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熊果酸干预骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化 预览
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作者 刘耀辉 黄振明 +2 位作者 何精选 黄玲华 李建平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2665-2671,共7页
背景:熊果酸可通过Wnt信号通路抑制破骨细胞增殖分化,对胶原诱导性关节炎模型大鼠有抗炎和骨保护作用,但是熊果酸对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化以及Wnt/β-catenin信号通路相关基因和蛋白表达的影响尚不明确。目的:探讨熊果酸对骨... 背景:熊果酸可通过Wnt信号通路抑制破骨细胞增殖分化,对胶原诱导性关节炎模型大鼠有抗炎和骨保护作用,但是熊果酸对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化以及Wnt/β-catenin信号通路相关基因和蛋白表达的影响尚不明确。目的:探讨熊果酸对骨髓间充质干细胞增殖、分化及Wnt信号通路的影响。方法:采用全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,不同浓度(1.0,2.5,5.0,10.0,20.0μmol/L)熊果酸作用骨髓间充质干细胞,以不含熊果酸的培养基为对照组,MTT法检测熊果酸对骨髓间充质干细胞增殖的影响。用含不同浓度(1.0,2.5,5.0μmol/L)熊果酸的成骨诱导液培养骨髓间充质干细胞,以不含熊果酸的成骨诱导液为对照组,在诱导后第7天和第14天采用ELISA法检测碱性磷酸酶活性和骨钙素水平,在诱导第14天采用RT-PCR检测成骨基因ALP、COL-I、OCN、OPN、RUNX2 mRNA表达水平,采用RT-PCR和Western blot法检测Wnt信号通路相关Wnt-3α、GSK-3β、β-catenin mRNA和蛋白表达。结果与结论:①不同浓度熊果酸均可促进骨髓间充质干细胞增殖,浓度为5.0μmol/L时增殖率最高;②骨髓间充质干细胞成骨诱导第7天和第14天时碱性磷酸酶活性和骨钙素水平均比对照组增高,差异有显著性意义(P<0.05),且诱导相同时间,随熊果酸浓度增加碱性磷酸酶活性增强,骨钙素水平升高(P<0.05);③诱导14d,熊果酸可促进骨髓间充质干细胞分化后成骨基因ALP、COL-I、OCN、OPN、RUNX2m RNA表达以及Wnt信号通路相关Wnt-3α、GSK-3β、β-cateninm RNA和蛋白表达,随熊果酸浓度增加其表达水平升高(P <0.05);④结果表明,熊果酸通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化。 展开更多
关键词 熊果酸 髓间充质干细胞 细胞增殖 分化 碱性磷酸酶 钙素 基因 WNT信号通路
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肿瘤坏死因子α可激活NF-κB信号通路抑制牙周膜干细胞成骨分化 预览
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作者 张赟 常群安 +1 位作者 李生梅 张源 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期3993-3997,共5页
背景:既往研究大多侧重于炎症因子激活NF-κB信号通路对骨细胞的影响,关于微炎症环境对人牙周膜干细胞成骨分化及NF-κB信号通路的影响研究较少。目的:探讨肿瘤坏死因子α对人牙周膜干细胞骨向分化及NF-κB信号通路的影响。方法:通过酶... 背景:既往研究大多侧重于炎症因子激活NF-κB信号通路对骨细胞的影响,关于微炎症环境对人牙周膜干细胞成骨分化及NF-κB信号通路的影响研究较少。目的:探讨肿瘤坏死因子α对人牙周膜干细胞骨向分化及NF-κB信号通路的影响。方法:通过酶消化结合组织块法体外培养人牙周膜干细胞,免疫组织化学染色鉴定人牙周膜干细胞来源。该研究获得青海大学附属医院伦理委员会批准,患者均签署知情同意书。将人牙周膜干细胞分为2组,对照组用单纯成骨诱导液培养,肿瘤坏死因子α组用单纯成骨诱导液+10μg/L肿瘤坏死因子α培养。在成骨诱导不同时间点,进行茜素红染色定量分析、碱性磷酸酶活性检测,实时定量RT-PCR检测Osterix、Runx2基因表达水平,Western Blot检测NF-κB信号通路关键蛋白表达水平。结果与结论:①免疫组织化学染色结果显示人牙周膜干细胞抗波形丝蛋白染色表达阳性,抗角蛋白表达阴性;②茜素红染色后肿瘤坏死因子α组形成的矿化结节比对照组数量少、范围小、染色浅;③肿瘤坏死因子α组碱性磷酸酶活性明显低于对照组(P <0.05);④肿瘤坏死因子α组Osterix、Runx2基因表达水平均显著低于对照组(P <0.05);⑤肿瘤坏死因子α组p-IκBα蛋白表达量显著高于对照组(P <0.05),p65、IκBα蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05);⑥结果表明,肿瘤坏死因子α能够通过激活NF-κB信号通路抑制人牙周膜干细胞成骨分化。 展开更多
关键词 人牙周膜干细胞 肿瘤坏死因子Α 分化 NF-ΚB信号通路 碱性磷酸酶活性 基因
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骨组织工程中应用的聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯静电纺丝支架 预览
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作者 傅娜 罗晓丁 +1 位作者 焦铁军 隋磊 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第22期3445-3450,共6页
背景:聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯是一种良好的组织工程支架材料,目前没有将其采用静电纺丝技术制成电纺支架并用于骨组织工程的报道。目的:采用静电纺丝技术制备聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯支架,检测其理化性能、生物学性能及成骨性能... 背景:聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯是一种良好的组织工程支架材料,目前没有将其采用静电纺丝技术制成电纺支架并用于骨组织工程的报道。目的:采用静电纺丝技术制备聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯支架,检测其理化性能、生物学性能及成骨性能。方法:通过静电纺丝技术制备聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯支架,利用扫描电镜观察支架表面形貌,并检测支架亲水角及杨氏模量等理化性能。将骨髓间充质干细胞接种于聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯支架上,扫描电镜观察细胞形态。实验组将骨髓间充质干细胞接种于聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯支架上,对照组单独培养骨髓间充质干细胞,培养1,3,5 d后,采用CCK-8法检测细胞增殖;成骨诱导1,5,7,14d后,采用荧光定量PCR法检测成骨基因Runx2和骨桥蛋白的表达。实验经四川大学华西口腔医学院伦理委员会批准(SKLODLL2013A173)。结果与结论:①聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯静电纺丝支架是一种无纺结构,其纤维连续且表面光滑均匀,无颗粒结节形成,纤维之间有明显的分界,且纤维之间相互交织形成小不一孔隙的三维结构,其亲水角为(116.1±2.5)°,相对疏水,杨氏模量为16.464 4MPa;②在聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯静电纺丝支架上可见大量黏附的骨髓间充质干细胞,相邻细胞之间开始互相连接并融合在一起,部分长入架纤维的孔隙中;③实验组培养不同时间点的细胞增殖速度均快于对照组(P<0.05);实验组成骨诱导5,7,14d的Runx2基因表达高于对照组(P<0.05),成骨诱导1,5,7,14d的骨桥蛋白基因表达高于对照组(P<0.05);④结果表明,聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯静电纺丝支架具有良好的理化性能、生物学性能与成骨性能。 展开更多
关键词 聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯 PCL-PEG-PCL 静电纺丝技术 髓间充质干细胞 生物相容性 生物安全性 基因 组织工程
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双基因重组载体转染乙醇诱导的兔干细胞对其成脂与成骨基因表达的影响 被引量:2
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作者 吕本浩 李劲峰 +4 位作者 马源 李成 尚国伟 李月白 王义生 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期2187-2190,共4页
目的观察双基因重组载体转染乙醇诱导的兔干细胞对其成脂与成骨基因表达的影响。方法取第3代兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),随机分为6组:(1)正常组:正常BMSCs,无特殊处理。以下5组均给予终质量浓度0.09 mol/L乙醇。(2)模型组:... 目的观察双基因重组载体转染乙醇诱导的兔干细胞对其成脂与成骨基因表达的影响。方法取第3代兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),随机分为6组:(1)正常组:正常BMSCs,无特殊处理。以下5组均给予终质量浓度0.09 mol/L乙醇。(2)模型组:无基因转染BMSCs;(3)无关序列组:10 μl无关序列载体转染BMSCs;(4)干扰过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达组(siPPARγ组):10 μl siPPARγ基因载体转染BMSCs;(5)exCGRP组:10 μl降钙素基因相关肽(CGRP)基因载体转染BMSCs;(6)双基因组:10 μl双基因重组载体转染BMSCs。实验第7、14天检测各组细胞中PPARγ、CGRP、Runt相关基因2(Runx2)、骨钙素mRNA与其蛋白表达。结果实验第7天,双基因组、siPPARγ组、正常组中PPARγ mRNA与蛋白均呈低表达(0.329±0.037与0.162±0.013、0.413±0.045与0.174±0.023、0.376±0.042与0.169±0.021),明显低于模型组(0.672±0.079与0.871±0.096)、无关序列组(0.674±0.083与0.823±0.089)、exCGRP组(0.683±0.079与0.839±0.091),差异均有统计学意义(均P=0.000)。双基因组、exCGRP组中均明显表达CGRP mRNA与蛋白,显著高于模型组、无关序列组、siPPARγ组、正常组,差异均有统计学意义(均P=0.000)。双基因组、exCGRP组、siPPARγ组、正常组中Runx2 mRNA、骨钙素mRNA与蛋白均呈高表达,双基因组显著高于模型组、无关序列组,且明显高于exCGRP组、siPPARγ组、正常组,差异均有统计学意义(均P=0.000)。实验第14天,各组表达量与第7天一致。结论双基因重组载体转染乙醇诱导的兔干细胞,能够同时高效阻止细胞中成脂基因表达并上调成骨基因表达,显著优于单一基因的作用。 展开更多
关键词 基因重组载体 转染 乙醇 干细胞 基因 基因 基因表达
骨形成相关基因的研究进展 预览
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作者 徐婧 李蜀光 +1 位作者 王丽艳 施亮 《医学综述》 2016年第18期3572-3575,共4页
骨组织形成是一个由多种生长因子调节的复杂而有序的过程。骨组织的形成是生物大分子在细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的信息传递及类骨质形成、类骨质钙化的过程。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿... 骨组织形成是一个由多种生长因子调节的复杂而有序的过程。骨组织的形成是生物大分子在细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的信息传递及类骨质形成、类骨质钙化的过程。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨细胞是骨形成的前提,骨矿化、钙化是骨形成的关键过程。很多骨生长因子可调节这几个阶段,从而最终调控骨形成。骨在形成过程中也不断地进行骨重塑和骨改建来适应外界因素的变化。 展开更多
关键词 基因 基因敲除
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铁过载对斑马鱼成骨影响的机制 预览 被引量:2
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作者 姜宇 阎一林 +1 位作者 朱国兴 徐又佳 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期713-717,共5页
目的通过高通量转录组的方法测序高铁环境生存的斑马鱼与和野生型的斑马鱼,通过比较筛选出铁过载对于成骨影响的通道,通过在体以及离体的一系列实验证实铁过载对这些通道的作用。方法通过在斑马鱼高铁环境下生存,造成斑马鱼铁过载,在4... 目的通过高通量转录组的方法测序高铁环境生存的斑马鱼与和野生型的斑马鱼,通过比较筛选出铁过载对于成骨影响的通道,通过在体以及离体的一系列实验证实铁过载对这些通道的作用。方法通过在斑马鱼高铁环境下生存,造成斑马鱼铁过载,在4天后提取其RNA和野生型斑马鱼提取的RNA进行高通量转录组测序比较,筛选出成骨Bmp2通道,并用定量QPCR验证。在体实验中将Runx2a标记的转基因斑马鱼在高铁环境下与正常环境在第九天进行比较,观察其荧光的变化;离体实验中,用Bmp2a带标签的c DNA和Runx2a带标签的c DNA的细胞进行转染,进行荧光素酶报告基因实验,然后用铁干预,观察其变化。结果通过高通量转录组测序发现高铁对于Bmp2抑制,并用定量验证发现铁过载后Runx2a,Runx2b,sp7等成骨基因均下调,观察发现Runx2a标记的转基因斑马鱼高铁环境下与正常环境相比基因表达明显下调,在细胞转染实验中,荧光素酶报告基因Runx2a在Bmp2a转染下大幅升高,转染铁后Runx2a下降。结论通过高通量转录组测序,我们发现铁过载对于BMP2的抑制影响,运用在体以及离体的一系列实验证实铁过载对Bmp2的抑制作用从而导致成骨代谢的异常。 展开更多
关键词 高通量转录组测序 基因 基因 形态发生蛋白2通道
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降钙素基因相关肽基因转染干细胞移植在兔股骨头坏死模型中的成骨基因表达 被引量:3
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作者 王义生 王亚寒 +3 位作者 李劲峰 王秀利 荆凯 李月白 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2460-2462,共3页
目的 观察人降钙素基因相关肽α(hCGRPα)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合自体骨移植在兔股骨头坏死(ONFH)模型中成骨基因的表达.方法 采用液氮冷冻法成功制作出家兔股骨头坏死兔.将72只ONFH模型兔随机分为3组.hCGRPα基因转染BM... 目的 观察人降钙素基因相关肽α(hCGRPα)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合自体骨移植在兔股骨头坏死(ONFH)模型中成骨基因的表达.方法 采用液氮冷冻法成功制作出家兔股骨头坏死兔.将72只ONFH模型兔随机分为3组.hCGRPα基因转染BMSCs组(A组):将hCGRPα基因转染BMSCs移植于股骨头内;BMSCs组(B组):植入BMSCs;无关序列组(C组):植入干细胞为无关基因BMSCs.3组中均同时将自体骨植入股骨头.于实验第1个月末观察兔股骨头的细胞内hCGRPα和成骨基因骨钙素的表达.结果 将hCGRPα基因转染BMSCs植入股骨头1个月时,A、B、C组中hCGRPα mRNA与其蛋白的相对表达量分别为0.84±0.06、0.31±0.02、0.29±0.02与0.76±0.07、0.21±0.02、0.18±0.02.3组中骨钙素mRNA与其蛋白的相对表达量分别为0.76±0.07、0.39±0.04、0.29±0.04与0.68±0.06、0.33±0.03、0.31±0.03.A组股骨头细胞中hCGRPα基因和骨钙素基因均呈高表达,明显高于B组和C组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 hCGRPα修饰BMSCs植入ONFH动物模型股骨头中,可促进细胞中成骨因子hCGRPα和骨钙素基因的表达. 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 髓间充质干细胞 头坏死 基因
阿魏酸对体外培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响 预览 被引量:6
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作者 高建林 陈珺 +4 位作者 李兵 卢丽 杨国柱 陆幸妍 李青南 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1479-1480,共2页
阿魏酸化学名称为3-甲氧基4-羟基丙烯酸,是当归等抗骨质疏松中药复方制剂的组方中药所含的一种水溶性单体成分,是其主要活性物质之一,具有降低胆固醇、抗氧化、抗血小板聚集等功能.目前阿魏酸对心肌细胞、淋巴细胞活性影响的研究已有报... 阿魏酸化学名称为3-甲氧基4-羟基丙烯酸,是当归等抗骨质疏松中药复方制剂的组方中药所含的一种水溶性单体成分,是其主要活性物质之一,具有降低胆固醇、抗氧化、抗血小板聚集等功能.目前阿魏酸对心肌细胞、淋巴细胞活性影响的研究已有报道,而其对成骨细胞活性影响的研究较为少见. 展开更多
关键词 阿魏酸 细胞 细胞增殖 细胞分化 碱性磷酸酶 基因
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二氧化钛纳米管对兔胫骨内种植体旋转扭力的影响 预览
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作者 徐玲 于卫强 《口腔医学》 CAS 2016年第1期25-29,共5页
目的通过兔子动物模型评估种植体表面不同管径的TIO_2纳米管对成骨细胞黏附、种植体扭力和成骨基因表达的影响。方法将24个订做的螺旋状的长为6 mm,外径为2.5 mm的纯钛种植体分为3组。A组:对照组平滑面种植体;B组:表面为30 nm管径TiO_... 目的通过兔子动物模型评估种植体表面不同管径的TIO_2纳米管对成骨细胞黏附、种植体扭力和成骨基因表达的影响。方法将24个订做的螺旋状的长为6 mm,外径为2.5 mm的纯钛种植体分为3组。A组:对照组平滑面种植体;B组:表面为30 nm管径TiO_2纳米管的种植体;C组:表面为70 nm管径TiO_2纳米管的种植体。分别将种植体植入兔子胫骨,手术后四周,处死兔子,采用数字扭力仪通过反向旋转取下腿部种植体,测量种植体扭力,通过扫描电子显微镜分析种植体表面成骨细胞的粘附,通过实时PCR检测核心结合因子(Runx2)、胰岛素样生长因子(IGF)、I型胶原(col-1)和骨钙素(OCN)的基因表达水平。结果表面为70 nm管径TiO_2纳米管的种植体可以增强兔胫骨内种植体的扭力(P〈0.05),并显著性的提高Runx2、IGF、col-1和OCN等成骨基因的表达水平(P〈0.05)。结论相对于30 nm管径纳米管,表面为70 nm管径纳米管的种植体可以获得良好的成骨反应,并且在早期植入期具有较高的界面强度。 展开更多
关键词 纳米管 扭力 细胞 基因
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携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达 预览 被引量:6
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作者 付志杰 张巨峰 +6 位作者 王大平 陈洁琳 段莉 何美建 李庆庆 李文翠 熊建义 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第28期4455-4462,共8页
背景:人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达,具有提高成骨活性的作用。目的:观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法:通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1... 背景:人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达,具有提高成骨活性的作用。目的:观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法:通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α,构建携带低氧诱导因子1α的慢病毒表达质粒Lenti-HIF-1α-eGFP,与LentiPac HIV混合包装质粒共包装293Ta细胞,获得病毒;采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1,4,7,14 d后,用实时荧光定量PCR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论:Lenti-HIF-1α-eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞,实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti-HIF-1α-eGFP感染后第4天开始明显过表达,且持续至14 d。结果表明低氧诱导因子1α可以提高骨髓间充质干细胞的成骨活性。 展开更多
关键词 干细胞 髓干细胞 低氧诱导因子1Α 髓间充质干细胞 基因转染 缺损 慢病毒载体 组织工程 基因 活性 广东省自然科学基金
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国产多孔钽对成骨细胞生物相容性及其相关成骨基因表达的影响 被引量:11
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作者 耿丽鑫 甘洪全 +4 位作者 王茜 张辉 刘英杰 王志强 李琪佳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1163-1167,共5页
目的 探讨国产多孔钽材料对成骨细胞粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA表达的影响。 方法 分离培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞并鉴定。根据国家标准制备多孔钽浸提液,以多孔钽浸提液与成骨细胞作为实验组,以DMEM完全培养基培养成... 目的 探讨国产多孔钽材料对成骨细胞粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA表达的影响。 方法 分离培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞并鉴定。根据国家标准制备多孔钽浸提液,以多孔钽浸提液与成骨细胞作为实验组,以DMEM完全培养基培养成骨细胞作为对照组。MTT法检测多孔钽浸提液对成骨细胞生长及增殖的影响;倒置相差显微镜及扫描电镜观察成骨细胞在多孔钽上粘附、生长及增殖的情况;实时荧光定量PCR技术检测OPN、OC及FN mRNA的表达并进行定量分析。 结果 肉眼及扫描电镜观察多孔钽外观呈深灰色、多孔状三维立体结构,表面及断面均匀分布直径400~600 μm的微孔,内部孔隙相互连通。MTT法检测结果显示,实验组及对照组成骨细胞培养1~8 d,除第3天外,各时间点细胞光密度值差异无统计学意义(P〉0.05)。成骨细胞种植于多孔钽培养结果显示,材料表面和孔隙内细胞叠层生长,分泌的骨基质完全覆盖材料表面。实时荧光定量PCR检测结果显示,实验组成骨基因OPN、OC、FN mRNA的相对表达量分别为1.45、1.79、1.69。 结论 国产多孔钽材料具有良好三维立体空间构型及良好的生物相容性,可刺激成骨细胞的粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA的表达。 展开更多
关键词 多孔钽 细胞 细胞增殖 生物相容性 基因
辛伐他汀对成骨细胞分化和成骨基因的影响 预览 被引量:2
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作者 王国亮 李文壮 +3 位作者 陈戈胜 蔡湘波 罗胜明 陈泽雁 《中国现代药物应用》 2013年第22期3-5,共3页
目的 探讨辛伐他汀对成骨细胞分化及成骨基因表达的影响.方法 选取成骨肉瘤细胞株 MG-63,采用不同浓度辛伐他汀(0.0625、0.125、0.25、0.5和 1.0 μmol/L)处理成骨细胞,ALP活性检测辛伐他汀对成骨细胞分化作用的影响;实时定量 RT-PCR... 目的 探讨辛伐他汀对成骨细胞分化及成骨基因表达的影响.方法 选取成骨肉瘤细胞株 MG-63,采用不同浓度辛伐他汀(0.0625、0.125、0.25、0.5和 1.0 μmol/L)处理成骨细胞,ALP活性检测辛伐他汀对成骨细胞分化作用的影响;实时定量 RT-PCR和免疫印迹检测细胞成骨基因 mRNA的表达.结果 通过不同浓度辛伐他汀处理成骨细胞后,不同浓度辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞ALP 活性差异均有统计学意义 ( P〈0.05),其中 0.25 μmol/L 浓度组作用对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响最为显著.采用 0.25 μmol/L辛伐他汀处理成骨细胞后,辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞骨钙蛋白、ALP、I型胶原 mRNA表达差异均有统计学意义 ( P〈0.05).结论 辛伐他汀可能通过上调成骨基因mRNA的表达水平来促进其分化,这为他汀类药物治疗骨质疏松症提供新的干预靶点. 展开更多
关键词 辛伐他汀 分化 基因
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铁调素干预成骨细胞(hFOB1.19)后细胞膜转铁蛋白1、铁离子、矿化及成骨基因变化研究 预览 被引量:6
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作者 张鹏 刘禄林 +4 位作者 贾鹏 林华 赵理平 钱忠明 徐又佳 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1011-1017,1048共8页
目的探讨铁调素对成骨细胞铁代谢指标、骨代谢指标的影响和相互关系。方法成骨细胞(hFOB1.19)培养3d后,使用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测成骨细胞(hFOB1.19)的膜转铁蛋白1(ferroportinl,Fpn1)的表达;再用不同浓度的... 目的探讨铁调素对成骨细胞铁代谢指标、骨代谢指标的影响和相互关系。方法成骨细胞(hFOB1.19)培养3d后,使用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测成骨细胞(hFOB1.19)的膜转铁蛋白1(ferroportinl,Fpn1)的表达;再用不同浓度的铁调素(25noml/L,50noml/L,100noml/L)干预培养环境,对照组加相同体积双蒸水,干预20h,MTT法检测细胞增殖情况;激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)检测成骨细胞内铁离子荧光染色后荧光强度变化情况;VonKossa染色检测成骨细胞矿化情况;RT—PCR检测骨钙素(BGP)、I型胶原(COL1)、骨保护素(OPG)基因表达。结果1、成骨细胞存在Fpn1表达;2、铁调素对成骨细胞增殖无显著影响(P〉0.05);3、铁调素干预后,成骨细胞内铁离子含量增多,且与铁调素干预存剂量依赖性关系(P〈0.05);4、铁调素干预后,成骨细胞矿化功能增强,且与铁调素干预存剂量依赖性关系(P〈0.05);5、RT—PCR检测显示不同浓度铁调素干预后,各组COL1、OPG、BGPmRNA均有表达;不同浓度组的COL1、OPG、BGPmRNA表达光密度比值不同,组间密度比值比较存在统计学意义(P〈0.05),但铁调素在400nmol/L时抑制OPG的表达(P〈0.05)。结论成骨细胞存在铁调素作用的膜转铁蛋白-1,所以铁调素干预成骨细胞培养环境后细胞内铁离子发生特异性变化,同时细胞矿化指标显著增加、细胞COL1、OPG、BGPmRNA表达含量增加;研究提示:铁调素可能通过膜转铁蛋白影响成骨细胞铁离子变化,细胞铁代谢变化可能引起细胞成骨指标上调改变。 展开更多
关键词 铁调素 铁离子 膜转铁蛋白1 细胞矿化 基因
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微纳米生物玻璃的体外成骨性能研究 预览 被引量:3
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作者 李玉莉 陈晓峰 +3 位作者 韩雪 苗国厚 胡庆 雷波 《中国材料进展》 CAS CSCD 2012年第6期7-11,55共6页
微纳米生物活性玻璃因其具有特殊的形态结构和理化性能目前引起众多研究者的关注,但是目前对微纳米生物活性玻璃的结构及形态对细胞性能的影响研究的较少。本文通过溶胶一凝胶法结合模板仿生技术合成了具有特殊结构和形态的微纳米生物... 微纳米生物活性玻璃因其具有特殊的形态结构和理化性能目前引起众多研究者的关注,但是目前对微纳米生物活性玻璃的结构及形态对细胞性能的影响研究的较少。本文通过溶胶一凝胶法结合模板仿生技术合成了具有特殊结构和形态的微纳米生物活性玻璃,并通过体外细胞实验,研究了这种微纳米结构对人骨髓间充质干细胞成骨性能(ALP,Runx2,Coilal和OPN)的影响,结果证明具有规则形态的生物活性玻璃(SBG)相比不规则形态的生物活性玻璃(IBG)更能促进细胞的体外成骨性能,为将来设计具有特定结构的生物活性玻璃提供了参考依据。 展开更多
关键词 微纳米生物玻璃 溶胶-凝胶技术 碱性磷酸酶 基因
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体外培养大鼠骨髓间充质干细胞成骨基因表达谱的检测 预览 被引量:3
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作者 赵东明 吴华 +3 位作者 杨勇 黄飞 赵文春 黄珊珊 《医学研究生学报》 CAS 2008年第7期 697-701,712,I0003,共7页
目的:探讨体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)成骨相关基因的表达谱,明确体外培养大鼠骨髓MSC的成骨潜能。方法:体外培养SD大鼠骨髓MSC,取第3代细胞提取总核糖核酸(RNA),制备杂交探针,并运用SuperArray公司提供的大鼠Oligo GEArra... 目的:探讨体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)成骨相关基因的表达谱,明确体外培养大鼠骨髓MSC的成骨潜能。方法:体外培养SD大鼠骨髓MSC,取第3代细胞提取总核糖核酸(RNA),制备杂交探针,并运用SuperArray公司提供的大鼠Oligo GEArray骨再生基因芯片(每张芯片可测113种基因)进行杂交,化学发光检测,通过X线胶片或台式扫描获得化学发光的芯片图像,使用网上提供的综合型GEArry表达分析配套软件(GEArryExpression Analysis Suite)进行完整的芯片数据分析。结果:检测体外培养大鼠骨髓MSC的113种成骨相关的基因,其中有31种基因表达强度较低,45种基因呈中等强度表达,37种基因表达强度较高。结论:体外培养大鼠骨髓MSC具有部分成骨细胞基因表型特征,但成熟成骨细胞的特征基因表达量较低,提示大鼠MSC是具有较强成骨细胞分化潜能的成纤维样细胞。 展开更多
关键词 髓间充质干细胞 基因 再生基因芯片
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Nel样Ⅰ型分子基因及其促进成骨作用的研究进展 预览 被引量:2
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作者 胡镜宙(综述) 蒋欣泉(审校) 张志愿(审校) 《国际口腔医学杂志》 CAS 2006年第6期 448-450,共3页
Nel样Ⅰ型分子基因作为一种新发现的颅颌面组织特异性的成骨相关基因,可能操纵了成骨基因的下游途径,并影响了信号通路,促进成骨细胞的分化。对于它的研究可能成为颅颌面骨组织工程中新的研究热点。本文对此基因的发现、作用机制和... Nel样Ⅰ型分子基因作为一种新发现的颅颌面组织特异性的成骨相关基因,可能操纵了成骨基因的下游途径,并影响了信号通路,促进成骨细胞的分化。对于它的研究可能成为颅颌面骨组织工程中新的研究热点。本文对此基因的发现、作用机制和在骨组织工程中的应用前景作一综述。 展开更多
关键词 组织工程 基因 生长因子
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体外培养人牙周膜细胞成骨基因表达谱的检测 被引量:1
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作者 杨磊 李东 +1 位作者 丁寅 李永明 《临床口腔医学杂志》 2005年第11期643-646,共4页
目的:探讨体外培养人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDL)成骨相关基因的表达谱,明确体外培养人牙周膜细胞的成骨潜能.方法:消化离心法收集体外培养人牙周膜细胞,提取总RNA,使用Superarray公司的点样数96点的人骨再生基... 目的:探讨体外培养人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDL)成骨相关基因的表达谱,明确体外培养人牙周膜细胞的成骨潜能.方法:消化离心法收集体外培养人牙周膜细胞,提取总RNA,使用Superarray公司的点样数96点的人骨再生基因表达谱芯片检测人牙周膜细胞成骨相关基因的表达.结果:体外培养人牙周膜细胞有15种成骨相关基因无表达,81种基因有表达,其中表达较高的基因22种.结论:体外培养人牙周膜细胞具有部分成骨细胞基因表型特征,但成熟成骨细胞的特征基因表达量较低,提示人牙周膜细胞是具有成骨细胞分化潜能的成纤维细胞. 展开更多
关键词 基因 基因芯片 牙周膜纤维细胞 细胞培养
特发性矮小的相关基因研究进展 预览 被引量:9
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作者 陈晓丽 《国外医学:妇幼保健分册》 2002年第5期 227-231,共5页
近年来有关特发性矮小致病机理研究日渐受重视,以期能明确病因,指导治疗。本研究就近几年特发性矮小相关基因研究作一综述,指出生长激素受体基因以及伪常染色体同源成骨基因(SHOX)是目前研究的焦点。
关键词 特发性矮小 生长激素受体基因 伪常染色体同源基因
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荷斯坦奶牛乳腺干细胞的成骨诱导及鉴定 预览
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作者 陈钰萌 韩哲先 +1 位作者 刘迎春 高峰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1359-1363,共5页
背景:课题组已经完成乳腺干细胞向神经细胞和脂肪细胞的诱导,该实验诱导乳腺干细胞分化为成骨细胞,进一步丰富其分化潜能多样性,对乳腺干细胞的研究具有重要意义。目的:探讨荷斯坦奶牛乳腺干细胞定向诱导分化为成骨细胞的潜能。方法:分... 背景:课题组已经完成乳腺干细胞向神经细胞和脂肪细胞的诱导,该实验诱导乳腺干细胞分化为成骨细胞,进一步丰富其分化潜能多样性,对乳腺干细胞的研究具有重要意义。目的:探讨荷斯坦奶牛乳腺干细胞定向诱导分化为成骨细胞的潜能。方法:分离纯化的荷斯坦奶牛乳腺干细胞系,由内蒙古生物制造重点实验室提供。取第4代乳腺干细胞加入成骨诱导液培养21 d,采用茜素红染色法和RT-PCR技术进行鉴定。结果与结论:荷斯坦奶牛乳腺干细胞经成骨诱导后,细胞边缘模糊,细胞中有颗粒状钙化结节出现,经茜素红染色呈阳性,诱导后成骨细胞标记性基因Alpl和Bglap呈阳性表达,表明了荷斯坦奶牛乳腺干细胞具有分化为成骨细胞的潜能。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 乳腺干细胞 诱导分化 细胞 标记基因 国家自然科学基金 乳腺 动物 干细胞 细胞分化 组织工程
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血清血浆对成骨细胞增殖和分化的影响 预览
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作者 贺自克 王上增 +2 位作者 薛艳 郑昱新 丁道芳 《医学研究杂志》 2018年第11期51-56,共6页
目的观察大鼠血清和血浆对大鼠成骨细胞的增殖和分化的影响。方法取出生24h SD大鼠头颅骨,Ⅰ型胶原酶多次消化后获得成骨细胞,DMEM加10%FBS进行常规培养,同时细胞免疫荧光鉴定Col1a1的表达,传代后分别用10%血清(rat serum,RS)和10%血浆(... 目的观察大鼠血清和血浆对大鼠成骨细胞的增殖和分化的影响。方法取出生24h SD大鼠头颅骨,Ⅰ型胶原酶多次消化后获得成骨细胞,DMEM加10%FBS进行常规培养,同时细胞免疫荧光鉴定Col1a1的表达,传代后分别用10%血清(rat serum,RS)和10%血浆(rat plasma,RP)进行培养,分别命名为血清组和血浆组。培养24h,镜下观察细胞形态变化及检测增殖蛋白PCNA的表达;CCK8方法检测成骨细胞增殖。成骨诱导刺激1周后,检测(alkaline phosphatase,ALP)染色、ALP活性,同时定量PCR检测ALP、Runx2、Col1a1和OCN基因的表达。分化3周后,进行矿化结节染色。成骨细胞经过血清和血浆处理6h后,标记钙离子探针检测钙离子内流。结果几乎所有的细胞均表达Ⅰ型胶原。血清组成骨细胞明显变得细长,失去成骨细胞原有的特征;大鼠血浆组的PCNA表达水平低于大鼠血清组,CCK8检测表明血清组细胞增殖速度高于血浆组细胞;大鼠血浆组碱性磷酸酶活性及染色显著强于大鼠血清组;成骨性基因ALP、Runx2、OCN和Col1a1在大鼠血浆刺激下,表达明显高于血清组。大鼠血浆组的钙离子内流和矿化结节明显优于大鼠血清组。结论大鼠血清刺激大鼠成骨细胞的增殖,在促进成骨分化方面的作用弱于大鼠血浆的作用。 展开更多
关键词 原代细胞 基因 细胞增殖 大鼠血清和大鼠血浆 分化
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