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Notch1信号通路激活在低氧诱导人脐静脉内皮细胞血管形成中的作用 认领
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作者 石紫云 李艳川 +3 位作者 刘飞飞 张雅 袁晓华 王淑娥 《中华细胞与干细胞杂志:电子版》 2020年第3期163-171,共9页
目的观察低氧条件下HIF-1α/VEGF/Notch信号通路在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管生成中的作用。方法将HUVEC进行常氧和低氧[二氯化钴(CoCl2),200μmol/L]诱导,再将常氧和低氧处理的HUVEC应用Notch1信号通路的抑制剂DAPT(30μmol/L,24 h)... 目的观察低氧条件下HIF-1α/VEGF/Notch信号通路在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管生成中的作用。方法将HUVEC进行常氧和低氧[二氯化钴(CoCl2),200μmol/L]诱导,再将常氧和低氧处理的HUVEC应用Notch1信号通路的抑制剂DAPT(30μmol/L,24 h)和激活剂JAG-1(30μmol/L,24 h)干预。通过体外小管形成实验观察低氧对HUVEC血管生成能力的影响。应用RT-PCR和Western blot检测HUVEC中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Notch1信号分子(Notch1、Dell4和JAG-1)的mRNA和蛋白表达。通过Transwell迁移实验和伤口愈合实验观察低氧、DAPT、JAG-1对HUVEC迁移能力的影响。应用MTT法检测低氧及Notch1对HUVEC增殖的影响。两组间比较采用t检验,采用析因设计方差分析低氧和DAPT以及低氧和JAG-1对HUVEC迁移能力、距离、小管形成能力和细胞增殖的交互作用。结果与常氧组比较,低氧组小管总长[(8.18±0.62)mm比(15.43±1.32)mm]增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与常氧组比较,低氧组的HIF-1α、VEGF、MMP-9、Notch1、Dell4和JAG-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量(1.01±0.03比4.43±0.35,1.02±0.03比3.55±0.28,0.98±0.04比3.24±0.25,1.01±0.03比3.22±0.25,0.99±0.02比2.89±0.22,1.02±0.04比2.43±0.19,0.98±0.01比3.13±0.24,0.98±0.02比2.67±0.21,0.97±0.03比2.45±0.19,1.01±0.03比2.44±0.19,1.00±0.04比2.30±0.18,1.03±0.05比2.27±0.18)均升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。Transwell迁移实验和伤口愈合实验显示,低氧条件下,DAPT干预使HUVEC的迁移能力降低,JAG-1干预使HUVEC的迁移能力升高(P均<0.05)。小管形成和MTT法测定显示,低氧条件下,DAPT干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力降低,JAG-1干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力升高(P均<0.05)。析因设计的方差分析结果显示,低氧和JAG-1对迁移细胞数、小管形成和细胞增殖能力交互作用具有协同作用(P<0.05)。� 展开更多
关键词 低氧 血管生成 静脉内皮细胞 低氧诱导因子-1Α 血管内皮细胞生长因子 NOTCH1 信号通路
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可溶性高尿酸对人脐静脉内皮细胞NLRP3炎性体途径的影响 认领
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作者 苏毕·阿吉 尹洪超 《医学研究杂志》 2020年第1期34-40,共7页
目的研究可溶性高尿酸(uric acid,UA)是否通过NLRP3炎性体途径参与人脐静脉内皮细胞活化。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用200μg/ml的UA培养后,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞内NLRP3和pro-IL-1βmRNA表达量;检测细胞间黏... 目的研究可溶性高尿酸(uric acid,UA)是否通过NLRP3炎性体途径参与人脐静脉内皮细胞活化。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用200μg/ml的UA培养后,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞内NLRP3和pro-IL-1βmRNA表达量;检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、E-选择素(E-selectin)、干扰素诱导蛋白10(CXCL10)、C-C原件趋化因子26(CCL26)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA水平;用Western blot法测定NLRP3、pro-IL-1β和IL-1β蛋白表达量;用免疫荧光检测NLRP3与ASC共定位和NF-κB核移位情况;并用荧光探针测定胞质活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果200μg/ml的UA上调黏附分子ICAM-1、E-选择素(P=0.000)和趋化分子CXCL10、CCL26mRNA水平(P<0.05),下调eNOS mRNA水平(P<0.01),并上调细胞内ROS水平,提示HUEVCs处于活化状态。UA对NLRP3、pro-IL-βmRNA和蛋白水平无显著影响;成熟IL-1β也无显著增加。NF-κB没有明显的核移位现象,但NLRP3-ASC复合体显著增加。结论可溶性高UA诱导HUVECs活化,虽然UA诱导NLRP3-ASC复合体体形成,但对IL-1β的产生没有显著影响。因此,在细胞水平,可溶性高UA主要不是通过激活NLRP3炎性体途径诱导人脐静脉内皮细胞活化。 展开更多
关键词 尿酸 静脉内皮细胞 NLRP3炎性体 内皮细胞活化
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麝香乌龙丸对S1P诱导血管内皮细胞通透性的调控作用 认领
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作者 马炜秀 王志文 +2 位作者 袁强 张爱国 曹颖 《疑难病杂志》 CAS 2020年第8期839-844,共6页
目的通过1-磷酸鞘氨醇(S1P)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察麝香乌龙丸提取物对HUVEC通透性的调控作用,及其保护血管屏障、减轻类风湿性关节炎(RA)滑膜炎性反应的可能机制。方法2018年8月—2019年11月于华北理工大学中医学院实验室进... 目的通过1-磷酸鞘氨醇(S1P)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察麝香乌龙丸提取物对HUVEC通透性的调控作用,及其保护血管屏障、减轻类风湿性关节炎(RA)滑膜炎性反应的可能机制。方法2018年8月—2019年11月于华北理工大学中医学院实验室进行实验。以S1P 10μmol/L诱导HUVEC细胞建立血管内皮高通透性模型。将HUVEC分为对照组、S1P诱导组及麝香乌龙丸提取物组(药物组),后2组分别给予S1P 10μmol/L、S1P 10μmol/L+麝香乌龙丸提取物干预。比较3组HUVEC通透性变化及连接蛋白的表达。结果S1P诱导组血管内皮通透性较对照组增高(t/P=9.180/0.001),药物组血管内皮通透性较S1P诱导组降低(t/P=4.206/0.014)。与对照组比较,S1P诱导组ZO-1、claudin-5、occludin蛋白表达减少(t/P=7.393/0.002、15.437/0.000、15.808/0.000),与S1P诱导组比较,药物组3种蛋白表达均增加(t/P=6.586/0.003、3.554/0.024、2.971/0.041)。结论麝香乌龙丸提取物可以通过上调ZO-1、claudin-5及occludin表达,对高浓度S1P诱导的HUVEC通透性增加起到明显抑制作用。 展开更多
关键词 麝香乌龙丸 类风湿性关节炎 静脉内皮细胞 血管内皮细胞通透性
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雌二醇和同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响 认领
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作者 陈海英 刘雨琪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期429-432,436共5页
目的探讨雌二醇(E2)与同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响及可能的作用机制。方法用不同浓度的E2和Hcy处理HUVEC,应用CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测细胞的凋亡率。选取最适... 目的探讨雌二醇(E2)与同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响及可能的作用机制。方法用不同浓度的E2和Hcy处理HUVEC,应用CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测细胞的凋亡率。选取最适浓度的E2和Hcy,设对照组、E2组、Hcy组和E2+Hcy组。采用实时定量RCR和Western blotting检测细胞中MTHFR mRNA和蛋白的表达水平。结果CCK-8法结果显示,E2对HUVEC有一定的促增殖作用,Hcy对HUVEC有抑制增殖的作用。流式细胞术结果显示,E2对HUVEC有抑制凋亡的作用,Hcy对HUVEC有促凋亡作用。选取最适浓度(1×10^-8μmol/L)E2和最适浓度(1×10^-4μmol/L)Hcy作用于细胞,实时定量PCR和Western blotting结果显示,E2组与E2+Hcy组MTHFR mRNA和蛋白的表达增加,而Hcy组无变化。结论E2促进HUVEC增殖,抑制HUVEC凋亡。Hcy抑制HUVEC增殖,促进HUVEC凋亡。E2和Hcy对HUVEC的作用可能与MTHFR的表达有关。 展开更多
关键词 雌二醇 同型半胱氨酸 静脉内皮细胞 静脉血栓
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升麻鳖甲汤加减方对人急性髓系白血病细胞诱导脐静脉内皮细胞迁移、趋化、管腔形成的影响 认领
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作者 王静宇 马邦云 +2 位作者 王梦亚 代兴斌 孙雪梅 《辽宁中医杂志》 CAS 2020年第4期143-148,I0001,共7页
目的研究升麻鳖甲汤加减方在体外对人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞株HL-60以及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖的影响;随后以人急性髓系白血病细胞HL-60的培养上清对人脐静脉... 目的研究升麻鳖甲汤加减方在体外对人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞株HL-60以及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖的影响;随后以人急性髓系白血病细胞HL-60的培养上清对人脐静脉内皮细胞HUVEC进行诱导培养,并加入不同浓度的升麻鳖甲汤加减方进行干预,检测人脐静脉内皮细胞HUVEC迁移、趋化、管腔形成能力的变化,从而揭示升麻鳖甲汤加减方对人急性髓系白血病细胞诱导的脐静脉内皮细胞迁移、趋化、管腔形成的影响。方法体外培养HL-60以及HUVEC细胞,待细胞进入对数生长期后进行相应实验;首先将不同浓度升麻鳖甲汤加减方在体外分别用于干预人急性髓系白血病细胞HL-60和人脐静脉内皮细胞HUVEC,在干预时间达48 h后,采用MTT法分别检测不同浓度升麻鳖甲汤加减方对HL-60以及HUVEC细胞增殖能力的影响;根据MTT实验的数据提示,选择适宜终浓度的升麻鳖甲汤加减方与HL-60细胞培养上清进行混合制备含药条件培养基用于干预HUVEC细胞,并分别运用划痕迁移、Transwell小室趋化以及Matrigel胶小管形成等实验方法观察HUVEC细胞经干预后的迁移、趋化效应以及成管能力的变化。结果不同浓度的升麻鳖甲汤加减方干预48 h后能够分别显著抑制HL-60以及HUVEC细胞的增殖(P<0.01),并且这种增殖抑制效应呈现出明显的时间-浓度依赖性,并且在HL-60和HUVEC两种细胞之间存在差异性细胞毒作用,即对HUVEC细胞的增殖抑制显著高于HL-60细胞(P<0.01);不同终浓度的升麻鳖甲汤加减方对由HL-60细胞上清诱导培养的HUVEC细胞的迁移运动能力均有不同程度的抑制作用(P<0.05),并且细胞迁移率随着药物浓度的增加而下降;细胞Transwell小室趋化实验结果显示,不同终浓度的升麻鳖甲汤加减方可显著降低HL-60细胞上清诱导培养的HUVEC细胞的趋化性(P<0.05);HUVEC细胞小管形成连接� 展开更多
关键词 升麻鳖甲汤加减方 急性髓系白血病细胞 静脉内皮细胞 抗肿瘤血管生成
人脐带间充质干细胞培养上清液对甲状腺乳头状癌细胞诱导人脐静脉内皮细胞血管形成的影响 认领
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作者 丁超 董利阳 +4 位作者 郑婷婷 刘佳梦 康萍 张助 毛朝明 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2020年第3期229-233,238共6页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)血管形成的作用。方法:使用不同浓度的hUCMSCs培... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)血管形成的作用。方法:使用不同浓度的hUCMSCs培养上清液(hUCMSC-CM)刺激甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1;采用基质胶小管形成实验检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞对HUVEC血管形成的影响;CCK-8法检测hUCMSC-CM对TPC-1细胞增殖能力的影响;实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA和蛋白表达及其培养上清液中VEGF的含量。结果:与对照组相比,hUCMSC-CM可显著抑制TPC-1细胞的增殖(P<0.05和P<0.01);经hUCMSC-CM刺激后的TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成能力显著下调(P<0.001),且TPC-1细胞中VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.001),其培养上清液中VEGF含量显著降低(P<0.05)。结论:hUCMSC-CM可显著下调TPC-1细胞中VEGF的表达及分泌,抑制TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成的能力。 展开更多
关键词 带间充质干细胞 甲状腺乳头状癌 血管内皮生长因子 血管形成 静脉内皮细胞
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血竭素高氯酸盐对人脐静脉内皮细胞血管形成功能的影响 认领
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作者 余州 余震 +5 位作者 宋雅娟 王彤 陈琳 宋保强 马显杰 彭湃 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2020年第6期380-382,I0009,共4页
目的探索血竭素高氯酸盐(dracorhodin perchlorate,DP)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的增殖、迁移和管腔样结构形成的影响。方法自2019年1—6月,取体外培养的第4~6代HUVECs,分为对照组... 目的探索血竭素高氯酸盐(dracorhodin perchlorate,DP)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的增殖、迁移和管腔样结构形成的影响。方法自2019年1—6月,取体外培养的第4~6代HUVECs,分为对照组和观察组。对照组在ECM培养基中添加DMSO;观察组添加不同浓度的(0.1、1.0、5.0、10.0和20.0 mmol/L)的DP。处理8 h后,采用小管形成实验检测DP对HUVECs管腔样结构形成的影响;48 h后,采用MTS试剂盒和划痕实验分别检测DP对HUVECs的增殖和迁移的影响。结果与对照组相比,采用5.0、10.0和20.0 mmol/L的DP进行处理,可显著抑制HUVECs的增殖和迁移(P<0.01),同时可显著抑制管腔样结构的形成(P<0.05)。结论DP对HUVECs的增殖和迁移以及管腔样结构形成能力,具有显著的抑制作用。 展开更多
关键词 血竭素高氯酸盐 静脉内皮细胞 增殖 迁移 新生血管形成
不同浓度三七总皂苷对HUVECs增殖及血管生成的作用研究 认领
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作者 范德生 甄蕾 《上海中医药杂志》 2020年第S01期142-146,共5页
目的研究不同浓度三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖和血管生成能力的影响。方法体外培养HUVECs,分为空白对照组、三七总皂苷低浓度组(1 mg/L)、三七总皂苷中浓度组(20 mg/L)、三七总皂苷高浓度组(200 mg/L),各组给予相应浓度... 目的研究不同浓度三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖和血管生成能力的影响。方法体外培养HUVECs,分为空白对照组、三七总皂苷低浓度组(1 mg/L)、三七总皂苷中浓度组(20 mg/L)、三七总皂苷高浓度组(200 mg/L),各组给予相应浓度药物干预,分别孵育24 h、48 h、72 h后采用CCK-8法检测细胞活性;孵育48 h后采用EdU实验检测不同浓度三七总皂苷对HUVECs增殖能力的影响;孵育24 h后采用管腔形成实验检测不同浓度三七总皂苷对HUVECs血管生成能力的影响;孵育48 h后采用荧光定量PCR检测不同浓度三七总皂苷对HUVECs血管生成相关基因VEGF和eNOS mRNA表达的影响。结果CCK-8结果显示,与空白对照组比较,不同浓度三七总皂苷作用24 h、48 h、72 h对HUVEC细胞活性均无明显影响(P>0.05)。EdU结果显示,不同浓度三七总皂苷对HUVECs增殖能力无显著影响(P>0.05)。管腔形成实验结果表明,与空白对照组比较,三七总皂苷中浓度组(20 mg/L)可促进HUVECs血管生成(P<0.05),而三七总皂苷低浓度组(1 mg/L)、三七总皂苷高浓度组(200 mg/L)对HUVECs血管生成能力的影响与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。荧光定量PCR结果显示,三七总皂苷中浓度组(20 mg/L)促进血管生成相关基因VEGF和eNOS mRNA表达,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而与空白对照组比较,三七总皂苷低浓度组(1 mg/L)和三七总皂苷高浓度组(200 mg/L)对VEGF和eNOS mRNA表达无明显影响(P>0.05)。结论不同浓度三七总皂苷对HUVECs增殖能力无明显影响,但三七总皂苷中浓度组(20 mg/L)可促进HUVECs血管形成。 展开更多
关键词 三七总皂苷 骨质疏松 静脉内皮细胞 增殖 血管生成
榆干离褶伞溶栓酶对酒精损伤血管内皮细胞的保护作用 认领
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作者 李芳芳 丛贺 沈明花 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第5期108-114,共7页
目的:研究榆干离褶伞溶栓酶(fibrinolytic enzyme from Lyophyllum ulmarium,LUFE)对酒精所致人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用及其机制。方法:以酒精诱导HUVECs损伤,四甲基偶氮唑蓝法... 目的:研究榆干离褶伞溶栓酶(fibrinolytic enzyme from Lyophyllum ulmarium,LUFE)对酒精所致人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用及其机制。方法:以酒精诱导HUVECs损伤,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活力,检测细胞培养上清液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力;比色法检测细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;吖啶橙-溴化乙啶双染法观察细胞凋亡;用荧光染料双氢罗丹明123和罗丹明123分别检测细胞总活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和线粒体跨膜电位;蛋白印迹法检测Bax、Bcl-2、细胞色素c、cleaved半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,cleaved caspase)-9和cleavedcaspase-3的表达水平。结果:LUFE能够提高内皮细胞存活率,降低LDH和MDA水平,提高SOD、GSH-Px活力,减少ROS的生成,并抑制酒精所致的线粒体跨膜电位的下降和细胞凋亡。Western blot结果表明,LUFE提高Bcl-2蛋白表达水平,并减少细胞色素c、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表达。结论:LUFE对酒精所致血管内皮细胞的损伤有保护作用,其机制可能与其抗氧化、抑制酒精诱导的线粒体途径细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 榆干离褶伞 溶栓酶 静脉内皮细胞 酒精 保护作用
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钩吻总碱抑制人结肠癌细胞增殖及血管新生的作用研究 认领
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作者 王文义 檀兴慧 +4 位作者 张萍萍 杨宇珂 黄梓泓 李德森 吴水生 《中国药房》 CAS 北大核心 2020年第8期957-962,共6页
目的:探讨钩吻总碱(TAG)抑制人结肠癌细胞增殖及血管新生的作用。方法:体外培养人结肠癌细胞HT-29和人脐静脉内皮细胞(HUVEC),经低、中、高剂量TAG(40、80、120μg/m L)干预后,使用倒置荧光显微镜观察两种细胞的形态,采用CCK-8法检测两... 目的:探讨钩吻总碱(TAG)抑制人结肠癌细胞增殖及血管新生的作用。方法:体外培养人结肠癌细胞HT-29和人脐静脉内皮细胞(HUVEC),经低、中、高剂量TAG(40、80、120μg/m L)干预后,使用倒置荧光显微镜观察两种细胞的形态,采用CCK-8法检测两种细胞的存活率,采用流式细胞术检测HT-29细胞的周期变化情况,采用划痕试验、Transwell侵袭试验和管腔形成试验检测HUVEC的迁移率、侵袭率和管腔数量。结果:与空白组比较,TAG各剂量组HT-29细胞和HUVEC均有不同程度的减少,并可见死亡细胞,两者存活率均显著降低(P<0.05或P<0.01);TAG各剂量组G2/M期HT-29细胞比例以及中剂量组G0/G1期细胞比例均显著升高,而TAG各剂量组S期细胞比例以及高剂量组G0/G1期细胞比例均显著降低(P<0.05或P<0.01);TAG各剂量组HUVEC的存活率、迁移率、侵袭率均显著降低,4~24 h各时间点管腔数量均显著减少(P<0.01)。结论:TAG可抑制人结肠癌HT-29细胞和HUVEC的增殖,可改变HT-29细胞的周期,并抑制HUVEC的迁移、侵袭及管腔形成。 展开更多
关键词 钩吻总碱 结肠癌 HT-29细胞 静脉内皮细胞 增殖 迁移 侵袭 血管新生
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阿司匹林联合阿托伐他汀钙对内皮细胞氧化损伤及炎症因子的影响 认领
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作者 李万奎 《实用医药杂志》 2020年第1期47-50,共4页
目的探讨阿司匹林联合阿托伐他汀钙对氧化低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及对炎症因子的影响。方法采用氧化低密度脂蛋白作为诱导,模拟动脉粥样硬化模型,观察阿司匹林联合阿托伐他汀钙对氧化低密度脂蛋白所致... 目的探讨阿司匹林联合阿托伐他汀钙对氧化低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及对炎症因子的影响。方法采用氧化低密度脂蛋白作为诱导,模拟动脉粥样硬化模型,观察阿司匹林联合阿托伐他汀钙对氧化低密度脂蛋白所致内皮细胞损伤的影响。通过四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测HUVEC增殖活力,并计算细胞存活率,检测上清液中白介素-1β(IL-1β)含量、白介素-6(IL-6)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,来分析各组炎症指标变化。结果相对于模型组及阿司匹林组,阿司匹林+阿托伐他汀钙组细胞增殖活力明显升高,存活率明显升高,IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量明显降低。结论阿司匹林联合阿托伐他汀钙可显著改善氧化低密度脂蛋白诱导损伤内皮细胞的增殖活力,提高存活率,抑制了炎性反应。 展开更多
关键词 阿司匹林 阿托伐他汀钙 氧化低密度脂蛋白 静脉内皮细胞 白介素-1Β 白介素-6 肿瘤坏死因子-α
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转染瘦素人胎盘源间充质干细胞对经X射线辐照后人脐静脉内皮细胞的成血管潜能和周围炎症的影响 认领
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作者 Shu CHEN Qian WANG +5 位作者 Bing HAN Jia WU Ding-kun LIU Jun-dong ZOU Mi WANG Zhi-hui LIU 《浙江大学学报:B卷英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第4期327-340,共14页
目的:放创复合伤是一种以血管损伤和促炎细胞因子缺乏为特征的难愈性创伤。瘦素(leptin)的直接应用在血管生成和炎症中起着重要作用。本研究构建了一种可持续稳定的leptin表达系统——leptin修饰的人胎盘来源间充质干细胞(HPMSCs/lepti... 目的:放创复合伤是一种以血管损伤和促炎细胞因子缺乏为特征的难愈性创伤。瘦素(leptin)的直接应用在血管生成和炎症中起着重要作用。本研究构建了一种可持续稳定的leptin表达系统——leptin修饰的人胎盘来源间充质干细胞(HPMSCs/leptin),并探究其对经X射线辐照后的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的成血管潜能及周围炎症的影响和潜在机制。创新点:可持续稳定的leptin表达系统(HPMSCs/leptin)促进受X射线辐照后HUVECs的成血管潜能及外周炎症反应,有助于解决放创复合伤伤口愈合过程中血管损伤和促炎因子缺乏的问题。方法:利用慢病毒载体将leptin基因转染HPMSCs获得HPMSCs/leptin。采用X射线单次照射HUVECs,剂量为20 Gy。细胞迁移侵袭实验技术(Transwell)检测照射后HUVECs的迁移情况。在Transwell体系的基础上,建立HPMSCs与受辐照HUVECs共培养体系。CCK-8比色法测定细胞增殖。酶联免疫吸附法(ELISA)检测促炎细胞因子(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-1α(IL-1α)、IL-6和IL-8)的分泌。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测促血管生成因子(VEGF和bFGF)mRNA的表达。蛋白免疫印迹法(westernblot)检测核因子κB(NF-κB)和JAK/STAT信号通路的相关分子表达。结论:可持续稳定的leptin表达系统(HPMSCs/leptin)具有更好的细胞增殖、迁移和成血管潜能。HPMSCs/leptin单独培养和HPMSCs/leptin与受辐照HUVECs共培养体系中,促炎细胞因子的分泌增加与NF-κB和JAK/STAT信号通路的相互作用有关。HPMSCs/leptin可能促进X射线照射后HUVECs的成血管潜能和外周炎症反应。 展开更多
关键词 瘦素表达系统 血管生成 促炎细胞因子 X线辐射 静脉内皮细胞
藁本内酯体外促进模拟缺血环境血管内皮细胞增殖研究 认领
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作者 杜旌畅 程青青 母昌会 《四川医学》 CAS 2020年第5期463-467,共5页
目的探索藁本内酯对于缺血状态下血管内皮细胞的促增殖作用及其机制。方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为研究对象,细胞被分为对照组、氧糖剥夺(OGD)造模组、给药组以及抑制剂组;CCK-8法检测细胞活性;划痕实验与成血管实验检测细胞迁移及... 目的探索藁本内酯对于缺血状态下血管内皮细胞的促增殖作用及其机制。方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为研究对象,细胞被分为对照组、氧糖剥夺(OGD)造模组、给药组以及抑制剂组;CCK-8法检测细胞活性;划痕实验与成血管实验检测细胞迁移及成血管能力;Western blot法测定细胞中PI3K-p85、总Akt、p-Akt、HIF-1α、VEGF及VEGFR 2的表达。结果与对照组比较,模型组细胞活性与细胞成血管能力下降,差异有统计学意义(P<0.05),细胞迁移能力及PI3K-p85、p-Akt表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05),HIF-1α、VEGF及VEGFR 2的表达则显著上升,差异有统计学意义(P<0.05);给予藁本内酯后,与模型组相比,给药组细胞活力、细胞迁移能力、细胞成血管能力以及相关细胞因子的表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05),在予以LY294002后,与给药组比较,除VEGFR 2外所有指标均出现明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论藁本内酯具有明确的促进体外模拟缺血环境下血管新生的能力,该能力与PI3K-Akt通路的激活有关。 展开更多
关键词 氧糖剥夺 静脉内皮细胞 血管新生 藁本内酯
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茶多酚对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞中MCP-1、IL-6表达水平的影响 认领
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作者 高丽 许伟 +2 位作者 李萍 杨琨 宋琦 《遵义医科大学学报》 2020年第3期333-337,共5页
目的探讨茶多酚(Tea polyphenol,TP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)中单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、白细胞... 目的探讨茶多酚(Tea polyphenol,TP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)中单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)表达水平的影响。方法分别选取一定浓度的TP和一定浓度的牙龈卟啉单胞菌LPS作用于人脐静脉内皮细胞,用ELISA法及Western blot法检测HUVEC中MCP-1、IL-6的表达水平。结果IL-6、MCP-1表达水平在阳性对照组(LPS)HUVEC中明显升高(P<0.05),其在TP预处理组HUVEC中的表达水平则明显降低(P<0.05);此外,IL-6、MCP-1蛋白表达水平也较LPS组显著下降(P<0.05)。结论TP可抑制牙龈卟啉单胞菌LPS诱导的HUVEC中MCP-1、IL-6表达水平上调,具有保护内皮细胞的作用。 展开更多
关键词 静脉内皮细胞 茶多酚 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 单核细胞趋化蛋白-1 细胞介素-6
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卵泡抑素样蛋白1在增生型糖尿病视网膜病变进程中的潜在作用机制初步探讨 认领
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作者 牛瑞 东莉洁 +5 位作者 杜雪利 何燕华 聂泽彤 崔伟娜 陈琼 胡博杰 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期220-226,共7页
目的观察增生型糖尿病视网膜病变(PDR)患者血清中卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)的变化。方法临床检查确诊的PDR患者(PDR组)20例及正常人20名(正常组)纳入研究。人视网膜血管内皮细胞(HRCEC)分为HRCEC空白对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组;人脐静... 目的观察增生型糖尿病视网膜病变(PDR)患者血清中卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)的变化。方法临床检查确诊的PDR患者(PDR组)20例及正常人20名(正常组)纳入研究。人视网膜血管内皮细胞(HRCEC)分为HRCEC空白对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组;人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为HUVEC空白对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组。应用实时定量PCR(RT-PCR)及ELISA测定所有受检者外周血和各组细胞中FSTL1、TGF-β、VEGF、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达。受检者血清中FSTL1、TGF-β1、CTGF、VEGF mRNA和蛋白比较行独立样本t检验;HRCEC空白对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组,HUVEC空白对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组细胞生存力、mRNA表达比较行单因素方差分析。结果PDR组患者血清中FSTL1、TGF-β1、CTGF、VEGF mRNA表达分别为1.79±0.58、0.97±0.21、1.85±0.69、1.38±0.44;FSTL1、TGF-β1蛋白表达分别为(1.19±0.50)、(0.71±0.24)ng/ml和(734.03±116.45)、(649.36±44.23)ng/L。与正常组比较,差异均有统计学意义(tmRNA=0.90、0.21、2.85、1.77,P=0.00、0.00、0.04、0.02;t蛋白=1.88、7.68,P=0.00、0.02)。HRCEC缺氧3 h组、缺氧6 h组细胞生存力分别为0.66±0.05、0.64±0.04;与空白对照组比较,差异有统计学意义(F=13.02,P=0.00)。HUVEC缺氧3 h组、缺氧6 h组细胞生存力分别为0.63±0.06、0.68±0.06;与空白对照组比较,差异有统计学意义(F=26.52,P=0.00)。HRCEC空白对照组、缺氧3 h组细胞中FSTL1、TGF-β1、CTGF、VEGF mRNA表达比较,差异有统计学意义(F=14.75、44.93、85.54、6.23,P=0.01、0.00、0.00、0.03);与HRCEC空白对照组上清液中FSTL1、TGF-β1蛋白表达比较,缺氧3 h组,蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05);缺氧6 h组,TGF-β1蛋白表达差异有统计学意义(P=0.03),FSTL1蛋白表达差异无统计学意义(P=0.68)。HUVEC空白对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组细胞中FSTL1、TGF-β1、CTGF、VEGF mRNA表达比较,差异均有统计学意义(F=19.08、25.12、 展开更多
关键词 卵泡抑素相关蛋白质类 静脉内皮细胞 糖尿病视网膜病变
免疫分子B7-H3对人脐静脉内皮细胞功能的影响 认领
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作者 孙静 杨洁 +4 位作者 吴萍萍 傅丰庆 刘翠平 陈瀚卿 郭云娣 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期187-191,共5页
设计针对B7-H3 1041以及996位点的shRNA,构建相应慢病毒B7-H3载体,研究其表达下调对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)生物学行为的影响。针对B7-H3mRNA序列设计2对不同位点的shRNA,克隆连接至慢病毒载体... 设计针对B7-H3 1041以及996位点的shRNA,构建相应慢病毒B7-H3载体,研究其表达下调对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)生物学行为的影响。针对B7-H3mRNA序列设计2对不同位点的shRNA,克隆连接至慢病毒载体中,与穿梭载体LV3共转染至人肾上皮细胞系293T细胞并包装病毒,逐孔稀释法测定病毒滴度。用聚凝胺浸染HUVEC细胞株,real-time PCR、FACS测定靶细胞B7-H3及其蛋白表达抑制情况,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验分析其迁移能力。结果显示,慢病毒载体可抑制B7-H3及其蛋白的表达,抑制率超过84.7%;CCK-8实验显示B7-H3表达降低后HUVEC的增殖和迁移能力明显降低。以上发现可为进一步研究该分子的生物学功能及其在RA中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 B7-H3 慢病毒载体 静脉内皮细胞 增殖能力 迁移能力
CHIP参与高糖介导下的血管内皮细胞损伤 认领
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作者 乔先栋 刘婷 +1 位作者 洪丽英 付勇南 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1368-1374,共7页
目的:探讨热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(CHIP)在高糖(HG)介导的血管内皮细胞损伤中的作用。方法:培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),利用RNA干扰技术下调CHIP表达,再以5.5 mmol/L正常浓度葡萄糖(NG)或25.5 mmol/L高浓度葡萄糖(HG)... 目的:探讨热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(CHIP)在高糖(HG)介导的血管内皮细胞损伤中的作用。方法:培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),利用RNA干扰技术下调CHIP表达,再以5.5 mmol/L正常浓度葡萄糖(NG)或25.5 mmol/L高浓度葡萄糖(HG)处理24 h,实验前用甘露醇排除渗透压对实验的干扰,接着将细胞分成NG+siRNA NC组、NG+siRNA CHIP组、HG+siRNA NC组和HG+siRNA CHIP组。MTT法和TUNEL染色法分别检测细胞活力和凋亡率;ELISA试剂盒检测内皮素1(ET-1)的表达水平;二氢乙啶荧光染料法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;一氧化氮(NO)、超氧化物岐化酶(SOD)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)试剂盒分别检测细胞内NO水平及SOD、iNOS活性;RT-qPCR检测白细胞介素8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA表达量;Western blot检测CHIP、NADPH氧化酶(NOX)2、NOX4、p38、p65、p-p38、p-p65、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果:与NG+siRNA NC组相比,HG+siRNA NC组HUVECs死亡率、凋亡率及IL-8和MCP-1 mRNA表达水平均升高(P<0.05),细胞内ROS水平升高(P<0.05),SOD活性下降(P<0.05),ET-1、NO水平及iNOS活性升高(P<0.05),pp38、p-p65和Bax蛋白水平升高(P<0.05)。与HG+siRNA NC组相比,HG+siRNA CHIP组HUVECs炎症反应和氧化应激反应明显增强,凋亡率显著升高(P<0.05),p-p38和p-p65蛋白水平升高(P<0.05)。结论:下调CHIP表达可加重HG介导的血管内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病 热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白 静脉内皮细胞 细胞凋亡 氧化应激
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阿托伐他汀钙对缺血再灌注损伤内皮细胞的保护作用及对氧化应激的影响 认领
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作者 李万奎 石春健 《河南医学研究》 CAS 2020年第20期3662-3665,共4页
目的探讨阿托伐他汀钙对缺血再灌注诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及对氧化应激的影响。方法体外培养HUVEC,分为空白对照组、缺氧模型组、阿托伐他汀钙高剂量组、阿托伐他汀钙低剂量组,每组重复10个复孔。缺氧培养制作模拟... 目的探讨阿托伐他汀钙对缺血再灌注诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及对氧化应激的影响。方法体外培养HUVEC,分为空白对照组、缺氧模型组、阿托伐他汀钙高剂量组、阿托伐他汀钙低剂量组,每组重复10个复孔。缺氧培养制作模拟缺血再灌注细胞模型。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测HUVEC增殖活力,检测上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力分析细胞的损伤程度,检测上清液丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC)来分析各组HUVEC氧化应激状态。结果(1)缺氧模型组光密度(OD)值低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);LDH外漏高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。阿托伐他汀钙高、低剂量组OD值高于缺氧模型组,差异有统计学意义(均P<0.05),LDH外漏低于缺氧模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。(2)缺氧模型组MDA水平高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);SOD活性低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);T-AOC低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。阿托伐他汀钙高、低剂量组MDA水平低于缺氧模型组,差异有统计学意义(均P<0.05);SOD活性高于缺氧模型组,差异有统计学意义(均P<0.05);T-AOC高于缺氧模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论阿托伐他汀钙可改善缺血再灌注损伤细胞的增殖活力,减轻细胞的损伤程度,降低氧自由基的损伤,提高抗氧化能力。 展开更多
关键词 阿托伐他汀钙 缺血再灌注损伤 静脉内皮细胞 乳酸脱氢酶 丙二醛 超氧化物歧化酶 总抗氧化能力
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甲状腺素及丙硫氧嘧啶对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶表达的影响 认领
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作者 贾海晗 景淼 +3 位作者 刘畅 高云雁 刘岚春 刘鹏 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期168-171,共4页
目的探讨甲状腺素(T4)及丙硫氧嘧啶(PTU)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞)一氧化氮合酶表达的影响。方法体外培养HUVEC细胞,实验分为6组,分别为对照组(未加T4及PTU),10^-9、10^-7、10^-4 mol/L T4组,PTU组(5μg/ml PTU),10^-4 mol/L T4+PT... 目的探讨甲状腺素(T4)及丙硫氧嘧啶(PTU)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞)一氧化氮合酶表达的影响。方法体外培养HUVEC细胞,实验分为6组,分别为对照组(未加T4及PTU),10^-9、10^-7、10^-4 mol/L T4组,PTU组(5μg/ml PTU),10^-4 mol/L T4+PTU组,作用时间为24 h。采用CCK-8法检测细胞活性;硝酸还原酶法检测细胞培养液一氧化氮(NO)、总一氧化氮合酶(TNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量;蛋白质印迹法检测eNOS蛋白表达水平。结果6组细胞存活率[(100.00±0.00)%、(96.73±1.17)%、(86.20±7.54)%、(47.37±9.10)%、(53.37±5.47)%、(53.40±8.84)%]比较差异有统计学意义(F=29.42,P<0.05);与对照组比较,10^-7、10^-4 mol/L T4组,PTU组和10^-4 mol/L T4+PTU组细胞存活率显著降低(P均<0.05)。6组细胞培养液NO、TNOS含量比较差异有统计学意义(F=3.93、3.46,P均<0.05);与对照组比较,PTU组TNOS含量显著降低(P<0.05);与10^-4 mol/L T4组比较,PTU、10^-4 mol/L T4+PTU组NO含量显著降低(P均<0.05)。6组细胞培养液eNOS含量及蛋白表达水平比较差异无统计学意义(F=0.24、0.17,P均>0.05)。结论高浓度T4可造成体外培养HUVEC细胞活性的损伤,PTU通过调节NO、TNOS起到对其的缓解作用,具体作用机制还需进一步分子生物实验的深入研究。 展开更多
关键词 甲状腺素 一氧化氮 丙硫氧嘧啶 静脉内皮细胞
利拉鲁肽对高糖诱导HUVECs损伤的抗氧化作用及相关机制 认领
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作者 句卫玲 郑淑君 +1 位作者 张娟 甄璐 《中国实用医刊》 2020年第2期67-70,共4页
目的研究利拉鲁肽对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的抗氧化作用及相关机制。方法分离培养HUVECs细胞,分为:N组(对照组)、G组(高糖组)、A组(低剂量高糖组)、B组(高剂量高糖组),各组均干预12、24、48 h后,测定其氧化应激产物和抗... 目的研究利拉鲁肽对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的抗氧化作用及相关机制。方法分离培养HUVECs细胞,分为:N组(对照组)、G组(高糖组)、A组(低剂量高糖组)、B组(高剂量高糖组),各组均干预12、24、48 h后,测定其氧化应激产物和抗氧化产物含量。结果G组氧化应激产物活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)及Nrf2、血红素氧合酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的mRNA表达均明显高于N组(P<0.05);利拉鲁肽干预组细胞中的ROS、MDA、ox-LDL含量均明显低于G组(P<0.05);利拉鲁肽干预组细胞中Nrf2、NQO1、HO1、GSH-PX的mRNA表达量明显高于高糖组(P<0.05);利拉鲁肽的作用效果与干预时间和利拉鲁肽浓度呈正相关。结论利拉鲁肽可通过增强高糖条件下内皮细胞抗氧化因子的活性,减少氧化物生成,减轻内皮细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 高糖诱导 静脉内皮细胞 氧化应激反应
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