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龙眼核活性脂质的分析及其细胞增殖活性研究 预览
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作者 纪漫 孙培冬 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期87-91,108共6页
研究了龙眼核活性脂质的组成及其细胞增殖活性。以龙眼核为原料,经超声辅助提取、氯仿萃取、硅胶柱层析分离后得到富含植物甾醇和神经酰胺的活性脂质组分CEP-2;定性定量分析脂质中的活性成分,并在细胞水平上考察龙眼核活性脂质对人皮肤... 研究了龙眼核活性脂质的组成及其细胞增殖活性。以龙眼核为原料,经超声辅助提取、氯仿萃取、硅胶柱层析分离后得到富含植物甾醇和神经酰胺的活性脂质组分CEP-2;定性定量分析脂质中的活性成分,并在细胞水平上考察龙眼核活性脂质对人皮肤成纤维细胞(HSF)、人永生化角质形成细胞(Ha CaT)增殖活性的影响。结果表明:CEP-2中主要含有三萜类、神经酰胺类、鞣质及酚类物质,总甾醇含量为518. 26 mg/g,神经酰胺含量为2. 65 mg/g;CEP-2在质量浓度为40μg/m L时,HSF细胞的存活率为105. 28%;在质量浓度为100μg/m L时,对HaCaT细胞表现出明显的细胞增殖活性(p <0. 001),细胞存活率为114. 21%。 展开更多
关键词 龙眼核 植物甾醇 神经酰胺 皮肤纤维细胞 永生化角质形细胞
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雷帕霉素对人皮肤成纤维细胞光老化模型自噬及氧化应激的影响
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作者 陈振辉 王明光 +2 位作者 杨瑞 李霞 王倩 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期253-257,共5页
目的分析雷帕霉素对中波紫外线(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞光老化模型自噬及氧化应激的影响。方法将人皮肤成纤维细胞HSF2细胞株分组培养:对照组;UVB照射组(A组),UVB+雷帕霉素0.1 mg/L组(B组),UVB+雷帕霉素1 mg/L组(C组),UVB+雷帕霉素1... 目的分析雷帕霉素对中波紫外线(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞光老化模型自噬及氧化应激的影响。方法将人皮肤成纤维细胞HSF2细胞株分组培养:对照组;UVB照射组(A组),UVB+雷帕霉素0.1 mg/L组(B组),UVB+雷帕霉素1 mg/L组(C组),UVB+雷帕霉素10 mg/L组(D组)。分别采用β-半乳糖苷酶染色法和MDC染色法检测细胞衰老和自噬情况,采用Western blot分析细胞中自噬相关蛋白LC3B和Beclin1蛋白表达水平,检测细胞中ROS水平及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)水平。结果 UVB照射可引起HSF2细胞提前衰老,自噬水平降低,ROS水平升高及氧化应激。B组细胞衰老率、自噬阳性细胞比例及细胞中p62、LC3B和Beclin1蛋白表达水平与A组比较差异无统计学意义(P>0.05),但随雷帕霉素浓度升高,C、D组细胞衰老率呈下降趋势(P<0.05),自噬阳性细胞比例和LC3B、 Beclin1蛋白表达水平呈升高趋势(P<0.05),p62蛋白水平呈降低趋势(P<0.05);B组细胞中ROS水平及CAT、SOD、POD水平与A组比较差异无统计学意义(P>0.05),但随雷帕霉素浓度升高,C、D组ROS和POD水平逐渐降低至正常水平(P<0.05),CAT和SOD水平逐渐升高至正常水平(P<0.05)。结论雷帕霉素能够增加UVB诱导的人皮肤成纤维细胞光老化的自噬水平,减少细胞衰老,同时降低ROS水平,改善氧化应激水平。 展开更多
关键词 皮肤纤维细胞 雷帕霉素 自噬 活性氧 中波紫外线
康复新液对人皮肤成纤维细胞增殖作用的影响 预览
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作者 刘荣荣 李丽娟 +2 位作者 李玥 王楠 张海珠 《大理大学学报》 CAS 2019年第2期15-20,共6页
目的:研究不同浓度康复新液对体外培养人皮肤成纤维细胞(HSF)增殖的影响。方法:取生长状态良好的HSF进行体外培养,分别给予不同浓度的康复新液处理,应用MTT法检测细胞的增殖。结果:与阴性对照组比较,24、48、72h康复新液在3~100μg/mL... 目的:研究不同浓度康复新液对体外培养人皮肤成纤维细胞(HSF)增殖的影响。方法:取生长状态良好的HSF进行体外培养,分别给予不同浓度的康复新液处理,应用MTT法检测细胞的增殖。结果:与阴性对照组比较,24、48、72h康复新液在3~100μg/mL浓度下对HSF均有增殖促进作用,48、72h时作用效果较好,呈时间依赖性,10μg/mL培养72h时作用最强。结论:康复新液可刺激HSF增殖,其促进HSF增殖的机制尚需进一步研究。 展开更多
关键词 康复新液 皮肤纤维细胞 细胞增殖
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LED光源照射对人皮肤成纤维细胞的影响 预览
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作者 胡晓剑 陈泽庆 +1 位作者 周小丽 刘木清 《照明工程学报》 2019年第3期61-66,74共7页
光疗是在皮肤类疾病治疗中一种有效的手段,而LED具有价格便宜、可控性强、操作简单等优势,可以作为光源用于医疗领域。人成纤维细胞是皮肤的重要组成部分,探究LED对人皮肤成纤维细胞的影响对于皮肤类疾病的治疗具有重要的意义。本文通... 光疗是在皮肤类疾病治疗中一种有效的手段,而LED具有价格便宜、可控性强、操作简单等优势,可以作为光源用于医疗领域。人成纤维细胞是皮肤的重要组成部分,探究LED对人皮肤成纤维细胞的影响对于皮肤类疾病的治疗具有重要的意义。本文通过实验研究了LED对人皮肤成纤维细胞的影响。研究分析人皮肤成纤维细胞的生长特点,分别探究了不同波长的LED和不同时间的光照产生的影响。实验结果对于LED在皮肤类疾病治疗的应用具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 发光二极管 皮肤纤维细胞 光生物调节 光疗
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丹酚酸B-TAT脂质体对HSF细胞增殖、侵袭和细胞周期的影响
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作者 时军 吴艳婷 +3 位作者 郭思旖 陈桂添 赖建辉 许小琪 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期357-363,共7页
制备载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),研究其对人皮肤成纤维细胞(HSF)生长增殖、迁移、侵袭和细胞周期的影响,初步评价其用于防治增生性瘢痕的效果。以体外培养的HSF细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐MTT法检测SAB-TAT-LI... 制备载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),研究其对人皮肤成纤维细胞(HSF)生长增殖、迁移、侵袭和细胞周期的影响,初步评价其用于防治增生性瘢痕的效果。以体外培养的HSF细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐MTT法检测SAB-TAT-LIP对细胞生长增殖的抑制作用;采用Transwell小室法和划痕法检测SAB-TAT-LIP对细胞侵袭和迁移能力的影响;采用流式细胞术检测细胞周期变化。空白脂质体对HSF细胞基本无毒副作用,不同浓度的SAB-TAT-LIP干预HSF细胞不同时间后,均具有一定的增殖抑制作用,且呈现剂量和时间依赖性,同时细胞迁移和侵袭能力明显降低;SAB-TATLIP干预HSF细胞48 h后,可使细胞周期阻滞于G0/G1期,与空白对照组相比,P<0. 01。SAB-TAT-LIP对HSF细胞的增殖、侵袭和迁移有显著的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有阻滞作用。 展开更多
关键词 丹酚酸B 穿膜肽TAT 脂质体 皮肤纤维细胞 增殖 迁移 细胞周期
Twist1在人皮肤成纤维细胞中的表达及其对细胞增殖的影响
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作者 王淑华 彭亚婷 +3 位作者 张志彬 刘志刚 姜美英 张颖鹏 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期741-746,共6页
目的探讨Twist1对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及其可能机制。方法组织块贴壁法提取人皮肤成纤维细胞(HSFs),通过连续传代建立人皮肤成纤维细胞的复制性衰老模型。将传代的HSFs分为年轻组(P3~7)、衰老组(P20~25),通过β-半乳糖核苷酶染... 目的探讨Twist1对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及其可能机制。方法组织块贴壁法提取人皮肤成纤维细胞(HSFs),通过连续传代建立人皮肤成纤维细胞的复制性衰老模型。将传代的HSFs分为年轻组(P3~7)、衰老组(P20~25),通过β-半乳糖核苷酶染色法比较衰老染色率、EdU检测细胞增殖率的变化以及Western blot法检测衰老相关蛋白p21表达的差异来验证复制性衰老模型是否成功建立。通过Western blot法检测Twist1分别在年轻组与衰老组的表达情况。接着在年轻组中,通过转染Si-Twist1序列,使Twist1的表达下降,EdU检测HSFs增殖率的变化。结果相比于年轻组,衰老组HSFs的SA-β-gal染色率明显增加,细胞增殖率明显下降,衰老相关蛋白p21的表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。以上实验结果表明,已成功建立了HSFs的复制性衰老模型。另外Western blot发现Twist1蛋白在年轻组HSFs中的表达水平显著高于衰老组(P<0.05),EdU提示在Si-Twist1组比NC组的细胞增殖率明显下降(P<0.05)。结论 Twist1在衰老组HSFs中表达明显下调,在体外抑制Twist1的表达可引起HSFs的增殖率的下降,这为探讨Twist1与皮肤成纤维细胞衰老的相关研究提供了依据。 展开更多
关键词 TWIST1 皮肤纤维细胞 复制性衰老 增殖
玉屏风散对紫外线致人皮肤成纤维细胞光老化的防护作用 预览
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作者 马卓飞 林艳明 +2 位作者 赵秋华 覃永长 蒙缜之 《右江民族医学院学报》 2019年第1期11-14,共4页
目的研究玉屏风散对人皮肤成纤维细胞光老化的保护作用及其作用机制。方法紫外线(UVA+UVB)照射人皮肤成纤维细胞,建立光老化模型,使用三种不同浓度的玉屏风散含药血清进行干预,通过β-半乳糖苷酶染色法检测细胞的衰老情况,ELISA法检测细... 目的研究玉屏风散对人皮肤成纤维细胞光老化的保护作用及其作用机制。方法紫外线(UVA+UVB)照射人皮肤成纤维细胞,建立光老化模型,使用三种不同浓度的玉屏风散含药血清进行干预,通过β-半乳糖苷酶染色法检测细胞的衰老情况,ELISA法检测细胞DNA总体甲基化水平,透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果与正常组相比,模型组细胞β-半乳糖苷酶染色结果阳性率明显上升,DNA总体甲基化水平降低,细胞形态发生明显改变,胞浆中可见大量空泡形成,线粒体显著肿胀变形,形态不规则。经玉屏风散干预后,人皮肤成纤维细胞的衰老程度有所减轻,β-半乳糖苷酶染色结果细胞阳性率明显下降,细胞的DNA总体甲基化水平有所升高,对成纤维细胞内细胞器尤其是线粒体的破坏明显减轻,细胞形态也有明显的改善。结论玉屏风散可能通过调控细胞DNA总体甲基化水平,保护细胞的形态,进而对于人皮肤成纤维细胞的光老化具有防护作用,其中又以大剂量玉屏风散的抗衰效果为佳。 展开更多
关键词 玉屏风散 皮肤纤维细胞 光老化 辐射防护
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穿膜肽TAT修饰载丹酚酸B脂质体的制备及其抑制人皮肤成纤维细胞增殖与迁移初步研究
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作者 吴艳婷 郭思旖 +4 位作者 时军 陈桂添 许小琪 张婷琼 吴芸 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期59-68,共10页
目的制备具有防治增生性瘢痕(HS)作用的载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),建立其质量评价方法,并初步考察其对体外人皮肤成纤维(HSF)细胞增殖和迁移的影响。方法采用pH梯度逆向蒸发法制备脂质体,超滤法测其包封率,以包封率... 目的制备具有防治增生性瘢痕(HS)作用的载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),建立其质量评价方法,并初步考察其对体外人皮肤成纤维(HSF)细胞增殖和迁移的影响。方法采用pH梯度逆向蒸发法制备脂质体,超滤法测其包封率,以包封率为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优化脂质体的处方工艺;考察其形态、粒径、Zeta电位、体外释放、体外透皮吸收和稳定性等理化性质;在此基础上采用MTT法考察其对HSF细胞增殖的作用,采用划痕法和Transwell小室法考察其对HSF细胞迁移和侵袭的作用。结果 SAB-TAT-LIP的药物包封率为(86.70±0.85)%,平均粒径为(219.90±5.09)nm,Zeta电位(-9.25±0.92)m V,体外24h累积释放率为62.49%,无突释效应,体外32h皮肤累积透过率为17.21%,透过速率为(28.33±4.9)μg/(cm^2·h),真皮层滞留量为(44.39±6.87)μg/cm^2,4℃放置10d稳定性良好。SAB-TAT-LIP能够显著地抑制HSF细胞的增殖、迁移和侵袭,与对照组相比,差异显著(P<0.01)。结论优化得到的SAB-TAT-LIP包封率较高、粒径较小,体外释放和透皮行为均满足局部透皮给药制剂的体外释放和透皮规律,对体外HSF细胞的增殖、迁移和侵袭具有抑制作用。 展开更多
关键词 丹酚酸B 穿膜肽TAT 脂质体 皮肤纤维细胞 增生性瘢痕
黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白及衰老相关基因的影响
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作者 崔力文 张加玲 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第3期710-714,共5页
目的研究黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)胶原蛋白合成及衰老相关基因的影响。方法体外培养HSF细胞,通过CCK-8(cell counting kit-8)法筛选黑咖啡提取物安全剂量;实验分为样品组和空白对照组,用ELISA技术检... 目的研究黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)胶原蛋白合成及衰老相关基因的影响。方法体外培养HSF细胞,通过CCK-8(cell counting kit-8)法筛选黑咖啡提取物安全剂量;实验分为样品组和空白对照组,用ELISA技术检测黑咖啡提取物对细胞中Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)含量的影响,用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测黑咖啡提取物作用后细胞中ColⅠ和MMP-1 mRNA的表达水平。结果与空白对照组比较,黑咖啡提取物可抑制HSF细胞中MMP-1合成(P<0.05),促进ColⅠ合成(P<0.05);使ColⅠmRNA表达水平升高(P<0.01),而MMP-1 mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论黑咖啡提取物通过促进ColⅠ和抑制MMP-1表达,对胶原蛋白代谢具有改善和调节作用,可延缓皮肤衰老。 展开更多
关键词 黑咖啡 皮肤纤维细胞 Ⅰ型胶原蛋白 基质金属蛋白酶-1
siRNA靶向抑制Nox2在阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤中的作用及机制研究 预览
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作者 郭亚东 孙要文 +1 位作者 秦高平 吴红娟 《河北医学》 CAS 2019年第4期532-535,共4页
目的:探讨siRNA靶向抑制Nox2在阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤中的作用及机制。方法:构建阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤模型,检测阿霉素处理的细胞中Nox2蛋白质的表达。根据实验设计分为正常组、单纯siRNA-Nox2转染组、阿霉素模型组及siR... 目的:探讨siRNA靶向抑制Nox2在阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤中的作用及机制。方法:构建阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤模型,检测阿霉素处理的细胞中Nox2蛋白质的表达。根据实验设计分为正常组、单纯siRNA-Nox2转染组、阿霉素模型组及siRNA-Nox2转染+阿霉素处理组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化应激水平。Westernblotting法检测siRNA靶向抑制Nox2对阿霉素诱导的细胞凋亡的影响。结果:Westernblotting结果表明,与正常组相比,阿霉素模型组细胞Nox2蛋白质水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。MMT法检测结果提示,相较于阿霉素模型组,siRNA-Nox2转染可提高细胞增殖能力和存活率,差异有统计学意义(P<0.05)。与阿霉素模型组相比,siRNA转染+阿霉素组细胞MDA和ROS水平降低,SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Westernblotting结果表明,siRNA-Nox2转染可显著降低阿霉素诱导的细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:siRNA靶向抑制Nox2保护阿霉素诱导的人皮肤成纤维细胞损伤,其机制与降低胞内氧化应激和ROS水平有关。 展开更多
关键词 Nox2 阿霉素 皮肤纤维细胞 氧化应激 ROS 凋亡
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过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞衰老模型的建立
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作者 潘长伟 赵峰 +3 位作者 郎宏鑫 林学文 施萍 庞希宁 《解剖科学进展》 2019年第2期193-195,199共4页
目的应用过氧化氢(H2O2)诱导人皮肤成纤维细胞衰老,建立体外细胞衰老模型。方法组织块贴壁法分离培养人皮肤成纤维细胞,免疫荧光法对获得的细胞进行鉴定,采用50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L的H2O2处理细胞1h、2h两个时... 目的应用过氧化氢(H2O2)诱导人皮肤成纤维细胞衰老,建立体外细胞衰老模型。方法组织块贴壁法分离培养人皮肤成纤维细胞,免疫荧光法对获得的细胞进行鉴定,采用50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L的H2O2处理细胞1h、2h两个时间点,然后正常培养4d,应用细胞增殖实验,衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色实验,确定H2O2氧化应激下的损伤力和细胞衰老率。结果镜下可见细胞呈梭形或多角形,结合免疫荧光结果,分离获得的细胞即为成纤维细胞。用50μmol/L、100μmol/L H2O2处理1h、2h后虽然活细胞较多,但是SA-β-gal染色阳性率较低。200μmol/L、400μmol/L H2O2处理2h组SA-β-gal染色阳性率较高,但细胞量较少给以后实验带来较多困难。200μmol/L、400μmol/L H2O2处理1h组细胞数量,SA-β-gal染色阳性率最高且二者间无明显差异。结论选取200μmol/L H2O2处理1h作为建立衰老细胞模型。 展开更多
关键词 H2O2 衰老 皮肤纤维细胞
红景天对人皮HSF和HaCaT细胞的抗衰老作用
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作者 周思思 姜建国 《现代食品科技》 北大核心 2018年第8期16-23,共8页
本文采用中波紫外照射的人皮肤成纤维细胞(HSF)和人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT)细胞衰老模型,探索了红景天的4种萃取物—红景天总皂苷、总黄酮、多糖和挥发油的体外抗皮肤衰老作用。结果显示所试的4种萃取物都具有与浓度相依的... 本文采用中波紫外照射的人皮肤成纤维细胞(HSF)和人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT)细胞衰老模型,探索了红景天的4种萃取物—红景天总皂苷、总黄酮、多糖和挥发油的体外抗皮肤衰老作用。结果显示所试的4种萃取物都具有与浓度相依的抗衰老作用,其效果顺序依次为皂苷〉多糖〉黄酮〉挥发油。其中,浓度为800μg/m L的皂苷的抗衰老效果是维生素C对照组的2倍。黄酮和多糖对HSF细胞具有相当的修复效果,且都好于挥发性油;在HaCaT细胞的场合多糖、黄酮和挥发油具有相类似的抗衰老效果。可见红景天的不同粗提物对人皮肤细胞有一定的抗衰老修复能力,这为深入地研发红景天抗衰老、抗辐射产品提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 红景天 中波紫外线 抗衰老 皮肤纤维细胞 永生化皮肤角质形细胞
高表达β-catenin对中波紫外线所致人皮肤成纤维细胞衰老相关因子FOXO3a表达的影响
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作者 陈用军 石年 +2 位作者 刘晓明 杨婷 田黎明 《武汉大学学报:医学版》 CAS 2018年第1期57-61,共5页
目的:探讨高表达β-联蛋白(β-catenin)对中波紫外线所致人皮肤成纤维细胞衰老相关因子FOXO3a表达的影响。方法:组织分离法培养正常人皮肤成纤维细胞(NHSFs),pcDNA3.1-β-catenin转染NHSFs,并用中波紫外线(UVB)进行氧化应激处理,流式细... 目的:探讨高表达β-联蛋白(β-catenin)对中波紫外线所致人皮肤成纤维细胞衰老相关因子FOXO3a表达的影响。方法:组织分离法培养正常人皮肤成纤维细胞(NHSFs),pcDNA3.1-β-catenin转染NHSFs,并用中波紫外线(UVB)进行氧化应激处理,流式细胞术检测NHSFs增殖与凋亡,Western印迹测定NHSFs中β-catenin和FOXO3a蛋白的表达。结果:pcDNA3.1-β-catenin明显上调了NHSFs中β-catenin的表达,降低细胞凋亡率,同时高表达的β-catenin激活了FOXO3a,上调了FOXO3a的表达。β-catenin/GAPDH蛋白的比值在NHSFs+vector,NHSFs+vector+UVB,NHSFs+β-catenin+UVB组分别是:0.63±0.03、0.21±0.18、0.47±0.09;FOXO3a/GAPDH蛋白的比值在NHSFs+vector,NHSFs+vector+UVB,NHSFs+β-catenin+UVB组分别是:0.89±0.59、0.24±0.02、0.48±0.76。结论:高表达的β-catenin可以降低细胞凋亡率,抑制细胞衰老,其作用机制可能是通过上调衰老相关因子FOXO3a表达。 展开更多
关键词 皮肤纤维细胞 中波紫外线 细胞衰老 FOXO3A
载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体对HSF细胞凋亡和TGF-β1表达水平的影响 预览
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作者 吴艳婷 陈桂添 +3 位作者 时军 郭思旖 许小琪 赖建辉 《广东药科大学学报》 CAS 2018年第6期714-718,共5页
目的制备载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),研究其对人皮肤成纤维HSF细胞凋亡和TGF-β1表达水平的影响,初步评价其用于防治增生性瘢痕的效果。方法采用pH梯度逆向蒸发法制备SAB-TAT-LIP;以体外培养的HSF细胞为研究对象,采... 目的制备载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),研究其对人皮肤成纤维HSF细胞凋亡和TGF-β1表达水平的影响,初步评价其用于防治增生性瘢痕的效果。方法采用pH梯度逆向蒸发法制备SAB-TAT-LIP;以体外培养的HSF细胞为研究对象,采用膜联蛋白V-FITC(AnnexinV-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法检测SAB-TAT-LIP对细胞凋亡的影响,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SAB-TAT-LIP对细胞分泌TGF-β1的影响。结果空白脂质体对HSF细胞基本无毒副作用,SAB-TAT-LIP干预HSF细胞48h后,细胞早期凋亡率、中晚期凋亡率和总凋亡率都明显增加,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);TGF-β1分泌量显著降低,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论SAB-TAT-LIP对HSF细胞凋亡有促进作用,对TGF-β1的表达水平有下调作用。 展开更多
关键词 丹酚酸B 穿膜肽TAT 脂质体 皮肤纤维细胞 细胞凋亡 TGF-Β1
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复方苦参注射液对X射线辐射后人皮肤成纤维细胞增殖与凋亡的影响
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作者 郑剑霄 薛晓光 +4 位作者 戴振晖 李工 詹文婷 郭伟伟 王苏美 《广州中医药大学学报》 CAS 2018年第6期1070-1073,共4页
【目的】探讨复方苦参注射液X射线辐射后人皮肤成纤维细胞(HSF)增殖与凋亡的影响及其放射防护作用机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测复方苦参注射液对X射线照射后HSF细胞增殖的影响,采用流式细胞法术观察复方苦参注射液... 【目的】探讨复方苦参注射液X射线辐射后人皮肤成纤维细胞(HSF)增殖与凋亡的影响及其放射防护作用机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测复方苦参注射液对X射线照射后HSF细胞增殖的影响,采用流式细胞法术观察复方苦参注射液对X射线照射后HSF细胞凋亡的影响,采用DCFH-DA荧光探针检测复方苦参注射液对X射线照射后HSF氧自由基的清除作用。【结果】苦参干预组HSF细胞的增殖率高于单纯放射组(P〈0.05);苦参干预组HSF细胞的凋亡率较单纯放射组明显减少(P〈0.05);经复方苦参注射液处理后,HSF细胞氧自由基含量较单纯放射组明显降低(P 〈0.05)。【结论】复方苦参注射液可能是通过清除HSF辐射后产生的氧自由基,从而抑制辐射后HSF细胞凋亡并促进其增殖。 展开更多
关键词 复方苦参注射液 放射防护 皮肤纤维细胞 细胞培养
α2-巨球蛋白对X线照射后人皮肤成纤维细胞的抗氧化及抗纤维化的作用 预览
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作者 孔祥波 刘仰 +4 位作者 陈雪英 李浣洋 李洁 葛雅平 房思炼 《中山大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2018年第1期48-53,共6页
【目的】研究α2-巨球蛋白 (α2M) 对X线照射后人皮肤成纤维细胞 (HSF) 超氧阴离子 (.O2-) 含量、 超氧化物歧化酶 (SOD) 活性和HSF细胞向肌成纤维细胞转化过程中的影响.【方法】 分别使用0、 5、 10、 15、 20 GyX线照射HSF细... 【目的】研究α2-巨球蛋白 (α2M) 对X线照射后人皮肤成纤维细胞 (HSF) 超氧阴离子 (.O2-) 含量、 超氧化物歧化酶 (SOD) 活性和HSF细胞向肌成纤维细胞转化过程中的影响.【方法】 分别使用0、 5、 10、 15、 20 GyX线照射HSF细胞, 在照射后第1天检测细胞培养基上清液中.O2-含量、 SOD活性的变化, 在照射后第5天采用Westernblot检测α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA) 的蛋白表达变化, 以选定合适的照射剂量.用以上合适剂量照射HSF细胞, 分别于照射前1 h、 照射后1 h实验组细胞培养基中加入终浓度为0.25 mg/mL, 0.5 mg/mL的α2M, 检测并比较不同实验组细胞培养基上清液中.O2-含量、 SOD活性和α-SMA蛋白表达的变化情况.【结果】5~20 GyX线照射HSF细胞后, .O2-含量逐渐增多, SOD活性逐渐降低, α-SMA蛋白表达量逐渐升高, 差异具有统计学意义(P〈0.05).10 GyX线照射后1 h加入α2M, 可明显减少照射后HSF细胞.O2-含量, 提高SOD活性, 下调放射后HSF细胞α-SMA的蛋白表达, 差异具有统计学意义 (P〈0.05), 照射前1 h给药则无明显变化.【结论】X线照射后的HSF细胞明显增加.O2-释放量, 同时SOD活性降低, 并有向肌成纤维细胞转化的趋势; 而X线照射后加入α2M可明显减少受照射HSF细胞的.O2-释放量, 提高其SOD活性, 并抑制向肌成纤维细胞转化的趋势, 说明α2M可通过抗氧化和抗纤维化起到放射保护作用. 展开更多
关键词 Α2-巨球蛋白 放射损伤 皮肤纤维细胞 抗氧化 纤维
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UVB诱导人皮肤成纤维细胞的SMP30基因表达变化 预览
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作者 张杰 高波 《东南国防医药》 2018年第2期126-129,共4页
目的研究经过不同剂量紫外线中波(UVB)照射不同时间后正常人皮肤成纤维细胞(HSF)中衰老标记蛋白30(SMP30)基因的表达改变,探讨UVB诱导HSF衰老可能的机制。方法以未采用UVB照射的HSF为对照组,经过不同剂量UVB(100、200、300mJ/cm2)处理... 目的研究经过不同剂量紫外线中波(UVB)照射不同时间后正常人皮肤成纤维细胞(HSF)中衰老标记蛋白30(SMP30)基因的表达改变,探讨UVB诱导HSF衰老可能的机制。方法以未采用UVB照射的HSF为对照组,经过不同剂量UVB(100、200、300mJ/cm2)处理不同时间(1、2、3d后)的HSF为实验组,四唑盐比色法(MTT)观察HSF的生长活性,流式细胞仪检测HSF的凋亡率,实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR)检测实验组和对照组中SMP30基因的表达。结果不同照射时间组和不同剂量组之间,随着UVB照射时间延长和剂量的增加,HSF细胞增殖抑制率逐渐增高,细胞的凋亡率也逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);UVB处理后实验组中SMP30基因的相对表达水平(0.66±0.19)明显低于对照组(1.15±0.11),差异有统计学意义(P<0.01);SMP30基因的表达水平随着UVB作用的时间和剂量的不同而变化,呈明显的时间依赖性和浓度剂量依赖性,不同照射时间组和不同剂量组之间基因表达的差异有统计学意义(P<0.05)。结论经过不同剂量UVB处理不同时间后可以抑制HSF细胞生长,促进细胞凋亡,大剂量长时间UVB照射可诱导HSF发生衰老改变。 展开更多
关键词 皮肤纤维细胞 紫外线中波 衰老标记蛋白30 四唑盐比色法 实时荧光定量PCR
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珍珠提取液抑制过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞凋亡的研究
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作者 王菁 杨安全 +2 位作者 陈志雄 张丽华 姚云飞 《药物生物技术》 CAS 2018年第5期402-405,共4页
建立了过氧化氢(H2O2)诱导人皮肤成纤维细胞损伤及凋亡模型,并初步研究了珍珠提取液抑制过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞凋亡。利用过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞凋亡,实验分为5组,即对照、模型、阳性对照[维生素C(5. 68 mmol/L)]和... 建立了过氧化氢(H2O2)诱导人皮肤成纤维细胞损伤及凋亡模型,并初步研究了珍珠提取液抑制过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞凋亡。利用过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞凋亡,实验分为5组,即对照、模型、阳性对照[维生素C(5. 68 mmol/L)]和珍珠提取液原、低浓度组。采用cck8、Hoechst33258染色等方法检测过氧化氢诱导细胞后以及加入珍珠提取液后细胞形态以及细胞凋亡的状况;酶化学法测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。与模型组相比,珍珠提取液原、低浓度组成纤维细胞的凋亡率显著降低,SOD水平显著升高,MDA含量显著降低(P 〈0. 01或P 〈0. 05)。珍珠提取液可在一定程度上抑制过氧化氢介导的人皮肤成纤维细胞的损伤以及凋亡。 展开更多
关键词 珍珠提取液 过氧化氢 皮肤纤维细胞 凋亡 损伤 抑制
紫檀芪对长波紫外线辐射所致人成纤维细胞急性光损伤的保护作用
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作者 陈荃 李华平 +7 位作者 张尔婷 梁碧华 邓蕙妍 李润祥 彭丽倩 莫子茵 代歆悦 朱慧兰 《中国皮肤性病学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期375-381,共7页
目的 探讨紫檀芪(pterostilbene)对长波紫外线(UVA)辐射所致的人成纤维细胞急性损伤的保护作用,初步分析其分子机制。 方法 MTT法测定紫檀芪对人皮肤成纤维细胞活力的影响,紫檀芪与人皮肤成纤维细胞共培养24h后,以20J/cm2的UVA剂量... 目的 探讨紫檀芪(pterostilbene)对长波紫外线(UVA)辐射所致的人成纤维细胞急性损伤的保护作用,初步分析其分子机制。 方法 MTT法测定紫檀芪对人皮肤成纤维细胞活力的影响,紫檀芪与人皮肤成纤维细胞共培养24h后,以20J/cm2的UVA剂量进行照射,然后采用乳酸脱氢酶释放法测定细胞活力,DCFH-DA测定胞内活性氧(cellular reactive oxygen species, ROS)水平,彗星实验检测DNA损伤,Western印迹检测核因子NF-E2 相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)蛋白细胞定位以及siRNA沉默Nrf2。结果 与对照相比,UVA照射后乳酸脱氢酶相对释放率增加为164.53%(P〈0.001)。而UVA照射前4μmol/L和8μmol/L紫檀芪预处理细胞24h,则细胞乳酸脱氢酶相对释放率分别恢复到对照组的100.11%(P〉0.05)和98.69%(P〉0.05)。流式细胞术分析显示,经UVA辐照后,其ROS水平上升至对照细胞的264.4%(P〈0.001),UVA照射前4μmol/L紫檀芪预处理细胞24h,则活性氧(ROS)水平恢复至对照细胞的113.50%(P〈0.05)。彗星实验结果显示,空白对照组细胞的尾部DNA百分比为(1.795±2.147)%,UVA辐照组为(65.50±12.418)%,与空白对照组相比DNA损伤显著增加(t=40.68,P〈0.000 1); 而紫檀芪预处理后再接受UVA辐照组为(13.53±8.152)%,与UVA辐照组相比其DNA损伤显著减轻(t=27.85,P〈0.000 1)。紫檀芪处理提高了细胞核中的Nrf2蛋白水平。转染siRNA-Nrf2后,细胞活性与对照细胞差异无统计学意义(P〉0.05),但经UVA照射,紫檀芪的预处理细 展开更多
关键词 紫檀芪 长波紫外线 皮肤纤维细胞 氧化损伤 NRF2
光甘草定对人皮肤成纤维细胞的作用研究 预览 被引量:1
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作者 王子偲 顾怀宇 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2017年第4期22-26,共5页
目的 探讨光甘草定对人皮肤成纤维细胞的作用。方法 将体外培养的人皮肤成纤维细胞分为空白对照组(仅加入单细胞悬液)、阳性对照组(10 nmol/L的17β-雌二醇处理)及实验组(光甘草定浓度分别为:0.1、1、10、100μmol/L),作用72小时... 目的 探讨光甘草定对人皮肤成纤维细胞的作用。方法 将体外培养的人皮肤成纤维细胞分为空白对照组(仅加入单细胞悬液)、阳性对照组(10 nmol/L的17β-雌二醇处理)及实验组(光甘草定浓度分别为:0.1、1、10、100μmol/L),作用72小时后,采用活细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测法、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)掺入法检测成纤维细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞S期所占比例。结果 10μmol/L实验组和阳性对照组的光密度均明显高于空白对照组(P〈0.05),100μmol/L实验组光密度明显低于空白对照组(P〈0.05),但10μmol/L实验组和阳性对照组光密度比较无显著差异(P〉0.05)。10μmol/L实验组和阳性对照组的EdU标记的阳性细胞百分比明显高于空白对照组(P〈0.05),但10μmol/L实验组和阳性对照组EdU标记的阳性细胞百分比无显著差异(P〉0.05)。10μmol/L实验组和阳性对照组的S期占比明显高于空白对照组(P〈0.05),但10μmol/L实验组和阳性对照组S期占比无显著差异(P〉0.05)。结论 光甘草定可以促进人皮肤成纤维细胞的增殖。 展开更多
关键词 植物雌激素 光甘草定 皮肤纤维细胞 细胞增殖
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