期刊文献+
共找到1,014篇文章
< 1 2 51 >
每页显示 20 50 100
小球藻表达β胡萝卜素酮化酶基因提高虾青素的量 预览
1
作者 冯兴标 李光伟 +2 位作者 陈丹阳 侯善如 刘永胜 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期267-272,共6页
文章以G418 抗性基因( NPT Ⅱ)作为选择标记基因,建立以PBI121为表达载体,农杆菌为介导的小球藻( Chlorella zofingiensis )遗传转化体系。确定了G418质量浓度为0.8 mg/L和羧苄青霉素质量浓度为500 mg/L的小球藻筛选体系,GFP 为报告基因... 文章以G418 抗性基因( NPT Ⅱ)作为选择标记基因,建立以PBI121为表达载体,农杆菌为介导的小球藻( Chlorella zofingiensis )遗传转化体系。确定了G418质量浓度为0.8 mg/L和羧苄青霉素质量浓度为500 mg/L的小球藻筛选体系,GFP 为报告基因,从DNA和RNA水平上鉴定转化子阳性,通过激光共聚焦检测到了GFP的表达,从而建立了农杆菌转化体系。为提高小球藻的虾青素表达量,文章克隆八氢番茄红素脱氢酶基因信号肽 PDSSP 为信号肽以及克隆β-胡萝卜素酮化酶基因 Crto,用overlap聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术构建 PDSSP-Crto 融合基因,并将融合基因克隆至表达载体PBI121∶35S∶PDSSP-Crto ,利用上述农杆菌介导小球藻遗传转换方法转化小球藻。结果表明,转化子小球藻虾青素的质量比为0.564 mg/g,野生型为0.345 mg/g,比野生型高63.5%,有效地提高了小球藻虾青素的表达量。 展开更多
关键词 小球藻 遗传转化 杆菌介导 虾青素 酮化酶
在线阅读 免费下载
农杆菌介导的水稻快速高效基因转化系统 预览
2
作者 高璐 薛永来 《江苏农业科学》 2019年第4期39-42,共4页
农杆菌介导的水稻遗传转化体系被广泛应用于水稻功能基因研究、T-DNA插入突变体库创建和农艺性状改良等研究领域。然而水稻转基因操作需要超过3个月的组织培养时间。运用组织培养和农杆菌介导的遗传转化技术,对水稻遗传转化体系进行快... 农杆菌介导的水稻遗传转化体系被广泛应用于水稻功能基因研究、T-DNA插入突变体库创建和农艺性状改良等研究领域。然而水稻转基因操作需要超过3个月的组织培养时间。运用组织培养和农杆菌介导的遗传转化技术,对水稻遗传转化体系进行快速高效的优化。结果表明,成熟种子用2,4-D诱导愈伤7d后,与农杆菌共培养转化效率最佳;抗性筛选时间以2~4周为最佳。根据以上优化条件,从成熟种子诱导愈伤至获得转基因株系的时间被缩短到6周左右。将有效降低水稻长时间组培导致的体细胞无性系变异概率,对促进水稻分子育种的发展有重要意义。 展开更多
关键词 粳稻 杆菌介导 遗传转化
在线阅读 下载PDF
荒漠苔藓齿肋赤藓(Syntrichia caninervis Mitt.)瞬时遗传转化方法建立
3
作者 卓露 张道远 +2 位作者 李小双 杨红兰 管开云 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1913-1919,共7页
以野生极端耐干藓类植物齿肋赤藓(S. caninervis)为转化受体,进行农杆菌浸染,对GUS基因的瞬时表达率进行组织染色和分子检测分析。结果表明:GUS基因在野生齿肋赤藓植株个体中有一定表达,农杆菌培养过程中农杆菌浓度和瞬时转化过程中共... 以野生极端耐干藓类植物齿肋赤藓(S. caninervis)为转化受体,进行农杆菌浸染,对GUS基因的瞬时表达率进行组织染色和分子检测分析。结果表明:GUS基因在野生齿肋赤藓植株个体中有一定表达,农杆菌培养过程中农杆菌浓度和瞬时转化过程中共培养时间对瞬时转化率有很大的影响。其中,最优条件为用1/2 MS+100μmol/L AS+3%蔗糖+0.02%Tween20,p H=5.6调整菌液浓度至0.8,得到最高转化苗GUS瞬时表达率,为38%。本研究建立了一种齿肋赤藓外源基因瞬时遗传转化方法,为后续抗逆基因功能原位快速鉴定提供理论参考。 展开更多
关键词 荒漠苔薛 齿肋赤薛 瞬时转化 杆菌介导
基于RNAi技术抗黑条矮缩病水稻新品系的培育 预览
4
作者 朱文银 徐建第 +1 位作者 杨连群 姜明松 《山东农业科学》 2018年第11期23-27,共5页
水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)由介体灰飞虱以持久性不经卵方式传播。该病毒引起的水稻黑条矮缩病分布范围广、危害重。RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来发现的一种重要的植物抗病毒基因工程策略... 水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)由介体灰飞虱以持久性不经卵方式传播。该病毒引起的水稻黑条矮缩病分布范围广、危害重。RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来发现的一种重要的植物抗病毒基因工程策略,已广泛应用于植物抗病毒研究中。本研究利用已构建的包含P10 CP基因部分片段反向重复序列和生物安全性更高的标记基因bar基因的RNAi双元表达载体pRBSDV-CP3-bar,采用农杆菌介导转化水稻愈伤组织获得抗黑条矮缩病和抗除草剂的转基因水稻植株,通过抗性筛选、PCR检测及分子杂交分析,获得2个抗RBSDV和Basta的稳定品系,并对其田间抗性及农艺性状表现进行了鉴定,为抗RBSDV水稻新品种(品系)的培育奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻黑条矮缩病毒 RNA干扰 反向重复序列 杆菌介导
在线阅读 免费下载
根瘤农杆菌介导的喜树叶片瞬时转化体系的建立
5
作者 王碧莹 谷金芸 +2 位作者 霍春红 常纯皓 于放 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第17期5624-5630,共7页
喜树是中国传统的珍贵药用植物,因其含有抗癌、抗病毒药物喜树碱而被广泛关注。然而喜树碱在喜树中的低积累量限制了其在市场上的应用,因此喜树碱生物合成途径关键酶基因功能的鉴定及其代谢途径的解析变得尤为重要。稳定遗传转化因其周... 喜树是中国传统的珍贵药用植物,因其含有抗癌、抗病毒药物喜树碱而被广泛关注。然而喜树碱在喜树中的低积累量限制了其在市场上的应用,因此喜树碱生物合成途径关键酶基因功能的鉴定及其代谢途径的解析变得尤为重要。稳定遗传转化因其周期长、效率低而无法快速鉴定相关基因,瞬时转化则具有高效、方便、易操作等特点。利用瞬时转化可望更快速地解析未知代谢途径,进而调控喜树碱的合成、提高喜树碱的含量。目前喜树中瞬时转化研究较少,并且在前期实验中发现,选取同时期不同个体的喜树叶片进行瞬时转化,会因生理生化差异导致实验数据误差较大,进而增加实验结果分析的难度。所以,建立一种降低个体差异的喜树叶片瞬时转化方法具有重要的理论价值和现实意义。本研究以转化p BI121GD(GUS DELETED)和p BI121(35S::GUS)的根瘤农杆菌GV3101分别侵染喜树同一叶片左右部分,在侵染后不同时期进行GUS染色以检测同一叶片的左右部分GUS蛋白的表达差异,并利用半定量RT-PCR来检测GUS基因的转录水平。结果表明:与对照组比较,在侵染后的第7天实验组中的GUS基因和GUS蛋白均有较高的表达。上述结果表明,成功的在喜树中建立了一种降低个体差异的喜树叶片瞬时转化方法。 展开更多
关键词 喜树 杆菌介导 瞬时转化 GUS染色 个体差异
黄花蒿悬浮培养细胞系的建立及遗传转化 预览
6
作者 龙炎杏 张学文 +2 位作者 罗莎 肖楠 赵燕 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第6期607-612,共6页
为建立稳定的黄花蒿悬浮细胞系,以黄花蒿428-A植株的子叶、茎、腋芽和叶片为外植体,以MS为基础培养基,采用3因素(6-BA、NAA、2,4-D)4水平的L16(43)正交试验,优化黄花蒿愈伤组织诱导培养基,分析不同质量浓度(0、5、10、15、20、25、30 mg... 为建立稳定的黄花蒿悬浮细胞系,以黄花蒿428-A植株的子叶、茎、腋芽和叶片为外植体,以MS为基础培养基,采用3因素(6-BA、NAA、2,4-D)4水平的L16(43)正交试验,优化黄花蒿愈伤组织诱导培养基,分析不同质量浓度(0、5、10、15、20、25、30 mg/L)潮霉素对黄花蒿悬浮细胞生长的影响,比较羧苄青霉素(0、100、150、200、250、300 mg/L)对农杆菌的抑制效果,并运用农杆菌介导法对黄花蒿悬浮细胞进行GUS报告基因及色氨酸单加氧酶iaaM基因的遗传转化。结果表明:黄花蒿叶片愈伤诱导率较高,叶片愈伤组织较优培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,出愈率可达99.33%;潮霉素最适筛选质量浓度为30 mg/L,羧苄青霉素最适抑菌质量浓度为200 mg/L;转基因抗性愈伤GUS组织化学染色及PCR鉴定结果表明,外源基因iaaM已导入并整合至黄花蒿基因组中。 展开更多
关键词 黄花蒿 6-苄基氨基腺嘌呤 萘乙酸 二氯苯氧乙酸 悬浮细胞 杆菌介导 遗传转化
在线阅读 免费下载
大豆子叶节遗传转化体系的优化研究
7
作者 李冬梅 陈薇 +1 位作者 李永光 李文滨 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期531-538,共8页
为了提高大豆转化效率,建立一个稳定高效的大豆遗传转化体系,选择了4个代表性基因型大豆子叶节为外植体,以子叶节和丛生芽GUS瞬时表达率为指标,优化了大豆遗传转化过程。结果表明:在侵染阶段分别进行超声波和抽真空辅助处理,GUS染色显... 为了提高大豆转化效率,建立一个稳定高效的大豆遗传转化体系,选择了4个代表性基因型大豆子叶节为外植体,以子叶节和丛生芽GUS瞬时表达率为指标,优化了大豆遗传转化过程。结果表明:在侵染阶段分别进行超声波和抽真空辅助处理,GUS染色显示,4个基因型品种处理不同时间后遗传转化效率均有不同程度提高,超声波30 s或者抽真空2 min后农杆菌的侵染效率提高最为明显,转化效率分别提高8%~42%、16%~41%。在芽诱导前期进行PPT浓度筛选,4种基因型的最适PPT浓度均为0.2 mg·L(-1),转化效率提高18%~33%。 展开更多
关键词 杆菌介导 大豆子叶节 超声波 抽真空
菘蓝遗传转化体系的建立及转AtNDPK2基因研究 预览
8
作者 王丽艳 郭永霞 +2 位作者 荆瑞勇 孙强 殷奎德 《核农学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期455-462,共8页
为建立菘蓝的遗传转化体系,获得转AtNDPK2基因的菘蓝植株,本试验以二倍体和四倍体菘蓝为试验材料,采用农杆菌介导的方法,将胁迫诱导型启动子SWPA2与At NDPK2基因构建的共表达载体导入二倍体和四倍体菘蓝中,得到菘蓝稳定的遗传转化体系... 为建立菘蓝的遗传转化体系,获得转AtNDPK2基因的菘蓝植株,本试验以二倍体和四倍体菘蓝为试验材料,采用农杆菌介导的方法,将胁迫诱导型启动子SWPA2与At NDPK2基因构建的共表达载体导入二倍体和四倍体菘蓝中,得到菘蓝稳定的遗传转化体系为:叶片切成约0.5 cm×0.5 cm的小块,预培养2 d后,取出放于OD600为0.6~0.8的农杆菌菌液中摇动15 min后取出。然后用灭过菌的滤纸吸干菘蓝叶片表面的农杆菌,共培养3 d后将菘蓝叶片转入含25 mg·L~(-1)Kan和300 mg·L~(-1)Cef筛选培养基中培养15 d,转接到含50 mg·L~(-1)Kan和300 mg·L~(-1)Cef的筛选培养基中培养15 d。结果表明,二倍体抗性芽诱导率为8.84%,四倍体抗性芽诱导率为9.86%,将抗性芽切成单株,转接到加有50 mg·L~(-1)Kan和300 mg·L~(-1)Cef的生根培养基上进行生根培养,20 d后每株能长出大约25条根,将生根良好的抗性植株移栽到栽培土中,成活率达到80%以上。通过PCR检测获得6个二倍体株系和7个四倍体株系,进一步通过RT-PCR检测发现,阳性株系均在转录水平表达。本研究为菘蓝基因工程操作技术提供了一定的参考,同时也为菘蓝抗逆品种的培育奠定了理论基础。 展开更多
关键词 菘蓝 AtNDPK2 转化 杆菌介导
在线阅读 免费下载
农杆菌介导流苏石斛遗传转化体系的建立 预览
9
作者 黄超群 王小敏 +3 位作者 苏建睦 牛俊奇 李姗姗 莫昭展 《玉林师范学院学报》 2018年第2期62-67,共6页
以流苏石斛原球茎作为受体材料,通过筛选卡那霉素和羧苄青霉素的工作浓度,同时利用正交试验设计对农杆菌介导的流苏石斛遗传转化条件进行优化.结果表明:(1)卡那霉素浓度为200 mg/L可有效抑制非转化材料的生长,可作为抗性植株植株初... 以流苏石斛原球茎作为受体材料,通过筛选卡那霉素和羧苄青霉素的工作浓度,同时利用正交试验设计对农杆菌介导的流苏石斛遗传转化条件进行优化.结果表明:(1)卡那霉素浓度为200 mg/L可有效抑制非转化材料的生长,可作为抗性植株植株初步筛选浓度;(2)羧苄青霉素浓度为200 mg/L可完全抑制农杆菌的生长,可作为遗传转化脱菌时的最佳时间.(3)农杆菌介导遗传转化的最佳条件;浸染时间20 min、OD600值为0.8,培养5d、添加乙酰丁香酮AS 50μmol/L时,获得的转化率最高.试验对已经筛选了2个月的抗性原球茎进行PCR鉴定,表明已得到了转化的原球茎,初步证实目的基因已整合到流苏石斛的基因组中. 展开更多
关键词 流苏石斛 再生体系 杆菌介导 遗传转化
在线阅读 下载PDF
农杆菌介导的甜高粱遗传转化研究进展 预览 被引量:1
10
作者 杜浩 庄义庆 +1 位作者 黄萍 杜道林 《江苏农业科学》 2018年第4期29-32,共4页
甜高粱具有产量高、抗逆性强等多种优点,是国内外学者研究的热点。改良甜高粱的品质,提高其适用性,具有很高的实际应用价值。农杆菌介导的植物遗传转化法具有简便、稳定及高效的优点,被广泛地应用于甜高粱的遗传改良研究中。本文从甜高... 甜高粱具有产量高、抗逆性强等多种优点,是国内外学者研究的热点。改良甜高粱的品质,提高其适用性,具有很高的实际应用价值。农杆菌介导的植物遗传转化法具有简便、稳定及高效的优点,被广泛地应用于甜高粱的遗传改良研究中。本文从甜高粱遗传转化中品种的筛选、培养基成分的优化、标记基因的选择及实际应用等方面对农杆菌介导的甜高粱遗传转化进行了综述,并提出了今后农杆菌介导法转化甜高粱亟待解决的问题。 展开更多
关键词 甜高粱 杆菌介导 遗传转化 应用
在线阅读 下载PDF
节瓜CqWRKY1基因的遗传转化 预览 被引量:1
11
作者 杜翔斐 彭庆务 +5 位作者 江彪 金庆敏 姚春鹏 林毓娥 何晓明 王永飞 《核农学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1060-1069,共10页
为建立和优化节瓜的遗传转化体系,并高效地完成CqWRKY1基因的遗传转化,本研究以节瓜A39为材料,通过RT-PCR技术克隆了节瓜CqWRKY1基因,采用Gateway同源重组法构建了pEarleyGate101-CqWRKY1超表达载体,以节瓜子叶节为外植体,利用农杆菌介... 为建立和优化节瓜的遗传转化体系,并高效地完成CqWRKY1基因的遗传转化,本研究以节瓜A39为材料,通过RT-PCR技术克隆了节瓜CqWRKY1基因,采用Gateway同源重组法构建了pEarleyGate101-CqWRKY1超表达载体,以节瓜子叶节为外植体,利用农杆菌介导的遗传转化法进行转化。结果表明,子叶节不定芽诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L^-16-BA+1 mg·L^-1ABA,诱导率可达76.17%;生根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-1IAA;农杆菌侵染的最佳条件为农杆菌浓度OD600为0.3、侵染时间为10 min、共培养时间为3 d;最佳的抑菌抗生素为500 mg·L^-1的头孢霉素。本研究在181株拟转基因组培苗中共得到76株阳性T_0转基因组培苗,其中共有37株移栽成活。PCR结果表明,CqWRKY1已成功整合到37株转化植株的基因组中。本研究结果为进一步研究CqWRKY1基因的功能奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 节瓜 CqWRKY1 杆菌介导 遗传转化 离体培养
在线阅读 免费下载
根癌农杆菌介导的香石竹遗传转化体系建立
12
作者 孔维龙 王翠 +3 位作者 但乃震 李丹丹 包满珠 傅小鹏 《中国农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期34-44,共11页
为获得香石竹最佳转化体系及稳定表达的转基因植株,以香石竹组培苗叶片为材料,研究农杆菌菌种、香石竹基因型、预培养天数、侵染方式、共培养方式和时间等多个因素对香石竹遗传转化的影响。结果表明:香石竹转化的最佳方式是预培养2d... 为获得香石竹最佳转化体系及稳定表达的转基因植株,以香石竹组培苗叶片为材料,研究农杆菌菌种、香石竹基因型、预培养天数、侵染方式、共培养方式和时间等多个因素对香石竹遗传转化的影响。结果表明:香石竹转化的最佳方式是预培养2d,采用LBA4404农杆菌缓冲液摇床摇12min(200r/min),静置3min的侵染方式。侵染后叶片外植体接种于50μmol/L乙酰丁香酮(AS)溶液浸湿的无菌滤纸(3层),进行黑暗共培养5d。不同基因型对比结果表明:‘小桃红’的抗性芽分化率优于‘马斯特’和‘锦葵钛合金’。60mg/L卡那霉素(Kan)浓度对3个基因型的香石竹品种均有较好的抗性芽筛选效果,0.5mg/L吲哚丁酸(IBA)+0.22mg/L噻苯隆(TDZ)培养基是分化效率高、丛芽多、生长状态好的直接出芽培养基。本研究建立的的香石竹遗传转化体系,重复性好、转化效率高、基因型依赖较小,该体系能显著提高DcnPIP1;1基因的转化效率。 展开更多
关键词 香石竹 杆菌介导 遗传转化体系 高效
根癌农杆菌介导遗传转化烟草‘NC89’效率的影响因素 被引量:1
13
作者 MALEKI Samaneh Sadat MOHAMMADI Kourosh 季孔庶 《南京林业大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第1期27-34,共8页
【目的】通过农杆菌介导将PBI121:CslA1基因转入烟草‘NC89’,研究遗传转化的影响因素,旨在提高转化效率,优化相关技术。【方法】通过培养基的筛选在MS培养基+6-BA(2.0 mg/L)+NAA(1.0 mg/L)获得了大量的幼苗,以其作为转基因受体... 【目的】通过农杆菌介导将PBI121:CslA1基因转入烟草‘NC89’,研究遗传转化的影响因素,旨在提高转化效率,优化相关技术。【方法】通过培养基的筛选在MS培养基+6-BA(2.0 mg/L)+NAA(1.0 mg/L)获得了大量的幼苗,以其作为转基因受体材料,通过控制农杆菌浓度、预培养时间、农杆菌侵染时间、共培养时间等条件,进行含卡那选择性培养基的筛选,获得转基因壮苗。【结果】最佳的转基因植株培养方法为:共培养2 d以后,农杆菌的浓度D600为0.7,农杆菌诱导20 min,培养基的卡那质量浓度为100 mg/m L;暗培养4 d易于提高再生率,更换选择性培养基后暗培养7 d,更容易缩短愈伤诱导的时间。用RT-PCR和Southern杂交进一步验证和分析了转基因的结果。【结论】通过优化转基因的各环节条件,实现烟草的过量表达,提高了转基因的效率。研究结果可为农杆菌介导转化法在烟草及其相关植物的遗传转化应用提供参考。 展开更多
关键词 遗传转化 烟草 杆菌介导 高效
抗氧化剂在清除活性氧及提高农杆菌介导转化效率中的应用
14
作者 钟宣伯 何梦迪 +2 位作者 周启政 汪桂凤 唐桂香 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第11期1928-1934,共7页
组织细胞褐变坏死、芽逃离和转化顽拗是影响农杆菌介导转化效率的三大因素,研究表明,这些因素均与活性氧(reactive oxygen species, ROS)产生有关,过量ROS会影响植物细胞的全能性。添加抗氧化剂不仅可以减少农杆菌介导转化过程中外植体... 组织细胞褐变坏死、芽逃离和转化顽拗是影响农杆菌介导转化效率的三大因素,研究表明,这些因素均与活性氧(reactive oxygen species, ROS)产生有关,过量ROS会影响植物细胞的全能性。添加抗氧化剂不仅可以减少农杆菌介导转化过程中外植体褐变坏死,而且可以增强农杆菌活力,促进外植体生长,增强农杆菌介导转化效率。该文综述了农杆菌介导转化过程中活性氧的产生及其对转化效率的影响,尤其是新型抗氧化剂硫辛酸在提高农杆菌介导转化效率中的作用。 展开更多
关键词 活性氧(ROS) 杆菌介导 抗氧化剂 转化效率
CD20片段抗体在红花悬浮细胞中的表达研究 预览 被引量:1
15
作者 王立勇 刘秀明 +6 位作者 张玲 姚娜 王德仲 历雯清 蔡静波 李海燕 姜潮 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2017年第12期112-120,共9页
【目的】研究用红花愈伤组织建立红花悬浮细胞培养体系的条件,并利用红花悬浮细胞通过农杆菌介导转化法表达CD20复合片段抗体。【方法】以红花子叶为外植体,研究不同种类激素组合对愈伤诱导率的影响,筛选优质愈伤组织进行悬浮培养,探索... 【目的】研究用红花愈伤组织建立红花悬浮细胞培养体系的条件,并利用红花悬浮细胞通过农杆菌介导转化法表达CD20复合片段抗体。【方法】以红花子叶为外植体,研究不同种类激素组合对愈伤诱导率的影响,筛选优质愈伤组织进行悬浮培养,探索不同初始接种量、蔗糖质量分数、水解酪蛋白质量浓度对红花悬浮细胞生长的影响。将CD20复合片段抗体基因两端引入XmaⅠ/EcoRⅠ酶切位点,并将其与pEASY-T1和pBasta载体相连,构建pEASY-T1-CD20克隆载体和pBasta-CD20表达载体,再将构建的pBasta-CD20表达载体转入根瘤农杆菌,利用根瘤农杆菌介导红花悬浮细胞转化法表达CD20复合片段抗体。【结果】红花子叶愈伤诱导最佳条件为MS+NAA 2mg/L+6-BA 0.5mg/L、温度(25±0.1)℃、光照70μmol/(m2·s)连续光照,继代培养条件为MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、30μmol/(m2·s)连续光照、温度(25±0.1)℃。悬浮细胞体系培养最佳条件为不加琼脂粉的MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、接种量2.5g(50mL培养基)、蔗糖质量分数2%、水解酪蛋白800mg/L。pBastaCD20表达载体构建成功,且目的蛋白在红花悬浮细胞中成功表达。【结论】成功构建了红花悬浮细胞培养体系,并用该体系成功表达了CD20复合片段抗体。 展开更多
关键词 红花愈伤组织 悬浮细胞 杆菌介导 表达载体 CD20复合片段抗体
在线阅读 下载PDF
农杆菌侵染条件对玉米单倍体遗传转化的影响 预览
16
作者 赵爱菊 陈希勇 +1 位作者 高增玉 王江浩 《河北农业科学》 2017年第6期81-84,共4页
以玉米诱导系HHI69诱导玉米自交系获得的单倍体愈伤组织为受体材料,GUS基因为报告基因,采用农杆菌介导法进行遗传转化,对影响转化效率的侵染条件进行了研究。结果表明:继代8d后的愈伤组织最适宜农杆菌转化;农杆菌菌株EHA105的侵染力好于... 以玉米诱导系HHI69诱导玉米自交系获得的单倍体愈伤组织为受体材料,GUS基因为报告基因,采用农杆菌介导法进行遗传转化,对影响转化效率的侵染条件进行了研究。结果表明:继代8d后的愈伤组织最适宜农杆菌转化;农杆菌菌株EHA105的侵染力好于LBA4404;侵染液浓度OD600为0.7、侵染时间为30min时,GUS瞬时表达率最高,达到了65.31%。 展开更多
关键词 杆菌介导 玉米 单倍体 侵染 遗传转化
在线阅读 免费下载
农杆菌介导的ZmRLK基因转化玉米的分析 被引量:1
17
作者 李倩 王帅 +6 位作者 隋颂扬 单晓辉 苏胜忠 刘宏魁 李世鹏 吴颖 原亚萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期150-154,共5页
玉米是世界上非常重要的粮食作物,其产量受诸多生物胁迫及非生物胁迫的影响。转基因技术是玉米遗传改良的重要途径之一。利用转基因技术把抗逆基因导入玉米优良自交系,并使其后代具有抵抗逆境的能力,减少损害,从而实现高产稳产。本研究... 玉米是世界上非常重要的粮食作物,其产量受诸多生物胁迫及非生物胁迫的影响。转基因技术是玉米遗传改良的重要途径之一。利用转基因技术把抗逆基因导入玉米优良自交系,并使其后代具有抵抗逆境的能力,减少损害,从而实现高产稳产。本研究通过将抗冷基因ZmRLK在玉米自交系Y423中遗传转化,得到过量表达ZmRLK基因的抗冷玉米新种质。结果表明,以玉米自交系Y423幼胚为受体,经检测获得ZmRLK过表达阳性植株89株;干扰载体获得121株阳性植株;空载体获得31株阳性植株。转基因阳性植株的获得为培育转基因玉米新品种提供帮助。 展开更多
关键词 玉米 ZmRLK基因 杆菌介导 转基因植株
地黄基因RghBNG转化地黄过表达研究 预览 被引量:1
18
作者 周延清 杨珂 +3 位作者 张喻 张丹丹 李梦辰 余萌 《湖北农业科学》 2017年第17期3342-3344,共3页
用RT-PCR技术从地黄[Rehmannia glutinosa(Gaertn.)Libosch.]幼叶中克隆地黄基因RghBNG,使用Pst I和HindⅢ分别酶切地黄基因RghBNG和植物表达载体p CAMBIA302-GFP,经过重组,构建其过表达载体,转化农杆菌菌株GV3101,获得其工程菌;采用... 用RT-PCR技术从地黄[Rehmannia glutinosa(Gaertn.)Libosch.]幼叶中克隆地黄基因RghBNG,使用Pst I和HindⅢ分别酶切地黄基因RghBNG和植物表达载体p CAMBIA302-GFP,经过重组,构建其过表达载体,转化农杆菌菌株GV3101,获得其工程菌;采用农杆菌介导法,将该基因转入地黄幼叶细胞,再生转化地黄植株。经过潮霉素抗性筛选、PCR和qRT-PCR检测,获得过表达基因RghBNG地黄植株。这些结果为进一步阐明地黄基因RghBNG功能和地黄遗传改良奠定了基础。 展开更多
关键词 地黄[Rehmannia glutinosa(Gaertn.) Libosch.] RghBNG 过表达载体 QRT-PCR 杆菌介导
在线阅读 下载PDF
导入OsVTE基因提高普那菊苣的抗旱性 预览
19
作者 穆志新 师颖 +1 位作者 张丽君 周建萍 《草地学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期839-844,共6页
通过植物基因工程手段培育转基因作物品种,可改善作物的生存能力和对生态环境的耐受力。本研究以普那菊苣叶片(Cichorium intybus L.‘Puna’)为受体材料,用农杆菌介导方法,将来自水稻的由CaMV35S启动子驱动的生育酚环化酶(tocophero... 通过植物基因工程手段培育转基因作物品种,可改善作物的生存能力和对生态环境的耐受力。本研究以普那菊苣叶片(Cichorium intybus L.‘Puna’)为受体材料,用农杆菌介导方法,将来自水稻的由CaMV35S启动子驱动的生育酚环化酶(tocopherol cyclase,OsVTE)基因导入普那菊苣。经过卡那霉素(Km)筛选以及对抗性植株PCR和Southern杂交分析,获得了转基因植株。用不同浓度的蔗糖、琼脂和甘露醇溶液研究普那菊苣幼苗的耐旱性,发现转基因植株的耐旱性明显得到提高。蔗糖浓度为50g·L~(-1)、琼脂浓度为10g·L~(-1)和甘露醇浓度为30g·L~(-1)胁迫下普那菊苣的生理指标测定显示,转基因普那菊苣幼苗SOD、POD活性比未转化植株高2~3倍,转基因普那菊苣幼苗MDA含量降低。本研究获得了稳定的转OsVTE基因植株,旱胁迫下的转基因植株的SOD酶活性和POD酶活性含量提高,表现出一定的耐旱性。 展开更多
关键词 维生素E(OsVTE) 普那菊苣 杆菌介导 遗传转化 抗逆性
在线阅读 下载PDF
冠突散囊菌nsdD基因超表达菌株的构建及表型分析
20
作者 余春芳 熊庆 +4 位作者 李文仿 谭玉梅 刘永翔 刘作易 欧琴 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第3期900-905,共6页
为了研究冠突散囊菌nssdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转... 为了研究冠突散囊菌nssdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转化到冠突散囊菌进行功能验证。结果显示向基因组随机插入外源质粒DNA,随机挑选11个nsdD基因超表达转化子,对nsdD基因超表达转化子菌株培养观察并与野生型菌株相比发现,在5%和17%NaCl培养基中菌落差异不显著,而且仍能产生成熟的有性孢子。本实验为冠突散囊菌有性发育调控机制的研究提供了技术基础。 展开更多
关键词 冠突散囊菌 表达质粒构建 nsdD基因超表达 杆菌介导
上一页 1 2 51 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈