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BMS-936559阻断PD-1在宫颈癌转移治疗中的作用 预览
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作者 乔亚光 马骊珠 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期2642-2645,共4页
目的通过使用单克隆抗体BMS-936559阻断程序性死亡因子(PD)-1/程序性死亡因子配体(PD-L)1通路,研究PD-1在宫颈癌进展中的作用及单克隆抗体在宫颈癌治疗中的应用。方法通过免疫组化反应判断PD-1在宫颈癌组织中的表达,使用BMS-936559对PD-... 目的通过使用单克隆抗体BMS-936559阻断程序性死亡因子(PD)-1/程序性死亡因子配体(PD-L)1通路,研究PD-1在宫颈癌进展中的作用及单克隆抗体在宫颈癌治疗中的应用。方法通过免疫组化反应判断PD-1在宫颈癌组织中的表达,使用BMS-936559对PD-1通路进行阻断,检测研究组和对照组患者在弥散加权成像(DWI)检查中表观弥散系数(ADC)的变化,同时观察两组近期治疗效果(有效率)和远期治疗指标(3年生存率、5年生存率、局部复发率和远处转移率),检验在PD-1被阻断情况下患者疗效的变化。结果研究组和对照组的ADC随着治疗的进行不断升高,在治疗6 w后,研究组的ADC值明显高于对照组;研究组的近期疗效显著高于对照组,研究组远期治疗指标中3年生存率和5年生存率显著高于对照组,而局部复发率和远处转移率显著低于对照组;生存曲线分析证实研究组的累计生存率显著高于对照组(均P<0.05)。结论 PD-1在宫颈癌的转移中起着重要的作用,宫颈癌治疗过程中单克隆抗体BMS-936559可以有效提高近期和远期疗效。 展开更多
关键词 宫颈癌 程序性死亡因子(PD)-1 单克隆抗体 转移治疗
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抗人脂蛋白相关磷脂酶A2单抗制备及应用
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作者 许雯 陆兆新 曹林 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期482-491,共10页
本研究旨在制备抗人脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)单克隆抗体,对单抗进行初步评价,采用免疫层析方法学,建立一种可在社区医疗机构应用的Lp-PLA2快速检测方法。首先从NCBI获得人Lp-PLA2全长基因序列构建表达载体,在CHO-K1细胞中表达Lp-P... 本研究旨在制备抗人脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)单克隆抗体,对单抗进行初步评价,采用免疫层析方法学,建立一种可在社区医疗机构应用的Lp-PLA2快速检测方法。首先从NCBI获得人Lp-PLA2全长基因序列构建表达载体,在CHO-K1细胞中表达Lp-PLA2重组蛋白。以获得的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术筛选杂交瘤细胞,小鼠腹水诱生单克隆抗体。通过SDS-PAGE、ELISA等方法评价抗体性能。利用双抗夹心法制备Lp-PLA2量子点荧光免疫层析检测试剂,并使用便携式检测仪器评估试剂性能。制备并筛选得到亲和力达到1×10–8的配对单克隆抗体PLA1与PLA5,抗体亚类为IgG1,能特异性识别血液中Lp-PLA2蛋白。自制Lp-PLA2量子点荧光免疫检测试剂可检测线性范围为20–2000ng/mL,与进口试剂的检测相关系数R达到0.99。综上,本研究制备得到一对高亲和力、高特异性的抗人Lp-PLA2单克隆抗体,并建立了Lp-PLA2免疫层析检测方法,该方法检测准确、操作简便,适合Lp-PLA2检测应用于社区医疗机构,为居民心血管健康管理提供了新途径。 展开更多
关键词 脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2) 单克隆抗体 免疫层析 动脉粥样硬化 真核表达
小反刍兽疫病毒N蛋白阻断ELISA方法的建立
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作者 毛立 张纹纹 +5 位作者 李文良 杨蕾蕾 李基棕 郝飞 刘茂军 江杰元 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第5期114-120,共7页
小反刍兽疫(PPR)是一种跨国传播的重大烈性传染病,主要发生于山羊和绵羊等小反刍动物,具有高发病率和死亡率。小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是抗体检测的主要靶蛋白,本研究将PPRV Nigeria 75/1毒株的N蛋白进行原核表达,重组蛋白经鉴定和纯... 小反刍兽疫(PPR)是一种跨国传播的重大烈性传染病,主要发生于山羊和绵羊等小反刍动物,具有高发病率和死亡率。小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是抗体检测的主要靶蛋白,本研究将PPRV Nigeria 75/1毒株的N蛋白进行原核表达,重组蛋白经鉴定和纯化后免疫BALB/c小鼠。取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选针对PPRV N蛋白的阳性单克隆细胞株,获得了具有阻断效果的单克隆抗体1B11株。经免疫荧光方法鉴定该单克隆抗体与PPRV Nigeria 75/1毒株发生特异性反应。用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,辣根过氧化物酶标记1B11抗体作为阻断抗体,建立了检测PPRV抗体的阻断ELISA方法。经优化反应条件,抗原的最佳包被浓度为2.5μg/mL,阻断抗体的最佳浓度为1μg/mL,待检血清1∶2稀释反应1 h,底物反应时间为10 min,阴阳性检测临界值为阻断率为58.5%。特异性试验证明该方法与山羊副流感病毒3型(CPIV3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)等阳性血清不发生交叉反应。通过对234份血清样品进行检测,该方法与商品化试剂盒符合率为91%(213/234)。由此表明,建立的阻断ELISA方法可用于PPRV临床样品的抗体水平检测,为PPRV疫苗免疫效果检验及PPRV根除提供了基础。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 N蛋白 单克隆抗体 阻断ELISA
鼠抗人CD86单克隆抗体的制备及对肿瘤细胞生长与迁移的影响 预览
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作者 王玉玉 颜天铭 +4 位作者 孔永 沈立军 王婧 周慧君 邱玉华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期458-462,共5页
目的:制备鼠抗人CD86分子的单克隆抗体(mAb),分析其对天然表达CD86分子的恶性肿瘤细胞株的生长与迁移的影响。方法:采用小鼠腹水诱生法制备CD86 mAb,Protein A亲和层析法纯化抗体。采用流式细胞术(FCM)检测抗体对细胞膜型CD86分子的识... 目的:制备鼠抗人CD86分子的单克隆抗体(mAb),分析其对天然表达CD86分子的恶性肿瘤细胞株的生长与迁移的影响。方法:采用小鼠腹水诱生法制备CD86 mAb,Protein A亲和层析法纯化抗体。采用流式细胞术(FCM)检测抗体对细胞膜型CD86分子的识别。以Raji、Daudi和8266细胞为观察对象,加入CD86 mAb共同孵育,用FCM检测抗体对细胞凋亡的诱导作用,MTT检测抗体对细胞增殖的影响,Transwell TM研究抗体对细胞迁移的影响。结果:本实验获得的CD86 mAb能很好地识别细胞膜型分子,其与Raji、Daudi和8266细胞的结合率分别为96.5%、99.0%和83.9%。FCM结果显示,共同孵育24 h,当抗体浓度为20μg/ml时,上述细胞的凋亡率分别为16%、18%及14%,均明显高于同型对照组(P<0.05)。MTT结果显示,共同孵育48 h,20μg/ml抗体对细胞的增殖己可产生抑制作用,40μg/ml抗体对上述细胞增殖的抑制效果更明显(P<0.05),抑制率依次为23%、25%及26%。Transwell TM结果显示,共同孵育48 h,20μg/ml抗体组的Raji、Daudi和8266细胞的迁移率分别为26%、23%和24%,均明显低于同型对照组(P<0.05)。结论:本实验制备的抗体能很好地识别细胞膜型分子,其对表达CD86分子的肿瘤细胞的增殖及迁移具有抑制作用,同时可诱导肿瘤细胞发生凋亡,提示该抗体对表达相应抗原分子的肿瘤具有一定的抗瘤效应。 展开更多
关键词 CD86分子 单克隆抗体 恶性肿瘤细胞 凋亡 增殖 迁移
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艾塞那肽单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立 预览
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作者 倪晓燕 杜贤宇 +5 位作者 周乐春 程婷 储成风 沈毅 王荣海 宋礼华 《中国医药生物技术》 2019年第3期277-279,共3页
艾塞那肽(exenatide)是Exendin-4的人工合成品,是首获批准应用于2型糖尿病的胰高血糖素样肽1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)[1-2]。注射给药后,通过模拟胰岛素抑制胰高血糖素的分泌,减慢胃排空和减少食... 艾塞那肽(exenatide)是Exendin-4的人工合成品,是首获批准应用于2型糖尿病的胰高血糖素样肽1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)[1-2]。注射给药后,通过模拟胰岛素抑制胰高血糖素的分泌,减慢胃排空和减少食欲从而达到控制血糖的效果[3-10]。研究资料表明,艾塞那肽的测定方法目前主要有高效液相法[11]和ELISA试剂盒法。其中高效液相法主要用于艾塞那肽制剂的含量、纯度等检测;ELISA方法灵敏度高,样品适用性广,可用于艾塞那肽血药浓度测定,但进口试剂盒价格十分昂贵,且难以获得,国产的试剂盒对样品的处理要求较高、不易获得稳定的检测结果。鉴于艾塞那肽的临床应用价值和未来的广泛使用,建立一种灵敏、适用性强的艾塞那肽含量检测方法具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 胰高血糖素样肽1 ELISA检测 单克隆抗体 EXENDIN-4 EXENATIDE receptor ELISA方法 高效液相法
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洋葱黄矮病毒RT-PCR和ELISA检测方法的建立
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作者 郭炎 李小宇 +3 位作者 苏颖 张春雨 周雪平 王永志 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期495-496,共2页
分麋洋葱Alliumcepa var.aggregatum俗称毛葱、鬼子葱,是北方地区特色经济作物,保健功效显著,其种植面积逐年增加。洋葱黄矮病毒(OBnion yellow dwarfvirus,OYDV)能够侵染分麋洋葱,造成其产量和品质下降。OYDV侵染分麋洋葱后,植株矮化,... 分麋洋葱Alliumcepa var.aggregatum俗称毛葱、鬼子葱,是北方地区特色经济作物,保健功效显著,其种植面积逐年增加。洋葱黄矮病毒(OBnion yellow dwarfvirus,OYDV)能够侵染分麋洋葱,造成其产量和品质下降。OYDV侵染分麋洋葱后,植株矮化,叶片变形褪绿、叶尖枯萎,后期整个叶片表现发黄、起皱及萎缩等症状。为能在发病早期及时快速地检测出OYDV,本研究利用特异性引物和已制备的单克隆抗体,通过优化参数确定最佳检测条件,建立OYDV的RT-PCR和ELISA检测方法,以期为分麋洋葱生产中农药减施提供技术保障。 展开更多
关键词 ELISA检测方法 洋葱黄矮病毒 RT-PCR 叶片变形 单克隆抗体 特异性引物 经济作物 地区特色
预防婴幼儿呼吸道合胞病毒感染的在研新药——MEDI8897
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作者 宗成 李立国 +1 位作者 聂鲁 王凌霄 《临床药物治疗杂志》 2019年第4期1-4,17共5页
呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是世界范围内引起儿童急性下呼吸道感染的最主要病原体,目前尚无疫苗及指南推荐的抗病毒治疗方案。唯一被美国食品药品监督管理局批准用于预防RSV的药物是帕利珠单抗(palivizumab),然... 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是世界范围内引起儿童急性下呼吸道感染的最主要病原体,目前尚无疫苗及指南推荐的抗病毒治疗方案。唯一被美国食品药品监督管理局批准用于预防RSV的药物是帕利珠单抗(palivizumab),然而该药仅被批准用于高危儿童的被动免疫,并且由于需要反复注射和费用高昂的问题,不能广泛的适用于全部婴幼儿群体。MEDI8897是阿斯利康正在开发的一种重组人IgG1κ单克隆抗体,目前正在开展在全部婴儿群体中用于预防RSV相关疾病的临床试验,具有比帕利珠单抗更高的效力和更长的半衰期,在典型的5个月RSV流行季节中只需注射1剂,有希望用于广泛的婴幼儿群体的RSV感染预防。本文就MEDI8897的靶标特点、基本信息、结构特征、作用机制、临床前及临床研究情况作一概述。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 MEDI8897 单克隆抗体 婴幼儿
冷鲜猪肉中单增李斯特菌快速检测试纸条的初步研制 预览
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作者 赵鑫 张帅 +2 位作者 祁文婧 齐颖颖 张红星 《北京农学院学报》 2019年第1期92-96,共5页
【目的】建立一种可快速检测单增李斯特菌的胶体金试纸条的制备方法.【方法】用自制的单核增生性李斯特菌作为抗原对BALB/c小鼠进行免疫,之后通过杂交瘤技术进行细胞融合制备出特异性良好的单克隆抗体,并通过双抗夹心ELISA体系筛选出2... 【目的】建立一种可快速检测单增李斯特菌的胶体金试纸条的制备方法.【方法】用自制的单核增生性李斯特菌作为抗原对BALB/c小鼠进行免疫,之后通过杂交瘤技术进行细胞融合制备出特异性良好的单克隆抗体,并通过双抗夹心ELISA体系筛选出2株稳定且配对最佳的抗体,利用胶体金免疫层析技术组装试纸条并分析其特性.【结果】筛选出的2株单抗命名为3B7、5C9,测得其灵敏度均为10^4CFU/mL,抗体的最适pH值是8.0,最佳抗体标记是24μg,试纸条的灵敏度为10^6CFU/mL且特异性良好.【结论】初步制备出可快速、准确检测冷鲜猪肉中单增李斯特菌的试纸条. 展开更多
关键词 增李斯特菌 单克隆抗体 胶体金免疫层析试纸条
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分子靶向治疗药物在子宫内膜癌中的研究进展 预览
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作者 刘莉 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2019年第23期130-130,134共2页
肿瘤分子靶向治疗是以肿瘤细胞的标志性分子为靶点,研制出有效的阻断剂,有效干预细胞发生癌变的环节,从分子水平来逆转这种细胞恶性生物学行为的出现,从而抑制肿瘤细胞生长。本文针对靶向治疗药物在子宫内膜癌的研究现状、应用前景进行... 肿瘤分子靶向治疗是以肿瘤细胞的标志性分子为靶点,研制出有效的阻断剂,有效干预细胞发生癌变的环节,从分子水平来逆转这种细胞恶性生物学行为的出现,从而抑制肿瘤细胞生长。本文针对靶向治疗药物在子宫内膜癌的研究现状、应用前景进行总结及展望。 展开更多
关键词 分子靶向治疗 单克隆抗体 酪氨酸酶抑制剂 子宫内膜癌
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基于纳米磁珠和双标记抗体的玉米赤霉烯酮快速、高灵敏检测方法的建立及应用
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作者 肖佳丽 叶青 +3 位作者 方云 方维焕 宋厚辉 章先 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期440-450,共11页
玉米赤霉烯酮(zeralenone,ZEN)具有雌激素活性,主要污染谷物和饲料,大量聚积可导致流产和死胎,给动物和人类健康带来严重威胁。本研究通过将ZEN偶联抗原ZEN-BSA包被于纳米磁珠(magnetic nanoparticles,MNPs),制备纳米磁珠-偶联抗原复合... 玉米赤霉烯酮(zeralenone,ZEN)具有雌激素活性,主要污染谷物和饲料,大量聚积可导致流产和死胎,给动物和人类健康带来严重威胁。本研究通过将ZEN偶联抗原ZEN-BSA包被于纳米磁珠(magnetic nanoparticles,MNPs),制备纳米磁珠-偶联抗原复合物(MNPs-BSA-ZEN),同时使用金颗粒(Au nanoparticles,AuNPs)和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)双标记的ZEN单克隆抗体,建立新型酶联免疫检测方法(MNPs-HRP-AuNPsIC-ELISA)。检测下限(IC10)达到0.03ng/mL,检测区间(IC20–IC80)为0.05–0.89ng/mL,半数抑制率(IC50)为0.22ng/mL,与ZEN类似物(α-zearalanol、zearalanone、α-zearalenol、β-zearalenol和β-zearalanol)的交叉反应性依次为19.2%、11.7%、8.3%、1.2%和4.3%,与黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、伏马毒素B1、桔青霉素和展青霉毒素几乎不存在交叉反应。在玉米、面粉和大豆样本中的加标回收率可达81.6%–113.5%,与LC-MS/MS同时对天然样本中ZEN含量的检测结果表明,两种方法相关性良好。本研究建立的MNPs-HRP-AuNPs IC-ELISA具备快速和高灵敏的双重优势,也可为其他霉菌毒素精准检测技术的开发提供参考。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 纳米磁珠 金颗粒 辣根过氧化物酶 单克隆抗体
上海科创企业“痛点”有专人解决
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作者 陈君言 杜佳 《中国检验检疫》 2019年第4期62-63,共2页
2月1日,中国科学院上海药物研究所的6支单克隆抗体,在张江跨境科创监管服务中心顺利完成查验放行,从机场提货到完成海关查验进入实验室,前后仅耗时148分钟。要是在以前,这样的通关速度,在药物研究所科研条件处处长张娟看来是不可想象的。
关键词 上海 药物研究所 企业 单克隆抗体 中国科学院 服务中心 通关速度 科研条件
单个B细胞制备CRP单克隆抗体及其ELISA检测体系的初步建立 预览
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作者 林骏 山云 +3 位作者 刘谦 王晓炜 王洪涛 刘尧 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期69-73,共5页
目的:用单个B细胞抗体制备技术结合Exip293真核表达系统制备hs-CRP单克隆抗体。方法:用重组CRP蛋白免疫小鼠,荧光标记探针和流式分选技术分离出表达CRP单克隆抗体的单个B细胞,通过PCR方法扩增出编码CRP单克隆抗体蛋白的轻重链核酸序列... 目的:用单个B细胞抗体制备技术结合Exip293真核表达系统制备hs-CRP单克隆抗体。方法:用重组CRP蛋白免疫小鼠,荧光标记探针和流式分选技术分离出表达CRP单克隆抗体的单个B细胞,通过PCR方法扩增出编码CRP单克隆抗体蛋白的轻重链核酸序列并构建重组质粒,质粒转染到Expi 293细胞中制备出单克隆抗体蛋白。结果:用间接ELISA法筛选出两个具有良好特异性的单克隆抗体20#,22#,将这两个抗体配对并建立ELISA双抗体夹心检测方法,CRP浓度在15~250 ng/ml范围内有较好的检测线性(y=0.003x-0.035 8,R 2=0.997 4),精密度分析的批内变异系数CV为6.7%~9.37%,批间变异系数为8.52%~9.10%,平均回收率为98%,与临床血清检测值具有良好的相关性,达到CRP检测要求。结论:本研究所用的单个B细胞分离分选方法结合Expi 293真核表达系统在制备单克隆抗体方面具有省时、高效、特异性好、灵敏度高的特点,具有很好的应用价值。 展开更多
关键词 个B细胞 CRP 单克隆抗体 真核表达系统 ELISA
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苯乙醇胺A单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的建立 预览
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作者 项自来 王玲 +6 位作者 夏苏干 邹辉 顾建红 袁燕 刘学忠 刘宗平 卞建春 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期849-857,共9页
为制备苯乙醇胺A(phenylethanolamine A,PA)单克隆抗体,建立一种针对苯乙醇胺A的快速、简便、灵敏度高的检测方法,本试验采用重氮化法将制备的苯乙醇胺A衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)进行偶联作为免疫原和包被原。利... 为制备苯乙醇胺A(phenylethanolamine A,PA)单克隆抗体,建立一种针对苯乙醇胺A的快速、简便、灵敏度高的检测方法,本试验采用重氮化法将制备的苯乙醇胺A衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)进行偶联作为免疫原和包被原。利用弗氏佐剂充分乳化免疫原(PA-BSA),按常规免疫程序免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠,选择血清抗体效价较高的小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞以PEG法进行细胞融合。结果显示,经3次细胞亚克隆筛选后,最终筛选出一株可稳定分泌抗苯乙醇胺A单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为D6H8,利用此细胞以小鼠体内诱生法制备抗体。经鉴定,D6H8腹水抗体亚型为IgG1,轻链为κ链;纯化后的抗体与沙丁胺醇、盐酸克伦特罗、盐酸异丙肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素均无明显的交叉反应(CR<0.18%),表明该抗体特异性良好。利用此抗体建立针对苯乙醇胺A药物残留检测的间接竞争ELISA方法,结果表明,腹水抗体效价为1∶12800,猪肉中苯乙醇胺A添加浓度在5~1000ng/mL时线性关系良好,标准工作曲线为y=0.3861x-0.1845(R^2=0.990),其IC50为58.88ng/mL,LOD为3.83ng/mL,回收率在85.96%~104.32%之间。综上所述,本试验成功建立了检测苯乙醇胺A药物残留的间接竞争ELISA方法,该方法灵敏度高、稳定性较好。 展开更多
关键词 苯乙醇胺A(PA) 杂交瘤 单克隆抗体 间接竞争ELISA 回收试验
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洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制 预览
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作者 刘红亮 王奇奇 +5 位作者 张改平 祁艳华 周景明 刘燕凯 马丽萍 王爱萍 《中国动物检疫》 CAS 2019年第2期97-102,共6页
本研究以洛克沙胂(ROX)的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸(HAPA)为小分子半抗原,采用碳二亚胺法,分别将其与载体蛋白——牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原HAPA-BSA和检测抗原HAPA-OVA。经紫外光谱扫描及聚丙烯酰... 本研究以洛克沙胂(ROX)的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸(HAPA)为小分子半抗原,采用碳二亚胺法,分别将其与载体蛋白——牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原HAPA-BSA和检测抗原HAPA-OVA。经紫外光谱扫描及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,以20μg/只剂量的HAPA-BSA免疫BALB/c小鼠;选择血清效价高、敏感性强的小鼠,取脾脏进行细胞融合,制备杂交瘤细胞株。利用间接ELISA法筛选得到1株可以稳定分泌抗ROX单克隆抗体的细胞株,命名为G12;间接ELISA法测定其细胞上清效价为1:512,间接竞争ELISA测定其半数抑制浓度IC50为3.147ng/μL。经小鼠体内诱生腹水,辛酸-硫酸铵法纯化获得纯度较高的单克隆抗体,间接ELISA测定其效价为1:102400,IC50为1.433ng/μL,且具有良好的特异性。本试验成功合成了ROX人工抗原,并制备了可以分泌高敏感性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为ROX免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 洛克沙胂 3-氨基-4羟基苯胂酸 完全抗原 碳二亚胺法 单克隆抗体
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猪圆环病毒3型夹心ELISA诊断方法的建立 预览
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作者 于俊楠 陈媛 +3 位作者 彭尧舜 金宜顺 罗莉妍 陈梅芳 《福建畜牧兽医》 2019年第2期17-20,共4页
本研究基于实验室制备的PCV3 Cap蛋白单克隆抗体,建立检测PCV3的夹心ELISA方法。通过筛选最佳包被浓度、包被时间、一抗和二抗浓度来建立夹心ELISA方法并确定临界值。探讨该方法的特异性和重复性,并进行临床应用。结果表明,单抗包被10μ... 本研究基于实验室制备的PCV3 Cap蛋白单克隆抗体,建立检测PCV3的夹心ELISA方法。通过筛选最佳包被浓度、包被时间、一抗和二抗浓度来建立夹心ELISA方法并确定临界值。探讨该方法的特异性和重复性,并进行临床应用。结果表明,单抗包被10μg/mL(1:200)、一抗1:4 000稀释、二抗1:5 000稀释后的作用浓度为最佳工作浓度;特异性试验表明,该诊断方法特异性良好,与PCV2等多种病毒蛋白不存在交叉反应;重复测试结果表明,测定内和测定间的变异小于5%。研究结果表明,建立的夹心ELISA试验可用于临床检测PCV3。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 夹心ELISA 单克隆抗体
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用自制单克隆抗体建立检测NGAL的胶体金方法 预览
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作者 郭会灿 李君华 +2 位作者 武晓莉 张丽媛 徐冬梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1232-1236,共5页
目的:通过免疫、融合、纯化获得了抗中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的特异性单克隆抗体,并建立了胶体金试纸条的检测。方法:本研究筛选得到5株抗NGAL的单克隆抗体,通过配对测试,1B4和2C6能用于双抗夹心胶体金试纸条的制备。以... 目的:通过免疫、融合、纯化获得了抗中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的特异性单克隆抗体,并建立了胶体金试纸条的检测。方法:本研究筛选得到5株抗NGAL的单克隆抗体,通过配对测试,1B4和2C6能用于双抗夹心胶体金试纸条的制备。以重组hrNGAL为检测对象,对本试纸条的灵敏度、重复性、稳定性进行了全面评价。结果:本试纸条的灵敏度为5ng/ml,重复性和稳定性良好,对临床样本的检测与临床结果一致。结论:本研究建立的NGAL免疫胶体金检测方法,灵敏度高,检测时间短,成本低,为普及临床检测早期肾损伤具有重要意义。 展开更多
关键词 NGAL 胶体金 单克隆抗体 筛选
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抗金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraPL-Lectin抗体在小鼠巨噬细胞抗感染中的功能研究
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作者 许秀华 郑峰 +3 位作者 岳岩 汪春晖 周婷婷 胡龙华 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期472-477,共6页
目的:阐述单克隆抗体anti-SraPL-Lectin在小鼠巨噬细胞吞噬杀伤金黄色葡萄球菌过程中的功能。方法:PCR扩增sraP相应基因片段,并克隆至pET28a表达载体,用0.1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,镍... 目的:阐述单克隆抗体anti-SraPL-Lectin在小鼠巨噬细胞吞噬杀伤金黄色葡萄球菌过程中的功能。方法:PCR扩增sraP相应基因片段,并克隆至pET28a表达载体,用0.1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,镍柱纯化重组蛋白,经Western blot分析anti-SraPL-Lectin的特异性,采用qPCR检测巨噬细胞炎症因子诱导表达水平,CCK8检测金黄色葡萄球菌的增殖抑制率,涂板计数巨噬细胞上清和裂解液中金黄色葡萄球菌的菌落数。结果:anti-SraPL-Lectin不仅能与不同截短类型的SraP重组蛋白结合,而且能与金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白发生特异性结合;anti-SraPL-Lectin能下调小鼠巨噬细胞促炎因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素(interleukin,IL)-1β、IL-12p40]的表达并上调抑炎因子(IL-10)的表达。庆大霉素和anti-SraPL-Lectin共同作用下,未见金黄色葡萄球菌出现明显的增殖。anti-SraPL-Lectin能降低巨噬细胞上清中金黄色葡萄球菌的载量。结论:单克隆抗体anti-SraPL-Lectin与金黄色葡萄球菌形成免疫复合物能减轻巨噬细胞的炎症反应,促进巨噬细胞对金黄色葡萄球菌的清除。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 富丝氨酸重复蛋白 单克隆抗体 巨噬细胞 免疫复合物
晚期胃癌抗血管生成治疗的研究进展 预览
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作者 邹子骅(综述) 张弘纲(审校) 《癌症进展》 2019年第10期1130-1134,共5页
胃癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,晚期胃癌因治疗手段有限而预后较差。血管生成相关通路在胃癌的浸润转移中起重要作用,针对其中关键分子的靶向药物为改善晚期胃癌患者预后提供了新的可能。目前抗血管生成的分子靶向药物主要包括单克... 胃癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,晚期胃癌因治疗手段有限而预后较差。血管生成相关通路在胃癌的浸润转移中起重要作用,针对其中关键分子的靶向药物为改善晚期胃癌患者预后提供了新的可能。目前抗血管生成的分子靶向药物主要包括单克隆抗体、酪氨酸激酶抑制剂以及重组人血管内皮抑制素等。然而,目前胃癌的抗血管治疗研究进展缓慢,仅有雷莫芦单抗、阿帕替尼被批准用于二线/三线治疗。未来可以通过更细致的亚组研究探索疗效预测指标,联合免疫治疗以期进一步推动胃癌抗血管生成治疗的发展。 展开更多
关键词 晚期胃癌 抗血管生成 单克隆抗体 酪氨酸激酶抑制剂 免疫调节
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慢性阻塞性肺疾病单克隆抗体治疗新进展 预览
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作者 邬祚虹 程德云 《临床肺科杂志》 2019年第1期170-173,共4页
慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)以持续性呼吸系统症状及气流受限为主要特征,是一种常见的、可以预防和治疗的疾病。据统计,COPD目前居全球疾病死亡原因的第4位,预计到2020年将升至第3位,在严重影响人类... 慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)以持续性呼吸系统症状及气流受限为主要特征,是一种常见的、可以预防和治疗的疾病。据统计,COPD目前居全球疾病死亡原因的第4位,预计到2020年将升至第3位,在严重影响人类健康的同时对社会经济亦造成严重负担。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 单克隆抗体 治疗 PULMONARY 呼吸系统症状 COPD 气流受限 死亡原因
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建立雌酮硫酸钠胶体金免疫层析快速限量检测方法
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作者 巩月红 段新宇 +4 位作者 王建华 赵军 罗俊 温浩 高晓黎 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期352-360,共9页
目的:建立一种快速检测孕马尿中雌酮硫酸钠的胶体金免疫层析试纸方法。方法:采用化学合成法将雌酮制备为ESS-17-肟(半抗原),应用混合酸酐法将ESS-17-肟与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备为ESS-17-肟-BSA(免疫原),对所得偶联物溶液进行紫外扫... 目的:建立一种快速检测孕马尿中雌酮硫酸钠的胶体金免疫层析试纸方法。方法:采用化学合成法将雌酮制备为ESS-17-肟(半抗原),应用混合酸酐法将ESS-17-肟与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备为ESS-17-肟-BSA(免疫原),对所得偶联物溶液进行紫外扫描鉴定并计算偶联率。ESS-17-肟-BSA免疫BALB/C小鼠,取血清高滴度小鼠脾脏淋巴细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞,用ELISA法进行阳性筛选。获得阳性克隆细胞株后于BALB/C小鼠体内诱生腹水制备单克隆抗体,抗体纯化后用胶体金标记,通过正交设计确定最佳实验参数,研制出雌酮硫酸钠胶体金免疫层析试纸条。结果:获得经化学结构修饰后的目标抗原ESS-17-肟-BSA,融合克隆后得到4株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株2D1、7G4、5F3、2A7,其中2D1抗体纯化后特异强,效价达1.0×106。该抗体制备的胶体金层析试纸条的检测限为1μg·L-1,与结构类似物均无交叉反应,此法检测样品结果与高效液相色谱法测定结果比对阳性符合率为85.45%(45/52),阴性符合率为89.58%(43/48),总符合率为88.00%(88/100),结果一致性较好。结论:本研究制备了雌酮硫酸钠免疫原,融合制得抗雌酮硫酸钠特异性单克隆抗体,并研制出以雌酮硫酸钠单克隆抗体为基础的胶体金免疫层析试纸条,能够快速、灵敏地检测孕马尿中的雌酮硫酸钠。 展开更多
关键词 雌酮硫酸钠 半抗原 免疫原 偶联率 细胞融合 杂交瘤细胞 单克隆抗体 胶体金免疫层析法
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