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转入抗草甘膦基因棉花的化学杀雄杂交制种技术 预览
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作者 李志强 郝献领 +3 位作者 周君华 张延忠 冯象秦 李泽田 《中国棉花》 2019年第1期41-42,共2页
目前棉花杂交种子生产仍以人工去雄授粉为主,但近年来劳动力严重匮乏,使得制种用工难、工价高的问题日益突出;加之国内棉花价格低迷、植棉效益降低,棉花杂交制种陷入困境,举步维艰。杂交棉生产已成为了棉种企业的一个很大屏障,如何大幅... 目前棉花杂交种子生产仍以人工去雄授粉为主,但近年来劳动力严重匮乏,使得制种用工难、工价高的问题日益突出;加之国内棉花价格低迷、植棉效益降低,棉花杂交制种陷入困境,举步维艰。杂交棉生产已成为了棉种企业的一个很大屏障,如何大幅降低杂交制种成本成为急待解决的问题。为此,人们开展过两系不育系杂交制种和“三系”(不育系、保持系和恢复系)不育系杂交制种,但仍不尽人意。高优势组合母本转入抗草甘膦基因进行化学杀雄制种模式的出现,有效缓解了当前困境。 展开更多
关键词 杂交制种技术 化学杀雄 草甘膦 棉花 基因 两系不育系 人工去雄授粉 种子生产
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全球抗草甘膦杂草的概况 预览 被引量:1
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作者 张翼翾 《世界农药》 CAS 2018年第3期38-45,共8页
草甘膦无选择性,具有内吸性,是杀草谱最广的芽后除草剂。其作用于莽草酸途径,抑制叶绿体酶5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSP),使芳香酸的合成受阻。草甘膦在1974年首次引入,当时价格相对较高,只用于高价值的园艺作物(果园)和一... 草甘膦无选择性,具有内吸性,是杀草谱最广的芽后除草剂。其作用于莽草酸途径,抑制叶绿体酶5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSP),使芳香酸的合成受阻。草甘膦在1974年首次引入,当时价格相对较高,只用于高价值的园艺作物(果园)和一些非作物场所;随着价格的下降,被用于许多其他情况,包括作物播前和休耕地的杂草防除,可使种植者少耕地或不耕地。 展开更多
关键词 草甘膦 除草剂 作用位点 性机制 杂草调查 草甘膦 美洲豚草
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抗虫抗草甘膦转基因玉米分子的特征及功能评价
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作者 Miao-miao LIU Xiao-jing ZHANG +2 位作者 Yan GAO Zhi-cheng SHEN Chao-yang LIN 《浙江大学学报:B卷英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第8期610-619,共10页
目的:研究抗虫抗草甘膦玉米转化体ZD12-6外源基因的分子特征,对ZD12—6的抗虫和抗草甘膦性状进行综合评价,为ZD12-6产业化提供基础信息。创新点:抗虫抗草甘膦转基因玉米ZD12-6是聚合了双抗虫基因和抗草甘膦基因的转化体,多基因聚... 目的:研究抗虫抗草甘膦玉米转化体ZD12-6外源基因的分子特征,对ZD12—6的抗虫和抗草甘膦性状进行综合评价,为ZD12-6产业化提供基础信息。创新点:抗虫抗草甘膦转基因玉米ZD12-6是聚合了双抗虫基因和抗草甘膦基因的转化体,多基因聚合有利于后期品种转育和多性状叠加。对该转化体的分子特征信息分析和功能评价是评判其产业化价值的重要依据。方法:利用DNA印迹法(Southem blot)研究外源基因插入拷贝数;利用高效热不对称交错聚合酶链反应(hiTAIL-PCR)方法对外源基因的插入位点进行定位;通过蛋白质印迹法(Western blot)对外源蛋白进行定性分析;利用酶联免疫吸附测定(ELISA)分析外源蛋白表达量;通过生物测定对抗虫和草甘膦的抗性水平进行评估。结论:抗虫抗草甘膦玉米转化体ZD12.6中外源基因单拷贝插入,插入位点位于玉米1号染色体。ZD12.6对玉米上的主要害虫具有良好抗性,同时对草甘膦具有较强耐受性,具有产业化推广潜力。 展开更多
关键词 转基因玉米 苏云金芽孢杆菌 草甘膦
基于GR79 EPSPS筛选标记的抗虫抗除草剂表达载体构建及抗性鉴定
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作者 杨羊 梁成真 +4 位作者 孟志刚 陈全家 罗淑萍 张锐 郭三堆 《中国农业科技导报》 CSCD 北大核心 2018年第11期22-28,共7页
虫害和草害是农业生产中两大主要危害。目前,尽管转基因抗虫和抗除草剂作物相继报道和应用,然而我国抗虫抗除草剂复合性状作物培育仍然明显滞后,而且多依靠传统杂交选育的手段,费事费力、周期长。根据苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringi... 虫害和草害是农业生产中两大主要危害。目前,尽管转基因抗虫和抗除草剂作物相继报道和应用,然而我国抗虫抗除草剂复合性状作物培育仍然明显滞后,而且多依靠传统杂交选育的手段,费事费力、周期长。根据苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) Cry1Ac蛋白结合结构域和毒性结构域特征,人工合成杀虫基因cry1Ac-2.5。同时,利用抗除草剂基因GR79 EPSPS替换卡那霉素筛选标记,构建基于草甘膦除草剂筛选标记的复合抗虫抗除草剂植物表达载体,并转化烟草。qRT-PCR结果表明转基因烟草cry1Ac-2.5和GR79EPSPS基因转录水平均成功表达,经Bt和GR79试纸条检测表明上述基因在蛋白水平正确翻译。抗性实验表明,转基因烟草愈伤经草甘膦筛选,阳性率达到80%,且转基因烟草耐受100 mg/L草甘膦处理。抗虫实验表明,饲喂cry1Ac-2.5转基因烟草4 d后,棉铃虫幼虫死亡率为90%左右,表明人工基因cry1Ac-2.5具有显著的的抗虫效果。以上结果表明,构建的抗虫抗除草剂植物表达载体(Cry1Ac-2.5+GR79 EPSPS)将抗虫基因和抗除草剂基因有效合并,对于快速培育抗虫抗除草剂作物具有指导意义。 展开更多
关键词 Bt CRY1AC GR79 EPSPS 烟草 草甘膦
草铵膦桶混敌草快配方药效初探 预览
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作者 陈志明 严玉听 《农化市场十日讯》 2018年第1期33-35,共3页
草铵膦与敌草快同为灭生性、触杀型除草剂。草铵膦通过积铵触杀,3天见效,除草彻底,尤其对牛筋草、小飞蓬等抗草甘膦杂草根除性好;而敌草快主要通过强氧化作用导致叶肉组织灼烧而死,速效性好,敌草快的速效性与光照有很大关系,打下去后3、... 草铵膦与敌草快同为灭生性、触杀型除草剂。草铵膦通过积铵触杀,3天见效,除草彻底,尤其对牛筋草、小飞蓬等抗草甘膦杂草根除性好;而敌草快主要通过强氧化作用导致叶肉组织灼烧而死,速效性好,敌草快的速效性与光照有很大关系,打下去后3、4个小时杂草就发黄,对阔叶杂草效果明显而对禾本科杂草作用不明显。 展开更多
关键词 敌草快 草铵膦 触杀型除草剂 禾本科杂草 药效 配方 桶混 草甘膦
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关于草甘膦的最新结论 预览
6
作者 彭文 《百科知识》 2018年第4期28-29,共2页
不久前,美国环保署发布公告,重申草甘膦不可能对人类致癌。这一结论美国环保署已坚持了40年。草甘膦是全球农业生产中使用最为普遍的一种广谱灭生性除草剂。但是南于抗草甘膦转基因作物的推广,使人们对其安全性感到担忧。此次人类健... 不久前,美国环保署发布公告,重申草甘膦不可能对人类致癌。这一结论美国环保署已坚持了40年。草甘膦是全球农业生产中使用最为普遍的一种广谱灭生性除草剂。但是南于抗草甘膦转基因作物的推广,使人们对其安全性感到担忧。此次人类健康评估涉及多方面,并对草甘膦癌症数据库进行了深入调查, 展开更多
关键词 草甘膦 广谱灭生性除草剂 美国环保署 转基因作物 农业生产 健康评估 数据库 人类
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抗草甘膦转基因大豆对土壤酶活性的影响 预览
7
作者 刘慧璐 范巧兰 +6 位作者 王慧 李永山 席吉龙 杨娜 席天元 常铁牛 陶民刚 《山西农业科学》 2018年第10期1677-1679,共3页
为评价转基因大豆对土壤酶活性的影响,采用TN1和94Y20这2个抗草甘膦转基因大豆品种和1个传统非转基因大豆品种运豆101作为供试材料进行盆栽试验。结果表明,抗草甘膦转基因大豆对土壤脲酶、蔗糖酶、碱性磷酸酶和过氧化氢酶活性均无显著影... 为评价转基因大豆对土壤酶活性的影响,采用TN1和94Y20这2个抗草甘膦转基因大豆品种和1个传统非转基因大豆品种运豆101作为供试材料进行盆栽试验。结果表明,抗草甘膦转基因大豆对土壤脲酶、蔗糖酶、碱性磷酸酶和过氧化氢酶活性均无显著影响;转基因大豆TN1在苗期和鼓粒期蔗糖酶活性显著高于94Y20,但均与传统大豆差异不显著。说明转基因大豆对土壤酶活性的影响不大。 展开更多
关键词 草甘膦 转基因大豆 土壤 酶活性
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转基因抗草甘膦大豆的荒地生存竞争能力 预览
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作者 李昊阳 刘义 +2 位作者 李娜 陈伟 曹越平 《杂草学报》 2018年第3期13-18,共6页
抗草甘膦大豆的安全性一直备受关注,对转G10-EPSPS基因抗草甘膦大豆SHZD32-01进行荒地生存竞争能力试验,以检验其是否具有杂草化风险。以转G10-EPSPS基因抗草甘膦大豆SHZD32-01、受体大豆中豆32、主栽品种皖豆28为材料,在上海交通大学... 抗草甘膦大豆的安全性一直备受关注,对转G10-EPSPS基因抗草甘膦大豆SHZD32-01进行荒地生存竞争能力试验,以检验其是否具有杂草化风险。以转G10-EPSPS基因抗草甘膦大豆SHZD32-01、受体大豆中豆32、主栽品种皖豆28为材料,在上海交通大学农业与生物学院的转基因试验基地,采用地表撒播和常规方式播种,在2017年4月至7月分4次播种,每个处理重复4次,调查不同播种条件下大豆和杂草的生长情况,并对大豆及杂草群落的生长进行分析。结果发现,在地表撒播情况下,SHZD32-01与中豆32、皖豆28的存活率、株高、覆盖度和种植区域内杂草覆盖度基本无显著差异。在常规播种情况下,3种大豆种植区域内杂草发生情况无显著差异;4、5月播种的转基因大豆存活率弱于中豆32和皖豆28,且与中豆32差异显著;6月播种的3种大豆存活率均低于5%。在2种播种条件下,4月播种的转基因大豆繁育系数显著大于中豆32,5—7月播种的大豆繁育系数,三者之间差异不显著。综合分析上述指标,转基因大豆荒地生存竞争能力略弱于中豆32和皖豆28。同时所有试验小区8月杂草覆盖度均达到100%,转基因大豆SHZD32-01的荒地生存能力明显弱于杂草。在2种播种条件下,转基因大豆SHZD32-01与受体大豆、主栽品种以及杂草相比均没有竞争优势,没有转化为杂草的风险。 展开更多
关键词 转基因大豆 草甘膦 繁育系数 生存竞争能力
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抗草甘膦大豆加工过程中基因降解研究进展
9
作者 夏义苗 陈复生 +2 位作者 郝莉花 张丽芬 辛颖 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期150-156,共7页
全球范围内转基因大豆的种植和消费越来越普遍,为了保障广大消费者的知情权和自主选择权,促进大豆市场健康有序发展,应尽快完善转基因大豆及其相关产品的科学标识制度,研究不同加工操作对抗草甘膦大豆内外源基因的影响可为标识制度... 全球范围内转基因大豆的种植和消费越来越普遍,为了保障广大消费者的知情权和自主选择权,促进大豆市场健康有序发展,应尽快完善转基因大豆及其相关产品的科学标识制度,研究不同加工操作对抗草甘膦大豆内外源基因的影响可为标识制度的完善和标识阈值的建立提供强有力的理论参考。文章分别从储藏、机械处理、热处理、酸碱处理、大豆油加工、中国传统豆制品加工等方面综述了不同加工操作对抗草甘膦大豆内外源基因的降解情况,并对内外源基因的稳定性差异进行了初步概述,以期为后续研究更好地服务于科学的标识制度提供有益思路参考。 展开更多
关键词 草甘膦 大豆 基因 加工 降解
草铵膦桶混敌草快配方药效初探 预览
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作者 陈志明 严玉听 《中国农药》 2017年第11期51-52,共2页
草铵膦与敌草快同为灭生性、触杀型除草剂,草铵膦通过积铵触杀、3天见效、对杂草彻底性好、尤其对牛筋草、小飞蓬等抗草甘膦杂草根除性好,而敌草快主要通过强氧化作用导致叶肉组织灼烧而死、速效性好,敌草快的速效性与光照有很大关系,... 草铵膦与敌草快同为灭生性、触杀型除草剂,草铵膦通过积铵触杀、3天见效、对杂草彻底性好、尤其对牛筋草、小飞蓬等抗草甘膦杂草根除性好,而敌草快主要通过强氧化作用导致叶肉组织灼烧而死、速效性好,敌草快的速效性与光照有很大关系,打下去后3、4个小时杂草就发黄,对阔叶杂草效果明显而对禾本科杂草作用不明显。目前市场上有厂家推出了草铵膦、敌草快"1+1"桶混配方、最佳配方等, 展开更多
关键词 最佳配方 敌草快 草铵膦 桶混 禾本科杂草 触杀型除草剂 药效 草甘膦
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Development of glyphosate-tolerant transgenic cotton plants harboring the G2-aroA gene 预览
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作者 ZHANG Xiao-bing TANG Qiao-ling +1 位作者 WANG Xu-jing WANG Zhi-xing 《农业科学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期551-558,共8页
Given that glyphosate weed control is an effective strategy to reduce costs and improve economic outcomes of agricultural production in China,the development of glyphosate-resistant cotton holds great promise.Using an... Given that glyphosate weed control is an effective strategy to reduce costs and improve economic outcomes of agricultural production in China,the development of glyphosate-resistant cotton holds great promise.Using an Agrobacterium-mediated transformation method,a new G2-aroA gene that encodes 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase(EPSPS)was transformed into cotton cultivar K312.The transgenic cotton plants were regenerated from a callus tissue culture via kanamycin selection.Ten regenerated cotton plants were obtained and allowed to flower normally to produce fruit.The results from polymerase chain reaction(PCR)and Southern and Western blot analyses indicated that the target gene was integrated into the cotton chromosome and was expressed effectively at the protein level.The glyphosate tolerance analysis showed that the transgenic cotton had a high resistance to glyphosate.Further,even cotton treated with 45.0 mmol L~(–1) of glyphosate was able to slowly grow,bloom and seed.The transgenic cotton may be used for cotton breeding research of glyphosate-tolerant cotton. 展开更多
关键词 转基因棉花 棉花植株 草甘膦 aroA基因 农杆菌介导法 EPSP合酶 愈伤组织培养 聚合酶链反应
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抗草甘膦棉花高效简化栽培技术 预览 被引量:1
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作者 姜辉 王秀丽 +5 位作者 高明伟 陈莹 王家宝 张超 王永翠 赵军胜 《中国棉花》 2017年第8期36-38,共3页
应用抗草甘膦棉花品种是减少棉田杂草防治用工、提高植棉效益的有效途径。总结了黄河流域棉区抗草甘膦棉花的高效简化栽培技术,为其推广应用提供支撑。
关键词 棉花 草甘膦 简化栽培
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谁动了上帝的遗传密码 预览
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作者 蒋高明 《中医健康养生》 2016年第6期74-75,共2页
<正>编者的话:时下,崔永元回应农业部转基因问题,又引起热议。转基因、食品安全、营养科学饮食……这些与我们健康息息相关的词语,您怎么理解?科学家们的观点或许会给我们一些启发——食物越来越丰富了,可没有人愿意从事农业,锄... <正>编者的话:时下,崔永元回应农业部转基因问题,又引起热议。转基因、食品安全、营养科学饮食……这些与我们健康息息相关的词语,您怎么理解?科学家们的观点或许会给我们一些启发——食物越来越丰富了,可没有人愿意从事农业,锄草太苦。有人抱怨,庄稼爱生病,爱生虫,怕渴怕涝; 展开更多
关键词 遗传密码 崔永元 草甘膦 乙肝病毒 神农尝百草 病毒 给你 表面 海洋鱼类 林业院校
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美国引入转基因抗除草剂作物近20年后的展望 预览 被引量:1
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作者 筱禾 《世界农药》 CAS 2016年第1期42-45,48共5页
从经济、环境、技术、科学甚至政治的角度来看,在过去的20年间,转基因抗除草剂作物(HRCs)的传说一直令人神往。作为第一批转基因抗除草剂作物的转基因抗溴苯腈棉花和抗草铵膦油菜于1995年商品化,它们影响相对不大(表1)。而第2年引... 从经济、环境、技术、科学甚至政治的角度来看,在过去的20年间,转基因抗除草剂作物(HRCs)的传说一直令人神往。作为第一批转基因抗除草剂作物的转基因抗溴苯腈棉花和抗草铵膦油菜于1995年商品化,它们影响相对不大(表1)。而第2年引进了一个彻底改变了杂草管理的技术——第一个抗草甘膦作物(GRC)。自1996年起,具有单一或与其他性状叠加GR基因的抗草甘膦作物,成为了最重要的转基因作物,约占全球超过1.75亿hm~2转基因作物种植面积的80%。 展开更多
关键词 草甘膦 杂草防除 草铵膦 大豆种植 性进化 性机制 溴苯 苋属 自然 杂草种类
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The EPSPS ProlO6Ser substitution solely accounts for glyphosate resistance in a goosegrass (Eleusine indica) population from Tennessee, United States 预览
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作者 Janel L Huffman Chance W Riggins +1 位作者 Lawrence E Steckel Patrick J Tranel 《农业科学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第6期1304-1312,共9页
Previous studies have documented the occurrence of glyphosate-resistant(GR) goosegrass(Eleusine indica(L.) Gaertn.) and, in at least some cases, resistance is due to an altered target site. Research was performe... Previous studies have documented the occurrence of glyphosate-resistant(GR) goosegrass(Eleusine indica(L.) Gaertn.) and, in at least some cases, resistance is due to an altered target site. Research was performed to determine if an altered target site was responsible for GR in a Tennessee, United States goosegrass population(Tenn GR). DNA sequencing revealed a mutation in Tenn GR plants conferring the Pro106 Ser 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase(EPSPS) substitution previously identified in other GR populations. F2 populations were derived from Tenn GR plants crossed with plants from a glyphosate-susceptible population(Tenn GS) and analyzed for their response to glyphosate and genotyped at the EPSPS locus. Plants from the F2 populations segregated 1:2:1 sensitive:intermediate:resistant in response to a selective dose of glyphosate, and these responses co-segregated with the EPSPS genotypes(PP106, PS106, and SS106). To separately investigate the effect of the Pro106 Ser substitution on GR, glyphosate dose-response curves and 50% effective dose(ED50) values were compared among the three genotypes and the two parental populations. The SS106 genotype was 3.4-fold resistant relative to the PP106 genotype, identical to the resistance level obtained when comparing the resistant and susceptible parental populations. We conclude that the mutation conferring a Pro106Ser EPSPS mutation is solely responsible for GR in the TennGR goosegrass population. 展开更多
关键词 草甘膦 田纳西州 牛筋草 EPSPS基因 人口 美国 EPSP合成酶 S基因型
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转基因棉花研发及商业化发展态势 预览 被引量:1
16
作者 张丽雯 张永娟 陈恒 《生物产业技术》 2016年第5期52-61,共10页
国内外转基因棉花的研发主要集中于抗虫、抗除草剂、抗病、耐盐碱、抗旱和纤维改良等性状研究,但只有转基因抗虫、抗除草剂和纤维改良等性状得到注册应用。转基因棉花的大规模商业化种植,可以有效控制棉花害虫与杂草并改善棉花纤维品质... 国内外转基因棉花的研发主要集中于抗虫、抗除草剂、抗病、耐盐碱、抗旱和纤维改良等性状研究,但只有转基因抗虫、抗除草剂和纤维改良等性状得到注册应用。转基因棉花的大规模商业化种植,可以有效控制棉花害虫与杂草并改善棉花纤维品质,显著提高棉花产量,降低生产成本。主要描述了棉花转基因的主要技术和规模化转基因技术体系平台,论述了转基因棉花近年来的总体研发状况及在棉花抗虫、抗除草剂及纤维改良方面的研究进展,分析了全球前四大转基因棉花种植国家(印度、美国、中国和巴基斯坦)转基因棉花的商业化发展态势,并归纳总结了转基因棉花的安全性问题及今后主要的发展方向。 展开更多
关键词 转基因棉花 商业化发展 商业化种植 转基因方法 中棉所 草铵膦 草甘膦 磺酰脲类 植物转基因 优质棉花
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利用微滴数字PCR方法快速分析转基因玉米中外源基因的拷贝数 预览 被引量:9
17
作者 姜志军 江颖 +2 位作者 徐摇光 张立全 张晓东 《生物技术进展》 2016年第4期288-294,共7页
以玉米自交系501幼胚为受体材料,首先将来自球形节杆菌的EPSPS基因(G23V)按玉米密码子偏爱性进行优化与人工合成,并且将其克隆到表达载体pBAC9200中;然后利用农杆菌介导法将质粒载体转入玉米自交系501的幼胚中。经过愈伤诱导、草甘膦... 以玉米自交系501幼胚为受体材料,首先将来自球形节杆菌的EPSPS基因(G23V)按玉米密码子偏爱性进行优化与人工合成,并且将其克隆到表达载体pBAC9200中;然后利用农杆菌介导法将质粒载体转入玉米自交系501的幼胚中。经过愈伤诱导、草甘膦抗性筛选和分化培养最终获得14株转化再生植株。经PCR、RT-PCR检测表明,其中5株目的基因G23V-EPSPS稳定整合且在转录水平获得表达。随后,利用微滴数字PCR技术对外源基因拷贝数进行了检测分析,分析结果表明在5株阳性转基因植株中,外源基因G23V-EPSPS拷贝数分别为0.12、1.0、0.9、1.89和0.66,介于0~2之间。成功建立了草甘膦抗性基因G23V-EPSPS在玉米中的遗传转化体系,为以新型高抗草甘膦G23V-EPSPS基因作为转基因玉米筛选标记基因奠定了基础;而且以微滴数字PCR技术代替传统的Southern Blot简便快速的完成外源基因拷贝数的分析,为微滴数字PCR技术在转基因外源基因拷贝数检测上的广泛应用做了初步的探索。 展开更多
关键词 转基因玉米 G23V-EPSPS基因 草甘膦 ddPCR
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突变肠杆菌株NRS-1中5个草甘膦逆境应答基因的克隆与功能研究
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作者 费云燕 盖钧镒 赵团结 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1690-1698,共9页
【目的】微生物对草甘膦的抗性受复杂的遗传体系调控,涉及靶基因和大量相关调控基因。对肠杆菌属细菌NRS-1突变菌株在高浓度草甘膦逆境下的5个重要差异表达基因进行功能研究,以期深入了解非靶标基因在抗草甘膦微生物的作用特点,为发掘... 【目的】微生物对草甘膦的抗性受复杂的遗传体系调控,涉及靶基因和大量相关调控基因。对肠杆菌属细菌NRS-1突变菌株在高浓度草甘膦逆境下的5个重要差异表达基因进行功能研究,以期深入了解非靶标基因在抗草甘膦微生物的作用特点,为发掘优异基因资源,服务抗草甘膦转基因生物育种提供参考。【方法】NRS-1的差异表达基因可能在蛋白质合成、代谢、细胞膜等水平发挥作用,保护细胞免受高浓度草甘膦逆境,因此分别选取易位酶延伸因子fus A、丁二酸脱氢酶sdh A、胸苷磷酸化酶deo A、鸟氨酸氨甲酰转移酶arg F、周质蛋白osm Y进行克隆,采用大肠杆菌原核表达、转化拟南芥实验研究其功能,并通过细菌双杂及KEGG pathway分析基因间互作特点。【结果】在明确5个基因结构特点基础上,通过大肠杆菌原核表达及转基因拟南芥鉴定,发现这5个基因及草甘膦的靶基因5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶基因aro A对提高2种生物的草甘膦耐性均有不同程度的作用,其中arg F、deo A的抗性较好,与aro A相当,表明在应对草甘膦逆境时,芳香族、含有胸腺嘧啶氨基酸及精氨酸的合成代谢通路可能起重要作用;利用基因互作与KEGG分析发现5个基因与靶基因aro A间形成复杂的调控网络,但无直接的蛋白互作。【结论】NRS-1的5个差异表达基因对草甘膦逆境具有抗性,arg F、deo A优于其他3个基因,其与靶基因aro A间表现复杂的基因互作关系。 展开更多
关键词 肠杆菌 草甘膦 差异表达基因 基因互作 调控网络
兼抗虫、除草剂、干旱转基因玉米的获得和鉴定 预览 被引量:25
19
作者 孙越 刘秀霞 +2 位作者 李丽莉 官赟赟 张举仁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期215-228,共14页
【目的】培育抗玉米螟、抗草甘膦、抗旱的转基因复合性状玉米种质。【方法】通过农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化法,把重组到同一植物表达载体的cry1Ac M、epsps、GAT和Zm PIS转入玉米骨干自交系9801和齐319(Q319),获得转基因植株。通... 【目的】培育抗玉米螟、抗草甘膦、抗旱的转基因复合性状玉米种质。【方法】通过农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化法,把重组到同一植物表达载体的cry1Ac M、epsps、GAT和Zm PIS转入玉米骨干自交系9801和齐319(Q319),获得转基因植株。通过逐代除草剂筛选、分子检测和抗虫性鉴定,从大量转基因株系中优选出6个优良玉米株系。在此基础上,以非转基因自交系9801、Q319为对照,在严格控制条件下对6个转基因株系进行抗虫、抗除草剂和抗旱性检测。由于不同生长时期植株对玉米螟危害的敏感程度有差异,在抗虫性检测试验中,对不同生长阶段的转基因玉米的抗虫性,分别进行了田间和室内玉米螟接种试验,并以灌浆期玉米的籽粒和苞叶饲喂玉米螟幼虫检测其杀虫性。在草甘膦抗性鉴定试验中,对6叶期田间玉米植株喷洒大田除草用量的草甘膦溶液评估其应用价值;采用3倍应用剂量的草甘膦溶液喷施3叶期玉米植株测试其草甘膦耐受力。在抗旱性鉴定试验中,对10叶期玉米植株进行干旱胁迫处理,观测转基因植株的表型变化并测定光合作用和叶绿素荧光等参数。【结果】选择出6个遗传稳定的兼抗亚洲玉米螟、抗草甘膦和抗旱性提高的转基因玉米株系,其中株系L1—L3来自自交系9801,Q1—Q3来自自交系Q319。通过RT-PCR检测4个转基因的转录强度,证明它们在转基因植株中有效表达;利用Western blot方法检测cry1Ac蛋白的表达水平,确定其在玉米植株中稳定表达。植株抗虫性鉴定结果显示这6个株系在玉米营养生长期和灌浆期的抗虫能力均显著高于未转基因自交系。在草甘膦抗性测试中,转基因植株表现出明显高于未转基因自交系的草甘膦抗性。在干旱控水期间,转基因植株能维持较强的光合能力和光系统Ⅱ活性,对干旱胁迫的抗性显著高于对照植株。【结论】将cry1Ac M、epsps、GAT 展开更多
关键词 玉米螟 草甘膦 复合性状 转基因玉米
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Developing transgenic maize (Zea mays L.) with insect resistance and glyphosate tolerance by fusion gene transformation 预览
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作者 SUN He LANG Zhi-hong +5 位作者 LU Wei ZHANG Jie HE Kang-lai ZHU Li LIN Min HUANG Da-fang 《农业科学学报:英文版》 SCIE CSCD 2015年第2期305-313,共9页
Using linker peptide LP4/2A for multiple gene transformation is considered to be an effective method to stack or pyramid several traits in plants. Bacillus thuringiensis(Bt) cry gene and epsps(5-enolpyruvylshikimate-3... Using linker peptide LP4/2A for multiple gene transformation is considered to be an effective method to stack or pyramid several traits in plants. Bacillus thuringiensis(Bt) cry gene and epsps(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase) gene are two important genes for culturing pest-resistant and glyphosate-tolerant crops. We used linker peptide LP4/2A to connect the Bt cry1 Ah gene with the 2m G2-epsps gene and combined the wide-used man A gene as a selective marker to construct one coordinated expression vector called p2 EPUHLAGN. The expression vector was transferred into maize by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation, and 60 plants were obtained, 40% of which were positive transformants. Molecular detection demonstrated that the two genes in the fusion vector were expressed simultaneously and spliced correctly in translation processing; meanwhile bioassay detection proved the transgenic maize had preferable pest resistance and glyphosate tolerance. Therefore, linker peptide LP4/2A provided a simple and reliable strategy for producing gene stacking in maize and the result showed that the fusion gene transformation system of LP4/2A was feasible in monocot plants. 展开更多
关键词 基因转化系统 转基因玉米 草甘膦 EPSPS基因 单子叶植物 苏云金芽孢杆菌 根癌农杆菌介导
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