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冬凌草毛状根体系的建立 预览
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作者 张利军 宋小锋 朱畇昊 《农村经济与科技》 2019年第4期19-20,共2页
用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)ATCC15834、ACCC10060、C58C1菌株对冬凌草无菌幼苗的叶片、茎段进行侵染,而后通过共培养的方法诱导其产生冬凌草毛状根,从而建立有效的冬凌草毛状根培养体系。通过PCR进一步检测T-DNA是否成功... 用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)ATCC15834、ACCC10060、C58C1菌株对冬凌草无菌幼苗的叶片、茎段进行侵染,而后通过共培养的方法诱导其产生冬凌草毛状根,从而建立有效的冬凌草毛状根培养体系。通过PCR进一步检测T-DNA是否成功导入冬凌草毛状根中。通过用发根农杆菌ATCC15834、ACCC10060、C58C1菌株对冬凌草外植体进行侵染,能够成功诱导产生冬凌草毛状根,从而对冬凌草毛状根培养体系进行建立,在一定程度上为冬凌草毛状根的大规模培养奠定基础。 展开更多
关键词 冬凌草 毛状根 发根杆菌 PCR
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发根农杆菌菌株和花生品种对发根诱导率的影响 被引量:1
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作者 任艳 李双铃 +4 位作者 尹亮 崔潇 李磊 石延茂 袁美 《山东农业科学》 2018年第3期103-106,共4页
试验以花育20、花育45、鲁花11无菌花生子叶为材料,采用3×3双因子设计,研究3株发根农杆菌菌株和花生品种对花生发根诱导率的影响。结果表明:发根农杆菌和花生品种均显著影响发根诱导率。花育45的发根诱导率最高,为93.7%,其适宜菌... 试验以花育20、花育45、鲁花11无菌花生子叶为材料,采用3×3双因子设计,研究3株发根农杆菌菌株和花生品种对花生发根诱导率的影响。结果表明:发根农杆菌和花生品种均显著影响发根诱导率。花育45的发根诱导率最高,为93.7%,其适宜菌株为A4;花育20的发根诱导率为89.2%,适宜菌株为ATCC15834;鲁花11的发根诱导率为73.4%,适宜菌株为GIM1.141。 展开更多
关键词 发根杆菌 发根 诱导率 花生品种
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超声辅助提高长春花毛状根诱导效率及转基因毛状根构建 预览
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作者 贾姗姗 王燕燕 于放 《植物研究》 CSCD 北大核心 2018年第4期604-610,共7页
在不同菌种、不同诱导部位、不同培养基以及不同的诱导方法对长春花进行毛状根诱导基础上,尝试改变侵染用试剂以及超声辅助的新方法,通过比较毛状根诱导效率以及毛状根的形态差异,筛选最优的长春花毛状根诱导方法与条件,并建立转基... 在不同菌种、不同诱导部位、不同培养基以及不同的诱导方法对长春花进行毛状根诱导基础上,尝试改变侵染用试剂以及超声辅助的新方法,通过比较毛状根诱导效率以及毛状根的形态差异,筛选最优的长春花毛状根诱导方法与条件,并建立转基因毛状根体系。最终以C58C1为侵染用菌株,以无菌苗的叶片为外植体材料,1/2MS培养基为诱导培养基,预培养时间为2天,使用共培养缓冲液侵染,5s超声辅助为诱导最优的诱导方法,成功获得乳白色、较为浓密的、无向地性并且多分枝的毛状根,并应用此条件成功构建转GUS基因的毛状根,为以后代谢调控途径相关基因的功能研究以及长春花中次生代谢产物合成的调控奠定基础。 展开更多
关键词 长春花 毛状根诱导 发根杆菌 超声辅助 GUS基因
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发根农杆菌Ri质粒介导的植物基因工程及应用 预览
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作者 吴萼 张瑞 +7 位作者 张超 朱瑶 李晨曦 张娜娜 谌容 葛晓萍 谢恬 殷晓浦 《杭州师范大学学报:自然科学版》 CAS 2018年第5期520-525,554共7页
发根农杆菌Ri质粒作为一种天然存在的植物遗传转化系统,已在植株再生,品种改良,增强植物抗逆性以及生产次生代谢产物等方面得到广泛应用,并取得了巨大的经济和社会效益.全文概述了发根农杆菌Ri质粒介导的植物基因工程原理、方法、影响... 发根农杆菌Ri质粒作为一种天然存在的植物遗传转化系统,已在植株再生,品种改良,增强植物抗逆性以及生产次生代谢产物等方面得到广泛应用,并取得了巨大的经济和社会效益.全文概述了发根农杆菌Ri质粒介导的植物基因工程原理、方法、影响因素、应用前景及存在的问题. 展开更多
关键词 发根杆菌 RI质粒 毛状根 基因工程
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基于响应面法对丹参毛状根诱导条件的优化研究
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作者 蔡媛 钟灿 +2 位作者 谢芳一 沈冰冰 张水寒 《湖南中医杂志》 2018年第11期144-147,共4页
目的:应用响应面法优化丹参毛状根诱导条件,提高其诱导率。方法:采用发根农杆菌ATCC15834侵染丹参无菌苗获得毛状根,在单因素实验的基础上,利用Box-Benhnkcn设计和响应面分析方法对丹参毛状根诱导过程的培养条件(叶片大小、农杆菌活力... 目的:应用响应面法优化丹参毛状根诱导条件,提高其诱导率。方法:采用发根农杆菌ATCC15834侵染丹参无菌苗获得毛状根,在单因素实验的基础上,利用Box-Benhnkcn设计和响应面分析方法对丹参毛状根诱导过程的培养条件(叶片大小、农杆菌活力、侵染时间、共培养时间、抗生素浓度)进行分析,优选最佳培养条件。结果:丹参毛状根在无外源激素的MS培养基上自主生长,表现出典型的发根特征。毛状根的最优培养条件为:叶片大小0.8cm2,农杆菌OD600为1.0,共培养时间2d,农杆菌侵染时间5min,头孢噻吩浓度400ng/L。在此条件下,丹参毛状根的诱导率为69.8%。结论:该研究优化了丹参毛状根的培养条件,为丹参的进一步开发利用提供了依据。 展开更多
关键词 丹参 发根杆菌 毛状根 响应面法 实验研究
人参发状根的相关研究进展
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作者 陆明海 张美萍 +5 位作者 李俐 王康宇 赵明珠 林彦萍 孙春玉 王义 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第11期3675-3680,共6页
人参发状根具有生长速度快、激素自养、皂苷含量高等特点,是大规模生产人参皂苷的有效途径。本综述在发根农杆菌转化机理、诱导体系建立、发状根鉴定研究的基础上对Ri质粒作用机理、影响诱导率的因素、人参发状根的形态及分子鉴定进行... 人参发状根具有生长速度快、激素自养、皂苷含量高等特点,是大规模生产人参皂苷的有效途径。本综述在发根农杆菌转化机理、诱导体系建立、发状根鉴定研究的基础上对Ri质粒作用机理、影响诱导率的因素、人参发状根的形态及分子鉴定进行了重点分析,并对今后急需研究的几个方向进行了展望,以期为人参发状根的有效开发和合理利用提供参考。 展开更多
关键词 人参 发状根 发根杆菌 RI质粒
两种影响因子对葫芦巴发根转化率的影响
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作者 李晓华 李长福 +2 位作者 黎佳 刘梦迪 章焰生 《植物科学学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期735-740,共6页
葫芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)是薯蓣皂素源植物之一,本文以来源于中国山西省的一年生草本植物葫芦巴为实验材料,研究发根农杆菌菌液浓度与超声波辅助处理两个因素对葫芦巴发根转化率的影响。结果显示,随着菌液浓度升高,发根... 葫芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)是薯蓣皂素源植物之一,本文以来源于中国山西省的一年生草本植物葫芦巴为实验材料,研究发根农杆菌菌液浓度与超声波辅助处理两个因素对葫芦巴发根转化率的影响。结果显示,随着菌液浓度升高,发根数和发根转化率均逐渐升高,中浓度与低浓度菌液相比,发根数量和转化率分别升高了2.58和3.90倍;利用高浓度菌液侵染获得的发根数量和发根转化率最高,分别是低浓度菌液的7.33和4.32倍。在超声波处理实验中,超声(工作频率40 KHz,超声功率180 W)处理30 s与经未超声处理的对照组相比,发根数量及转化率略有下降;当超声处理60 s时,发根转化率明显上升,为对照组的2.48倍。葫芦巴发根体系的建立可为生产薯蓣皂素以及解析薯蓣皂素合成路径提供一个关键的技术平台。 展开更多
关键词 葫芦巴 发根 发根杆菌
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美洲商陆毛状根诱导及其离体培养的影响因素
8
作者 施和平 朱远锋 +3 位作者 曾宝强 周卓辉 余震傲 黄胜琴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期272-283,共12页
为了探讨利用美洲商陆毛状根生产其药用成分的可能性,研究了美洲商陆毛状根诱导及其离体培养的影响因素。结果表明,美洲商陆叶片外植体被发根农杆菌ATCC 15834感染约18 d后,从其叶片外植体形态学下端叶脉切口处产生毛状根,其中以预培养1... 为了探讨利用美洲商陆毛状根生产其药用成分的可能性,研究了美洲商陆毛状根诱导及其离体培养的影响因素。结果表明,美洲商陆叶片外植体被发根农杆菌ATCC 15834感染约18 d后,从其叶片外植体形态学下端叶脉切口处产生毛状根,其中以预培养1 d,农杆菌感染20 min,共培养4 d时的毛状根诱导率最高,达到70%。PCR扩增和硅胶薄层层析结果显示,发根农杆菌Ri质粒的rol C基因以及冠瘿碱合成酶基因已在美洲商陆毛状根基因组中整合和表达。所获得的美洲商陆毛状根系都能在无外源激素的MS固体培养基上快速自主生长;其中以毛状根根系2的生长速度最快、分生侧根能力最强和根表面的根毛密度最高;毛状根根表面呈紫红色或呈白色。在供试的MS、1/2MS、B5和6,7-V液体培养基中,以无外源激素的MS培养基最适合美洲商陆毛状根根系生长。与无外源激素的MS培养基相比,6,7-V培养基更有利于毛状根中商陆皂苷甲的合成与积累。本文所建立的美洲商陆毛状根诱导及其离体培养的适宜条件为今后利用其毛状根株系的规模培养来生产其药用有效成分商陆皂苷甲奠定了实验和技术基础。 展开更多
关键词 美洲商陆 发根杆菌 毛状根 商陆皂苷甲
北玄参毛状根诱导及其植株再生 被引量:1
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作者 任如意 薛巨坤 +1 位作者 国会艳 魏继承 《植物学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期783-787,共5页
利用发根农杆菌A4和R1601感染北玄参(Scrophularia buergeriana)叶片外植体,诱导产生毛状根,产生的毛状根可在无激素的液体和固体MS培养基上快速生长。rol B基因的PCR检测表明,Ri质粒中的T-DNA片段整合到了北玄参毛状根的基因组中。... 利用发根农杆菌A4和R1601感染北玄参(Scrophularia buergeriana)叶片外植体,诱导产生毛状根,产生的毛状根可在无激素的液体和固体MS培养基上快速生长。rol B基因的PCR检测表明,Ri质粒中的T-DNA片段整合到了北玄参毛状根的基因组中。毛状根在附加0.5 mg·L–1 6-BA及0.1 mg·L–1 NAA的MS固体培养基上形成绿色愈伤组织,之后形成不定芽,并获得再生植株;毛状根在附加0.5 mg·L–1 6-BA及0.02 mg·L–1 NAA的MS固体培养基上培养约15–20天可直接形成不定芽,且不定芽的诱导率达85%。 展开更多
关键词 北玄参 发根杆菌 毛状根 植株再生
发根农杆菌诱导蚕豆毛状根的研究 预览
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作者 陈晨 《广东化工》 CAS 2017年第11期34-35,共2页
本文以发根农杆菌在蚕豆的外植体进行诱导产生毛状根,利用GUS基因特性,采用GUS染色来检测诱导蚕豆产生毛状根的情况。通过对种子萌发时间、外植体、侵染时间等条件进行比较,初步建立蚕豆毛状根发根适宜条件,为利用毛状进行分析测试研究... 本文以发根农杆菌在蚕豆的外植体进行诱导产生毛状根,利用GUS基因特性,采用GUS染色来检测诱导蚕豆产生毛状根的情况。通过对种子萌发时间、外植体、侵染时间等条件进行比较,初步建立蚕豆毛状根发根适宜条件,为利用毛状进行分析测试研究提供了材料。 展开更多
关键词 发根杆菌 蚕豆 毛状根 GUS染色
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亳菊EDT1抗旱基因遗传转化体系建立与耐旱性初步评价
11
作者 胡同华 陈达伟 +1 位作者 王钰 刘芳源 《中药材》 北大核心 2017年第1期1-6,共6页
目的:建立亳菊EDT1抗旱基因遗传转化体系,并初步评价其耐旱性。方法:以亳菊茎段外植体为受体材料,抗草甘膦除草剂为筛选基因,通过发根农杆菌介导法转入EDT1抗旱基因。通过农杆菌介导,对影响亳菊遗传转化效率的四个因素进行讨论:侵染... 目的:建立亳菊EDT1抗旱基因遗传转化体系,并初步评价其耐旱性。方法:以亳菊茎段外植体为受体材料,抗草甘膦除草剂为筛选基因,通过发根农杆菌介导法转入EDT1抗旱基因。通过农杆菌介导,对影响亳菊遗传转化效率的四个因素进行讨论:侵染时间、农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮浓度和共培养时间,以及草甘膦最佳筛选浓度的研究。结果:建立了农杆菌介导的亳菊高效遗传转化体系,菌液浓度(A600)为0.6~0.8,乙酰丁香酮浓度150μmol/L,侵染时间25 min,共培养3 d,除菌培养后,可得到15 d最大转化效率95.6%。草甘膦对亳菊组培苗致死率的研究表明其最佳筛选浓度为100 mg/L。通过聚合酶链式反应(PCR)检测,初步得到5株转基因植株。结论:在干旱胁迫下,叶片中抗氧化酶活性和MDA含量测定表明,转基因植株具有较高的耐旱性。 展开更多
关键词 亳菊 发根杆菌 抗旱基因 再生植株 抗氧化酶
胡杨组织培养叶片及插穗毛状根发生 被引量:2
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作者 王大鹏 唐嘉泽 +2 位作者 邵明成 张文彪 王华芳 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期210-217,共8页
胡杨(Populus euphratica)是唯一分布在干旱沙漠地区的高大乔木,根蘖能力强,但自然条件下插穗难以生根,扦插繁殖困难。该文研究发根农杆菌菌株ATCC11325诱导胡杨发根,菌液浓度为OD_(600)=0.4,添加100 mg·L~(–1)乙酰丁香酮,... 胡杨(Populus euphratica)是唯一分布在干旱沙漠地区的高大乔木,根蘖能力强,但自然条件下插穗难以生根,扦插繁殖困难。该文研究发根农杆菌菌株ATCC11325诱导胡杨发根,菌液浓度为OD_(600)=0.4,添加100 mg·L~(–1)乙酰丁香酮,叶片切段划伤预培养后侵染10分钟,培养20天,在叶片创伤部位诱导发生无向性的健壮毛状根;浸染肉质根插穗,须根发生和植株成活率从20%提高到60%,且地上部分分枝多,生长茂盛。该发根农杆菌菌株显著促进胡杨插穗生根成活。 展开更多
关键词 发根杆菌 毛状根 ROLB基因 生根 胡杨
发根农杆菌诱导毛酸浆毛状根条件的优化 被引量:1
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作者 任如意 李思璇 +2 位作者 金秋 梁仕茹 王珊珊 《北方园艺》 北大核心 2017年第8期115-119,共5页
以4种发根农杆菌A4、C58C1、R1601、ATCC15834为诱导菌株侵染毛酸浆叶片、茎段,研究了发根农杆菌种类、外植体类型、不同预培养时间、不同侵染时间、不同共培养时间和乙酰丁香酮对毛酸浆毛状根诱导率的影响,并用PCR检测rolB基因。结果... 以4种发根农杆菌A4、C58C1、R1601、ATCC15834为诱导菌株侵染毛酸浆叶片、茎段,研究了发根农杆菌种类、外植体类型、不同预培养时间、不同侵染时间、不同共培养时间和乙酰丁香酮对毛酸浆毛状根诱导率的影响,并用PCR检测rolB基因。结果表明:4种发根农杆菌均能诱导毛酸浆外植体产生毛状根,ATCC15834的诱导率相对较高,叶片优于茎段;最佳侵染时间为6~8min;预培养和共培养时间均为2~3d时诱导率较高;乙酰丁香酮(AS)浓度为100μmol·L~(-1)有利于促进毛状根的产生,经PCR检测证明,rolB基因已整合到毛酸浆毛状根基因组中。 展开更多
关键词 毛酸浆 发根杆菌 毛状根 诱导率
甜叶菊毛状根培养系统的建立及绿原酸类成分的诱导
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作者 邹凯 刘泽波 +4 位作者 许小向 上官新晨 尹忠平 陈继光 蒋艳 《现代食品科技》 北大核心 2017年第6期118-124,79共8页
本文利用发根农杆菌A4诱导甜叶菊毛状根再生,建立毛状根生产绿原酸类物质的培养体系,并研究茉莉酸甲酯和水杨酸对毛状根中绿原酸类物质积累的影响。结果表明,经发根农杆菌A4侵染的甜叶菊叶片外植体在共培养14 d后诱导出了毛状根;PCR检... 本文利用发根农杆菌A4诱导甜叶菊毛状根再生,建立毛状根生产绿原酸类物质的培养体系,并研究茉莉酸甲酯和水杨酸对毛状根中绿原酸类物质积累的影响。结果表明,经发根农杆菌A4侵染的甜叶菊叶片外植体在共培养14 d后诱导出了毛状根;PCR检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒中rol B和rol C基因均已整合到毛状根中;毛状根在MS液体培养基中,培养到第14 d时分别加入不同浓度(50、100、200μmol/L)的水杨酸和茉莉酸甲酯进行诱导,处理第1、3、6 d后均抑制了毛状根的生长,但茉莉酸甲酯促进了毛状根中绿原酸类物质的积累,而水杨酸却抑制了毛状根中绿原酸类物质的积累。由此说明,发根农杆菌A4侵染甜叶菊可诱导出毛状根,该毛状根可用于绿原酸类物质的生产,茉莉酸甲酯可提高绿原酸类物质的含量。 展开更多
关键词 发根杆菌 毛状根 茉莉酸甲酯 水杨酸 绿原酸类
毛状根研究进展及其在博落回资源创新中的应用前景 预览
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作者 夏丽琼 黄鹏 +1 位作者 唐昭山 曾建国 《中国现代中药》 CAS 2017年第10期1495-1499,共5页
发根农杆菌作为一种天然菌株可用于诱导多种植物产生毛状根性状。毛状根组织能够稳定高效地生产次生代谢产物,该研究领域正受到越来越多的关注。本文对发根农杆菌及毛状根的特性、遗传机制和应用进行了综述。同时结合本课题组前期研究基... 发根农杆菌作为一种天然菌株可用于诱导多种植物产生毛状根性状。毛状根组织能够稳定高效地生产次生代谢产物,该研究领域正受到越来越多的关注。本文对发根农杆菌及毛状根的特性、遗传机制和应用进行了综述。同时结合本课题组前期研究基础,对毛状根在博落回资源创新与新药源途径开发上的应用前景进行展望。 展开更多
关键词 毛状根 次生代谢产物 发根杆菌 博落回 资源创新
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不同培养条件对黄瓜发状根生长影响研究
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作者 田雲 蒋景龙 +1 位作者 李丽 黎远东 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2017年第8期3231-3236,共6页
本研究以PCR分子鉴定转化成功的黄瓜发状根为试材,采用悬浮培养的方法分析不同培养基类型、不同培养基组分和不同激素对黄瓜发状根生长的影响。分析显示:MS培养基中黄瓜发状根生长速度最快,其次为1/2 MS培养基,N6培养基中发状根生长的... 本研究以PCR分子鉴定转化成功的黄瓜发状根为试材,采用悬浮培养的方法分析不同培养基类型、不同培养基组分和不同激素对黄瓜发状根生长的影响。分析显示:MS培养基中黄瓜发状根生长速度最快,其次为1/2 MS培养基,N6培养基中发状根生长的速度最慢;以MS为基础培养基,30 g/L的蔗糖为氮源,C_(NH4+):C_(NO3)-=1:2为碳源和204 mg/L KH_2PO_4为磷源时,培养基中黄瓜发状根生长量最大;以MS为基础培养基,分别添加激素IAA(Indole acetic acid)、GA3(Gibberellin)、NAA(Naphthalene acetic acid)、KT(Kinetin),其中1 mg/L IAA作用下的黄瓜发状根的增长量最大(51.0 mg),1 mg/L的NAA(Naphthalene acetic acid)处理下黄瓜发状根的增长量最少(37.8 mg/L)。以上为发状根进一步扩大培养和后期的工业化大规模生产提供一定理论依据。 展开更多
关键词 黄瓜 发根杆菌 培养基 激素
党参毛状根诱导条件研究 预览
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作者 薛雯心 刘立业 +4 位作者 袁金月 刘琪 魏铁锁 郑彦杰 李秀霞 《安徽农业科学》 CAS 2017年第10期121-123,146共4页
[目的]研究党参毛状根的诱导条件。[方法]利用发根农杆菌A4、C58C1和A1476进行毛状根诱导,探讨发根农杆菌种类、外植体类型、菌液浓度、侵染时间和共培养天数等因素对党参毛状根诱导的影响。[结果]3种发根农杆菌中A4诱导率最高;茎段的... [目的]研究党参毛状根的诱导条件。[方法]利用发根农杆菌A4、C58C1和A1476进行毛状根诱导,探讨发根农杆菌种类、外植体类型、菌液浓度、侵染时间和共培养天数等因素对党参毛状根诱导的影响。[结果]3种发根农杆菌中A4诱导率最高;茎段的诱导率最高;发根农杆菌浓度在OD600为0.4时诱导效果较好;较佳侵染时间为5 min;共培养时间为2 d时诱导率较高;头孢噻肟钠浓度为300 mg/L时除菌效果较好。[结论]该试验为大量生产毛状根以及毛状根的后续研究提供试验基础。 展开更多
关键词 党参 毛状根 诱导条件 发根杆菌
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转基因植物发根农杆菌研究的进展及应用 预览
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作者 熊笙屹 厍润祥 +3 位作者 张璐 孟令晨 于月华 倪志勇 《农业与技术》 2017年第16期72-74,共3页
农杆菌转化法作为植物基因工程使用最广泛的转化方法之一,分为根癌农杆菌Ti质粒和根瘤农杆菌Ri质粒2种类型。发根农杆菌(Agmbacteriu mrhiz-ogenes)的Ri质粒能够诱导植物产生毛状根。本文阐述了发根农杆菌的特性及Ri质粒的分类、结... 农杆菌转化法作为植物基因工程使用最广泛的转化方法之一,分为根癌农杆菌Ti质粒和根瘤农杆菌Ri质粒2种类型。发根农杆菌(Agmbacteriu mrhiz-ogenes)的Ri质粒能够诱导植物产生毛状根。本文阐述了发根农杆菌的特性及Ri质粒的分类、结构特征和转化特点,介绍了发根农杆菌在实际生产中的应用,分析了影响发根农杆菌成功转化的因素,综述了发根农杆菌在理论研究、植物基因工程、植物品种改良、植物次生代谢产物生产和植物栽培生根等方面的应用,并指出未来领域研究的着重点。 展开更多
关键词 发根杆菌 RI质粒 研究进展 应用
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除虫菊发状根的诱导及培养条件优化
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作者 公冶祥旭 朱惠君 +2 位作者 李群 李琰 张兴 《植物科学学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期427-434,共8页
以除虫菊(Pyrethrum cinerariifolium Trey.)无菌苗为外植体,研究除虫菊发状根的诱导、培养条件优化,并对发状根中的除虫菊素进行检测和生物活性测定。结果显示,乙酰丁香酮能促进除虫菊下胚轴和子叶发状根的诱导,当乙酰丁香酮浓度为15... 以除虫菊(Pyrethrum cinerariifolium Trey.)无菌苗为外植体,研究除虫菊发状根的诱导、培养条件优化,并对发状根中的除虫菊素进行检测和生物活性测定。结果显示,乙酰丁香酮能促进除虫菊下胚轴和子叶发状根的诱导,当乙酰丁香酮浓度为150μmol/L时除虫菊下胚轴和子叶的诱导率为对照的2.29倍和2.66倍,预培养6 d时,下胚轴发状根诱导率为对照的2.25倍,发根农杆菌A4的诱导率均高于ATCC15834,愈伤组织较适合发状根的诱导,愈伤组织侵染后适合在无激素的MS培养基上进行发状根诱导,250 m L三角瓶中添加50 m L MS培养基较适合发状根的生长。对除虫菊发状根进行PCR检测发现,发根农杆菌含有的Ri T-DNA的rol B基因已整合进入发状根基因组中。通过GCMS检测发现,愈伤组织中除虫菊素的6种成分均未检测到,而发状根中检测到瓜菊素Ⅰ、茉酮菊素Ⅰ和茉酮菊素Ⅱ3种成分,发状根对粘虫的拒食作用明显优于愈伤组织。本研究为通过组织培养方式生产除虫菊素奠定了基础。 展开更多
关键词 除虫菊 发根杆菌 发状根 除虫菊素 培养条件优化
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甜叶菊毛状根的诱导培养及茉莉酸甲酯对其绿原酸类物质积累的影响 预览 被引量:1
20
作者 邹凯 刘泽波 +3 位作者 陈继光 上官新晨 许小向 尹忠平 《食品科学》 CSCD 北大核心 2017年第12期89-95,共7页
以发根农杆菌ACCC10060诱导甜叶菊毛状根,建立毛状根培养生产绿原酸类物质体系,研究茉莉酸甲酯对绿原酸类化合物积累的影响。经发根农杆菌ACCC10060侵染的甜叶菊叶片外植体,共培养14d后产生毛状根。聚合酶链式反应检测结果表明,发... 以发根农杆菌ACCC10060诱导甜叶菊毛状根,建立毛状根培养生产绿原酸类物质体系,研究茉莉酸甲酯对绿原酸类化合物积累的影响。经发根农杆菌ACCC10060侵染的甜叶菊叶片外植体,共培养14d后产生毛状根。聚合酶链式反应检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒的rolB和rolC基因已成功整合到甜叶菊毛状根基因组中。MS液体培养基较B5、WPM更利于甜叶菊毛状根生长及绿原酸类物质的积累,培养35d后,干质量增加约30倍,绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸最高含量分别为3.47、11.47、3.04mg/g。毛状根在MS液体培养基中培养至第3周时分别添加15、45、100μmol/L的茉莉酸甲酯进行诱导,处理后第1、2、4、8天收获,毛状根的生长量和绿原酸类物质含量均有提高,其中以45μmol/L茉莉酸甲酯的促进作用最为显著,3种绿原酸类物质的总产量是对照组的2.68倍(P<0.01)。以上结果表明,甜叶菊毛状根培养可用于绿原酸类物质的生产,经茉莉酸甲酯处理可显著提高绿原酸类物质的产量。 展开更多
关键词 甜叶菊 发根杆菌 毛状根 茉莉酸甲酯 绿原酸类化合物
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