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抗体药物表达技术最新进展
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作者 张梦筱 朱建伟 路慧丽 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期171-182,共12页
生物技术药物是21世纪医药工业发展的中坚力量,其中单克隆抗体类药物是生物技术药物的典型代表,是恶性肿瘤、自身免疫病等领域全球销售额最高的药品种类。在抗体药物发展的几十年里,随着基因工程、蛋白质工程等领域的发展,抗体生产的宿... 生物技术药物是21世纪医药工业发展的中坚力量,其中单克隆抗体类药物是生物技术药物的典型代表,是恶性肿瘤、自身免疫病等领域全球销售额最高的药品种类。在抗体药物发展的几十年里,随着基因工程、蛋白质工程等领域的发展,抗体生产的宿主细胞建立、表达、纯化等各阶段的技术均不断取得突破,文中综述和讨论了抗体药物生产所采用的真核哺乳动物细胞表达系统、原核大肠杆菌表达系统、转基因动物反应器、无细胞蛋白质合成系统以及相关的关键技术进展。 展开更多
关键词 抗体药物 表达系统 哺乳动物细胞 生产 CRISPR
动物疫病病毒样颗粒疫苗的研究进展 预览
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作者 刘萍 郭富城 +3 位作者 李林杰 李凌浩 马晓霞 马忠仁 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期102-107,共6页
病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)是由病毒结构蛋白组成的空心颗粒,具有天然病毒粒子形态和空间结构,但不含有病毒核酸,无感染能力,也不能自主复制[1-2]。许多病毒的结构蛋白在异源系统内重组表达即可自装配形成VLPs,这些VLPs的... 病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)是由病毒结构蛋白组成的空心颗粒,具有天然病毒粒子形态和空间结构,但不含有病毒核酸,无感染能力,也不能自主复制[1-2]。许多病毒的结构蛋白在异源系统内重组表达即可自装配形成VLPs,这些VLPs的形态和结构与真正的病毒粒子相似,大小介于15 nm~400 nm,具有天然病毒粒子的空间构象和与天然病毒相似的免疫原性。 展开更多
关键词 疫苗免疫 哺乳动物细胞 表达系统 结构蛋白 动物疫病 中和抗体 重组杆状病毒 病毒粒子 病毒样颗粒 研究进展
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自噬相关蛋白ATG5调控细胞自噬和凋亡的研究进展 被引量:1
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作者 谢昆 李密杰 +4 位作者 蒋成砚 鲁海菊 孔琼 高波 杨婉莹 《中华医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期875-877,共3页
自噬和凋亡是真核生物中广泛存在的主动或应激代谢过程,是细胞内蛋白质的生物合成和分解代谢之间保持动态平衡的关键因素之一,平衡的破坏会造成肿瘤细胞生长和细胞死亡,因此自噬和凋亡这两种程序性细胞死亡(PCD)在维持细胞生存和... 自噬和凋亡是真核生物中广泛存在的主动或应激代谢过程,是细胞内蛋白质的生物合成和分解代谢之间保持动态平衡的关键因素之一,平衡的破坏会造成肿瘤细胞生长和细胞死亡,因此自噬和凋亡这两种程序性细胞死亡(PCD)在维持细胞生存和发育过程中扮演着重要角色。在哺乳动物细胞中,一系列自噬相关蛋白质(ATGS)如ATG4、ATG5、Beclin-1(酵母ATG6同源物)和ATG12等参与到自噬和凋亡的分子调控网络过程中。本文就自噬相关蛋白质ATG5调控细胞自噬和凋亡的研究进展作一综述,为进一步研究ATG5调控细胞自噬和凋亡的分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 分子调控网络 相关蛋白质 细胞自噬 凋亡 程序性细胞死亡 细胞内蛋白质 肿瘤细胞生长 哺乳动物细胞
世界首个哺乳动物细胞图谱在浙江大学诞生 预览
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作者 章咪佳 《创新时代》 2018年第4期26-27,共2页
6万亿个微小、复杂的细胞结构,组成了人的身体。简单说,我们每个人,就是由一堆细胞组成的;每一次呼吸、运动、思考,都是细胞在工作。但是人们对细胞的了解却很少。人类迈出了新的一大步—近期上线的著名学术期刊CELL(《细胞》)上,刊登... 6万亿个微小、复杂的细胞结构,组成了人的身体。简单说,我们每个人,就是由一堆细胞组成的;每一次呼吸、运动、思考,都是细胞在工作。但是人们对细胞的了解却很少。人类迈出了新的一大步—近期上线的著名学术期刊CELL(《细胞》)上,刊登了浙江大学医学院干细胞与再生医学中心郭国骥教授团队的研究成果,团队自主研发了低成本、高效率、完全国产化的高通量单细胞测序平台Microwell-seq,并在短时间内利用这一平台构建了全球首个哺乳动物细胞图谱。这将打开一场奇妙之旅,带人类深入一个奇幻世界。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞 浙江大学 图谱 世界 细胞组成 细胞结构 细胞 CELL
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蓖麻毒蛋白在细胞内的转运过程研究进展 预览
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作者 徐雅楠 孙立杰 +1 位作者 于丽丽 黄凤兰 《山东农业大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第6期916-920,共5页
蓖麻毒蛋白(Ricin)是一种核糖体失活蛋白,对真核细胞有毒性。它移除真核细胞核糖体大亚基28SrRNA保守序列中特异的腺嘌呤残基,使蛋白合成过程终止,导致细胞死亡。本文对蓖麻毒蛋白在植物细胞内合成后转运出细胞的过程,以及蓖麻毒蛋白作... 蓖麻毒蛋白(Ricin)是一种核糖体失活蛋白,对真核细胞有毒性。它移除真核细胞核糖体大亚基28SrRNA保守序列中特异的腺嘌呤残基,使蛋白合成过程终止,导致细胞死亡。本文对蓖麻毒蛋白在植物细胞内合成后转运出细胞的过程,以及蓖麻毒蛋白作用于哺乳动物细胞时转运过程的研究进展予以简要描述。 展开更多
关键词 蓖麻毒蛋白 转运过程 蓖麻细胞 哺乳动物细胞
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研发单细胞测序平台绘制哺乳动物细胞图谱——国家“青年千人计划”专家、浙江大学郭国骥教授
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作者 张娜娜 《科技成果管理与研究》 2018年第5期53-54,共2页
浙江大学医学院干细胞与再生医学中心郭国骥教授团队自主开发了一套完全国产化的Microwell—seq高通量单细胞分析平台,对来自小白鼠近50种器官组织的40余万个细胞进行了系统性的单细胞转录组分析,绘制了哺乳动物细胞图谱,开展了高通... 浙江大学医学院干细胞与再生医学中心郭国骥教授团队自主开发了一套完全国产化的Microwell—seq高通量单细胞分析平台,对来自小白鼠近50种器官组织的40余万个细胞进行了系统性的单细胞转录组分析,绘制了哺乳动物细胞图谱,开展了高通量单细胞捕获技术、单细胞RNA测序、多向转分化机制以及细胞谱系特异性转录抑制等相关研究,并取得了诸多创新成果。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞 细胞分析 浙江大学 图谱 平台 测序 专家 研发
基因编辑在构建抗凋亡工程细胞中的应用
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作者 李泓健 严钤禹 +4 位作者 陈玉园 冯韵宇 胡汶星 吴星云 仝爱平 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第12期2065-2071,共7页
21世纪以来,人们在生物科技领域取得了长足进步。一方面,基因编辑技术的问世为精确修饰目的基因带来可能,即能够在活细胞中完成特定DNA片段的插入、删除、替换、激活、抑制等任务;另一方面,越来越多的新型重组蛋白药物被开发并应用于对... 21世纪以来,人们在生物科技领域取得了长足进步。一方面,基因编辑技术的问世为精确修饰目的基因带来可能,即能够在活细胞中完成特定DNA片段的插入、删除、替换、激活、抑制等任务;另一方面,越来越多的新型重组蛋白药物被开发并应用于对抗肿瘤等人类重大疾病,相比于传统化学药物,它具有高特异性和低副作用等显著优势,治疗效果得到普遍认可。目前用于生产治疗性重组蛋白的工程细胞株主要来源于哺乳动物,然而,由于生产过程中任何环境因素的改变都可能使工程细胞凋亡,严重影响蛋白的表达水平,因此大大提高了生产成本。研究人员在明确工程细胞的生长与死亡相关机制后,利用基因编辑技术对其进行了定向改造,提高了其表达水平。该文就对该方面研究成果进行了综述。 展开更多
关键词 基因编辑 CRISPR/Cas系统 重组蛋白 哺乳动物细胞 细胞凋亡
高通量微型生物反应器的研究进展
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作者 郭玉蕾 唐亮 +2 位作者 孙瑞强 李尤 陈依军 《中国生物工程杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期69-75,共7页
近年来,哺乳动物细胞培养技术发展迅猛,基于此技术的生物制药行业更是异军突起。在激烈的生物药市场竞争中,缩短研发时间和降低研发成本是制胜的关键。与传统的生物反应器相比,高通量微型生物反应器具有操作简单、运行通量高、实验重复... 近年来,哺乳动物细胞培养技术发展迅猛,基于此技术的生物制药行业更是异军突起。在激烈的生物药市场竞争中,缩短研发时间和降低研发成本是制胜的关键。与传统的生物反应器相比,高通量微型生物反应器具有操作简单、运行通量高、实验重复性好等优点,可大大缩短研发周期,降低人力、物力成本,因此成为了生物制药行业最新的研究热点之一。目前,已成功应用于生物药物研发的微型生物反应器有Simcell~(TM)、Ambr 15~(TM)、Ambr 250~(TM)等,分别适用于工艺开发中的不同阶段。以上述三种微型生物反应器为例,介绍高通量微型反应器在哺乳动物细胞培养工艺开发中的研究现状及发展前景。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞 细胞培养 生物反应器 微型反应器
口蹄疫亚单位疫苗真核表达系统简述
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作者 柴立丽 安芳兰 +3 位作者 万玉林 武发菊 孙玉霞 董文教 《中兽医医药杂志》 2018年第4期26-30,共5页
目前,防治口蹄疫最有效的方式是接种灭活疫苗,但该疫苗免疫周期短,且存在一定安全隐患,生产和研制新型口蹄疫疫苗尤显重要。亚单位疫苗是利用基因工程技术生产保护性抗原来诱导机体产生免疫反应,由于不含病毒DNA,不会使动物发病,安全性... 目前,防治口蹄疫最有效的方式是接种灭活疫苗,但该疫苗免疫周期短,且存在一定安全隐患,生产和研制新型口蹄疫疫苗尤显重要。亚单位疫苗是利用基因工程技术生产保护性抗原来诱导机体产生免疫反应,由于不含病毒DNA,不会使动物发病,安全性极高,具有良好的应用前景。研制亚单位疫苗,首先要构建携带编码目的蛋白基因的表达载体,然后将构建好的载体导入合适的宿主细胞来表达,需要一个由表达载体和宿主细胞组成的完整表达系统。目前所用表达系统主要有原核系统以及酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞、植物生物反应器等真核系统,其中真核表达系统具有翻译后的加工修饰体系,表达的外源蛋白更接近于天然蛋白质而被广泛应用。本文就常用表达FMDV结构蛋白和非结构蛋白的真核表达系统、FMD亚单位疫苗研究进展进行综述。 展开更多
关键词 口蹄疫 亚单位疫苗 酵母 杆状病毒 哺乳动物细胞 植物生物反应器
重组蛋白的CHO细胞瞬时表达体系的研究进展
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作者 韩阳 蔡洁行 +1 位作者 张朗 李谦 《药物生物技术》 CAS 2017年第3期243-248,共6页
单抗等治疗性重组蛋白具有巨大的商业价值和科研价值,而哺乳动物细胞瞬时表达体系能够快速生产毫克到克级别的重组蛋白,且生化特性(如翻译后的糖基化修饰类型等)均与人源相似,使该技术成为当前高校和企业研究的热点。该体系在工业... 单抗等治疗性重组蛋白具有巨大的商业价值和科研价值,而哺乳动物细胞瞬时表达体系能够快速生产毫克到克级别的重组蛋白,且生化特性(如翻译后的糖基化修饰类型等)均与人源相似,使该技术成为当前高校和企业研究的热点。该体系在工业界的广泛使用推动了其向高通量和大规模的发展,然而由于它存在着表达量低的天然缺陷,制约了其进一步发展。通过整理和研究最近一段时间发表的研究数据和研究观点,文章从宿主细胞的改造、表达载体的设计、转染方法的选择、补料策略4个角度综述近年来在工业界和学术界,CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)重组蛋白瞬时表达体系的现状和最新突破,并展望其未来发展方向。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞 CHO细胞 重组蛋白 瞬时表达 基因定点编辑 转座子载体 大体积电转 解除转录 抑制
Comparative mammalian cell cytotoxicity of wastewater with elevated bromide and iodide after chlorination,chloramination, or ozonation
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作者 Shengkun Dong Thanh H.Nguyen Michael J.Plewa 《环境科学学报:英文版》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第8期296-301,共6页
当社区在全世界试着更好对延长干旱或强烈泛滥的增加的频率控制他们的水资源,再循环废水正在变得更普通。为在沿海的区域的社区,废水可以包含溴化物的提高的层次(Br <sup></sup>) 和碘化物(我从海水侵入或来源的高矿物质... 当社区在全世界试着更好对延长干旱或强烈泛滥的增加的频率控制他们的水资源,再循环废水正在变得更普通。为在沿海的区域的社区,废水可以包含溴化物的提高的层次(Br <sup></sup>) 和碘化物(我从海水侵入或来源的高矿物质内容的 <sup></sup>) 流水。如此的废水的消毒是强制的阻止病原体的传播,然而,很少面对 Br <sup></sup> 在消毒以后对废水的毒性被知道并且我 <sup></sup> 。在我们比较了的这研究,在在市政的第二等的废水自河的样品的哺乳动物的房间的长期的 cytotoxicity 的正式就职由识别过程哪个消毒与不利生物反应的底层产生了废水的氯,氯胺或臭氧在消毒以后与 Br <sup></sup>/I<sup></sup> 的提高的层次修改了。氯化作为与非消毒的控制相比到 5 次增加了哺乳动物的房间 cytotoxicity。Chloramination 生产了比非消毒的控制表示了更多的 cytotoxicity 6.3 次并且是比使氯化的样品更细胞毒素的 1.3 次的消毒废水。Ozonation 与比得上非消毒的控制的 cytotoxicity 生产了废水并且比氯消毒废水的是细胞毒素的至少 4 次更少。这些结果显示与氯化和 chloramination 相比,有高 Br <sup></sup>/I<sup></sup> 层次的废水的 ozonation 产出最低哺乳动物的房间 cytotoxicity,建议它象消毒有最小化在头脑的生物毒性的废水的一个更有利的方法的潜力。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞 废水最小化 细胞毒性 臭氧氧化 碘化物 氯化 氯胺
真核细胞表达人骨形态发生蛋白-7的研究进展 预览
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作者 薛俊英 付加芳 王世立 《济南大学学报:自然科学版》 北大核心 2017年第5期459-465,共7页
针对目前生物系统表达的人骨形态发生蛋白-7(h BMP-7)产量不能满足市场需求量、活性低、成本高的现状,对目前h BMP-7在酵母表达系统、昆虫、哺乳动物组织细胞的表达状况进行综述,分析其各自的优势和局限性,并对h BMP-7真核系统表达进... 针对目前生物系统表达的人骨形态发生蛋白-7(h BMP-7)产量不能满足市场需求量、活性低、成本高的现状,对目前h BMP-7在酵母表达系统、昆虫、哺乳动物组织细胞的表达状况进行综述,分析其各自的优势和局限性,并对h BMP-7真核系统表达进行展望,指出h BMP-7是一种有重要价值的生长因子,具有强烈的骨诱导活性,临床上可用于治疗骨折、骨不愈合,未来的研究重点应是h BMP-7表达量的问题。 展开更多
关键词 人骨形态发生蛋白-7 毕赤酵母 哺乳动物细胞 人骨肉瘤细胞U2-OS
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赖氨酸修饰对蛋白质功能的调控
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作者 秦樾 易静 +1 位作者 陈策实 胡荣贵 《科技纵览》 2017年第9期68-71,共4页
在生命进化的长河里,作为基因产物的蛋白质演化出大量的翻译后修饰。相比原核细胞或低等动物细胞,哺乳动物细胞内蛋白质翻译后修饰受到内外微环境变化的调控更为复杂。在哺乳动物细胞中,这些修饰和去修饰是在相应酶的控制下发生的,... 在生命进化的长河里,作为基因产物的蛋白质演化出大量的翻译后修饰。相比原核细胞或低等动物细胞,哺乳动物细胞内蛋白质翻译后修饰受到内外微环境变化的调控更为复杂。在哺乳动物细胞中,这些修饰和去修饰是在相应酶的控制下发生的,使蛋白质处于修饰和去修饰的可逆反应中,好像阴阳两面可以此消彼长,但维持着动态平衡。 展开更多
关键词 翻译后修饰 蛋白质功能 调控 赖氨酸 哺乳动物细胞 生命进化 基因产物 原核细胞
The impact of iodinated X-ray contrast agents on formation and toxicity of disinfection by-products in drinking water
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作者 Clara H.Jeong Edward J.Machek +5 位作者 Morteza Shakeri Stephen E.Duirk Thomas A.Ternes Susan D.Richardson Elizabeth D.Wagner Michael J.Plewa 《环境科学学报:英文版》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第8期173-182,共10页
因为他们的潜力,来源水里的 iodinated X 光检查对比媒介(ICM ) 的存在具有公共健康的高担心产生高度有毒的消毒副产品(DBP ) 。这研究的目的是在来源水和类型里决定 ICM 的影响在 DBP 混合物并且到的全面毒性上消毒决定哪个 ICM 和反... 因为他们的潜力,来源水里的 iodinated X 光检查对比媒介(ICM ) 的存在具有公共健康的高担心产生高度有毒的消毒副产品(DBP ) 。这研究的目的是在来源水和类型里决定 ICM 的影响在 DBP 混合物并且到的全面毒性上消毒决定哪个 ICM 和反应条件产生有毒的副产品。从 Akron 收集的来源水,哦与五不同 ICM 被对待包括 iopamidol, iopromide, iohexol, diatrizoate 和 iomeprol,与或没有氯或氯胺消毒。反应产品混合物与 XAD 树脂和哺乳动物的房间 cytotoxicity 被集中,混合集中的反应的 genotoxicity 被测量。包含 iopamidol 的水在消毒以后产生了哺乳动物的房间 cytotoxicity 和 genotoxicity 的提高的水平。当有 iopamidol 的氯消毒总的来说导致了最高的 cytotoxicity 时,当氯胺被用作时,毒性的相对调停 iopamidol 的增加更大与氯相比消毒。没有任何消毒,四另外的 ICM (iopromide, iohexol, diatrizoate,和 iomeprol ) 在控制上表示了某 cytotoxicity,并且当使氯化时,导致了更高的 cytotoxicity。仅仅 iohexol 与使氯化的来源水相比提高了 genotoxicity。 展开更多
关键词 X射线造影剂 消毒副产物 遗传毒性 饮用水 含碘 哺乳动物细胞 反应混合物 氯胺消毒
Primary cilia as a novel horizon between neuron and environment 预览
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作者 Gregory W.Kirschen Qiaojie Xiong 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第8期1225-1230,共6页
The primary cilium, a hair-like sensory organelle found on most mammalian cells, has gained recent attention within the field of neuroscience. Although neural primary cilia have been known to play a role in embryonic ... The primary cilium, a hair-like sensory organelle found on most mammalian cells, has gained recent attention within the field of neuroscience. Although neural primary cilia have been known to play a role in embryonic central nervous system patterning, we are just beginning to appreciate their importance in the mature organism. After several decades of investigation and controversy, the neural primary cilium is emerging as an important regulator of neuroplasticity in the healthy adult central nervous system. Further, primary cilia have recently been implicated in disease states such as cancer and epilepsy. Intriguingly, while primary cilia are expressed throughout the central nervous system, their structure, receptors, and signaling pathways vary by anatomical region and neural cell type. These differences likely bear relevance to both their homeostatic and neuropathological functions, although much remains to be uncovered. In this review, we provide a brief historical overview of neural primary cilia and highlight several key advances in the field over the past few decades. We then set forth a proposed research agenda to fill in the gaps in our knowledge regarding how the primary cilium functions and malfunctions in nervous tissue, with the ultimate goal of targeting this sensory structure for neural repair following injury. 展开更多
关键词 神经元 原发性 纤毛 地平线 中枢神经系统 环境 哺乳动物细胞 神经可塑性
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环状RNA在肿瘤中调控作用的研究进展 被引量:1
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作者 李景林 郑汪洋 +4 位作者 李鑫恒 李正龙 王志东 姜兴明 崔云甫 《中华病理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期578-581,共4页
环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种广泛存在于哺乳动物细胞中并具有闭合环状结构的非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)[1-2].早在20世纪90年代被发现并被视为RNA错误剪接的副产物而未引起研究人员的重视[3-4].随着生物信息学和RNA... 环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种广泛存在于哺乳动物细胞中并具有闭合环状结构的非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)[1-2].早在20世纪90年代被发现并被视为RNA错误剪接的副产物而未引起研究人员的重视[3-4].随着生物信息学和RNA测序等技术的快速发展,已证实大量稳定且保守的circRNA在人类细胞基因表达调控中扮演着重要的角色,使其成为ncRNA家族中新的研究热点[5-6].近年来,关于circRNA的形成机制、特征、生物学功能及其与疾病关系的研究均取得了较大的突破,尤其在肿瘤发生发展中的重要作用,我们就circRNA在肿瘤中调控作用的研究进展做一综述. 展开更多
关键词 肿瘤发生发展 环状结构 调控作用 RNA 哺乳动物细胞 基因表达调控 生物信息学 生物学功能
大规模抗体生产中的反应器放大策略
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作者 马宁宁 《药学进展》 CAS 2017年第9期645-652,共8页
反应器放大是大规模抗体生产的关键技术之一。反应器放大的挑战来自两方面,一方面是需要综合考虑多个放大参数,如剪切力、混合、传质等,找到均衡的放大方案,另一方面是需要考虑细胞株、培养工艺、反应器的个性化差异,每个项目的具体限... 反应器放大是大规模抗体生产的关键技术之一。反应器放大的挑战来自两方面,一方面是需要综合考虑多个放大参数,如剪切力、混合、传质等,找到均衡的放大方案,另一方面是需要考虑细胞株、培养工艺、反应器的个性化差异,每个项目的具体限制因素不同。对现有反应器放大研究进行总结,并在此基础上系统地介绍成功的反应器放大策略。 展开更多
关键词 抗体 反应器 剪切力 哺乳动物细胞
生物素标记的甲基化间区位点扩增技术分辨不同组织DNA甲基化水平方法初探 预览
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作者 王小怡 王博 +2 位作者 王雪伟 高哲 郭大玮 《中国医药生物技术》 2017年第1期80-83,共4页
DNA甲基化是重要的表观遗传修饰之一。在哺乳动物细胞中,DNA甲基化参与基因表达和染色质结构的调控,与多种癌症的发生发展相关。DNA甲基化在胚胎发育早期、个体生长发育及多种疾病的发生发展过程中起着重要的作用,是当前表观遗传研究领... DNA甲基化是重要的表观遗传修饰之一。在哺乳动物细胞中,DNA甲基化参与基因表达和染色质结构的调控,与多种癌症的发生发展相关。DNA甲基化在胚胎发育早期、个体生长发育及多种疾病的发生发展过程中起着重要的作用,是当前表观遗传研究领域的热点之一。 展开更多
关键词 DNA甲基化 甲基化水平 生物素标记 扩增技术 表观遗传修饰 组织 区位 哺乳动物细胞
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Temperature effect on CRISPR-Cas9 mediated genome editing
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作者 Guanghai Xiang Xingying Zhang +2 位作者 Chenrui An Chen Cheng Haoyi Wang 《遗传学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期199-205,共7页
Zinc-finger nuclease(ZFN), transcription activator-like effector nuclease(TALEN), and clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9(CRISPR-Cas9) are the most commonly used genom... Zinc-finger nuclease(ZFN), transcription activator-like effector nuclease(TALEN), and clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9(CRISPR-Cas9) are the most commonly used genome editing tools. Previous studies demonstrated that hypothermia treatment increased the mutation rates induced by ZFNs and TALENs in mammalian cells. Here, we characterize the effect of different culture temperatures on CRISPR-Cas9 mediated genome editing and find that the genome editing efficiency of CRISPR-Cas9 is significantly hampered by hypothermia treatment, unlike ZFN and TALEN. In addition, hyperthermia culture condition enhances genome editing by CRISPR-Cas9 in some cell lines, due to the higher enzyme activity and sg RNA expression level at higher temperature. Our study has implications on CRISPR-Cas9 applications in a broad spectrum of species, many of which do not live at 37 C. 展开更多
关键词 编辑工具 温度效应 基因组 介导 哺乳动物细胞 转录激活 相关蛋白 低温处理
Human apo-SRP72 and SRP68/72 complex structures reveal the molecular basis of protein translocation
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作者 Yina Gao Qi Zhang +8 位作者 Yue Lang Yang Liu Xiaofei Dong Zhenhang Chen Wenli Tian Jun Tang Wei Wu Yufeng Tong Zhongzhou Chen 《分子细胞生物学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期220-230,共11页
co 翻译的指向或插入能分泌并且膜蛋白质进 endoplasmic 蜂窝胃(嗯) 一个关键生物过程被信号识别粒子(SRP ) 调停。在优核质, SRP68-SRP72 (SRP68/72 ) heterodimer 在蛋白质 translocation 起一个必要作用。然而,二最大的 SRP 蛋白质... co 翻译的指向或插入能分泌并且膜蛋白质进 endoplasmic 蜂窝胃(嗯) 一个关键生物过程被信号识别粒子(SRP ) 调停。在优核质, SRP68-SRP72 (SRP68/72 ) heterodimer 在蛋白质 translocation 起一个必要作用。然而,二最大的 SRP 蛋白质, SRP68 和 SRP72 的结构的信息,被限制,特别关于他们的相互作用。此处,我们在 2.91 点报导人的 apo-SRP72 和 SRP68/72 建筑群的第一水晶结构吗?并且 1.7?分辨率分别地。SRP72 的 SRP68 有约束力的领域包含四次不正常的 tetratricopeptide 重复(TPR ) 和一顶灵活 C 终端帽子。Apo-SRP72 在答案主要作为 dimers 存在。为了绑在 SRP68, SRP72 homodimer disassociates,和不可缺少的 C 终端帽子,经历一个显著 conformational 变化帮助 SRP68/72 heterodimer 的形成。SRP68 的 A 23 残余多肽为到通过它的不平常地恐水病、扩大的表面的 SRP72 的紧密的绑定是足够的。结构,生物物理,并且 mutagenesis 分析表明联系癌症的变化破坏 SRP68-SRP72 相互作用和他们的合作本地化与嗯在哺乳动物的房间。结果在调停 SRP 的蛋白质 translocation 加亮 SRP68-SRP72 相互作用的必要角色并且为疾病诊断, pathophysiology,和药设计提供一个结构的基础。 展开更多
关键词 蛋白质转运 结构信息 分子基础 TIAL基合金 异源二聚体 人类 信号识别颗粒 哺乳动物细胞
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