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新型分子检测技术在基层实验室诊断肺结核的效能分析
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作者 彭英 苏欣 +5 位作者 江琦 陈昌明 卞然 钟声 高谦 李发滨 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第2期145-148,共4页
目的分析与比较GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)与交叉引物核酸恒温扩增(cross-priming amplification,CPA)技术在基层实验室结核病快速诊断中的效能。方法连续收集黑龙江省五常市结核病防治所2014年4月至2017年7月初诊肺结核可... 目的分析与比较GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)与交叉引物核酸恒温扩增(cross-priming amplification,CPA)技术在基层实验室结核病快速诊断中的效能。方法连续收集黑龙江省五常市结核病防治所2014年4月至2017年7月初诊肺结核可疑患者的痰标本,分别进行改良罗氏固体培养基培养法(简称“固体培养法”)与快速分子检测(A组采用GeneXpert检测了787例;B组采用CPA检测了501例)。以固体培养法为标准,计算2种分子检测技术的敏感度、特异度、Kappa值。结果A组共检测787例患者痰标本,其中培养阳性229例,GeneXpert阳性300例,GeneXpert检测的敏感度、特异度分别为99.1%(227/229)、86.9%(485/558),Kappa=0.788。B组共检测501例患者痰标本,其中培养阳性129例,CPA检测阳性125例。CPA检测的敏感度、特异度分别为81.4%(105/129)、94.6%(352/372),Kappa=0.768。2种分子检测技术与固体培养法检测结果的一致率比较,差异无统计学意义[90.5%(712/787)vs91.2%(457/501);χ^2=0.204,P=0.652)]。结论CPA检测的准确性与GeneXpert相当,但其成本低、无需检测仪器、允许每批次大量样本同时操作,更适用于基层实验室对肺结核患者的早期诊断。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分子探针技术 核酸扩增技术 实验室技术和方法 对比研究
129株非结核分枝杆菌采用两种分子检测技术行菌种鉴定的结果分析
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作者 刘佳文 吕红艳 +1 位作者 丁北川 张治国 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第9期999-1004,共6页
目的分析北京地区3个单位非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株采用芯片杂交法(简称“芯片法”)和16SrRNA基因测序(简称“基因测序”)进行菌种鉴定的结果,为临床分枝杆菌病的快速准确诊断提供科学依据。方法用芯片法和基因测序进行北京地区3... 目的分析北京地区3个单位非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株采用芯片杂交法(简称“芯片法”)和16SrRNA基因测序(简称“基因测序”)进行菌种鉴定的结果,为临床分枝杆菌病的快速准确诊断提供科学依据。方法用芯片法和基因测序进行北京地区3个单位129株NTM临床分离株的菌种鉴定,实验操作者之间采用双盲法,对两种鉴定方法的结果进行比较和评价。结果129株NTM菌株中,有107株进行分枝杆菌基因测序,其中59株为胞内分枝杆菌(55.1%);29株为堪萨斯分枝杆菌(27.1%);5株为龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌(4.7%);3株为鸟分枝杆菌(2.8%);2株为偶发分枝杆菌(1.9%);2株为戈登分枝杆菌(1.9%);1株为蟾蜍分枝杆菌(0.9%);1株为草分枝杆菌(0.9%);1株为瘰疬分枝杆菌(0.9%);4株为其他NTM(3.7%)。有116株进行芯片法分枝杆菌菌种鉴定,且有96株同时进行芯片法和基因测序法检测,两种方法进行菌种鉴定的符合率为88.5%(85/96)。基因测序发现有3株外来菌株,分别为明尼苏达分枝杆菌、熊本分枝杆菌、提门分枝杆菌(M.temen)。结论北京3家机构NTM菌种以胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌为主。用芯片法和基因测序对NTM临床分离株进行菌种鉴定的一致率较高。 展开更多
关键词 分枝杆菌 非典型性 生物学鉴定法 芯片分析技术 分子探针技术 寡核苷酸序列分析 结果与过程评价(卫生保健)
GeneXpert MTB/RIF与线性探针技术检测骨关节结核及利福平耐药性的价值
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作者 盛杰 古甫丁 +4 位作者 古丽比克·木拉提 唐伟 马良 米尔扎提·艾莎 地里下提·阿不力孜 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第4期394-398,共5页
目的探讨GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)和线性探针技术检测骨关节结核及利福平耐药性的临床应用价值。方法选取2018年3-12月接受病灶清除手术或穿刺术的疑似骨关节结核患者172例,同时采用GeneXpert、线性探针技术及BACTEC MGIT ... 目的探讨GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)和线性探针技术检测骨关节结核及利福平耐药性的临床应用价值。方法选取2018年3-12月接受病灶清除手术或穿刺术的疑似骨关节结核患者172例,同时采用GeneXpert、线性探针技术及BACTEC MGIT 960对患者病灶标本进行检测。以临床综合诊断为参照标准,评价GeneXpert、线性探针技术及两种方法联合检测骨关节结核的效能。以BACTEC MGIT 960药物敏感性试验(DST)结果为参照标准,评价GeneXpert、线性探针技术及两种方法联合检测MTB对利福平耐药性的效能。结果 172例疑似骨关节结核患者经临床综合诊断,112例诊断为骨关节结核,60例为非骨关节结核。以临床综合诊断为参照标准,GeneXpert检测骨关节结核的敏感度和特异度分别为82.14%(92/112)和96.67%(58/60),与临床诊断结果一致性良好(Kappa=0.74);线性探针技术检测的敏感度和特异度分别为69.64%(78/112)和90.00%(54/60),与临床诊断结果一致性一般(Kappa=0.54);两种方法联合检验的敏感度和特异度分别为82.14%(92/112)和90.00%(54/60),与临床诊断结果一致性良好(Kappa=0.68)。三种方法诊断骨关节结核的受试者工作特征曲线(简称“ROC曲线”)下面积分别为0.89、0.80、0.86,提示诊断价值均较好。以BACTEC MGIT 960 DST 结果为参照标准,GeneXpert检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为100.00%(18/18)和92.31%(24/26),与BACTEC MGIT 960 DST结果一致性较高(Kappa=0.91),ROC曲线下面积为0.96;线性探针技术检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为100.00%(18/18)和88.46%(23/26),与BACTEC MGIT 960 DST结果一致性较高(Kappa=0.86),ROC曲线下面积为0.94;两种方法联合检验结果与线性探针技术检测结果一致。结论 GeneXpert、线性探针技术能够快速、准确的检测骨关节结核及其耐药性,具有较好的临床应用价值。 展开更多
关键词 结核 骨关节 微生物敏感性试验 分子探针技术 核酸扩增技术 评价研究
三种分子生物学方法检测结核分枝杆菌耐药性的效能分析
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作者 马进宝 杨翰 +1 位作者 任斐 党丽云 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第4期440-446,共7页
目的评价GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)、基因芯片检测及实时荧光定量PCR熔解曲线法(简称“PCR熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的价值。方法选取2017年1月至2018年1月西安市胸科医院有表型药物敏感性试验(简称“表型... 目的评价GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)、基因芯片检测及实时荧光定量PCR熔解曲线法(简称“PCR熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的价值。方法选取2017年1月至2018年1月西安市胸科医院有表型药物敏感性试验(简称“表型药敏试验”)结果的痰MTB培养阳性的774例肺结核患者作为研究对象,收集其表型药敏试验、GeneXpert、基因芯片及PCR熔解曲线法检测结果。以表型药敏试验结果为参照标准,评估3种分子生物学方法检测MTB耐药性的效能;根据受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积比较3种分子生物学方法检测MTB对利福平(RFP)耐药性的准确度。结果以表型药敏试验结果为参照标准,GeneXpert检测MTB对RFP耐药性的敏感度和特异度分别为95.6%(87/91)和93.6%(249/266);基因芯片检测MTB对RFP和异烟肼(INH)耐药性的敏感度分别为92.8%(90/97)和78.8%(130/165),特异度分别为96.8%(610/630)和99.1%(557/562);PCR熔解曲线法检测MTB对RFP、INH、左氧氟沙星(Lfx)和阿米卡星(Am)耐药性的敏感度分别为:94.4%(51/54)、82.4%(61/74)、87.1%(27/31)、75.0%(6/8),特异度分别为:93.9%(138/147)、95.3%(121/127)、98.8%(164/166)、99.5%(188/189)。以表型药敏试验结果为参照标准,GeneXpert检测MTB对RFP耐药性ROC曲线下面积为0.95±0.02,基因芯片法和PCR熔解曲线法检测MTB对RFP耐药性曲线下面积均为0.93±0.03。结论 GeneXpert、基因芯片及PCR熔解曲线法检测MTB培养阳性肺结核患者对一线抗结核药物耐药性均比较可靠;PCR熔解曲线法检测MTB对Lfx和Am耐药性比较可靠。 展开更多
关键词 结核 抗多种药物性 微生物敏感性试验 分子探针技术 核酸扩增技术 评价研究
基因芯片与线性探针技术检测涂阳肺结核患者痰标本MTB耐药性的价值
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作者 刘元 周俊 +2 位作者 崔晓利 雷佳媛 党丽云 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第7期738-742,共5页
目的评价基因芯片技术与线性探针技术(GenoType MTBDRplus)快速检测MTB耐药性的临床应用价值。方法选取西安市胸科医院2017年4月至2018年8月住院治疗的493例涂阳肺结核患者作为研究对象,收集其痰标本,痰标本量均不少于2ml。每例患者用... 目的评价基因芯片技术与线性探针技术(GenoType MTBDRplus)快速检测MTB耐药性的临床应用价值。方法选取西安市胸科医院2017年4月至2018年8月住院治疗的493例涂阳肺结核患者作为研究对象,收集其痰标本,痰标本量均不少于2ml。每例患者用同一份痰标本分别进行基因芯片检测、线性探针检测和BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960液体培养”),同时对培养阳性且鉴定为MTB的临床分离株进行MGIT 960液体药物敏感性试验(简称“药敏试验”)。以MGIT 960液体药敏试验结果为参照标准,分析基因芯片技术及线性探针技术检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平和异烟肼耐药性的效能。结果 454例研究对象同时具有3种药敏试验检测结果。以MGIT 960液体药敏试验结果为参照标准,基因芯片法和线性探针法检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为89.0%(65/73)、96.1%(366/381)、0.82和90.4%(66/73)、96.1%(366/381)、0.83;检测涂阳肺结核患者痰标本MTB异烟肼耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为80.2%(93/116)、96.7%(327/338)、0.80和81.9%(95/116)、97.0%(328/338)、0.82。454例涂阳肺结核患者痰标本中,453例应用2种分子生物学检测方法检测MTB利福平耐药性结果相同,符合率为99.8%;445例应用2种分子生物学方法检测MTB异烟肼耐药性结果相同,符合率为98.0%。结论基因芯片技术和线性探针技术(GenoType MTBDRplus)检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平和异烟肼耐药性与MGIT 960液体药敏试验具有较高的一致性,二者均可为临床提供快速、特异的耐药检测结果。 展开更多
关键词 结核 抗多种药物性 芯片分析技术 分子探针技术 利福平 异烟肼 对比研究
荧光PCR探针熔解曲线技术检测涂阳患者痰标本中结核分枝杆菌耐药性的价值
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作者 赵国连 崔晓利 +2 位作者 康磊 刘元 党丽云 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第2期149-155,共7页
目的评估荧光PCR探针熔解曲线(MeltPro)技术检测涂阳患者痰标本中MTB耐药性的效能。方法收集2016年9月至2018年8月西安市胸科医院500例痰涂片阳性患者的痰标本,分别进行痰涂片镜检、GeneXpert MTB/RIF检测、BACTEC MGIT 960(简称“MGIT ... 目的评估荧光PCR探针熔解曲线(MeltPro)技术检测涂阳患者痰标本中MTB耐药性的效能。方法收集2016年9月至2018年8月西安市胸科医院500例痰涂片阳性患者的痰标本,分别进行痰涂片镜检、GeneXpert MTB/RIF检测、BACTEC MGIT 960(简称“MGIT 960”)液体培养、表型药物敏感性试验(简称“药敏试验”),并应用MeltPro法检测痰标本中MTB菌株对利福平、异烟肼、二线注射类和氟喹诺酮类等抗结核药物的耐药性,并以表型药敏试验为标准,评价MeltPro法的检测效能。结果以表型药敏试验结果为标准,MeltPro法检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为98.7%(76/77)和94.2%(343/364),检测对异烟肼耐药性的敏感度和特异度分别为82.3%(102/124)和96.2%(304/316),检测对阿米卡星耐药性的敏感度和特异度分别为8/9和99.5%(432/434),检测对卷曲霉素耐药性的敏感度和特异度分别为6/7和99.1%(432/436),检测对左氧氟沙星耐药性的敏感度和特异度分别为90.6%(48/53)和99.2%(386/389),检测对莫西沙星耐药性的敏感度和特异度分别为88.1%(37/42)和96.5%(386/400)。以表型药敏试验结果为标准,GeneXpertMTB/RIF检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为94.8%(73/77)和94.0%(342/364)。GeneXpert-MTB/RIF和MeltPro法与表型药敏试验结果一致性均较好(Kappa值分别为0.81和0.84),但MeltPro法检测效能与表型药敏试验检测结果的一致性更高。结论MeltPro法检测涂阳患者痰标本中MTB菌株对利福平、异烟肼,以及二线注射类和氟喹诺酮类抗结核药物耐药性有较好的效能。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 微生物敏感性试验 分子探针技术 结核 抗多种药物性 敏感性与特异性 对比研究
荧光PCR探针熔解曲线技术检测结核分枝杆菌对五种抗结核药物耐药性的研究
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作者 曹志华 赵悦竹 胡双双 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第2期156-161,共6页
目的运用荧光PCR探针熔解曲线技术检测结核分枝杆菌(MTB)对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氟喹诺酮类共5种抗结核药物的耐药性,并评价其临床应用价值。方法收集2018年1—8月分离自抚顺市第四人民医院门诊患者的153株MTB临床分离株... 目的运用荧光PCR探针熔解曲线技术检测结核分枝杆菌(MTB)对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氟喹诺酮类共5种抗结核药物的耐药性,并评价其临床应用价值。方法收集2018年1—8月分离自抚顺市第四人民医院门诊患者的153株MTB临床分离株,采用荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素和氟喹诺酮类药物的耐药性。以比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”)为金标准,评价荧光PCR探针熔解曲线法的敏感度、特异度和一致率。结果以比例法药敏试验为金标准,荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对利福平耐药性的敏感度为95.56%(43/45),特异度为94.44%(102/108),一致率为94.77%(145/153),Kappa值为0.88;对异烟肼耐药性的敏感度为90.57%(48/53),特异度为96.00%(96/100),一致率为94.12%(144/153),Kappa值为0.87;对乙胺丁醇耐药性的敏感度为85.71%(18/21),特异度为92.42%(122/132),一致率为91.50%(140/153),Kappa值为0.69;对链霉素耐药性的敏感度为89.66%(26/29),特异度为92.74%(115/124),一致率为92.16%(141/153),Kappa值为0.76;对氟喹诺酮类药物耐药性的敏感度为93.75%(15/16),特异度为96.35%(132/137),一致率为96.08%(147/153),Kappa值为0.81。结论荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素和氟喹诺酮类药物的耐药性具有良好的效能,可为医生制定用药方案提供重要依据。 展开更多
关键词 结核 抗多种药物性 聚合酶链反应 分子探针技术 微生物敏感性试验 评价研究
958例结核病患者临床分离株耐药基因检测结果分析
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作者 崔晓利 杨翰 +3 位作者 邬霞 郑丹 尤振宇 党丽云 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第5期541-545,共5页
目的分析958例患者结核分枝杆菌的相关基因突变位点。方法收集2017年1-12月西安市胸科医院对痰液、组织、胸腹腔积液等各类型临床标本进行分枝杆菌培养阳性的2718例患者的菌液,经菌种鉴定非结核分枝杆菌感染患者-11例.结核分枝杆菌感染... 目的分析958例患者结核分枝杆菌的相关基因突变位点。方法收集2017年1-12月西安市胸科医院对痰液、组织、胸腹腔积液等各类型临床标本进行分枝杆菌培养阳性的2718例患者的菌液,经菌种鉴定非结核分枝杆菌感染患者-11例.结核分枝杆菌感染患者2677例.选择结核分枝杆菌菌种同时进行MGIT 960液体药物敏感性试验(简称“药敏试验”)和耐药基因检测的患者958例.分析不同性别、年龄组患苕的结核分枝杆菌菌株间突变位点差异及突变位点与表型药敏试验检测结果的符合率。计数资料采用x^2检验,以PV0.05为差异有统计学意义。结果958例患者菌株的基因突变位点分析中,任一位点突变率为19.52%( 187/958).5~、21~、41~、61~83岁各年龄组的菌株mpB基因位点突变率分别为7. 89%(9 114) J3. 52%(63/466)、18. 27%(38/208)和9.41;(16 170)。不同年龄组中.中年组的mpB基因位点突变率与青少年组和老年组比较差异有统计学意义(x^2值分别为6.358和5.994. P值分别为0.013和0.018);男性任一位点突变率为19. 45%(121 622).女性为19. 05%(61 336),不同性别比较差异无统计学意义(x^2=0. 023.P=0. 932);突变位点与表型药敏试验的符合率以利福平 ropB 531(C-T)(96. 10%,74/77)、异烟肼 katG 315(6-0(98. 45%, 127/129)最高.但 ropB 51KT-C)与利福平表型药敏试验结果相符率较差(0.00%.0/10)。结论不同年龄组患者的菌株基因位点突变率差异有统计学意义.中年组突变率最高;不同性别患者的突变率差异无统计学意义;应当结合表型药敏试验的检测结果进行耐药基因位点突变在诊断意义上的分析。 展开更多
关键词 分枝杆菌.结核 微生物敏感性试验 分子探针技术 点突变 对比研究
荧光PCR探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌复合群对利福平和异烟肼耐药性的价值
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作者 吴慧娜 孙付胜 +5 位作者 刘清文 戎中录 张纪东 高阳 李永福 常斐 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第1期74-79,共6页
目的评价荧光PCR探针熔解曲线法(简称“探针熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌复合群对利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药性的价值。方法从2015年1月至2018年7月山东省菏泽市传染病医院收治的883例肺结核和耐多药结核病(MDR-TB)患者中,选择萋-... 目的评价荧光PCR探针熔解曲线法(简称“探针熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌复合群对利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药性的价值。方法从2015年1月至2018年7月山东省菏泽市传染病医院收治的883例肺结核和耐多药结核病(MDR-TB)患者中,选择萋-尼染色结果为阳性的结核病患者的痰标本共215份(例)进行分离培养,对鉴定为结核分枝杆菌复合群(MTBC)的200株(例)菌株同时使用比例法药物敏感性试验(DST)和探针熔解曲线法检测对RFP和INH的耐药性。以DST检测结果为金标准,分析探针熔解曲线法检测RFP和INH的敏感度、特异度、符合率和一致性(Kappa检验)。结果 200株(例)MTBC分离株中,以DST检测结果为标准,探针熔解曲线法检测RFP耐药性的敏感度、特异度和符合率分别为96.4%(106/110;95%CI:90.7%~98.9%)、80.0%(72/90;95%CI:70.5%~87.1%)和89.0%(178/200);对INH耐药性检测的敏感度、特异度和符合率分别为85.4%(123/144;95%CI:78.6%~90.7%)、96.4%(54/56;95%CI:87.7%~99.6%)和88.5%(177/200)。探针熔解曲线法与DST检测MTBC对RFP耐药性的Kappa值为0.78,对INH耐药性的Kappa值为0.74。结论探针熔解曲线法检测MTBC对RFP和INH的耐药性均有较高的敏感度和特异度,且探针熔解曲线法与DST检测MTBC对RFP和INH耐药性的一致性较高,有助于对耐药结核病患者的及早发现和治疗。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 聚合酶链反应 分子探针技术 利福平 异烟肼 微生物敏感性试验 数据说明 统计
采用GenoType MTBDR plus检测技术快速检测结核分枝杆菌耐药性的研究
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作者 洪创跃 李金莉 +3 位作者 赵广录 桂静 朱玉梅 王峰 《结核病与肺部健康杂志》 2018年第3期180-184,共5页
目的评价GenoType MTBDR plus方法[线性探针杂交技术(HAIN技术)中的一种方法,以下简称“HAIN技术”]检测深圳地区结核分枝杆菌菌株耐药性的临床应用能力。方法采用HAIN技术检测2014-2016年深圳市耐药监测项目(来自于深圳市慢性病防... 目的评价GenoType MTBDR plus方法[线性探针杂交技术(HAIN技术)中的一种方法,以下简称“HAIN技术”]检测深圳地区结核分枝杆菌菌株耐药性的临床应用能力。方法采用HAIN技术检测2014-2016年深圳市耐药监测项目(来自于深圳市慢性病防治中心及深圳市各区慢性病防治院)的1140株临床菌株的耐药性,以传统药物敏感性试验(简称“药敏试验”)的比例法(简称“比例法药敏试验”)作为对照,评价HAIN技术检测耐药的能力。分别利用McNemar检验对检测效果进行评价,敏感度和特异度对检测结果真实性进行评价,阳性预测值和阴性预测值对检测方法应用价值进行评价,以及利用Kappa检验对两种方法检测结果的一致性进行评价。结果比例法药敏试验检测结果为异烟肼耐药123例,利福平耐药75例,耐多药52例;HAIN技术检测异烟肼耐药120例、利福平耐药79例、耐多药52例,两种检测方法比较差异均无统计学意义(McNemar检验,P值分别为0.250、0.219、1.000)。以比例法药敏试验结果为标准,HAIN技术检测异烟肼耐药的敏感度和特异度分别为97.6%(120/123)和100.0%(1017/1017),阳性预测值和阴性预测值分别为100.0%(120/120)和99.7%(1017/1020),Kappa值为0.986;检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为98.7%(74/75)和99.5%(1060/1065),阳性预测值和阴性预测值分别为93.7%(74/79)和99.9%(1060/1061),Kappa值为0.958;检测耐多药的敏感度和特异度分别为96.2%(50/52)和99.8%(1086/1088),阳性预测值和阴性预测值分别为96.2%(50/52)和99.8%(1086/1088),Kappa值为0.960。HAIN技术检测利福平耐药基因rpoB出发生频率最高的突变是野生型条带8缺失及S531L位点突变(58.7%,44/75),其次是野生型条带7缺失及H526Y位点突变( 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分子探针技术 结核 抗多种药物性 评价研究(主题)
柳州市和喀什地区推广应用结核病新诊断技术的效果分析
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作者 阮云洲 李仁忠 +5 位作者 苏伟 赵雁林 王黎霞 魏旭 刘一垚 廖奇志 《中国防痨杂志》 CAS 2018年第6期583-588,共6页
目的探索我国边疆少数民族地区推广应用发光二级管荧光显微镜(简称“LED荧光显微镜”)和线性探针耐药检测技术的可行性。方法采用典型调查,选择广西壮族自治区柳州市和新疆维吾尔自治区喀什地区作为研究现场,研究对象为2013年1月1日... 目的探索我国边疆少数民族地区推广应用发光二级管荧光显微镜(简称“LED荧光显微镜”)和线性探针耐药检测技术的可行性。方法采用典型调查,选择广西壮族自治区柳州市和新疆维吾尔自治区喀什地区作为研究现场,研究对象为2013年1月1日至2016年12月31日期间,所有初次到当地结核病防治机构(简称“结防机构”)就诊的肺结核可疑症状者。推广新技术前(2013年)柳州市和喀什地区分别纳入肺结核可疑症状者14337和32022例;推广新技术后(20142016年)柳州市和喀什地区分别纳入肺结核可疑症状者年平均12796和36649例。推广的新技术主要为研究地区县级结防机构配备LED荧光显微镜,对初诊患者的痰标本进行涂片镜检,以诊断涂片阳性肺结核和活动性肺结核;地市级结防机构配备线性探针耐药检测设备和试剂,检测痰涂片阳性标本对一线抗结核药物利福平和异烟肼的耐药性。回顾性收集推广新技术前的数据,并前瞻性收集推广新技术后的数据,对比分析推广新技术前后初诊患者查痰率和耐药高危人群耐药筛查率的变化情况。结果柳州市和喀什地区初诊患者查痰率分别从推广新技术前的54.15%(7763/14337)和65.36%(20930/32022)增加到推广新技术后的年平均64.25%(8221/12796)和74.34%(27246/36649),差异均有统计学意义(x2=285.00,P〈0.001;x2=658.00,P〈0.001);其中,LED荧光显微镜查痰比率从均为0.00%分别增加到79.36%(6524/8221)和92.88%(25307/27246),差异均有统计学意义(Fisher精确检验法,P值均〈0.001)。2个地区耐药高危人群筛查率从均为0.00%分别增加到94.61%(158/167)和74.96%(494/659),差异均有统计学意义(Fisher精确检验法,P值均〈0.001);其中使用线性探针检测的比率从均为0.00%分别增� 展开更多
关键词 结核 结核 抗多种药物性 少数民族 贫困区 分子探针技术 显微镜检查 荧光
光磁双模态分子探针Gd-DO3A-EA-FITC在脑组织间隙成像分析中的应用 预览 被引量:1
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作者 李昀倩 盛荟 +6 位作者 梁磊 赵越 李怀业 白宁 王彤 袁兰 韩鸿宾 《北京大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第2期221-225,共5页
目的:研究光磁双模态分子探针Gd-DO3A-ethylthiourea-fluorescein isothiocyanate(Gd-DO3A-EA-FITC)在脑组织间隙(interstitial space,ISS)成像分析中的应用价值。方法:24只SD雄性大鼠随机分为磁示踪组(6只)、荧光示踪组(6只)和光磁示踪... 目的:研究光磁双模态分子探针Gd-DO3A-ethylthiourea-fluorescein isothiocyanate(Gd-DO3A-EA-FITC)在脑组织间隙(interstitial space,ISS)成像分析中的应用价值。方法:24只SD雄性大鼠随机分为磁示踪组(6只)、荧光示踪组(6只)和光磁示踪组(12只),光磁示踪组随机分为磁示踪亚组(6只)和荧光示踪亚组(6只)。分别在大鼠尾状核区注入磁示踪剂钆-二乙三胺五乙酸(gadolinium-diethylene triamine pentaacetic acid,Gd-DTPA)、光示踪剂异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)和光磁双模态分子探针Gd-DO3A-EA-FITC,应用磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)检测示踪剂在脑ISS中的扩散和分布,利用自主研发的脑ISS图像处理系统测量Gd-DO3A-EA-FITC和Gd-DTPA在脑ISS内的扩散系数、清除率、体积分数和半衰期等扩散参数。注射示踪剂2 h后,利用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)对离体脑切片进行荧光信号的采集,并对比分析斜矢状位切片中示踪剂扩散分布的最大面积。结果:Gd-DTPA和Gd-DO3A-EA-FITC在鼠脑内的平均扩散系数分别为(3.31±0.11)×10-4 mm2/s和(3.37±0.15)×10-4 mm2/s(t=0.942,P=0.360),清除率分别为(3.04±0.37)mmol/L和(2.90±0.51)mmol/L(t=0.640,P=0.531),体积分数分别为17.18%±0.14%和17.31%±0.15%(t=1.961,P=0.068),半衰期分别为(86.58±3.31)min和(84.61±2.38)min(t=1.412,P=0.177),扩散分布最大面积分别为(22.71±1.00)mm2和(23.25±0.68)mm2(t=1.100,P=0.297),两者的各项扩散参数差异均无统计学意义。FITC和Gd-DO3A-EA-FITC在鼠脑内扩散分布最大面积分别为(22.10±1.29)mm2和(22.61±1.16)mm2(t=0.713,P=0.492),两者差异无统计学意义,Gd-DO3A-EA-FITC的扩散面积略大于FITC。结论:Gd-DO3A-EA-FITC与传统的Gd-DTPA的成像结果相同,可用于ISS的测量。 展开更多
关键词 造影剂 分子探针技术 组织间隙 显微镜检查 共焦 磁共振成像
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荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐药基因的结果分析 被引量:3
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作者 刘艳 古丽比克·木拉提 +4 位作者 玛力亚木·阿布力提甫 易星 李君莲 师永欢 刘天剑 《中国防痨杂志》 CAS 2018年第9期959-963,共5页
目的分析和探讨荧光PCR熔解曲线法对结核病的诊断和耐药检测的应用价值。方法收集2015年9月至2016年12月新疆维吾尔自治区胸科医院的976例疑似结核病患者的痰标本,运用探针荧光PCR熔解曲线法来检测结核分枝杆菌及其对利福平、异烟肼的... 目的分析和探讨荧光PCR熔解曲线法对结核病的诊断和耐药检测的应用价值。方法收集2015年9月至2016年12月新疆维吾尔自治区胸科医院的976例疑似结核病患者的痰标本,运用探针荧光PCR熔解曲线法来检测结核分枝杆菌及其对利福平、异烟肼的耐药突变情况。以BACTECMGIT960液体培养法及液体药敏试验检测结果为标准,评价探针荧光PCR熔解曲线法鉴定结核分枝杆菌及其耐药突变检测的敏感度、特异度、一致率、Kappa值等。结果以MGIT960液体培养结果为标准,荧光PCR熔解曲线法鉴定结核DNA的敏感度为85.44%(135/158),特异度为94.01%(769/818),Kappa值为0.75,诊断符合率为92.62%(904/976)。以MGIT960液体药敏试验结果为标准,荧光PCR熔解曲线法对异烟肼耐药突变检测的敏感度为83.33%(20/24),特异度为94.59%(105/111),Kappa值为0.76,诊断符合率为92.59%(125/135);荧光PCR熔解曲线法对利福平耐药突变检测的敏感度为95.83%(23/24),特异度为95.50%(106/111),Kappa值为0.86,诊断符合率为95.56%(129/135)。结论荧光PCR熔解曲线法检测速度快,对利福平和异烟肼耐药突变检测结果具有良好的敏感度和特异度,可用于临床上对结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药情况的快速筛查。 展开更多
关键词 结核 抗多种药物性 荧光免疫测定 分子探针技术 DNA突变分析 利福平 异烟肼
多色探针熔解曲线法在结核分枝杆菌耐药性检测中的应用
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作者 蔚鸣 许鑫鑫 +6 位作者 闫朋 张宝庆 刘春涛 吴景秋 刘玉琴 王开利 侯艳杰 《结核病与肺部健康杂志》 2018年第4期268-274,共7页
目的评价多色探针熔解曲线法(multicolor melting curve analysis,MMCA)在MTB耐药性检测中的临床应用价值。方法收集235例浓集抗酸杆菌检测阳性和(或)MTB分子检测阳性患者的晨痰,同时用MMCA和分枝杆菌液体培养及比例法药物敏感性试验(... 目的评价多色探针熔解曲线法(multicolor melting curve analysis,MMCA)在MTB耐药性检测中的临床应用价值。方法收集235例浓集抗酸杆菌检测阳性和(或)MTB分子检测阳性患者的晨痰,同时用MMCA和分枝杆菌液体培养及比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”)进行耐药性检测,采用Kappa检验比较两方法的一致性。两方法有差别的标本用基因测序的方法进行比较。结果MMCA和比例法药敏试验检测利福平(RFP)、异烟肼(INH)、乙胺丁醇(EMB)、左氧氟沙星(Lfx)、莫西沙星(Mfx)及耐多药结核(MDR-TB)的符合率分别为94.04(221/235)、90.64%(213/235)、80.00%(188/235)、94.89%(223/235)、77.87%(183/235)、89.36%(210/235);RFP、INH、Lfx及MDR-TB两方法比较Kappa值分别为0.88、0.81、0.88、0.77,具有极好的一致性;以上不一致的标本经基因测序技术验证,痰液及培养分离株两种标本类型的MMCA与测序结果总符合率分别为89.80%(132/147)、98.64%(145/147)。结论采用MMCA法直接、快速检测临床患者痰液MTB耐药情况,与金标准比例法药敏试验及参考方法基因测序技术一致性好,且操作简便、快速、准确,在结核病诊断及耐药结核病快速筛查中将发挥重要作用。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 结核 抗多种药物性 多种药物 耐药 荧光免疫测定 分子探针技术 药物敏感性试验 比对研究
线性探针技术检测结核分枝杆菌耐药性的效果分析
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作者 陈丽 秦玉宝 +3 位作者 邬剑 唐鹭 林百丰 张学志 《结核病与肺部健康杂志》 2018年第1期49-53,共5页
目的探讨线性探针技术(GenoType MTBDRplus)检测结核分枝杆菌耐药性的效能。方法对378例结核分枝杆菌临床分离株采用分子线性探针技术检测利福平(RFP)和异烟肼(INH)的耐药性,并用传统比例法药敏试验(简称“药敏试验”)对该378... 目的探讨线性探针技术(GenoType MTBDRplus)检测结核分枝杆菌耐药性的效能。方法对378例结核分枝杆菌临床分离株采用分子线性探针技术检测利福平(RFP)和异烟肼(INH)的耐药性,并用传统比例法药敏试验(简称“药敏试验”)对该378例菌株进行RFP和INH的耐药性试验,比较两种方法检测耐药性的差别。用SPSS13.0软件进行统计学分析。率的比较采用χ2检验,P〈0.05为差异有统计学意义;一致性比较采用Kappa检验,Kappa≥0.75表示两者一致性较好。结果线性探针法与比例法检测RFP的耐药率分别为12.2%(46/378)和10.6%(40/378),差异无统计学意义(χ2=3.60,P〉0.05),两种方法检测的总体一致率为97.4%(368/378),具有很高的一致性(Kappa=0.87);检测INH的耐药率分别为14.3%(54/378)和12.2%(46/378),差异无统计学意义(χ2=3.20,P〉0.05),两种方法检测的总体一致率为94.7%(358/378),一致性较好(Kappa=0.77);检测耐多药率分别为7.4%(28/378)和7.9%(30/378),差异无统计学意义(χ2=0.40,P〉0.05),两种方法检测的总体一致率为97.4%(368/378),一致性较好(Kappa=0.81)。以比例法为金标准,线性探针法检测RFP耐药的敏感度和特异度分别是95.0%(38/40)和97.6%(330/338),检测INH耐药的敏感度和特异度分别是87.0%(40/46)和95.8%(318/332),检测耐药性的敏感度和特异度分别是80.0%(24/30)和98.9%(344/348)。结论线性探针技术检测结核分枝杆菌临床分离株耐药性是可行的。 展开更多
关键词 分子探针技术 结核 抗多种药物性 微生物敏感性试验 对比研究
线性探针技术在骨关节结核快速诊断中的应用价值 被引量:1
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作者 盛杰 吐尔松江·胡达拜尔迪 +3 位作者 古甫丁 唐伟 马良 地里下提·阿不力孜 《结核病与肺部健康杂志》 2017年第3期208-211,共4页
目的 评估线性探针技术在骨关节结核快速诊断中的应用价值.方法 回顾性纳入新疆维吾尔自治区胸科医院骨科2014年1月至2017年2月接受病灶清除手术的157例疑似骨关节结核患者,同时采用线性探针技术、结核分枝杆菌培养及抗酸染色对病灶组织... 目的 评估线性探针技术在骨关节结核快速诊断中的应用价值.方法 回顾性纳入新疆维吾尔自治区胸科医院骨科2014年1月至2017年2月接受病灶清除手术的157例疑似骨关节结核患者,同时采用线性探针技术、结核分枝杆菌培养及抗酸染色对病灶组织(均为术中切除病灶组织)进行检测.以临床诊断为金标准,计算线性探针技术检测结核分枝杆菌的敏感度、特异度,并结合药物敏感性试验(简称“药敏试验”)结果评价线性探针技术在骨关节结核快速诊断中的应用价值.结果 157例患者中127例临床确诊为骨关节结核,30例为非骨关节结核.线性探针技术、结核分枝杆菌培养及抗酸染色检测手术切除病灶组织的敏感度分别为76.38%(97/127)、55.12%(70/127)、37.01%(47/127),差异有统计学意义(x2=40.06,P<0.05);特异度分别为73.33%(22/30)、76.67%(23/30)、93.33%(28/30),差异无统计学意义(x2=4.50,P=0.11).与结核分枝杆菌培养及药敏试验相比较,157例患者中,培养+药敏试验10例检测为耐药菌株,线性探针技术也检测出10例耐药菌株,患者与上述10例相同.其中,4例对异烟肼耐药,线性探针技术检测结果均为对异烟肼单耐药;1例对利福平耐药,线性探针技术检测为对异烟肼、利福平同时耐药;其余5例为耐多药结核病,线性探针技术检测结果均为对异烟肼、利福平同时耐药.结论 线性探针技术检测病灶组织中结核分枝杆菌的敏感度高、耗时短,且可同时检测样本中的结核分枝杆菌是否对异烟肼、利福平耐药,对骨关节结核快速诊断及耐药结核病的早期筛查有较好的临床应用价值. 展开更多
关键词 分子探针技术 临床实验室技术 结核 骨关节
荧光及磁示踪法观测脑组织液的引流分区特征 预览 被引量:3
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作者 赵越 李昀倩 +5 位作者 李怀业 李玉亮 刘兰祥 袁兰 张殊佳 韩鸿宾 《北京大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2017年第2期303-309,共7页
目的:对比光、磁两种探针示踪显示脑组织间隙(interstitial space,ISS)内分子扩散与团流运动的结果,研究脑组织液(interstitial fluid,ISF)在ISS内的分区引流特征。方法:36只SD大鼠随机分为荧光检查组(18只)和磁示踪组(18只)... 目的:对比光、磁两种探针示踪显示脑组织间隙(interstitial space,ISS)内分子扩散与团流运动的结果,研究脑组织液(interstitial fluid,ISF)在ISS内的分区引流特征。方法:36只SD大鼠随机分为荧光检查组(18只)和磁示踪组(18只),每组再随机分为尾状核(caudate nucleus,Cn)、丘脑(thalamus,T)和黑质(substantia nigra,Sn)3个亚组,每亚组6只。荧光检查组:参考脑立体定位图谱,选取冠状位苍白球为中心层面,以Cn、T和Sn为靶点进行穿刺定位,分别导入2μL 10 mmol/L荧光黄(lucifer yellow,LY)于相应脑区的中心位置,于Cn 3 h、T 2 h和Sn 1 h对大鼠用4%(体积分数)多聚甲醛进行心脏灌注固定后,将取出的鼠脑置于脑切片模具中,沿视交叉向后切片,以进针位点所在的冠状切片为中心层面,计为1片,前取3片,后取2片,每片厚约1 mm,共6片待检测,应用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)对离体切片进行采集,测量离体切片LY扩散的面积;磁示踪组大鼠也以Cn、T和Sn为靶点进行穿刺定位导入2μL 10 mmol/L钆喷酸葡胺(gadolinium-diethylene triamine pentaacetic acidm,Gd-DTPA),应用磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)动态监测示踪剂在大鼠脑内的扩散,并利用Radiant软件测量Gd-DTPA的扩散面积。结果:LY与Gd-DTPA在Cn、T和Sn的ISS内扩散区域各不相同,Cn亚组LY与Gd-DTPA导入3 h后,比较1~6层LY与Gd-DTPA扩散面积为:(10.95±4.27)mm2vs.(8.33±2.25)mm2、(18.16±4.74)mm2vs.(16.42±2.88)mm2、(24.57±3.65)mm2vs.(20.75±2.29)mm2、(34.81±3.32)mm2vs.(28.88±1.51)mm2、(30.53±3.12)mm2vs.(20.92±2.75)mm2、(12.15±4.92)mm2vs.(10.00±1.89)mm2,对其在每层两组间扩散面积进行t检验,扩散面积差异均无统计学意义(t=0.940,P=0.400;t=0.546,P=0.614;t=1.534,P=0.200;t=2.809,P=0.480;t=2.693,P=0.055;t=0.707,P=0.518);T亚组中LY与Gd-DTPA导入2 h后,比较1~6� 展开更多
关键词 分子探针技术 显微镜检查 共焦 磁共振成像
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GenoType线性探针技术检测结核分枝杆菌及其药物敏感性的价值 被引量:7
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作者 张国钦 钟达 +2 位作者 陈盛玉 张玉华 傅衍勇 《结核病与肺部健康杂志》 2016年第4期267-270,共4页
目的 与对硝基苯甲酸(PNB)菌种鉴定法和BACTEC MGIT 960检测系统(简称“MGIT 960法”)药物敏感性试验(简称“药敏试验”)结果进行对比,评价GenoType线性探针技术(简称“GenoType法”)检测结核分枝杆菌(MTB)及其药物敏感性的... 目的 与对硝基苯甲酸(PNB)菌种鉴定法和BACTEC MGIT 960检测系统(简称“MGIT 960法”)药物敏感性试验(简称“药敏试验”)结果进行对比,评价GenoType线性探针技术(简称“GenoType法”)检测结核分枝杆菌(MTB)及其药物敏感性的应用价值.方法 选取2014-2015年天津市结核病控制中心门诊部确诊的364例涂阳肺结核患者作为研究对象,收集本次抗结核治疗前痰标本.应用GenoType法鉴定分枝杆菌菌种并检测其对异烟肼和利福平的耐药情况,并与PNB法菌种鉴定结果和MGIT 960法药敏试验结果进行比较,比较上述方法的检测敏感度、特异度及一致性.结果 以PNB法为金标准,GenoType法检测报告为“未检测到MTB”预判非结核分枝杆菌(NTM)的敏感度为83.3%(10/12),特异度为99.7%(351/352),一致率为99.2%(361/364),Kappa=0.87,差异无统计学意义(x2=0.33,P=0.56).以MGIT 960法为金标准,GenoType法检测对利福平耐药的敏感度为92.6%(25/27),特异度为97.5%(316/324),一致率为97.2%(341/351),Kappa=0.82,差异无统计学意义(x2 =3.60,P=0.06);GenoType法检测对异烟肼耐药的敏感度为68.7%(46/67),特异度为98.9%(281/284),一致率为93.2%(321/351),Kappa=0.75,差异有统计学意义(x2=13.50,P<0.01);GenoType法判断耐多药的敏感度为69.2%(18/26),特异度为98.5%(320/325),一致率为96.3%(338/351),Kappa=0.71,差异无统计学意义(x2 =0.69,P=0.41).结论 GenoType法在检测MTB及其对利福平耐药和耐多药判断方面与表型药敏试验方法的检测结果具有较好的一致性,可用于指导临床治疗. 展开更多
关键词 结核 结核 抗多种药物性 分子探针技术 微生物敏感性试验 评价研究
MTBDRplus V2用于诊断涂阴疑似肺结核患者的效果评价 被引量:4
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作者 李强 包训迪 +3 位作者 刘元 赵冰 欧喜超 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2016年第7期544-548,共5页
目的评价MTBDRplus V2线性探针技术(简称“MTBDRplus V2”)用于诊断涂阴疑似肺结核患者的检测效能。方法连续纳入2014年112月在安徽省胸科医院和西安市胸科医院就诊的涂阴疑似肺结核患者1973例,对其1973份痰标本同时开展MTBDRplus V2... 目的评价MTBDRplus V2线性探针技术(简称“MTBDRplus V2”)用于诊断涂阴疑似肺结核患者的检测效能。方法连续纳入2014年112月在安徽省胸科医院和西安市胸科医院就诊的涂阴疑似肺结核患者1973例,对其1973份痰标本同时开展MTBDRplus V2和MGIT 960快速液体培养(mycobacterial detection system,BACTEC TM MGIT TM960,简称“MGIT 960培养法”),对培养阳性鉴定为结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)的菌株,开展利福平和异烟肼药物敏感性试验(简称“药敏试验”),对两种方法耐药检测结果不一致样本进行耐药相关基因测序验证。采用SPSS22.0软件进行统计学分析,两种方法对MTBC检出率的比较使用χ2检验,以P〈0.05为差异有统计学意义。对利福平和异烟肼耐药基因检测的效能比较分析用敏感度、特异度进行效果评估。结果1973例涂阴疑似肺结核患者中,MTBDRplus V2和MGIT 960培养法对MTBC的检出率分别为27.67%(546/1973)和26.76%(528/1973),差异无统计学意义(χ2=0.05,P=0.974)。以MGIT 960培养法为标准,MTBDRplus V2检测痰标本中MTBC的敏感度和特异度分别为86.74%(458/528)和93.84%(1356/1445)。以MGIT 960药敏试验检测利福平和异烟肼耐药结果为标准,MTBDRplus V2检测利福平和异烟肼耐药性的敏感度分别为94.34%(50/53)和77.38%(65/84),特异度为96.62%(372/385)和98.02%(347/354)。结论MTBDRplus V2可快速准确检测出涂阴疑似肺结核患者痰标本中的MTBC,并可同时检测利福平和异烟肼对MTBC的药物敏感性,其检测结果敏感度和特异度高,对于结核病防控有很好的应用价值。 展开更多
关键词 结核 分子探针技术 分枝杆菌 结核 药物敏感性试验 评价研究
MTBDRplus在初治2个月末涂阳肺结核治疗中的应用 预览 被引量:1
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作者 黄富礼 周祖模 +4 位作者 刘伟 孙峰 黄何清 吴刚 金嘉琳 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第34期4791-4794,共4页
目的运用分子线性探针技术(MTBDRplus)对2个月末涂片阳性的初治肺结核患者进行快速耐药检测及个体化治疗指导,并观察其预后。方法选择基线及2个月朱痰涂片仍为阳性的初治肺结核患者随机分两组,分别予以传统直接观察(或面视)下的... 目的运用分子线性探针技术(MTBDRplus)对2个月末涂片阳性的初治肺结核患者进行快速耐药检测及个体化治疗指导,并观察其预后。方法选择基线及2个月朱痰涂片仍为阳性的初治肺结核患者随机分两组,分别予以传统直接观察(或面视)下的短程化疗(Directly Observed Treatment+short course chemotherapy,DOTs)方案及分子药敏指导治疗,并比较预后。结果在分子药敏指导治疗组中成功率,完全敏感的为74.4%,单耐异烟肼为87.5%,单耐利福平100.0%,耐多药结核75.0%;DOTs方案组中,成功率为单耐异烟肼25.0%,单耐利福平耐和耐多药结核均为0.0%。两组预后χ^2分析显示差异有统计学意义(P=0.044)。结论MTBDRplus应用在2个月末涂阳初治肺结核患者中可改善预后。 展开更多
关键词 结核 分子探针技术 预后 MTBDRplus 初治 2个月末涂阳
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