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人乳牙和恒牙牙髓干细胞中唾液腺分泌相关分子的表达比较
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作者 杜志豪 李盛林 +2 位作者 葛兮源 俞光岩 丁冲 《中华口腔医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期741-747,共7页
目的探讨人乳牙牙髓干细胞(stem cells from the pulp of human exfoliated deciduous teeth,SHED)和恒牙牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)的一般生物学特性及与唾液腺分泌相关分子的表达差异,为使用SHED或DPSC治疗唾液... 目的探讨人乳牙牙髓干细胞(stem cells from the pulp of human exfoliated deciduous teeth,SHED)和恒牙牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)的一般生物学特性及与唾液腺分泌相关分子的表达差异,为使用SHED或DPSC治疗唾液腺分泌功能低下提供依据。方法分别培养SHED和DPSC至第4、7代,使用组织块法原代培养人下颌下腺上皮和间质细胞,使用相差显微镜观察细胞形态;使用流式细胞术检测干细胞表面标志物;分别使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、长时间动态活细胞成像及数据分析系统IncuCyte ZOOM检测细胞增殖;使用实时荧光定量PCR检测与分泌相关的分子表达。结果第4和7代SHED及DPSC均呈长梭形贴壁生长。4组细胞均阳性表达间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD73和CD90,阴性表达上皮干细胞标志物CD49f和CD117。4组细胞增殖无差异。与第4代SHED相比,第7代SHED中与水分泌相关的毒蕈碱型乙酰胆碱受体1(muscarinic acetylcholine receptor 1,MR1)和MR3、水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5),与蛋白质分泌相关的β1-肾上腺素受体(β1-adrenoceptor,β1-AR)及分泌蛋白α-淀粉酶和黏蛋白5B的表达差异均无统计学意义(P〉0.05),β2-AR的表达显著降低(P〈0.05)。与第4代DPSC相比,第7代DPSC中MR3、β2-AR和α-淀粉酶表达差异无统计学意义(P〉0.05),而MR1、AQP5、β1-AR和黏蛋白5B表达降低(P〈0.05)。与1例同年龄段人的下颌下腺组织及其原代上皮细胞相比,第4和7代SHED中各分子表达均低。与同年龄段人的下颌下腺原代上皮细胞相比,第4代DPSC中AQP5表达显著降低(P〈0.05),其他分子表达差异无统计学意义(P〉0.05);第7代DPSC中AQP5、β1-AR、α-淀粉酶和黏蛋白5B表达显著降低(P〈0.05),其他分子表达差异无统计学意义(P〉0.05)。第4和7代DPSC中各分子的表达均显著低于人下颌 展开更多
关键词 干细胞 乳牙牙髓干细胞 恒牙牙髓干细胞 唾液腺 分泌
人脱落乳牙牙髓干细胞与人恒牙牙髓干细胞成骨分化及破骨能力的差异 预览 被引量:9
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作者 路博闻 刘娜 +3 位作者 徐璐璐 石海刚 张洋 张维 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期180-185,共6页
目的比较处于生理性根吸收时期的自然脱落乳牙牙髓干细胞(SHED)和恒牙牙髓干细胞(DPSCs)的成骨分化及破骨能力,探讨两者在成骨和破骨相关分子的表达情况。方法体外分离、培养和纯化处于生理性根吸收时期的自然脱落乳牙牙髓干细胞与... 目的比较处于生理性根吸收时期的自然脱落乳牙牙髓干细胞(SHED)和恒牙牙髓干细胞(DPSCs)的成骨分化及破骨能力,探讨两者在成骨和破骨相关分子的表达情况。方法体外分离、培养和纯化处于生理性根吸收时期的自然脱落乳牙牙髓干细胞与恒牙牙髓干细胞;两种干细胞在成骨诱导14 d和21 d,分别进行ALP染色、茜素红染色,并通过Real-time PCR检测SHED和DPSCs矿化诱导后的成骨与破骨相关基因表达。结果倒置显微镜下观察,SHED和DPSCs形态均为长梭形;两种干细胞经矿化诱导后,茜素红染色可见SHED的矿化结节计数多于DPSCs(P〈0.05),SHED的ALP活性亦强于DPSCs(P〈0.05)。RT-PCR检测结果显示,经矿化诱导后两种干细胞均表达成骨与破骨相关基因Runx2、OCN、ALP、OPG和RANKL,但DPSCs的Runx2、OCN和ALP的表达水平均低于SHED(P〈0.05),且SHED反应细胞破骨/成骨能力的RANKL/OPG的比值显著高于DPSCs(P〈0.05)。结论与DPSCs相比,SHED不仅具有较强的成骨分化能力,还兼有较强的破骨能力,为SHED参与生理性根吸收骨改建的调控机制提供实验依据。 展开更多
关键词 生理性根吸收 人脱落乳牙牙髓干细胞 恒牙牙髓干细胞 成骨分化 破骨细胞
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人乳牙牙髓干细胞和恒牙牙髓干细胞的蛋白质组学比较 预览 被引量:1
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作者 王劲松 胡家 王松灵 《北京口腔医学》 CAS 2013年第5期249-253,共5页
目的 采用蛋白质组学方法研究人乳牙牙髓干细胞(SHED)和恒牙牙髓干细胞(DPSC)中的蛋白表达差异.方法 应用双向凝胶电泳技术分离SHED和DPSC的细胞总蛋白.通过比较两种细胞的蛋白组学图谱,确定差异表达的蛋白点,而后对差异点进行基质... 目的 采用蛋白质组学方法研究人乳牙牙髓干细胞(SHED)和恒牙牙髓干细胞(DPSC)中的蛋白表达差异.方法 应用双向凝胶电泳技术分离SHED和DPSC的细胞总蛋白.通过比较两种细胞的蛋白组学图谱,确定差异表达的蛋白点,而后对差异点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析和蛋白数据库信息检索,对差异蛋白进行功能分类.结果 建立了SHED和DPSC的蛋白质组图谱,经软件分析出45个差异蛋白点,其中26个表达上调,19个表达下调,再经质谱鉴定出48种蛋白,其生物学功能涉及细胞周期、代谢等.结论 SHED与DPSC中蛋白的差异表达体现了两种细胞在结构和功能上的异同性,为进一步研究SHED和DPSC在增殖、分化中的差异,以及牙齿相关干细胞在组织工程和再生医学研究中的应用提供参考. 展开更多
关键词 乳牙牙髓干细胞 恒牙牙髓干细胞 蛋白质组学
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