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慢性蜜蜂麻痹病毒SP1蛋白的原核表达及免疫原性分析
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作者 李明 孙莉 +1 位作者 马鸣潇 侯振中 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期473-478,共6页
慢性蜜蜂麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)主要侵袭成年工蜂,造成患病蜜蜂神经麻痹,丧失飞行能力,出现爬行现象。CBPV据推测有两个结构蛋白SP1和SP2,通过对SP1蛋白的免疫原性探索,为SP1蛋白的功能研究和CBPV生物制剂研制奠... 慢性蜜蜂麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)主要侵袭成年工蜂,造成患病蜜蜂神经麻痹,丧失飞行能力,出现爬行现象。CBPV据推测有两个结构蛋白SP1和SP2,通过对SP1蛋白的免疫原性探索,为SP1蛋白的功能研究和CBPV生物制剂研制奠定基础。本研究根据大肠杆菌密码子的偏嗜性,对CBPVSP1基因进行优化和合成,将其克隆至原核表达载体pET-32a,获得重组表达质粒pET-Opti-SP1。将重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,用SDS-PAGE和Western Blot方法对该蛋白进行分析和鉴定,然后对最佳表达条件进行摸索。在此基础上,用纯化后的SP1蛋白免疫接种BALB/c小鼠,同时设置纯化病毒组、pET-32a对照组和空白对照组,检测免疫小鼠的淋巴细胞增殖指数(SI)和血清中抗体水平。结果表明,首次成功表达和纯化了重组SP1蛋白,且该蛋白能诱导产生特异性抗CBPV的抗体,促进淋巴细胞的增殖和提高IL-4、IL-10、IFN-γ水平,具有较好的免疫原性。本研究为进一步研究CBPV SP1蛋白的功能和防治CBPV生物制剂的研发提供了帮助。 展开更多
关键词 慢性蜜蜂麻痹毒(CBPV) 慢性蜜蜂麻痹(CBPD) 结构蛋白 原核表达 免疫原性
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