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克氏原螯虾sex-lethal基因的克隆与表达分析 认领
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作者 费佳敏 石林林 李艳和 《华中农业大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期120-128,共9页
为探究克氏原螯虾sex-lethal基因(Sxl)的功能与分子机制,采用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆获得4个克氏原螯虾Sxl cDNA序列,利用荧光定量PCR技术检测其在不同组织以及早期发育时期的表达情况。生物信息学分析发现,Pc... 为探究克氏原螯虾sex-lethal基因(Sxl)的功能与分子机制,采用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆获得4个克氏原螯虾Sxl cDNA序列,利用荧光定量PCR技术检测其在不同组织以及早期发育时期的表达情况。生物信息学分析发现,PcSxlβ和PcSxlδ比PcSxlγ多了一段77 bp的碱基序列,而PcSxlβ和PcSxlδ预测所得的氨基酸序列较PcSxlγ短。克氏原螯虾的Sxl氨基酸序列与红螯螯虾的序列相似性较高(75.76%)。保守结构域分析显示,这4种转录异构体序列预测的氨基酸序列都具有2个相同的高度保守的RRM结构域。表达分析结果显示,PcSxl在成年雄性克氏原螯虾的触角腺和鳃中表达量较高,在成年雌性中则是中肠和前肠的表达量较高,雌性卵巢中的表达量要显著高于雄性精巢。早期发育时期中,无节幼体时期的表达量最高,在蚤状幼体期表达量出现下降,但在出膜后第1天表达量又有所升高,随后整体则呈现出逐渐下降的趋势。以上结果表明克氏原螯虾PcSxl与其性别分化有关。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 Sxl基因 性别决定 性别调控基因 转录异构体 基因表达 单性养殖
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文章速递P53和Ki-67基因表达与膀胱癌分级、分期相关性的大样本回顾性研究 认领
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作者 郝鹏 胡海龙 +1 位作者 都吉海 王希路 《国际泌尿系统杂志》 2021年第1期84-87,共4页
目的探讨p53和Ki-67基因表达与膀胱癌病理分级和临床分期的关系。方法回顾性分析2013年1月至2015年1月在本院与天津医科大学第二医院收治的445例膀胱癌患者的临床资料,应用免疫组织化学染色的方法,对这些膀胱癌患者的病理切片进行p53和K... 目的探讨p53和Ki-67基因表达与膀胱癌病理分级和临床分期的关系。方法回顾性分析2013年1月至2015年1月在本院与天津医科大学第二医院收治的445例膀胱癌患者的临床资料,应用免疫组织化学染色的方法,对这些膀胱癌患者的病理切片进行p53和Ki47免疫组化染色,并将p53和Ki-67基因的免疫组化表达强度结果与患者的病理分级和临床分期进行分析。结果在445例膀胱癌患者中,435例患者测得P53免疫组化指标,440例患者测得Ki-67免疫组化指标.Sparman秩相关分析表明,P53和Ki-67阳性程度越大,患者膀胱癌的病理分级、临床分期越高(P<0.05)。其中p53、Ki-67与病理分级的相关系数分别为0.298、0.181,与临床分期的相关系数分别为0.143、0.103,均呈正相关。结论p53和Ki-67基因的表达强度与膀胱癌病理分级与临床分期密切相关,即阳性程度越大,病理分级、临床分期越高。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 基因 P53 Ki-67 基因表达
文章速递miR-212对疾病基因表达调控的研究进展 认领
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作者 龙富立 彭子明 +5 位作者 冯逢 林镛 张建玲 覃艳新 毛德文 韦艾凌 《中国当代医药》 2021年第2期26-29,共4页
miRNAs是存在于动植物中的一类RNA分子,每一个miRNA可以调节一个或多个基因,具有十分复杂的调节网络。根据现有研究,miRNA至少调节人类1/3的基因。miR-212是一种新发现的miRNA,它的表达在人类某些疾病的发生、发展过程中起到了非常重要... miRNAs是存在于动植物中的一类RNA分子,每一个miRNA可以调节一个或多个基因,具有十分复杂的调节网络。根据现有研究,miRNA至少调节人类1/3的基因。miR-212是一种新发现的miRNA,它的表达在人类某些疾病的发生、发展过程中起到了非常重要的作用,在阐释相关疾病的发病机制、筛选诊断标志物、疾病的治疗、新药研发、判断疾病预后等方面具有巨大的潜在研究价值。本文就miR-212在癌症、心血管疾病、神经退行性疾病等疾病中的作用作一综述,以资临床借鉴。 展开更多
关键词 miRNA miR-212 癌症 心血管疾病 神经退行性疾病 基因表达 基因调控
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CREPT在人脑胶质母细胞瘤组织中的表达及其与病人预后的关系 认领
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作者 王睿健 张文超 尹涛 《中国临床神经外科杂志》 2021年第1期20-22,25,共4页
目的探讨人脑胶质母细胞瘤(GBM)组织肿瘤高表达细胞周期相关蛋白(CREPT)的表达水平及其与病人预后的关系。方法收集2010年1月至2011年1月手术切除的GBM组织104例和2018年1~12月颅脑损伤内减压术中切除的正常脑组织40例,采用免疫组织化... 目的探讨人脑胶质母细胞瘤(GBM)组织肿瘤高表达细胞周期相关蛋白(CREPT)的表达水平及其与病人预后的关系。方法收集2010年1月至2011年1月手术切除的GBM组织104例和2018年1~12月颅脑损伤内减压术中切除的正常脑组织40例,采用免疫组织化学染色法检测CREPT的表达,根据染色情况将GBM分为高表达组和低表达组。GBM病人术后随访截止时间为2019年4月,记录总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)。采用多因素Cox比例回归风险模型分析GBM病人生存预后的影响因素。用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Log-rank检验。结果GBM组织CREPT高表达率(73.08%,76/104)明显高于正常脑组织(10.00%,4/40;P<0.05)。多因素Cox比例回归风险模型分析结果显示CREPT高表达是GBM病人OS和PFS较短的独立影响因素(P<0.05)。低表达组OS和PFS均明显高于高表达组(P<0.05)。结论人脑GBM组织CREPT呈高表达,与病人不良生存预后和肿瘤进展有关。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 肿瘤高表达细胞周期相关蛋白 CREPT 预后 基因表达
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N-myc下游调控基因1在肝细胞癌中的表达及其与预后的相关性 认领
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作者 郭晶晶 徐瀚峰 +2 位作者 朱传东 缪祎 郑勤 《东南国防医药》 2021年第1期21-27,共7页
目的肝细胞癌(HCC)是肝最常见的原发性恶性肿瘤之一。N-myc下游调控基因1(NDRG1)在肝癌中的作用尚存争议。文章旨在证实NDRG1在HCC患者中的表达及其预后价值、潜在的生物学功能以及对免疫系统的影响。方法选择TCGA数据库中的肝癌数据,包... 目的肝细胞癌(HCC)是肝最常见的原发性恶性肿瘤之一。N-myc下游调控基因1(NDRG1)在肝癌中的作用尚存争议。文章旨在证实NDRG1在HCC患者中的表达及其预后价值、潜在的生物学功能以及对免疫系统的影响。方法选择TCGA数据库中的肝癌数据,包括58例正常肝组织标本和407例肝癌标本及与之相应的临床资料,对NDRG1基因在正常肝组织和肝癌组织中的表达进行分析。使用GTEx数据库显示NDRG1在人类肝组织中的表达。利用HPA分析NDRG1蛋白在HCC的表达情况。根据NDRG1表达的中位数,将所有患者分为NDRG1低表达组和NDRG1高表达组,并分析2组的生存情况。分析NDRG1表达与组织学分级(G)、临床S分期、临床T分期相关性。通过GSEA富集分析KEGG通路,探讨NDRG1的生物学功能。使用TIMER和CIBERSORT来分析HCC中NDRG1与免疫浸润细胞的相关性。结果与正常肝组织相比,肝癌组织中NDRG1表达增加(P<0.001)。NDRG1表达与组织学分级(G)(P<0.001)、临床S分期(P=0.03)、临床T分期(P=0.018)呈正相关。NDRG1的高表达与较差的总生存率显著相关(P=0.005)。单因素Cox分析分析显示NDRG1高表达与较差的总生存率显著相关(P<0.001)。多因素Cox分析分析表明,高NDRG1表达是独立危险因素,与肝细胞癌患者的总生存期密切相关(P<0.001)。通过GSEA分析,发现NDRG1可能通过DNA修复、E 2 F、MYC-V 1、G 2 M检查点、P53通路、TGF-β通路等途径调控肿瘤的发生发展。TIMER和CIBERSORT分析显示NDRG1的高表达与M 0巨噬细胞呈正相关。结论NDRG1在肝癌组织中高表达,提示预后不佳。可能通过肿瘤免疫浸润细胞改变肿瘤微环境促进肝癌的发生发展。NDRG1可作为HCC预后的生物学标志物。 展开更多
关键词 N-myc下游调控基因1 肝细胞癌 基因表达 预后
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克氏原螯虾PcDsx基因的克隆及表达分析 认领
6
作者 石林林 陈家豪 +3 位作者 石瑞雪 费佳敏 张龙 李艳和 《华中农业大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期129-136,共8页
为阐明克氏原螯虾(Procambarus clarkii)doublesex(PcDsx)的功能,采用RACE技术克隆获得PcDsx cDNA序列,利用qRT-PCR检测该基因的表达情况。生物信息学分析结果显示,该基因cDNA全长1584 bp,包括243 bp 5′UTR、765 bp ORF(编码254 aa)和5... 为阐明克氏原螯虾(Procambarus clarkii)doublesex(PcDsx)的功能,采用RACE技术克隆获得PcDsx cDNA序列,利用qRT-PCR检测该基因的表达情况。生物信息学分析结果显示,该基因cDNA全长1584 bp,包括243 bp 5′UTR、765 bp ORF(编码254 aa)和576 bp 3′UTR;PcDsx蛋白包含1个保守的DM结构域,与东方刺龙虾(Sagmariasus verreauxi)SvDsx的DM结构域相似性较高。基因表达分析结果显示,PcDsx广泛表达于成年克氏原螯虾的各组织中,其中克氏原螯虾触角腺中该基因的相对表达量最高,性腺和肌肉中的相对表达量也较高,并且发现该基因在成年雌虾多种组织中的表达与相应雄虾组织中的表达存在显著性差异;克氏原螯虾早期发育不同时期表达分析结果表明,PcDsx的表达水平在出膜后3 d达到一个高峰,而幼虾中PcDsx的最高表达分别出现在出膜后41 d和115 d,此外,该基因在出膜后期雌雄幼虾中的表达亦表现出显著性差异。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 Dsx 性别决定 分子克隆 基因表达 单性养殖 性别调控基因
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虹鳟spindlin基因克隆及不同倍性的表达分析 认领
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作者 史秀兰 黄天晴 +5 位作者 徐革锋 邹作宇 谷伟 程琳 刘晨斌 王炳谦 《水生生物学报》 CAS 北大核心 2021年第1期14-21,共8页
spindlin基因是减数分裂纺锤体相关因子,为了研究spindlin基因在二倍体和三倍体雌性虹鳟减数分裂过程中出现的差异,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得spindlin基因cDNA 4529 bp(GenBank登录号:MN378564),其中3′非编码区(UTR)和5′非... spindlin基因是减数分裂纺锤体相关因子,为了研究spindlin基因在二倍体和三倍体雌性虹鳟减数分裂过程中出现的差异,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得spindlin基因cDNA 4529 bp(GenBank登录号:MN378564),其中3′非编码区(UTR)和5′非编码区(UTR)分别长3662 bp和141 bp,开放阅读框(ORF)长726 bp,编码241个氨基酸,该蛋白质序列的相对分子量为28.3 kD,理论等电点值为5.94,无跨膜结构。同源性分析表明,虹鳟(Oncorhynchus mykiss)与银大马哈鱼(Oncorhynchus kisutch)同源最高,高达99.59%。系统发育进化树显示,虹鳟与大鳞大马哈鱼(Oncorhynchus tshawytscha)和红点鲑(Salvelinus alpinus),聚为一支。实时荧光定量(RT-PCR)结果显示,spindlin基因在二倍体雌性虹鳟卵巢、肾、肝、脾、肌、鳃、心、眼、肠和鳍组织中均有表达,其中,在卵巢中的表达量极显著高于其他组织(P<0.01)。对于二倍体雌性虹鳟,在受精后240—300d(days post fertilization,dpf)发育阶段,spindlin基因在卵巢组织中的相对表达量显著下降。对于三倍体雌性虹鳟,该基因在240—330 dpf阶段的表达量显著上升。在同一发育阶段中,spindlin基因在二倍体雌性虹鳟卵巢中的表达量较三倍体雌性虹鳟相对较高,且均存在极显著差异(P<0.01)。通过免疫组化结果发现,二倍体雌性虹鳟在240 dpf阶段,Spin蛋白在初级卵母细胞核内信号最强,在270—330 dpf阶段逐渐减弱;三倍体虹鳟卵巢在240—330 dpf发育阶段,在卵原细胞中信号逐渐增强。减数分裂异常是性腺败育的关键原因,研究结果表明三倍体虹鳟在减数分裂过程中出现异常与spindlin基因的低表达有关,这可能是卵巢发育阻滞的原因之一。 展开更多
关键词 虹鳟 spindlin 基因克隆 基因表达 免疫组化
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外源诱导姬松茸麦角甾醇的合成 认领
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作者 范秀芝 姚芬 +2 位作者 殷朝敏 史德芳 高虹 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2021年第1期65-72,共8页
为提高姬松茸中麦角甾醇含量,本研究借助液体培养,通过添加外源诱导物提高菌丝中麦角甾醇含量。分别以茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)和水杨酸(salicylic acid,SA)为外源诱导物,对其添加量、添加时间以及诱导时长进行优化,并通过荧... 为提高姬松茸中麦角甾醇含量,本研究借助液体培养,通过添加外源诱导物提高菌丝中麦角甾醇含量。分别以茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)和水杨酸(salicylic acid,SA)为外源诱导物,对其添加量、添加时间以及诱导时长进行优化,并通过荧光定量PCR对诱导条件下参与麦角甾醇合成的相关基因表达量进行分析。结果表明,两种诱导物对姬松茸菌丝中麦角甾醇的最佳诱导条件分别为菌丝培养到第8 d加入70.00μmol/L MeJA和第6 d加入10.00μmol/L SA,并分别继续培养2 d。优化条件下获得的菌丝中麦角甾醇含量分别为2.35 mg/g和2.43 mg/g,比对照组分别增加了147.37%和155.79%。根据参与麦角甾醇合成的基因表达谱分析推测其诱导机制可能是MeJA和SA直接或间接的启动了麦角甾醇合成上游关键酶基因的表达,并通过参与合成代谢相关酶的相互作用来实现麦角甾醇的合成调控。通过短时间外源诱导培养获得菌丝体中麦角甾醇含量已超过子实体中的,因此可替代子实体开展麦角甾醇的相关研究。 展开更多
关键词 姬松茸 麦角甾醇 茉莉酸甲酯 水杨酸 基因表达
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三维胶原HepaRG微球的建立及其体外功能特征 认领
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作者 黎少 梁永康 +1 位作者 高毅 彭青 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第16期2541-2547,共7页
背景:近年来的一些研究显示,HepaRG细胞三维培养模型可较好地模仿体内微环境,与二维培养相比显示出更好的肝分化和功能情况。目的:选择HepaRG人源肝祖细胞制备三维胶原微球,评价胶原微球内细胞适应性培养和功能表达情况。方法:以胶原蛋... 背景:近年来的一些研究显示,HepaRG细胞三维培养模型可较好地模仿体内微环境,与二维培养相比显示出更好的肝分化和功能情况。目的:选择HepaRG人源肝祖细胞制备三维胶原微球,评价胶原微球内细胞适应性培养和功能表达情况。方法:以胶原蛋白作为基质材料,选择HepaRG和HepG2细胞分别建立三维胶原细胞微球模型,形成稳定的细胞球体,以HepaRG普通微球、HepG2普通微球、HepaRG二维培养、HepG2细胞二维培养为对照。培养1,6,12 d后,死活染色法观察细胞存活情况;培养1,6,12,16d后,检测各组上清尿素合成与CYP3A4分泌量;培养12d后,采用qPCR检测CYP3A4、CYP1A2、UGT1A1、CPS1mRNA相对表达,Western Blot检测肝细胞标志物白蛋白和CYP3A4蛋白表达水平。结果与结论:①连续培养12 d的活死染色显示,三维胶原微球内的活细胞数量较多,死细胞较少,具有较高的细胞活率,并且Hepa RG三维胶原微球内的细胞呈现出多个细胞簇紧密连接的交联结构;②Hepa RG三维胶原微球培养1,6,12 d后的尿素含量高于Hepa RG二维培养(P<0.05),Hep G2三维胶原微球培养1,6,12,16 d后的尿素含量高于Hep G2二维培养(P<0.05),Hepa RG三维胶原微球培养1,6,12 d后的CYP3A4分泌量高于Hepa RG二维培养(P<0.05),Hep G2三维胶原微球培养6,12 d后的CYP3A4分泌量高于Hep G2二维培养(P<0.05);③Hepa RG三维胶原微球内的CYP3A4、CYP1A2、UGT1A1和CPS1 mRNA相对表达高于Hepa RG二维细胞(P<0.05),Hep G2三维胶原微球内的CYP1A2相对表达高于Hep G2二维培养(P<0.05);④Hepa RG三维胶原微球内的白蛋白、CYP3A4蛋白表达水平高于Hep G2三维胶原微球、普通微球、二维培养(P<0.05);⑤结果表明,Hepa RG三维胶原微球具有高表达的肝功能水平,可为体外药物代谢评价、组织工程等应用提供研究参考。 展开更多
关键词 材料 HepaRG细胞 三维培养 胶原微球 细胞表型 细胞色素P450酶系 尿素合成 基因表达
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越橘VcCAX2基因的克隆与生物信息学及其在Cd胁迫下的表达分析 认领
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作者 陈少鹏 庄倩倩 +1 位作者 段肖琪 刘浚蓉 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第1期111-117,共7页
越橘(Vaccinium ssp.)具有较高的抗污染能力,它是一种可成功应用于酸性—重金属复合污染土壤的优势树种。目前对于越橘重金属体内转运调节功能尚不清楚。离子交换蛋白(calcium exchanger, CAX)负责液泡膜上阳离子的运输,其中CAX2 (Calci... 越橘(Vaccinium ssp.)具有较高的抗污染能力,它是一种可成功应用于酸性—重金属复合污染土壤的优势树种。目前对于越橘重金属体内转运调节功能尚不清楚。离子交换蛋白(calcium exchanger, CAX)负责液泡膜上阳离子的运输,其中CAX2 (Calcium exchanger 2)参与细胞内的镉(cadmium, Cd)离子运输。因此,本研究通过对越橘Vc CAX2基因进行克隆,并采用模拟盆栽法对越橘进行不同浓度的镉胁迫处理试验,分析Vc CAX2基因的表达量,以期为阐述越橘体内重金属调节机制的研究提供借鉴。结果表明:Vc CAX2基因全长1 329 bp,编码443个氨基酸,Vc CAX2基因编码的蛋白质可能位于细胞质中;根据系统发育分析,Vc CAX2与葡萄(Vitis vinifera) CAX2的亲缘关系较近;Vc CAX2基因在越橘根系中表达量随着Cd胁迫浓度的提高呈现增加的趋势。这些结论为越橘重金属体内转运调节机制的研究提供了思路。 展开更多
关键词 越橘(Vaccinium ssp.) 镉(CD) VcCAX2 生物信息学 基因表达
绣球花花色相关基因HmF3H的克隆及其表达分析 认领
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作者 薛超 韩纪盈 +5 位作者 彭继庆 杨雨禾 肖惠玲 黄石琦 董旭杰 曹福样 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第1期59-64,共6页
花色是植物重要的观赏性状之一,而黄烷酮羟化酶是植物花色素物质积累的关键酶,对植物花色差异具有重要影响。本研究利用PCR技术从盛花期蓝色花绣球品种‘无尽夏’不孕花中克隆获得了Hm F3H基因的全长序列,该基因的ORF序列长度为1 095 bp... 花色是植物重要的观赏性状之一,而黄烷酮羟化酶是植物花色素物质积累的关键酶,对植物花色差异具有重要影响。本研究利用PCR技术从盛花期蓝色花绣球品种‘无尽夏’不孕花中克隆获得了Hm F3H基因的全长序列,该基因的ORF序列长度为1 095 bp,编码364个氨基酸,编码蛋白的理论分子量为41.08 k D,理论等电点为5.48,为亲水性蛋白,该蛋白属于PLNO2515超家族成员,具有2-酮戊二酸双加氧酶结构域。系统进化树分析表明,该蛋白与咖啡树和佛手瓜的亲缘关系最近。实时定量PCR分析表明,Hm F3H基因在绣球花不同组织器官中均有表达,红色绣球品种‘粉黛’盛花期不孕花比蓝色绣球品种‘无尽夏’盛花期不孕花中表达量高,说明Hm F3H基因对绣球花花色差异形成具有一定影响。本研究获得了绣球花Hm F3H基因序列及其表达情况,为探讨绣球花品种花色差异形成机制具有一定指导意义。 展开更多
关键词 绣球花(Hydrangea macrophylla) 花色 F3H 基因表达
唾液乳杆菌M18-6体外抗氧化功能评价及其机制探讨 认领
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作者 董晨阳 张红星 +3 位作者 贾宇 谢远红 刘慧 金君华 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2021年第1期132-137,共6页
分别检测了唾液乳杆菌M18-6菌悬液、无细胞上清液及细胞内容物的体外抗氧化功能指标,包括DP-PH自由基清除率、抑制亚油酸过氧化率、羟自由基(·OH)清除率、抗氧化相关酶活力等,并结合菌株基因组信息,利用实时荧光定量PCR,检测菌株... 分别检测了唾液乳杆菌M18-6菌悬液、无细胞上清液及细胞内容物的体外抗氧化功能指标,包括DP-PH自由基清除率、抑制亚油酸过氧化率、羟自由基(·OH)清除率、抗氧化相关酶活力等,并结合菌株基因组信息,利用实时荧光定量PCR,检测菌株中11个抗氧化功能相关的基因在mRNA上的表达水平,以期对菌株体外抗氧化功能进行全面评价,并从分子水平进一步探讨其抗氧化的机理。结果显示,唾液乳杆菌M18-6无细胞上清液清除DPPH自由基和·OH的清除能力、抑制亚油酸过氧化率的能力均显著高于鼠李糖乳酸杆菌LGG(P<0.05),在菌株无细胞上清液中检测到较强的谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性,表明唾液乳杆菌M18-6无细胞上清液中有较强的抗氧化能力。在2.5 mmol/L H_2O_2胁迫下,菌株的NADH氧化酶和超氧化物歧化酶编码基因在mRNA上表达水平分别上调了6.2和4.5倍,硫氧还蛋白系列的基因(trx A1、trx A2、trx A3、trx)和过氧化氢酶基因表达水平也均上调2倍以上,推测唾液乳杆菌M18-6可能通过上调NADH氧化酶基因与硫氧还蛋白系统相关基因表达,激活硫氧还蛋白系统,通过上调sod和cat基因表达水平,提高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的酶活力,发挥抗氧化作用。 展开更多
关键词 唾液乳杆菌 抗氧化功能 抗氧化机理 基因表达
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慢性寒冷应激对绵羊体增重、血清免疫和抗氧化机能的影响 认领
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作者 石璐璐 王哲奇 +4 位作者 徐元庆 毛晨羽 郭世伟 金晓 史彬林 《动物营养学报》 CAS 北大核心 2021年第1期397-408,共12页
本试验旨在探究慢性寒冷应激对绵羊体增重、血清免疫和抗氧化机能的影响。选取体重为(55.50±0.80)kg、毛丛长度为(11.60±1.47)cm的3岁杜蒙杂交母羊18只,随机分为3组:舍内加热组(对照组)、舍内组和舍外组,每组6只。试验共28 d... 本试验旨在探究慢性寒冷应激对绵羊体增重、血清免疫和抗氧化机能的影响。选取体重为(55.50±0.80)kg、毛丛长度为(11.60±1.47)cm的3岁杜蒙杂交母羊18只,随机分为3组:舍内加热组(对照组)、舍内组和舍外组,每组6只。试验共28 d,每天记录各组试验羊的采食量,并于试验第1、14和28天称重,计算平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI);于试验第14和28天进行颈静脉采血,分离血清并收集白细胞,测定免疫、抗氧化指标及相关基因相对表达量。结果表明:与对照组相比,1)舍外组绵羊的ADG显著降低(P<0.05);2)在试验第14天,舍外组血清白细胞介素(IL)-1含量和白细胞中IL-1β、IL-2基因相对表达量显著降低(P<0.05),舍内组血清IL-1含量和白细胞中IL-1β基因相对表达量显著降低(P<0.05);在试验第28天,舍外组血清免疫球蛋白(Ig)G、IL-2含量显著下降(P<0.05),血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和白细胞中其基因相对表达量显著升高(P<0.05),舍内组血清IL-2含量显著下降(P<0.05);3)在试验第14天,舍外组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和白细胞中GPx、超氧化物歧化酶1(SOD1)基因相对表达量显著下降(P<0.05),血清丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);在试验第28天,舍外组血清过氧化氢酶(CAT)、GPx、T-SOD活性和总抗氧化能力(T-AOC)及白细胞中GPx、超氧化物歧化酶2(SOD2)基因相对表达量显著下降(P<0.05),而白细胞中CAT、核转录因子2(Nrf2)基因相对表达量和血清MDA含量显著升高(P<0.05),舍内组血清T-AOC及CAT活性和白细胞中其基因相对表达量显著下降(P<0.05)。综上所述,慢性寒冷应激能够降低绵羊的体增重,抑制机体血清免疫和抗氧化水平,而安置供暖设备的保温圈舍可以显著缓解这种负面影响。 展开更多
关键词 慢性寒冷应激 绵羊 免疫水平 抗氧化能力 基因表达
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氨氮胁迫下饥饿与复投喂对黄颡鱼肝脏中脂质代谢相关酶活性及相关基因表达的影响 认领
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作者 刘嘉欣 张木子 +3 位作者 黎明 谢雨欣 钱云霞 王日昕 《动物营养学报》 CAS 北大核心 2021年第1期436-447,共12页
为了研究氨氮胁迫下饥饿与复投喂对黄颡鱼脂质代谢的影响,将360尾黄颡鱼幼鱼[初始体重为(14.95±0.03)g]随机分配到12个养殖桶中,每桶30尾。对照组人工饱食投喂42 d,试验组饥饿14 d后恢复投喂28 d。对照组和试验组分别被暴露到总氨... 为了研究氨氮胁迫下饥饿与复投喂对黄颡鱼脂质代谢的影响,将360尾黄颡鱼幼鱼[初始体重为(14.95±0.03)g]随机分配到12个养殖桶中,每桶30尾。对照组人工饱食投喂42 d,试验组饥饿14 d后恢复投喂28 d。对照组和试验组分别被暴露到总氨氮浓度为0(低氨氮处理,正常养殖环境)和5.70 mg/L(高氨氮处理,氨氮胁迫)的水体中,每组分配3桶试验鱼。结果显示:饥饿14 d后,高氨氮处理黄颡鱼肝脏中6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)、脂肪酸合酶(FAS)活性以及6PGD、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、FAS、胆固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因的mRNA相对表达量显著低于低氨氮处理(P<0.05),而肝脏中肉碱棕榈酰转移酶(CPT)、脂蛋白脂酶(LPL)活性以及肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)和LPL基因的mRNA相对表达量则显著高于低氨氮处理(P<0.05);在氨氮胁迫或正常养殖环境下,饥饿14 d后,试验组黄颡鱼肝脏中6PGD、FAS活性以及6PGD、G6PD、FAS、SREBP-1和PPARγ基因的mRNA相对表达量显著低于对照组(P<0.05),而CPT、LPL活性以及PPARα、CPT1和LPL基因的mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05);恢复投喂28 d后,高氨氮处理黄颡鱼肝脏中6PGD、FAS活性以及6PGD、G6PD、FAS和PPARα基因的mRNA相对表达量显著低于低氨氮处理(P<0.05),而肝脏中CPT、LPL活性以及CPT1和LPL基因的mRNA相对表达量则显著高于低氨氮组(P<0.05);在氨氮胁迫或正常养殖环境下,恢复投喂28 d后,试验组黄颡鱼肝脏中6PGD活性以及6PGD和G6PD基因的mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05),而肝脏中LPL活性显著低于对照组(P<0.05);此外,在氨氮胁迫下,试验组黄颡鱼肝脏中FAS、SREBP-1和PPARγ基因的mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05),而LPL基因的mRNA相对表达量则显著低于对照组(P<0.05)。综上可知,氨氮胁迫和饥饿胁迫均会促� 展开更多
关键词 黄颡鱼 氨氮胁迫 饥饿胁迫 复投喂 脂质代谢 酶活性 基因表达
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山羊p300基因生物信息学分析及其在主要器官中的表达 认领
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作者 李晓璇 童旭 +7 位作者 张丹丹 张冰 申屠璐燕 孙梦娟 齐昕 宁伟 张运海 曹祖兵 《浙江农业科学》 2021年第1期159-163,共5页
为探讨山羊p300基因的基因组特征及其在主要器官中的表达,本研究从染色体定位、基因结构、序列比对等方面对p300基因进行生物信息学分析,并通过实时定量PCR技术检测了p300基因在三月龄胎羊八种不同器官的表达情况。实验表明,p300基因定... 为探讨山羊p300基因的基因组特征及其在主要器官中的表达,本研究从染色体定位、基因结构、序列比对等方面对p300基因进行生物信息学分析,并通过实时定量PCR技术检测了p300基因在三月龄胎羊八种不同器官的表达情况。实验表明,p300基因定位于5号染色体,包含31个外显子,跨越长度63766 bp,mRNA总长9571 bp,CDS全长7235 bp,编码2411个氨基酸。p300在物种间保守性较高,其中山羊与绵羊同源性最高。此外,p300在山羊的8种器官中均有表达,且在心脏中相对表达量最高。 展开更多
关键词 山羊 P300 主要器官 生物信息学 基因表达
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仿刺参SARM基因的克隆、表达和功能研究 认领
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作者 孙红娟 陈仲 +6 位作者 贺迪 高杉 王摆 关晓燕 蒋经伟 董颖 周遵春 《水产科学》 CAS 北大核心 2021年第1期1-9,共9页
采用RACE方法克隆了仿刺参TLR信号通路MyD88非依赖途径接头分子SARM,命名为AjSARM。AjSARM基因的序列全长3874 bp,开放阅读框为2412 bp,编码803个氨基酸。通过SMART软件对AjSARM蛋白进行蛋白结构预测,发现AjSARM蛋白由2个SAM结构域和1个... 采用RACE方法克隆了仿刺参TLR信号通路MyD88非依赖途径接头分子SARM,命名为AjSARM。AjSARM基因的序列全长3874 bp,开放阅读框为2412 bp,编码803个氨基酸。通过SMART软件对AjSARM蛋白进行蛋白结构预测,发现AjSARM蛋白由2个SAM结构域和1个C端TIR结构域组成。采用实时荧光定量PCR的方法检测AjSARM基因在仿刺参发育不同时期的表达量,发现在小耳幼虫期开始高表达,神经发育也是从这一时期开始的,表明AjSARM蛋白在仿刺参的发育过程中发挥了重要作用。仿刺参体腔细胞经过4种病原菌(灿烂弧菌、假交替单胞菌、希瓦氏菌和蜡样芽孢杆菌)刺激后,在灿烂弧菌、假交替单胞菌和希瓦氏菌刺激组,AjSARM基因在4 h和24 h的表达均受到抑制,然而在蜡样芽孢杆菌组,24 h表达上调。除了希瓦氏菌组外,其他3个组的AjSARM基因在96 h表达量达到最高。AjSARM在应对不同病原菌刺激后不同时间点所表现出的动态表达模式表明,它参与了仿刺参体腔细胞免疫应答的过程。通过对AjSARM的结构以及在不同发育阶段和不同病原菌刺激后的表达模式进行分析,探索仿刺参MyD88非依赖途径接头分子SARM的功能,可以为棘皮动物的发育和免疫系统进化研究提供参考。 展开更多
关键词 仿刺参 SARM 结构分析 发育阶段 免疫刺激 基因表达
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红鳍东方鲀3个白介素基因的序列特征及表达分析 认领
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作者 杨旭 吴东舒 +3 位作者 华昕彤 李荣 吕伟 姜晨 《水产科学》 CAS 北大核心 2021年第1期64-71,共8页
本试验分析体质量(190.34±2.13)g的红鳍东方鲀白介素基因IL-1b、IL-8和IL-10的序列特征,检测其在红鳍东方鲀脑、鳃、心脏、肌肉、肝脏和脾脏中的表达,以及每尾红鳍东方鲀注射密度1×10^7 cfu/mL的哈维氏弧菌菌液0.1 mL后0、12... 本试验分析体质量(190.34±2.13)g的红鳍东方鲀白介素基因IL-1b、IL-8和IL-10的序列特征,检测其在红鳍东方鲀脑、鳃、心脏、肌肉、肝脏和脾脏中的表达,以及每尾红鳍东方鲀注射密度1×10^7 cfu/mL的哈维氏弧菌菌液0.1 mL后0、12、24、48 h在肝脏和脾脏中的表达。试验结果表明,IL-1b、IL-8和IL-10基因的序列全长分别为771、822 bp和844 bp。3个基因在健康成鱼脑、鳃、心脏、肌肉、肝脏、脾脏中均有表达,其中肝脏和脾脏表达显著(P<0.05)。感染哈维氏弧菌后12 h,IL-1b基因在肝脏中显著上调,12 h和48 h在脾脏中显著升高(P<0.05)。感染哈维氏弧菌后12 h和24 h IL-8基因在肝脏和脾脏中均显著上调(P<0.05);而感染后24 h和48 h IL-10基因在肝脏中显著升高,在脾脏中12 h和48 h显著升高(P<0.05)。笔者首次探讨红鳍东方鲀IL-1b、IL-8和IL-10基因的序列特性及表达特征,为研究3个基因的原核表达提供了试验信息,将为进一步深入探究重组蛋白活性及其在红鳍东方鲀健康养殖中的应用奠定基础。 展开更多
关键词 红鳍东方鲀 IL-1B IL-8 IL-10 哈维氏弧菌 基因表达
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谷子丙酮酸磷酸双激酶基因(SiPPDK1)对非生物逆境的响应 认领
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作者 杜艳伟 王高鸿 +6 位作者 李颜方 赵根有 阎晓光 王振华 王玉文 余爱丽 赵晋锋 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第1期13-21,共9页
通过序列比对在谷子基因组中鉴定出一个PPDK基因,命名为Si PPDK1。为揭示该基因对逆境胁迫的响应,本研究通过对Si PPDK1的基因结构、蛋白特征、功能、启动子区域顺势元件、亚细胞定位、进化特征等进行了系统的分析和预测。荧光实时定量... 通过序列比对在谷子基因组中鉴定出一个PPDK基因,命名为Si PPDK1。为揭示该基因对逆境胁迫的响应,本研究通过对Si PPDK1的基因结构、蛋白特征、功能、启动子区域顺势元件、亚细胞定位、进化特征等进行了系统的分析和预测。荧光实时定量PCR检测了该基因在苗期不同逆境、关键生育期干旱以及不同光照条件下的表达。结果表明该基因位于谷子9号染色体,含有17个内含子,有2个可变剪切。功能域分析和多序列比对发现Si PPDK1蛋白具有非常保守的序列结构,并且与其它植物PPDK蛋白非常相似。q RT-PCR表达谱分析表明Si PPDK1基因在苗期被PEG、ABA、Na Cl和低温胁迫强烈诱导。进一步研究表明Si PPDK1基因在拔节、抽穗和灌浆期干旱和不同光照强度条件下均参与了对干旱和光照的胁迫响应,推测该基因参与了谷子对非生物逆境的应答,尤其在抽穗期干旱和光照胁迫应答中起重要作用。 展开更多
关键词 谷子 丙酮酸磷酸双激酶 非生物逆境 基因表达
广东虫草Zn(Ⅱ)2Cys6转录因子TgPRO1克隆及表达分析 认领
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作者 程慧娇 张成花王刚正 +2 位作者 习平根 邓旺秋 李泰辉 《食用菌学报》 北大核心 2021年第1期22-29,共8页
通过克隆测序获得广东虫草(Tolypocladium guangdongense)PRO1(TgPRO1)序列并对其相关序列进行分析,进一步利用定量PCR研究子实体发育不同时期以及菌丝体在不同光照(红光、绿光、蓝光、白光、黑暗)、温度处理下TgPRO1表达情况。结果表明... 通过克隆测序获得广东虫草(Tolypocladium guangdongense)PRO1(TgPRO1)序列并对其相关序列进行分析,进一步利用定量PCR研究子实体发育不同时期以及菌丝体在不同光照(红光、绿光、蓝光、白光、黑暗)、温度处理下TgPRO1表达情况。结果表明:TgPRO1长度为2135 bp,含有一个内含子,其CDS全长为2010 bp,编码669个氨基酸。蛋白同源性分析表明TgPRO1蛋白序列与已报道的PRO1蛋白序列高度相似。TgPRO1启动子区包含茉莉酸甲酯、光、植物激素响应元件等多种顺式作用元件。与菌丝期比较,TgPRO1在原基期表达量最高;不同光照条件下培养时,黑暗条件TgPRO1表达量较高;与23℃处理3 h比较,17℃处理3 h时TgPRO1表达量显著上调。 展开更多
关键词 广东虫草 PRO1 启动子分析 同源聚类分析 基因表达
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不同浓度镉对烟草幼苗生长发育及生长素相关基因表达的影响 认领
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作者 罗勇 焦桂珍 +3 位作者 刘胜波 魏跃伟 邵惠芳 贾宏昉 《中国农业科技导报》 CAS 北大核心 2021年第1期58-65,共8页
为了探究镉胁迫对烟草生长发育的影响及其调控机制,以DR5∷GUS云烟87转基因纯合株系作为供试材料,采用营养液水培法,设置0、5、10、20、40μmol·L^-1共5种镉浓度,研究不同浓度镉处理下烟草幼苗生物量、叶绿素含量、抗氧化能力、镉... 为了探究镉胁迫对烟草生长发育的影响及其调控机制,以DR5∷GUS云烟87转基因纯合株系作为供试材料,采用营养液水培法,设置0、5、10、20、40μmol·L^-1共5种镉浓度,研究不同浓度镉处理下烟草幼苗生物量、叶绿素含量、抗氧化能力、镉含量、生长素分布及水平变化,并检测生长素合成(NtYUCCA4、NtYUCCA6、NtYUCCA8、NtYUCCA9)和生长素极性运输(NtPIN1a、NtPIN1c、NtPIN4、NtPIN9)相关基因的表达差异。结果显示,随着供镉水平的提高,烟苗中镉含量显著增加,镉胁迫对烟草幼苗的毒害作用逐渐加大。与对照相比,在40μmol·L^-1的镉胁迫下,烟苗的生物量显著下降73.1%,叶绿素含量显著降低75.5%,地上部和地下部生长素含量分别显著下降59.6%和84.5%,生长素相关基因NtYUCCA4、NtYUCCA6、NtYUCCA8、NtYUCCA9和NtPIN1a、NtPIN1c、NtPIN4、NtPIN9相对表达量均显著降低,丙二醛(MDA)含量显著升高。镉胁迫下,参与合成生长素的NtYUCCA基因家族与生长素极性运输蛋白基因NtPINs家族的表达水平下降,可能是烟苗生长受到抑制的重要原因。 展开更多
关键词 烟草 生长素 NtYUCCA NtPINs 基因表达
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