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白细胞介素-1受体相关激酶M抑制p22phox调控脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞呼吸爆发
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作者 翟学花 蒋政宇 +1 位作者 薄禄龙 邓小明 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2019年第5期420-425,共6页
目的研究白细胞介素-1受体相关激酶M(interleukin-1 receptor-associated kinase M, IRAK-M)是否调控p22phox介导脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导的巨噬细胞呼吸爆发。方法分离、培养小鼠腹腔巨噬细胞,细胞贴壁后分为内毒素耐受(e... 目的研究白细胞介素-1受体相关激酶M(interleukin-1 receptor-associated kinase M, IRAK-M)是否调控p22phox介导脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导的巨噬细胞呼吸爆发。方法分离、培养小鼠腹腔巨噬细胞,细胞贴壁后分为内毒素耐受(endotoxin tolerance, ET)组和对照组(NC组)。 ET组预先10μg/L LPS刺激2h后,予100g/L LPS再刺激,NC组不作预先处理,直接100μg/L LPS刺激,3h后收集上清液,ELISA法检测TNF-α和IL-6水平,试剂盒检测过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子(O2-)水平;细胞裂解后提取蛋白,Western blot法检测IRAK-M和p22phox蛋白表达。采用IRAK-M 小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)干扰IRAK-M,分组为:LPS刺激组(NC-control组)、干扰IRAK-M+LPS刺激组(NC-si-IRAK-M组)、内毒素耐受组(ET-control组)和干扰IRAK-M+内毒素耐受组(ET-si-IRAK-M组),PCR检测干扰效率并再次检测IRAK-M和p22phox的蛋白表达。IRAK-M干扰成功后,分组为:二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)+内毒素耐受组(control-placebo组)、夹竹桃麻素(apocynin)+内毒素耐受组(control-apocynin组)、DMSO+干扰IRAK-M+内毒素耐受组(si-IRAK-M-placebo组)和干扰IRAK-M+apocynin+内毒素耐受组(si-IRAK-M-apocynin组),采用apocynin抑制p22phox,再次取上清液检测TNF-α、IL-6以及H2O2、O2-水平。结果与NC组比较,ET组TNF-α、IL-6水平和H2O2、O2-水平均降低,p22phox表达水平降低,而IRAK-M表达水平升高(P<0.05);干扰IRAK-M后,与ET-control组比较,ET-si-IRAK-M组蛋白水平明显降低,p22phox的蛋白水平明显升高(P<0.05);干扰IRAK-M并抑制p22phox后,与si-IRAK-M-placebo组比较,si-IRAK-M-apocynin组TNF-α、IL-6和H2O2、O2-的水平明显降低(P<0.05)。结论 IRAK-M通过抑制p22phox对内毒素诱导的小鼠巨噬细胞呼吸爆发产生负向调控作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-1受体相关激酶M P22PHOX 免疫抑制 巨噬细胞 呼吸爆发 氧化应激 脓毒症
培养温度对LPS诱导的离体大黄鱼头肾巨噬细胞抗氧化能力和炎性反应的影响 预览
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作者 李庆飞 崔坤 +1 位作者 艾庆辉 麦康森 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期810-819,共10页
为研究温度对离体大黄鱼头肾巨噬细胞抗氧化能力和炎性反应的影响,从大黄鱼头肾组织中分离巨噬细胞结合贴壁筛选法得到细胞单层后,在不同温度(16、22和28℃)下培养备用。使用25μg/mL的脂多糖(LPS)孵育细胞2 h后,测定不同培养温度下离... 为研究温度对离体大黄鱼头肾巨噬细胞抗氧化能力和炎性反应的影响,从大黄鱼头肾组织中分离巨噬细胞结合贴壁筛选法得到细胞单层后,在不同温度(16、22和28℃)下培养备用。使用25μg/mL的脂多糖(LPS)孵育细胞2 h后,测定不同培养温度下离体细胞活力、呼吸爆发活性、抗氧化酶(SOD和CAT)活性以及相关基因(SOD、CAT、Hsp70和IL-1β)表达的情况。结果显示,体外培养细胞36 h后,16℃和22℃条件下培养的细胞活力显著高于28℃处理组;LPS处理组大黄鱼头肾巨噬细胞呼吸爆发活性显著升高,但SOD和CAT酶活性较对照组显著下降。高温(28℃)显著提高了细胞CAT酶的活性和基因表达水平,但SOD酶活性和基因表达变化差异不显著;LPS显著促进了大黄鱼头肾巨噬细胞IL-1β基因的表达,并且随培养温度升高细胞IL-1β基因的表达水平显著降低;但大黄鱼头肾巨噬细胞Nrf2和Hsp70的基因表达量随温度升高而显著增加,且LPS处理组细胞基因表达水平显著高于对照组。研究表明,温度显著影响了离体大黄鱼头肾巨噬细胞的抗氧化能力和LPS所诱导的促炎基因的表达,Nrf2和Hsp70在这一过程中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 大黄鱼 巨噬细胞 细胞培养 脂多糖 抗氧化能力 呼吸爆发 热休克蛋白
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海藻多糖锌配合物的组成及其对THP-1细胞耗氧的影响
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作者 先宏 张莉 +3 位作者 宋曙辉 步卫东 丛建波 计峰 《营养学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期261-265,271共6页
目的通过海藻多糖(SP)与锌离子(II)络合成一种新型的海藻多糖锌(SPZC),在比较SP和SPZC二者理化性质、结构组成基础上,对锌离子的多糖螯合物在单核细胞THP-1细胞耗氧的影响做了初步的研究。方法:用苯酚法法测定SP和SPZC的总多糖... 目的通过海藻多糖(SP)与锌离子(II)络合成一种新型的海藻多糖锌(SPZC),在比较SP和SPZC二者理化性质、结构组成基础上,对锌离子的多糖螯合物在单核细胞THP-1细胞耗氧的影响做了初步的研究。方法:用苯酚法法测定SP和SPZC的总多糖含量、Hodgson法测定二者的硫酸根含量和Folin酚试剂法等化学法测定二者主要作用成分,气相色谱(GC)分析了二者所含的主要单糖及摩尔比,红外光谱(IR)分析多糖二者的主要成分基团等。用ESR自旋捕捉法检测了二者对细胞的呼吸爆发作用(respiratory burst,RB)下耗氧量的影响,以及利用活性氧(reactive oxygen species,ROS)的荧光探针(2,7-二氢二氯荧光素,DCFH-DA)分析了PMA激活THP-1细胞后ROS产生的变化。结果 SP络合上锌离子成为SPZC后也具有很好的稳定性,二者之间的主要成分含量变化明显,多糖含量、蛋白质含量、硫酸根离子下降明显;而SPZC中Zn(II)的含量为15%。通过GC分析,表明锌离子的配位反应,使得SP的单糖组成也有改变;IR图谱可以发现SP结合上锌离子后,图谱上的特征性峰发生位移、钝化或消失,而代之有SPZC核的类型峰。RB结果,提示在细胞受到激发的短暂时间内,SPZC比SP更能维持细胞的RB在一个更高水平;而同样细胞激发后的较长时间内,ROS产生的荧光染色,相较SP对ROS产生有一定的淬灭作用,而SPZC则能触发ROS产生更多。结论 SP同锌离子(II)络合产生的SPZC,增加了新的有机锌来源;同时,SPZC对比SP,其抗氧化性能有所减弱。 展开更多
关键词 海藻多糖 海藻多糖锌 THP-1 呼吸爆发 活性氧
高毒力肺炎克雷伯菌诱导人外周血中性粒细胞凋亡延迟及其影响核因子-κB的潜在机制 预览
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作者 杜芳玲 王莲慧 +3 位作者 魏丹丹 万腊根 张伟 刘洋 《中国感染与化疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期389-393,共5页
目的了解高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)和普通肺炎克雷伯菌(non-hvKP)对人外周血中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响与差异,探讨hvKP影响核因子-κB(NF-κB)诱导中性粒细胞凋亡的潜在作用机制。方法离体检测hvKP和non-hvKP感染患者外周血... 目的了解高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)和普通肺炎克雷伯菌(non-hvKP)对人外周血中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响与差异,探讨hvKP影响核因子-κB(NF-κB)诱导中性粒细胞凋亡的潜在作用机制。方法离体检测hvKP和non-hvKP感染患者外周血中性粒细胞的凋亡情况。取健康成人外周血分离中性粒细胞,设0.9%NaCl溶液对照组、hvKP组和non-hvKP组,各组分别刺激中性粒细胞0、3、6、9h后,采用FITC-AnnexinV/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用流式细胞术检测细胞的呼吸爆发功能,采用Westernblot检测感染后中性粒细胞NF-κB的表达水平。结果hvKP组各个时间点的中性粒细胞凋亡率显著低于non-hvKP组(P<0.01)。体外研究显示,non-hvKP组各个时间点的中性粒细胞凋亡率显著高于hvKP组和对照组(P<0.01);hvKP组中性粒细胞的呼吸爆发率显著低于non-hvKP组(P<0.01)。Westernblot检测发现随着感染时间的增加,hvKP感染人中性粒细胞的p65蛋白表达量显著高于non-hvKP(P<0.01)。结论hvKP可通过上调p65蛋白表达从而抑制NF-κB信号途径,导致中性粒细胞凋亡延迟,但却可降低中性粒细胞的呼吸爆发能力,其或可在hvKP感染致病中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 高毒力 凋亡延迟 呼吸爆发
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草鱼核因子E2相关因子2基因克隆分析及其对呼吸爆发的调控作用 预览
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作者 冯燕 秦真东 +6 位作者 代云佳 张玉蕾 刘小玲 周洋 兰江风 赵丽娟 林蠡 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期161-177,共17页
呼吸爆发过程可以产生大量的活性氧,核因子E2相关因子2(Nrf2)在此过程中起着重要作用。实验克隆和分析了草鱼的Nrf2基因,随后制备了Nrf2蛋白的多克隆抗体,研究了其和呼吸爆发的关系。草鱼Nrf2基因cDNA长度为1994 bp,开放阅读框为1782 ... 呼吸爆发过程可以产生大量的活性氧,核因子E2相关因子2(Nrf2)在此过程中起着重要作用。实验克隆和分析了草鱼的Nrf2基因,随后制备了Nrf2蛋白的多克隆抗体,研究了其和呼吸爆发的关系。草鱼Nrf2基因cDNA长度为1994 bp,开放阅读框为1782 bp,编码593个氨基酸(aa)。氨基酸序列比对发现,草鱼Nrf2基因与鲤的同源性最高,为87%;草鱼Nrf2基因含有6个进化过程中保守的Neh[Nrf2-Epoxy chloropropane(ECH)homology]区。实时定量PCR(q RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测结果表明,Nrf2基因在检测的草鱼8个组织中均有表达。Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚(t BHQ)处理草鱼肾细胞(CIK)后,CIK细胞总抗氧化能力显著上调,产生的活性氧下调,Nrf2及其下游的HO-1和GST基因的m RNA表达上调。Western blot和免疫荧光(IF)检测结果表明,t BHQ处理CIK后,Nrf2的蛋白表达也上调,并伴随着入细胞核现象。研究表明,保守的草鱼Nrf2基因在机体中广泛表达,能通过上调自身及其下游抗氧化基因的表达下调细胞活性氧的产生,从而参与调控呼吸爆发过程。 展开更多
关键词 草鱼 核因子E2相关因子2(Nrf2) 基因克隆 多克隆抗体制备 呼吸爆发
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高原低氧环境对小鼠巨噬细胞杀伤活性及分泌IL-6、TNF-α的影响 预览 被引量:1
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作者 蒲小燕 胡方杰 +5 位作者 李积东 刘燕 乔丽娟 许玉珍 刘珺 永胜 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第3期344-348,共5页
目的:通过建立高原低氧环境的小鼠模型,研究低氧条件对机体固有免疫细胞巨噬细胞(Mψ)吞噬杀伤功能的影响。方法:分别将小鼠暴露于海拔4200m、2200m和400m的不同环境30 d后:①流式细胞仪检测小鼠腹腔Mψ对FITC标记的金黄色葡萄球菌的吞... 目的:通过建立高原低氧环境的小鼠模型,研究低氧条件对机体固有免疫细胞巨噬细胞(Mψ)吞噬杀伤功能的影响。方法:分别将小鼠暴露于海拔4200m、2200m和400m的不同环境30 d后:①流式细胞仪检测小鼠腹腔Mψ对FITC标记的金黄色葡萄球菌的吞噬能力;②双乙酰基二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针法检测Mψ的呼吸爆发功能;③ELISA法检测小鼠Mψ培养上清中NO稳定氧化代谢产物亚硝酸盐(NO2-)的水平;④ELISA法检测小鼠Mψ培养上清中的IL-6、TNF-α的释放水平。结果:低氧暴露30 d后,海拔4 200 m和2 200 m的低氧状态下,小鼠腹腔Mψ的吞噬能力、呼吸爆发水平、NO的释放水平明显低于平原对照组(P<0.05),培养细胞上清中的IL-6、TNF-α的浓度明显升高(P<0.05)。结论:低氧暴露30 d可降低Mψ的吞噬能力和氧依赖杀伤功能,升高IL-6、TNF-α的分泌水平,进而影响机体Mψ的固有免疫应答能力。 展开更多
关键词 低氧 巨噬细胞 吞噬能力 呼吸爆发 一氧化氮
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ERCP治疗时机的选择对AOSC患者呼吸爆发及炎性因子水平的影响 预览 被引量:1
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作者 邹奇 陈杰 +1 位作者 李春生 凤茂华 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第24期3374-3376,共3页
目的探讨内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)治疗时机的选择对急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC)患者呼吸爆发及炎性因子水平的影响。方法回顾性分析了2013年1月至2016年6月该院治疗的AOSC患者98例,按照其行ERCP术时机将其分为A组和B组。其中A组患... 目的探讨内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)治疗时机的选择对急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC)患者呼吸爆发及炎性因子水平的影响。方法回顾性分析了2013年1月至2016年6月该院治疗的AOSC患者98例,按照其行ERCP术时机将其分为A组和B组。其中A组患者于入院后6h内行ERCP,共42例;B组患者于入院后6~24h内行ERCP,共56例。对比两组患者治疗前后血清炎性因子水平,比较两组患者治疗前后外周血中中性粒细胞凋亡率和呼吸爆发水平,记录两组患者出现并发症情况和死亡人数。结果治疗后,A组患者的肿瘤坏死因子(TNFα)和白细胞介素(IL)6)水平低于B组患者,而IL10水平高于B组患者,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后A组患者中性粒细胞凋亡率高于B组患者,差异有统计学意义(P<0.05);A组患者呼吸爆发水平低于B组患者,差异有统计学意义(P<0.05);A组患者出现并发症人数和死亡人数均低于B组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对AOSC患者行ERCP治疗应尽快尽早,早期ERCP治疗安全有效,能缓解患者机体炎性反应,提高患者生存率,值得临床推广。 展开更多
关键词 内镜逆行胰胆管造影术 急性梗阻行化脓性胆管炎 呼吸爆发 炎性因子
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谷氨酰胺在体内和体外试验中对鲤免疫力影响的研究 预览
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作者 雷五长 李锦 +3 位作者 孙颖 曲木 李静辉 程镇燕 《天津农学院学报》 CAS 2016年第3期35-38,42共5页
以鲤的中肾白细胞作为研究对象,研究了谷氨酰胺对鲤免疫细胞免疫力的影响。在培养基中分别添加浓度为0、0.5、1.0、1.5、2.0mmol/L的谷氨酰胺,在细胞培养2、6、12、24h后,分别测定白细胞的呼吸爆发活力。结果发现,添加谷氨酰... 以鲤的中肾白细胞作为研究对象,研究了谷氨酰胺对鲤免疫细胞免疫力的影响。在培养基中分别添加浓度为0、0.5、1.0、1.5、2.0mmol/L的谷氨酰胺,在细胞培养2、6、12、24h后,分别测定白细胞的呼吸爆发活力。结果发现,添加谷氨酰胺后,鲤肾脏白细胞的呼吸爆发活力得到了明显提高(P〈0.05),且随着培养时间的延长,呼吸爆发活力呈现先上升后下降的趋势,最高值出现在培养12h后的2.0mmol/L谷氨酰胺组。在鲤肾脏白细胞培养12、24h后,测定鲤。肾脏白细胞的吞噬活力,发现白细胞吞噬活力变化趋势和呼吸爆发活力相似,其最高值出现在1.5mmol/L谷氨酰胺细胞培养24h后的添加组,鲤。肾脏白细胞对迟钝爱德华氏菌杀菌率变化趋势与吞噬活力相符,添加谷氨酰胺后的各组杀菌率最高值发生在1.5mmol/L谷氨酰胺组,与1.0、2.0mmol/L谷氨酰胺组之间差异均不显著(P〉O.05),但均显著高于对照组及0.5mmol/L谷氨酰胺组(P〈0.05)。将平均体重37g的鲤鱼分为5组,每组30条,体内注射0、50、100、150、200mg/kg鱼体重的谷氨酰胺溶液,商业饲料投喂2周后分离中肾获取鲤。肾脏白细胞,发现白细胞的呼吸爆发活力和增殖活力随谷氨酰胺浓度的增加而呈现先显著上升后趋于平稳的趋势(P〈0.05),而吞噬活力则一直显著升高(P〈0.05),最高值均出现在200mg/kg谷氨酰胺注射组。综合结果表明,谷氨酰胺是鲤有效的免疫增强剂。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 吞噬 呼吸爆发 增殖
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慢性肉芽肿病的实验室诊断 被引量:1
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作者 周钦华 刘丹如 +8 位作者 王莹 应文静 俞晔珩 王静漪 惠晓莹 孙金峤 侯佳 王文婕 王晓川 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期337-343,共7页
目的总结功能、蛋白、基因诊断技术在慢性肉芽肿病(CGD)精准诊断中的价值。方法回顾性分析2008年1月至2015年12月复旦大学附属儿科医院基因诊断明确的138例CGD患儿临床及实验室检查资料,总结流式细胞仪-二氢若丹明分析(DHR分析)检... 目的总结功能、蛋白、基因诊断技术在慢性肉芽肿病(CGD)精准诊断中的价值。方法回顾性分析2008年1月至2015年12月复旦大学附属儿科医院基因诊断明确的138例CGD患儿临床及实验室检查资料,总结流式细胞仪-二氢若丹明分析(DHR分析)检测的呼吸爆发功能刺激指数(SI),检测gp91蛋白表达情况,5个致病基因(CYBB、CYBA、NCF1、NCF2、NCF4)基因检测结果,并分析刺激指数、gp91蛋白、基因检测结果之间的相互关系。结果138例基因诊断明确的CGD患儿中CYBB基因突变123例(89.1%)、CYBA基因突变4例(2.9%)、NCF1基因突变5例(3.6%)、NCF2基因突变6例(4.4%)、NCF4基因突变0例。SI范围为:0.8~60.5,第25、50、75百分位分别为1.7、2.7、4.7。112例CGD患儿检测gp91表达结果,其中100例不表达gp91,2例部分表达gp91,10例正常表达gp91。发现的未曾报道的突变位点包括:CYBB基因的c.76—77delTT、c.343—344delCA、c.481A〉T、c.1152G〉C、c.1613G〉A,NCF2基因的c.137T〉G。CYBB突变CGD患儿中,gp91正常表达患儿SI高于gp91不表达者(14.6比2.5,t=44.21,P=0.004),NCF1基因突变者SI高于CYBB基因突变者(17.7比2.5,t=60.8,P=0.003)。结论流式细胞仪-DHR分析、gp91蛋白的流式检测方法为CGD的重要诊断方法,可指导进一步的基因检测。不同的基因突变及突变类型可影响呼吸爆发功能及gp91的蛋白水平。使用从功能、蛋白到基因水平的诊断技术可以精准有效诊断CGD。 展开更多
关键词 肉芽肿病 慢性 呼吸爆发 膜糖蛋白类 流式细胞术 DNA突变分析
PAEs对四角蛤蜊毒性和免疫的影响 预览
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作者 苏洪波 王兴强 +2 位作者 曹梅 阎斌伦 张庆起 《淮海工学院学报》 CAS 2015年第4期83-86,共4页
研究PAEs对四角蛤蜊毒性和免疫的影响.96h的急性毒理试验表明,在助溶剂Tween 20的安全质量浓度范围内,随着DMP,DEP和DBP水平的升高,蛤蜊存活率呈下降趋势,而安全质量浓度随PAEs碳链的增加而下降;DMP,DEP和DBP分别处理蛤蜊96h,短期内蛤... 研究PAEs对四角蛤蜊毒性和免疫的影响.96h的急性毒理试验表明,在助溶剂Tween 20的安全质量浓度范围内,随着DMP,DEP和DBP水平的升高,蛤蜊存活率呈下降趋势,而安全质量浓度随PAEs碳链的增加而下降;DMP,DEP和DBP分别处理蛤蜊96h,短期内蛤蜊免疫力显著提高,30d的慢性毒理试验表明,长期使用PAEs可引起蛤蜊免疫力下降. 展开更多
关键词 四角蛤蜊 PAES 安全质量浓度 呼吸爆发
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喜炎平与头孢唑啉联合应用增强小鼠中性粒细胞的呼吸爆发但不影响其趋化功能 被引量:2
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作者 熊南燕 刘晓霞 +4 位作者 王雪玲 陈剑华 霍忠超 王夏炎 盖自宽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1097-1099,共3页
目的研究喜炎平与头孢唑啉联合应用对小鼠外周血中性粒细胞的趋化功能和呼吸爆发能力的影响。方法将10只正常小鼠作为空白组;将金黄色葡萄球菌感染后的40只小鼠分为模型组、喜炎平组、头孢唑啉组及喜炎平联合头孢唑啉组(联合处理组)... 目的研究喜炎平与头孢唑啉联合应用对小鼠外周血中性粒细胞的趋化功能和呼吸爆发能力的影响。方法将10只正常小鼠作为空白组;将金黄色葡萄球菌感染后的40只小鼠分为模型组、喜炎平组、头孢唑啉组及喜炎平联合头孢唑啉组(联合处理组)。空白组与模型组经腹腔给予生理盐水,其他组经腹腔依次给予喜炎平、头孢唑啉、喜炎平联合头孢唑啉。采用Transwell^TM小室法检测小鼠外周血中性粒细胞趋化功能;将小鼠外周血中性粒细胞与二氢罗丹明共同孵育,再用佛波酯刺激中性粒细胞,诱导其活化,产生活性氧,活性氧将胞质中的二氢罗丹明氧化为罗丹明,用流式细胞仪检测细胞的荧光强度,判定中性粒细胞呼吸爆发能力。结果经喜炎平、头孢唑啉和喜炎平联合头孢唑啉处理后,各组小鼠外周血中性粒细胞的趋化指数无显著性差异。空白组、喜炎平组、联合处理组小鼠外周血中性粒细胞的细胞活化率均明显高于模型组和头孢唑啉组;空白组和联合处理组细胞活化率无显著性差异,但明显高于喜炎平组;空白组、喜炎平组、联合处理组小鼠外周血中性粒细胞的刺激指数均明显高于模型组和头孢唑啉组,且3个处理之间无显著性差异;模型组和头孢唑啉组2个指标之间均无显著性差异。结论喜炎平与头孢唑啉联合应用可通过增强中性粒细胞的呼吸爆发能力,提高机体的抗菌功能,但对中性粒细胞的趋化作用无明显影响。 展开更多
关键词 喜炎平 头孢唑啉 中性粒细胞 趋化功能 呼吸爆发
右美托咪定对人中性粒细胞凋亡和呼吸爆发功能的影响 预览
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作者 吴新海 邓若熹 万帆 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第17期2883-2886,共4页
目的:观察右美托咪定(Dex)对离体培养的人中性粒细胞(PMN)凋亡率和呼吸爆发功能的影响。方法:取健康人外周静脉血,血浆-Percoll不连续密度梯度离心法分离出PMN,分为对照组,1ng/mLDex组,10ng/mLDex组和100ng/mLDex组,离体... 目的:观察右美托咪定(Dex)对离体培养的人中性粒细胞(PMN)凋亡率和呼吸爆发功能的影响。方法:取健康人外周静脉血,血浆-Percoll不连续密度梯度离心法分离出PMN,分为对照组,1ng/mLDex组,10ng/mLDex组和100ng/mLDex组,离体培养24h,取培养2h和24h的PMN悬液。检测caspase-3活性、PMN凋亡率和呼吸爆发功能。结果:与对照组比较3种不同浓度的Dex与PMN孵育2h。PMN的caspase-3活性、PMN凋亡率和呼吸爆发功能没有统计学差异;孵育24h.与对照组比较,1ng/mLDex组PMNcaspase-3活性、PMN凋亡率和呼吸爆发功能没有差异,而10ng/mLDex组和100ng/mLDex组PMNcaspase-3活性增强、凋亡率增加和呼吸爆发功能下降;与10ng/mLDe组比较.100ng/mLDex组PMNcaspase-3活性增强、凋亡率增加和呼吸爆发功能下降。结论:临床常用剂量的Dex(血药浓度〈1ng/mL)不影响PMN的凋亡率和呼吸爆发功能,不影响机体的抗感染能力;而大剂量的Dex与PMN孵育一定时间(〉24h)可促进PMN凋亡.降低其呼吸爆发功能。 展开更多
关键词 右美托咪定 中性粒细胞 凋亡 呼吸爆发
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南极细菌Pseudoalteromonassp.3—3—1—2产胞外多糖对黄盖鲽生长和免疫活性的影响 预览
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作者 李凯 郑风荣 +4 位作者 杜宗军 王波 张宁 齐鲁 林学政 《中国渔业质量与标准》 2015年第2期8-14,共7页
研究了在基础饲料中添加不同含量(0、0.5、1.0、1.5和2.0g/kg)南极细菌Pseudoalteromonassp.3—3—1—2产胞外多糖(EPS)对黄盖鲽(Pseudopleuronectesyokohamae)生长和免疫活性的影响。结果表明,当基础饲料中EPS添加量为1... 研究了在基础饲料中添加不同含量(0、0.5、1.0、1.5和2.0g/kg)南极细菌Pseudoalteromonassp.3—3—1—2产胞外多糖(EPS)对黄盖鲽(Pseudopleuronectesyokohamae)生长和免疫活性的影响。结果表明,当基础饲料中EPS添加量为1.5g/kg时,试验组黄盖鲽的体重和体长均高于对照组,呈显著性差异(P〈0.05)。添加量为1.0和1.5g/kg试验组的脾脏和后肠淋巴细胞呼吸爆发能力和对照组相比有明显提高,呈极显著性差异(P〈0.01);脾脏淋巴细胞增殖能力也有明显提高,呈显著性差异(P〈0.05)。和对照组相比,添加量为1.5g/kg试验组的脾脏蛋白含量明显提高,呈显著性差异(P〈0.05);脾脏和肝脏酸性磷酸酶(ACP)活力明显提高,呈显著性差异(P〈0.05)。添加量为1.5和2.0s/kg试验组的肝脏蛋白含量和总超氧化物歧化酶(T—SOD)活力明显提高,呈显著差异(P〈0.05)。攻毒实验表明,试验组黄盖鲽均获得了一定的免疫保护,且添加量为1.5∥kg试验组的免疫保护率最高(50.O%)。由此得出,在基础饲料中添加南极细菌Pseudoalteromonassp.3—3—1—2产EPS可促进黄盖鲽生长,提高特异性免疫活力和非特异性免疫活力,提高黄盖鲽抗病能力,且添加量以1.5g/kg效果最佳。 展开更多
关键词 黄盖鲽 胞外多糖 生长 呼吸爆发 淋巴细胞增殖 非特异性免疫
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肝硬化患者中性粒细胞功能损伤的研究进展 预览 被引量:2
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作者 柳启传 刘璐璐 +1 位作者 任艺 林世德 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第30期4838-4843,共6页
肝硬化是由各种致病因素引起的慢性肝病发展的终末阶段,对细菌、病毒、真菌等感染的免疫反应性减弱,肝硬化患者发生感染、败血症和死亡的风险增加,研究表明与免疫功能障碍有关.而中性粒细胞是机体固有免疫重要组成部分,为机体抵抗各种... 肝硬化是由各种致病因素引起的慢性肝病发展的终末阶段,对细菌、病毒、真菌等感染的免疫反应性减弱,肝硬化患者发生感染、败血症和死亡的风险增加,研究表明与免疫功能障碍有关.而中性粒细胞是机体固有免疫重要组成部分,为机体抵抗各种侵害因子的第一道防线,并参与特异性免疫反应,中性粒细胞功能受损是肝硬化患者免疫功能障碍重要环节和组成部分.本文就肝硬化患者中性粒细胞功能受损及机制作一综述. 展开更多
关键词 肝硬化 中性粒细胞 呼吸爆发 内毒素
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黄连生物碱对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞的影响 被引量:6
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作者 周霞 彭耀宗 +4 位作者 黄涛 李玲 牟绍霞 寇淑鸣 李学刚 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期4660-4666,共7页
该文主要研究4种黄连生物碱对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,初步探讨其调节机制。MTT法检测黄连生物碱对巨噬细胞活力的影响;采用中性红实验和NBT法分别测定生物碱对巨噬细胞吞噬和呼吸爆发活性的影响;通过实时荧光定量PCR检测黄连生物碱处... 该文主要研究4种黄连生物碱对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,初步探讨其调节机制。MTT法检测黄连生物碱对巨噬细胞活力的影响;采用中性红实验和NBT法分别测定生物碱对巨噬细胞吞噬和呼吸爆发活性的影响;通过实时荧光定量PCR检测黄连生物碱处理后巨噬细胞呼吸爆发相关基因的表达量;用荧光分光光度计检测生物碱对巨噬细胞膜蛋白构象的影响。结果显示,4种黄连生物碱对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能都有不同程度的提高,小檗碱效果最好;小檗碱、黄连碱和巴马汀对佛波酯(PMA)刺激的小鼠腹腔巨噬细胞呼吸爆发活性具有正向调节的作用,并且能够在一定程度上增加巨噬细胞中PKC,p40phox或p47phox mRNA的表达量,而表小檗碱对呼吸爆发没有显著性影响;黄连生物碱能够改变巨噬细胞膜蛋白的构象,其中小檗碱作用最强。结果表明黄连生物碱可能通过改变巨噬细胞膜蛋白构象从而激活巨噬细胞,增强其吞噬和呼吸爆发功能,而且,生物碱对巨噬细胞呼吸爆发的调节机制还可能与相关基因PKC,p40phox和p47phox mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 黄连 生物碱 巨噬细胞 吞噬 呼吸爆发
中性粒细胞性哮喘与稳定期COPD患者诱导痰中性粒细胞炎症程度比较的研究 被引量:4
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作者 高瞻 杨旭 +3 位作者 刘禹 刘湘 程晓明 王长征 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期408-412,共5页
目的比较中性粒细胞性哮喘(NA)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者诱导痰中性粒细胞的炎症程度。方法收集2014年3月至2014年8月到我院呼吸科门诊及研究所就诊的25例NA患者、30例COPD稳定期患者及11例健康正常人的病例资料。进行诱... 目的比较中性粒细胞性哮喘(NA)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者诱导痰中性粒细胞的炎症程度。方法收集2014年3月至2014年8月到我院呼吸科门诊及研究所就诊的25例NA患者、30例COPD稳定期患者及11例健康正常人的病例资料。进行诱导痰白细胞分类计数,ELISA检测诱导痰上清中髓过氧化物酶(MPO)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、IL-8、IL-17的水平,流式细胞术检测诱导痰中性粒细胞的呼吸爆发。结果 NA组与稳定期COPD组患者诱导痰细胞总数和中性粒细胞百分比均显著高于健康对照组(P〈0.05),2组间无统计学差异(P〉0.05);NA组和稳定期COPD组患者诱导痰上清MPO、TIMP-1、IL-8、IL-17水平均显著高于健康对照组(P〈0.05),稳定期COPD组IL-8、IL-17水平显著高于NA组(P〈0.05);NA组与稳定期COPD组患者间MPO、TIMP-1及呼吸爆发无统计学差异(P〉0.05);NA组和稳定期COPD组患者肺功能FEV1(%)和FEV1/FVC(%)之间呈正相关(r=0.66和0.75,P〈0.05),其余2组内FEV1(%)、FEV1/FVC(%)、MPO、TIMP-1、IL-8、IL-17及呼吸爆发这些指标间均无显著相关性(P〉0.05)。结论 NA组和稳定期COPD组患者诱导痰中性粒细胞明显活化,2组间的差异有待更多实验观察。 展开更多
关键词 中性粒细胞哮喘 COPD 蛋白酶 呼吸爆发 细胞因子
激活素A对小鼠中性粒细胞活性的调控作用 预览
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作者 齐妍 崔雪玲 +3 位作者 闫青 吴倩 柳忠辉 葛敬岩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期22-25,共4页
目的:通过检测中性粒细胞激活素受体表达以及细胞活性,阐述激活素A调控中性粒细胞的作用。方法:分离小鼠腹腔中性粒细胞;通过免疫荧光细胞化学染色及流式细胞术检测中性粒细胞激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)表达;激活素A刺激后,Western b... 目的:通过检测中性粒细胞激活素受体表达以及细胞活性,阐述激活素A调控中性粒细胞的作用。方法:分离小鼠腹腔中性粒细胞;通过免疫荧光细胞化学染色及流式细胞术检测中性粒细胞激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)表达;激活素A刺激后,Western blot检测中性粒细胞Smad3表达;检测呼吸爆发、NO分泌及吞噬能力的变化以确定中性粒细胞活性。结果:分离的小鼠腹腔中性粒细胞纯度大于90%;免疫荧光细胞化学染色显示中性粒细胞可以表达ActRⅡA,流式细胞术检测结果显示Gr-1与ActRⅡA双阳性细胞约41.1%;激活素A刺激后,中性粒细胞p-Smad3表达上调,ROS及O2-产生升高(P〈0.05),NO分泌增加(P〈0.01),流式细胞术检测结果显示激活素A还可以明显促进中性粒细胞对荧光微球的吞噬(P〈0.01)。结论:中性粒细胞可以表达激活素受体及其信号传导蛋白,激活素A对中性粒细胞活化及功能具有重要的调节作用。 展开更多
关键词 激活素A 激活素受体 中性粒细胞 呼吸爆发
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精氨酸对团头鲂幼鱼生长、血清游离精氨酸和赖氨酸、血液生化及免疫指标的影响 预览 被引量:15
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作者 廖英杰 刘波 +6 位作者 任鸣春 戈贤平 谢骏 崔红红 周群兰 张武肖 陈汝丽 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期549-559,共11页
选用初始体质量为(2.60±0.10)g的团头鲂(Megalobrama amblycephala)幼鱼540尾,随机分为6组,每组3个重复,每个重复30尾鱼,分别投喂精氨酸水平(实测值)为0.83%、1.30%、1.81%、2.35%、2.82%和3.36%(占饲料... 选用初始体质量为(2.60±0.10)g的团头鲂(Megalobrama amblycephala)幼鱼540尾,随机分为6组,每组3个重复,每个重复30尾鱼,分别投喂精氨酸水平(实测值)为0.83%、1.30%、1.81%、2.35%、2.82%和3.36%(占饲料的质量分数)的6组等氮等能半精制饲料,饲养期为9周,探讨精氨酸对团头鲂幼鱼生长、血清游离精氨酸和赖氨酸、血液生化及免疫指标的影响。实验结果表明,随着饲料中精氨酸水平的增加,团头鲂幼鱼增重率和饲料效率显著升高(P〈0.05),均在1.81%组达到最大;随着精氨酸水平的进一步增加,上述指标不再发生显著变化(P〉0.05);饲料中精氨酸水平对各组存活率无显著影响(P〉0.05)。与对照组(0.83%)相比,1.81%、2.82%和3.36%组团头鲂幼鱼血清中精氨酸含量显著提高(P〈0.05),3.36%组血清中赖氨酸含量却显著降低(P〈0.05)。与对照组相比,1.30%和1.81%组团头鲂幼鱼血清中谷草转氨酶活性显著降低(P〈0.05),1.81%、2.35%、2.82%和3.36%组血清中总蛋白和球蛋白的含量显著提高(P〈0.05)。3.36%组团头鲂幼鱼血清中尿素含量显著高于其他各组(P〈0.05),但饲料中精氨酸水平对各组血清中谷丙转氨酶活力、葡萄糖和白蛋白含量没有显著影响(P〉0.05)。随着饲料中精氨酸水平的增加,团头鲂幼鱼血液中白细胞、红细胞数量和血红蛋白含量都呈先上升后趋于平缓的趋势,其中1.81%组最高;饲料中精氨酸水平对血栓细胞数量无显著影响(P〉0.05)。与对照组相比,1.81%和2.35%组显著提高了血清中补体3的含量(P〈0.05),却对血清中补体4的含量无显著影响(P〉0.05)。添加精氨酸显著(P〈0.05)提高了血细胞呼吸爆发活性,同时显著(P〈0.05)降低了团头鲂� 展开更多
关键词 团头鲂 精氨酸 赖氨酸 呼吸爆发 生长
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高糖培养时间对正常人外周血白细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性及其呼吸爆发功能的影响 预览 被引量:1
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作者 曾慧妍 曹瑛 薛耀明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第2期238-240,共3页
目的:观察正常人外周血白细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性改变与高糖环境培养时间的关系.探讨高糖对白细胞呼吸爆发功能的影响。方法:观察高浓度葡萄糖培养环境下不同时间点正常人外周血白细胞的G6PD活性变化.并通过检测白细胞... 目的:观察正常人外周血白细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性改变与高糖环境培养时间的关系.探讨高糖对白细胞呼吸爆发功能的影响。方法:观察高浓度葡萄糖培养环境下不同时间点正常人外周血白细胞的G6PD活性变化.并通过检测白细胞ROS产量观察其呼吸爆发功能,研究高糖培养时间对白细胞呼吸爆发功能的影响。结果:与正常对照组相比,高糖组的G6PD活性及ROS产量随着培养时间延长出现明显减少(P〈0.01).呼吸爆发功能明显受损。结论:随着培养时间的延长,高糖可明显降低白细胞G6PD活性.导致呼吸爆发功能障碍。这可能是糖尿病患者白细胞功能低下,抗感染能力降低的可能机制之一。 展开更多
关键词 白细胞 呼吸爆发 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
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极低出生体重儿中性粒细胞呼吸爆发功能的研究
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作者 程婕 王晓川 +4 位作者 曹云 陈超 蒋思远 俞晔珩 王静漪 《中华围产医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第10期667-671,共5页
目的 探讨极低出生体重儿中性粒细胞呼吸爆发功能. 方法 以2012年7月1日至2012年12月31日收住复旦大学儿科医院的22例极低出生体重儿(very low birth weight infant,VLBWI)为VLBWI组,根据有无新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respirat... 目的 探讨极低出生体重儿中性粒细胞呼吸爆发功能. 方法 以2012年7月1日至2012年12月31日收住复旦大学儿科医院的22例极低出生体重儿(very low birth weight infant,VLBWI)为VLBWI组,根据有无新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS),分为NRDS组和无NRDS组,各11例.以同期在上海市闵行区妇幼保健院出生的20例正常足月新生儿为对照.所有新生儿均排除早发型败血症.VLBWI组入院时留取桡动脉血1.5 ml,足月儿组出生时留取脐带血1.5 ml.对早产儿和足月儿进行中性粒细胞呼吸爆发功能检测,使用佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)刺激中性粒细胞活化后,将二氢若丹明123(dihydrorhodamine-1,2,3,DHR)氧化为发出黄绿色荧光的若丹明123,用流式细胞仪检测荧光强度以评价中性粒细胞呼吸爆发功能.使用荧光标记的细胞色素b558单克隆抗体(7D5)标记,用流式细胞仪检测中性粒细胞gp91Phox的表达.采用Mann-Whitney U检验进行统计学分析.结果 无刺激时,VLBWI组发生呼吸爆发的中性粒细胞比例为(49.10±20.19)%,高于足月儿组的(18.73±6.81)%(Z=-4.911,P=0.000).PMA刺激后VLBWI组发生呼吸爆发的中性粒细胞比例为(96.58±3.44)%,高于足月儿组的(99.20±0.62)%,差异有统计学意义(Z=-3.186,P=0.001).VLBWI组中性粒细胞刺激指数为171.40±103.35,低于足月儿组的306.30±138.47,差异有统计学意义(Z=-3.413,P=0.001).VLBWI组中性粒细胞表达gp91Phox荧光强度几何均数为21.66±19.87,而足月儿组为19.60±8.03,2组差异无统计学意义(Z=-0.934,P=0.350).VLBWI组表达gp91Phox的中性粒细胞比例为(56.11±29.40)%,低于足月儿组的(80.14±14.87)%,差异有统计学意义(Z=-2.374,P=0.018).无刺激时,NRDS组发生呼吸爆发的中性粒细胞比例为(63.40±16.45)%,高于无NRDS组的(34.80±11.65)%,差异有统计学意义(Z=-3.382,P=0.001).NRDS� 展开更多
关键词 婴儿 极低出生体重 中性白细胞 呼吸爆发 膜糖蛋白类 NADPH氧化酶
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