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3D培养体系富集外周血中的循环肿瘤干细胞的研究
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作者 周鲁林 张文 +3 位作者 段新春 郭丽萍 冯林 张开泰 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期381-386,共6页
[目的]探究建立3D培养体系富集外周血中的循环肿瘤干细胞。[方法]应用阴性筛选的方法富集外周血中的循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs),随后利用3D培养体系将富集得到的细胞进行培养。采用免疫荧光、定量RT-PCR对3D培养的前... [目的]探究建立3D培养体系富集外周血中的循环肿瘤干细胞。[方法]应用阴性筛选的方法富集外周血中的循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs),随后利用3D培养体系将富集得到的细胞进行培养。采用免疫荧光、定量RT-PCR对3D培养的前列腺癌LNCaP细胞系、肺癌H2347细胞系的干性表型特征进行分析。使用肺癌患者的血液样本分离CTCs进行3D培养验证该方法的可行性。[结果]在光镜下可观察到,在3D培养体系中从外周血分离的前列腺癌LNCaP细胞增殖形成肿瘤细胞微球。免疫荧光结果显示,在3D培养条件下成团生长的前列腺癌LNCaP细胞表达EpCAM和CD133。在3D无血清培养条件下,LNCaP细胞系成球率为18.67%±3.06%。前列腺癌LNCaP细胞在3D培养体系中与普通2D培养相比,干性相关基因CD133、CD44和ABCG2表达水平明显增高,3D培养的肺癌H2347细胞与普通2D培养相比,干性相关基因CD133表达水平明显升高。肺腺癌患者肺静脉血分离CTCs 3D培养,可形成多个微型肿瘤细胞微球(称为肺癌类器官)。在光镜下观察,同一个患者培养获得的肺癌类器官呈现不同的形态结构特征。[结论]利用3D培养体系能够培养外周血中的CTCs,并富集得到CD133+的肿瘤干细胞。肺癌患者的CTCs 3D培养能够形成肺癌类器官,并能够展现CTCs的异质性。 展开更多
关键词 循环肿瘤细胞 循环肿瘤干细胞 3D培养 类器官
表面蛋白EpCAM检测循环肿瘤细胞缺陷的研究进展 预览
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作者 谢瑞芝 黎必非 +2 位作者 练殊 李书慧 贾力 《癌症进展》 2018年第10期1216-1220,1313共6页
近年来,越来越多的研究显示循环肿瘤细胞(CTC)与肿瘤的转移性复发和病死率升高有关,CTC的探测、统计和定量研究成为研究热潮。最新的研究表明,CTC具有多相性,包括上皮肿瘤细胞、上皮-间充质转化(EMT)细胞、混合(上皮和EMT阳性)肿... 近年来,越来越多的研究显示循环肿瘤细胞(CTC)与肿瘤的转移性复发和病死率升高有关,CTC的探测、统计和定量研究成为研究热潮。最新的研究表明,CTC具有多相性,包括上皮肿瘤细胞、上皮-间充质转化(EMT)细胞、混合(上皮和EMT阳性)肿瘤细胞、循环肿瘤干细胞(CTSC)和不可逆EMT阳性肿瘤细胞;另外,CTC表面蛋白上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达是动态的。以EpCAM为基础的检测方法无法检测到EpCAM表达低的CTC、EpCAM-细胞、CTSC和EMT阳性的细胞,因此在肿瘤扩散中以EpCAM为基础的富集方法可能低估CTC、CTSC、EMT阳性肿瘤细胞的重要性,EpCAM可能不是用于检测CTC的完美标志物。 展开更多
关键词 循环肿瘤细胞 上皮细胞黏附分子 循环EMT阳性肿瘤细胞 循环不可逆EMT阳性肿瘤细胞 循环肿瘤干细胞
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循环肿瘤细胞在结直肠癌治疗中的研究现状 预览 被引量:1
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作者 张文杰 张冰凯 +7 位作者 董朔晖 董浩 刘增林 郑文博 张翔 王延磊 胡三元 戴勇 《腹腔镜外科杂志》 2018年第8期628-632,共5页
循环肿瘤细胞被认为是癌症患者的一种实时“液体活组织”,可反映疾病进展与预后,有效检测是其应用于临床的前提。循环肿瘤细胞计数作为结直肠癌预后的独立预测因素已被广泛接受,而循环肿瘤细胞内部蕴含的丰富异质性信息具有更大的临... 循环肿瘤细胞被认为是癌症患者的一种实时“液体活组织”,可反映疾病进展与预后,有效检测是其应用于临床的前提。循环肿瘤细胞计数作为结直肠癌预后的独立预测因素已被广泛接受,而循环肿瘤细胞内部蕴含的丰富异质性信息具有更大的临床价值。此外,循环肿瘤千细胞作为具有千细胞特性的独特亚群,可能是早期发现、阻断肿瘤发生与转移的关键。循环肿瘤细胞体外模型的建立,在为其参与肿瘤转移提供更直接证据的同时,也为结直肠癌个体化治疗提供了新思路。因此,基于循环肿瘤细胞的个体化、实时性治疗会是循环肿瘤细胞应用于结直肠癌治疗的发展趋势。 展开更多
关键词 循环肿瘤细胞 循环肿瘤干细胞 结直肠肿瘤
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流式细胞术检测结直肠癌根治术前后循环肿瘤细胞和循环肿瘤干细胞及其临床预测价值 被引量:3
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作者 许扬梅 刘巧珍 +4 位作者 刘沁颖 魏晟宏 陈路川 应敏刚 郑秋红 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期355-361,共7页
目的:探讨流式细胞仪检测结直肠癌根治术前后循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)和循环肿瘤干细胞(circulating tumor stem cell,CTSC)作为患者临床预测指标的可行性和临床价值。方法:入组首诊初治50例结直肠癌患者,手... 目的:探讨流式细胞仪检测结直肠癌根治术前后循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)和循环肿瘤干细胞(circulating tumor stem cell,CTSC)作为患者临床预测指标的可行性和临床价值。方法:入组首诊初治50例结直肠癌患者,手术前后各抽取15 ml外周血。分离单个核细胞后分成两份,一份标记CTC标志物(CD45、EpCAM 和CK),另一份标记CTSC标志物(CD45、EpCAM、CD44和CD133),Moflo XDP流式细胞仪对其进行检测, CD45-EpCAM^+CK^+细胞确定为CTC;CTSC确定为3群:CD44^+CTSC、 CD133^+ CTSC和CD44^+ CD133^+ CTSC。 结果:结直肠癌根治术前患者CTC和CD44^+CTSC阳性率分别为34%和44% ,CD133^+ CTSC和CD44^+ CD133^+ CTSC是 24%和0;术后患者CTC和CD44^+CTSC阳性率分别为38%和54%,CD133^+ CTSC 和CD44^+ CD133^+CTSC分别为26%和0。根治术前后CTC阳性率都与肿瘤T分期有关联(P〈0.05);术后CTC与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和远处转移有关联(P〈0.05);术前CD44^+CTSC与肿瘤的浸润深度有关联。结论:根治术前后CTC及术前CD44^+CTSC阳性率都具有临床预测指标的可行性和价值,术后CTC阳性率可能是更好的预测指标。 展开更多
关键词 结直肠癌 循环肿瘤细胞 循环肿瘤干细胞 CD133 CD44 流式细胞
液体活检和肿瘤精准医疗 被引量:1
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作者 许扬梅 郑秋红 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期589-594,共6页
精准医疗新技术——液体活检,既有极高的科研价值,又具备助力推进精准医疗临床实践的巨大潜能。它可用于癌症早期筛查、诊断、监控、治疗方案指导和疗效评估等众多领域,液体活检的优势使其成为最具发展潜力的肿瘤诊疗手段。本文围绕... 精准医疗新技术——液体活检,既有极高的科研价值,又具备助力推进精准医疗临床实践的巨大潜能。它可用于癌症早期筛查、诊断、监控、治疗方案指导和疗效评估等众多领域,液体活检的优势使其成为最具发展潜力的肿瘤诊疗手段。本文围绕液体活检在临床肿瘤精准医疗的应用前景,从概念、特点、研究方法和个体化肿瘤治疗、临床应用及研究现状等方面进行阐述,展示了液体活检巨大的临床应用价值和市场前景。 展开更多
关键词 液体活检 精准医疗 循环肿瘤细胞 循环肿瘤DNA 循环肿瘤干细胞
循环肿瘤干细胞与原发性乳腺癌患者生存时间的相关性分析 预览
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作者 李卉 王珏 +2 位作者 何敏 巴雅力格 张翠英 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2016年第41期30-,37共2页
目的:分析循环肿瘤干细胞与原发性乳腺癌患者生存时间的相关性。方法:将我院48例原发性乳腺癌患者作为研究对象,并进行外周血的免疫组化检测,分析循环肿瘤干细胞与原发性乳腺癌患者生存时间的关系。结果:患者的乳腺癌组织的上皮细胞CK19... 目的:分析循环肿瘤干细胞与原发性乳腺癌患者生存时间的相关性。方法:将我院48例原发性乳腺癌患者作为研究对象,并进行外周血的免疫组化检测,分析循环肿瘤干细胞与原发性乳腺癌患者生存时间的关系。结果:患者的乳腺癌组织的上皮细胞CK19+/CD44+/CD24-/LOW的表达率较癌旁组织更高,且在外周血样本中,CK19+/CD44+/CD24-/LOW阳性率增高会使得C-erbB-2的表达强度随之增高,同时CK19+/CD44+/CD24-/LOW表达率增高,患者远处转移发生率及死亡率会随之增高。结论:循环肿瘤干细胞与原发性乳腺癌患者生存时间之间存在一定相关性,临床上可通过对循环肿瘤干细胞的动态监测来实现对乳腺癌患者病情和临床疗效的了解,值得推广。 展开更多
关键词 循环肿瘤干细胞 原发性乳腺癌患者 生存时间 相关性
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胃癌患者45例外周血肿瘤干细胞样循环肿瘤细胞的检测 被引量:2
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作者 李熳 张志广 +1 位作者 刘霞 罗丹 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期726-729,共4页
目的研究胃癌患者外周血中CD44(胃癌干细胞标志物)阳性的循环肿瘤细胞(CTC)的表达及其意义。方法纳入2010年3月至2012年12月的45例胃癌患者和20名健康体检者。采集所有纳入对象的外周血,应用密度梯度离心法和双重免疫荧光法(细胞... 目的研究胃癌患者外周血中CD44(胃癌干细胞标志物)阳性的循环肿瘤细胞(CTC)的表达及其意义。方法纳入2010年3月至2012年12月的45例胃癌患者和20名健康体检者。采集所有纳入对象的外周血,应用密度梯度离心法和双重免疫荧光法(细胞角蛋白19/CD44)检测CTC和CD44阳性的CTC。统计学分析采用卡方检验和t检验。结果健康对照者外周血中未检出CTC。45例胃癌患者外周血中,27例(60%)检出CTC,其中19例为CD44阳性。两组CTC阳性率差异有统计学意义(X2=10.986,P〈0.05)。27例CTC阳性的患者中,近端胃癌19例,其中16例为CD44阳性;16例出现淋巴结转移,其中14例为CD44阳性;13例出现远处转移,其中12例为CD44阳性;14例出现复发,其中13例为CD44阳性;CD44阳性的CTC与胃癌患者的肿瘤部位、淋巴结转移、远处转移和复发有关(X2=5.89l、5.527、5.787、7.052,P均〈0.05)。13例复发的CD44阳性CTC患者,其复发时间为(10.54±5.55)个月,短于1例CD44阴性CTC患者的19个月,差异有统计学意义(t=-3.654,P=0.004)。结论表达肿瘤干细胞标志物的CTC与胃癌的复发转移相关,检测这部分亚群的CTC可能更有临床意义。 展开更多
关键词 肿瘤 肿瘤循环细胞 肿瘤干细胞 循环肿瘤干细胞 CD44
循环肿瘤细胞检测及其特性 预览 被引量:8
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作者 杨卓 张玉娟 +2 位作者 陈倩 付静轩 崔巍 《协和医学杂志》 2013年第2期191-194,共4页
肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的重要原因,现有影像学手段及传统肿瘤标志物不能辅助医生尽早发现肿瘤转移并判断预后。外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)存在于肺癌、乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、膀胱癌和卵巢癌等... 肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的重要原因,现有影像学手段及传统肿瘤标志物不能辅助医生尽早发现肿瘤转移并判断预后。外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)存在于肺癌、乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、膀胱癌和卵巢癌等多种恶性肿瘤中, 展开更多
关键词 循环肿瘤细胞 分离 鉴定 循环肿瘤干细胞
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