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基因芯片:值得期待的概念产业 预览
1
作者 杜鹃 《科技中国》 2013年第7期74-75,共2页
作为现代生物技术最前沿的发展方向之一,基因芯片近年来被学界和相关公司联手推动快速发展。基因芯片的基本运作过程是将基因片段固定于载体制成芯片,然后将其与荧光标记产物按碱基配对的原则进行固相杂交,继而对芯片上的荧光信号进... 作为现代生物技术最前沿的发展方向之一,基因芯片近年来被学界和相关公司联手推动快速发展。基因芯片的基本运作过程是将基因片段固定于载体制成芯片,然后将其与荧光标记产物按碱基配对的原则进行固相杂交,继而对芯片上的荧光信号进行扫描,最后用计算机系统对荧光信号作比较和检测。研究人员推测,随着基因芯片在医学领域的广泛运用,可能会对现有的医疗模式产生影响。更重要的是。 展开更多
关键词 基因芯片 产业 现代生物技术 荧光信号 计算机系统 基因片段 杂交 碱基配对
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PCR-ELISA技术及应用 预览 被引量:10
2
作者 贾丽艳 张映 《山西农业大学学报:社会科学版》 2007年第6期 214-215,共2页
PCR-ELISA技术是PCR技术、探针技术和ELISA技术三者结合的一项技术,是PCR技术的衍生和发展.近几年,PCR-ELISA技术已被应用在检测领域,并取得一定的进展.本文综合相关文献,对该技术工作原理、分类、应用作一介绍.
关键词 PCR--ELISA 探针 杂交 杂交
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RT—PCR—ELISA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度的初步研究
3
作者 钱汶 陈悦青 +4 位作者 洪艳 唐彩华 周康凤 庄昉成 陈勇 《浙江省医学科学院学报》 2005年第2期 34-37,共4页
目的应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用RT-PCR-ELISA,将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物,与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,通过辣根过氧化... 目的应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用RT-PCR-ELISA,将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物,与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色,读取吸光度(A值),判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度,并与常规细胞培养法(CCID50)比较。结果本方法与细胞培养法的敏感性相仿,具有简便、快速、特异的优点。结论RTPCR—EUSA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。 展开更多
关键词 甲肝减毒活疫苗 病毒滴度 ELISA方法 检测 RT-PCR-ELISA 步研究 细胞培养法 核酸扩增产物 病毒基因产物 寡核苷酸引物 辣根过氧化物 特异性探针 EUSA法 RTPCR 杂交 方法应用 酶联显色 链亲和素 判断结果 疫苗滴度 显色法
PCR产物固相杂交酶联显色观察白细胞介素-2联合干扰素-α治疗慢性丙型肝炎疗效 预览
4
作者 王芳 郭雁宾 +2 位作者 黄德庄 王风水 贺立香 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2004年第7期 361-364,共4页
目的建立一步法基因扩增产物固相杂交酶联免疫吸附方法并用于临床观察白细胞介素-2(IL2)联合干扰素-α(IFN-α)治疗慢性丙型肝炎的疗效.方法7例患者中有4例患者接受IL-2和IFN-α联合治疗,其中2例为IFN-α单独或联合抗病毒药物治疗后复发... 目的建立一步法基因扩增产物固相杂交酶联免疫吸附方法并用于临床观察白细胞介素-2(IL2)联合干扰素-α(IFN-α)治疗慢性丙型肝炎的疗效.方法7例患者中有4例患者接受IL-2和IFN-α联合治疗,其中2例为IFN-α单独或联合抗病毒药物治疗后复发者,未接受过抗病毒药物治疗者2例,疗程为一年.余下的3例患者为单独使用IFN-α治疗者.同时采用一步法基因扩增产物固相杂交酶联免疫吸附方法检测血清丙型肝炎病毒核酸(HCVRNA)滴度评价疗效.结果IL-2联合干扰素治疗对干扰素治疗后复发者仍有效,完全应答率为100%;对未接受过抗病毒药物治疗者也有效,完全应答率为50%.结论白细胞介素-2联合干扰素可作为初次治疗及复发后再治疗的选择方案.而一步法基因扩增产物固相杂交酶联显色检测血清HCV-RNA滴度的方法可快速、特异、灵敏地反应出治疗过程中HCV-RNA量的变化,为临床治疗提供可靠的疗效判定指标. 展开更多
关键词 抗病毒治疗 慢性丙型肝炎 基因扩增 杂交 酶联反应
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基因扩增产物微孔杂交法检测新城疫病毒致病毒株 预览
5
作者 夏梦岩 张卓然 《中国动物检疫》 CAS 2002年第5期 22-25,共4页
目的 建立一种快速,简便,敏感实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株。方法 在F蛋白裂解位点的两侧设计引物,引物1的5'端用生物素标记;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针,并对之进行5'端地高辛标记... 目的 建立一种快速,简便,敏感实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株。方法 在F蛋白裂解位点的两侧设计引物,引物1的5'端用生物素标记;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针,并对之进行5'端地高辛标记。生物素化的双链扩增产物被固相的链霉亲和素捕获后经变性成为生物素化单链,然后微孔中加入地高辛标记的探针进行杂交。并用抗-地高辛-碱性磷酸酶显色。结果 所建立的方法快速,简便,特异,敏感性比琼脂糖电泳法高约3-4倍,批内CV为9.88%。批间CV为18.31%。结论 所建立的方法优化PCR条件后可作为新城疫病毒感染诊断,检疫的常规方法。 展开更多
关键词 基因扩增产物微孔杂交 检测 新城疫病毒 致病毒株 免疫酶技术 杂交
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基因扩增产物微孔杂交法检测新城疫致病毒株 预览
6
作者 秦城 陈明生 +1 位作者 赵昕 齐震玉 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2001年第5期 272-277,共6页
[目的]建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以鉴别新城疫病毒(NDV)强弱毒株.[方法]依据NDV强弱毒株F0蛋白在裂解位点处的核酸序列有差异,设计一种针对强毒株的探针,利用基因扩增物微孔杂交法,检测标本中NDV致病毒株.[结果]缩短杂交时... [目的]建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以鉴别新城疫病毒(NDV)强弱毒株.[方法]依据NDV强弱毒株F0蛋白在裂解位点处的核酸序列有差异,设计一种针对强毒株的探针,利用基因扩增物微孔杂交法,检测标本中NDV致病毒株.[结果]缩短杂交时间,加快反应速度,能从强、中、弱毒株中扩增出371bp的核酸产物.利用酶显色法杂交结果,比电泳法观察PCR结果高4倍.[结论]本方法经优化PCR参数后,可作为新城疫的诊断方法,又可作为出入境检疫的常规方法. 展开更多
关键词 新城疫病毒 免疫酶技术 聚合酶链反应 杂交
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固相杂交检测HCV RNA PCR产物方法的建立 预览 被引量:2
7
作者 王凤水 王宇 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第7期567-569,共3页
目的 建立简便,快速的丙型肝炎病毒基因扩增产物的固相杂交检测方法。方法 将标记有生物素的寡核引物扩增的丙肝病毒基因产物,与通过结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显... 目的 建立简便,快速的丙型肝炎病毒基因扩增产物的固相杂交检测方法。方法 将标记有生物素的寡核引物扩增的丙肝病毒基因产物,与通过结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色。读取光密度值。结果应用本方法对血清中丙型肝炎病毒核酸检测,灵敏度可达5拷贝~50拷贝/反应。结论 此方法简便,快速,特异性好,敏感性高,结果判定指标客观,可广泛应用于病毒感染的临 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 RNA病毒 杂交 PCR 丙型肝炎
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基因扩增产物的固相杂交—酶联显色方法的建立 预览 被引量:3
8
作者 王凤水 王宇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期 192-198,共7页
建立基于基因扩增技术的简便、快速的病毒核酸定量检测方法。将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的病毒基因产物,与通过共价键结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取... 建立基于基因扩增技术的简便、快速的病毒核酸定量检测方法。将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的病毒基因产物,与通过共价键结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取光密度值。应用本方法对血清中乙型、丙型肝炎病毒核酸定量检测,灵敏度分别可达1-5拷贝/反应。此方法简便、快速、特异性好、敏感性高、半定量指标客观,要广泛应用于肝炎病毒感染的临床诊断和疗 展开更多
关键词 核酸定量 杂交 酶联显色 PCR 肝炎病毒
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固相杂交技术检测真菌性角膜病常见致病菌的初步研究 预览
9
作者 张英朗 王丽娅 +1 位作者 李智涛 孙声桃 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第36期 17-18,共2页
目的探讨快速、准确检测真菌性角膜病常见致病菌的方法。方法将临床上常见的角膜致病真菌6属12种经氨基化修饰的特异性寡核苷酸探针固定在醛基化的载玻片上。用一对荧光标记通用引物对上述真菌的DNA基因片断进行扩增,将带有荧光标记的... 目的探讨快速、准确检测真菌性角膜病常见致病菌的方法。方法将临床上常见的角膜致病真菌6属12种经氨基化修饰的特异性寡核苷酸探针固定在醛基化的载玻片上。用一对荧光标记通用引物对上述真菌的DNA基因片断进行扩增,将带有荧光标记的扩增产物与载玻片上排列的探针进行杂交,置于荧光显微镜下观察其显色情况。结果12种真菌都产生了530~630bp的PCR扩增产物,在相同的条件下对其进行杂交检测,得到了具有各自特征的杂交后荧光显色图谱,通过荧光信号可直接对不同菌种进行区分判断。结论采用固相杂交技术能够在3~4h完成对临床上常见的12种角膜致病真菌的菌种检测。 展开更多
关键词 杂交技术 角膜病 真菌 致病菌 菌种检测
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RT-RCR产物固相杂交-酶联显色方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度 预览
10
作者 钱汶 陈悦青 +4 位作者 洪艳 唐彩华 周康凤 庄昉成 陈勇 《浙江省医学科学院学报》 2004年第2期 1-4,共4页
目的应用RT-PCR-EIJSA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用固相杂交一酶联显色方法,将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物,与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶... 目的应用RT-PCR-EIJSA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用固相杂交一酶联显色方法,将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物,与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色,读取光密度值(OD值),判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度。并与常规细胞培养法(CCID50)比较。结果证明本方法与细胞培养法(CCID50)的敏感性相仿,具有简便、快速、特异的优点。结论RT-PCR-EIJSA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。 展开更多
关键词 RT-RCR产物 杂交-酶联显色 检测 甲肝减毒活疫苗 病毒滴度
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松材线虫体前端特异cDNA文库的构建及细胞壁松弛蛋白基因的克隆与初步分析 被引量:1
11
作者 林世锋 郭立 +1 位作者 简恒 张国珍 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期 283-291,共9页
本研究将松材线虫切割为包括食道腺、分泌孔和头感器的体前端以及包括肠道的体后端,通过改进的固相杂交方法进行消减杂交,构建了松材线虫体前端的特异cDNA文库,利用该文库并结合RACE技术获得了松材线虫细胞壁松弛蛋白基因的全长cDNA... 本研究将松材线虫切割为包括食道腺、分泌孔和头感器的体前端以及包括肠道的体后端,通过改进的固相杂交方法进行消减杂交,构建了松材线虫体前端的特异cDNA文库,利用该文库并结合RACE技术获得了松材线虫细胞壁松弛蛋白基因的全长cDNA。该基因编码149个氨基酸,经过比对发现其翻译产物与马铃薯金线虫EXPB1、EXPB2蛋白有46%和42%的相似性,与南方根结线虫的推定无毒基因蛋白(CAC27774.1)有39%的相似性,该基因产物可能在侵染过程中起着软化寄主细胞壁的作用,但具体功能有待进一步研究。 展开更多
关键词 松材线虫 消减杂交 特异cDNA文库 细胞壁松弛蛋白
应用固相核酸杂交检测口蹄疫病毒 预览
12
作者 Mcfa.,RG 蒋正军 《动物检疫》 1991年第1期 20-22,共3页
<正>口蹄疫(FMD)是由微小RNA病毒引起偶蹄兽的急性高度传染性疾病。由于发病率高,经济损失大,此病被称为“全世界家畜中最可怕的疾病”。 大多数国家实施严格的进口检疫措施,以防FMDV的侵进。有许多诊断方法用来监测和控制此病的... <正>口蹄疫(FMD)是由微小RNA病毒引起偶蹄兽的急性高度传染性疾病。由于发病率高,经济损失大,此病被称为“全世界家畜中最可怕的疾病”。 大多数国家实施严格的进口检疫措施,以防FMDV的侵进。有许多诊断方法用来监测和控制此病的流行。FMDV有七个血清型(即A、O、C型,亚洲—1型、SAT— 展开更多
关键词 核酸杂交 口蹄疫病毒 检测
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重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白的DNA残留量检测 预览 被引量:2
13
作者 宋欣 郑海洲 《黑龙江医药》 CAS 2009年第1期28-30,共3页
目的:重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rhTrail)是一种治疗肿瘤的蛋白药物。其质量控制中,参照2005年《中华人民共和国药典》第三部规定,单支剂量的外源性DNA含量不应超过10ng。通过纯化,我们得到重组大肠杆菌表达的rhTrail蛋白,对... 目的:重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rhTrail)是一种治疗肿瘤的蛋白药物。其质量控制中,参照2005年《中华人民共和国药典》第三部规定,单支剂量的外源性DNA含量不应超过10ng。通过纯化,我们得到重组大肠杆菌表达的rhTrail蛋白,对其进行了DNA残留检测。方法:参照固相斑点杂交和地高辛核酸探针法,利用DNA地高辛标记和检测试剂盒,制备了地高辛标记宿主DNA探针,对三个rhTrail样品进行DNA残留检测。结果:杂交膜上,宿主DNA带显色,颜色按DNA上样量高低由深至浅,呈梯度差异,三个rhTrail蛋白样品的上样带颜色均较参比的宿主DNA100pg上样带颜色浅。结论:通过换算,三个样品单支剂量的DNA残留均低于10ng,符合DNA残留要求。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子关凋亡诱导配体 DNA残留 地高辛 斑点杂交
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