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Tbx18通过下调EMT信号分子参与调控心脏发育
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作者 张进 佘强 +1 位作者 范洁 魏飞宇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第3期236-243,共8页
转录因子Tbx18(Tbx18)在小鼠胚胎心外膜上皮细胞表达并调控心外膜上皮细胞向心系细胞分化.上皮间充质转化(EMT)过程是器官发育和形成的重要机制.为阐述Tbx18通过调控下游EMT关键信号分子参与心外膜上皮细胞分化和心脏发育,本研... 转录因子Tbx18(Tbx18)在小鼠胚胎心外膜上皮细胞表达并调控心外膜上皮细胞向心系细胞分化.上皮间充质转化(EMT)过程是器官发育和形成的重要机制.为阐述Tbx18通过调控下游EMT关键信号分子参与心外膜上皮细胞分化和心脏发育,本研究运用Tbxl8-Cre/Rosa26R.EYFP双杂合基因敲入小鼠和免疫荧光共聚焦,证实Tbx18’心系细胞和EMT关键信号分子Snaill、Smad、Slug、Twist在发育后期胚鼠心外膜和心外膜下间充质发生共聚焦.同时还发现,Tbx18在胚鼠不同发育阶段的表达模式和Tbx18’心系细胞内上述EMT关键信号分子的表达模式相似.Tbxl8和EMT关键信号分子在发育心脏存在相似的时空表达模式,因此,它们之间可能存在相互调控作用.运用Tbx18突变技术揭示了Tbx18突变型胚鼠心脏EMT关键信号分子表达水平均较野生型显著下调,直接证实了上述4个EMT信号分子是Tbx18的可能靶点.理解Tbx18参与心脏发育的下游靶点有助于改善成年心脏损伤后的再生修复. 展开更多
关键词 转录因子Tbx18 上皮间充质转化(EMT) 心外膜细胞 脏发育
心外膜和心外膜源细胞在心脏缺血修复治疗中的作用 预览 被引量:1
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作者 鲁映映 李一文 《国际心血管病杂志》 2013年第5期272-275,共4页
心外膜是由前体心外膜细胞逐渐分化形成并覆盖于心脏表面的间皮组织。心外膜的部分细胞通过上皮间充质转化进入心外膜下层,随后形成心肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌细胞,最终导致冠脉系统的形成和心脏的发育。研究表明,... 心外膜是由前体心外膜细胞逐渐分化形成并覆盖于心脏表面的间皮组织。心外膜的部分细胞通过上皮间充质转化进入心外膜下层,随后形成心肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌细胞,最终导致冠脉系统的形成和心脏的发育。研究表明,成年哺乳动物心外膜细胞具有多向分化的潜能,可能是心脏驻留干细胞的来源,并且可通过旁分泌作用保护心肌梗死后幸存组织。因此,心外膜细胞在心脏修复治疗中发挥重要的作用,已成为心肌再生领域的研究热点。 展开更多
关键词 心外膜细胞 心外膜细胞 缺血修复 再生
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小鼠胚胎心脏心外膜细胞体外培养模型的建立 预览
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作者 曾彬 王艾丽 +1 位作者 胡冬冬 李昌 《中国组织工程研究》 CSCD 2013年第44期7661-7666,共6页
背景:胚胎心脏心外膜细胞是最近被发现的具有分化为心肌细胞和血管平滑肌细胞潜能的心脏干细胞,可分化为心脏三系细胞,为心脏损伤的再生提供了新的细胞来源,但其定向分化机制及调控因素仍不清楚。目的:体外建立小鼠胚胎心脏心外膜... 背景:胚胎心脏心外膜细胞是最近被发现的具有分化为心肌细胞和血管平滑肌细胞潜能的心脏干细胞,可分化为心脏三系细胞,为心脏损伤的再生提供了新的细胞来源,但其定向分化机制及调控因素仍不清楚。目的:体外建立小鼠胚胎心脏心外膜细胞培养模型。方法:解剖显微镜下分离11.5-12.5 d小鼠胚胎心脏,剪除肺静脉血管、心房组织及左心室,移至6孔板(或35 mm培养皿)培养,24 h后移走胚胎心脏组织继续培养。相差显微镜观察胚胎心外膜细胞生长特点;使用免疫荧光技术对细胞进行胚胎心外膜细胞特异性抗体Wt-1、Tbx18染色。结果与结论:胚胎心外膜单层细胞从组织块边缘长出,呈鹅卵石样,并围绕组织块向外延伸。移去胚胎心脏后细胞继续生长,且增殖迅速,三四天后长至融合。所有细胞均强阳性表达胚胎心脏心外膜细胞特异性抗体Wt-1及Tbx18。结果表明,胚胎心脏心外膜细胞生长迅速、形态单一,均表达心外膜细胞特异因子,细胞纯度高,成功构建了体外胚胎心脏心外膜细胞培养模型,为研究其定向分化的分子机制提供了新的思路。 展开更多
关键词 器官移植 肺移植 脏干细胞 心外膜细胞 细胞培养 分化 再生 增殖 信号通路 Wt-1 Tbx-18 国家自然科学基金
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心外膜细胞在心脏发育及再生的研究进展 预览
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作者 刘亚杰 佘强 《心血管病学进展》 CAS 2012年第3期 428-431,共4页
心外膜是由前体心外膜细胞逐渐分化形成并覆盖于心脏表面的间皮组织。研究表明,哺乳动物心外膜细胞具有多向分化的潜能,因而心外膜细胞现已成为心肌再生领域的研究热点。现就心外膜细胞功能、标志基因及其在心脏再生领域研究进展做一综... 心外膜是由前体心外膜细胞逐渐分化形成并覆盖于心脏表面的间皮组织。研究表明,哺乳动物心外膜细胞具有多向分化的潜能,因而心外膜细胞现已成为心肌再生领域的研究热点。现就心外膜细胞功能、标志基因及其在心脏再生领域研究进展做一综述,并展望其研究前景。 展开更多
关键词 心外膜细胞 发育 再生
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心外膜细胞标记基因介导的Cre重组酶在双转基因小鼠心脏的表达 预览 被引量:1
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作者 曾彬 武智晓 +2 位作者 张静 易欣 马乐乐 《微循环学杂志》 2011年第3期 12-13,F0003,I0001,共4页
目的:检测心外膜细胞标记基因Tbx18介导的Cre重组酶在双转基因小鼠心脏的表达及分布。方法:将Tbx18-Cre小鼠与ROSA26报告小鼠交配,收获不同怀孕天数(12.5天、13.5天、14.5天)的胚胎,用PCR技术筛选双转基因阳性胚胎,取阳性胚胎心脏... 目的:检测心外膜细胞标记基因Tbx18介导的Cre重组酶在双转基因小鼠心脏的表达及分布。方法:将Tbx18-Cre小鼠与ROSA26报告小鼠交配,收获不同怀孕天数(12.5天、13.5天、14.5天)的胚胎,用PCR技术筛选双转基因阳性胚胎,取阳性胚胎心脏进行冰冻切片、X-Gal染色。结果:PCR检测每只小鼠胚胎中约一半胚胎为双转基因阳性,这些胚胎心脏的心外膜、左心室壁及室间隔均可检测到X-Gal阳性的蓝色细胞;且随着胚胎心脏的发育,蓝色细胞显著增多。结论:心外膜细胞标记基因Tbx18介导的Cre重组酶能有效地在双转基因胚胎小鼠心脏表达,表明Tbx18在心脏发育过程中扮演重要角色。 展开更多
关键词 心外膜细胞 标记基因Tbx18 CRE重组酶 双转基因小鼠
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动作电位参数作为区分狗心室肌三种细胞的可行性研究 预览 被引量:2
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作者 王焱 巩燕 +1 位作者 黄卫斌 王挹青 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2005年第6期 472-475,共4页
应用细胞膜片钳技术测定狗心室肌细胞的电生理特征、动作电位(AP)以及收缩的参数,并用统计学方法评价所测量的参数是否可将心内、外膜及中层(M)细胞有效地区分开.结果:获取52个混合的有3种心肌细胞的AP,以AP穹隆的高度以及 AP切迹的膜... 应用细胞膜片钳技术测定狗心室肌细胞的电生理特征、动作电位(AP)以及收缩的参数,并用统计学方法评价所测量的参数是否可将心内、外膜及中层(M)细胞有效地区分开.结果:获取52个混合的有3种心肌细胞的AP,以AP穹隆的高度以及 AP切迹的膜电位水平和穹隆上升的速度将其分三组细胞.以穹隆的膜电位水平能有效区分心外膜与其他两种细胞(P<0.05), 但不能有效区分心内膜和M细胞(P>0.05).以AP时程(APD)可以有效区分M细胞与其他两种细胞(P<0.05),但不能有效区分心内膜和心外膜细胞(P>0.05).尖峰-切迹时间以及收缩参数均不能有效区分三种心室肌细胞(P>0.05).结论:狗心室单个细胞AP的一些参数, 可以作为辨别心内、外膜,M细胞的依据. 展开更多
关键词 电生理学 动作电位 内膜细胞 心外膜细胞 肌中层M细胞
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共培养诱导心外膜祖细胞向血管平滑肌细胞的分化
7
作者 李英瑞 李郁 +4 位作者 景小东 刘亚杰 赵郑波 刘斌 佘强 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期556-562,共7页
目的探讨冠脉发育过程中,血管内皮细胞是否可以影响心外膜祖细胞(epicardial progenitor cells,EpiCs)的分化从而调节冠状动脉的发育。方法饲养7~8周龄成年C57BL/6小鼠60只(雌、雄各半,体质量25~30 g)。提取出高纯度的EpiCs,实验分为对... 目的探讨冠脉发育过程中,血管内皮细胞是否可以影响心外膜祖细胞(epicardial progenitor cells,EpiCs)的分化从而调节冠状动脉的发育。方法饲养7~8周龄成年C57BL/6小鼠60只(雌、雄各半,体质量25~30 g)。提取出高纯度的EpiCs,实验分为对照组与共培养组,通过Transwell共培养系统探讨血管内皮细胞和EpiCs间的相互作用,采用细胞免疫荧光技术和荧光定量PCR分别检测EpiCs标志物WT1和Tbx18、平滑肌细胞标志物α-SMA和Myh11的蛋白表达与mRNA表达;胶原凝胶收缩实验检测细胞收缩能力;ELISA实验检测培养基中生长因子的表达。结果与对照组比较,共培养系统下血管内皮细胞可促进EpiCs中α-SMA[(1.73±0.85)%vs(34.20±3.38)%,P<0.01,n=3]与Myh11[(3.70±1.49)%vs(45.63±4.85)%,P<0.01,n=3]的表达并增强EpiCs的收缩能力,并且对共培养条件培养基的检测可见在此过程中碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factors,bFGFs)的升高[(87.64±8.78)vs(304.96±52.91)pg/mL,P<0.01,n=3]。结论血管内皮细胞可通过分泌bFGFs调节EpiCs向血管平滑肌细胞的分化,从而调节冠状动脉的发育。 展开更多
关键词 心外膜细胞 Transwell共培养 细胞分化
Wdpcp基因调控心脏冠状动脉发育的机制 预览
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作者 刘向阳 CAI Chen-leng 《上海交通大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第4期361-362,共2页
Wdpcp作为平面细胞极性的效应基因,在胚胎时期主要通过影响细胞运动和初级纤毛生长参与多种器官和组织的发生和发育过程。WDPCP突变与临床上Bardet-Biedl综合征和Meckel-Gruber综合征相关。该文主要揭示了Wdpcp基因调节小鼠冠状动脉发... Wdpcp作为平面细胞极性的效应基因,在胚胎时期主要通过影响细胞运动和初级纤毛生长参与多种器官和组织的发生和发育过程。WDPCP突变与临床上Bardet-Biedl综合征和Meckel-Gruber综合征相关。该文主要揭示了Wdpcp基因调节小鼠冠状动脉发育的新功能和机制,丰富了该基因的致病类型,为临床上诊断冠状动脉疾病的发病原因提供了重要的遗传学依据。 展开更多
关键词 Wdpcp基因 冠状动脉发育 心外膜来源细胞 上皮-间充质转化
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心外膜脂肪细胞核因子-κB信号途径抑制在抗动脉粥样硬化中的作用 预览 被引量:1
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作者 邢杰 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期6981-6983,共3页
目的研究心外膜脂肪细胞核因子(NF)-κB信号途径抑制在抗动脉粥样硬化中的作用。方法建立泡沫细胞模型,分为空白组,转染试剂组,siRNA干扰组,高脂组,高脂+SRT1720组,高脂+SRT1720+siRNA干扰组。采用油红O染色判断模型的建立,采用Western... 目的研究心外膜脂肪细胞核因子(NF)-κB信号途径抑制在抗动脉粥样硬化中的作用。方法建立泡沫细胞模型,分为空白组,转染试剂组,siRNA干扰组,高脂组,高脂+SRT1720组,高脂+SRT1720+siRNA干扰组。采用油红O染色判断模型的建立,采用Western印迹方法进行蛋白表达的分析。结果建立模型成功;与高脂组比较,高脂+SRT1720组SIRT1蛋白表达量升高显著,NF-κB及其下游靶分子肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白表达量下降显著(P<0.05)。与高脂+SRT1720组比较,高脂+SRT1720+siRNA干扰组SIRT 1蛋白表达量下降显著,NF-κB及其下游靶分子TNF-α蛋白表达量升高显著(均P<0.05)。结论泡沫细胞中SIRT1是NF-κB信号通路的上游,通过抑制心外膜脂肪组织NF-κB炎症信号途径,参与调节泡沫细胞从动脉粥样硬化斑块中移出,可为防治冠状动脉粥样硬化的治疗提供新的手段。 展开更多
关键词 NF-κB信号途径 心外膜脂肪细胞 抗动脉粥样硬化 沉默信息调节因子(SIRT)1
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双异丙吡胺对犬右心室心外膜下细胞瞬间外向钾电流抑制作用的研究 预览
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作者 王立中 杨新春 +2 位作者 张银 王金波 曹树军 《中国医药导刊》 2006年第3期 208-209,213,共3页
目的:探讨双异丙吡胺对犬右心室心外膜下(Epi)细胞复极1期末4-氨基吡啶敏感的非钙依赖性瞬间外向钾电流(Ito1)的抑制作用,以期为临床药物治疗Brugada综合征等起源于右心室的恶性心律失常疾病提供必要的证据。方法:酶解分离犬右心... 目的:探讨双异丙吡胺对犬右心室心外膜下(Epi)细胞复极1期末4-氨基吡啶敏感的非钙依赖性瞬间外向钾电流(Ito1)的抑制作用,以期为临床药物治疗Brugada综合征等起源于右心室的恶性心律失常疾病提供必要的证据。方法:酶解分离犬右心室Epi单个心肌细胞,在全细胞钳制条件下,观察双异丙吡胺对犬右心室Epi细胞Ito1离子流的抑制作用。结果:(1)在刺激频率为0.2Hz、37℃和去极化试验电压+70mv水平,在临床相关的治疗浓度范围内双异丙吡胺呈浓度依赖性有效地抑制犬Ito1离子流而无电压依赖性。(2)当刺激频率超过1Hz时,双异丙吡胺对Ito1离子流的抑制作用具有明显的快频率应用依赖性。(3)双异丙吡胺对Ito1离子流的抑制作用依赖于去极化试验电压脉冲提示双异丙吡胺属于通道开放状态阻滞剂。结论:在临床相关的治疗浓度范围内双异丙吡胺能以浓度依赖性方式抑制犬右心室Epi细胞的Ito1离子流,恢复Epi细胞间Ito1离子流的均衡性,因而对Brugada综合征等疾病所致的、以2相折返为基础的恶性心律失常可能有预防作用。 展开更多
关键词 双异丙吡胺 犬右 心外膜细胞 瞬间外向钾电流
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心外膜脂肪细胞核因子(NF)-κB信号途径抑制在抗动脉粥样硬化中的作用分析 预览
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作者 林伯理 《当代医学》 2017年第30期127-129,共3页
目的分析在抵抗动脉粥样硬化过程中,心外膜脂肪细胞核因子(NF)-κB信号途径的抑制。方法建立泡沫模型之后,采用油红染色O来判断模型是否建立成功,将其分成空白组,siRNA干扰组,转染试剂组,高脂组,高脂+SRT1720+siRNA干扰组,高... 目的分析在抵抗动脉粥样硬化过程中,心外膜脂肪细胞核因子(NF)-κB信号途径的抑制。方法建立泡沫模型之后,采用油红染色O来判断模型是否建立成功,将其分成空白组,siRNA干扰组,转染试剂组,高脂组,高脂+SRT1720+siRNA干扰组,高脂+SRT1720组,分析其蛋白表达的分析均采用Western的方式。结果模型被成功建立之后,从SIRT1蛋白表达量来看,高脂+SRT1720组相对于高脂组升高明显,其下游的靶向分子肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白表达量及(NF)-κB下降显著。SIRT1蛋白表达量高脂+SRT1720+siRNA干扰组比高脂+SRT1720组相比下降量更为显著,其下游的靶向分子肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白表达量及(NF)-κB升高更为显著。结论泡沫细胞模型中(NF)-κB的信号通路上游是SIRT1,其作用为抑制心外膜脂肪细胞核因子(NF)-κB炎症信号途径,调节并参与帮助泡沫细胞的移除,从动脉粥样硬化的斑块当中。此种方式可以提供新的手段在预防及治疗动脉粥样硬化上,为广大临床患者获得更高的治疗途径。 展开更多
关键词 心外膜脂肪细胞核因子(NF)-κB信号途径 抵抗动脉粥样硬化 作用分析
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利多卡因对家兔左右心室外膜心肌细胞电不均一性的影响
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作者 周军 王腾 +2 位作者 胡河 曹红 秦牧 《武汉大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2012年第1期 17-22,共6页
目的:探讨利多卡因对家兔左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和钠电流(INa)的影响,阐明利多卡因引起左、右心室心外膜心肌细胞电不均一性机制。方法:酶解法分离家兔单个左、右心室心外膜心肌细胞,全细胞膜片钳技术记录左、右心室心... 目的:探讨利多卡因对家兔左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和钠电流(INa)的影响,阐明利多卡因引起左、右心室心外膜心肌细胞电不均一性机制。方法:酶解法分离家兔单个左、右心室心外膜心肌细胞,全细胞膜片钳技术记录左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和INa在应用利多卡因前后变化。结果:在电流钳制下,对照组中的左、右心室心外膜心肌细胞上记录动作电位都具有典型的0至4期的形态,2相平台期有心外膜心肌细胞特有的穹窿样凸起;但在利多卡因组,左、右心室心外膜心肌细胞动作均明显地失去2相平台期穹窿样凸起和高度,右室心外膜心肌细胞动作电位失去2相平台期立即复极,形似三角形,左、右心室心外膜心肌细胞动作电位的幅度(APA)和复极化50%和90%(APD50和APD90)均明显减少(P〈0.05),且右室心外膜心肌细胞的APA和APD50以及APD90受利多卡因影响后减小最为严重(P〈0.05或0.01)。通过电压钳制方式,利多卡因使左、右心室心外膜心肌细胞的INa在各个指令电位下明显减小,而且右室心外膜心肌细胞INa减小的幅度要显著强于左室心外膜心肌细胞INa的减小幅度,当钳制电压为-20mV时,左、右心室心外膜心肌细胞的INa分别由(62.1±4.5)和(54.2±2.9)减小为(40.8±3.2)和(26.5±2.1)(P〈0.05或0.01)。利多卡因还使左、右心室心外膜心肌细胞INa的I-V曲线明显上抬,尤其是使右室心外膜心肌细胞INa的I-V曲线处在其他曲线最上面,同时引起左、右心室心外膜心肌细胞的INa电流密度的最大峰值由-20mV略向右偏为-10mV。结论:利多卡因可以引起左、右心室心外膜心肌细胞电不均一性,其可能原因是利多卡因对右室心外膜心肌细胞动作电位和INa的影响程度明显强于左室相同情况。 展开更多
关键词 利多卡因 细胞膜片钳技术 动作电位 钠电流 心外膜细胞 电不均一性
异丙酚对家兔心室外膜心肌细胞动作电位和L-型钙电流的影响 预览 被引量:2
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作者 王腾 汪晶晶 +4 位作者 唐其柱 黄从新 江洪 杨波 李庚山 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2008年第5期 438-441,共4页
目的研究异丙酚对家兔左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和L-型钙电流的影响。方法酶解法分离家兔左、右心室心外膜心肌细胞。全细胞膜片钳技术记录左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和L一型钙电流(ICa-L)在使用异丙酚前后的变化。结... 目的研究异丙酚对家兔左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和L-型钙电流的影响。方法酶解法分离家兔左、右心室心外膜心肌细胞。全细胞膜片钳技术记录左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和L一型钙电流(ICa-L)在使用异丙酚前后的变化。结果在电流钳制下,左、右心室心外膜心肌细胞动作电位都具有从0期到4期的动作电位形态,2相平台期有心外膜心肌细胞特有的穹窿样突起。异丙酚使右室心外膜心肌细胞动作电位失去2相平台期穹窿样突起,呈三角形尖锥锋形。左、右心室心外膜心肌细胞动作电位时程复极化50%和90%(APD50和APD90)在异丙酚作用后都明显缩短,其中右室心外膜心肌细胞APD50和APD90缩短最为明显(P〈0.05或0.01)。在电压钳制下,异丙酚使左、右心室心外膜心肌细胞ICa-L在同一指令电位下,电流幅度均明显减小,但右室心外膜心肌细胞ICa-L的减小幅度明显强于左室同层ICa-L的减小幅度(P〈0.01)。异丙酚还使左、右心室心外膜心肌细胞ICa-L的I—V曲线上移,并且使右室心外膜心肌细胞ICa-L的I-V曲线处在所有I—V曲线最上部。结论异丙酚对右室心外膜心肌细胞动作电位和ICa-L的影响程度明显强于左室,从而引起左、右心外膜心肌细胞电不均一性。 展开更多
关键词 电生理学 异丙酚 动作电位 L-型钙电流 电不均一性 右室心外膜细胞
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