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甲烷饱和生理盐水对内毒素导致急性肺损伤模型大鼠的保护作用 预览
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作者 孟庆溪 王伟恒 +2 位作者 孙爱军 席焱海 叶晓健 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第3期396-403,共8页
背景:研究表明甲烷在肠道、肝脏、心肌等多种缺血再灌注损伤疾病中具有显著的抗氧化和抗凋亡作用。甲烷对急性肺损伤的保护作用未见相关研究。目的:分析甲烷饱和生理盐水对由于内毒素导致的大鼠急性肺损伤的保护作用及其可能的机制。方... 背景:研究表明甲烷在肠道、肝脏、心肌等多种缺血再灌注损伤疾病中具有显著的抗氧化和抗凋亡作用。甲烷对急性肺损伤的保护作用未见相关研究。目的:分析甲烷饱和生理盐水对由于内毒素导致的大鼠急性肺损伤的保护作用及其可能的机制。方法:内毒素(20mg/kg)诱导大鼠急性肺损伤。实验分为空白组,对照组(甲烷饱和生理盐水),急性肺损伤组,急性肺损伤组+甲烷组(急性肺损伤甲烷饱和生理盐水治疗)。24h后取材测定肺组织湿干质量比,苏木精-伊红染色及电镜组织学检查,ELISA法检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素1β炎症因子的质量浓度,并检测肺组织丙二醛和超氧化物歧化酶活性;TUNEL检测肺组织中细胞凋亡情况;Westernblot法检测肺组织中caspase-3含量。结果与结论:①空白组和对照组在各项指标上均无显著差异;②与空白组相比,急性肺损伤和急性肺损伤+甲烷组肺组织湿干质量比显著增加(P<0.05),肺组织的炎症反应强度、氧化应激水平和凋亡率均显著增高(P<0.05);③与急性肺损伤组相比,急性肺损伤+甲烷组肺组织湿干质量比,炎症因子、细胞凋亡率、caspase-3表达及丙二醛含量均有显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶活性提高(P<0.05);④结果说明,甲烷饱和生理盐水可以通过降低肺组织氧化应激水平,抑制炎症因子表达,减少细胞凋亡等途径治疗由于内毒素导致的大鼠急性肺损伤。 展开更多
关键词 甲烷 内毒素 急性肺损伤 湿干重比 氧化应激 MDA SOD 炎症反应 凋亡 caspase-3 组织构建 甲烷 内毒素 急性肺损伤 肿瘤坏死因子α 白细胞介素6 白细胞介素1Β 丙二醛 超氧化物歧化酶 组织工程
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自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用
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作者 陈红光 毛幸 +5 位作者 张鹏 田婧 王桂平 白广 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期89-92,共4页
目的评价自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠RAW264.7细胞,采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(Con组)、LPS组、LPS+氢组(LPS+H2组)和LPS+氢+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS+H2+3-MA组)。LPS组... 目的评价自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠RAW264.7细胞,采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(Con组)、LPS组、LPS+氢组(LPS+H2组)和LPS+氢+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS+H2+3-MA组)。LPS组给予终浓度为1μg/ml的LPS孵育6h;LPS+H2组给予终浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6mmol/L的含氢培养液孵育6h;LPS+H2+3-MA组先给予终浓度为2mmol/L的3-MA孵育1h,然后给予终浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6mmol/L的含氢培养液孵育6h。采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR),采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP),透射电镜下计数自噬体,采用Westernblot法测定细胞PTEN诱导的蛋白激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和Beclin-1的表达。结果与Con组比较,LPS组RCR和MMP降低,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,自噬体计数升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+H2组RCR和MMP升高,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,自噬体计数升高(P<0.05);与LPS+H2组比较,LPS+H2+3-MA组RCR和MMP降低,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达下调,自噬体计数降低(P<0.05)。结论自噬增强参与了氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤。 展开更多
关键词 内毒素 巨噬细胞 线粒体 自噬
PI3K/Akt信号通路在内毒素攻击大鼠肺泡上皮细胞时一氧化碳上调线粒体融合蛋白中的作用
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作者 黄漫迎 史佳 +4 位作者 张圆 吴丽丽 宫丽荣 董树安 余剑波 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期728-731,共4页
目的 评价1-磷酯酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在内毒素攻击大鼠肺泡上皮细胞时一氧化碳(CO)上调线粒体融合蛋白表达中的作用.方法 将肺泡上皮细胞用含10%胎牛血清的1%青链双抗F12K完全培养基于37℃、5%CO2的培养箱... 目的 评价1-磷酯酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在内毒素攻击大鼠肺泡上皮细胞时一氧化碳(CO)上调线粒体融合蛋白表达中的作用.方法 将肺泡上皮细胞用含10%胎牛血清的1%青链双抗F12K完全培养基于37℃、5%CO2的培养箱中培养,采用随机数字表法分为10组(n=5):对照组(C组);内毒素组(L组)向培养基中加入10 μg/ml脂多糖(LPS);LPS+外源性CO释放剂CORM-2组(L+CO组)向培养基中加入CORM-2 100 μmol/L,1h后向培养基中加入10 μg/ml LPS;LPS+PI3K抑制剂LY294002组(L+ LY组)向培养基中加入25 μmol/LLY294002,1h后向培养基中加入10 μg/ml LPS;LPS+外源性CO释放剂CORM-2+ PI3K抑制剂LY294002组(L+CO+LY组)向培养基中加入25 μmol/L LY294002,1h后向培养基中加入CORM-2 100μmol/L,1h后向培养基中加入10 μg/ml LPS;LPS+无活性的CO释放剂iCORM-2组(L+iCO组)向培养基中加入iCORM 100 μmol/L,1h后向培养基中加入10 μg/ml LPS;LPS+二甲基亚砜(DM-SO)组(L+D组)向培养基中加入等浓度DMSO,1h后加入1μg/ml LPS;外源性CO释放剂CORM-2组(CO组)向培养基中加入CORM-2 100 μmol/L;PI3K抑制剂LY294002组(LY组)向培养基中加入25 μmol/L LY294002;外源性CO释放剂CORM-2+PI3K抑制剂LY294002组(CO+LY组)向培养基中加入25 μmol/L LY294002,1 h后向培养基中加入CORM-2 100 μmol/L.孵化24h后收集细胞,检测MDA含量和SOD活性,采用Western blot法检测血红素氧合酶-1(HO-1)、磷酸化Akt(p-Akt)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)、Mfn2和视神经萎缩蛋白1(OPA1)的表达.结果 与C组比较,L组、L+CO组、L+LY组、L+CO+LY组、L+iCO组、L+D组MDA含量升高,SOD活性降低,L组HO-1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-Akt表达上调(P<0.05);与L组比较,L+CO组MDA含量降低,SOD活性升高,L+LY组MDA含量升高,SOD活性降低,L+CO组HO-1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-Akt表达上调,L+LY组HO-1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-Akt表达下调(P<0.05);与L+CO组比较,L+CO+LY组MDA含量升高,SOD活性降低,HO-1、Mfn1、Mfn2、OP 展开更多
关键词 1-磷酯酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 内毒素 一氧化碳 肺泡 上皮细胞 线粒体蛋白质
不同方式营养支持对重症急性胰腺炎患者肠道功能和C反应蛋白、血浆内毒素的影响
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作者 陈东升 《中国基层医药》 CAS 2018年第22期2876-2880,共5页
目的 探讨不同方式营养支持对重症急性胰腺炎(SAP)患者肠道功能和C反应蛋白(CRP)、血浆内毒素(LPS)的影响.方法 选取运城市中心医院2012年8月至2016年9月治疗的SAP患者112例,采用随机数字表法将患者分为三组:完全肠外营养组(TPN... 目的 探讨不同方式营养支持对重症急性胰腺炎(SAP)患者肠道功能和C反应蛋白(CRP)、血浆内毒素(LPS)的影响.方法 选取运城市中心医院2012年8月至2016年9月治疗的SAP患者112例,采用随机数字表法将患者分为三组:完全肠外营养组(TPN组,n=37例)、早期肠内营养组(EEN组,n=37例)、肠外+早期肠内营养组(PN+EEN组,n=38例).分别在入院1 d、营养支持7 d、14 d检测三组患者的CRP、LPS、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)水平,在入院1 d、营养支持14 d检测三组患者的D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)水平,并在营养支持14 d后对比三组患者感染、腹胀腹泻、多器官功能衰竭综合征(MODS)、消化道出血等的发生情况.结果 营养支持7 d、14 d后PN+EEN组血清CRP、LPS、TNF-α 水平[7 d分别为(35.56±4.54)mg/L、(1.59±0.58)EU/L、(48.56±5.25)ng/L,14 d分别为(8.68±2.36)mg/L、(1.23±0.43)EU/L、(38.63±4.82)ng/L],均显著低于TPN组[7 d分别为(60.86±5.63)mg/L、(1.91±0.59)EU/L、(54.10±4.02)ng/L,14 d分别为(28.38±2.47)mg/L、(1.62±0.52)EU/L、(44.51±4.58)ng/L]和EEN组[7 d分别为(59.58±5.25)mg/L、(1.89±0.61)EU/L、(52.54±5.13)ng/L,14 d分别为(27.45±2.13)mg/L、(1.58±0.46)EU/L、(43.21±5.20)ng/L],差异均有统计学意义(tTPN组=21.451、35.321、2.369、3.544、5.121、5.413,t EEN组=21.212、36.127、2.183、3.405、3.320、3.957,均P〈0.05).营养支持14 d后PN+EEN组的D-乳酸、DAO水平[(5.27±1.01)mg/L、(5.78±1.94)U/L]低于TPN组[(8.62±1.26)mg/L、(9.32±2.04)U/L]和EEN组[(8.43±1.08)mg/L、(8.98±2.01)U/L](tTPN组=12.619、12.999,tEEN组=7.649、6.968,均P〈0.05).营养支持治疗14 d后,PN+EEN组患者腹胀腹泻、MODS、感染的发生例数分别为4例、2例、5例,均明显少于EEN组的11例、8例、12例和TPN组的12例、9例、13例,差异均有统计学意义(χ2=5.361、4.321、4. 展开更多
关键词 胰腺炎 急性坏死性 营养支持 胃肠外营养 C反应蛋白质 内毒素 乳酸 临床对照试验
丙二醛、超氧化物歧化酶及内毒素在大鼠布加综合征模型肝损伤中的表达及意义
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作者 朱楠 成德雷 +1 位作者 方伟伟 吕维富 《中华放射学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期554-559,共6页
目的探讨丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及内毒素(ET)在大鼠布加综合征(BCS)肝损伤模型中的表达及意义。 方法通过部分结扎大鼠肝后段下腔静脉建立BCS动物模型。所有实验大鼠分为3组:健康对照组(12只)、模型组(48只)... 目的探讨丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及内毒素(ET)在大鼠布加综合征(BCS)肝损伤模型中的表达及意义。 方法通过部分结扎大鼠肝后段下腔静脉建立BCS动物模型。所有实验大鼠分为3组:健康对照组(12只)、模型组(48只)和假手术组(48只),模型组及假手术组又各分4个亚组(实验1、3、6、12周),每亚组12只大鼠。行DSA证实造模成功后每组随机抽取9只大鼠处死,留取血清及肝脏组织,采用双抗体夹心法检测肝匀浆及血清中MDA、SOD及ET的表达量。通过Levene法检验所测数据符合方差齐性后,以方差分析比较组内、组间的差异,采用LSD法行组内、组间两两比较,采用Pearson法行MDA、SOD及ET相关性分析。 结果模型组大鼠术后肝匀浆及血清中各时间点的MDA、SOD、ET值与对照组及假手术组中相应指标比较,差异均具有统计学意义(MDA:肝匀浆F值分别为52.906、219.016,血清分别为21.573、43.878;SOD:肝匀浆F值分别为22.927、19.317,血清分别为10.841、31.643;ET:肝匀浆F值分别为33.588、105.515,血清分别为40.832、46.323;P值均〈0.05)。模型组术后各时间点肝匀浆MDA值差异有统计学意义(F=7.716,P=0.001),血清MDA值差异无统计学意义(F=1.965,P=0.139);模型组肝匀浆及血清SOD及ET值在术后各时间点比较,差异均有统计学意义(SOD:F值分别为17.053、7.903;ET:F值分别为19.870、39.372;P值均〈0.05),两者在肝匀浆及血清中含量均从术后1周开始逐渐上升,6周达峰值,第12周稍下降。模型组各时间点肝匀浆MDA及ET较假手术组上升值均高于血清中相应上升值。模型组肝匀浆及血清中MDA与SOD均为负相关(r分别为-0.814、-0.591,P均为0.001)、与ET均为正相关(r分别为0.761、0.422,P分别为0.004、0.001),SOD与ET均为负相关(r分别为-0.726、-0.490,P均为0.001)� 展开更多
关键词 缺氧 内毒素 氧自由基 布加综合征
NLRP3炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用
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作者 陈红光 张杨 +5 位作者 韩焕芝 毛幸 田婧 冯竞成 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期1241-1244,共4页
目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,采用随机数字表法随机分为4组(n=6):对照组(C组)、LPS组、富氢液+LPS组(LPS+H2组)... 目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,采用随机数字表法随机分为4组(n=6):对照组(C组)、LPS组、富氢液+LPS组(LPS+H2组)和富氢液+LPS+ATP组(LPS+ATP+H2组)。LPS组给予浓度为1μg/ml的LPS孵育30min。LPS+H2组和LPS+ATP+H2组同时给予浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6mmol/L的富氢液孵育30min,然后LPS+ATP+H2组给予浓度为1nmol/L的ATP孵育6h。采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP),采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR)。采用Westernblot法测定细胞NLRP3、caspase-1和凋亡相关点状蛋白(ASC)的表达。采用ELISA法检测上清液IL-1β、IL-18和IL-6的浓度。结果与C组比较,LPS组MMP和RCR降低,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度升高,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达上调(P<0.05);与LPS比较,LPS+H2组MMP和RCR升高,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度降低,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达下调(P<0.05);与LPS+H2组比较,LPS+ATP+H2组MMP和RCR升高,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度降低,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达下调(P<0.05)。结论富氢液可通过抑制NLRP3炎症小体激活,减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤。 展开更多
关键词 内毒素 巨噬细胞 线粒体 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3
右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时HIF-1α表达的影响
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作者 毛幸 陈红光 +4 位作者 闫梦莹 冯竞成 王国林 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1505-1508,共4页
目的评价右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时缺氧诱导因子-1(HIF-1α)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%~70%时,采用随机数字表法分为4组(n=16):对照组(Con组)、右美... 目的评价右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时缺氧诱导因子-1(HIF-1α)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%~70%时,采用随机数字表法分为4组(n=16):对照组(Con组)、右美托咪定组(Dex组)、脂多糖组(LPS组)和LPS+右美托咪定组(LPS+Dex组)。Con组加入PBS缓冲液;Dex组加入1μmol/L右美托咪定;LPS组和LPS+Dex组均给予1μg/ml的LPS;LPS+Dex组于加入LPS后立即给予1μmol/L右美托咪定,各组孵育24h。采用TUNEL法测定细胞凋亡率,采用JC-1法测定线粒体膜电位水平,采用荧光酶标仪法测定ROS含量,采用酶标仪法测定ATP含量,采用Westernblot法测定HIF-1α、细胞色素c(Cytc)、caspase-9和cleavedcaspase-3的表达水平。结果与Con组相比,LPS组巨噬细胞凋亡率和ROS含量升高,ATP含量和线粒体膜电位水平降低,HIF-1α、Cytc、caspase-9和cleavedcaspase-3表达上调(P<0.05),Dex组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组相比,LPS+Dex组巨噬细胞凋亡率和ROS含量降低,ATP含量和线粒体膜电位水平升高,HIF-1α表达上调,Cytc、caspase-9和cleavedcaspase-3表达下调(P<0.05)。结论右美托咪定可减轻内毒素致巨噬细胞氧化应激损伤,改善线粒体功能,抑制线粒体途径凋亡,其机制可能与上调HIF-1α表达有关。 展开更多
关键词 右美托咪咙 内毒素 巨噬细胞 线粒体 细胞凋亡 缺氧诱导因子 1a亚基
Nrf2/HO-1信号通路在远端缺血预处理减轻小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用 被引量:1
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作者 巩红岩 郑芳 +3 位作者 贾志杰 刘景景 董铁立 赵国安 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期245-249,共5页
目的 评价核转录因子NF-E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路在远端缺血预处理减轻小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用.方法 健康雄性C57BL/6小鼠68只,6-8周龄,体重22- 26 g,采取随机数字表法分为4组(n=17):对照组(C组)... 目的 评价核转录因子NF-E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路在远端缺血预处理减轻小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用.方法 健康雄性C57BL/6小鼠68只,6-8周龄,体重22- 26 g,采取随机数字表法分为4组(n=17):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)、远端缺血预处理组(RIPC组)、鸦胆子苦醇+远端缺血预处理组(B+RIPC组).C组气管内注入生理盐水100μl;ALI组气管内注入LPS 5 mg/kg制备急性肺损伤模型;RIPC组于制备急性肺损伤模型前1h,施行远端缺血预处理:将止血带置于小鼠右后肢,充气5 min后放气5 min,共6个循环;B组于制备急性肺损伤模型前10 d开始,隔天腹腔注射Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇2 mg/kg(溶于1%二甲基亚砜100μl中);B+RIPC组于制备急性肺损伤模型前10d,隔天腹腔注射鸦胆子苦醇2 mg/kg,模型制备前1h时行远端缺血预处理.模型制备后24 h时,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白浓度,并行中性粒细胞计数;然后处死小鼠,取肺组织,计算含水率,光镜下观察病理学结果,采用比色法测定MPO活性,采用ELISA法检测IL-1β和TNF-α的含量,采用Western blot法测定Nrf2、HO-1和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平.结果 与C组比较,ALI组肺组织含水率、MPO活性、IL-1β和TNF-α含量、BALF中性粒细胞计数和蛋白浓度升高,肺组织Nrf2、HO-1和HMGB1表达上调(P<0.05);与ALI组比较,RIPC组肺组织含水率、MPO活性、IL-1β和TNF-α含量、BALF中性粒细胞计数和蛋白浓度降低,肺组织Nrf2和HO-1表达上调,HMGB1表达下调(P<0.05),病理学损伤减轻;与RIPC组比较,B+RIPC组组肺组织含水率、MPO活性、IL-1β和TNF-α含量、BALF中性粒细胞计数和蛋白浓度升高,肺组织Nrf2和HO-1表达下调,HMGB1表达上调(P<0.05),病理学损伤加重.结论Nrf2/HO-1信号通路的激活参与了远端缺血预处理减轻大鼠内毒素性急性肺损伤. 展开更多
关键词 NF-E2相关因子2 血红素加氧酶-1 缺血预处理 呼吸窘迫综合征 成人 内毒素
口服肠道微生态制剂治疗非酒精性脂肪性肝病的疗效观察
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作者 夏晨梅 陈霞 +1 位作者 李倩倩 金玲肖 《中国基层医药》 CAS 2018年第10期1234-1237,共4页
目的 探讨非酒精性脂肪性肝病患者接受微生态制剂口服治疗的临床价值。方法 选取非酒精性脂肪性肝病患者100例为研究对象,对临床资料进行回顾性分析,根据患者治疗方法的不同分为两组,接受基础治疗患者50例为对照组,在基础治疗... 目的 探讨非酒精性脂肪性肝病患者接受微生态制剂口服治疗的临床价值。方法 选取非酒精性脂肪性肝病患者100例为研究对象,对临床资料进行回顾性分析,根据患者治疗方法的不同分为两组,接受基础治疗患者50例为对照组,在基础治疗上加用微生态制剂口服治疗50例为观察组,分析两组疗效。结果 观察组总有效率(54.00%)明显高于对照组(30.00%)(χ2=5911,P=0015);治疗后,观察组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)、稳定胰岛素抵抗指数(HOMA-R)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、D乳酸、内毒素水平均明显优于对照组(均P<0.05);两组不良反应发生率差异无统计学意义(400%比2.00%,χ2 =0343,P=0.558)。结论 微生态制剂口服治疗非酒精性脂肪性肝病,可以降低患者的肠黏膜通透性,改善肠源性内毒素血症,促进患者预后的改善。 展开更多
关键词 脂肪肝 胃肠道 微生物学技术 内毒素
早期肠内营养对重症急性胰腺炎患者血清内毒素水平和肠黏膜通透性的影响
10
作者 何战鹏 王奕平 +1 位作者 王志文 李海玲 《中国基层医药》 CAS 2018年第10期1263-1266,共4页
目的 研究早期肠内营养(EN)对重症急性胰腺炎患者血清内毒素和肠黏膜通透性的影响。方法 选取70例重症急性胰腺炎患者为研究对象,采用随机数字表法分为肠外营养(PN)和EN组,每组35例。PN组给予PN干预,EN组则给予... 目的 研究早期肠内营养(EN)对重症急性胰腺炎患者血清内毒素和肠黏膜通透性的影响。方法 选取70例重症急性胰腺炎患者为研究对象,采用随机数字表法分为肠外营养(PN)和EN组,每组35例。PN组给予PN干预,EN组则给予EN干预。对比干预前、干预1周和干预2周患者血清内毒素水平、尿液乳果糖排泄率/甘露醇排泄率比值及治疗前后炎性因子水平。结果 干预前两组血清内毒素水平及尿液乳果糖排泄率/甘露醇排泄率比值差异均无统计学意义(t=0.274,P=0.452;t=0.035,P=0.885),干预1周和干预2周后EN组血清内毒素水平及尿液乳果糖排泄率/甘露醇排泄率比值均远低于PN组(t=9.024、10761,P=0000、0.000;t=6.935、8.358,P=0.000、0.000);治疗后,EN组TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8水平均低于PN组(t=12.674、10.318、9.754、8.307,P=0.000、0.000、0.000、0.002)。结论 EN对重症急性胰腺炎患者血清内毒素和肠黏膜通透性的影响大,与PN比,可更好促进血清内毒素的清除,降低肠黏膜通透性,值得推广。 展开更多
关键词 胃肠外营养 胰腺炎 急性坏死性 内毒素
内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时P13K/Akt信号通路在线粒体分裂中的作用
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作者 曹涵冰 史佳 +3 位作者 宫丽荣 张圆 董树安 余剑波 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期618-621,共4页
目的评价内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)信号通路在线粒体分裂中的作用。方法将肺泡Ⅱ型上皮细胞以密度2×10^5/ml接种于6孔板,采用随机数字表法将其分为6组(n=10):空白对照组(C... 目的评价内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)信号通路在线粒体分裂中的作用。方法将肺泡Ⅱ型上皮细胞以密度2×10^5/ml接种于6孔板,采用随机数字表法将其分为6组(n=10):空白对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+CORM一2组(L+CO组)、LPS+I|Y294002组(L+LY组)、LPS+无活性的CORM-2(iCORM-2)组(L+iCO组)、LPS+甲基亚砜组(L+D组)。L组、L+CO组、L+LY组、L+iCO组和L+D组采用10Ixg/mlLPS孵育24h;于LPS孵育前1h时,L+CO组、L+LY组、LPS+iCO组分别加入CORM-2100μmol、LY29400225I-Lg、iCORM-2100μmol:L+D组于LPS孵育前1h加入0.1%二甲基亚砜100Ixmol。细胞孵育结束后,采用ELISA法测定培养液TNF-a和IL-6浓度。采用Westernbolt法测定细胞磷酸化Akt(p-Akt)、血红素加氧酶-1(HO-1)、线粒体动力相关蛋白1(Drpl)、线粒体分裂相关蛋白1(Fisl)的表达。结果与C组比较,L组、L+CO组、L+LY组、L+iCO组和L+D组培养液TNF-a和IL-6浓度升高,p-Akt、HO-1、Drpl和Fisl表达上调(P〈0.05)。与L组比较,L+C0组TNF-a和IL-6浓度降低,p-Akt和HO-1表达上调。Drpl和Fisl表达下调.L+LY组TNF-a和IL-6浓度升高,p-Akt和HO.1表达下调,Drpl和Fisl表达上调(P〈0.05)。结论内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时P13K/Akt信号通路激活可抑制线粒体分裂。 展开更多
关键词 1-磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 内毒素 线粒体 上皮 细胞 肺泡
自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用
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作者 毛幸 闫梦莹 +4 位作者 陈红光 冯竞成 王国林 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期992-995,共4页
目的 评价自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用.方法 体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,细胞常规接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%时,采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(Con组)、LPS组、LPS+右美托咪定组... 目的 评价自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用.方法 体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,细胞常规接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%时,采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(Con组)、LPS组、LPS+右美托咪定组(LPS+Dex组)和LPS+右美托咪定+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS+Dex+3-MA组).Con组加入PBS培养12 h;LPS组加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS孵育12 h;LPS+Dex组先加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS,随后立即加入终浓度为1μmol∕L的右美托咪定孵育12 h;LPS+Dex+3-MA组先加入终浓度为2 mmol∕L的3-MA孵育1 h,再加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS,随后立即加入终浓度为1μmol∕L右美托咪定孵育12 h.采用CCK-8法检测细胞活力,采用ELISA法测定上清液NO、TNF-α和IL-1β的浓度,采用Western blot法测定微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、LC3Ⅱ、泛素结合蛋白(P62)和Bcelin-1的表达水平,计算LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值.结果 与Con组相比,LPS组巨噬细胞活力降低,TNF-α、IL-1β和NO的浓度升高,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值升高,P62和Beclin-1的表达上调(P<0.05);与LPS组相比,LPS+Dex组巨噬细胞活力升高,TNF-α、IL-1β和NO的浓度降低,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值升高,P62表达下调,Beclin-1表达上调(P<0.05);与LPS+Dex组相比,LPS+Dex+3-MA组巨噬细胞活力降低,TNF-α、IL-1β和NO的浓度升高,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值降低,P62表达上调,Beclin-1表达下调(P<0.05).结论 自噬增强参与了右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应. 展开更多
关键词 右美托咪啶 自噬 内毒素 巨噬细胞 炎症
M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素诱导人肺微血管内皮细胞损伤中的作用
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作者 刘强胜 颜学滔 +7 位作者 刘安鹏 袁清红 沈石文 郑菲 张宗泽 陈凯 王焱林 詹佳 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期996-1000,共5页
目的 评价M3受体在盐酸戊乙奎醚(PHC)减轻内毒素(LPS)诱导人肺微血管内皮细胞损伤中的作用.方法 正常人肺微血管内皮细胞和M3 shRNA转染人肺微血管内皮细胞,以1×105个∕ml的密度接种于6孔板(2 ml∕孔)或培养瓶(4 ml∕瓶)中,采用随... 目的 评价M3受体在盐酸戊乙奎醚(PHC)减轻内毒素(LPS)诱导人肺微血管内皮细胞损伤中的作用.方法 正常人肺微血管内皮细胞和M3 shRNA转染人肺微血管内皮细胞,以1×105个∕ml的密度接种于6孔板(2 ml∕孔)或培养瓶(4 ml∕瓶)中,采用随机数字表法分为5组(n=5):对照组(C组)、LPS组、PHC+LPS组(P+LPS组)、LPS+M3 shRNA转染组(LPS+shRNA组)和PHC+LPS+M3 shRNA转染组(P+LPS+shRNA组).C组不给予药物处理;余各组均加入终浓度为0.1μg∕ml LPS;P+LPS组和P+LPS+shRNA组于加入LPS前1 h加入PHC 2μg∕ml;LPS+shRNA组和P+LPS+shRNA组以含2.5 nmol∕L M3受体shRNA的质粒转染细胞.加入LPS后1 h时,采用流式细胞仪测定内皮细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)的含量;免疫荧光法检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)和血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的表达;Western blot法检测NF-κB p65和IκB的表达;ELISA法测定TNF-α和IL-6的含量;实时定量PCR法分别检测加入LPS后10、30和60 min时M3受体mRNA表达水平.结果 与C组比较,LPS组和P+LPS组F-actin含量降低,VE-cadherin和IκB表达下调,TNF-α和IL-6含量升高,MLCK和NF-κB p65表达上调(P<0.05);与C组比较,LPS组M3受体mRNA表达上调(P<0.05),P+LPS组差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组比较,P+LPS组和LPS+shRNA组F-actin含量升高,VE-cadherin和IκB表达上调,TNF-α和IL-6浓度降低,MLCK、NF-κB p65和M3受体mRNA表达下调(P<0.05);与P+LPS组比较,P+LPS+shRNA组F-actin含量升高,VE-cadherin和IκB表达上调,TNF-α和IL-6浓度降低,MLCK、NF-κB p65和M3受体mRNA表达下调(P<0.05).结论 PHC可通过干扰M3受体,抑制NF-κB介导炎性反应,减轻LPS诱导的人肺微血管内皮细胞损伤. 展开更多
关键词 受体 毒蕈碱M3 胆碱能拮抗剂 内毒素 皮细胞
内毒素耐受对人正常前列腺上皮细胞分泌IL-6和IL-8的影响
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作者 黄煜 郑硕 +3 位作者 曹德宏 刘振华 杨璐 魏强 《国际泌尿系统杂志》 2018年第1期1-6,共6页
目的 研究发现前列腺组织炎症在前列腺增生的发生与进展中有着重要作用.方法 内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)现象存在于人组织上皮细胞中如肠上皮细胞和人牙龈上皮细胞等,并可能影响组织的炎症和免疫反应.产生内毒素/脂多糖(Lip... 目的 研究发现前列腺组织炎症在前列腺增生的发生与进展中有着重要作用.方法 内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)现象存在于人组织上皮细胞中如肠上皮细胞和人牙龈上皮细胞等,并可能影响组织的炎症和免疫反应.产生内毒素/脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的G-菌如大肠埃希菌是影响前列腺炎的主要病原体.因此,本研究拟通过分析LPS反复刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中细胞炎性因子IL-6和IL-8表达,探讨是否内毒素耐受现象存在于人前列腺上皮细胞中.结果 采用1μg/mL大肠杆菌(Escherichia coli) LPS刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1 24 h,洗涤细胞后,给予1μg/mL浓度LPS再次刺激24 h,构建内毒素耐受模型.采用液相芯片技术检测细胞培养液中细胞因子IL-6和IL-8分泌水平的变化.结果LPS刺激后6h和24 h,IL-6和IL-8分泌水平均呈现上升趋势(P<0.05),较空白对照组有明显增高(P<0.05),LPS反复刺激后,诱导细胞耐受后,IL-6和IL-8分泌水平较第1次刺激后明显降低(P<0.05).结论 内毒素耐受现象存在于RWPE-1中,能抑制RWPE-1细胞因子IL-6和IL-8的表达,进而可能影响前列腺组织的炎症和免疫反应. 展开更多
关键词 前列腺 内毒素 白细胞介素6 白细胞介素8
肠-肝轴在炎症性肠病发病机制中的作用 预览
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作者 施莹莹 陈颖伟 《胃肠病学》 2018年第7期429-432,共4页
炎症性肠病(IBD)是一种病因和发病机制未明的慢性复发性肠道炎性疾病,肝胆系统症状是其最常见的肠外表现。肠道与肝脏在结构和功能上紧密联系、相互影响,称之为"肠-肝轴"。研究发现,胆汁酸肠肝循环异常、肠道细菌和内毒素移位以及... 炎症性肠病(IBD)是一种病因和发病机制未明的慢性复发性肠道炎性疾病,肝胆系统症状是其最常见的肠外表现。肠道与肝脏在结构和功能上紧密联系、相互影响,称之为"肠-肝轴"。研究发现,胆汁酸肠肝循环异常、肠道细菌和内毒素移位以及淋巴细胞归巢紊乱可能通过肠-肝轴参与IBD的发病。本文就肠-肝轴在IBD发病机制中的作用作一综述。 展开更多
关键词 炎症性肠病 肠-肝轴 胆汁酸 内毒素 淋巴细胞归巢
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6例血液内毒素阳性精神分裂症患者的脑脊液内毒素分析
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作者 律东 林志雄 +9 位作者 麦奇 罗旭东 戴准 杨志江 冼君定 廖德权 殷静雯 颜海锋 王丽静 林举达 《神经疾病与精神卫生》 2018年第6期427-429,共3页
目的探讨血液内毒素(LPS)、脑脊液LPS与精神分裂症的相关性。方法回顾性分析6例血液LPS检测阳性的精神分裂症患者的血液、脑脊液检验结果。结果6例患者血液LPS水平为0.063—0.669 EU/ml,脑脊液LPS水平为0~1.018EU/ml,其中4例... 目的探讨血液内毒素(LPS)、脑脊液LPS与精神分裂症的相关性。方法回顾性分析6例血液LPS检测阳性的精神分裂症患者的血液、脑脊液检验结果。结果6例患者血液LPS水平为0.063—0.669 EU/ml,脑脊液LPS水平为0~1.018EU/ml,其中4例阳性。3例血液白细胞计数〉10×10^9/L,1例中性粒细胞〉70%;血清抗链球菌溶血素O(ASO)为25~606 IU/ml,其中1例ASO〉116 IU/ml。结论血液LPS阳性的精神分裂症患者,部分脑脊液LPS阳性,考虑感染与精神分裂症的发病相关,脑外细菌感染可能是精神分裂症的始发病因。 展开更多
关键词 精神分裂症 内毒素 隐性感染
注射用伏立康唑细菌内毒素检查方法研究 预览
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作者 王红平 黄梅梅 荣祖元 《现代医药卫生》 2017年第13期1948-1950,共3页
目的建立统一的注射用伏立康唑(VRC)细菌内毒素检查方法。方法按2015的版《中华人民共和国药典:四部》通则1 143细菌内毒素检查凝胶法,使用2个厂家的鲎试剂对5个生产厂家的13批VRC样品进行细菌内毒素检查的方法学研究。结果不同厂家... 目的建立统一的注射用伏立康唑(VRC)细菌内毒素检查方法。方法按2015的版《中华人民共和国药典:四部》通则1 143细菌内毒素检查凝胶法,使用2个厂家的鲎试剂对5个生产厂家的13批VRC样品进行细菌内毒素检查的方法学研究。结果不同厂家注射用VRC稀释至0.67 mg/m L均可排除干扰作用。结论建议将注射用VRC细菌内毒素检查项限值统一为0.75 EU/mg。 展开更多
关键词 三唑 嘧啶 注射剂 内毒素 细菌毒素 鲎试验
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PKCα/HO-1信号通路在内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤中的作用:与Mfn1的关系 被引量:1
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作者 李香云 王曼 +3 位作者 余剑波 吴丽丽 王丹 史佳 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期727-730,共4页
目的评价蛋白激酶Cα(PKCα)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路在内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤中的作用及其与线粒体融合蛋白-1(Mfnl)的关系。方法将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞以1×104个/ml密度接种于96孔板中... 目的评价蛋白激酶Cα(PKCα)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路在内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤中的作用及其与线粒体融合蛋白-1(Mfnl)的关系。方法将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞以1×104个/ml密度接种于96孔板中。采用随机数字表法分为5组(n=15):对照组(C组)、内毒素攻击模型组(E组)、PKCα抑制剂G06976组(G组)、PKCα激动剂PMA组(P组)和二甲基亚砜组(D组)。采用给予10μg/mlLPS刺激NR8383细胞的方法制备肺泡巨噬细胞内毒素攻击模型。G组、P组和D组于LPS刺激前30min分别给予5txmol/LG06976、100nmol/LPMA、0.1%二甲基亚砜预处理30min,再给予10μg/mlLPS,各组均孵育24h后收集细胞,检测丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用Westernblot法及q-PCR法检测PKCα、HO-1和Mfnl的表达。结果与C组比较,E组、G组、P组和D组MDA和ROS含量升高,SOD活性降低,PKCα、HO-1及其mRNA表达上调,Mfnl及其mRNA表达下调(P〈0.05);与E组比较,G组MDA和ROS含量升高,SOD活性降低,PKCα、HO-1、Mfnl及其mRNA表达下调,P组MDA和ROS含量降低,SOD活性升高,PKCα、HO-1、Mfnl及其mRNA表达上调(P〈0.05),D组上述指标差异无统计学意义(P〉O.05)。结论PKCαHO-1信号通路激活后促进Mfnl表达是内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤时的内源性保护机制。 展开更多
关键词 蛋白激酶CΑ 血红素加氧酶-1 内毒素 线粒体蛋白质 膜融合蛋白
骨髓间充质干细胞移植治疗多器官功能障碍综合征 预览
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作者 和法莲 刘高米洋 +3 位作者 刘菊芬 李自安 王强 潘兴华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第9期1378-1383,共6页
背景:多器官功能障碍综合征为当今临床治疗的一大难题,骨髓间充质干细胞移植为其提供了一个新的治疗研究方向。目的:观察骨髓间充质干细胞移植治疗多器官功能障碍综合征的疗效。方法:按1 mg/kg剂量股静脉注射内毒素建立大鼠多器官功... 背景:多器官功能障碍综合征为当今临床治疗的一大难题,骨髓间充质干细胞移植为其提供了一个新的治疗研究方向。目的:观察骨髓间充质干细胞移植治疗多器官功能障碍综合征的疗效。方法:按1 mg/kg剂量股静脉注射内毒素建立大鼠多器官功能障碍综合征模型,将存活的大鼠随机分为治疗组和模型组,治疗组大鼠尾静脉注射500μL(5×106)第3代骨髓间充质干细胞,对照组尾静脉注射等体积的生理盐水;治疗5 d后行血常规、血生化、凝血功能检测,取血后处死大鼠取肝脏、肾脏、心脏、脾脏进行苏木精-伊红染色病理学观察。结果与结论:(1)移植治疗1周后,与模型组相比,治疗组肝功能、凝血功能各项指标明显得到改善(P〈0.05),白细胞计数更接近正常水平(P〈0.05);(2)模型组心、肝、脾、肾脏均出现不同程度的炎症性病变和坏死,治疗组炎性浸润和坏死性病变明显减轻;(3)结果提示,骨髓间充质干细胞对多器官功能障碍综合征模型大鼠具有明显的治疗作用。 展开更多
关键词 内毒素 多器官功能衰竭 骨髓 间质干细胞移植 组织工程 干细胞 移植 内毒素 多器官功能障碍综合征模型 SD大鼠 骨髓间充质干细胞 细胞移植
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β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制LPS致人肺微血管内皮细胞通透性升高中的作用
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作者 袁清红 颜学滔 +5 位作者 郑菲 王轶芃 张宗泽 陈凯 王焱林 詹佳 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期869-873,共5页
目的 评价β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制LPS致人肺微血管内皮细胞通透性升高中的作用.方法 人肺微血管内皮细胞以1×10^5个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)或培养瓶(4ml/瓶)中,采用随机数字表法分为5组(n=15):空质粒转染组... 目的 评价β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制LPS致人肺微血管内皮细胞通透性升高中的作用.方法 人肺微血管内皮细胞以1×10^5个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)或培养瓶(4ml/瓶)中,采用随机数字表法分为5组(n=15):空质粒转染组(C组)、LPS+空质粒转染组(LPS组)、盐酸戊乙奎醚+LPS+空质粒转染组(P+LPS组)、LPS+β-抑制蛋白-1 shRNA转染组(LPS+ shRNA组)和盐酸戊乙奎醚+LPS+β-抑制蛋白-1 shRNA转染组(P+LPS+shRNA组).LPS组和LPS+shRNA组分别以空质粒1.5 μg或含15 nmol/L β-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染细胞,孵育24 h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1 h;P+LPS组和P+LPS+shRNA组分别以空质粒1.5 μg或含15 nmol/L β-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染细胞,孵育24 h时加入终浓度为2μg/ml的盐酸戊乙奎醚,孵育1h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1h.采用Transwell法测定细胞通透性,采用免疫荧光化学法检测热休克蛋白27(HSP27)的表达水平,采用Western blot法检测β-抑制蛋白-1、丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK (p-p38MAPK)的表达水平,并计算p-p38MAPK/p38MAPK比值.结果 与C组比较,LPS组、LPS+shRNA组和P+LPS+shRNA组细胞通透性升高,HSP27表达上调,p-p38MAPK/p38MAPK比值升高,β-抑制蛋白-1表达下调(P〈0.05),P+LPS组上述指标差异无统计学意义(P〉0.05);与LPS组比较,P+LPS组细胞通透性降低,HSP27表达下调,p-p38MAPK/p38MAPK比值降低,β-抑制蛋白-1表达上调,P+LPS+shRNA组p-p38MAPK/p38MAPK比值升高(P〈0.05),其余指标差异无统计学意义(P〉0.05);与P+LPS组比较,P+LPS+shRNA组细胞通透性升高,HSP27表达上调,p-p38MAPK/p38MAPK比值升高,β-抑制蛋白-1表达下调(P〈0.05).结论 盐酸戊乙奎醚抑制LPS导致的人肺微血管内皮细胞通透性升高的机制完全与β-抑制蛋白-1有关. 展开更多
关键词 抑制蛋白 胆碱能拮抗剂 内毒素 毛细血管通透性
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