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基于全基因组序列的核桃细菌性黑斑病菌分泌蛋白的预测及特征分析
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作者 祝友朋 刘宏莉 韩长志 《南京林业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期17-22,共6页
【目的】充分了解核桃黑斑病菌的侵染机制。【方法】以全基因组序列已经公布的7个核桃细菌性黑斑病菌菌株CFBP2528、CFBP7179、CFBP8253、DW3F3、J303、NCPPB1447、Xaj417等所具有的蛋白序列为预测数据,基于分泌蛋白所具有的主要特征,利... 【目的】充分了解核桃黑斑病菌的侵染机制。【方法】以全基因组序列已经公布的7个核桃细菌性黑斑病菌菌株CFBP2528、CFBP7179、CFBP8253、DW3F3、J303、NCPPB1447、Xaj417等所具有的蛋白序列为预测数据,基于分泌蛋白所具有的主要特征,利用SignalP v4.1、ProtCompB v9.0、TMHMM v2.0、big-PI Fungal predictor、TargetP v1.1、LipoP v1.0等在线分析程序对分泌蛋白进行预测,同时分析其氨基酸组成及分布、信号肽长度、信号肽切割位点等特征。【结果】核桃细菌性黑斑病菌的分泌蛋白平均为74个,其氨基酸长度多集中于101~400氨基酸,所占比例为63.65%。信号肽氨基酸残基中以A最多,所占比例为22.04%;其次是L,所占比例为19.27%。信号肽长度以19~29个氨基酸的最多,所占比例为79.62%,信号肽切割位点属于A-X-A类型。【结论】核桃细菌性黑斑病菌中分泌蛋白的有效预测,可为深入解析核桃细菌性黑斑病菌中分泌蛋白在侵染过程中所发挥的功能提供理论依据。 展开更多
关键词 核桃细菌性黑斑病菌 全基因组 分泌蛋白 生物信息学分析
COL5A1抑制肺腺癌转移的蛋白分泌组分析的研究 预览
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作者 孙靖宇 于滢 +3 位作者 孙明波 付新 余洋 刘赞 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2019年第7期139-140,共2页
背景肺腺癌(LAC)是全球范围内癌症相关死亡的首要原因。LAC分泌组中,优先表达基因/蛋白的异常表达可能为其治疗和预后提供依据。FOLR1在多种肿瘤研究中作为治疗靶点,但在肺腺癌中未见研究。本研究拟对同一来源的具有高低转移性的两株LA... 背景肺腺癌(LAC)是全球范围内癌症相关死亡的首要原因。LAC分泌组中,优先表达基因/蛋白的异常表达可能为其治疗和预后提供依据。FOLR1在多种肿瘤研究中作为治疗靶点,但在肺腺癌中未见研究。本研究拟对同一来源的具有高低转移性的两株LAC细胞系进行比较分泌组研究,在LAC的转移分泌组作为生物标志物的组中进行比较分析,进一步探究LAC转移相关早期生物标志物,为其治疗和预后提供依据。方法 对同一来源的两株肺腺癌细胞系Anip973和AGZY83a进行有血清和无血清培养后提取其分泌蛋白,采用同位素标记绝对与相对定量(iTRAQ)技术进行蛋白多肽N末端或赖氨酸侧链基团进行标记,经二维液相色谱-串联质谱(2D-MS/MS)进行所获得全部蛋白的鉴定。利用信号肽预测软件SignalP 4.0和软件共筛选出经典途径分泌蛋白。免疫印迹(Western Blot)方法分析两株细胞系分泌蛋白中COL5A1蛋白的表达变化。结果 经信号肽预测软件共筛选出82个分泌蛋白,研究表明Anip973细胞系中表达高于AGZY83a细胞系的蛋白27个,AGZY83a细胞系中表达高于Anip973细胞系的蛋白55个。COL5A1在低转移细胞系AGZY83a中高表达,由此推测分泌蛋白COL5A1有抑制肺腺癌转移的作用,可以作为肺腺癌潜在的治疗和预后靶点。结论 COL5A1有抑制肺腺癌转移的作用,可以作为肺腺癌潜在的治疗和预后潜在靶点。 展开更多
关键词 肺腺癌 分泌蛋白 转移 COL5A1
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核桃细菌性黑斑病菌分泌蛋白质的理化性质及特征分析 预览
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作者 祝友朋 韩长志 熊智 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期295-301,共7页
核桃细菌性黑斑病严重影响着核桃的产量和品质,是核桃生产过程中危害较为严重的病害之一。植物病原真菌、细菌以及卵菌的分泌蛋白质在其致病过程中发挥着重要的作用。本研究以核桃细菌性黑斑病菌CFBP2528、CFBP7179、CFBP8253、DW3F3、J... 核桃细菌性黑斑病严重影响着核桃的产量和品质,是核桃生产过程中危害较为严重的病害之一。植物病原真菌、细菌以及卵菌的分泌蛋白质在其致病过程中发挥着重要的作用。本研究以核桃细菌性黑斑病菌CFBP2528、CFBP7179、CFBP8253、DW3F3、J303、NCPPB1447、Xaj4177个菌株分泌蛋白质氨基酸序列为基础数据,利用蛋白质数据库、PHD、Protscale、TargetP1.1Server、SMART等网站在线预测分析其理化性质、二级结构、疏水性、转运肽及保守结构域等性质,明确核桃细菌性黑斑病菌的分泌蛋白质所具有的特征。结果表明,在所分析的7个菌株520个分泌蛋白质中,分泌蛋白质的理论等电点集中在6.01~7.00,蛋白质数量所占比例为26.92%;不稳定性系数集中在20.01~40.00,其蛋白质数量所占比例为63.65%;亲水值小于0的蛋白质数量所占比例为76.51%,亲水性最强的氨基酸残基中数量最多的是D,所占比例为13.64%,疏水性最强的氨基酸残基中数量最多的是L,所占比例为29.58%;分泌蛋白质均含有无规则卷曲、α螺旋、β折叠、TM(跨膜螺旋)二级结构,其所占比例分别为27.56%、27.17%、26.45%、1.03%;转运肽集中在分泌通路,其所占比例为95.38%;每个菌株平均有16个分泌蛋白质具有保守结构域,所占比例为21.35%。上述研究结果为深入解析核桃细菌性黑斑病菌分泌蛋白质的功能冗余性和多样性奠定了基础。 展开更多
关键词 核桃细菌性黑斑病菌 分泌蛋白 理化性质 生物信息学分析
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基于全基因组序列的尖孢镰刀菌分泌蛋白预测及其特征分析 预览
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作者 祝友朋 蔡旺芸 韩长志 《河南师范大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期92-97,共6页
尖孢镰刀菌是一种以土壤习居为主要特征的植物病原菌,广泛分布于世界各地,且寄主广泛,能引起豆科、茄科、葫芦科等科100多种植物根腐、茎腐、茎基腐等病害,严重时造成植株萎蔫死亡,严重影响着植物的产量和品质.同时,目前生产上对于该菌... 尖孢镰刀菌是一种以土壤习居为主要特征的植物病原菌,广泛分布于世界各地,且寄主广泛,能引起豆科、茄科、葫芦科等科100多种植物根腐、茎腐、茎基腐等病害,严重时造成植株萎蔫死亡,严重影响着植物的产量和品质.同时,目前生产上对于该菌的防治多使用甲霜灵·锰锌、多菌灵、百菌清等化学药剂,然而,防治效果不佳,急需开发针对该菌新的作用靶标的药剂.前人已经明确植物病原真菌分泌蛋白在侵染、操控植物等过程中发挥着重要功能,然而,学术界尚未见有关该菌中分泌蛋白的报道.本研究以尖孢镰刀菌菌株(Fusariumoxysporumf.sp.lycopersici4287)的蛋白序列为基础数据,以分泌蛋白所具有的N-端含有信号肽、不含有跨膜结构域、没有GPI锚定位点、将蛋白分泌在胞外4大特征为依据,利用生物信息学在线分析程序明确该菌中含有778个分泌蛋白,并对上述蛋白开展特征分析,明确上述蛋白的氨基酸长度主要集中在101~400aa、氨基酸组成中以G,T,S,A较多,信号肽长度主要集中在16~21aa、信号肽氨基酸组成中以P,S,A,T,G较多,信号肽切割位点为T-X-T类型.为今后进一步开展尖孢镰刀菌的分泌蛋白功能解析和开发新型药剂靶标提供了重要的理论基础. 展开更多
关键词 尖孢镰刀菌 分泌蛋白 预测 特征 生物信息学分析
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稻曲病菌Six1类效应蛋白UvSix1-1的功能研究
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作者 李重阳 王毓富 +2 位作者 林杨 罗朝喜 阴伟晓 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期27-34,共8页
稻曲病菌在侵染过程中会分泌大量的效应蛋白来帮助其侵染。本研究鉴定到一个稻曲病菌效应蛋白UvSix1-1,同源序列比对及系统发育分析发现其具有Six1蛋白保守的氨基酸位点,并与多个病原菌中的Six1蛋白具有同源性。进一步研究发现UvSix1-1... 稻曲病菌在侵染过程中会分泌大量的效应蛋白来帮助其侵染。本研究鉴定到一个稻曲病菌效应蛋白UvSix1-1,同源序列比对及系统发育分析发现其具有Six1蛋白保守的氨基酸位点,并与多个病原菌中的Six1蛋白具有同源性。进一步研究发现UvSix1-1可以抑制Bax、XEG1和INF1引起的烟草叶片细胞坏死,并且其预测的信号肽区域具有分泌功能,在烟草上瞬时表达UvSix1-1可以促进辣椒疫霉的定殖。对不同稻曲菌株中的序列进行分析,没有发现序列多态性,说明该基因非常保守。以上研究结果表明,UvSix1-1在病原菌侵染过程中发挥作用,研究结果为稻曲病菌效应蛋白的研究提供参考。 展开更多
关键词 稻曲病菌 分泌蛋白 Six1 过敏性坏死反应 致病性
芽孢杆菌subtilis str Sec分泌蛋白预测分析 预览
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作者 张路路 朱德全 +2 位作者 张跃华 白雪 韩诚武 《中国科技信息》 2018年第19期98-99,共2页
枯草芽孢杆菌是一类广泛存在植物和土壤中的具有较强抗逆性的革兰氏阳性益生菌,具有繁殖快,能抑制有害菌的生长等特点,是研究菌种的典型菌株。蛋白的Sec分泌途径的分析能够认识该菌株的生理功能和与宿主之间的作用机理。方法:Sec途径... 枯草芽孢杆菌是一类广泛存在植物和土壤中的具有较强抗逆性的革兰氏阳性益生菌,具有繁殖快,能抑制有害菌的生长等特点,是研究菌种的典型菌株。蛋白的Sec分泌途径的分析能够认识该菌株的生理功能和与宿主之间的作用机理。方法:Sec途径分泌蛋白具有I型信号肽的分泌蛋白Spase I和II型信号肽的分泌蛋白Spase II。首先在NCBI(www.ncbi.nlm.nih.gov)中下载枯草芽孢杆菌subtilis str168 Sec途径构件蛋白对应的氨基酸序列,然后用一系列生物信息学软件分析该菌基因组中Sec途径分泌蛋白信号肽、跨膜螺旋数和进行COG功能数据库对各类蛋白进行注释和功能聚分析。结果:结果显示Sec途径Spase I类肽酶识别的蛋白个数为172个,其中具有COG功能的蛋白有141个,Spase II类肽酶识别的蛋白个数为61个。结论:枯草芽孢杆菌外表面的分泌途径系统比较完整,是典型的研究菌株,但是对于Sec分泌途径的报道尚未有。本课题通过对枯草芽孢杆菌subtilis str168 Sec途径分泌蛋白信号肽和功能分析,得知该菌的Sec途径分泌蛋白的蛋白长度、编号、数量和COG功能等,为研究该菌的分泌系统提供了理论依据和基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 分泌蛋白 SEC 预测分析 STR 生理功能 分泌途径 分泌系统
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鱼诺卡氏菌动力蛋白调节蛋白robl/LC7的亚细胞定位和功能初步研究 预览
7
作者 夏立群 陈锐敏 +5 位作者 廖保山 苏泽杰 徐亮 童邦卓 黄嘉慧 鲁义善 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期419-430,共12页
鱼类诺卡氏菌病是一种慢性系统性肉芽肿疾病,鱼诺卡氏菌是其主要病原。鱼诺卡氏菌全基因组生物信息学分析,发现了一个可能靶向定位于宿主细胞线粒体的分泌蛋白——动力蛋白调节蛋白robl/LC7。为了对鱼诺卡氏菌robl/LC7的亚细胞定... 鱼类诺卡氏菌病是一种慢性系统性肉芽肿疾病,鱼诺卡氏菌是其主要病原。鱼诺卡氏菌全基因组生物信息学分析,发现了一个可能靶向定位于宿主细胞线粒体的分泌蛋白——动力蛋白调节蛋白robl/LC7。为了对鱼诺卡氏菌robl/LC7的亚细胞定位和功能进行初步研究,实验对鱼诺卡氏菌robl/LC7进行了基因克隆、真核表达重组质粒构建、分泌蛋白鉴定、亚细胞定位、过表达和凋亡检测。结果显示,成功克隆了鱼诺卡氏菌robl/LC7基因并构建了其真核表达质粒p EGFP-robl/LC7和pc DNA-robl/LC7;鱼诺卡氏菌分泌蛋白质谱鉴定证实robl/LC7为分泌蛋白;亚细胞定位研究显示robl/LC7-GFP融合蛋白呈全细胞分布,不与线粒体共定位;凋亡检测发现robl/LC7过表达能诱导FHM细胞凋亡。研究表明,鱼诺卡氏菌robl/LC7是一个不与线粒体共定位的分泌蛋白,其可能通过参与细胞凋亡调控,协助鱼诺卡氏菌在宿主体内生存和免疫逃避,并在鱼诺卡氏菌的致病过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 鱼诺卡氏菌 动力蛋白调节蛋白robl/LC7 分泌蛋白 亚细胞定位 细胞凋亡
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青枯雷尔氏菌Ⅲ型分泌蛋白致病侵染的生物信息学初步分析 预览
8
作者 满娇 张武 《文山学院学报》 2018年第3期13-15,共3页
以青枯雷尔氏菌为病原菌引起的植物青枯病,是世界性的严重病害。以青枯雷尔氏菌蛋白质组为材料,用EffectiveDB等分析工具对青枯雷尔氏菌的Ⅲ型分泌蛋白进行预测和分析,发现Ⅲ型分泌蛋白主要涉及底物转运、致病侵染以及鞭毛合成等方面。... 以青枯雷尔氏菌为病原菌引起的植物青枯病,是世界性的严重病害。以青枯雷尔氏菌蛋白质组为材料,用EffectiveDB等分析工具对青枯雷尔氏菌的Ⅲ型分泌蛋白进行预测和分析,发现Ⅲ型分泌蛋白主要涉及底物转运、致病侵染以及鞭毛合成等方面。这些蛋白质可能参与了青枯雷尔氏菌对宿主植物的侵染,是两者分子互作的关键参与者。 展开更多
关键词 青枯雷尔氏菌 Ⅲ型分泌系统 分泌蛋白 致病侵染
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基质细胞衍生因子-1/受体生物轴相互作用的研究进展 预览
9
作者 车宇芳 《中日友好医院学报》 2018年第2期105-107,110共4页
趋化因子又称趋化性细胞因子,是一类能趋化白细胞定向移动的小分子分泌蛋白。其受体是GTP-蛋白偶联的跨膜受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)。基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)归属于A类趋化因子,... 趋化因子又称趋化性细胞因子,是一类能趋化白细胞定向移动的小分子分泌蛋白。其受体是GTP-蛋白偶联的跨膜受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)。基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)归属于A类趋化因子,也叫趋化因子配体12(CXC chemokine ligand-12,CXCL12). 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1 跨膜受体 相互作用 趋化性细胞因子 趋化因子配体 生物 分泌蛋白 蛋白偶联
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柑桔黄龙病菌亚洲种菌毛形成蛋白基因序列分析、原核表达及抗血清制备 预览
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作者 余乃通 李宾宾 +2 位作者 黎维丽 杨毅 刘志昕 《广东农业科学》 CAS 2018年第11期74-80,共7页
柑桔黄龙病菌菌毛形成蛋白(pilus formation protein, 408)是一种丰度较高的分泌蛋白。以感染柑桔黄龙病(HLB) 的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,利用408 基因的特异引物进行PCR 扩增,获得该基因的目的片段。序列分析结果表明海南... 柑桔黄龙病菌菌毛形成蛋白(pilus formation protein, 408)是一种丰度较高的分泌蛋白。以感染柑桔黄龙病(HLB) 的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,利用408 基因的特异引物进行PCR 扩增,获得该基因的目的片段。序列分析结果表明海南琼海黄龙病菌408 基因与柑桔黄龙病菌亚洲种psy62 株系(GenBank 登录号:CP001677.5)408 基因序列一致。功能预测结果表明其含有一个与菌毛形成相关的N端结构域,以及C 端含有两个高度保守的基序(Motif 1 和Motif 2)。通过EcoR Ⅴ和Xho Ⅰ双酶切构建重组载体pET32a-408 并将其转化BL21(DE3)大肠杆菌。重组菌经终浓度为1 mmoL/L IPTG 诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni2+-NTA 层析柱纯化,并以此为抗原,腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500~1∶10000 的多克隆抗血清;Western blot 进一步分析表明,408 蛋白多克隆抗血清特异性强。研究结果为柑桔黄龙病菌408 蛋白功能研究和柑桔黄龙病菌的蛋白检测产品开发提供重要科学依据。 展开更多
关键词 柑桔黄龙病 柑桔黄龙病菌 菌毛形成蛋白 分泌蛋白 抗血清制备
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全基因组预测哈茨木霉T6776的分泌蛋白 预览 被引量:1
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作者 许僖 伍建榕 +1 位作者 韩长志 马焕成 《贵州农业科学》 CAS 2018年第2期5-8,共4页
为探明哈茨木霉T6776的分泌蛋白及其作用于植物病原菌的功能,在前期研究的基础上,采用SignalP、ProtComp和TMHMM等生物在线预测程序,对该菌11 498条蛋白序列进行N-端信号肽、亚细胞定位和跨膜结构等预测。结果表明:哈茨木霉T6776含分... 为探明哈茨木霉T6776的分泌蛋白及其作用于植物病原菌的功能,在前期研究的基础上,采用SignalP、ProtComp和TMHMM等生物在线预测程序,对该菌11 498条蛋白序列进行N-端信号肽、亚细胞定位和跨膜结构等预测。结果表明:哈茨木霉T6776含分泌蛋白503个,分泌蛋白的信号肽长度、氨基酸长度均与植物病原菌不同;哈茨木霉T6776分泌蛋白信号肽切割位点属A-X-A型,为SPI型信号肽识别位点。 展开更多
关键词 哈茨木霉 分泌蛋白 信号肽 氨基酸
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不同碳源条件下里氏木霉的分泌蛋白比较分析 预览
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作者 夏俊 《生物化工》 2018年第5期58-62,共5页
丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei)被作为工业菌株广泛用于生产分解不同植物纤维的酶类,包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶等。本研究利用高效液相色谱一质谱联用法,比较分析了里氏木霉在玉米麦麸培养基、甘蔗渣培养基... 丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei)被作为工业菌株广泛用于生产分解不同植物纤维的酶类,包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶等。本研究利用高效液相色谱一质谱联用法,比较分析了里氏木霉在玉米麦麸培养基、甘蔗渣培养基和甘蔗秸秆培养基三种不同碳源条件下的分泌蛋白。结果显示,三种培养基中的T.reesei分别含有分泌蛋白199、161、183个,且不同碳源条件下T.reesei分泌的纤维素、半纤维素降解酶的种类和数量都有差异。 展开更多
关键词 里氏木霉 纤维素 半纤维素 分泌蛋白
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微课让生物学课堂更加有趣——以“细胞器——系统内的分工合作”第2课时为例
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作者 何丹丹 陶锦 阎平 《中学生物教学》 2018年第10X期45-46,共2页
传统教学最大的局限性在于学生往往比较被动,将微课引入课堂后,学习过程将可从以'教'为主转为以'学'为主。使得学习更加有的放矢,更有利于培养学生的生物学学科核心素养。
关键词 微课 高中生物学 分泌蛋白
血清人附睾分泌蛋白-4对上皮性卵巢癌的早期诊断价值研究 预览 被引量:1
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作者 彭琼 朱碧琳 《中国实验诊断学》 2018年第4期628-629,共2页
卵巢上皮癌是女性生殖系统最为常见的恶性肿瘤之一,约占卵巢癌的50%-70%。手术是目前最为有效的治疗方式,但由于卵巢癌早期并无特异性表现,多数患者就诊时常已经失去手术机会。人附睾分泌蛋白-4(HE4)在卵巢上皮癌早期病程中即可表达。
关键词 早期上皮性卵巢癌 ROC HE CA 外周血 分泌蛋白 早期诊断
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哈茨木霉Tr1菌株分泌蛋白及Peptaibols合成酶的生物信息学分析 预览
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作者 许勇 戴陈伟 +4 位作者 李静 蔡标 张爽 童琳 叶红 《中国农学通报》 2018年第23期46-52,共7页
研究旨在应用生物信息学方法分析生防菌哈茨木霉的分泌蛋白及Peptaibols合成酶。本研究以哈茨木霉Tr1菌株的11264条假定蛋白质序列为对象,利用Signal P、Protparam和Swissmodel等生物信息学工具预测出分泌蛋白,分析其信号肽特征,从中筛... 研究旨在应用生物信息学方法分析生防菌哈茨木霉的分泌蛋白及Peptaibols合成酶。本研究以哈茨木霉Tr1菌株的11264条假定蛋白质序列为对象,利用Signal P、Protparam和Swissmodel等生物信息学工具预测出分泌蛋白,分析其信号肽特征,从中筛选可能与其生防机制有直接联系的分泌蛋白和Peptaibols合成酶,并对这些蛋白质的性质和结构功能进行分析。结果表明:哈茨木霉Tr1菌株含有403个分泌蛋白,其中假定蛋白质PNP53160和PNP56908可能起到纤维素酶和几丁质酶的作用。分泌蛋白的信号肽的中间区域富含亮氨酸和丙氨酸,C端属于A-X-A类型。假定蛋白PNP58822中的16862-20750 aa片段可能起到Peptaibols合成酶作用,该蛋白主要包括了乙酰辅酶A合成酶Ⅰ、Taq A的CT结构域和脂肽合成酶亚基Ⅲ等功能区域。本研究应用生物信息学方法分析了403个分泌蛋白及其信号肽特征,筛选出了可能与哈茨木霉生防机制相关的蛋白质,并预测了其性质、结构和功能,为进一步研究哈茨木霉的生防机制提供理论基础。 展开更多
关键词 哈茨木霉 分泌蛋白 生物信息学 信号肽 Peptaibols合成酶
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核盘菌致病机理研究进展 预览
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作者 羊国根 程家森 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2018年第4期9-15,共7页
菌核病(Sclerotinia stem rot,SSR)是我国油料作物生产中主要病害之一,严重制约长江中下游地区油菜主产区的产业发展。菌核病的病原是子囊菌门的核盘菌,是一种世界性分布的重要植物病原真菌。其寄主范围广泛,引起的菌核病对多种作物... 菌核病(Sclerotinia stem rot,SSR)是我国油料作物生产中主要病害之一,严重制约长江中下游地区油菜主产区的产业发展。菌核病的病原是子囊菌门的核盘菌,是一种世界性分布的重要植物病原真菌。其寄主范围广泛,引起的菌核病对多种作物的产量和品质造成重要影响。核盘菌作为典型的死体营养型病原真菌,侵染寄主植物时通过直接杀死细胞和破坏组织攫取生长所需的营养物质。核盘菌的致病机理相对复杂,前期研究主要集中在其分泌的水解酶类(角质酶、细胞壁降解酶和蛋白酶等)和草酸在核盘菌侵染寄主植物中的作用。近些年来,越来越多的研究证实了分泌蛋白在核盘菌的致病过程中同样发挥着重要作用。分泌蛋白(效应蛋白)主要通过诱导植物细胞死亡或抑制寄主细胞的免疫反应,促进核盘菌的侵染和定殖。综述了水解酶类、草酸和分泌蛋白等在核盘菌致病机制中的作用,并对核盘菌致病机理研究进行了展望,以期为菌核病的安全防控提供理论参考。 展开更多
关键词 核盘菌 致病机理 分泌蛋白 水解酶 草酸
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3种不同的HPV型别宫颈癌细胞株分泌蛋白非标记定量技术分析 预览
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作者 郝轶 袁建林 +2 位作者 肖悦 李卉 郭霞 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2018年第5期354-358,364共6页
目的:分析3种不同HPV型别的宫颈癌细胞株Siha、Caski和C33的分泌蛋白表达及种类,寻找其共性分泌蛋白标志物,为临床早期发现及针对性干预提供依据。方法:采用非标记(label-free)定量技术分析3种不同宫颈癌SiHa、Caski和C33细胞株... 目的:分析3种不同HPV型别的宫颈癌细胞株Siha、Caski和C33的分泌蛋白表达及种类,寻找其共性分泌蛋白标志物,为临床早期发现及针对性干预提供依据。方法:采用非标记(label-free)定量技术分析3种不同宫颈癌SiHa、Caski和C33细胞株的分泌蛋白,运用LC-MS/MS和Maxquant的非标记技术,筛选出宫颈癌分泌蛋白的种类及分类。结果:共鉴定肽段数21609个,蛋白数2895个。其中3种宫颈癌细胞株共性蛋白共729种,占29.2%;特异性蛋白Siha细胞株含128种,Caski细胞株含143种,C33细胞株含859种。对于结果中7729种共性蛋白进行分析,有以下4类较为集中的类型:热休克蛋白类(HSPs)共14种;异质性核糖核蛋白类(HNRP)共8种;层黏连蛋白类(LN)共4种;阿尔多酮还原酶1类(AKR1)共2种。其中,溶酶体信号通路所占比例最大(39种)。结论:SiHa、Caski和C33细胞株的分泌蛋白中共有729种共性蛋白,其中4类集中的蛋白类型均先后在研究中证实对宫颈癌的进程和发展有影响,并且可能与溶酶体信号通路有关。可为筛选高危型HPV感染的宫颈癌患者的血清标志物提供依据。 展开更多
关键词 宫颈癌 宫颈癌细胞株 分泌蛋白 非标记定量技术分析
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结核分枝杆菌分泌蛋白调控巨噬细胞自噬诱导持续性感染 预览
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作者 张彩勤 杨丽 +1 位作者 张廷芬 师长宏 《科学技术与工程》 北大核心 2018年第32期124-128,共5页
巨噬细胞的自噬作用能够保护宿主抵抗结核分枝杆菌的感染;而持续性感染的MTB(Mycobacterium tuberculosis)可以从自噬体中逃逸或抑制自噬的发生,从而在宿主体内长期存活。尽管相关机制不明确,但胞内存活的MTB分泌蛋白在持续性感染时发... 巨噬细胞的自噬作用能够保护宿主抵抗结核分枝杆菌的感染;而持续性感染的MTB(Mycobacterium tuberculosis)可以从自噬体中逃逸或抑制自噬的发生,从而在宿主体内长期存活。尽管相关机制不明确,但胞内存活的MTB分泌蛋白在持续性感染时发挥了重要作用。它可以通过抑制巨噬细胞自噬维持蛋白质稳定性和在胞内长期存活,导致LTBI(latent TB infection)的发生。综述了MTB的四种分泌蛋白(Eis、PknG、SapM和Hsp16.3)在持续性感染中调节巨噬细胞自噬的作用,可能为发现LTBI新的生物标志物和药物新靶点提供有效思路。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分泌蛋白 巨噬细胞自噬 持续性感染
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5种沙眼衣原体分泌蛋白对小鼠巨噬细胞和树突状细胞吞噬功能的影响
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作者 侯淑萍 许荣 +3 位作者 朱丛中 李晓婷 单士军 王惠平 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期401-406,共6页
目的探索5种沙眼衣原体分泌蛋白在体外对小鼠巨噬细胞和树突状细胞吞噬功能的影响。方法原核表达蛋白GST-CT311、GST-GIgA、GST-cHtrA、GST-OmcBc和GST-Pgp3中,同时表达了衣原体膜蛋白GST-IncA作为对照,经谷胱甘肽巯基转移酶(GST)... 目的探索5种沙眼衣原体分泌蛋白在体外对小鼠巨噬细胞和树突状细胞吞噬功能的影响。方法原核表达蛋白GST-CT311、GST-GIgA、GST-cHtrA、GST-OmcBc和GST-Pgp3中,同时表达了衣原体膜蛋白GST-IncA作为对照,经谷胱甘肽巯基转移酶(GST)磁珠纯化、PreScission蛋白酶切除GST标签后得到蛋白CT311、GIgA、cHtrA、OmcBc、Pgp3以及IncA。取C3H/HeJ小鼠骨髓细胞制备巨噬细胞和树突状细胞,分别用100μg/ml和500μg/ml的蛋白质预处理巨噬细胞和树突状细胞,4h后加入荧光珠,1h后固定细胞,直接免疫荧光法计数每100个细胞吞噬荧光珠的平均数量(吞噬量)及每100个细胞中吞噬的细胞百分比(吞噬率)。结果高、低浓度蛋白质组对巨噬细胞及树突状细胞的吞噬率均无明显影响;与无处理组相比,LPS以及低浓度(100μg/ml)的各蛋白组对巨噬细胞和树突状细胞的吞噬量无明显影响;高浓度组(500μg/ml)的Pgp3、cHtrA及CT311预处理的巨噬细胞和树突状细胞吞噬量明显升高,GIgA、OmcBc以及IncA对巨噬细胞和树突状细胞的吞噬量无明显影响。结论在体外,沙眼衣原体分泌蛋白Pgp3、cHtrA及CT311可以促进巨噬细胞和树突状细胞的吞噬功能,这可能有助于沙眼衣原体在宿主体内的播散感染。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 分泌蛋白 巨噬细胞 树突状细胞 吞噬功能
沙眼衣原体GlgA蛋白表达和分泌的调控机制
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作者 孙豫辉 彭波 +4 位作者 刘安元 栾秀丽 米彦安 陈丽丽 陆春雪 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2018年第2期428-435,共8页
【背景】沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)的分泌蛋白在Ct与宿主细胞的相互作用、感染发育周期及致病过程中发挥着至关重要的作用。GlgA蛋白是课题组前期研究发现的一种新的Ct分泌蛋白,其表达和分泌的具体机制及作用还不清楚。... 【背景】沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)的分泌蛋白在Ct与宿主细胞的相互作用、感染发育周期及致病过程中发挥着至关重要的作用。GlgA蛋白是课题组前期研究发现的一种新的Ct分泌蛋白,其表达和分泌的具体机制及作用还不清楚。【目的】寻找调控CtGlgA蛋白表达和分泌的分子机制,为后续Ct致病机制研究提供实验基础和新思路。【方法】采用Signal P 4.1软件对GlgA蛋白N端进行信号肽预测分析,并用细菌分泌蛋白特异性阻断剂C16和C1化合物分别或同时处理Ct感染的He La细胞,观察阻断Ⅱ型、Ⅲ型分泌途径对GlgA蛋白分泌的影响;经新生霉素处理、噬斑筛选及穿梭质粒转染技术,构建Ct质粒缺失株和缺失互补株,并鉴定质粒编码基因在两种菌株的缺失及表达情况;间接免疫荧光法观察质粒缺失对GlgA表达和分泌的影响。【结果】GlgA蛋白N端无信号肽序列,细菌Ⅱ型、Ⅲ型分泌途径特异性阻断剂C16和C1化合物不能阻断GlgA的胞浆分泌;Ct质粒缺失株CTD1的质粒编码基因pgp7丢失,且质粒编码蛋白Pgp3及基因组编码蛋白GlgA的表达和分泌现象均消失;Ct缺失互补株CTD1-pGFP::SW2重新获得pgp7基因,并恢复Pgp3蛋白和GlgA的表达和分泌。【结论】初步证实Ct糖原合酶GlgA蛋白的表达和分泌不依赖细菌Ⅱ型和Ⅲ型分泌途径,而且与衣原体质粒密切相关。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 糖原合酶GlgA 分泌蛋白 质粒缺失株
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