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彗星实验技术及其应用 预览
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作者 李岗 吴声敢 蔡磊明 《生态毒理学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期79-96,共18页
彗星实验是瑞典科学家Ostling和Johanson于1984年发明的检测毒物DNA损伤效应的方法。它经历了从最初的微电泳技术、中性彗星实验、碱性彗星实验、酶切彗星实验和双向垂直彗尾彗星实验等不断完善的发展过程。在毒理学、遗传学和环境生态... 彗星实验是瑞典科学家Ostling和Johanson于1984年发明的检测毒物DNA损伤效应的方法。它经历了从最初的微电泳技术、中性彗星实验、碱性彗星实验、酶切彗星实验和双向垂直彗尾彗星实验等不断完善的发展过程。在毒理学、遗传学和环境生态科学等领域有着重要的应用,是经济合作与发展组织(OECD)和欧洲食品安全局等国际组织推荐的测定遗传毒性的方法之一。彗星实验的关键点包括单细胞悬液的制备、细胞裂解液的成分与比例,低熔点琼脂糖凝胶的浓度,电泳条件等。在典型应用领域,如蚯蚓、鱼、两栖动物、鼠和人的彗星实验很难找到标准实验方案。成功的彗星实验还需关注,实验设计时必须包括阳性对照,结果表述时必须有图为证,实验方案可能因物种或细胞而异。 展开更多
关键词 彗星实验 单细胞凝胶电泳 DNA损伤 遗传毒性
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核酸荧光染料在单细胞凝胶电泳中的染色比较 预览 被引量:1
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作者 杨丽艳 王竹 +1 位作者 刘圆圆 徐克前 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第2期81-85,共5页
目的探讨4种核酸染料(EB、SYBR GreenⅠ、Gold View和AO)在单细胞凝胶电泳(SCGE)中的染色特性,以分析用新型核酸荧光染料代替EB染料的可能性。方法分离提取健康人外周血淋巴细胞,分别用0、20、40、60、80μg/m L的H2O2进行处理,中性... 目的探讨4种核酸染料(EB、SYBR GreenⅠ、Gold View和AO)在单细胞凝胶电泳(SCGE)中的染色特性,以分析用新型核酸荧光染料代替EB染料的可能性。方法分离提取健康人外周血淋巴细胞,分别用0、20、40、60、80μg/m L的H2O2进行处理,中性SCGE检测淋巴细胞DNA损伤情况;分别用EB、SYBR GreenⅠ、Gold View和AO进行染色,荧光显微镜下观察并比较染色结果。分析尾部DNA百分含量(%Tail DNA)以比较组间差异。结果 SCGE结果表明,SYBR GreenⅠ、Gold View和AO均能很好的反应实验结果,不同浓度中,1×-5×SYBR GreenⅠ、2×-5×Gold View、2-5μg/m L AO为最佳染色浓度范围。EB、SYBR GreenⅠ、Gold View和AO的回归系数分别为2.71、2.81、2.73、2.75,其染色效果较为一致,稳定性分析结果表明,3组细胞在48 h以内结果稳定,%Tail DNA差异无统计学意义(P均〉0.05);SYBR GreenⅠ、Gold View和AO实验室内精密度分别为6.92%、7.10%、8.25%,优于EB染色(8.35%);SYBR GreenⅠ和Gold View重复性分别为3.07%、2.74%,优于EB染色(3.59%)。结论SYBR GreenⅠ、Gold View和AO均可用于本实验染色,Gold View是更适合用于SCGE中替代EB的核酸荧光染料。 展开更多
关键词 核酸荧光染料 溴化乙锭 单细胞凝胶电泳 安全性
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两种遗传毒性检测方法在饮水安全监测的应用对比
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作者 张丽霞 张明 +1 位作者 治洪 张宏伟 《环境与健康杂志》 北大核心 2018年第8期707-710,共4页
目的采用两种遗传毒性试验检测不同城市的水源水、出厂水和末稍水的遗传毒性,并评价不同的遗传毒性检测方法用于饮水安全监测中的适用性。方法于2016年4月,采集拥有完整的自来水处理系统的甲、乙市水厂的水源水、出厂水及末梢水水样,以... 目的采用两种遗传毒性试验检测不同城市的水源水、出厂水和末稍水的遗传毒性,并评价不同的遗传毒性检测方法用于饮水安全监测中的适用性。方法于2016年4月,采集拥有完整的自来水处理系统的甲、乙市水厂的水源水、出厂水及末梢水水样,以去离子水作为阴性对照。甲市水厂采用氯胺消毒;乙市水厂采用二氧化氯消毒。分别采用蚕豆根尖微核实验和单细胞凝胶电泳试验[分别设立4、20、100μl/ml(分别相当于0.08、0.4、2 L原水)以及空白对照(基础培养液)、阴性对照(4、20、100μl/ml的DMSO)和阳性对照(50μg/ml重铬酸钾)]对水样进行染色体及DNA损伤评价。结果对于甲市,与阴性对照组比较,仅出厂水的蚕豆根尖细胞微核率增加,差异有统计学意义(P<0.05),根据污染指数判断属于轻度污染;末梢水的污染指数为1.5,属于轻度污染,但处于轻度污染的临界点;出厂水的尾部DNA含量高于相同剂量阴性对照组及水源水、末梢水,仅100μl/ml组差异有统计学意义(P<0.05);且各水样100μl/ml组的尾部DNA含量均高于4、20μl/ml组。对于乙市,乙市某水厂水源水、出厂水、末梢水均可导致蚕豆根尖细胞微核率增加,但与阴性对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);根据污染指数判断,均属于轻度污染;各水样致突变性强度依次为出厂水>末梢水>水源水;100μl/ml组乙市水源水、出厂水、末稍水的尾部DNA含量均高于相同剂量的阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且各水样100μl/ml组的尾部DNA含量均高于4、20μl/ml组。结论对于相同水样,蚕豆根尖微核实验结果与单细胞凝胶电泳结果一致。此两种实验适于协同应用于饮水安全性监测评价工作。 展开更多
关键词 饮水安全 蚕豆根尖实验 单细胞凝胶电泳
人源HepaRG肝细胞毒性与遗传毒性高通量筛选方法的初步建立 被引量:3
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作者 文海若 毛志慧 +3 位作者 耿兴超 李波 王雪 黄芝瑛 《药物评价研究》 CAS 2017年第11期1550-1558,共9页
目的利用正常人源肝细胞(HepaRG)和高内涵技术检测肝毒性标志物,并结合微核试验和单细胞凝胶电泳试验建立体外细胞毒性和遗传毒性的快速筛选平台。方法选取适当的荧光探针Hoechst33342、DCFH-DA、Fluo4-AM、Mito Tracker?Red CMX Ro... 目的利用正常人源肝细胞(HepaRG)和高内涵技术检测肝毒性标志物,并结合微核试验和单细胞凝胶电泳试验建立体外细胞毒性和遗传毒性的快速筛选平台。方法选取适当的荧光探针Hoechst33342、DCFH-DA、Fluo4-AM、Mito Tracker?Red CMX Ros联合高内涵技术研究不同大黄蒽醌类单体(AQs)对HepaRG细胞活性氧簇(ROS)、胞内Ca2+含量及线粒体膜完整性等肝毒性标志物的影响,并开展高内涵法胞质分裂阻断法微核试验和高通量彗星电泳试验,综合评价AQs致肝细胞毒性及染色体、DNA损伤情况。结果与对照组比较,HepaRG细胞经25.0μg/m L大黄素、12.5和25.0μg/m L芦荟大黄素、50和25.0μg/m L大黄酚处理24 h后,胞内ROS含量显著增多;12.5和25.0μg/m L芦荟大黄素和50.0μg/m L大黄酸可引起胞内Ca2+含量显著增多;大黄素25.0μg/m L、芦荟大黄素25.0μg/m L、大黄酚50.0和25.0μg/m L、大黄酸50.0和25.0μg/m L组导致线粒体明显损伤(P〈0.05、0.01)。与对照组比较,25.0μg/m L大黄素诱导微核率、尾DNA含量和彗星尾距(OTM)数值均显著升高(P〈0.05、0.01);50.0μg/m L大黄酚给药72 h后微核率显著升高(P〈0.01)。结论 AQs的研究结果与现有文献报道基本相符。本研究成功建立肝细胞毒性和遗传毒性的联合快速筛选模型,有助于药物研发早期的毒性筛选。 展开更多
关键词 大黄蒽醌类 HepaRG细胞 高通量筛选 细胞毒性 活性氧 线粒体损伤 遗传毒性 DNA断裂 染色体损伤 微核试验 单细胞凝胶电泳 大黄素 芦荟大黄素 大黄酚 大黄酸
重金属胁迫对罗非鱼血细胞DNA损伤的影响 预览 被引量:3
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作者 张来军 李晓梅 +3 位作者 陈永敢 陈攀 杭瑜瑜 公维洁 《海南热带海洋学院学报》 2017年第5期31-35,共5页
为研究重金属对鱼类的毒性效应,将罗非鱼血细胞分别暴露于低、中、高三种不同浓度的四种重金属溶液Cr(VI)、Pb、Cu、Hg中2 h,采用单细胞凝胶电泳实验(彗星电泳)技术检测血细胞的DNA损伤程度,对照组不加任何重金属,检测指标包括尾部... 为研究重金属对鱼类的毒性效应,将罗非鱼血细胞分别暴露于低、中、高三种不同浓度的四种重金属溶液Cr(VI)、Pb、Cu、Hg中2 h,采用单细胞凝胶电泳实验(彗星电泳)技术检测血细胞的DNA损伤程度,对照组不加任何重金属,检测指标包括尾部DNA含量、尾长、尾矩、Olive尾矩.结果显示,鱼血细胞对四种重金属胁迫均极为敏感,随重金属胁迫浓度的升高,DNA损伤程度增加.因此,罗非鱼可作为评价重金属污染遗传毒性损伤的敏感性生物标记物. 展开更多
关键词 单细胞凝胶电泳 鱼血细胞 重金属污染 DNA损伤
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蜀本草多糖对植物DNA损伤的修复 预览
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作者 唐红枫 马自骋 +4 位作者 田梦婷 徐晨月 熊琦捷 程芬 孙茜 《科学技术与工程》 北大核心 2017年第21期212-216,共5页
研究蜀本草多糖对植物DNA损伤的修复作用,以蜀本草为原料,通过热水提法提取蜀本草多糖。经过浓缩、脱色、脱蛋白获得蜀本草多糖粗品。用不同浓度重金属溶液处理生长中的蚕豆幼苗,72 h后通过单细胞凝胶电泳检测蚕豆幼苗DNA损伤情况;采用... 研究蜀本草多糖对植物DNA损伤的修复作用,以蜀本草为原料,通过热水提法提取蜀本草多糖。经过浓缩、脱色、脱蛋白获得蜀本草多糖粗品。用不同浓度重金属溶液处理生长中的蚕豆幼苗,72 h后通过单细胞凝胶电泳检测蚕豆幼苗DNA损伤情况;采用不同浓度的蜀本草粗多糖溶液培养受损的蚕豆幼苗,检测其对蚕豆幼苗DNA损伤的修复作用。结果:20μmol CuSO_4对蚕豆幼苗叶片细胞诱导出了明显的DNA迁移。用蜀本草多糖溶液培养此浓度CuSO_4胁迫受损的蚕豆幼苗,其DNA受损情况得到一定改善,当蜀本草多糖浓度为200μmol时,彗星图像尾部明显缩短,修复效果明显。蜀本草多糖对植物DNA损伤修复存在一定的作用,但其作用的具体机制需要更进一步研究。 展开更多
关键词 蜀本草多糖 植物DNA损伤 单细胞凝胶电泳 DNA修复
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苯胺致小鼠肝细胞和淋巴细胞DNA损伤及其修复效应 预览 被引量:3
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作者 边高鹏 刘瑞祥 +1 位作者 史宝忠 焦海华 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期139-144,共6页
目的研究苯胺的遗传毒性及其修复动力学效应。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术,检测100 mg/kg苯胺单次灌胃3、8、16、24、32 h后,对KM小鼠肝细胞和淋巴细胞DNA损伤及时效关系。结果 SCGE实验结果显示肝细胞从8 h开始尾长和尾矩逐渐... 目的研究苯胺的遗传毒性及其修复动力学效应。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术,检测100 mg/kg苯胺单次灌胃3、8、16、24、32 h后,对KM小鼠肝细胞和淋巴细胞DNA损伤及时效关系。结果 SCGE实验结果显示肝细胞从8 h开始尾长和尾矩逐渐增大,至16 h DNA损伤程度达到最大,相比对照组差异有显著性(P〈0.01),随着时间的延长,DNA损伤程度逐渐减轻,在32 h DNA损伤已恢复正常,与对照组相比差异无显著性(P〉0.05);而淋巴细胞则在16 h开始尾长和尾矩逐渐增大,24 h时达到最大,32 h时DNA损伤逐渐恢复。结论苯胺对肝细胞和淋巴细胞具有潜在的遗传毒性;2个DNA损伤指标的变化存在明显的时间效应关系,说明这两种细胞具有有效DNA修复机制。 展开更多
关键词 苯胺 单细胞凝胶电泳 DNA修复
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单细胞凝胶电泳技术检测丙烯酰胺亚急性中毒大鼠的单细胞DNA损伤 预览 被引量:1
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作者 杨淑芸 李国良 +2 位作者 付正英 张引国 张金波 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第12期1071-1075,共5页
目的研究大鼠丙烯酰胺(acrylamide,ACR)亚急性中毒对脑组织(小脑、海马和纹状体)及精子和血液淋巴细胞DNA的损伤作用。方法雄性SD大鼠20只随机分为ACR组和对照组,ACR组大鼠每只每天腹腔注射ACR 50 mg/kg(浓度5mg/ml,容量1 ml/100 g... 目的研究大鼠丙烯酰胺(acrylamide,ACR)亚急性中毒对脑组织(小脑、海马和纹状体)及精子和血液淋巴细胞DNA的损伤作用。方法雄性SD大鼠20只随机分为ACR组和对照组,ACR组大鼠每只每天腹腔注射ACR 50 mg/kg(浓度5mg/ml,容量1 ml/100 g),连续9 d,对照组给予等量(1 ml/100 g)生理盐水。每天称重,于染毒第0天、3天、6天和9天测量大鼠甩尾反射时、后肢撑力及步态评分,于染毒第9天水合氯醛麻醉处死大鼠,制备小脑、海马和纹状体单细胞悬液及大鼠淋巴细胞和精子悬液,用单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)技术检测单细胞/精子悬液中DNA损伤(彗星尾长、尾部DNA百分含量及Olive尾距)。结果与对照组相比,ACR组大鼠体重于染毒第3天、6天和9天均明显下降(P〈0.001),甩尾反射时于染毒第6天和9天均明显缩短(P〈0.001),后肢撑力指数于染毒第6天和9天均明显增宽(P〈0.001),步态分值在染毒第3天、6天和9天均高于对照组(P〈0.001)。SCGE表明,染毒第9天小脑、海马、纹状体细胞及精子和淋巴细胞悬液的彗星尾长、尾部DNA百分含量及Olive尾距均显著增加。结论大鼠ACR亚急性中毒可致小脑、海马和纹状体单细胞及大鼠淋巴细胞和精子DNA损伤。 展开更多
关键词 丙烯酰胺 急性中毒 单细胞凝胶电泳 DNA损伤 大鼠
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单细胞凝胶电泳应用研究进展 预览 被引量:3
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作者 蔡继翔 刘烨 +1 位作者 梁明才 杨林 《生物信息学》 2016年第2期95-99,共5页
单细胞凝胶电泳技术是被广泛使用的检测DNA损伤的技术,其具有灵敏度高、简便、经济、快速等各种优点。在近30年来,该技术广泛被应用于遗传毒理、环境监测、医学诊断等研究及各类实验证实方面。近些年单细胞凝胶电泳与荧光原位杂交等... 单细胞凝胶电泳技术是被广泛使用的检测DNA损伤的技术,其具有灵敏度高、简便、经济、快速等各种优点。在近30年来,该技术广泛被应用于遗传毒理、环境监测、医学诊断等研究及各类实验证实方面。近些年单细胞凝胶电泳与荧光原位杂交等其他技术相结合后更是拓宽了它的应用范围,本文主要介绍了单细胞凝胶电泳的原理及优劣,并重点阐明了其在遗传毒理学、细胞凋亡、环境监测、群体生物学、临床诊断与治疗,生物信息学领域上的应用,并讨论了它的发展前景。 展开更多
关键词 单细胞凝胶电泳 优势 应用 发展
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小鼠卵巢玻璃化冻融过程中FSH的DNA保护作用 预览 被引量:1
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作者 于佳 马会明 +6 位作者 张红 孙苗 王燕蓉 裴秀英 杨延周 蒲静 张宁 《宁夏医科大学学报》 2016年第9期994-997,1015+1101
目的探讨卵泡刺激素(FSH)干预下的小鼠卵巢玻璃化冻融对卵母细胞形态以及DNA损伤的影响,为临床玻璃化冷冻实施FSH干预的应用提供科学依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、非干预玻璃化冻存对照组(VTG)及0.3IU... 目的探讨卵泡刺激素(FSH)干预下的小鼠卵巢玻璃化冻融对卵母细胞形态以及DNA损伤的影响,为临床玻璃化冷冻实施FSH干预的应用提供科学依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、非干预玻璃化冻存对照组(VTG)及0.3IU·m L-1FSH干预玻璃化冻存组(FSH-VG)。通过石蜡切片及HE染色法判断卵泡形态;采用单细胞凝胶电泳法检测分离的卵母细胞,Olive尾矩评价各组卵母细胞DNA的损伤情况;免疫组织化学法和Western blot法检测与DNA修复相关的PCNA蛋白表达情况。结果 FSH干预下的冻存卵巢组织内部的卵泡结构优于非干预组。Olive尾矩分析结果显示,与FCG相比,VTG差异有统计学意义(P<0.05),FSH-VG差异不明显。免疫组织化学和Western blot检测结果显示,FSH-VG的PCNA表达明显优于非干预组(P<0.05),与新鲜对照组相似。结论 FSH干预下的卵巢玻璃化冻融有利于卵母细胞DNA的保护与修复。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 单细胞凝胶电泳 卵母细胞 DNA损伤 卵泡刺激素
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苯亚急性染毒对大鼠造血系统的影响及其机制 预览
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作者 张越时 郑丹 +4 位作者 杨国珍 万秀方 龚骏杰 王永红 张亚莉 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第20期21-24,I0002共5页
目的探讨苯亚急性染毒对大鼠造血系统的影响及其机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、苯低剂量组、苯中剂量组和苯高剂量组,每组6只。苯低、中、高剂量组分别按照体质量给予200、400、800 mg/kg苯溶液灌胃,空白... 目的探讨苯亚急性染毒对大鼠造血系统的影响及其机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、苯低剂量组、苯中剂量组和苯高剂量组,每组6只。苯低、中、高剂量组分别按照体质量给予200、400、800 mg/kg苯溶液灌胃,空白对照组未经任何处理,溶剂对照组给予等量玉米油灌胃;均1次/d,连续处理28天。采用全自动血细胞分析仪检测血常规,处死大鼠后计算肝脏、脾脏系数,观察股骨病理改变及骨髓、外周血细胞形态改变;采用单细胞凝胶电泳法检测骨髓及外周血细胞DNA损伤情况,记录尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)。结果苯低、中、高剂量组白细胞均低于空白对照组和溶剂对照组,苯高剂量组红细胞均低于其余各组,苯中、高剂量组血红蛋白均低于其余各组(P均〈0.05);各组间血小板比较差异均无统计学意义(P均〉0.05)。各组肝脏、脾脏系数比较差异均无统计学意义(P均〉0.05)。空白对照组、溶剂对照组股骨病理改变及骨髓、外周血细胞形态改变基本一致;苯低、中、高剂量组股骨病理显示造血组织面积减小,骨髓、外周血细胞有较多中毒颗粒、空泡,随着苯染毒剂量的增加,上述改变越明显。苯低、中、高剂量组骨髓及外周血细胞TM和OTM依次升高,且均高于空白对照组、溶剂对照组(P均〈0.01)。结论苯亚急性染毒对大鼠骨髓具有毒性损伤作用,且呈浓度依赖性,可能与其导致外周血、骨髓细胞发生DNA损伤有关。 展开更多
关键词 亚急性染毒 骨髓细胞 DNA损伤 单细胞凝胶电泳 大鼠
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柚皮苷体外抗肿瘤活性及其机制研究 预览 被引量:5
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作者 杨慧慧 王秀珍 《广东药学院学报》 CAS 2016年第6期757-761,共5页
目的研究柚皮苷的体外抗肿瘤活性。方法采用MTT法测定柚皮苷对5种不同肿瘤细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测柚皮苷对细胞凋亡、细胞活性氧水平及细胞线粒体膜电位水平的变化。采用单细胞凝胶电泳(SCGE)实验检测柚皮苷对细胞DN... 目的研究柚皮苷的体外抗肿瘤活性。方法采用MTT法测定柚皮苷对5种不同肿瘤细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测柚皮苷对细胞凋亡、细胞活性氧水平及细胞线粒体膜电位水平的变化。采用单细胞凝胶电泳(SCGE)实验检测柚皮苷对细胞DNA的损伤。结果 MTT实验得出柚皮苷对不同的肿瘤细胞产生不同的增殖抑制现象,并且对肿瘤细胞的抑制作用呈浓度依赖性。其对PC-12细胞作用24 h后,流式细胞术检测得到柚皮苷能有效诱导PC-12细胞的凋亡,并且细胞内活性氧水平升高,线粒体膜电位下降。SCGE实验发现柚皮苷使细胞DNA断裂,形成拖尾。结论柚皮苷通过活性氧调控的线粒体途径诱导肿瘤细胞PC-12的凋亡。 展开更多
关键词 柚皮苷 流式细胞 单细胞凝胶电泳 细胞凋亡
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乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的毒性测定 预览 被引量:1
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作者 夏晓华 董慧 +2 位作者 李会娜 夏晓培 常重杰 《贵州农业科学》 CAS 2016年第1期113-116,共4页
为探明除草剂乙氧氟草醚(Oxyfluorfen)对水生生物的毒性,以大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)为受试对象,进行乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的急性毒性、生理毒性和DNA损伤试验。结果表明:随着染毒浓度增加和时间的延长,大鳞副泥鳅的... 为探明除草剂乙氧氟草醚(Oxyfluorfen)对水生生物的毒性,以大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)为受试对象,进行乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的急性毒性、生理毒性和DNA损伤试验。结果表明:随着染毒浓度增加和时间的延长,大鳞副泥鳅的死亡率升高,安全浓度为8.40mg/L,根据中国《化学农药环境安全评价试验准则》,乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅为低毒。乙氧氟草醚低浓度(8.00 mg/L,10.50mg/L,13.00mg/L)作用下,大鳞副泥鳅肝脏谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)、谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性明显升高;高浓度(15.50mg/L)作用下酶活性在染毒2d、4d时呈上升趋势,但在6d时急速下降。15.50mg/L组与空白对照组相比,大鳞副泥鳅肝细胞的彗尾DNA百分含量、彗星尾长和Olive尾矩明显增加,肝细胞受到明显损伤。 展开更多
关键词 乙氧氟草醚 大鳞副泥鳅 谷丙转氨酶 谷草转氨酶 单细胞凝胶电泳
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续断水提液对小鼠急性毒性和遗传毒性的影响 被引量:5
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作者 刘星 李啸红 +4 位作者 陈阳 罗琼 葛晨 王超 黎善铭 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期160-165,共6页
目的: 探讨续断水提液对小鼠的急性毒性和遗传毒性. 方法: 采用最大耐受剂量法评价续断水提液对小鼠的急性毒性,观察小鼠体重及心脏、脾脏、肝脏、肾脏指数的变化;采用微核实验和单细胞凝胶电泳实验评价其遗传毒性,将40只小鼠随机分... 目的: 探讨续断水提液对小鼠的急性毒性和遗传毒性. 方法: 采用最大耐受剂量法评价续断水提液对小鼠的急性毒性,观察小鼠体重及心脏、脾脏、肝脏、肾脏指数的变化;采用微核实验和单细胞凝胶电泳实验评价其遗传毒性,将40只小鼠随机分成空白组(ig 10 mL ·kg^-1生理盐水),环磷酰胺组(第4天开始注射0.1 g ·kg^-1环磷酰胺),续断水提液高、中、低剂量组(ig 32,16,8 g ·kg^-1续断水提液).各组小鼠给药5 d后处死并解剖,取骨髓细胞检测嗜多染红细胞的微核率;取胸腺、肝脏及脾脏细胞检测续断水提液对小鼠DNA的损伤. 结论: 续断水提液经口给药小鼠的最大给药量为80 g ·kg^-1,该剂量对小鼠体重及心脏、脾脏、肝脏、肾脏指数均无显著影响.中、低剂量组小鼠嗜多染红细胞的微核率与空白组比较无显著性差异;但续断高剂量组微核率明显高于空白组(P〈0.05).高、中、低剂量组胸腺、脾脏、肝脏细胞尾部DNA百分率,尾矩略高于空白组,但均无显著性差异. 结论: 续断水提液对小鼠最大给药剂量为80 g·kg^-1,属无毒级;中和低剂量续断水煎液对小鼠无遗传毒性作用,高剂量续断水提液可诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率升高,存在潜在的遗传毒性. 展开更多
关键词 续断 急性毒性 遗传毒性 微核 单细胞凝胶电泳
羰基镍急性中毒对大鼠骨髓细胞的DNA损伤 预览
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作者 赵亚学 李宇 +7 位作者 马国煜 刘静 王秋英 张小培 宣小强 闫铭锋 吴喜江 程宁 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期230-233,共4页
通过动物实验观察不同剂量羰基镍对大鼠骨髓细胞DNA损伤程度。采用SD大鼠,以135 mg·m^-3和250 mg·m^-3羰基镍为染毒组,250 mg·m^-3氯气为阳性对照组,静态方式染毒30 min。未染毒组为正常对照组,大鼠染毒后1、2、3和7 d... 通过动物实验观察不同剂量羰基镍对大鼠骨髓细胞DNA损伤程度。采用SD大鼠,以135 mg·m^-3和250 mg·m^-3羰基镍为染毒组,250 mg·m^-3氯气为阳性对照组,静态方式染毒30 min。未染毒组为正常对照组,大鼠染毒后1、2、3和7 d分别采集样本。采用单细胞凝胶电泳检测每组大鼠骨髓细胞DNA的损伤程度。彗星尾长和Olive尾矩2个指标的分析结果表明,大鼠骨髓细胞DNA损伤程度随着羰基镍染毒剂量的增加而增加,在4个时间点各剂量组间均有显著差异(P〈0.05)且随时间的变化有一定的规律,损伤程度在3 d时达到最大,而后缓慢下降。羰基镍急性中毒对大鼠骨髓细胞DNA有一定的损伤,且存在剂量-效应关系,各剂量组损伤程度有一定的时间效应规律。 展开更多
关键词 羰基镍 SD大鼠 DNA损伤 单细胞凝胶电泳 骨髓细胞
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纳米氧化硅对RAW264.7细胞的DNA损伤作用 预览
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作者 杨红 吴秋云 +2 位作者 劳灿山 李明月 李文超 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2016年第4期249-254,共6页
目的:研究纳米氧化硅(SiO2)对小鼠RAW264.7细胞的DNA损伤作用,探讨其可能的毒作用机制。方法:分别采用浓度为31.25、125、500μg/m L的两种纳米SiO2(平均粒径分别为20、60 nm)和500μg/m L的微米SiO2粒子悬液对RAW264.7细胞染毒24... 目的:研究纳米氧化硅(SiO2)对小鼠RAW264.7细胞的DNA损伤作用,探讨其可能的毒作用机制。方法:分别采用浓度为31.25、125、500μg/m L的两种纳米SiO2(平均粒径分别为20、60 nm)和500μg/m L的微米SiO2粒子悬液对RAW264.7细胞染毒24 h,彗星试验检测细胞DNA单链断裂情况,CASP软件分析彗星图像,观察指标为彗星率(r(彗星))、尾长(TL)、尾部DNA百分率(r(尾部DNA))和OT尾矩(OTM);分别用硝酸还原酶法、TBA法、Fenton法、黄嘌呤氧化酸法、钼酸法、考马斯亮兰法测定各组染毒细胞匀浆上清液中细胞氧化应激指标丙二醛(MDA)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2)、过氧化氢(H2 O2)、一氧化氮(NO)和蛋白含量。结果:与阴性对照组比较,500μg/m L微米SiO2染毒组和125、500μg/m L的两种纳米SiO2染毒RAW264.7细胞时,r(彗星)、TL、r(尾部DNA)、OTM均升高(P〈0.01);且500μg/m L微米SiO2组的r(彗星)、r(尾部DNA)、OTM高于同浓度两个纳米SiO2组(P〈0.01)。两种纳米SiO2和微米SiO2染毒细胞内脂质过氧化产物MDA、OH、O2、NO及H2O2的水平均高于阴性对照组(P〈0.01)。结论:两种纳米SiO2与微米SiO2均可引起RAW264.7细胞DNA断裂和氧化损伤,氧化应激自由基的大量产生在DNA损伤过程中可能起到一定的作用。 展开更多
关键词 纳米SIO2 RAW264.7细胞 自由基 遗传毒性 单细胞凝胶电泳
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Genotoxic Effects in Mice Exposed to Radon Emissions in Indoor Conditions. Comparison between in utero and Neonatal Exposures 预览
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作者 Cristiano Foschi Manuel Luis Orta +2 位作者 Licia Radicchi Germana Szpunar Mauro Cristaldi 《生命科学:英文版(ISSN1934-7391)》 2016年第2期66-76,共11页
关键词 成年小鼠 遗传毒性 氡污染 排放量 新生儿 室内条件 单细胞凝胶电泳 细胞微核
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635 nm波长激光降低干细胞电离辐射敏感性作用的研究 被引量:2
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作者 王宏 刘强 +4 位作者 陈洪丽 吴小光 王磊 李迎新 沙洪 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2015年第1期25-28,I0005共5页
目的 研究低能激光照射作为提高干细胞抗电离辐射的作用效果.方法 取脐带间充质干细胞(UC-MSCs),分为对照组和实验组(单纯激光照射,单纯γ射线照射,激光照射后γ射线照射组);经635 nm(10 mW/cm2,12 J/cm2)每天2次的剂量照射处理3d... 目的 研究低能激光照射作为提高干细胞抗电离辐射的作用效果.方法 取脐带间充质干细胞(UC-MSCs),分为对照组和实验组(单纯激光照射,单纯γ射线照射,激光照射后γ射线照射组);经635 nm(10 mW/cm2,12 J/cm2)每天2次的剂量照射处理3d,于第3天γ射线照射处理(剂量2Gy)后进行碱性单细胞凝胶电泳检测DNA损伤程度、测定γ射线照射前后细胞内活性和脂质氧化物丙二醛的水平,检测氧化应激相关酶(超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT))的活性.结果 低能激光联合射线组DNA损伤程度较单纯γ射线照射组明显降低,氧化应激酶活性有一定提高,活性氧水平得到抑制,2组丙二醛产量差异无统计学意义(P>0.05).结论 635 nm激光照射处理的UC-MSCs抗电离辐射水平有一定的提高,可降低移植细胞的辐射敏感性. 展开更多
关键词 低能激光 细胞 电离辐射 单细胞凝胶电泳
有机磷农药辛硫磷对家蚕卵巢培养细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测 被引量:2
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作者 赵焱坤 王赵群 +2 位作者 杨仁奎 万永继 冯丽春 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期468-471,共4页
采用单细胞凝胶电泳技术检测农药对家蚕卵巢培养细胞(Bm N)DNA的损伤作用,从细胞毒理学方面确证农药对家蚕的残留毒性,并探讨家蚕培养细胞作为农药危害及残留检测生物标志物的可行性。以有机磷杀虫剂辛硫磷以及Bm N细胞供试,用0.05 m... 采用单细胞凝胶电泳技术检测农药对家蚕卵巢培养细胞(Bm N)DNA的损伤作用,从细胞毒理学方面确证农药对家蚕的残留毒性,并探讨家蚕培养细胞作为农药危害及残留检测生物标志物的可行性。以有机磷杀虫剂辛硫磷以及Bm N细胞供试,用0.05 mg/L辛硫磷药液(约为家蚕5龄第1天幼虫24 h LC50的1/100)处理正常Bm N细胞,24 h后观察到处理组Bm N细胞出现明显的凋亡现象,通过单细胞凝胶电泳检测到Bm N细胞的DNA条带有95.43%出现拖尾现象。试验结果表明Bm N细胞对辛硫磷非常敏感,低浓度辛硫磷即会对细胞DNA造成严重损伤,该项技术可用于农药对家蚕的危害及残留毒性鉴定,同时也说明Bm N细胞可以作为农药的细胞毒性研究材料。 展开更多
关键词 有机磷农药 细胞毒理学 家蚕卵巢培养细胞 DNA损伤 单细胞凝胶电泳
铅和镉对小鼠骨髓细胞DNA损伤的检测 预览 被引量:1
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作者 杨国强 黎杰强 +3 位作者 何风华 高峰 陈世贞 朱碧岩 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2015年第7期44-49,共6页
用灌胃法对小鼠进行染毒,设置染毒组剂量为1/32LD50、1/16LD50、1/8LD50、1/4LD50和1/2LD50,即Pb(NO3)2(3.75、7.5、15.0、30.0、60.0 mg/L)和Cd Cl2(5.84、11.69、23.38、46.75、93.50 mg/L),同时设蒸馏水为阴性对照。采用单细... 用灌胃法对小鼠进行染毒,设置染毒组剂量为1/32LD50、1/16LD50、1/8LD50、1/4LD50和1/2LD50,即Pb(NO3)2(3.75、7.5、15.0、30.0、60.0 mg/L)和Cd Cl2(5.84、11.69、23.38、46.75、93.50 mg/L),同时设蒸馏水为阴性对照。采用单细胞凝胶电泳法进行检测,试验结果用CASP彗星图像分析软件分析。结果表明:铅和镉均能引起小鼠骨髓细胞彗星细胞率的升高,染毒组的彗星细胞损伤各项指标均与对照存在显著差异,并呈现出一定的剂量-遗传毒理效应关系,表明重金属铅和镉可对小鼠骨髓细胞DNA造成一定程度的损伤,且镉的遗传毒性大于铅。 展开更多
关键词 重金属 单细胞凝胶电泳 骨髓细胞 DNA损伤
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