨葡萄籽原花青素对H2O2导致的人晶状体上皮细胞损伤的保护作用的机制。方法对人晶状体上皮细胞进行培养,分别加入设计浓度的原花青素培养液,经过相应的培养时间后,再与含有不同浓度过氧化氢的培养液共同作用。流式细胞仪检测葡... 目的探讨葡萄籽原花青素对H2O2导致的人晶状体上皮细胞损伤的保护作用的机制。方法对人晶状体上皮细胞进行培养,分别加入设计浓度的原花青素培养液,经过相应的培养时间后,再与含有不同浓度过氧化氢的培养液共同作用。流式细胞仪检测葡萄籽原花青素对细胞内活性氧的影响。用Western blot方法检测各组细胞中p38,p-p38,JNK,p-JNK蛋白的变化。结果在体外HLE-B3细胞培养状态下,葡萄籽原花青素能有效地降低细胞内活性氧水平。蛋白测定表明,p-p38,p-JNK蛋白表达下降。结论葡萄籽原花青素能够有效抑制p-p38,p-JNK蛋白表达,阻断了MAPK细胞信号传导通路,减少氧化氢诱导的氧化损伤的发生,从而对人晶状体上皮细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 原花青素 晶状体上皮细胞 氧自由基 细胞信号传导 白内障
miR-126对人晶状体上皮细胞凋亡的影响 预览 被引量:1
11
作者 汪静 《中国老年学杂志》 北大核心 2018年第8期1970-1972,共3页
目的探讨miR-126表达水平对人晶状体上皮细胞系HLEB3凋亡的影响及作用机制。方法使用H2O2构建HLEB3体外凋亡模型,qRT-PCR检测miR-126水平变化;使用脂质体2000分别将miR-126模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)以及二者相应的阴性对... 目的探讨miR-126表达水平对人晶状体上皮细胞系HLEB3凋亡的影响及作用机制。方法使用H2O2构建HLEB3体外凋亡模型,qRT-PCR检测miR-126水平变化;使用脂质体2000分别将miR-126模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)以及二者相应的阴性对照转染到HLEB3中,分别上调、下调细胞中miR-126表达,转染48h后qRT—PCR验证转染效率,流式细胞仪检测各组HLEB3凋亡水平;通过靶基因预测软件预测miR-126可能靶向调控KLF6基因的表达,检测各组HLEB3中KLF6mRNA和蛋白表达水平。结果HLEB3凋亡模型中miR-126相对表达量明显高于正常HLEB3,差异有统计学意义(P〈0.01)。模拟物组HLEB3凋亡率明显低于模拟物阴性对照组;抑制物组HLEB3凋亡率明显高于抑制物阴性对照组;差异均有统计学意义(均P〈0.05)。模拟物组HLEB3中KLF6mRNA相对表达量明显低于模拟物阴性对照组,抑制物组KLF6mRNA相对表达量明显高于抑制物阴性对照组,差异均有统计学意义(均P〈0.05);模拟物组HLEB3中KLF6蛋白相对表达量明显低于模拟物阴性对照组,抑制物组KLF6蛋白相对表达量明显高于抑制物阴性对照组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。结论miR-126在HLEB3凋亡模型中表达上调,miR-126可通过调控KLF6基因表达来影响HLEB3凋亡,在白内障发病机制中发挥作用。 展开更多
关键词 MIR-126 锌指蛋白Kruppel样因子6 晶状体上皮细胞 凋亡 白内障
在线阅读 下载PDF
四君子汤含药血清抑制晶状体上皮细胞凋亡的实验研究 预览 被引量:1
12
作者 胡艳红 李颖 +5 位作者 林淑娜 李四化 胡俊 陈胜 冯春燕 柯发杰 《眼科新进展》 北大核心 2018年第7期630-633,共4页
目的 观察四君子汤含药血清对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)凋亡的抑制作用,从而探讨四君子汤防治老年性白内障的机制。方法 30只SD大鼠随机分为2组,分别用四君子汤(1.725 g·kg-1·d-1)和生理盐水灌胃,用... 目的 观察四君子汤含药血清对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)凋亡的抑制作用,从而探讨四君子汤防治老年性白内障的机制。方法 30只SD大鼠随机分为2组,分别用四君子汤(1.725 g·kg-1·d-1)和生理盐水灌胃,用药7 d后经腹主动脉采血,离心提取四君子汤含药血清和空白血清冻存备用。细胞实验分为4组:阴性对照组、过氧化氢组(300μmol·L-1过氧化氢作用4 h)、空白血清组(300μmol·L-1过氧化氢作用4 h后加入体积分数20%空白血清作用12 h)和四君子汤含药血清组(300μmol·L-1过氧化氢作用4 h后加入体积分数20%四君子汤含药血清作用12 h),流式细胞仪检测HLEC细胞周期;透射电子显微镜观察各组HLEC超微结构的改变。结果 流式细胞仪检测结果示:过氧化氢组G1期细胞比例为(67.127±2.615)%,较阴性对照组明显增加,S期细胞比例为(24.603±2.547)%、G2期细胞比例为(8.270±1.149)%,均较阴性对照组减少,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。四君子汤含药血清组G1期细胞比例为(41.517±20.008)%,较过氧化氢组明显减少,S期细胞比例为(38.423±10.213)%、G2期细胞比例为(20.060±11.004)%,均较过氧化氢组明显增加,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。透射电子显微镜结果显示:阴性对照组胞膜完整,各细胞器结构正常;过氧化氢组细胞表面微绒毛消失,染色质凝集成块分布于核膜下,核膜欠完整,细胞质内可见溶酶体;空白血清组细胞质内空泡增多,线粒体、内质网等细胞器结构仍可见;四君子汤含药血清组胞膜完整,细胞质内可见少许空泡,线粒体、内质网等细胞器结构清晰。结论 四君子含药血清能有效抑制过氧化氢诱导的HLEC凋亡,这可能是四君子汤防治老年性白内障的机制之一。 展开更多
关键词 老年性白内障 四君子汤 含药血清 晶状体上皮细胞 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
mTOR-siRNA转染人晶状体上皮细胞对PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白p70S6K及4EBP1表达的影响 预览 被引量:1
13
作者 席亚慧 刘红玲 +1 位作者 刘明月 姜梦圆 《眼科新进展》 北大核心 2018年第9期804-809,共6页
目的研究m TOR-siRNA转染人晶状体上皮细胞系B3(human lens epithelial line B3,HLEB3)后,对PI3K/AKT/m TOR信号通路蛋白p70S6K及4EBP1表达的影响,并与雷帕霉素的作用作对比。方法 HLEB3分为m TOR-siRNA组(培养基加入Lipo2000和m TOR... 目的研究m TOR-siRNA转染人晶状体上皮细胞系B3(human lens epithelial line B3,HLEB3)后,对PI3K/AKT/m TOR信号通路蛋白p70S6K及4EBP1表达的影响,并与雷帕霉素的作用作对比。方法 HLEB3分为m TOR-siRNA组(培养基加入Lipo2000和m TOR-siRNA)、control-siRNA组(培养基加入Lipo2000和control-siRNA)、Lipo2000组(培养基加入Lipo2000)、雷帕霉素组(培养基加入雷帕霉素)和空白对照组,于转染24 h、48 h、72 h后观察各组细胞的形态和密度;Western blot法检测各时间点各组细胞p70S6K及4EBP1蛋白的表达情况。结果 m TOR-siRNA组随着转染时间延长,HLEB3细胞分布稀疏、形态不规则,部分细胞贴壁不良。转染24 h、48 h、72 h时,m TOR-siRNA组细胞密度均较其他四组低,差异均有统计学意义(均为P〈0.05)。转染24 h后,各组细胞4EBP1蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05),但与空白对照组相比,m TOR-siRNA组及雷帕霉素组p70S6K蛋白表达均下降(均为P〈0.05);转染48 h、72 h后,与空白对照组相比,m TOR-siRNA组及雷帕霉素组4EBP1及P70S6K蛋白表达均下降(均为P〈0.05),而control-siRNA组、Lipo2000组4EBP1、P70S6K蛋白表达与空白对照组相比差异均无统计学意义(均为P〉0.05)。结论 m TOR-siRNA及雷帕霉素均可影响HLEB3的增殖及生长活性,并抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路蛋白p70S6K和4EBP1的表达,且m TOR-siRNA的早期作用较雷帕霉素强。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 后发性白内障 雷帕霉素 p70S6K蛋白 4EBP1蛋白
在线阅读 下载PDF
丹酚酸A(Sal A)对H2O2诱导的氧化应激损伤人晶状体上皮细胞增殖、凋亡、超微结构及炎症反应的作用 预览
14
作者 杨洪涛 赵静 +2 位作者 王媛媛 禹鑫 裴存文 《眼科新进展》 北大核心 2018年第8期724-727,731共5页
目的 探讨丹酚酸A(salvianolic acid A,Sal A)对H2O2诱导的氧化应激损伤人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)增殖、凋亡、超微结构及炎症反应的作用。方法 将HLEC SRA01/04细胞传代培养后,用不同浓度(50 μmol&... 目的 探讨丹酚酸A(salvianolic acid A,Sal A)对H2O2诱导的氧化应激损伤人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)增殖、凋亡、超微结构及炎症反应的作用。方法 将HLEC SRA01/04细胞传代培养后,用不同浓度(50 μmol·L-1、100 μmol·L-1、200 μmol·L-1、400 μmol·L-1、800 μmol·L-1)H2O2处理培养24 h,通过MTT法检测细胞存活率,筛选H2O2最佳作用浓度,作为细胞模型组使用浓度。对照组细胞用正常完全培养液培养。Sal A干预组将细胞先在含50 μmol·L-1 Sal A培养液中预孵育24 h,后加入最佳作用浓度H2O2继续培养24 h。而后采用MTT法检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,电镜观察细胞超微结构,Western blot检测各组细胞炎症相关蛋白IL-1β、IL-18、TNF-α的表达情况。结果 MTT法检测结果显示不同浓度H2O2(50 μmol·L-1、100 μmol·L-1、200 μmol·L-1、400 μmol·L-1、800 μmol·L-1)处理组细胞存活率分别为61.26%±3.35%、47.81%±2.63%、29.53%±2.54%、21.47%±2.26%、14.97%±1.82%,各浓度处理组细胞存活率和对照组相比,差异均有统计学意义(均为P〈0.05)。其中,100 μmol·L-1 H2O2处理组细胞存活率最接近半数致死量,故选择100 μmol·L-1 H2O2作为氧化应激损伤模型浓度用于后续实验。Sal A干预组细胞存活率为82.54%±3.07%,比100 μmol·L-1 H2O2模型组明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。流式细胞术检测结果显示,对照组细胞凋亡率为4.06%±0.41%,H2O2模型组细胞凋亡率为20.52%±3.29%,Sal A干预组细胞凋亡率为12.35%±1.48%,H2O2模型组和Sal A干预组细胞凋亡率差异有统计学意义(P〈0.05)。电镜观察结果显示H2O2诱导产生了明显的细胞超微结构损伤,线粒体、内质网数目减少,分泌颗粒减少,胞核体积缩小,可见少数细胞核内异染色质增多甚至聚集成块状。Sal A预处理后,细胞损伤的超微� 展开更多
关键词 丹酚酸A 晶状体上皮细胞 H2O2 细胞增殖 细胞凋亡 细胞超微结构 炎症反应
在线阅读 下载PDF
PP242对人晶状体上皮细胞凋亡的诱导及凋亡相关蛋白Bax表达的影响 预览
15
作者 白雪 宁宏 《中国医科大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期548-551,共4页
目的研究PP242对人晶状体上皮细胞(HLECs)凋亡的诱导及凋亡蛋白Bax表达的影响。方法用不同浓度PP242处理人晶状体上皮细胞系SRA01/04,分别用浓度为0、250、500、750、1 000 nmol/L的PP242处理HLECs 48 h后,Annexin V/PI双染流式细胞... 目的研究PP242对人晶状体上皮细胞(HLECs)凋亡的诱导及凋亡蛋白Bax表达的影响。方法用不同浓度PP242处理人晶状体上皮细胞系SRA01/04,分别用浓度为0、250、500、750、1 000 nmol/L的PP242处理HLECs 48 h后,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用实时定量PCR及Western blotting方法检测Bax的m RNA及蛋白的表达。结果 250、500、750和1 000 nmol/L PP242对人晶状体上皮细胞系SRA01/04作用48 h后,早期凋亡率分别为7.20%±0.36%、13.77%±0.21%、16.31%±0.20%和18.67%±0.49%,与对照组(0 nmol/L)差异有统计学意义(P〈0.05)。Western blotting结果显示,随着PP242浓度的增加,Bax蛋白表达量增加,与对照组(0 nmol/L)比较差异有统计学意义(P〈0.05);实时定量PCR结果显示,Bax m RNA表达量随PP242药物浓度的增加而增加,相对定量m RNA结果分别为2.157±0.125、3.733±0.302、5.596±0.261和7.436±0.167,与对照组(0 nmol/L)比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 PP242可以诱导HLECs的凋亡,增加其凋亡蛋白Bax的表达。 展开更多
关键词 PP242 晶状体上皮细胞 BAX
在线阅读 下载PDF
锌对半乳糖诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的影响 预览
16
作者 贾义 张亮亮 夏欢 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期1774-1777,共4页
目的:研究锌对半乳糖诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)凋亡的影响。方法:将培养的SRA01/04细胞系分为六组,对照组、半乳糖处理组、补锌组、补锌联合半乳糖处理组、缺锌组、缺锌联合半乳糖处理组。采用MTT... 目的:研究锌对半乳糖诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)凋亡的影响。方法:将培养的SRA01/04细胞系分为六组,对照组、半乳糖处理组、补锌组、补锌联合半乳糖处理组、缺锌组、缺锌联合半乳糖处理组。采用MTT法检测半乳糖对HLEC存活率的影响,荧光显微镜和流式细胞仪分别检测各实验分组细胞核形态和细胞凋亡率水平的变化。结果:不同浓度半乳糖(0、25、50、75、100、125mmol/L)处理HLEC细胞后,细胞存活率分别为(100. 0±5. 4)%、(97. 5±3. 2)%、(91. 3±5. 3)%、(93. 4±0. 6)%、(86. 6±1. 4)%和(83. 5±0. 4)%,与未处理细胞相比,半乳糖浓度为100、125mmol/L时,细胞存活率显著下降,差异有统计学意义(P〈0. 05)。荧光显微镜结果显示对照组和补锌组的细胞核呈现均一的染色,半乳糖处理组、补锌联合半乳糖处理组、缺锌组和缺锌联合半乳糖处理组中一些细胞的细胞核收缩,表现出典型的细胞凋亡形态。各组的细胞凋亡率分别为(1. 5±0. 1)%、(7. 1±0. 2)%、(1. 4±0. 1)%、(4. 4±0. 2)%、(5. 5±0. 2)%和(15. 8±0. 3)%。与对照组相比,半乳糖处理组、补锌联合半乳糖处理组、缺锌组和缺锌联合半乳糖处理组的细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P 〈0. 05)。与半乳糖处理组相比,补锌联合半乳糖处理组的细胞凋亡率显著下降,差异有统计学意义(P〈0. 05),缺锌联合半乳糖处理组的细胞凋亡率则显著升高,差异有统计学意义(P〈0. 05)。结论:补锌可以保护人晶状体上皮细胞抵抗由半乳糖引起的细胞凋亡,可能对白内障的形成有抑制作用。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 半乳糖 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
锌对3-吗啉-斯得酮亚胺(SIN-1)诱导的人晶状体上皮细胞Cu/Zn-SOD表达及活性的影响 预览 被引量:1
17
作者 贾义 宋萍萍 +1 位作者 周静 钟乃凤 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第1期24-27,共4页
目的研究补锌和缺锌条件下3-吗啉-斯得酮亚胺(SIN-1)对人晶状体上皮细胞铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn—SOD)表达及活性的影响。方法将培养的SRAOI/04细胞系分为6组:对照组、SIN—1处理组、补锌组、补锌联合SIN-1处理组、缺锌组和缺... 目的研究补锌和缺锌条件下3-吗啉-斯得酮亚胺(SIN-1)对人晶状体上皮细胞铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn—SOD)表达及活性的影响。方法将培养的SRAOI/04细胞系分为6组:对照组、SIN—1处理组、补锌组、补锌联合SIN-1处理组、缺锌组和缺锌联合SIN-1处理组。采用MTT法检测细胞存活率,Westem blotting和Cu/Zn—SOD活性检测试剂盒分别检测Cu/Zn—SOD蛋白表达和活性水平的变化。结果我们选择对细胞存活率无显著影响的50txmol·L~ZnS04和1μmol·L-1 N,N,N,N-四-(2-吡啶基甲基)乙二胺作为补锌和缺锌的条件,选择对细胞存活率有显著影响的500μmol·L-1 SIN-1作为细胞受损的条件。在此条件下对照组、SIN-1处理组、补锌组、补锌联合SIN-1处理组、缺锌组和缺锌联合SIN-1处理组的细胞存活率分别为(100.0±1.4)%、(84.7±1.8)%、(101.2±1.6)%、(95.5±1.9)%、(100.9±2.3)%和(75.3±1.2)%,与对照组相比,SIN-1处理组和缺锌联合SIN-1处理组的细胞存活率均显著下降(均为P〈0.05),与SIN-1处理组相比,补锌联合SIN一1处理组的细胞存活率显著升高(P〈0.05),缺锌联合SIN-1处理组的细胞存活率则进一步下降(P〈0.05)。各组的Cu/Zn-SOD蛋白相对表达量分别为1.005±0.007、0.991±0.015、1.044±0.008、0.945±0.007、1.278±0.011和0.850±0.057.Cu/Zn—SOD活性分别为(1.00±0.03)U、(0.85±0.05)U、(1.69±0.04)U、(1.35±0.05)U、(1.52±0.04)U和(1.09±0.03)U。与对照组相比,补锌组和缺锌组Cu/Zn—SOD蛋白表达量和活性均显著增加(均为P〈0.05)。分别与补锌组或缺锌组相比,补锌联合SIN-1处理组和缺锌联合SIN-1处理组的Cu/Zn—SOD蛋白表达水平和活性均显著下降(均为P〈0.05)。结论补锌可以通过上调Cu/Zn—SOD的表达水平� 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 铜锌超氧化物歧化酶
在线阅读 下载PDF
TGF-β1对HLEC发生EMT影响分析
18
作者 王慧 温晏 +2 位作者 闫丽 于晓明 宁宏 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2017年第4期76-79,83共5页
目的 研究TGF-β1对人晶状体上皮细胞(HLEC)上皮间质转分化(EMT)的影响。方法 根据处理不同,将细胞分为TGF-β1组、siRNA-TGF-β1组和空白对照组,培养24 h后观察细胞形态,Transwell法检测各组细胞迁移能力,实时荧光定量PCR检测各组... 目的 研究TGF-β1对人晶状体上皮细胞(HLEC)上皮间质转分化(EMT)的影响。方法 根据处理不同,将细胞分为TGF-β1组、siRNA-TGF-β1组和空白对照组,培养24 h后观察细胞形态,Transwell法检测各组细胞迁移能力,实时荧光定量PCR检测各组细胞中TGF-β1、α-SMA、E-cadherin和vimentin基因表达,Western blotting法检测各组细胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达。结果 TGF-β1组迁移细胞数为(31.2±4.7)个,高于siRNA-TGF-β1组(14.6±5.3)个及空白对照组(3.9±1.4)个,且空白对照组高于siRNA-TGF-β1组;siRNA-TGF-β1组TGF-β1、α-SMA及Vimentin的mRNA相对表达量均低于TGF-β1组及空白对照组,且空白对照组低于TGF-β1组;siRNA-TGF-β1组E-cadherin的mRNA相对表达量均高于TGF-β1组及空白对照组,且空白对照组高于TGF-β1组;siRNA-TGF-β1组细胞中PI3K蛋白及p-Akt蛋白相对表达量均低于TGF-β1组和空白对照组,且空白对照组低于TGF-β1组,siRNA-TGF-β1组Akt蛋白相对表达量高于TGF-β1处理组和空白对照组,且空白对照组高于TGF-β1组。结论 TGF-β1可诱导HLEC发生EM T,且可促进HLEC迁移,其机制可能与细胞中PI3K/Akt信号通路活化有关。 展开更多
关键词 TGF-Β1 晶状体上皮细胞 上皮-间质转化 PI3K/AKT信号通路
硫醇转移酶(TTase)对紫外线诱导氧化损伤的人晶状体上皮细胞的保护作用 预览
19
作者 郑晓亮 张婕 严宏 《眼科新进展》 北大核心 2017年第7期601-604,共4页
目的探讨硫醇转移酶(thioltransferase,TTase)对紫外线诱导氧化损伤的人晶状体上皮细胞(humanlens epithelial cells,HLEC)的保护作用。方法将体外培养的HLEC随机分为4组。正常组:正常培养的HLEC;紫外线组:正常培养的HLEC+紫... 目的探讨硫醇转移酶(thioltransferase,TTase)对紫外线诱导氧化损伤的人晶状体上皮细胞(humanlens epithelial cells,HLEC)的保护作用。方法将体外培养的HLEC随机分为4组。正常组:正常培养的HLEC;紫外线组:正常培养的HLEC+紫外线(波长302nm、辐照强度55.56μW·cm“的紫外线照射15min,辐照量共计500J·m2);TTasesiRNA组:TTasesiRNA转染的HLEC;TTasesiRNA+紫外线组:TTaesiRNA转染的HLEC+紫外线(照射参数同紫外线组)。应用乳酸脱氢酶释放试剂盒检测细胞的增殖能力;测定TTase酶活性及Western blotting检测TTase蛋白表达;测量细胞内总GSH、GSH与GSSG含量,计算GSSG与总GsH的比值。结果紫外线组较正常组细胞增殖能力下降21.0%(P〈0.05)TTaesiRNA组较正常组细胞增殖能力下降17.0%(P〈0.05);TTasesiRNA+紫外线组较正常组细胞增殖能力下降29.0%(P〈0.05)。紫外线组TTake活性较正常组升高,约为正常组的2.1倍;siRNA组较正常组TTase活性下降,约为正常组的67.0%(P〈0.05);TIkesiRNA+紫外线组较TTasesiRNA组TTase活性增加,约为TTasesiRNA组的1.3倍(P〈0.05)。与正常组相比,紫外线组TTase相对表达量升高,约为正常组的3.9倍,TTase siRNA组的TTase相对表达量明显降低,约为正常组的35.0%(P〈0.05);而TTaesir—NA+紫外线组的TTase相对表达量较TTasesiRNA组升高,约为TTasesiRNA组的3.0倍(P〈0.05)。相比于正常组,紫外线组、TTasesiRNA组及TTasesiRNA+紫外线组GSSG含量均上升,分别为正常组的2.3倍、1.4倍和3.7倍(均为P〈0.05);紫外线组、TTasesiRNA组和TTasesiRNA+紫外线组GSH含量较正常组下降,分别为正常组的68.4%、79.0%和61.7%(均为P〈0.05)。紫外线组、TTasesiRNA组和TTasesiRNA+紫外线组GSSG/总GSH比值均较正常组增加,分别为正常组的3.1倍、1.7 展开更多
关键词 硫醇转移酶 紫外线辐射 晶状体上皮细胞 SIRNA
在线阅读 下载PDF
miR-34a/SIRT1在H2O2诱导人晶状体上皮细胞氧化应激中的表达 预览 被引量:2
20
作者 季青山 俞茜 +2 位作者 孙思勤 柯根杰 温跃春 《眼科新进展》 北大核心 2017年第8期728-731,共4页
目的 观察微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)和沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在不同浓度 H2O2诱导的人晶状体上皮细胞(SRA01/04细胞)氧化应激中的表达变化。方法 用不同浓度的 H2O2(0 μmol·... 目的 观察微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)和沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在不同浓度 H2O2诱导的人晶状体上皮细胞(SRA01/04细胞)氧化应激中的表达变化。方法 用不同浓度的 H2O2(0 μmol·L-1、100 μmol·L-1、200 μmol·L-1、300 μmol·L-1、400 μmol·L-1)处理细胞24 h后,用CCK-8检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率和RT-PCR检测miR-34a/SIRT1的表达。结果 CCK-8检测结果显示:100~400 μmol·L-1 H2O2对SRA01/04细胞有增殖抑制作用,且呈剂量依赖关系,与0 μmol·L-1 H2O2组相比差异均有统计学意义(均为P〈0.01);流式细胞仪凋亡检测结果显示:0 μmol·L-1 H2O2组细胞凋亡率为(6.1±1.2)%;100 μmol·L-1、200 μmol·L-1、300 μmol·L-1 H2O2组细胞凋亡率分别为(26.3±1.8)%、(32.5±2.2)%、(64.7±5.3)%,各组与0 μmol·L-1 H2O2组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。RT-PCR检测结果显示:不同浓度 H2O2处理SRA01/04细胞后,细胞中的miR-34a表达水平呈剂量依赖性升高,而SIRT1表达水平呈相应下降,与0 μmol·L-1 H2O2组相比差异均有统计学意义(均为P<0.001)。结论 在一定浓度 H2O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激中,miR-34a表达水平显著增加,而SIRT1表达水平显著下降。下调miR-34a表达可增加氧化应激人晶状体上皮细胞存活率。 展开更多
关键词 微小RNA-34a 沉默信息调节因子1 过氧化氢 晶状体上皮细胞 氧化应激
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 7 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈