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STAT1信号通路在成骨细胞凋亡蛋白表达中的作用
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作者 薛星河 冯振华 潘孝云 《中国医师杂志》 CAS 2018年第10期1491-1494,共4页
目的研究转录活化蛋白1(STAT1)信号通路在成骨细胞凋亡蛋白表达中的作用。方法用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测不同浓度氟达拉滨对成骨细胞的毒性作用,Western blot和ELISA方法检测在不同时间及地塞米松浓度下,Bcl-2相关X蛋白(BA... 目的研究转录活化蛋白1(STAT1)信号通路在成骨细胞凋亡蛋白表达中的作用。方法用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测不同浓度氟达拉滨对成骨细胞的毒性作用,Western blot和ELISA方法检测在不同时间及地塞米松浓度下,Bcl-2相关X蛋白(BAX)、裂解的caspase-3蛋白(cleaved caspase-3)、STAT1及STAT1的磷酸化蛋白(p-STATl)的蛋白水平。大鼠成骨细胞设对照组、单纯氟达拉滨组、地塞米松组、地塞米松+氟达拉滨组,ELISA方法检测BAX、STAT1和p-STAT1的蛋白量及分光光度法测cleaved caspase-3的蛋白水平。结果在地塞米松刺激作用下,成骨细胞凋亡相关蛋白及P-STATl的蛋白水平增高,且具有时间及浓度依赖性。应用氟达拉滨下调p-STATl水平后,地塞米松+氟达拉滨组凋亡相关蛋白表达较地塞米松组下降(P〈0.05)。结论氟达拉滨可以通过抑制p-STATl的活性下调cleaved caspase-3等凋亡蛋白水平。 展开更多
关键词 成骨细胞/药物作用 阿糖腺苷/类似物和衍生物 阿糖腺苷/理学 细胞凋亡 STATl转录因子
淫羊藿苷促进胶原水凝胶三维立体培养成骨细胞的成熟分化 预览 被引量:4
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作者 谢艳芳 王鸣刚 +3 位作者 陈克明 石文贵 周建 高玉海 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期301-307,共7页
目的:研究淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的新生大鼠颅骨成骨细胞( ROB)分化和成熟的影响。方法:取新生SD 大鼠颅骨,酶消化法培养ROB,将传代1次的ROB包埋于2 mg/mL的Ⅰ型鼠尾胶原中进行三维立体培养,48 h后进行双乙酸荧光素... 目的:研究淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的新生大鼠颅骨成骨细胞( ROB)分化和成熟的影响。方法:取新生SD 大鼠颅骨,酶消化法培养ROB,将传代1次的ROB包埋于2 mg/mL的Ⅰ型鼠尾胶原中进行三维立体培养,48 h后进行双乙酸荧光素/碘化丙啶( FDA/PI )细胞染色、苏木素-伊红( HE )染色,并用扫描电镜观察细胞生长状态。分别采用终浓度为1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7 mol/L的淫羊藿苷进行干预,培养3、6、9 d后分别检测细胞内碱性磷酸酶活性,筛选最佳药物浓度;以最佳浓度淫羊藿苷干预三维凝胶中的ROB 12、24、36、48 h后,用实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测骨形态发生蛋白2( BMP-2)、Runt相关转录因子2(RUNX-2)、Osterix mRNA及其蛋白表达情况。结果:胶原水凝胶三维立体培养的ROB 采用FDA/PI染色、HE染色以及扫描电镜结构显示, ROB在胶原水凝胶中分布均匀,生长状态良好。终浓度为1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7 mol/L的淫羊藿苷可显著提高三维凝胶中ROB的碱性磷酸酶活性,其中以1×10^-6 mol/L浓度淫羊藿苷干预后ROB 的碱性磷酸酶活性最高。 1×10^-6 mol/L 淫羊藿苷能显著提高BMP-2、RUNX-2、Osterix mRNA及其蛋白表达量。结论:淫羊藿苷可显著促进三维立体培养的ROB成骨性相关因子的表达,提示淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的ROB具有较强的促骨形成活性。 展开更多
关键词 细胞外基质 淫羊藿/投和剂量 淫羊藿甙 水凝胶 胶原 成骨细胞/药物作用 细胞 培养的
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金属颗粒对MG63细胞骨保护素/核因子-κB受体活化因子配体表达影响的研究 预览
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作者 冯毅 朱晓春 汪伟基 《陕西医学杂志》 CAS 2012年第3期 295-298,共4页
目的:探讨金属钴、铬颗粒对人成骨细胞系MG63细胞骨保护素(OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响。方法:将金属钴、铬颗粒与人成骨细胞系MG63细胞共培养,ELISA法检测细胞培养上清中OPG、RANKL水平,采用荧光定量... 目的:探讨金属钴、铬颗粒对人成骨细胞系MG63细胞骨保护素(OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响。方法:将金属钴、铬颗粒与人成骨细胞系MG63细胞共培养,ELISA法检测细胞培养上清中OPG、RANKL水平,采用荧光定量PCR法检测OPG、RANKLmRNA表达水平。结果:培养后24、48h实验组RANKL蛋白与mRNA水平显著增加,与对照组相比差异有统计学意义;但OPG蛋白与mRNA水平虽然增加,但与对照组相比差异没有统计学意义;RANKL/OPG比值显著增加,与正常对照组相比差异有统计学意义。结论:金属钴、铬颗粒可以促进RANKL蛋白及RANKL mRNA表达,使RANKL/OPG比率增高,促进破骨细胞分化,从而使骨吸收增强。 展开更多
关键词 成骨细胞/药物作用 保护素/分析 @核因子-κB受体活化因子配体
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葛根素注射液对高糖培养成骨细胞保护作用的研究 预览 被引量:1
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作者 李永华 潘寒松 梁一民 《中国中医药科技》 CAS 2012年第4期318-319,共2页
目的:探讨葛根素注射液对高糖培养成骨细胞的保护作用,为临床治疗糖尿病骨质疏松提供实验依据。方法:体外分离培养成骨细胞,并随机分为正常培养基组、高糖培养基组和高糖培养基添加葛根素注射液组。3组成骨细胞各自培养48小时后进行... 目的:探讨葛根素注射液对高糖培养成骨细胞的保护作用,为临床治疗糖尿病骨质疏松提供实验依据。方法:体外分离培养成骨细胞,并随机分为正常培养基组、高糖培养基组和高糖培养基添加葛根素注射液组。3组成骨细胞各自培养48小时后进行形态学观察,同时检测其碱性磷酸酶(ALP)表达的阳性率。结果:高糖培养组成骨细胞增殖分化能力减弱,细胞数量及连接减少,其碱性磷酸酶(ALP)阳性率也明显低于正常组;葛根素组上述指标均明显改善。结论:高糖可影响骨组织代谢及成骨细胞的增殖分化,葛根素对上述改变有一定的保护作用。 展开更多
关键词 葛根素注射液/理学 成骨细胞/药物作用 体外研究
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不同浓度龟龙坚骨汤方对TNF-α诱导大鼠成骨细胞凋亡的保护作用 预览
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作者 陈树清 周厚明 +1 位作者 孙保国 陈泽雄 《中国中医药科技》 CAS 2011年第4期 290-291,共2页
目的:探讨不同浓度龟龙坚骨汤方对TNF-α诱导大鼠成骨细胞凋亡的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠颅骨成骨细胞分为中药低浓度组、中浓度组、高浓度组和空白对照组,中药组给予龟龙坚骨汤含药血清培养,空白对照组给予常规血清培养,培... 目的:探讨不同浓度龟龙坚骨汤方对TNF-α诱导大鼠成骨细胞凋亡的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠颅骨成骨细胞分为中药低浓度组、中浓度组、高浓度组和空白对照组,中药组给予龟龙坚骨汤含药血清培养,空白对照组给予常规血清培养,培养7天后,用含量为30ng/mlTNF-α刺激成骨细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡,应用酶联免疫法测定PICP和ICTP的含量。结果:中药低浓度、中浓度和高浓度组在早期和晚期细胞凋亡百分率均低于空白对照组(P〈0.05),中浓度组与高浓度组的晚期凋亡百分率比较,差异明显(P〈0.05),低浓度组早晚期凋亡率明显高于中、高浓度组。中药低浓度、中浓度和高浓度组PICP含量均高于空白对照组(P〈0.05);中、高浓度组均高于低浓度组;中、高浓度组的ICTP含量明显低于空白组和低浓度组。结论:龟龙坚骨方可以在一定程度抑制成骨细胞的凋亡,促进骨形成,但对骨质增生抑制的效果一般,可以用来防治骨质疏松症。 展开更多
关键词 @龟龙坚汤/理学 成骨细胞/药物作用 细胞凋亡 血清理学 Ⅰ型前胶原羧基端肽 Ⅰ型胶原吡啶交联终肽 体外研究
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骨碎补柚皮苷对人牙周韧带细胞增殖和成骨分化潜能的影响 预览 被引量:26
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作者 胡其勇 陈莉丽 王仁飞 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期 79-83,共5页
目的:探讨骨碎补柚皮苷对人牙周韧带细胞的增殖能力以及成骨分化潜能的影响。方法:MTT法检测在含有不同浓度骨碎补柚皮苷的细胞培养液中人牙周韧带细胞的增殖特性;检测不同浓度骨碎补柚皮苷作用后人牙周韧带细胞中碱性磷酸酶(ALP)... 目的:探讨骨碎补柚皮苷对人牙周韧带细胞的增殖能力以及成骨分化潜能的影响。方法:MTT法检测在含有不同浓度骨碎补柚皮苷的细胞培养液中人牙周韧带细胞的增殖特性;检测不同浓度骨碎补柚皮苷作用后人牙周韧带细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性的改变。结果:骨碎补柚皮苷≥0.01μmol/L时能增进人牙周韧带细胞增殖(P〈0.05),并能增加其ALP活性(P〈0.05)。结论:骨碎补柚皮苷可提高人牙周韧带细胞的增殖能力及成骨分化的潜能。 展开更多
关键词 碎补△/投和剂量 橙皮苷/理学 牙周膜/细胞 细胞分化 细胞增殖 成骨细胞/药物作用
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rhBMP2不同动物异位诱导成骨及其小鼠体内诱导成骨的剂量依赖性 预览 被引量:5
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作者 赵广跃 胡蕴玉 +1 位作者 刘建 吕荣 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2006年第3期 260-263,共4页
目的:对大肠杆菌表达的hBMP2在小鼠体内进行剂量依赖性研究,并观察其在大鼠和家兔体内异位诱导成骨情况,为临床应用提供参考。方法:大鼠、家兔股部肌袋植入rhBMP21.5和3.0mg,植入后1、2、4周取材观察成骨情况;小鼠股部肌袋植入... 目的:对大肠杆菌表达的hBMP2在小鼠体内进行剂量依赖性研究,并观察其在大鼠和家兔体内异位诱导成骨情况,为临床应用提供参考。方法:大鼠、家兔股部肌袋植入rhBMP21.5和3.0mg,植入后1、2、4周取材观察成骨情况;小鼠股部肌袋植入100~1000μg的rhBMP2,植入后1、2、3周取材,行组织学检查,成骨量分析,碱性磷酸酶和钙含量测定。结果:大鼠植入1.5mgrhBMP2植入2周、家兔3.0mgrhBMP2植入4周表现为高效成骨活性。rhBMP2小鼠体内诱导成骨实验表现为成骨量,碱性磷酸酶活性和钙含量显著的剂量依赖性。结论:原核表达的hBMP在小鼠、大鼠和家兔体内有高效的诱导成骨活性,小鼠体内实验rhBMP2表现为明显的剂量依赖性。 展开更多
关键词 重组人蛋白2成骨细胞/药物作用 细胞分化 剂量效应关系 免疫小鼠
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淫羊藿苷对人成骨细胞的作用 预览 被引量:40
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作者 于波 杨久山 +1 位作者 刘岩 董建文 《中医正骨》 2006年第6期 17-18,共2页
为探讨淫羊藿苷对人成骨细胞的影响,采用分次酶消化法做离体人成骨细胞培养,得到性状稳定、纯度高的成骨细胞;用MTT法做淫羊藿苷对成骨细胞增殖的研究.结果发现不同浓度的淫羊藿苷对成骨细胞的生长增殖均有促进作用,以10ng·ml^-1... 为探讨淫羊藿苷对人成骨细胞的影响,采用分次酶消化法做离体人成骨细胞培养,得到性状稳定、纯度高的成骨细胞;用MTT法做淫羊藿苷对成骨细胞增殖的研究.结果发现不同浓度的淫羊藿苷对成骨细胞的生长增殖均有促进作用,以10ng·ml^-1浓度时其作用最强(P<0.05);生化方法测定淫羊藿苷浓度为100ng·ml^-1和10ng·ml^-1对成骨细胞分泌碱性磷酸酶(AKP)有促进作用.表明淫羊藿苷促进成骨细胞增殖的同时,增强了成骨细胞成骨活性. 展开更多
关键词 淫羊藿苷/治疗应用 成骨细胞增殖/药物作用 碱性磷酸酶/药物作用 实验研究
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