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RNA干涉与基因沉默 预览 被引量:36
1
作者 汤富酬 薛友纺 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期 167-172,共6页
双链RNA介导的遗传干涉的机制是1998年发现的。它通过双链RNA的介导特异性地降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默。到目前为止在真菌、拟南芥、线虫、锥虫、水螅、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等真核生物中都发现存在这一基... 双链RNA介导的遗传干涉的机制是1998年发现的。它通过双链RNA的介导特异性地降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默。到目前为止在真菌、拟南芥、线虫、锥虫、水螅、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等真核生物中都发现存在这一基因沉默机制。目前的研究表明,RNA干涉与植物中的共抑制(cosuppression)、真菌中的基因压制(quelling)很可能具有共同的基本分子机制。这也说明,很可能在进化的很早期阶段,生物就获得了这种机制。RNA干涉对于抵抗病毒入侵、抑制转座子活动等具有重要作用,对于生物体的发育和基因调控可能也有重要作用。 展开更多
关键词 RNA干涉 双链RNA 基因沉默 遗传干涉
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转基因植物内源基因与外源基因共抑制问题研究进展 预览 被引量:19
2
作者 李艳 李毅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期 1-5,共5页
在植物基因工程研究中心,有时外源转化基因和植物中同源的内源基因的表达均被抑制了,这种现象被称为共抑制。引起该现象的原因包括许多因素,有外源基因和与之同源的内源基因RNA的转录量,DNA的甲基化,T-DNA的结构形式,... 在植物基因工程研究中心,有时外源转化基因和植物中同源的内源基因的表达均被抑制了,这种现象被称为共抑制。引起该现象的原因包括许多因素,有外源基因和与之同源的内源基因RNA的转录量,DNA的甲基化,T-DNA的结构形式,RNA依赖的RNA聚合酶,非正常RNA以及非等位配对等。其具体机制仍不清楚,最近的研究结果表明转基因植物对病毒的抗性在某些方面与抑制有相似之处,两者都表现为外源转化基因转录水平很高而稳 展开更多
关键词 基因植物 共抑制 转录后 基因沉默 病毒抗性
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植物遗传转化中存在的问题及对策 预览 被引量:11
3
作者 章冰 卫志明 《植物生理学通讯》 CSCD 2000年第3期 245-251,共7页
关键词 植物遗传转化 体细胞变异 基因沉默 安全性
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RNA干涉分子机制研究进展 预览 被引量:14
4
作者 孙建国 廖荣霞 陈正堂 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期 678-681,共4页
RNA干涉(RNA interference,RNAi)是生物体内的一种通过双链RNA(dsRNA)来抵抗病毒入侵和抑制转座子活动的自然机制.双链RNA与同源mRNA互补结合而使特定基因失活,这一过程已经在包括拟南芥、线虫和真菌等多种模式生物中得到揭示.近来研究... RNA干涉(RNA interference,RNAi)是生物体内的一种通过双链RNA(dsRNA)来抵抗病毒入侵和抑制转座子活动的自然机制.双链RNA与同源mRNA互补结合而使特定基因失活,这一过程已经在包括拟南芥、线虫和真菌等多种模式生物中得到揭示.近来研究表明,21~25 nt的小干涉RNA(small interference RNA, siRNA)可介导哺乳动物细胞特异性基因沉默.RNAi具有高效性和高度特异性,可能成为关闭基因的新技术而在基因功能研究和疾病基因治疗中发挥重要作用. 展开更多
关键词 RNA干涉 分子机制 研究进展 基因沉默
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抗小麦黄花叶病毒转基因小麦的获得及病毒诱导的基因沉默 被引量:18
5
作者 董槿 何震天 +9 位作者 韩成贵 陈秀兰 张凌娣 刘伟华 韩月澎 王锦荣 翟亚锋 于嘉林 肖悦岩 刘仪 《科学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期763-767,共5页
利用Act1启动子和除草剂选择标记bar基因, 构建了含有小麦黄花叶病毒外壳蛋白基因的植物表达载体, 并采用基因枪法导入小麦品系. 经PCR和PCR-RFLP对转基因小麦T0代及T1代进行检测后, 对阳性植株的后代株系(T2 代)进行田间抗病性检测. ... 利用Act1启动子和除草剂选择标记bar基因, 构建了含有小麦黄花叶病毒外壳蛋白基因的植物表达载体, 并采用基因枪法导入小麦品系. 经PCR和PCR-RFLP对转基因小麦T0代及T1代进行检测后, 对阳性植株的后代株系(T2 代)进行田间抗病性检测. 结果表明, 外源基因可以在后代中遗传, 并且其中一个转基因株系的后代(P8-T2)对小麦黄花叶病毒呈现高度抗性. 经Western blot和RT-PCR检测发现, 抗病转基因小麦体内外壳蛋白基因在病毒感染后的表达水平出现明显下降, 认为所获得转基因小麦的抗性是由病毒诱导的基因沉默引起的. 展开更多
关键词 病毒诱导 小麦黄花叶病毒 外壳蛋白基因 基因小麦 抗病性 基因沉默 抗病机制
马铃薯Y病毒衣壳蛋白基因片段长度对RNA介导抗病性的影响 被引量:9
6
作者 朱俊华 竺晓平 +3 位作者 温孚江 白庆荣 朱常香 宋云枝 《中国科学:C辑》 CSCD 北大核心 2004年第1期23-30,共8页
在已证明转化马铃薯Y病毒(PVY)全长衣壳蛋白基因可获得高度抗病的转基因烟草、且这种抗病性为RNA介导抗病性的基础上,克隆了马铃薯Y病毒坏死株系衣壳蛋白基因(PVYN—CP)3′端202(1/4CP),417(1/2CP)和603bp(3/4CP)的部分基因片段(CP... 在已证明转化马铃薯Y病毒(PVY)全长衣壳蛋白基因可获得高度抗病的转基因烟草、且这种抗病性为RNA介导抗病性的基础上,克隆了马铃薯Y病毒坏死株系衣壳蛋白基因(PVYN—CP)3′端202(1/4CP),417(1/2CP)和603bp(3/4CP)的部分基因片段(CP202,CP417和CP603),并分别构建植物表达载体pROKⅡ—CP202,pROKⅡ—CP417和pROKⅡ-CP603.利用农杆菌介导方法转化烟草NC89.抗病性鉴定表明,转化1/2CP和3/4CP基因片段的转基因烟草均可获得抗病程度达到免疫的植株,而转化1/4CP的基因片段没有获得抗病植株.分子分析结果表明这种抗病性为RNA介导的抗病性,是转录后基因沉默的结果.研究表明,能够诱发RNA介导抗病性所需的PVY—CP基因的最短有效片段长度可能介于202和417bp之间.这一研究结果对改进利用转录后基因沉默策略来防治植物病毒病害以及研究转录后基因沉默机制具有意义. 展开更多
关键词 马铃薯 Y病毒 CP基因部分片段 基因烟草 RNA介导抗病性 基因沉默
RNA干涉及其应用前景 预览 被引量:18
7
作者 张利生 陈大元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期 341-344,共4页
RNA干涉是指由特定双链RNA(dsRNA)引起的转录后基因沉默现象.研究表明,Dicer断裂dsRNA产生的小干涉RNA可以抑制哺乳动物体细胞和胚胎中的基因的表达.RdRP在扩增RNAi中起着关键性的作用,RdRP活性复制较长的触发性dsRNA或以一种非引物的... RNA干涉是指由特定双链RNA(dsRNA)引起的转录后基因沉默现象.研究表明,Dicer断裂dsRNA产生的小干涉RNA可以抑制哺乳动物体细胞和胚胎中的基因的表达.RdRP在扩增RNAi中起着关键性的作用,RdRP活性复制较长的触发性dsRNA或以一种非引物的方式复制短的siRNA,即以siRNA为引物的RdRP反应使靶mRNA转变为dsRNA,同时复制触发性dsRNA.所有的产物又可作为Dicer的底物,起始RdRP级联反应.本文综述了RNAi可能的作用机制,并对RNAi在分析功能基因组、药物治疗等方面的应用前景进行了展望. 展开更多
关键词 RNA干涉 双链RNA DSRNA 转录 基因沉默 DICER酶 RdRP活性 功能基因 作用机制 RNAi
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RNA沉默机制及其抗病毒应用 预览 被引量:20
8
作者 牛颜冰 青玲 周雪平 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第2期 76-79,共4页
RNA沉默是发生在植物(转录后基因沉默或共抑制)、动物(RNA干扰)和真菌(消除作用)等真核生物细胞中的一种对外源遗传因子(转座子、转基因或病毒)的特异性和高效率的降解机制。随着对植物病毒分子遗传学认识的加深和对寄主防御系统研究的... RNA沉默是发生在植物(转录后基因沉默或共抑制)、动物(RNA干扰)和真菌(消除作用)等真核生物细胞中的一种对外源遗传因子(转座子、转基因或病毒)的特异性和高效率的降解机制。随着对植物病毒分子遗传学认识的加深和对寄主防御系统研究的深入,发现了许多控制植物病毒病的方法,不过迄今为止最为成功的是通过RNA沉默机制获取抗病毒工程植株。在陈述了RNA沉默机制的研究最新进展基础上,提出了如何充分利用该机制进行植物抗病毒转基因研究。 展开更多
关键词 RNA沉默 植物 抗病毒 基因沉默 RNA干扰
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RNA干扰技术的研究进展 预览 被引量:20
9
作者 秦玉新 蒙凌华 丁健 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期 421-424,共4页
RNA干扰是一项新的分子生物学技术,是外源和内源性双链RNA在生物体内诱导同源靶基因的mRNA特异性降解,从而导致转录后基因沉默的现象。尽管RNA干扰发现的时间较短,但由于其具有操作简单、成本低、特异性高和高效性等特点,因而发展... RNA干扰是一项新的分子生物学技术,是外源和内源性双链RNA在生物体内诱导同源靶基因的mRNA特异性降解,从而导致转录后基因沉默的现象。尽管RNA干扰发现的时间较短,但由于其具有操作简单、成本低、特异性高和高效性等特点,因而发展迅速,目前对于它的机制已有初步的了解,同时RNA干扰在功能基因组学以及疾病的基因干预治疗方面也有一定的进展。该文就RNA干扰技术的历史、作用机制、生物学意义及应用作简要概述。 展开更多
关键词 RNAI SIRNA miRNA RISC DICER 基因沉默
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RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α治疗骨肉瘤的实验研究 预览 被引量:17
10
作者 吴强 杨述华 +1 位作者 叶树楠 王锐英 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期 409-413,共5页
目的观察靶向缺氧诱导因子(HIF)-1α的短发夹状小干扰RNA基因转染对骨肉瘤生长的影响.方法针对HIF-1α构建短发夹状siRNA真核表达载体(pSilencer)-HIF并转染骨肉瘤细胞系(SaOS)-2 .骨肉瘤细胞置于缺氧诱导培养基中培养.逆转录-聚合酶链... 目的观察靶向缺氧诱导因子(HIF)-1α的短发夹状小干扰RNA基因转染对骨肉瘤生长的影响.方法针对HIF-1α构建短发夹状siRNA真核表达载体(pSilencer)-HIF并转染骨肉瘤细胞系(SaOS)-2 .骨肉瘤细胞置于缺氧诱导培养基中培养.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹沉淀观察HIF-1α的基因沉默效果.四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析检测细胞体外增殖活力,透射电镜,原位末端标记TUNEL法,Annexin V/PI双标记法检测细胞的凋亡.同时,通过裸鼠移植瘤模型观察HIF-1α基因沉默后对骨肉瘤体内治疗效果.结果测序证实成功构建HIF-1α的短发夹状siRNA真核表达载体pSilencer-HIF,转染骨肉瘤细胞后,HIF-1α基因表达显著抑制(90%).与对照组比较,pSilencer-HIF转染组骨肉瘤细胞缺氧状态下的增殖活性显著降低.缺氧培养72 h后,透射电镜、TUNEL法显示细胞典型凋亡特征,Annexin V/PI双标检测转染组细胞凋亡率为18.71%±0.98%,明显高于pSilencer-neo空载体转染组和未转染组(P<0.01).裸鼠移植瘤实验显示pSilencer-HIF转染组肿瘤生长减慢,成瘤率下降,肿瘤组织中可见大量坏死组织.结论靶向HIF-1α基因的短发夹状siRNA可以有效阻断骨肉瘤缺氧耐受转导通路,抑制骨肉瘤细胞的生长. 展开更多
关键词 HIF-1α 骨肉瘤细胞 转染 Α基因 治疗 观察 靶向 RNA干扰 基因沉默 小干扰RNA
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RNA沉默与植物病毒 预览 被引量:12
11
作者 郭兴启 朱常香 宋云枝 《生命科学》 CSCD 2002年第1期 9-13,共5页
植物中RNA沉默(RNAsilencing)亦称为转录后基因沉默(PTGS)或共抑制,是植物抵抗外来核酸(转座子、转基因或病毒)入侵,并保护自身基因组完整性的一种防御机制。RNA沉默是近十年来发现的植物界中普遍存在的现象,已成为植物分子生... 植物中RNA沉默(RNAsilencing)亦称为转录后基因沉默(PTGS)或共抑制,是植物抵抗外来核酸(转座子、转基因或病毒)入侵,并保护自身基因组完整性的一种防御机制。RNA沉默是近十年来发现的植物界中普遍存在的现象,已成为植物分子生物学领域的一个新的研究方向。对RNA沉默特点和机制的研究表明,植物病毒与(转基因)植物内发生的RNA沉默有着密切的联系,作者从病毒对RNA沉默的诱导、抑制、防御等方面,简述了RNA沉默与病毒的关系。并对病毒载体所诱导的RNA沉默在植物发育和基因组功能分析等方面的应用价值进行了讨论。 展开更多
关键词 RNA沉默 植物病毒 病毒诱导 基因沉默
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RNA干扰技术在哺乳动物中的应用 预览 被引量:13
12
作者 陈杰 白春学 张敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期 650-654,共5页
RNA干扰(RNAi)是生物界普遍存在的一种抵御外来基因和病毒感染的进化保守机制.RNAi是由双链RNA触发的转录后基因沉默机制,具有序列特异性,在哺乳动物细胞中,RNAi由21~23个核苷酸组成的双链RNA引发.小干扰RNA(siRNA)可以在体外合成或通... RNA干扰(RNAi)是生物界普遍存在的一种抵御外来基因和病毒感染的进化保守机制.RNAi是由双链RNA触发的转录后基因沉默机制,具有序列特异性,在哺乳动物细胞中,RNAi由21~23个核苷酸组成的双链RNA引发.小干扰RNA(siRNA)可以在体外合成或通过表达载体在哺乳动物细胞内合成.由于RNAi技术具有快速、简单和特异性强等特点,在基因功能研究、抗病毒治疗和抗肿瘤治疗等方面有广泛的应用前景. 展开更多
关键词 RNA干扰技术 哺乳动物 基因沉默 序列特异性 小干扰RNA
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RNA阻抑和基因沉默 被引量:6
13
作者 张明 邵宁生 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2002年第1期61-65,共5页
真核生物中,双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱导产生特异性基因沉默(gene silencing)的机制,被称为dsRNA介导的基因阻抑(dsRNA-mediated interference,RNAi), 简称RNA阻抑.RNAi现在被认为是真核生物对病毒、转基因和转座因子(trans... 真核生物中,双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱导产生特异性基因沉默(gene silencing)的机制,被称为dsRNA介导的基因阻抑(dsRNA-mediated interference,RNAi), 简称RNA阻抑.RNAi现在被认为是真核生物对病毒、转基因和转座因子(transposable elements)的防御机制.本文回顾了RNAi的研究历程,并介绍了RNAi的机制假说及其在技术应用方面的进展. 展开更多
关键词 RNA 双链 RNA阻抑 基因沉默 基因阻抑
RNAi及其在植物遗传改良中的应用 预览 被引量:16
14
作者 朱龙付 张献龙 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期 472-477,共6页
RNAi(RNA interfering)是由与靶基因同源的双链RNA引发的、在动植物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默.这种现象在动物、植物和真菌中广泛存在并被证实,因此可能是生物的发育调控及抗外源或内源侵染的一种普遍的生理机制.对RNAi的... RNAi(RNA interfering)是由与靶基因同源的双链RNA引发的、在动植物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默.这种现象在动物、植物和真菌中广泛存在并被证实,因此可能是生物的发育调控及抗外源或内源侵染的一种普遍的生理机制.对RNAi的研究是目前生物学领域研究的热点之一,近几年来该技术已经在功能基因组学、遗传学和医学等诸学科得到大量应用.本文将就RNAi的机制研究及其在植物遗传改良中的应用进行综述. 展开更多
关键词 RNAI 植物 遗传改良 基因沉默 RNA干涉
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RNA干扰技术的原理与应用 预览 被引量:10
15
作者 马鹏鹏 薛社普 韩代书 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期 201-207,共7页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)所引起的序列特异性基因沉默,是真核生物中一种非常保守的机制,它与协同抑制(cosuppression)、转座子沉默(transposon silencing)以及发育等许多重要的生物学过... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)所引起的序列特异性基因沉默,是真核生物中一种非常保守的机制,它与协同抑制(cosuppression)、转座子沉默(transposon silencing)以及发育等许多重要的生物学过程密切相关.RNA干扰依赖于小干扰RNA(small interference RNA, siRNA)与靶序列之间严格的碱基配对,具有很强的特异性,涉及众多基因和蛋白复合物,构成了一个以小RNA为核心的真核基因表达调控系统,它可以在染色质水平、转录水平、转录后水平和翻译水平参与基因表达的调节.RNA干扰技术为人们迅速、准确的剖析基因的功能,分析基因之间错综复杂的联系和相互作用提供了极为有用的工具,同时也为人们预防和治疗癌症和病毒疾病提供了新的思路. 展开更多
关键词 RNA干扰 双链RNA 小干扰RNA 基因沉默
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DNA甲基化与基因沉默及肿瘤 预览 被引量:12
16
作者 吕斌斌(综述) 彭剑雄(审校) 《国际检验医学杂志》 CAS 2006年第1期 52-54,57,共4页
DNA甲基化在胚胎发育及肿瘤演变过程中都扮演丁重要角色,相关方面的研究日益受到关注。现对近年来DNA甲基化的分子学基础及其与基因沉默和肿瘤关系的研究进行综述。
关键词 DNA甲基化 基因沉默 肿瘤
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miR-138对小鼠乳腺上皮细胞的作用及其调控的靶序列 预览 被引量:20
17
作者 王春梅 李庆章 李晔 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第7期 834-838,共5页
miRNA是一类长约20~25nt的内源性非编码蛋白的小RNA.miRNAs的作用遍及生命体的发生、生长、发育、分化和死亡等过程,但目前对miRNA在细胞中的确切功能和其如何发挥作用知之甚少.应用miRNA基因沉默技术,抑制小鼠乳腺上皮细胞miR-138的表... miRNA是一类长约20~25nt的内源性非编码蛋白的小RNA.miRNAs的作用遍及生命体的发生、生长、发育、分化和死亡等过程,但目前对miRNA在细胞中的确切功能和其如何发挥作用知之甚少.应用miRNA基因沉默技术,抑制小鼠乳腺上皮细胞miR-138的表达,应用荧光定量PCR、Western blot、细胞活力分析技术等分析mi-138的表达及miR-138对小鼠乳腺上皮细胞的影响,结果显示,miR-138抑制后细胞活性增强(P〈0.05),PRL-R蛋白表达增强(P〈0.05),信号转导通路分子STAT5、MAPK表达加强.研究认为,miR-138抑制小鼠乳腺上皮细胞的增殖.miR-138在乳腺上皮细胞调控的靶序列是PRL-R,抑制其表达而发挥作用.miR-138通过调控STAT5、MAPK信号转导通路而调控乳腺上皮细胞增殖. 展开更多
关键词 乳腺上皮细胞 miR-138 基因沉默
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多倍体植物的表观遗传现象 预览 被引量:10
18
作者 杨俊宝 彭正松 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期 335-342,共8页
表观遗传现象是指基因表达发生改变但不涉及DNA序列的变化,它存在于许多植物的多倍体化过程中,而且能够在代与代之间传递.表观遗传变异包括基因沉默、DNA甲基化、核仁显性、休眠转座子激活和基因组印记等方面.这种现象可能是由于基因组... 表观遗传现象是指基因表达发生改变但不涉及DNA序列的变化,它存在于许多植物的多倍体化过程中,而且能够在代与代之间传递.表观遗传变异包括基因沉默、DNA甲基化、核仁显性、休眠转座子激活和基因组印记等方面.这种现象可能是由于基因组间的相互作用直接诱发基因沉默或基因表达改变所致;也可能由DNA甲基化之外的组蛋白编码的改变引起;或者与甲基化不足、染色质重组或转座子激活等有关.表观遗传变异在提高基因表达的多样性,引起遗传学和细胞学上的二倍化,以及促进基因组间的相互协调等方面起着重要作用.文章综述了植物多倍体化过程中的表观遗传现象及其在多倍体植物基因组进化中的作用,并在此基础上提出了今后在这方面的研究途径. 展开更多
关键词 表观遗传 基因沉默 DNA甲基化 转座因子激活 基因组印记 基因组进化
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siRNA干扰大鼠神经元Nogo受体mRNA表达的时程研究 被引量:12
19
作者 张涛 袁文 +3 位作者 刘百峰 曹莉 肖林 陈公星 《中国脊柱脊髓杂志》 CSCD 2005年第10期 588-591,i0004,共5页
目的:观察大鼠Nogo受体(NgR)特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)在原代神经元干扰其mRNA表达的时程效果.方法:体外培养大鼠原代皮层和海马细胞,应用阳离子脂质体转染试剂转染针对2个基因片段(199和964位点)的大鼠NgR特异性si... 目的:观察大鼠Nogo受体(NgR)特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)在原代神经元干扰其mRNA表达的时程效果.方法:体外培养大鼠原代皮层和海马细胞,应用阳离子脂质体转染试剂转染针对2个基因片段(199和964位点)的大鼠NgR特异性siRNA和对照siRNA,分别于转染后24h、48h、72h和96h,应用实时荧光定量PCR检测NgR mRNA表达情况.结果:2对siRNA(siNgR199和siNgR964)均能够下调靶基因mRNA的表达水平,24h、48h、72h和96h,NgR mRNA表达分别为对照siRNA组的38.12%、12.47%、3.96%、18.4%(siNgR199)和49.54%、24.25%、13.17%、37.93%(siNgR964),与对照siRNA组比较有统计学意义(P<0.05).结论:NgR特异性siRNA能够在原代皮层和海马细胞下调靶基因mRNA的表达水平,且基因沉默效果在转染后3d最显著. 展开更多
关键词 NOGO受体 RNA干扰 基因沉默 实时荧光定量PCR
南方水稻黑条矮缩病毒S6编码一个沉默抑制子 预览 被引量:19
20
作者 卢嫣红 张金凤 +2 位作者 熊如意 徐秋芳 周益军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期2909-2917,共9页
【目的】分析南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)基因组S6编码的SP6蛋白的抑制子活性,明确SRBSDV是否编码RNA沉默抑制子来干扰植物的沉默。【方法】将分别含有SP6与GFP质粒的农杆菌共浸润转GFP基因的16c本氏烟纯合系,观察SP6对局部沉默... 【目的】分析南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)基因组S6编码的SP6蛋白的抑制子活性,明确SRBSDV是否编码RNA沉默抑制子来干扰植物的沉默。【方法】将分别含有SP6与GFP质粒的农杆菌共浸润转GFP基因的16c本氏烟纯合系,观察SP6对局部沉默和系统沉默的抑制作用;将含有SF6,GFP和dsGFP质粒的农杆菌三者共浸润,观察SP6对由dsRNA引起的沉默的抑制作用;在同一植株不同部位接种GFP和SP6,观察SP6对RNA沉默信号传导的影响;通过马铃薯x病毒(Potatao virus X,PVX)在本氏烟上表达SP6,观察SP6是否能增强PVX的致病性。【结果】SP6能抑制由GFP正义RNA介导的沉默,但其抑制作用较弱,仅能延缓局部沉默和系统沉默的产生。SP6能灭活RNA沉默信号,阻止沉默信号的长距离传导,回复GFP的沉默,但不能抑制由dsRNA引起的沉默。利用PVX在本氏烟上表达SP6能增强PVX的致病性。【结论】SP6是病毒编码的RNA沉默抑制子,在RNA沉默的起始和信号传导阶段起作用。 展开更多
关键词 南方水稻黑条矮缩病毒 SP6 基因沉默 抑制子
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