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MicroRNA-155对3种可经输血传播RNA病毒复制的影响及机制探究
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作者 段晓琼 王艳翠 +6 位作者 廖鑫忠 李玉佳 徐敏 叶海艳 李世林 陈利民 杨春晖 《中国输血杂志》 CAS 2019年第5期430-433,共4页
目的 了解经血传播的RNA病毒感染细胞后对小分子非编码RNA-155 (miR-155)的诱导作用及miR-155对这类病毒复制的影响。方法 在2×10~5/mL肝癌细胞系Huh7.5.1中分别感染3种RNA病毒HCV、DENV和ZIKV,感染复数(MOI)为0.2,感染后48 h,提... 目的 了解经血传播的RNA病毒感染细胞后对小分子非编码RNA-155 (miR-155)的诱导作用及miR-155对这类病毒复制的影响。方法 在2×10~5/mL肝癌细胞系Huh7.5.1中分别感染3种RNA病毒HCV、DENV和ZIKV,感染复数(MOI)为0.2,感染后48 h,提取胞内RNA,通过荧光定量PCR (qRT-PCR)的方法,检测病毒感染后miR-155的相对表达变化;同时在2×10~5/mL Huh7.5.1细胞中转染10 pmol的miR-155模拟物(miR-155 mimic)使miR-155高表达,转染后12 h分别接种0.2 MOI的3种病毒,感染后48 h提取胞内RNA,通过荧光定量PCR检测3种病毒RNA的复制水平及宿主抗病毒先天免疫相关基因表达水平。结果 与未感染病毒的Huh7.5.1细胞相比,HCV、DENV及ZIKV感染Huh7.5.1细胞48 h后,miR-155的相对表达分别升高了132倍、157倍和8倍。与转染阴性对照组相比,miR-155高表达的Huh7.5.1细胞中,HCV、ZIKV和DENV的复制分别降低了48%、54%和70%;miR-155高表达的Huh7.5.1细胞中,IFNβ及一些干扰素刺激基因的表达明显升高。结论 HCV、DENV和ZIKV感染Huh7.5.1细胞后,显著诱导细胞中miR-155的表达;miR-155在细胞中高表达后,通过调节宿主细胞中Ⅰ型干扰素及一些干扰素刺激基因的表达来抑制HCV、DENV和ZIKV的复制。 展开更多
关键词 小分子非编码RNA MIR-155 丙型肝炎病毒 登革病毒 病毒 病毒复制 抑制
海南省三沙市永兴岛和赵述岛鼠形动物及其携带病原调查
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作者 李丹丹 孙定炜 +6 位作者 曾林海 彭恒 马雅军 杨振洲 詹道成 王如敏 王善青 《中国热带医学》 CAS 2019年第3期225-227,245共4页
目的了解海南省三沙市所属南海重要岛屿永兴岛和赵述岛特殊环境中的鼠形动物带毒情况,对寨卡病毒、基孔肯雅病毒和肾综合征汉坦病毒流行的风险进行评估,为当地政府和卫生部门制定综合防控技术方案提供科学依据。方法于2017年8月及2017... 目的了解海南省三沙市所属南海重要岛屿永兴岛和赵述岛特殊环境中的鼠形动物带毒情况,对寨卡病毒、基孔肯雅病毒和肾综合征汉坦病毒流行的风险进行评估,为当地政府和卫生部门制定综合防控技术方案提供科学依据。方法于2017年8月及2017年12月分两次利用鼠笼法和陷阱法捕捉三沙市永兴岛和赵述岛鼠形动物,解剖并采集肺、肾、肝、脾和心脏血标本,用实时荧光PCR的方法检测上述三种病毒的核酸。结果共捕获鼠型动物76只,其中鼠笼法捕获60只,陷阱法捕获16只,隶属2科4种,鼩鼱居多占36.67%、黄胸鼠占35.00%、褐家鼠占26.67%及小家鼠占1.67%。采集肺、肾、肝和脾标本合计76份、心脏血标本52份,因其中10份溶血严重,故仅对其余42份血进行检测。用鼠脏器标本及心脏血标本提取的RNA为模板进行实时荧光PCR检测,均未检出寨卡病毒、基孔肯雅病毒和肾综合征汉坦病毒。结论永兴岛和赵述岛上鼠形动物传播寨卡病毒、基孔肯雅病毒、和肾综合征汉坦病毒的风险不大。 展开更多
关键词 三沙市 永兴岛 赵述岛 病毒 基孔肯雅病毒 肾综合征汉坦病毒 鼠型动物
基于重组水疱性口炎病毒载体的寨卡疫苗构建及免疫原性评价
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作者 卢建博 郑文铝 +3 位作者 陈文文 余硕 刘珠果 戴秋云 《军事医学》 CAS 北大核心 2019年第3期192-197,共6页
目的建立表达寨卡病毒E蛋白或含prM蛋白的G蛋白缺失型重组水疱性口炎病毒(rVSV)载体疫苗,评价其免疫效果。方法选取E蛋白或含prM蛋白基因,分别构建入prVSVΔG和prVSV骨架质粒,通过反向遗传学操作得到2种缺失VSV-G蛋白的重组病毒疫苗(rVS... 目的建立表达寨卡病毒E蛋白或含prM蛋白的G蛋白缺失型重组水疱性口炎病毒(rVSV)载体疫苗,评价其免疫效果。方法选取E蛋白或含prM蛋白基因,分别构建入prVSVΔG和prVSV骨架质粒,通过反向遗传学操作得到2种缺失VSV-G蛋白的重组病毒疫苗(rVSV△G-E、rVSV△G-prM-2A-E)和2种含VSV-G蛋白的重组病毒疫苗(rVSV-E、rVSV-prM-2A-E),免疫BALB/c小鼠后进行体液免疫及细胞免疫水平检测,比较4种重组病毒疫苗免疫差异。结果rVSV△G-prM-2A-E免疫后诱导产生的特异性抗体与rVSV-prM-2A-E免疫后抗体水平相当(P>0.05),但显著高于rVSV△G-E免疫组(P<0.05);rVSV△G-prM-2A-E免疫诱导产生的中和抗体略高于rVSV△G-E和rVSVE免疫组,但低于rVSV-prM-2A-E免疫组;4种重组疫苗免疫后能有效诱导细胞分泌淋巴细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)产生,但诱导产生的IFN-γ水平无显著差异(P>0.05);rVSV△G-prM-2A-E及rVSV△G-E的扩增需要添加VSV-G。结论提供额外的VSV-G可成功包装并扩增rVSV△G-prM-2A-E,且该疫苗诱导产生较高中和抗体及细胞免疫反应,可进一步研发成实用疫苗。 展开更多
关键词 病毒 病毒包膜蛋白质类 重组蛋白质类 水疱性口炎 免疫原性 疫苗
一例基孔肯雅病毒和寨卡病毒混合感染病例的发现
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作者 郑夔 孙芳芳 +9 位作者 袁帅 黎东红 林泽凯 梁洁怡 欧阳善初 黄树祥 戴俊 师永霞 李小波 黄吉城 《华南预防医学》 2019年第5期481-485,共5页
目的对来自菲律宾的入境旅客(1例发热病例)进行病原体鉴定。方法采集病例血液样本,提取核酸后进行基孔肯雅病毒和寨卡病毒荧光RT PCR检测,进而接种Vero细胞分离培养病毒,细胞培养上清用荧光RT PCR方法和宏基因组序列测定分析法进行病毒... 目的对来自菲律宾的入境旅客(1例发热病例)进行病原体鉴定。方法采集病例血液样本,提取核酸后进行基孔肯雅病毒和寨卡病毒荧光RT PCR检测,进而接种Vero细胞分离培养病毒,细胞培养上清用荧光RT PCR方法和宏基因组序列测定分析法进行病毒鉴定。结果荧光RT PCR检测结果显示,该病例存在基孔肯雅病毒和寨卡病毒感染,Ct值分别为20和26;血清样本接种Vero细胞72 h后可观察到明显的细胞病变效应,细胞培养上清的荧光RT PCR检测和病毒宏基因组测序分析结果显示,Vero细胞中有基孔肯雅病毒和寨卡病毒。结论该病例为基孔肯雅病毒和寨卡病毒混合感染病例。 展开更多
关键词 基孔肯雅病毒 病毒 感染
乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆构建及病毒拯救
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作者 黄荣 冯亚岚 +3 位作者 冷生玲 袁磊 唐丽萍 杨健 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第1期17-22,共6页
目的构建乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆并拯救嵌合病毒。方法通过分子克隆技术将寨卡病毒prM/E基因克隆到乙脑病毒疫苗株SA-14-14-2感染性克隆的KasI和BglⅡ位点,构建乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆,体外转录嵌合病毒RNA,再将RNA电转染BHK2... 目的构建乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆并拯救嵌合病毒。方法通过分子克隆技术将寨卡病毒prM/E基因克隆到乙脑病毒疫苗株SA-14-14-2感染性克隆的KasI和BglⅡ位点,构建乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆,体外转录嵌合病毒RNA,再将RNA电转染BHK21细胞拯救病毒,并用免疫荧光技术、测序和噬斑试验进行鉴定,通过动物试验初步鉴定嵌合病毒的神经毒力。结果感染性克隆质粒可被相应限制性内切酶切下与理论值相吻合的核酸片段(1.1、0.7、0.4bp);拯救的病毒可在BHK21细胞形成噬斑,能被寨卡病毒抗血清识别;测序表明嵌合病毒含有寨卡病毒的prM/E基因。用嵌合病毒攻击小鼠,显示具有神经毒力,接种后14d小鼠全部死亡。结论成功拯救乙脑/寨卡嵌合病毒。该嵌合病毒对小鼠有较强的神经毒力,为寨卡病毒疫苗研发提供一种新的思路。 展开更多
关键词 病毒 疫苗 嵌合病毒
寨卡疫苗相关研究进展 预览
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作者 罗丹(综述) 杨晓明(审校) 《微生物学免疫学进展》 2019年第3期58-63,共6页
寨卡病毒(zika virus,ZIKV)是一种主要以蚊虫传播的虫媒病毒,其感染孕妇后,可导致胎儿畸形和新生儿小头症;感染成人后,可引起以神经缺陷为特征的自身免疫性疾病“格林-巴利综合征”等病症。近年来,寨卡病毒已是一种严重危害人类健康的... 寨卡病毒(zika virus,ZIKV)是一种主要以蚊虫传播的虫媒病毒,其感染孕妇后,可导致胎儿畸形和新生儿小头症;感染成人后,可引起以神经缺陷为特征的自身免疫性疾病“格林-巴利综合征”等病症。近年来,寨卡病毒已是一种严重危害人类健康的病原体,对全球公共卫生产生了重大威胁,因此,各国相关研究人员均在积极研制安全有效的ZIKV疫苗,以预防该病毒的感染和蔓延。现就ZIKV的基本特征、目前正在研究的几种ZIKV候选疫苗,如减毒活疫苗及嵌合活疫苗、全灭活病毒疫苗、核酸疫苗、病毒载体疫苗等作一概述,旨在为该疫苗的进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 病毒 病毒 免疫应答 疫苗
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抗寨卡病毒药物筛选模型的建立及其应用 预览
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作者 周睿 石星 +5 位作者 田东芳 张永欣 余利岩 马雪梅 李晓宇 岑山 《中国医药生物技术》 2019年第1期14-20,共7页
目的建立寨卡病毒抑制剂高通量筛选模型,为筛选和评价抗寨卡病毒化合物提供技术手段。方法利用CCK-8法测定寨卡病毒感染后细胞活性,间接反应胞内病毒复制水平。进而对分析方法进行优化,建立可定量病毒复制能力的药物筛选模型,并利用统... 目的建立寨卡病毒抑制剂高通量筛选模型,为筛选和评价抗寨卡病毒化合物提供技术手段。方法利用CCK-8法测定寨卡病毒感染后细胞活性,间接反应胞内病毒复制水平。进而对分析方法进行优化,建立可定量病毒复制能力的药物筛选模型,并利用统计学分析对模型的稳定性和灵敏性进行评价。应用该模型对32000个微生物发酵液进行初步筛选,验证该方法的可行性。结果成功建立寨卡病毒抑制剂高通量筛选模型,该筛选模型具有较好的稳定性和灵敏度,Z'因子为0.733,CV为5.52%,S/B为20.21,S/N为14.18。利用该模型筛选得到阳性样品102个,对其中I07A-01164进行抗病毒活性验证,测定其稀释4倍后可以抑制50%以上的病毒复制。结论建立了抗寨卡病毒化合物的高通量筛选模型,可用于寨卡病毒抑制剂的筛选和活性初步评价,有助于抗寨卡病毒药物的发现。 展开更多
关键词 高通量筛选分析 病毒 病毒
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寨卡病毒非结构蛋白NS5的结构与功能研究进展
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作者 黄星耀 叶青 +1 位作者 李晓峰 秦成峰 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第26期2677-2688,共12页
寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是黄病毒科黄病毒属重要成员,因其能引起小头症、格林-巴利综合征等严重神经疾病引起了全球的关注.NS5蛋白是其基因组编码的最大非结构蛋白,主要包括N端的甲基转移酶MTase(methyltransferase)结构域和C端的RN... 寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是黄病毒科黄病毒属重要成员,因其能引起小头症、格林-巴利综合征等严重神经疾病引起了全球的关注.NS5蛋白是其基因组编码的最大非结构蛋白,主要包括N端的甲基转移酶MTase(methyltransferase)结构域和C端的RNA依赖的RNA聚合酶RdRp(RNA-dependent RNA polymerase)结构域.NS5蛋白是一个多功能蛋白,不仅负责病毒基因组的复制和加帽过程,而且参与调控宿主的多种天然免疫反应.鉴于其具备重要的生物学功能,NS5蛋白被广泛认为是抗病毒药物设计的重要靶标.近年来,寨卡病毒NS5蛋白的高分辨率结构被成功解析,其生物学功能的研究也取得了重要突破,本文就相关领域的最新进展作一简要综述. 展开更多
关键词 病毒 NS5蛋白 结构 功能 病毒药物 天然免疫
寨卡病毒感染早期快速抗原检测方法的建立
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作者 向梦蓉 郭文靖 +2 位作者 温莺芬 李泽 庾蕾 《热带医学杂志》 CAS 2019年第4期413-416,382共5页
目的建立检测非结构蛋白1(NS1)抗原的免疫层析胶体金试纸方法,用于寨卡病毒(ZIKV)感染的早期诊断。方法对已获得的5株人源抗ZIKV NS1的单克隆抗体(ZKns2E11、ZKns3G2、ZKns4B8、ZKns4F10、ZKns14G5)采用生物膜层光学干涉法进行竞争抑制... 目的建立检测非结构蛋白1(NS1)抗原的免疫层析胶体金试纸方法,用于寨卡病毒(ZIKV)感染的早期诊断。方法对已获得的5株人源抗ZIKV NS1的单克隆抗体(ZKns2E11、ZKns3G2、ZKns4B8、ZKns4F10、ZKns14G5)采用生物膜层光学干涉法进行竞争抑制实验,以得到它们在抗原结合位点的相互关系并根据抗体结合抗原表位的不同将其进行分类,又通过两两随机组合配对方法筛选出最佳捕获抗体及包被抗体,制备成胶体金试纸。分别用重组NS1蛋白、感染ZIKV细胞培养上清液以及感染登革病毒(DENV)病人血清/血浆多种检测样品以获得准确的特异性和敏感性。其中病毒定量采用FFA(focus-forming assay)方法。结果在竞争抑制实验结果中,根据抗体与抗原结合的剩余结合率(<20%被认为强竞争关系即结合位点相似甚至相同,>60%被认为无竞争关系即位点不同),抗体大致分为两类,并通过两两配对筛选出2株结合位点不一致的最佳配对抗体(ZKns2E11、ZKns3G2),最终建立检测ZIKV NS1抗原胶体金试纸的快速诊断方法。在试纸敏感性分析中,ZIKV重组NS1蛋白为31.25 ng/mL时肉眼仍可观测到阳性条带的出现,以2×10~4FFU/mL的ZIKV病毒量感染细胞所释放的NS1蛋白仍可被检测到。试纸在其特异性上,无论是重组蛋白、感染病毒细胞培养上清液还是临床样本,与DENV均不交叉,表现出良好的特异性。该检测方法的成功建立为ZIKV感染早期诊断带来了一定的补充作用。结论建立检测ZIKV NS1抗原胶体金试纸的方法可成功区分ZIKV和DENV,表现出良好的敏感性及特异性,为ZIKV与DENV共感染地区提供了技术储备。 展开更多
关键词 病毒 登革病毒 非结构蛋白1 免疫层析胶体金法
寨卡病毒包膜蛋白重组人腺病毒5型载体的构建与免疫原性测定 预览
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作者 马晓瑞 罗升学 +5 位作者 王一琳 张攀丽 刘博超 赵卫 李婷婷 黎诚耀 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期474-480,共7页
目的以腺病毒5型载体(Ad5)构建含寨卡病毒(ZIKV)包膜蛋白(prM-E)的复制缺陷型5型重组腺病毒(rAd5)表达载体,测定prM-E在细胞中的表达及对小鼠的免疫原性。方法从ZIKV毒株Z16006(亚洲型)分离获得prM-E基因片段,以重组腺病毒AdMaxTM系统... 目的以腺病毒5型载体(Ad5)构建含寨卡病毒(ZIKV)包膜蛋白(prM-E)的复制缺陷型5型重组腺病毒(rAd5)表达载体,测定prM-E在细胞中的表达及对小鼠的免疫原性。方法从ZIKV毒株Z16006(亚洲型)分离获得prM-E基因片段,以重组腺病毒AdMaxTM系统包装重组腺病毒rAd5/prM-E。选用C57BL/6小鼠,以rAd5/prM-E107、108和109 PFU三个剂量肌内注射免疫小鼠,在第3周同等剂量加强免疫一次,第5周从小鼠眼球取血并分离脾淋巴细胞。分别以ELISpot和ELISA方法测定小鼠对ZIKV prM-E的体液与细胞免疫反应。结果成功构建复制缺陷型重组腺病毒载体rAd5/prM-E,采用Western blot方法和抗ZIKV E抗体检测rAd5/prM-E感染的293A细胞表达产物,可见与E蛋白相应的56 kDa蛋白带。以ELISpot方法测定小鼠脾淋巴细胞特异性IFN-γ分泌细胞形成斑点数(SFCs),结果分别为(688.54±186.43)、(1 084.90±144.14)和(1 640.20±147.13)SFCs/106脾细胞,与病毒接种剂量呈正比关系;采用ELISA测定免疫小鼠血清中抗E抗体,其滴度(log10值)分别为(3.14±0.39)、(3.50±0.30)和(3.74±0.25),均高于对照组小鼠(0.80±0.17),差异具有统计学意义(P<0.001)。结论 rAd5/prM-E具有感染小鼠并诱导小鼠产生强烈的特异性抗体和细胞免疫反应的能力,表明prM-E具有良好的免疫原性,为ZIKV候选疫苗研制提供了可靠的免疫源。 展开更多
关键词 病毒 prM-E蛋白 病毒载体 免疫原性
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非包被ELISA可检测寨卡病毒包膜蛋白 预览
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作者 柳红妙 周炜烽 +3 位作者 廖晖 胡正阳 邹敏 刘叔文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期699-704,共6页
目的建立一种基于寨卡病毒包膜蛋白的非包被ELISA方法,检测被感染的细胞内E蛋白的表达情况,用于抗寨卡病毒药物筛选。方法将寨卡病毒感染的贴壁细胞固定在孔板上,加入抗体与之结合,并确定抗体浓度,建立E蛋白的非包被ELISA方法;用该方法... 目的建立一种基于寨卡病毒包膜蛋白的非包被ELISA方法,检测被感染的细胞内E蛋白的表达情况,用于抗寨卡病毒药物筛选。方法将寨卡病毒感染的贴壁细胞固定在孔板上,加入抗体与之结合,并确定抗体浓度,建立E蛋白的非包被ELISA方法;用该方法检测木脂素类化合物C1的抗病毒活性;用实时荧光定量PCR实验(RT-PCR)验证这种非包被ELISA方法的准确性;并排除该方法对登革病毒的交叉反应。结果经过优化,未感染的细胞的背景A450nm降低到0.20左右,采用该方法检测的抗病毒活性结果,与实时荧光定量PCR实验的结果基本一致,且该方法对登革病毒不存在交叉反应。结论建立了一种寨卡病毒E蛋白的非包被ELISA方法,可用于抗寨卡病毒药物筛选。 展开更多
关键词 病毒 酶联免疫吸附实验 包膜蛋白 交叉反应 病毒药物
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富马酸替诺福韦二吡呋酯体外抗寨卡病毒活性研究
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作者 陈秀秀 罗荣华 +4 位作者 郑昌博 姚债文 唐秋菊 熊思东 郑永唐 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1582-1587,共6页
富马酸替诺福韦二吡呋酯(tenofovir disoproxil fumarate, TDF)是一种核苷类似物(nucleoside analogues),已广泛用于临床治疗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)和乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染。本研究... 富马酸替诺福韦二吡呋酯(tenofovir disoproxil fumarate, TDF)是一种核苷类似物(nucleoside analogues),已广泛用于临床治疗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)和乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染。本研究旨在探讨TDF是否具有体外抗寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)活性。首先通过噬斑抑制实验在细胞水平检测TDF是否具有抑制ZIKV作用,随后通过实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR)实验和蛋白质印迹(Western blot)实验分别在RNA水平和蛋白水平进一步验证TDF的抗ZIKV活性,最后通过MTT实验检测TDF的细胞毒性。结果发现, TDF不仅可降低ZIKV感染细胞后噬斑形成,还可抑制ZIKV RNA复制和ZIKV NS2B蛋白的表达,其对ZIKV的半数有效浓度(50%effective concentration, EC50)为14.96~27.47μmol·L-1。阳性药物利巴韦林抑制ZIKV的EC50为56.01±12.16μmol·L-1。MTT检测结果表明, TDF和利巴韦林的细胞毒性很小,半数细胞毒浓度(50%cytotoxic concentration, CC50)均大于500μmol·L-1。通过CC50/EC50计算出TDF的治疗指数(therapeutic index, TI)大于18.20,高于阳性对照药利巴韦林。本研究表明, TDF在细胞、RNA及蛋白水平均具有很好的体外抗ZIKV活性,有望成为抗ZIKV治疗的候选药物。 展开更多
关键词 富马酸替诺福韦二吡呋酯 核苷类似物 病毒 病毒活性 治疗
塞卡病毒的NS2B蛋白通过CITED2调控人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE的凋亡
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作者 曾维晨 张建峰 +1 位作者 徐逸轩 祖恒兵 《解剖学研究》 CAS 2019年第5期418-421,共4页
目的探讨塞卡病毒(ZIKV)的NS2B蛋白通过CITED2调控对人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE凋亡的调控机制。方法在人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE中,ZIKV感染后过表达NS2B,通过Annex-V染色检测细胞凋亡情况。通过免疫共沉淀检测NS2B蛋白与CITED2的相... 目的探讨塞卡病毒(ZIKV)的NS2B蛋白通过CITED2调控对人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE凋亡的调控机制。方法在人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE中,ZIKV感染后过表达NS2B,通过Annex-V染色检测细胞凋亡情况。通过免疫共沉淀检测NS2B蛋白与CITED2的相互作用、CITED2蛋白与MDM2的相互作用,以及NS2B对P53和MDM2相互作用的影响。通过核蛋白抽取检测NS2B对P53的核定位的影响。结果 ZIKV能够引起人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE的凋亡,且NS2B蛋白促进SK-N-BE的凋亡;CITED2蛋白与ZIKV的NS2B蛋白存在相互作用;CITED2蛋白与MDM2蛋白存在相互作用;ZIKV的NS2B蛋白抑制MDM2与P53的相互作用;ZIKV的NS2B蛋白促进P53入核。结论 ZIKV的NS2B蛋白通过与CITED2相互作用,抑制了MDM2对P53在细胞浆中的定位,促进了P53的入核,引起了人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE的凋亡。 展开更多
关键词 病毒 人神经母细胞瘤细胞 NS2B Cbp/P300相互作用反式激活因子2 SK-N-BE细胞株 凋亡
寨卡病毒与不同血型红细胞的粘附作用探讨
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作者 莫琴 张博 +3 位作者 王迅 伍晓菲 贾尧 黄宇闻 《中国输血杂志》 CAS 2019年第9期874-877,共4页
目的探讨寨卡病毒(Zika Virus,ZIKV)与不同血型红细胞的粘附作用。方法选取A型、B型、O型及AB型全血各5 U,离心后去除白膜层与血浆,红细胞经生理盐水洗涤后重悬于等体积的同型血浆,添加一定比例的寨卡病毒,置37℃孵育箱孵育。3 d后,分... 目的探讨寨卡病毒(Zika Virus,ZIKV)与不同血型红细胞的粘附作用。方法选取A型、B型、O型及AB型全血各5 U,离心后去除白膜层与血浆,红细胞经生理盐水洗涤后重悬于等体积的同型血浆,添加一定比例的寨卡病毒,置37℃孵育箱孵育。3 d后,分别留取各血液成分血样,其中红细胞以生理盐水洗涤后重悬。抽提全血、红细胞以及血浆中的核酸并定量检测病毒载量。结果所有血型的红细胞和血浆中均能够检测到载量>10~8 copies/mL的寨卡病毒RNA;且O型红细胞中的RNA拷贝数高于血浆,差异具有显著性(P<0.05);而AB型红细胞中的RNA拷贝数则显著低于血浆(P<0.05)。结论寨卡病毒对红细胞具有一定的粘附作用,且该作用在不同血型的红细胞间存在差异。 展开更多
关键词 血型 红细胞 病毒 粘附
寨卡病毒溶瘤治疗脑癌的数学模型动力学分析 预览
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作者 杨婷梅 刘建 《应用数学进展》 2019年第2期277-291,共15页
本文基于寨卡病毒特异性靶向杀害脑瘤细胞中的胶质瘤干细胞,而对正常细胞没有影响的原理,建立一个在正常细胞和脑肿瘤细胞竞争营养液的培养皿中,添加寨卡病毒溶瘤治疗的数学模型。分析系统中平衡点的存在性与稳定性,当脑肿瘤细胞灭绝时... 本文基于寨卡病毒特异性靶向杀害脑瘤细胞中的胶质瘤干细胞,而对正常细胞没有影响的原理,建立一个在正常细胞和脑肿瘤细胞竞争营养液的培养皿中,添加寨卡病毒溶瘤治疗的数学模型。分析系统中平衡点的存在性与稳定性,当脑肿瘤细胞灭绝时,溶瘤病毒治疗效果最佳,并给出最小的有效药物剂量参数表达式。最后,通过数值模拟来验证我们所得到的结论。 展开更多
关键词 病毒 脑癌 溶瘤治疗 稳定性 药物剂量 数值模拟
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寨卡病毒及其与吉兰-巴雷综合征相关性研究进展
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作者 周怡汶 卢祖能 《中国医药》 2019年第6期956-960,共5页
寨卡病毒是目前国内外学者的研究热点。2013-2014年法属波利尼西亚暴发了大规模寨卡病毒感染,患者神经系统并发症发生率显著增加,并报道了第1例寨卡病毒感染相关的吉兰-巴雷综合征(ZIKV-GBS),之后越来越多的研究表明寨卡病毒与吉兰-巴... 寨卡病毒是目前国内外学者的研究热点。2013-2014年法属波利尼西亚暴发了大规模寨卡病毒感染,患者神经系统并发症发生率显著增加,并报道了第1例寨卡病毒感染相关的吉兰-巴雷综合征(ZIKV-GBS),之后越来越多的研究表明寨卡病毒与吉兰-巴雷综合征的发病有关。本文从寨卡病毒的发现、病毒特性、流行病学、传播途径、感染后一般临床表现、实验室诊断以及ZIKV-GBS临床表现、电生理、抗体和神经影像研究等着手,综述了ZIKV-GBS的研究现状、目前所面临的困难及将来的展望,希望能为国内学者进一步了解ZIKV-GBS提供帮助。 展开更多
关键词 病毒 流行病学 吉兰-巴雷综合征
利用质谱技术鉴定寨卡病毒非结构蛋白NS1的细胞内相互作用蛋白 预览
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作者 章纳 王衡瑞 +3 位作者 毛彦娜 张成林 秦斌 王志民 《华中师范大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期401-407,共7页
寨卡病毒(Zika Virus)属于黄病毒科中的黄病毒属,虽然很早就已经被人类所发现,但是一直到2015年在南美巴西的大规模爆发,才引起了广泛的关注.寨卡病毒对人类的感染往往引起包括小头畸形和格林-巴利综合征在内的多种症状?寨卡病毒的基因... 寨卡病毒(Zika Virus)属于黄病毒科中的黄病毒属,虽然很早就已经被人类所发现,但是一直到2015年在南美巴西的大规模爆发,才引起了广泛的关注.寨卡病毒对人类的感染往往引起包括小头畸形和格林-巴利综合征在内的多种症状?寨卡病毒的基因组为单链正链RNA.其基因组可以编码翻译并剪切加工出3个结构蛋白,分别为膜蛋白,囊膜蛋白和核衣壳蛋白.以及7个非结构蛋白(NS1. NS2A. NS2B, NS3, NS4A, NS4B. NS5).相关研究已经证明,NS1蛋白与同属黄病毒属的登革病毒的发病有紧密的联系,而且根据其蛋白结构推测其可能与寨卡病毒穿越血脑屏障有关.因此鉴别NS1与细胞内的相互作用蛋白对于发现寨卡病毒在细胞内的转运,转录,以及装配都有重大的意义?在此,该课题构建并在HEK293细胞中表达包含Flag和Strep两种标签的NS1融合蛋白.通过免疫沉淀的方法将与NS1结合的蛋白利用标签蛋白进行分离,利用高分辨生物质谱技术,对蛋白进行分析鉴定.通过分别带有Flag与Strep标签的相互作用蛋白分析.发现了16个两种标签共同的结合蛋白,其进一步的通路分析证明这些蛋白于与病毒转录、病毒复制和免疫反应多个通路有关,相关的研究结果为今后进一步研究寨卡病毒的复制机制以及开发抗病毒药物提供了重要的参考价值. 展开更多
关键词 病毒 NS1蛋白 免疫沉淀 生物质谱分析
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东南亚地区寨卡病毒的流行及结构蛋白分子进化特征分析
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作者 林垚 洪珊 +1 位作者 蓝青萍 孙强明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第9期958-964,共7页
目的分析寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)在东南亚地区的感染传播情况,探讨其分子水平上的进化特征。方法用关键词和主题词检索ZIKV在东南亚地区暴发感染流行情况。在GenBank中获取ZIKV东南亚病毒株全基因序列,采用BIOEDIT软件进行比对;利用M... 目的分析寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)在东南亚地区的感染传播情况,探讨其分子水平上的进化特征。方法用关键词和主题词检索ZIKV在东南亚地区暴发感染流行情况。在GenBank中获取ZIKV东南亚病毒株全基因序列,采用BIOEDIT软件进行比对;利用MEGA 7. 0软件绘制系统进化树;将结构蛋白核苷酸翻译获得其相应的氨基酸序列,分析突变情况;统计不同株型间结构蛋白核苷酸突变和氨基酸替代位点;预测包膜蛋白第三结构域(envelop domainⅢ,ED-Ⅲ)的二级结构。结果 ZIKV在东南亚国家均有血清学感染或回顾性检测阳性报道,其中越南、泰国和新加坡ZIKV感染病例较多,疾病负担较为严重。系统进化树表明,东南亚ZIKV株均属于亚洲型,2016年新加坡株(序列号:KY241788)与2015年巴西株亲缘关系最近,1966年分离的马来西亚株与其他东南亚株亲缘关系较远。东南亚ZIKV各株型间衣壳蛋白(capsid protein,C)的碱基突变点为22处,突变率为6. 36%,造成非同义氨基酸突变点为19处,突变率为16. 52%。前膜蛋白(pre-membrane protein,prM)的碱基突变点为51处,突变率为10. 12%,造成非同义氨基酸突变点为37处,突变率为22. 02%。包膜蛋白(envelope protein,E)的碱基突变点为141处,突变率为9. 33%,造成非同义氨基酸突变点为101处,突变率为20. 04%。ED-Ⅲ二级结构预测结果显示,在该区域2株代表株有相同数量的蛋白结合位点,代表株2(1966 Malaysia KX377336)存在1个蛋白结合位点富集区(ED-Ⅲ:55-63),而代表株1(2014 Thailand KU681081)蛋白结合位点分布较均匀,代表株2的ED-Ⅲ存在1个二硫键,而代表株1不存在,代表株1(ED-Ⅲ:79-80)存在1个解螺旋,而代表株2不存在。结论通过病例统计分析、系统发育分析、蛋白质核苷酸及氨基酸序列比较分析、ED-Ⅲ二级结构预测,为研究东南亚地区ZIKV不同株型间的生物学和流行致病性差异提供参考。 展开更多
关键词 病毒 东南亚 流行 结构蛋白 分子特征
寨卡病毒E蛋白第三结构域的可溶性表达及多克隆抗体的制备
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作者 何婷 杨欢 +7 位作者 范凤鸣 刘杰 牟建超 孙艳 陈智 代云见 曾献武 杨会强 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第6期668-672,共5页
目的原核表达并纯化寨卡病毒(Zika virus)E蛋白第三结构域(ZK-EⅢ)重组蛋白,并制备其多克隆抗体。方法 PCR扩增ZK-E Ⅲ序列,经双酶切后将其插入原核表达载体p ET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-ZKE Ⅲ,转化至大肠埃希菌(E. coli)Rosetta... 目的原核表达并纯化寨卡病毒(Zika virus)E蛋白第三结构域(ZK-EⅢ)重组蛋白,并制备其多克隆抗体。方法 PCR扩增ZK-E Ⅲ序列,经双酶切后将其插入原核表达载体p ET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-ZKE Ⅲ,转化至大肠埃希菌(E. coli)Rosetta2(DE3),经IPTG诱导,表达的重组蛋白经亲和层析和阴离子交换层析纯化后,免疫家兔,制备ZK-E Ⅲ多克隆抗血清,进行Western blot鉴定后,ELISA法检测该抗血清效价。结果经PCR及测序鉴定证明原核表达质粒pET-ZKE Ⅲ构建正确,表达的重组蛋白相对分子质量约31 000,主要以可溶性形式存在,表达量占菌体总蛋白的60%;用纯化的重组蛋白免疫家兔后,获得的血清特异性良好,血清效价为1∶51 200。结论 ZKE Ⅲ蛋白在E. coli中以可溶性形式表达,制备的抗血清特异性好,效价高,具有用于寨卡病毒诊断和进行重组亚单位疫苗开发的潜力。 展开更多
关键词 病毒 E蛋白Ⅲ区 原核表达 多克隆抗体
2018年美国可能与先天性寨卡病毒感染有关的出生缺陷和神经发育异常数据分析
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作者 龚甫哲(摘译) 龚震宇(审校) 《疾病监测》 CAS 2019年第1期93-95,共3页
1背景母亲在怀孕期间感染寨卡病毒可能导致婴儿严重的先天性缺陷,包括脑和眼的结构异常。随着先天性寨卡病毒感染婴儿的年龄增大,还逐渐发现癫痫、视力丧失和发育迟缓等问题。早期识别和干预不良神经发育结果可以改善儿童的认知、社会... 1背景母亲在怀孕期间感染寨卡病毒可能导致婴儿严重的先天性缺陷,包括脑和眼的结构异常。随着先天性寨卡病毒感染婴儿的年龄增大,还逐渐发现癫痫、视力丧失和发育迟缓等问题。早期识别和干预不良神经发育结果可以改善儿童的认知、社会和行为功能,并且对整个社会具有很好的成本效益。干预和改善大脑发育的最关键时期是在生命的前3年。 展开更多
关键词 病毒 出身缺陷 大脑 发育异常 美国
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