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白藜芦醇修复内皮细胞氧化损伤抑制促血栓分子表达的作用和机制 预览
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作者 何卫 娄振凯 +3 位作者 王兵 李兴国 赵冲宇 赵学凌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第3期464-469,共6页
背景:相关研究表明,白藜芦醇具有抗氧化、抑制动脉血栓的作用。目的:探讨白藜芦醇保护内皮细胞氧化损伤,抑制深静脉血栓形成的分子作用。方法:使用人脐静脉内皮细胞进行传代培养;实验分3组:①对照组为正常培养液中培养24h;②H2O2组在培... 背景:相关研究表明,白藜芦醇具有抗氧化、抑制动脉血栓的作用。目的:探讨白藜芦醇保护内皮细胞氧化损伤,抑制深静脉血栓形成的分子作用。方法:使用人脐静脉内皮细胞进行传代培养;实验分3组:①对照组为正常培养液中培养24h;②H2O2组在培养液中加入200μmol/LH2O2培养24h;③H2O2+白藜芦醇组:先分别予以10,20,30μmol/L的白藜芦醇预处理2h,再加入200μmol/LH2O2培养24h。采用MTT法检测细胞活力;Hoechst33258染色法、荧光显微镜观察细胞凋亡;Westernblot检测P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子及PI3-K/Akt/GSK3β、NF-κB信号通路关键蛋白表达。结果与结论:①与对照组相比,H2O2能够诱导内皮细胞损伤,白藜芦醇对H2O2诱导的内皮细胞损伤具有修复作用(P<0.05);②与对照组相比,H2O2组细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与H2O2组相比,H2O2+白藜芦醇组细胞凋亡率明显减少(P<0.05);③与对照组相比,H2O2组P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子、NF-κB和GSK3β蛋白的表达显著上调(P<0.05),Akt总蛋白无明显变化(P>0.05),pAkt蛋白表达下调(P<0.05);与H2O2组相比,H2O2+白藜芦醇组上述蛋白表达被逆转(P<0.05);④结果表明,白藜芦醇能够修复静脉内皮细胞氧化损伤,对P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子蛋白表达具有抑制作用,其机制可能与PI3-K/Akt/GSK3β、NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 内皮细胞 氧化应激 国家自然科学基金 组织构建 藜芦属 内皮细胞 氧化性应激 静脉血栓形成 组织工程
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天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压大鼠门静脉血流动力学及内皮细胞的影响 预览
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作者 文彬 赵晓芳 +4 位作者 陈然 杨义维 黎莹莹 梁健 邓鑫 《广西医学》 CAS 2019年第2期202-205,共4页
目的探讨天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压(PHT)大鼠门静脉系统血流动力学及内皮细胞的影响。方法建立肝硬化PHT大鼠模型。将45只肝硬化PHT大鼠随机分为对照组、结合牛磺酸组(A组)及天然牛磺酸组(B组),每组15只。A组给予结合牛磺酸灌胃,B... 目的探讨天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压(PHT)大鼠门静脉系统血流动力学及内皮细胞的影响。方法建立肝硬化PHT大鼠模型。将45只肝硬化PHT大鼠随机分为对照组、结合牛磺酸组(A组)及天然牛磺酸组(B组),每组15只。A组给予结合牛磺酸灌胃,B组给予天然牛磺酸灌胃,对照组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。21d后,比较3组大鼠门静脉血流量(PVF)、门静脉压力(PVP)、门静脉阻力(PVR)、平均动脉压(MAP)以及肝脏血流灌注量(HPV)水平,并在超微电镜下观察门静脉内皮细胞超微结构。结果A组及B组PVP、PVR、PVF均低于对照组(均P<0.05);对照组、A组、B组MAP、HPV水平依次升高(P<0.05)。电镜下可见对照组门静脉内皮细胞变性或脱落,基底膜完整性遭破坏,A组及B组内皮细胞结构完整,B组基底膜正常。结论天然牛磺酸可减轻肝硬化门脉高压大鼠门静脉压力,改善效应内皮细胞的超微结构,且其效果优于结合牛磺酸。 展开更多
关键词 肝硬化 门静脉高压 天然牛磺酸 结合牛磺酸 血流动力学 内皮细胞 大鼠
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EPCs移植对缺血再灌注肾损伤大鼠血管内皮生长因子的影响
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作者 周丽娜 王玉新 +1 位作者 武挺 方林 《医学理论与实践》 2019年第2期160-162,159共4页
目的:探讨EPCs移植对缺血再灌注肾损伤大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:雄性SD大鼠22头,随机分为3组:对照组、I/R组、EPCs组,术后1d处死各组大鼠,抽取外周血培养及鉴定内皮祖细胞,抽血检测大鼠的生化指标,采用RT-PCR技术测... 目的:探讨EPCs移植对缺血再灌注肾损伤大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:雄性SD大鼠22头,随机分为3组:对照组、I/R组、EPCs组,术后1d处死各组大鼠,抽取外周血培养及鉴定内皮祖细胞,抽血检测大鼠的生化指标,采用RT-PCR技术测定三组大鼠VEGF mRNA的表达情况,行病理染色观察各组大鼠肾间质血管CD34的表达情况。结果:EPCs移植上调缺血再灌注大鼠VEGF mRNA的表达并改善了该组大鼠的肾功能,减轻了肾间质血管内皮细胞的损伤。结论:EPCs移植减轻大鼠缺血再灌注肾损伤可能与上调VEGF的表达有关。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 内皮细胞 缺血再灌注损伤 内皮细胞
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超声联合微泡对内皮细胞一氧化氮合酶磷酸化程度的影响
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作者 吴玉鹏 李岩峰 马逸 《生物医学工程与临床》 CAS 2019年第1期14-18,共5页
目的探索超声联合微泡对内皮细胞一氧化氮合酶(e NOS)磷酸化程度的影响。方法将人脐静脉内皮细胞分为3组(对照组、单纯超声组、超声微泡组),超声微泡组给予超声(频率1 MHz,输出功率100 k Pa,占空比20%)联合微泡(500μL)刺激2 min,单纯... 目的探索超声联合微泡对内皮细胞一氧化氮合酶(e NOS)磷酸化程度的影响。方法将人脐静脉内皮细胞分为3组(对照组、单纯超声组、超声微泡组),超声微泡组给予超声(频率1 MHz,输出功率100 k Pa,占空比20%)联合微泡(500μL)刺激2 min,单纯超声组给予单纯超声(频率1 MHz,输出功率100 kPa,占空比20%)刺激2 min,对照组无任何干预。应用Western blot方法检测磷酸化一氧化氮合酶(S1177)[p-eNOS(S1177)]和总e NOS表达、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测细胞核数目及台盼蓝染色检测3组细胞存活率。结果3组总e NOS相对表达量分别为1.00±0.09、1.00±0.11、0.99±0.02,差异无统计学意义(P>0.05)。3组p-eNOS(S1177)相对表达量分别为0.41±0.10、0.49±0.08、0.98±0.05,与对照组和单纯超声组比较,超声微泡组p-eNOS(S1177)表达水平显著升高(P<0.05)。p-eNOS(S1177)与总e NOS的比值亦显著升高(P<0.05)。而3组细胞存活率、细胞核数量及细胞核形态未见明显差异(P>0.05)。结论超声联合微泡可以促进e NOS磷酸化、p-eNOS(S1177)表达增加,并且不会对内皮细胞的存活产生影响;为临床应用超声联合微泡治疗微血管阻塞提供了理论基础,也为心血管疾病的治疗提供一个新思路。 展开更多
关键词 超声 微泡 内皮细胞 一氧化氮合酶 磷酸化
蓬乱蛋白2干扰和过表达慢病毒载体的构建及其在hUVECs中的表达 预览
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作者 生欣 王俊华 +3 位作者 刘月华 郜双林 谢夏丹 范芳 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第1期15-22,共8页
目的获得蓬乱蛋白2(DVL2)基因干扰和过表达慢病毒表达系统,并在人脐静脉内皮细胞中(hUVECs)稳定表达。方法①聚合酶链反应扩增目的基因,设计合成shRNA,以慢病毒表达质粒为基础构建DVL2干扰和过表达载体,酶切电泳、实时荧光定量聚合酶链... 目的获得蓬乱蛋白2(DVL2)基因干扰和过表达慢病毒表达系统,并在人脐静脉内皮细胞中(hUVECs)稳定表达。方法①聚合酶链反应扩增目的基因,设计合成shRNA,以慢病毒表达质粒为基础构建DVL2干扰和过表达载体,酶切电泳、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和测序技术鉴定载体构建是否成功;②以3质粒系统在HEK293T细胞中包装病毒,通过荧光显微镜观察计数并计算病毒滴度;以嘌呤霉素筛选稳定转染的hUVECs,通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为BC组(hUVECs空白对照)、NC组(HBLV-GFP-PURO阴性对照)、干扰组(pHB-shRNA-HDVL2)及过表达组(pHBLV-HDVL2)。③通过qRT-PCR与Western blotting检测分别从mRNA和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果①插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。干扰序列峰形图为单峰,无突变。②病毒包装后,NC组、干扰组、过表达组滴度分别为2×10^8、2×10^8和1×10^8TU/ml,感染人脐静脉内皮细胞的感染效率达98%。③干扰组DVL2的表达较BC组降低,差异有统计学意义(P<0.05),过表达组较BC组升高,差异有统计学意义(P<0.05),其中干扰效率为61%,蛋白质过表达水平为BC组的2.7倍。结论DVL2基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功,并能够在原代hUVECs中稳定表达。 展开更多
关键词 蓬乱蛋白2/Wnt蛋白质类 慢病毒载体 内皮细胞 RNA干扰 过表达
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桃红四物汤干预外周血内皮祖细胞数量与功能增加的时间剂量效应 预览
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作者 王小斌 蒋红心 +3 位作者 屈长宏 吴冬梅 张荣生 徐斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1354-1358,共5页
背景:近期研究表明,桃红四物汤能减轻血管内皮细胞的损伤和维持其正常的分泌功能,而内皮祖细胞对内皮损伤后的修复有促进作用,因而设想桃红四物汤可能通过改善内皮祖细胞的功能活性及增加其数量来保护内皮功能。目的:观察桃红四物汤对... 背景:近期研究表明,桃红四物汤能减轻血管内皮细胞的损伤和维持其正常的分泌功能,而内皮祖细胞对内皮损伤后的修复有促进作用,因而设想桃红四物汤可能通过改善内皮祖细胞的功能活性及增加其数量来保护内皮功能。目的:观察桃红四物汤对人外周血内皮祖细胞功能活性和数量的影响。方法:从健康人外周血中分离培养内皮祖细胞,将内皮祖细胞分为对照组和桃红四物汤低、中、高质量浓度组,在体外培养24 h以观察量效关系,同时桃红四物汤高质量浓度组培养6,12,24,48 h以观察时效关系。倒置相差显微镜下计数内皮祖细胞数量,通过MTT比色法、黏附能力和Boyden小室观察内皮祖细胞的增殖、黏附和迁移能力。结果与结论:①桃红四物汤干预组内皮祖细胞增殖、黏附和迁移能力明显高于对照组,并与质量浓度呈一定的量效关系,高质量浓度组最为显著(P<0.01);②桃红四物汤高质量浓度组内皮祖细胞增殖、黏附和迁移能力的增加呈时间依赖关系,干预24 h时最为显著(P<0.01);③结果表明,桃红四物汤可增加内皮祖细胞数量并改善其功能,高质量浓度干预24 h时效果最佳。 展开更多
关键词 内皮细胞 桃红四物汤 内皮细胞增殖 细胞迁移 细胞黏附 中草药 内皮细胞 细胞增殖 细胞粘附 细胞运动 组织工程
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hCD47诱导人巨噬细胞对猪内皮细胞的免疫耐受 预览
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作者 胡文宝 潘登科 +2 位作者 DavidK.C.Cooper 蔡志明 牟丽莎 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期165-170,共6页
目的探讨人CD47(hCD47)在诱导人巨噬细胞对猪内皮细胞免疫耐受中的作用。方法将转染了pCDH-hCD47-FLAG质粒的猪髂总动脉内皮细胞(PIEC)设为pCDH-hCD47组;将转染了pCDH-FLAG空载体质粒的PIEC为pCDH组;将转染了hCD47-dN的PIEC设为pCDH-hCD... 目的探讨人CD47(hCD47)在诱导人巨噬细胞对猪内皮细胞免疫耐受中的作用。方法将转染了pCDH-hCD47-FLAG质粒的猪髂总动脉内皮细胞(PIEC)设为pCDH-hCD47组;将转染了pCDH-FLAG空载体质粒的PIEC为pCDH组;将转染了hCD47-dN的PIEC设为pCDH-hCD47-dN组;将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)设为阳性对照组。将细胞分别与人巨噬细胞共培养,检测信号调节蛋白α(SIRPα)的磷酸化情况以及人巨噬细胞对PIEC的杀伤作用。进一步从GT-/-及GT-/-/hCD47基因编辑猪中分离了猪主动脉血管内皮细胞(PAEC),并分析SIRPα的磷酸化情况及人巨噬细胞对PAEC的杀伤作用。结果 pCDH组细胞不能诱导SIRPα的磷酸化,而pCDH-hCD47组细胞与人巨噬细胞共培养10 min后便能够激活SIRPα的磷酸化,且随着共培养时间的延长,SIRPα的磷酸化程度也随之增强。pCDH-hCD47-dN组细胞不能激活SIRPα的磷酸化。人巨噬细胞对p CDH组细胞产生了明显的杀伤作用,p CDH-h CD47组细胞可明显抑制人巨噬细胞的杀伤作用(P<0.05),而pCDH-hCD47-dN组细胞则不能抑制人巨噬细胞的杀伤作用。GT-/--PAEC与人巨噬细胞共培养后,不能激活SIRPα的磷酸化;而GT-/-/hCD47-PAEC与人巨噬细胞共培养后则明显激活了SIRPα的磷酸化。人巨噬细胞对GT-/--PAEC产生了明显的杀伤作用,GT-/-/hCD47-PAEC可明显抑制人巨噬细胞的杀伤作用(P<0.05)。结论在猪内皮细胞中表达hCD47可以通过激活SIRPα的磷酸化抑制人巨噬细胞对内皮细胞的杀伤作用。 展开更多
关键词 异种移植 CD47 信号调节蛋白α 人巨噬细胞 内皮细胞 磷酸化 免疫排斥反应
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丁苯酚对缺氧缺糖条件下大鼠微血管内皮细胞保护作用的分子机制研究
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作者 张宏兵 孙小祥 +1 位作者 罗秀琴 夏国华 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第1期1-5,共5页
目的探讨丁苯酚对缺氧缺糖条件下大鼠微血管内皮细胞保护作用的分子机制。方法取大鼠脑微血管内皮细胞进行培养,按随机数字表法分为正常组、模型组、丁苯酚组,除正常组外,其余2组采用氧糖剥夺实验构建拟缺血损伤细胞模型,流式细胞术检... 目的探讨丁苯酚对缺氧缺糖条件下大鼠微血管内皮细胞保护作用的分子机制。方法取大鼠脑微血管内皮细胞进行培养,按随机数字表法分为正常组、模型组、丁苯酚组,除正常组外,其余2组采用氧糖剥夺实验构建拟缺血损伤细胞模型,流式细胞术检测内皮细胞凋亡情况,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子-β(VEGF-β)、碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)及凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)水平,采用qPCR和蛋白免疫印迹检测3组抗激活素受体样激酶(ALK)、抗人分化抑制因子(ID1)、抗Smad5抗体mRNA和蛋白水平相对表达情况。结果模型组和丁苯酚组细胞凋亡率高于正常组,但丁苯酚组低于模型组(P<0.05)。模型组中TGF-β、VEGF-β、b-FGF及TSP-1水平和丁苯酚组中VEGF-β、b-FGF水平高于正常组(P<0.05)。丁苯酚组TGF-β和TSP-1水平低于模型组,而VEGF-β、b-FGF水平高于模型组(P<0.05)。模型组和丁苯酚组Smad5、ID1、ALKmRNA和蛋白相对表达水平高于正常组,且丁苯酚组高于模型组(P<0.05)。结论拟缺血脑微血管内皮细胞凋亡显著增加,且内皮细胞ALK、Smad5及ID1表达增加,丁苯酚可能通过上调ALK/Smad5/ID1信号通路来降低内皮细胞凋亡,达到保护内皮细胞的作用。 展开更多
关键词 丁苯酚 氧糖剥夺 血管 内皮细胞 信号通路 大鼠 Sprague-Dawley
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运动干预12周对超重/肥胖儿童内皮细胞功能的影响
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作者 贵永玲 《中国学校卫生》 CAS 北大核心 2019年第1期26-30,共5页
目的探讨12周运动处方干预对超重/肥胖儿童内皮细胞功能的影响,为促进超重/肥胖儿童心血管健康水平提供有效方法。方法 将郑州市某小学69名超重/肥胖儿童随机分为对照组(35名)和运动组(34名),对照组仅参加学校组织的体育活动,运动组在... 目的探讨12周运动处方干预对超重/肥胖儿童内皮细胞功能的影响,为促进超重/肥胖儿童心血管健康水平提供有效方法。方法 将郑州市某小学69名超重/肥胖儿童随机分为对照组(35名)和运动组(34名),对照组仅参加学校组织的体育活动,运动组在对照组的基础上进行60 min/次、3次/周共12周的运动处方干预(有氧运动+抗阻训练)。分别于实验前后利用流式细胞仪测定外周血CD34+(造血干细胞表面标志物)、CD133+(造血祖细胞表面标志物)以及CD34+CD133+(内皮祖细胞)表达量(用阳性细胞率表示),B超检测颈总动脉内膜中层厚度(c IMT),内皮功能-外周动脉张力测试仪测定反应性充血指数(RHI)作为血管内皮功能参数。结果实验后,运动组CD34+(0.087%±0.044%),CD133+(0.192%±0.076%)以及CD34+CD133+(0.110%±0.034%)表达量均较实验前(0.043%±0.011%,0.077%±0.030%,0.062%±0.011%)升高(t值分别为-6.05,-8.72,-7.75,P值均<0.01),RHI升高[实验前(1.86±0.27),实验后(2.13±0.32),t=-3.70,P<0.05],c IMT下降[实验前(0.41±0.09) mm,实验后(0.34±0.11) mm,t=2.49,P<0.05];对照组各参数均无显著性变化(P值均>0.05)。结论12周运动干预可通过动员内皮祖细胞改善超重/肥胖儿童血管内皮细胞功能。 展开更多
关键词 超重 肥胖症 干预性研究 健康促进 儿童 内皮细胞
花青素通过TLR4/NF-κB通路对脂多糖诱导的血管内皮损伤的保护作用
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作者 陈惠 胡勇 《实用医药杂志》 2019年第1期59-62,共4页
目的探讨花青素(PC)对脂多糖(LPS)作用下血管内皮细胞损伤的影响及作用机制。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞,脂多糖作用于人脐静脉血管内皮细胞诱导其损伤,设置空白对照组、模型组(1000ng/ml脂多糖处理)、不同浓度(100,50,25μg/ml... 目的探讨花青素(PC)对脂多糖(LPS)作用下血管内皮细胞损伤的影响及作用机制。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞,脂多糖作用于人脐静脉血管内皮细胞诱导其损伤,设置空白对照组、模型组(1000ng/ml脂多糖处理)、不同浓度(100,50,25μg/ml)花青素组。使用MTT法检测各组细胞活力;ELISA检测各组细胞培养液中NO、TNF-α和IL-6的浓度变化;特定试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH-PX)含量;DHE荧光探针检测ROS的变化;Westernblot法检测各组TLR4/NF-κB蛋白表达水平。结果与空白对照组相比脂多糖损伤组能够降低HUVECs的活力,增加ROS的含量,LDH、MDA含量显著增加,SOD、GSH-PX活性显著下降,同时降低NO分泌,诱导TNF-α和IL-6分泌及增加了TLR4/NF-κB的表达(P<0.01)。不同浓度花青素和脂多糖同时作用HUVECs时,细胞活力逐渐上升,ROS含量逐渐下降,LDH、MDA含量逐渐下降,SOD、GSH-PX活性随之上升,同时NO分泌增加,TNF-α和IL-6分泌及TLR4/NF-κB蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论花青素能够提升脂多糖作用下HUVECs活力,恢复细胞分泌功能,增强细胞抗氧化能力,减少细胞的炎性反应;花青素可能部分地通过TLR4/NF-κB通路对血管内皮细胞发挥保护作用。 展开更多
关键词 花青素 内皮细胞 TLR4/NF-κB 炎性反应
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血小板与内皮细胞屏障功能 预览
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作者 李爽 程波 +1 位作者 王强 李岩松 《中华危重症医学杂志(电子版)》 CAS CSCD 2019年第1期56-60,共5页
内皮细胞位于各级血管最内层,与细胞连接及整合素-细胞外基质(extracellular matrix,ECM)复合体共同构成一层内皮细胞屏障。内皮细胞屏障为半透膜,可有效隔离血液和组织液,并通过主动运输、被动扩散维持二者之间物质交换,其连续性和完... 内皮细胞位于各级血管最内层,与细胞连接及整合素-细胞外基质(extracellular matrix,ECM)复合体共同构成一层内皮细胞屏障。内皮细胞屏障为半透膜,可有效隔离血液和组织液,并通过主动运输、被动扩散维持二者之间物质交换,其连续性和完整性是维持体液稳态的关键。近年来越来越多的研究表明血小板对内皮细胞屏障通透性具有调控作用[1-4]。该作用对疾病的发生、发展、转归和预后具有重要影响。本文就血小板对内皮细胞屏障通透性的调控及其与疾病的关系做一综述。 展开更多
关键词 内皮细胞 屏障功能 血小板 MATRIX 调控作用 细胞外基质 细胞连接 物质交换
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溶酶体与肾固有细胞病理生理研究进展 预览
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作者 邹婷 王淑君 +3 位作者 唐皓璇 杨陈 潘庆军 刘华锋 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期124-127,共4页
溶酶体是一种富含酸性水解酶的细胞器,是胞内主要的降解工厂,参与物质分泌、质膜修复、细胞信号传导和能量代谢等过程,其功能异常与多种疾病相关。近年发现,肾固有细胞溶酶体功能障碍参与慢性肾病的发生发展:溶酶体功能障碍可导致足细... 溶酶体是一种富含酸性水解酶的细胞器,是胞内主要的降解工厂,参与物质分泌、质膜修复、细胞信号传导和能量代谢等过程,其功能异常与多种疾病相关。近年发现,肾固有细胞溶酶体功能障碍参与慢性肾病的发生发展:溶酶体功能障碍可导致足细胞自噬受阻,诱发足细胞的转分化和损伤;近端小管上皮细胞溶酶体损伤可通过诱导氧化应激诱导其凋亡;系膜细胞溶酶体损伤可导致其Ⅰ型胶原蛋白降解减少;溶酶体组织蛋白酶-S及α-半乳糖苷酶-A表达异常与肾内皮细胞功能障碍密切相关。综上,溶酶体功能障碍与肾固有细胞的病理生理过程密切相关,阐明溶酶体在肾固有细胞的作用,有望为明确慢性肾病肾固有细胞的损伤机制提供新思路。 展开更多
关键词 溶酶体 细胞 近端小管上皮细胞 系膜细胞 内皮细胞 病理生理
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低氧损伤下调大鼠脑血管内皮细胞中硫化氢及其介导的Rho A-ROCK通路激活 预览
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作者 王良芳 陈志武 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期50-55,共6页
目的观察大鼠脑血管内皮细胞中内皮源性硫化氢(H2S)、一氧化氮(NO)及Ras同源基因家族成员A-Rho相关的卷曲螺旋激酶(RhoA-ROCK)信号通路在低氧性损伤中的动态变化,并探讨内皮源性H2S对RhoA-ROCK通路的影响。方法胶原酶消化法原代培养大... 目的观察大鼠脑血管内皮细胞中内皮源性硫化氢(H2S)、一氧化氮(NO)及Ras同源基因家族成员A-Rho相关的卷曲螺旋激酶(RhoA-ROCK)信号通路在低氧性损伤中的动态变化,并探讨内皮源性H2S对RhoA-ROCK通路的影响。方法胶原酶消化法原代培养大鼠脑血管内皮细胞,内皮细胞分别低氧培养1、2、4、8、24h后,测定H2S和NO含量,G-LISA检测RhoA活性,细胞裂解后对相关蛋白进行免疫印迹分析。结果低氧1h后H2S含量显著下降;NO含量在低氧4h后开始显著下降;RhoA活性低氧8h后才有显著增加。低氧4h时内源性H2S合成酶胱硫醚γ-裂解酶(CSE)表达就有了显著下降;低氧8h后内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)才开始明显降低;低氧8h时Rho激酶ROCK1、ROCK2表达显著增加。内源性和外源性H2S均可抑制RhoA的激活。结论在大鼠脑血管内皮细胞低氧损伤过程中,内皮源性H2S降低发生最早,其次为NO,而RhoA-ROCK通路激活发生在后,可能是继发于H2S的降低。 展开更多
关键词 内皮细胞 低氧 硫化氢 RhoA-ROCK通路
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槲皮素对非对称性二甲基精氨酸诱导损伤的脑血管内皮细胞的保护作用及其机制研究 预览
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作者 任锟 李彦杰 +2 位作者 邢若星 赵晶 张志鑫 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期82-88,共7页
目的探讨槲皮素对非对称性二甲基精氨酸(ADMA)诱导下人脑血管内皮细胞(HBMECs)损伤的保护作用及其作用机制。方法采用ADMA(30μmol/L,作用24h)诱导建立HBMECs损伤模型。实验分为对照组(不加任何干预因素)、ADMA组、ADMA+槲皮素处理组(... 目的探讨槲皮素对非对称性二甲基精氨酸(ADMA)诱导下人脑血管内皮细胞(HBMECs)损伤的保护作用及其作用机制。方法采用ADMA(30μmol/L,作用24h)诱导建立HBMECs损伤模型。实验分为对照组(不加任何干预因素)、ADMA组、ADMA+槲皮素处理组(加入终浓度分别为0.1、1、10、100μmol/L的槲皮素预处理2h后再加入终浓度为30μmol/L的ADMA作用24h)、100μmol/L槲皮素处理组(100μmol/l的槲皮素预处理2h后换常规培养液)、10μmol/l槲皮素处理组(10μmol/L的槲皮素预处理2h后换常规培养液)、茴香霉素(ANISO)/P79350+ADMA+槲皮素处理组[加入终浓度为10μmol/L的槲皮素预处理2h后再加入终浓度为30μmol/L的ADMA作用24h,实验结束前1h加入10μmol/L的ANISO或50μmol/L的P79350]以及ANISO/P79350处理组(常规培养液培养,实验结束前1h加入10μmol/L的NAISO或50μmol/L的P79350),每组6个样本。不同浓度槲皮素预处理2h后,噻唑蓝法测定细胞活性,酶联免疫吸附试验法测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧、丙二醛、脑源性神经营养因子(BDNF)水平,Westernblotting分析Bax、Bcl-2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、p38、磷酸化p38(p-p38)表达水平,逆转录-聚合酶链式反应检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达,caspase-3活性试剂盒检测caspase-3活性,应用JNK激动剂ANISO和p38激动剂P79350观察JNK/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在槲皮素介导的细胞损伤保护中的作用。结果与对照组比较,ADMA组HBMECs活性(52±8)明显降低,LDH水平(356±28)显著升高,BDNF浓度(51±8)明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);与ADMA组比较,ADMA+10μmol/L槲皮素处理组和ADMA+100μmol/L槲皮素处理组HBMECs细胞活性显著改善(分别为80±5、86±7),LDH水平明显下调(分别为162±20、141±17),BDNF浓度明显增加(分别为82±5、94±6),差异均有统计学意义(均P<0.05)。应用10μmol/L的槲 展开更多
关键词 槲皮素 内皮细胞 JNK丝裂原活化蛋白激酶类 非对称性二甲基精氨酸 氧化应激
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体外培养乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞定向分化的实验研究 预览
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作者 刘琼 文军 +1 位作者 吴小明 钱虹 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第1期29-34,共6页
目的研究体外培养乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞的定向分化。方法选取南方医科大学口腔医院29例健康儿童的滞留乳牙,在4h内进行乳牙牙髓干细胞的原代提取。采用免疫磁珠分选法进行细胞分选,并对分选出的细胞进行特定的血管内皮细胞定向... 目的研究体外培养乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞的定向分化。方法选取南方医科大学口腔医院29例健康儿童的滞留乳牙,在4h内进行乳牙牙髓干细胞的原代提取。采用免疫磁珠分选法进行细胞分选,并对分选出的细胞进行特定的血管内皮细胞定向诱导。对乳牙牙髓干细胞及血管内皮细胞定向诱导后的细胞进行镜下形态观察、血管生成实验,以及免疫表型鉴定。结果镜下形态观察显示,经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞呈典型血管内皮细胞的形态特征;血管生成实验表明,经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞可呈现明显的血管样结构;免疫表型鉴定显示经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞血管内皮细胞表面抗原呈阳性。结论乳牙牙髓干细胞可定向分化为血管内皮细胞。 展开更多
关键词 细胞 内皮细胞 细胞分化 血管生成实验 免疫表型
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转化生长因子β1基因沉默内皮祖细胞移植抑制大鼠肺纤维化 预览
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作者 彭秋凤 高静珍 +1 位作者 叶奎 邢爱民 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第1期90-95,共6页
背景:大量动物实验证明转化生长因子β1基因是目前肺纤维化的研究热点和重要的药物作用靶点。目的:探讨转化生长因子β1基因沉默内皮祖细胞移植对大鼠肺纤维化的影响。方法:①构建靶向转化生长因子β1的siRNA质粒,转染内皮祖细胞,分为... 背景:大量动物实验证明转化生长因子β1基因是目前肺纤维化的研究热点和重要的药物作用靶点。目的:探讨转化生长因子β1基因沉默内皮祖细胞移植对大鼠肺纤维化的影响。方法:①构建靶向转化生长因子β1的siRNA质粒,转染内皮祖细胞,分为空白组、对照组及转化生长因子β1基因沉默组,Western blot检测转染第3天和第28天转化生长因子β1表达;②80只Wistar大鼠(北京维通利华动物实验技术有限公司提供)分为正常对照组、肺纤维化模型组、内皮祖细胞组、转化生长因子β1沉默内皮祖细胞组,后3组大鼠气管内分别一次性注入0.3 mL博莱霉素溶液(5 mg/kg)以制备大鼠肺纤维化病理模型,造模后24 h,正常对照组和肺纤维化模型组大鼠尾静脉注射20μL生理盐水,内皮祖细胞组及转化生长因子β1沉默组大鼠尾静脉注射20μL细胞浓度为3×106 L-1的内皮祖细胞悬液或转化生长因子β1沉默内皮祖细胞悬液;③移植28 d后,ELISA测定大鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞介素10、白细胞介素6以及肿瘤坏死因子α水平,苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化,RT-PCR、Western blot检测肺组织中转化生长因子β1及Smad-2、Smad-7的表达。结果与结论:①在转染后第3天和第28天,转化生长因子β1基因沉默组的转化生长因子β1蛋白相对表达水平低于空白组和对照组,差异有显著性意义(P<0.05);②内皮祖细胞组较肺纤维化模型组病理变化减轻,肺泡间隔厚度低,转化生长因子β1沉默内皮祖细胞组病理变化进一步减轻;③内皮祖细胞组白细胞介素10、白细胞介素6以及肿瘤坏死因子α水平较肺纤维化模型组降低(P<0.05),转化生长因子β1沉默内皮祖细胞组进一步降低,但与内皮祖细胞组比较,差异无显著性意义(P>0.05);④与肺纤维化模型组相比,内皮祖细胞组和转化生长因子β1沉默组大鼠肺组织中转化生长因子β1和Smad-2的基因和蛋� 展开更多
关键词 肺纤维化 内皮细胞 转化生长因子Β1 基因沉默 Smad-2 Smad-7 细胞 肺纤维化 内皮细胞 基因沉默 转化生长因子Β1 Smad2蛋白质 Smad7蛋白质 组织工程
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两性霉素B脂质体滴眼液对兔曲霉菌性角膜溃疡角膜内皮细胞毒性观察 预览
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作者 孙晓宇 崔国义 李海岗 《海峡药学》 2019年第2期41-42,共2页
目的观察在兔曲霉菌性角膜溃疡的相关实验中,两性霉素B脂质体滴眼液对于实验用兔角膜内皮细胞的毒性效果。方法选择2017年1月至2018年5月的100例实验用兔进行研究,将所有实验用兔随机均分成为参照组与研究组,参照组实验用兔的两性霉素B... 目的观察在兔曲霉菌性角膜溃疡的相关实验中,两性霉素B脂质体滴眼液对于实验用兔角膜内皮细胞的毒性效果。方法选择2017年1月至2018年5月的100例实验用兔进行研究,将所有实验用兔随机均分成为参照组与研究组,参照组实验用兔的两性霉素B脂质体滴眼液用量为0.5%,研究组实验用兔的用药剂量则为0.25%,对比两组实验用兔在用药后不同时间段的角膜内皮细胞平均密度以及流变性细胞百分率情况。结果研究组实验用兔用药后的相关指标要优于参照组,具体数据比较后差异存在统计学意义(P<0.05)。结论对于兔曲霉菌性角膜溃疡的治疗,两性霉素B脂质体滴眼液的用药剂量可选择0.25%,该剂量值得在临床中推广。 展开更多
关键词 兔曲霉菌性角膜溃疡 两性霉素B脂质体滴眼液 内皮细胞 毒性
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经典瞬时受体电位C亚族5与动脉粥样硬化发生发展的关系
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作者 季一楠 郭瑞威 《心血管病防治》 2019年第1期82-83,95共3页
经典瞬时受体电位通道C亚族5(TRPC5)是细胞膜上的一种非选择性阳离子钙库操纵性通道蛋白。在血管平滑肌细胞的迁移和增殖、内皮细胞的损伤和功能障碍、脂质的沉积等动脉粥样硬化形成过程中具有重要意义。本文就TRPC5的分子结构、通道激... 经典瞬时受体电位通道C亚族5(TRPC5)是细胞膜上的一种非选择性阳离子钙库操纵性通道蛋白。在血管平滑肌细胞的迁移和增殖、内皮细胞的损伤和功能障碍、脂质的沉积等动脉粥样硬化形成过程中具有重要意义。本文就TRPC5的分子结构、通道激活机制和在动脉粥样硬化的发生发展中的作用作一综述。 展开更多
关键词 经典瞬时受体电位C亚族5 内皮细胞 脂质 动脉粥样硬化
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内皮间质转分化在心肌纤维化中的研究进展 预览
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作者 尹玉洁 张倩 +1 位作者 旷湘楠 贾振华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期12-16,共5页
内皮间质转分化是内皮细胞在多种因素作用下紧密连接丢失,逐步丧失内皮特异性标记物表达,并获得间质细胞或肌成纤维细胞表型表达及其运动和收缩特性的一种生物过程。不仅在心脏和血管生长发育中发挥重要作用,也参与了心、肺、肾等重要... 内皮间质转分化是内皮细胞在多种因素作用下紧密连接丢失,逐步丧失内皮特异性标记物表达,并获得间质细胞或肌成纤维细胞表型表达及其运动和收缩特性的一种生物过程。不仅在心脏和血管生长发育中发挥重要作用,也参与了心、肺、肾等重要器官纤维化变性过程,可能成为慢性心力衰竭心肌纤维化防治的关键病理环节。该文将对内皮间质转分化在心肌纤维化中的作用及研究进展进行综述。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 心肌纤维化 内皮间质转分化 内皮细胞 信号通路 转化生长因子Β
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α-硫辛酸改善初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平 预览
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作者 李博鹏 陈树春 +1 位作者 唐勇 任路平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期803-808,共6页
背景:前期研究表明,初诊2型糖尿病患者已存在血管内皮功能障碍,α-硫辛酸作为一种抗氧化剂,广泛应用于糖尿病神经病变患者,而其能否改善初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞的数量与功能,目前尚无这方面的研究。目的:探讨α-硫辛酸对初诊2... 背景:前期研究表明,初诊2型糖尿病患者已存在血管内皮功能障碍,α-硫辛酸作为一种抗氧化剂,广泛应用于糖尿病神经病变患者,而其能否改善初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞的数量与功能,目前尚无这方面的研究。目的:探讨α-硫辛酸对初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平的影响。方法:将50例初诊2型糖尿病患者在基础治疗的前提下,随机分为对照组20例和α-硫辛酸组30例,治疗前和治疗2周检测超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平及内皮祖细胞数量,分析各指标在两组间的差异及相关性。结果与结论:①与治疗前比较,α-硫辛酸组治疗后内皮祖细胞数量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶活性显著增加(P<0.05),丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇显著降低(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇显著升高(P<0.05);②与治疗前比较,对照组治疗后三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇显著下降(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇显著升高(P<0.05);③两组治疗前后的差值比较:α-硫辛酸组较对照组内皮祖细胞数量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶活性显著增加(P<0.05),丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷含量显著降低(P<0.05);④以α-硫辛酸组治疗前后各指标的差值进行多元线性回归分析显示,谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛是内皮祖细胞水平的影响因素;⑤结果表明,α-硫辛酸能够通过抗氧化应激增加初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平。 展开更多
关键词 2型糖尿病 糖尿病血管并发症 内皮细胞 Α-硫辛酸 氧化应激 谷胱甘肽过氧物酶 丙二醛 细胞 糖尿病 2型 糖尿病血管病变 内皮细胞 硫辛酸 氧化性应激 组织工程
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