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河南省信阳市发热伴血小板减少患者中巴贝虫感染的分子流行特征分析
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作者 李素华 赵玉玲 +8 位作者 高丽君 张雅兰 周瑞敏 钱丹 杨成运 刘颖 鲁德领 张红卫 许汴利 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期66-69,共4页
目的探讨河南省信阳市发热伴血小板减少患者中巴贝虫感染分子流行特征,为信阳市及河南省巴贝虫病的防治提供依据。方法采集信阳市2012年有发热伴血小板减少症状患者的血样和基本信息。提取血样DNA,用两对引物(Bab5/Bab8+Bab6/Bab7和RIB-... 目的探讨河南省信阳市发热伴血小板减少患者中巴贝虫感染分子流行特征,为信阳市及河南省巴贝虫病的防治提供依据。方法采集信阳市2012年有发热伴血小板减少症状患者的血样和基本信息。提取血样DNA,用两对引物(Bab5/Bab8+Bab6/Bab7和RIB-19/RIB-20+BAB-rumF/BAB-rumR)巢式PCR扩增巴贝虫18S r RNA基因,测序后与GenBank中田鼠巴贝虫的相应序列进行比对。对血样检测阳性的病例进行地区、发病时间、人群、蜱虫叮咬和布尼亚病毒检测情况的分析。结果共收集600例有发热伴血小板减少症状的患者血样, 59例(9.8%)血样两对引物巢式PCR均扩增出约430 bp的18S r RNA基因片段。序列比对结果显示, 59条扩增序列与田鼠巴贝虫(GenBank登录号:LC314655.1)的一致性均高于97%。59例血样扩增阳性中, 51例来自信阳市(86.4%),其中商城县16例(27.1%),光山县12例(20.3%);发病时间集中在5月(23.7%, 14/59)、6月(39.0%, 23/59)和7月(17.0%, 10/59);患者以中老年人为主, 40岁以上者48例(81.4%, 48/59)。59例阳性病例中14例(23.7%)曾被蜱虫叮咬, 31例(2.5%)布尼亚病毒检测阳性。结论河南省信阳市发热伴血小板减少患者中巴贝虫感染率较高,尤其中老年患者。 展开更多
关键词 巴贝虫病 发热伴血小板减少 巢式PCR 流行病学 信阳市 河南省
内蒙古绵羊梅迪-维斯纳病的病理组织学和巢式PCR诊断
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作者 王多智 史晓娜 +2 位作者 张洁 杨惠 刘淑英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期651-658,共8页
为检测内蒙古地区是否存在梅迪-维斯纳病(Maedi-Visna dieas,eMVD),本试验以内蒙古呼浩特市周边某屠宰场采集的12份绵羊病肺组织为研究对象,采用组织病理学、巢式PCR和测序分析等方法进行检测。组织病理学结果显示:肺脏发生纤维化,并且... 为检测内蒙古地区是否存在梅迪-维斯纳病(Maedi-Visna dieas,eMVD),本试验以内蒙古呼浩特市周边某屠宰场采集的12份绵羊病肺组织为研究对象,采用组织病理学、巢式PCR和测序分析等方法进行检测。组织病理学结果显示:肺脏发生纤维化,并且肺泡腔内Ⅱ型肺泡上皮增生以及间质增宽,支气管和细支气管周围可见较多的淋巴滤泡增生;巢式PCR结果显示:病肺组织中有梅迪-维斯纳病毒(Maedi-Visna viru,sMVV)G ag基因序列的特异性扩增,且与小反刍兽疫、绵羊肺腺瘤病毒以及支原体均无交叉反应。以上结果表明,内蒙古存在MVD。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病 巢式PCR 组织病理学 内蒙古
福建人群香港型地中海贫血的基因变异检测
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作者 张敏 黄海龙 +8 位作者 陈梅环 陈灵基 王燕 林娜 李英 陈雪美 王林铄 林元 徐两蒲 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期297-300,共4页
目的分析福建省籍人群右向缺失型地中海贫血(-α^3.7)样本中香港型地中海贫血基因(Hong Kongαα,HKαα)检出率,探讨其临床意义。方法对10145份福建省籍人群地贫筛查阳性样本进行常规地贫基因诊断,应用单重PCR及巢式PCR技术对检测到的... 目的分析福建省籍人群右向缺失型地中海贫血(-α^3.7)样本中香港型地中海贫血基因(Hong Kongαα,HKαα)检出率,探讨其临床意义。方法对10145份福建省籍人群地贫筛查阳性样本进行常规地贫基因诊断,应用单重PCR及巢式PCR技术对检测到的507例-α3.7/αα样本及2例电泳结果同时出现东南亚缺失型α-地中海贫血(--SEA)、-α^3.7及α2条带样本进行HKαα基因型检测。结果在507例-α3.7/αα样本中,共检出25例HKαα/αα,5例HKαα/-α^3.7,4例HKαα/αα合并CD41/42(HBB:c.126_129delCTTT)杂合变异,1例HKαα/αα合并IVS-Ⅱ-654(HBB:c.316_197C>T)杂合变异,另检出1例-α^3.7/anti4.2,2例电泳结果同时出现--SEA、-α^3.7及α2条带样本均为HKαα/--SEA,HKαα基因型在福建省籍人群中检出率为0.36%,在-α^3.7阳性样本中检出率为7.27%。结论在福建人群中检出一定比例的HKαα基因型,为临床提供更准确的地贫基因诊断结果及遗传咨询。 展开更多
关键词 巢式PCR 地中海贫血 基因变异 香港型地中海贫血基因
牛巴贝斯虫巢式PCR检测方法的建立
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作者 孙明 王锦明 +7 位作者 刘爱红 刘志杰 聂英 魏华 李玉峰 殷宏 关贵全 罗建勋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期183-189,共7页
为建立一种适用于基层兽医实验室特异、敏感、快速检测牛巴贝斯虫感染的方法,以牛巴贝斯虫球状体蛋白4(SBP4)基因为靶基因设计引物,建立检测牛巴贝斯虫的巢式PCR方法。结果表明,该方法可特异性地检测牛巴贝斯虫感染,与14种动物梨形虫无... 为建立一种适用于基层兽医实验室特异、敏感、快速检测牛巴贝斯虫感染的方法,以牛巴贝斯虫球状体蛋白4(SBP4)基因为靶基因设计引物,建立检测牛巴贝斯虫的巢式PCR方法。结果表明,该方法可特异性地检测牛巴贝斯虫感染,与14种动物梨形虫无交叉反应。该方法能够检测到1 copy的SBP4基因,其敏感性分别是对应的内、外引物普通PCR的10倍和1 000倍。应用该巢式PCR方法,对田间随机采集的136份野外样品进行检测,检出阳性样品9份,显著高于AbouLaila等报道的方法(5份)。这些数据表明,建立的巢式PCR方法可用于基层兽医实验室敏感、准确地检测牛巴贝斯虫感染。 展开更多
关键词 牛巴贝斯虫 巢式PCR SBP4基因
珠海口岸地区孕妇人群梅毒螺旋体基因分型的初步研究 预览
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作者 郑水华 杜明君 +2 位作者 宋雅琴 唐喜军 涂成宁 《检验医学与临床》 CAS 2019年第2期177-179,共3页
目的分析珠海口岸地区孕妇人群的梅毒螺旋体感染情况及基因分型,探讨先天性梅毒与梅毒基因分型的关系。方法统计2016―2017年该院建档孕妇的梅毒检测例数为4414例,其中42例被确诊为现状梅毒,其新生儿有9例患有先天性梅毒。对梅毒阳性患... 目的分析珠海口岸地区孕妇人群的梅毒螺旋体感染情况及基因分型,探讨先天性梅毒与梅毒基因分型的关系。方法统计2016―2017年该院建档孕妇的梅毒检测例数为4414例,其中42例被确诊为现状梅毒,其新生儿有9例患有先天性梅毒。对梅毒阳性患者血液进行巢式PCR检测arp、tpr基因并进行分型。结果42例现状梅毒孕妇有25例检测出polA基因阳性,9例先天性梅毒患儿检测出7例polA基因阳性;最后综合基因分型14a型2例(6%,2/32),13d型5例(16%,5/32),14d型25例(78%,25/32),其中7例polA基因阳性的先天性患儿和母亲的型别全为14d型。结论珠海口岸地区梅毒流行基因型主要为14d型,同样在先天性梅毒中基因型也是14d型。 展开更多
关键词 巢式PCR 基因分型 梅毒螺旋体 先天性梅毒
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养殖大黄鱼一种黏孢子虫病的组织病理学及检测方法初探 预览
6
作者 施慧 陈卓 +5 位作者 丁慧昕 谢建军 汪玮 王庚申 何杰 许文军 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期203-213,共11页
运用组织病理切片、电镜观察及PCR扩增等方法对2017年在舟山采集到的临床表现“白鳃”症状的发病大黄鱼(Larimichthys crocea)开展了病原学及快速检测方法的初步研究。组织病理观察显示,患病鱼的肝、脾、肾等内脏组织发生严重的病理变化... 运用组织病理切片、电镜观察及PCR扩增等方法对2017年在舟山采集到的临床表现“白鳃”症状的发病大黄鱼(Larimichthys crocea)开展了病原学及快速检测方法的初步研究。组织病理观察显示,患病鱼的肝、脾、肾等内脏组织发生严重的病理变化,尤其是组织内红细胞发生明显的退行性变化,同时血液中红细胞数量显著减少。在病鱼组织的电镜超薄切片中可观察到直径约300~600nm的孢子虫样结构。提取病鱼内脏组织总基因组DNA样本,采用1对针对寄生原虫的通用引物进行SSU rDNA的PCR扩增,最终获得大小为1471bp的特异性条带,经测序比对发现,该条带与GenBank中1种黏孢子虫Sinuolinea sp.的序列同源性最高,达89%。根据获得的SSU rDNA序列,建立了适用于该病临床检测的巢式PCR方法,最小灵敏度可达0.5pg。研究表明,引起此次网箱养殖大黄鱼“白鳃”症状并导致鱼类大量死亡的是一类寄生性黏孢子虫。 展开更多
关键词 大黄鱼 白鳃病 组织病理学 电镜 亚单位核糖体核糖核酸基因 黏孢子虫 巢式PCR
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芋疫霉菌的巢式PCR检测 预览
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作者 兰成忠 卢学松 +2 位作者 姚锦爱 丁雪玲 蒋军喜 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期76-82,共7页
【目的】建立芋疫霉菌快速、准确的PCR检测技术,为芋疫病流行规律监测和综合防控提供科学依据。【方法】根据芋疫霉菌与其他疫霉菌种类Ypt1基因序列差异,设计了1对芋疫霉菌PCR检测特异引物PCOF/PCOR,并对该引物的特异性、灵敏性和应用... 【目的】建立芋疫霉菌快速、准确的PCR检测技术,为芋疫病流行规律监测和综合防控提供科学依据。【方法】根据芋疫霉菌与其他疫霉菌种类Ypt1基因序列差异,设计了1对芋疫霉菌PCR检测特异引物PCOF/PCOR,并对该引物的特异性、灵敏性和应用性进行了验证。【结果】在优化的反应体系与扩增条件下,PCOF/PCOR引物能特异性地从芋疫霉菌基因组DNA中扩增出1条172bp的条带,而其他供试病原菌均无扩增条带。在25μLPCR反应体系中,PCOF/PCOR引物对芋疫霉菌基因组DNA的检测灵敏度为100pg,而以疫霉菌Ypt1基因通用引物ph1F/Yph2R为第一轮引物,PCOF/PCOR为第二轮引物,进行巢式PCR扩增,能检测到10fg芋疫霉菌基因组DNA,检测灵敏度提高了10000倍。采用巢式PCR,可从芋疫病发病的叶片和未显症叶片组织中检测到芋疫霉菌,检出率分别为100%和57.5%。【结论】所建立的巢式PCR可应用于芋疫霉菌的快速、特异和高灵敏度检测。 展开更多
关键词 芋疫霉菌 特异引物 巢式PCR 分子检测
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基于不同PCR方法的Ⅱ型鲤疱疹病毒检测技术研究
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作者 谢亚君 税典章 +3 位作者 吴萍 叶元土 王敏 蒋蓉 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1018-1025,共8页
异育银鲫“鳃出血病”是一种因感染了鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)而引起的疾病,近年来给江苏异育银鲫养殖业造成了巨大的经济损失。为了能够建立及时、有效检出Ⅱ型鲤疱疹病毒的技术,本研究在克隆了CyHV-2解旋酶基因和三联体蛋白基因的基础... 异育银鲫“鳃出血病”是一种因感染了鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)而引起的疾病,近年来给江苏异育银鲫养殖业造成了巨大的经济损失。为了能够建立及时、有效检出Ⅱ型鲤疱疹病毒的技术,本研究在克隆了CyHV-2解旋酶基因和三联体蛋白基因的基础上,建立了检测CyHV-2的普通PCR、双重PCR、巢式PCR、环介导等温扩增、实时荧光定量PCR等方法,并对这5种PCR技术检测CyHV-2的灵敏性进行了系统研究。结果表明,针对CyHV-2病毒的解旋酶基因和三联体蛋白基因,普通PCR能够检测出的极限值是2.4×10^4copies/μL,双重PCR是1.4×10^4copies/μL,巢式PCR是2.4×10^-2copies/μL,荧光定量PCR是2.4×10^-2copies/μL,环介导等温扩增是3.5×10^2copies/μL。通过采用以上方法对从不同地区采集的54尾异育银鲫提取的DNA为模板进行临床检验,测定不同检测方法的阳性检出率。结果表明,实时荧光定量PCR和巢式PCR的检出率很高,分别为89%和90.7%;普通PCR的检出率最低,为68.5%。综合检测灵敏度和阳性检出率,环介导等温扩增(LAMP)是一种适用于生产实践的能有效检测CyHV-2的良好技术。 展开更多
关键词 Ⅱ型鲤疱疹病毒 双重PCR 巢式PCR 环介导等温扩增 荧光定量PCR
美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测方法的建立 预览
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作者 陈细红 杨小龙 +2 位作者 廖富荣 高芳銮 沈建国 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期162-165,171共5页
本文以我国台湾进境美人蕉病株为材料,根据已报道的美人蕉黄斑驳病毒Canna yellow mottle virus(CaYMV)基因序列设计2对特异性引物(外侧引物1对、内侧引物1对),建立了巢式PCR快速检测CaYMV的方法,并对进境的50份美人蕉样品进行了检测。... 本文以我国台湾进境美人蕉病株为材料,根据已报道的美人蕉黄斑驳病毒Canna yellow mottle virus(CaYMV)基因序列设计2对特异性引物(外侧引物1对、内侧引物1对),建立了巢式PCR快速检测CaYMV的方法,并对进境的50份美人蕉样品进行了检测。结果显示,该方法特异性强,且灵敏度高于常规PCR,是常规PCR的1 000倍,表明该方法能够实现对CaYMV的快速、准确、灵敏检测,适用于口岸快速检测CaYMV。 展开更多
关键词 美人蕉黄斑驳病毒 巢式PCR 检测
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杧果露水斑病病原菌枝状枝孢霉的巢氏PCR检测方法的建立 预览
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作者 刘晓妹 杨永利 +3 位作者 杨石有 张贺 朱朝华 蒲金基 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期111-118,共8页
[目的]杧果露水斑病是当前生产上影响杧果产业的重要病害之一,因潜伏期长常在发病初期不易被察觉而错过防治适期,建立其主要致病菌Cladosporium cladosporioides的快速准确检测方法,对于该病的早期诊断和及时防控尤为重要。[方法]将该... [目的]杧果露水斑病是当前生产上影响杧果产业的重要病害之一,因潜伏期长常在发病初期不易被察觉而错过防治适期,建立其主要致病菌Cladosporium cladosporioides的快速准确检测方法,对于该病的早期诊断和及时防控尤为重要。[方法]将该病菌的ITS序列与NCBI中的数据大量比对后,在差异位点大的区域设计了8对引物,通过筛选获得两对特异性良好的引物及其扩增条件。[结果]两对特异性引物分别是ML-SF9/ML-SR5和ML-SF10/ML-SR10,扩增条件:94℃4 min;94℃45 s,65℃45 s,72℃1 min,36周;72℃10 min,特异条带大小分别为408 bp和424 bp。为了提高检测的灵敏度,又与真菌通用引物ITS1/ITS4结合后,建立了杧果露水斑病病原菌的两套巢式PCR快速检测体系,可检测病菌DNA的含量最低为3.55×10^-9ng·μL^-1比常规PCR灵敏度提高了1万倍,且能实现对潜伏期果实的特异性检测。[结论]此技术操作简单、特异性强、灵敏度高,为杧果露水斑病的早期诊断提供了新方法。 展开更多
关键词 杧果 露水斑病菌 常规PCR 巢式PCR 分子检测
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中山市6例疑似麻疹疫苗相关病例病原学特征分析
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作者 谢颖 高赛珍 +3 位作者 欧慧 王翠玲 吴衍恒 林金思 《实用预防医学》 CAS 2019年第4期437-440,共4页
目的分析中山市6例疑似麻疹疫苗相关病例的病原学特征。方法采集中山市2014-2015年6例疑似麻疹疫苗相关病例咽拭子样本并提取核酸,采用巢式PCR法扩增麻疹病毒核蛋白(N)基因羧基末端450个核苷酸片段并测序,分析其与世界卫生组织(WHO)参... 目的分析中山市6例疑似麻疹疫苗相关病例的病原学特征。方法采集中山市2014-2015年6例疑似麻疹疫苗相关病例咽拭子样本并提取核酸,采用巢式PCR法扩增麻疹病毒核蛋白(N)基因羧基末端450个核苷酸片段并测序,分析其与世界卫生组织(WHO)参考株、麻疹病毒中国疫苗株沪191(Shanghai191,S191)基因的亲缘关系、核苷酸与氨基酸序列相似度。结果 6份样本中,2份未检出核酸,4份检出核酸,序列比对结果示3株病毒核苷酸、氨基酸序列相似度均为100%,与S191株相比,核苷酸序列和氨基酸序列相似度也为100%,属于A基因型;1株病毒与Chin9322-H1a株相比,核苷酸序列相似度为97.7%,氨基酸序列相似度为96.6%,为H1a基因型。结论 3例病例为疫苗株感染,1例为野毒株感染。 展开更多
关键词 巢式PCR 麻疹 病原学 麻疹疫苗相关病例
蜱传反刍动物艾立希体巢式PCR检测方法的建立及应用
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作者 王素华 袁淑辉 +4 位作者 吴绍强 吕继洲 帅江冰 张晓峰 赵治国 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期271-275,共5页
为建立一种快速、敏感检测反刍动物艾立希体的方法,本研究根据GenBank中登录的反刍动物艾立希体pCS20基因保守区设计2对特异性引物,经各反应条件的优化,建立了反刍动物艾立希体巢式PCR检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测反刍动物... 为建立一种快速、敏感检测反刍动物艾立希体的方法,本研究根据GenBank中登录的反刍动物艾立希体pCS20基因保守区设计2对特异性引物,经各反应条件的优化,建立了反刍动物艾立希体巢式PCR检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测反刍动物艾立希体DNA,而对牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、牛环形泰勒虫和弓形虫的检测均为阴性,具有良好的特异性;该方法灵敏度可达1.04×101拷贝/μL,是反刍动物艾立希体实时荧光PCR检测试剂盒的10倍,是常规PCR的1 000倍。对50只血蜱、花蜱和微小牛蜱DNA进行检测,巢式PCR、反刍动物艾立希体实时荧光PCR检测试剂盒和常规PCR的阳性检出率分别为26.0%,14.0%和0.0%。本试验建立的巢式PCR检测方法适用于反刍动物艾立希体病的早期诊断和分子流行病学调查,为蜱传反刍动物艾立希体病的防控提供技术支持。 展开更多
关键词 反刍动物艾立希体 pCS20基因 巢式PCR 蜱传
广西地区艾滋病病毒感染/艾滋病患者蓝氏贾第鞭毛虫感染情况及基因型分析
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作者 刘华 徐宁 +2 位作者 沈玉娟 胡媛 曹建平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期321-325,共5页
目的了解广西地区艾滋病病毒感染/艾滋病(HIV/AIDS)患者蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)感染情况及基因型分析。方法收集广西地区HIV/AIDS患者和健康者粪样,镜检后提取粪样中贾第虫DNA,并采用巢式PCR方法扩增贾第虫磷酸丙糖异构酶基因(trios... 目的了解广西地区艾滋病病毒感染/艾滋病(HIV/AIDS)患者蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)感染情况及基因型分析。方法收集广西地区HIV/AIDS患者和健康者粪样,镜检后提取粪样中贾第虫DNA,并采用巢式PCR方法扩增贾第虫磷酸丙糖异构酶基因(triosephosphate isomerase, TPI),对阳性结果进行测序和BLAST比对分析,并构建进化树。结果共收集285例HIV/AIDS患者粪样,其中男性216例,女性69例,年龄21~85岁,其中130例曾接受抗逆转录病毒治疗。HIV/AIDS患者粪样镜检贾第虫阳性8份,阳性率为2.8%;健康者粪样303份,无贾第虫感染,两者差异有统计学意义(P <0.01)。巢式PCR扩增阳性粪样,发现530 bp左右有一条特异性条带。经测序分析,有7份贾第虫样品为人兽共患集聚体B型,其中6份与已报到的人源分离株TPI基因序列一致性为100%。另外1份为集聚体C型,且该分离株与已报到的人源贾第虫集聚体C型基因序列一致性为100%。结论广西地区部分HIV/AIDS患者感染贾第虫,其基因型主要为集聚体B型。 展开更多
关键词 贾第虫 集聚体 巢式PCR 艾滋病病毒感染/艾滋病
长春地区猪十二指肠贾第鞭毛虫感染的分子流行病学调查
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作者 赵春艳 张西臣 +3 位作者 张洪波 宫鹏涛 李建华 杨举 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期553-556,共4页
目的调查长春地区猪十二指肠贾第鞭毛虫(简称贾第虫)感染的分子流行病学特征。方法选择长春地区两个猪场,随机采集60份猪粪便样品,根据贾第虫磷酸丙糖异构酶(triose phosphate isomerase,TPI)基因设计巢式PCR引物,以提取的猪粪便基因组... 目的调查长春地区猪十二指肠贾第鞭毛虫(简称贾第虫)感染的分子流行病学特征。方法选择长春地区两个猪场,随机采集60份猪粪便样品,根据贾第虫磷酸丙糖异构酶(triose phosphate isomerase,TPI)基因设计巢式PCR引物,以提取的猪粪便基因组DNA为模板进行巢式PCR扩增,PCR产物经测序及序列比对,并建立贾第虫系统进化树。结果 60份样品中,27份为阳性,阳性率为45%(27/60),基因型均为人兽共患型集聚体A。结论长春地区两个猪场存在较严重的贾第虫感染,基因型均为集聚体A,有较大的散播风险,需加强猪场卫生监督管理,以避免疫病流行。 展开更多
关键词 十二指肠贾第鞭毛虫 磷酸丙糖异构酶基因 巢式PCR
新疆南疆绵羊牛无浆体病的流行病学调查 预览
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作者 桂成坤 林留霞 +4 位作者 张晶 宋倩倩 石长青 王新疆 李莲瑞 《塔里木大学学报》 2019年第1期7-11,共5页
为了调查新疆南疆地区绵羊牛无浆体病的流行情况,试验从南疆喀什、和田、阿克苏和巴州四个地区21个县市采集绵羊血液样品共637份。以巢式PCR扩增绵羊血液样品中牛无浆体的16SrRNA特异性片段。PCR扩增片段为551bp的样品为阳性样品,表示... 为了调查新疆南疆地区绵羊牛无浆体病的流行情况,试验从南疆喀什、和田、阿克苏和巴州四个地区21个县市采集绵羊血液样品共637份。以巢式PCR扩增绵羊血液样品中牛无浆体的16SrRNA特异性片段。PCR扩增片段为551bp的样品为阳性样品,表示感染了牛无浆体。结果表明:新疆南疆绵羊牛无浆体的总体感染率为52.9%,其中喀什、和田、阿克苏、巴州地区的感染率分别为55.3%、53.3%、51.3%、43.3%。说明新疆南疆绵羊牛无浆体的感染率较高,为绵羊牛无浆体病的诊断和防控提供流行病学资料。 展开更多
关键词 新疆南疆 绵羊 牛无浆体 巢式PCR
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荧光定量PCR在疟疾实验室诊断中的应用
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作者 李素华 李静 +7 位作者 高丽君 张雅兰 周瑞敏 钱丹 杨成运 刘颖 赵玉玲 张红卫 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期232-234,共3页
分别采用镜检、巢式PCR和荧光定量PCR等3种检测方法对收集到的79份疟疾血样进行检测,并对检测结果进行比较分析。结合患者临床症状和3种检测结果,79份血样最终确诊74份为疟原虫阳性,阳性率为93.7%(74/79),其中镜检阳性检出率为82.3%(65/... 分别采用镜检、巢式PCR和荧光定量PCR等3种检测方法对收集到的79份疟疾血样进行检测,并对检测结果进行比较分析。结合患者临床症状和3种检测结果,79份血样最终确诊74份为疟原虫阳性,阳性率为93.7%(74/79),其中镜检阳性检出率为82.3%(65/79),巢式PCR阳性检出率为82.3%(65/79),荧光定量PCR阳性检出率为93.7%(74/79),荧光定量PCR阳性检出率高于其他两种方法(P<0.05)。镜检和巢式PCR的一致率为78.4%(58/74),镜检和荧光定量PCR的一致率为63.5%(47/74),巢式PCR和荧光定量PCR的一致率为83.8%(62/74)。相比镜检和巢式PCR,荧光定量PCR敏感性和检出率更高,且用时更短。 展开更多
关键词 疟疾 镜检 巢式PCR 荧光定量PCR
武汉市两种输入性卵形疟巢式PCR检测
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作者 贾西帅 周水茂 +2 位作者 杨燕 吴凯 汤伟峰 《中国热带医学》 CAS 2018年第5期423-426,共4页
目的了解巢式PCR鉴别卵形疟curtisi及变种wallikeri效果。方法收集武汉市2008—2015年疟疾患者血样和流行病学资料。提取患者血样中的疟原虫DNA,进行巢式PCR检测。结果采用巢式PCR检测疟疾患者282例,其中恶性疟原虫206例、间日疟原虫62... 目的了解巢式PCR鉴别卵形疟curtisi及变种wallikeri效果。方法收集武汉市2008—2015年疟疾患者血样和流行病学资料。提取患者血样中的疟原虫DNA,进行巢式PCR检测。结果采用巢式PCR检测疟疾患者282例,其中恶性疟原虫206例、间日疟原虫62例、三日疟原虫6例、卵形疟原虫19例。巢式PCR结果显示,卵形疟原虫经典型curtisi和变种型wallikeri分别扩增出800 bp和780 bp目的条带。2012—2015年卵形疟占当年疟疾患者分别为4.1%(2/49)、12.2%(9/74)、8.2%(4/49)、11.4%(4/35),卵形疟总数占全部病例的6.74%,其中,经典型curtisi 14例,变种型wallikeri 3例,混合感染2例,变种型wallikeri检出率占卵形疟26.3%。19例卵形疟病例全部为男性,感染输入地主要分布在撒哈拉沙漠以南地区,2例卵形疟混合感染分别来自安哥拉和尼日利亚。其中有2例卵形疟原虫curtisi型镜检结果分别为间日疟和恶性疟,1例血片重新复核后为卵形疟,另1例巢式PCR检测为间日疟和卵形疟混合感染型。结论分子生物学技术可以减少卵形疟误诊的情况;加强卵形疟curtisi及变种wallikeri的巢式PCR检测,避免误诊。 展开更多
关键词 疟疾 卵形疟原虫 wallikeri变种 巢式PCR
人巨细胞病毒基因在胶质瘤中的表达及其与患者预后的关系分析
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作者 丁大领 李远 +4 位作者 张风江 吴力新 郭宗泽 刘献志 孙剑瑞 《中华神经医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期554-557,共4页
目的分析人巨细胞病毒(HCMP)基因在脑胶质瘤中的表达,探讨HCMV感染和胶质瘤患者预后的关系。方法选取郑州大学第一附属医院和中国医科大学附属第一医院神经外科自2007年1月至2016年12月手术切除并经病理证实的脑胶质瘤标本89例,其中... 目的分析人巨细胞病毒(HCMP)基因在脑胶质瘤中的表达,探讨HCMV感染和胶质瘤患者预后的关系。方法选取郑州大学第一附属医院和中国医科大学附属第一医院神经外科自2007年1月至2016年12月手术切除并经病理证实的脑胶质瘤标本89例,其中WHO分级Ⅱ级32例、Ⅲ级31例、Ⅳ级26例。另外选取同期因行原发性癫痫切除术切除的正常脑组织10例作为对照组。巢式PCR检测脑胶质瘤组织和正常脑组织、胶质瘤组和对照组患者外周血HCMV基因的表达;Kaplan—Meier生存分析评价患者的预后。结果89例脑胶质瘤组织中46例HCMV基因表达阳性,其中WHO分级Ⅱ级14例、Ⅲ级16例、Ⅳ级16例。10例正常脑组织HCMV基因表达阴性。脑胶质瘤组织与正常脑组织中HCMV基因表达差异有统计学意义(P=0.002)。26例脑胶质瘤患者血清感染HCMV,其中胶质瘤WHO分级Ⅱ级10例、Ⅲ级8例、Ⅳ级8例,10例对照组患者血清未感染HCMV。脑胶质瘤组及对照组患者外周血中HCMV基因表达差异有统计学意义(P=0.048)。胶质瘤组织HCMV表达阳性、阴性和外周血HCMV表达阳性、阴性患者的生存率差异均无统计学意义(χ^2=1.849.P=0.174;χ^2=0.082,P=0.774)。结论HCMV感染在脑胶质瘤的发生发展过程中起重要作用。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 神经胶质瘤 巢式PCR
长春地区兔的隐孢子虫分子流行病学调查
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作者 邰利鑫 林永超 +4 位作者 宫鹏涛 李建华 王一凡 李巍 张西臣 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第10期104-106,共3页
为了对长春地区家兔的隐孢子虫感染情况进行分子流行病学调查,试验针对隐孢子虫基因中核糖体小亚基RNA(SSUrRNA)保守序列分别设计两对引物进行PCR扩增,建立检测家兔的隐孢子虫的巢式PCR方法,并对长春不同地区3个兔场149份家兔粪便样... 为了对长春地区家兔的隐孢子虫感染情况进行分子流行病学调查,试验针对隐孢子虫基因中核糖体小亚基RNA(SSUrRNA)保守序列分别设计两对引物进行PCR扩增,建立检测家兔的隐孢子虫的巢式PCR方法,并对长春不同地区3个兔场149份家兔粪便样品进行流行病学调查。结果表明:本试验成功建立了兔隐孢子虫巢式PCR方法,特异性扩增出了大小为1 325 bp和830 bp的目的片段,利用建立的PCR方法检测出8份阳性样品,阳性率为5.37%,其中1份为微小隐孢子虫(C.parvum),7份为兔隐孢子虫(C.cuniculus)。说明建立的巢式PCR方法具有较高的灵敏性和特异性,适合于临床应用,同时发现长春地区兔隐孢子虫感染存在人兽共患虫种。 展开更多
关键词 SSUrRNA基因 PCR扩增 微小隐孢子虫 兔隐孢子虫 巢式PCR
两种检测方法在间日疟和卵形疟诊断中的应用分析 预览
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作者 李联军 贾西帅 周水茂 《热带病与寄生虫学》 2018年第1期9-11,44共4页
目的分析疟原虫镜检和巢式PCR检测间日疟和卵形疟效果。方法收集2012~2016年输入性间日疟和卵形疟病例血样,巢式PCR检测疟原虫ssRNA基因,并与显微镜检结果进行比对。结果显微镜检和巢式PCR检测71份血样,间日疟、卵形疟、混合感染分别占... 目的分析疟原虫镜检和巢式PCR检测间日疟和卵形疟效果。方法收集2012~2016年输入性间日疟和卵形疟病例血样,巢式PCR检测疟原虫ssRNA基因,并与显微镜检结果进行比对。结果显微镜检和巢式PCR检测71份血样,间日疟、卵形疟、混合感染分别占74.6%、25.4%、0%和63.4%、29.6%、7%,符合率为81.7%;亚洲23份血样,镜检与巢式PCR均为间日疟,符合率为100%,巢式PCR检测非洲血样48份,间日疟、卵形疟和混合感染分别占45.8%、43.8%和10.4%,镜检与巢式PCR符合率为72.9%;巢式PCR检测26份卵形疟,经典curtisi、变种wallikeri和混合感染分别占80.8%、11.5%和7.7%,检出变种wallikeri总数占卵形疟19.2%。结论巢式PCR检测疟原虫虫种鉴别优于传统镜检法,可提高疟疾病例诊断水平。 展开更多
关键词 镜检 巢式PCR 间日疟 卵形疟
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