期刊文献+
共找到52篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
ELISA、流式微球载体技术和胶体金渗滤法检测梅毒抗体的比较及评价 被引量:8
1
作者 李如林 张洁 +1 位作者 张小艳 林远 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期200-201,共2页
梅毒是由梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)引起的一种性传播疾病,近年来我国的梅毒发病率有逐年上升的趋势。梅毒特异性抗体的血清学检查是梅毒诊断的重要依据。传统血清学检测方法有梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)和梅毒螺旋体酶... 梅毒是由梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)引起的一种性传播疾病,近年来我国的梅毒发病率有逐年上升的趋势。梅毒特异性抗体的血清学检查是梅毒诊断的重要依据。传统血清学检测方法有梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)和梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)。长期以来国内外都在不断探讨更灵敏或更快速的梅毒血清学检测技术。近 展开更多
关键词 梅毒 流式微球载体技术 ELISA 斑点免疫渗滤
斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估 预览 被引量:5
2
作者 陈长强 杨晶 +5 位作者 顾志冬 万颖蕾 毛客自 冯晓静 徐建新 樊绮诗 《检验医学》 CAS 2013年第9期835-840,共6页
目的建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)定量测定血清淀粉样蛋白A(SAA)并评估其分析性能。方法选用2株商品化抗SAA单克隆抗体,分别结合于硝酸纤维素膜和胶体金,制备免疫金渗滤试剂板条(SAA—DOT)以定量检测SAA。按照EP文件,评估SAA—... 目的建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)定量测定血清淀粉样蛋白A(SAA)并评估其分析性能。方法选用2株商品化抗SAA单克隆抗体,分别结合于硝酸纤维素膜和胶体金,制备免疫金渗滤试剂板条(SAA—DOT)以定量检测SAA。按照EP文件,评估SAA—DOT的分析性能(检测限、精密度、准确性、线性范围等)。结果SAA—DOT最低检测限为5mg/L;10和100mg/L的批内变异系数(CV)分别为9.07%和10.21%,天间CV分别为11.33%和11.53%;线性范围为5—230mg/L;SAA—DOT的测定结果与商品化乳胶增强速率散射比浊法(LERN)试剂具有良好的相关性(r=0.995,P〈0.05)。表观健康者血清SAA浓度中位数为5.7mg/L,95%可信区间为0—9.6mg/L。结论基于DIGFA的SAA-DOT简便、快速,能在5min内完成检测,各项分析性能指标达到国家食品药品监督管理局(SFDA)对体外诊断试剂的要求,可用于临床患者血清标本的检测。 展开更多
关键词 斑点免疫渗滤 血清淀粉样蛋白A 即时检验 乳胶增强速率散射比浊
在线阅读 下载PDF
人自身抗原SSA52的酵母重组分泌表达及其斑点免疫金渗滤法的建立 预览
3
作者 杨湘越 宋涛 兰小鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期 176-180,共5页
人自身抗原SSA52通常采用组织提取法或原核表达获得,存在诸多问题。通过基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人自身抗原SSA52,并建立斑点免疫金渗滤法。采用RT-PCR扩增SSA52基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SSA52。用电穿... 人自身抗原SSA52通常采用组织提取法或原核表达获得,存在诸多问题。通过基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人自身抗原SSA52,并建立斑点免疫金渗滤法。采用RT-PCR扩增SSA52基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SSA52。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)鉴定,并建立斑点免疫金渗滤法(dot immuogold filtration assay,DIGFA),进行初步临床应用对比研究。结果显示,RT-PCR产物约为1 400 bp,与预期1 428 bp接近,pPIC9k-SSA52重组阳性克隆测序结果与基因库核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物SSA52的相对分子质量约52 kD。Western blot法证实表达产物具有天然SSA52分子的免疫原性,阴性对照菌未见目的表达条带。DIGFA与欧蒙酶免疫斑点法的阳性符合率为95.2%(120/126),阴性符合率为94.0%(47/50),总符合率为94.9%(167/176);两种方法检测结果无统计学显著差异(P〉0.05)。说明SSA52在毕赤酵母中分泌表达成功,建立的DIGFA简便、快速、准确。 展开更多
关键词 自身抗原 SSA52 克隆 表达 巴斯德毕赤酵母 斑点免疫渗滤
在线阅读 免费下载
结核抗体检测在住院患者结核病诊断中的临床意义 被引量:7
4
作者 马秀清 陈良安 +2 位作者 李春笋 梁媛 于玲 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期413-415,共3页
目的探讨结核抗体检测在住院患者结核病诊断中的临床价值。方法对医院1911例住院患者,应用3种方法同时检测血清结核抗体的结果进行回顾性分析。结果 3种方法联合检测结核抗体的敏感性为79.8%,特异性为81.9%,结果优于单一检测,均P=0.000... 目的探讨结核抗体检测在住院患者结核病诊断中的临床价值。方法对医院1911例住院患者,应用3种方法同时检测血清结核抗体的结果进行回顾性分析。结果 3种方法联合检测结核抗体的敏感性为79.8%,特异性为81.9%,结果优于单一检测,均P=0.000;与传统方法相比,3种方法联合检测结核抗体的阳性率为77.6%,优于抗酸染色法(33.6%,P=0.000),略高于结核菌素试验法(66.4%),差异无统计学意义。结论 3种方法联合检测结核抗体,敏感性高,操作简单、快捷,成本低,对住院患者结核病辅助诊断有重要的临床应用价值。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 免疫层析 斑点免疫渗滤 免疫印迹
结核抗体检测在老年肺结核诊断中的应用价值 预览 被引量:4
5
作者 马秀清 陈良安 +2 位作者 李春笋 于玲 梁媛 《中华老年多器官疾病杂志》 2011年第2期 146-148,共3页
目的探讨结核抗体检测在老年肺结核诊断中的应用价值。方法回顾性分析296例老年住院患者血清结核抗体的结果。以老年肺结核的临床诊断为金标准,将一步免疫层析法、斑点免疫金渗滤法、免疫印迹法以及传统检测方法的敏感度和特异度同金标... 目的探讨结核抗体检测在老年肺结核诊断中的应用价值。方法回顾性分析296例老年住院患者血清结核抗体的结果。以老年肺结核的临床诊断为金标准,将一步免疫层析法、斑点免疫金渗滤法、免疫印迹法以及传统检测方法的敏感度和特异度同金标准进行比较,同时比较了41例老年肺结核病患者与83例中青年肺结核病患者血清结核抗体的检测结果。结果一步免疫层析法和免疫印迹法检测老年血清结核抗体的敏感度和特异度分别为58.54%和93.43%,75.61%和89.39%,与金标准检测结果相比,差异无统计学意义(P〉0.05)。三种方法在老年和中青年肺结核病患者中血清结核抗体检测的敏感度无统计学差异(P〉0.05)。结论一步免疫层析法和免疫印迹法与金标准检测结果一致,且敏感度高,特异度好,操作简单、快捷,不受年龄的影响,适合老年住院患者结核病的辅助诊断。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 免疫层析 斑点免疫渗滤 免疫印迹
在线阅读 下载PDF
两种抗双链DNA抗体检测方法的比较 预览 被引量:1
6
作者 李淑兰 《检验医学与临床》 CAS 2011年第22期 2789-2790,共2页
目的评价两种方法检测抗双链DNA(ds-DNA)抗体的敏感性和特异性。方法用斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和免疫印迹法(IBT)同时检测100例健康体检者和79例系统性红斑狼疮患者血清,结果采用χ2检验进行统计学分析。结果 DIGFA和IBT检测所... 目的评价两种方法检测抗双链DNA(ds-DNA)抗体的敏感性和特异性。方法用斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和免疫印迹法(IBT)同时检测100例健康体检者和79例系统性红斑狼疮患者血清,结果采用χ2检验进行统计学分析。结果 DIGFA和IBT检测所有健康体检者均为阴性,DIGFA和IBT的阳性率分别为82.28%和81.01%,二者符合率为96.2%。结论 DIGFA的灵敏性和特异性与IBT具有一致性(P=0.56),但DIGFA比IBT操作简便,快速,且成本低廉,可作为临床抗ds-DNA抗体检测的常规方法 。 展开更多
关键词 抗双链DNA抗体 斑点免疫渗滤 免疫印迹 系统性红斑狼疮
在线阅读 下载PDF
两种抗原检测弓形虫病IgM的效果
7
作者 王亚平 张英 +1 位作者 徐明 盛青松 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期 582-584,共3页
目的观察弓形虫P30重组抗原及可溶性抗原检测弓形虫病IgM的效果。方法建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。采用2种抗原分别包被在两条硝酸纤维素膜(NC)上,与待检血清中的相应IgM抗体结合,通过金标记兔抗人IgM直接显色,以检测弓形虫病IgM... 目的观察弓形虫P30重组抗原及可溶性抗原检测弓形虫病IgM的效果。方法建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。采用2种抗原分别包被在两条硝酸纤维素膜(NC)上,与待检血清中的相应IgM抗体结合,通过金标记兔抗人IgM直接显色,以检测弓形虫病IgM。2种抗原的DIGFA分别检测弓形虫IgM抗体阳性、类风湿、支原体肺炎、血吸虫病人和正常人血清。结果两种抗原建立的DIGFA检测试剂共检测5种血清样本166份,其中弓形虫感染IgM抗体阳性病人血清38份,弓形虫P30DIGFA敏感性为92.1%(35/38),可溶性抗原DIGFA敏感性为81.6%(31/38),差异无统计学意义(P〉0.05)。正常人群对照血清63份,检测全部阴性,特异性为100%。检测类风湿病人血清30份、血吸虫病人血清25份及支原体肺炎病人血清10份,仅类风湿病人血清出现阳性交叉反应,其中弓形虫P30DIGFA阳性2例,可溶性抗原DIGFA阳性3例。结论弓形虫P30重组抗原检测弓形虫病人血清IgM的DIGFA试剂可用于临床早期或急性期弓形虫病的诊断。 展开更多
关键词 弓形虫 P30重组抗原 可溶性抗原 斑点免疫渗滤
人自身抗原U1RNP 70K的酵母重组分泌表达及斑点免疫金渗滤检测法的建立 预览
8
作者 杨湘越 张惠菊 +2 位作者 徐秀云 兰小鹏 朱忠勇 《医学研究生学报》 CAS 2011年第9期 908-912,共5页
目的人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得。文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法。方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-U1RNP ... 目的人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得。文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法。方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-U1RNP 70K。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western b lot)鉴定。用所表达的蛋白包被硝酸纤维素膜,建立检测U1RNP抗体的斑点免疫金渗滤法(dot immuogold filtrationassay,D IGFA)。结果 PCR产物约为1300 bp,接近于预期的1314 bp,pPIC9k-U1RNP 70K重组阳性克隆测序结果与Gen-Bank中的U1RNP 70K序列完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物U1RNP 70K的相对分子质量约70 000。W estern b lot证实表达产物具有天然U1RNP 70K分子的免疫原性,阴性对照菌无目的条带表达。D IGFA的检测结果与欧蒙酶免疫斑点法的阳性符合率为94.74%(54/57),阴性符合率为98.00%(49/50),总符合率为96.26%(103/107)。2种方法检测结果无统计学显著差异(P=0.617)。结论在毕赤酵母中成功地高分泌表达了U1RNP 70K蛋白,并建立了简便、快速、准确检测U1RNP抗体的DIGFA方法。 展开更多
关键词 自身抗原 U1RNP70K 克隆 表达 巴斯德毕赤酵母 斑点免疫渗滤
在线阅读 下载PDF
斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病 预览 被引量:3
9
作者 何光志 田维毅 +4 位作者 王平 王文佳 韩洁 简昌友 安永如 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第21期 11144-11145,11227,共3页
[目的]探讨斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病的可行性,为制备诊断猪蛔虫病试剂盒提供参考依据。[方法]采用猪蛔虫的重组蛋白AS16抗原和胶体金标记葡萄球菌蛋白A(SPA),根据免疫渗滤原理,建立抗猪蛔虫抗体的斑点金免疫渗滤检测法。[结果]... [目的]探讨斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病的可行性,为制备诊断猪蛔虫病试剂盒提供参考依据。[方法]采用猪蛔虫的重组蛋白AS16抗原和胶体金标记葡萄球菌蛋白A(SPA),根据免疫渗滤原理,建立抗猪蛔虫抗体的斑点金免疫渗滤检测法。[结果]斑点免疫金渗滤法检测1200份猪血清样本中猪蛔虫抗体,检出阳性率为25.00%,而琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为15.00%。[结论]斑点金免疫渗滤检测法具有操作简便,灵敏度高,特异性强的优点,可用于猪蛔虫病的快速检测。 展开更多
关键词 猪蛔虫病 斑点免疫渗滤 琼脂扩散试验 诊断
在线阅读 下载PDF
检测口蹄疫病毒非结构蛋白3AB抗体的斑点免疫金渗滤法的建立 被引量:1
10
作者 孔繁德 朱文钏 +4 位作者 林祥梅 徐淑菲 吴德峰 韩雪清 吴绍强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期717-721,共5页
为建立一种能够区分口蹄疫疫苗免疫与野毒感染动物的快速检测方法,将纯化的口蹄疫病毒3AB非结构蛋白抗原包被在硝酸纤维素膜上,加入待检血清样品后,利用胶体金标记SPA显色。应用斑点免疫金渗滤技术(DIGFA)和ELISA方法同时对150份猪血... 为建立一种能够区分口蹄疫疫苗免疫与野毒感染动物的快速检测方法,将纯化的口蹄疫病毒3AB非结构蛋白抗原包被在硝酸纤维素膜上,加入待检血清样品后,利用胶体金标记SPA显色。应用斑点免疫金渗滤技术(DIGFA)和ELISA方法同时对150份猪血清进行检测,结果DIGFA法的阳性率为6%(9/150),ELISA法的阳性率为5.3%(8/150),两者符合率达99.3%。DIGFA操作简单,耗时短,结果易于判断,且与口蹄疫免疫猪血清、猪细小病毒、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬病病毒阳性血清不发生交叉反应。结果表明,该法适用于生猪和牛等口蹄疫病毒3AB抗体的快速检测。 展开更多
关键词 斑点免疫渗滤 胶体 口蹄疫 非结构蛋白3AB 抗体
斑点免疫金渗滤法检测弓形虫感染效果 被引量:3
11
作者 宋成 沈振海 +2 位作者 徐明 盛青松 王亚平 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期479-481,共3页
目的建立一种简捷、准确的弓形虫感染检测方法。方法将弓形虫P30抗原包被在硝酸纤维素膜上,与待检血清中的相应抗体结合,通过金标记Protein-A蛋白直接显色。结果用该试剂检测5种血清样本共221份,其中弓形虫感染病人血清58份,敏感性为96.... 目的建立一种简捷、准确的弓形虫感染检测方法。方法将弓形虫P30抗原包被在硝酸纤维素膜上,与待检血清中的相应抗体结合,通过金标记Protein-A蛋白直接显色。结果用该试剂检测5种血清样本共221份,其中弓形虫感染病人血清58份,敏感性为96.55%(56/58)。正常人群对照血清68份,检测结果全部为阴性,特异性为100%。检测25份类风湿病人血清、18份血吸虫病人血清及22份肺炎支原体病人血清,仅有1例类风湿病人血清出现阳性交叉反应。结论用弓形虫P30为抗原,以金标记Protein-A蛋白为探针显色系统的斑点免疫金渗滤法,对检测弓形虫病人血清抗体具有较高的敏感性和特异性,且操作简单、快速。 展开更多
关键词 弓形虫病 P30抗原 斑点免疫渗滤 胶体
斑点免疫金渗滤法检测赤羽病抗体的研究 预览 被引量:6
12
作者 张吉红 闻伟刚 唐泰山 《经济动物学报》 CAS 2010年第3期 139-142,153,共5页
以亲和层析原理为基础,将提纯的AKAV抗原包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,建立了斑点免疫金渗滤法诊断赤羽病抗体的方法。其中最佳点样抗原质量浓度是0.099mg/mL,封闭液选择含1%BSA,0.5%Tween-20的0.01mol/LpH7.2的PBS缓冲液,... 以亲和层析原理为基础,将提纯的AKAV抗原包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,建立了斑点免疫金渗滤法诊断赤羽病抗体的方法。其中最佳点样抗原质量浓度是0.099mg/mL,封闭液选择含1%BSA,0.5%Tween-20的0.01mol/LpH7.2的PBS缓冲液,SPA胶体金最佳稀释度为1∶4。特异性试验表明,该方法特异性好,与牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎、牛白血病、口蹄疫、蓝舌病等阳性血清不发生交叉反应。将DIGFA与ELISA进行对比,差异不显著。研究结果表明,该方法操作简单,结果易于判断,适用于赤羽病的临床诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 斑点免疫渗滤 赤羽病 检测
在线阅读 下载PDF
应用斑点免疫金渗滤法诊断犬弓首蛔虫病 预览
13
作者 何光志 田维毅 +2 位作者 钱宁 简昌友 安永如 《贵州畜牧兽医》 2010年第4期 1-2,共2页
根据免疫渗滤原理,采用犬弓首蛔虫抗原蛋白和胶体金标记SPA,建立抗犬弓首蛔虫抗体的斑点免疫金渗滤法(D IGFA)检测200份犬血清样本。结果:阳性检出率为8.00%(16/200);血清样本对应犬粪便用饱和盐水漂浮法检查虫卵,阳性检出率为2.0%... 根据免疫渗滤原理,采用犬弓首蛔虫抗原蛋白和胶体金标记SPA,建立抗犬弓首蛔虫抗体的斑点免疫金渗滤法(D IGFA)检测200份犬血清样本。结果:阳性检出率为8.00%(16/200);血清样本对应犬粪便用饱和盐水漂浮法检查虫卵,阳性检出率为2.0%(4/200)。结论:斑点免疫金渗滤法具有操作简便、灵敏度高、特异性强的优点,可用于犬弓首蛔虫病的早期、快速检测。 展开更多
关键词 犬弓首蛔虫病 斑点免疫渗滤 诊断
在线阅读 下载PDF
新型自身抗体联合检测斑点免疫金渗滤法的建立及应用评价 预览 被引量:1
14
作者 杨湘越 兰小鹏 +1 位作者 徐秀云 张惠菊 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第7期 1147-1149,共3页
目的:建立一种简便快速的联合检测自身抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将多种人自身抗原SmD1、SSA、SSB、Jo—1,采用毕赤酵母重组表达后,纯化抗原点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中相应多种自身抗体,通过胶体金标记的金... 目的:建立一种简便快速的联合检测自身抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将多种人自身抗原SmD1、SSA、SSB、Jo—1,采用毕赤酵母重组表达后,纯化抗原点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中相应多种自身抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点。结果:DIGFA检测185份经欧蒙ENA酶斑点法检测为不同自身免疫病患者血清和50份正常人血清,阳性符合率分别为抗SmD1 91.2%,抗SSA92.8%.抗SSB96.9%,抗Jo-1 92.6%,阴性符合率为100%(50/50)。与欧蒙ENA酶斑点法对比检测的总符合率为93.0%(172/185),差异无显著性(P〉0.05).结论:DIGFA法简便、快速、准确,可用于临床自身免疫病的联合诊断。 展开更多
关键词 自身免疫疾病 自身抗体 斑点免疫渗滤 联合检测
在线阅读 免费下载
细粒棘球蚴AgB8/2基因的原核表达及免疫学鉴定 预览 被引量:5
15
作者 陈献威 王志钢 +4 位作者 王红霞 毕玉新 李树裕 李洁 王媛媛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期 130-135,共6页
旨在克隆细粒棘球蚴AgB8/2基因,优化原核表达体系,鉴定纯化蛋白并初步确定其诊断价值。采用RT-PCR扩增AgB8/2基因cDNA,构建原核表达载体pET-AgB8/2并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,优化表达条件。纯化的AgB8/2融合蛋白经Western blot鉴... 旨在克隆细粒棘球蚴AgB8/2基因,优化原核表达体系,鉴定纯化蛋白并初步确定其诊断价值。采用RT-PCR扩增AgB8/2基因cDNA,构建原核表达载体pET-AgB8/2并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,优化表达条件。纯化的AgB8/2融合蛋白经Western blot鉴定正确后,采用斑点免疫金渗滤法初步验证其血清学诊断价值。结果显示,克隆的AgB8/2基因包含了273bp的完整ORF,序列分析表明与其它已报道的AgB8/2cDNA序列的同源性在99%-100%之间。优化的表达条件为,当菌液OD600值为0.6时,加入终浓度为0.05mmol/L的IPTG,37℃,振荡培养5h。纯化的蛋白经Western blot鉴定为目的蛋白。克隆的AgB8/2基因高度保守,原核表达载体pET-AgB8/2构建正确并高效表达可溶性融合蛋白,可作为特异性抗原应用于斑点免疫金渗滤法检测血清抗体。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 AgB8/2基因 基因克隆 原核表达 斑点免疫渗滤
在线阅读 免费下载
斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究 预览 被引量:8
16
作者 王荣 孔繁德 +1 位作者 吴德峰 徐淑菲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期 107-111,共5页
在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现... 在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(呈红色斑点),结果易于判断。且操作简单,耗时短,与猪细小病毒、口蹄疫和猪伪狂犬病毒阳性血清不发生交叉反应。 展开更多
关键词 斑点免疫渗滤 猪瘟 蓝耳病 胶体 检测
在线阅读 免费下载
舍格伦综合征A抗原(SSA60)在巴斯德毕赤酵母中的高效分泌表达及胶体金快速检测方法的建立 预览
17
作者 杨湘越 兰小鹏 +1 位作者 徐秀云 张惠菊 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第1期 37-39,共3页
目的在巴斯德毕赤酵母中表达舍格伦综合征A抗原(SSA60)并建立胶体金快速检测方法。方法表达质粒pPIC9k—SSA60用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上... 目的在巴斯德毕赤酵母中表达舍格伦综合征A抗原(SSA60)并建立胶体金快速检测方法。方法表达质粒pPIC9k—SSA60用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)和斑点免疫金渗滤法(DIGFA)鉴定。结果表达产物SSA60的分子量约60000,高拷贝巴斯德毕赤酵母转化菌的表达水平明显高于低拷贝的,表达量占分泌总蛋白60%以上,产物浓度为600~950mg/L。DIGFA检测85份舍格伦综合征(SS)患者血清和30份正常人血清,抗SSA检测阳性率为95.3%(81/85),特异度为100%(30/30)。与德国欧蒙ENA酶斑点法对比检测的符合率为96.5%(111/115),差异无统计学意义(P〉O.05)。结论SSA60在巴斯德毕赤酵母中获得高效分泌表达,DIGFA简便、快速、准确,可用于临床自身免疫病的诊断。 展开更多
关键词 舍格伦综合征A抗原 分泌表达 巴斯德毕赤酵母 斑点免疫渗滤
在线阅读 免费下载
斑点免疫金渗滤法检测结核抗体在老年肺结核诊断中的应用价值 预览 被引量:4
18
作者 梁庆华 《广西医学》 CAS 2009年第4期 532-533,共2页
目的探讨斑点免疫金渗滤法(DIGFA)检测血清抗结核分枝杆菌抗体在老年肺结核诊断中的临床应用价值。方法用DIGFA法检测60例老年肺结核患者(结核组)和52例老年非结核呼吸道疾病患者(对照组)的抗结核分枝杆菌抗体,并同时进行痰涂片... 目的探讨斑点免疫金渗滤法(DIGFA)检测血清抗结核分枝杆菌抗体在老年肺结核诊断中的临床应用价值。方法用DIGFA法检测60例老年肺结核患者(结核组)和52例老年非结核呼吸道疾病患者(对照组)的抗结核分枝杆菌抗体,并同时进行痰涂片抗酸染色查结核分枝杆菌,分析比较两者的检出结果。结果DIGFA法检测阳性率为83.3%(50/60),显著高于痰涂片阳性率的12.0%(7/60),两者比较差异有统计学意义(P〈0.001)。对照组DIGFA阳性率仅为3.8%。结论DIGFA法操作简单、快捷,检出率高,在老年肺结核辅助诊断中具有非常重要的临床应用价值。 展开更多
关键词 肺结核 结核分枝杆菌 斑点免疫渗滤 血清抗结核分枝杆菌抗体 老年人
在线阅读 下载PDF
微量快速检测血吸虫抗体的斑点免疫金渗滤法试剂盒研制 被引量:5
19
作者 蒋守富 邱倩雯 +6 位作者 刘静 张小萍 何艳燕 马晓疆 张莉 张明敏 蔡黎 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期500-502,共3页
目的研制一种适用于现场使用的血吸虫抗体快速检测试剂盒。方法通过对原有的斑点免疫金渗滤法全面改进,建立新的快速检测血吸虫抗体试剂盒。采用双盲法,检测慢性血吸虫病人血清100人份,正常人、乙肝患者及其他寄生虫病感染血清140人份... 目的研制一种适用于现场使用的血吸虫抗体快速检测试剂盒。方法通过对原有的斑点免疫金渗滤法全面改进,建立新的快速检测血吸虫抗体试剂盒。采用双盲法,检测慢性血吸虫病人血清100人份,正常人、乙肝患者及其他寄生虫病感染血清140人份。以敏感性、特异性、Youden指数、Kappa值等指标评价试剂盒的检测效果。结果试剂盒的敏感性为92%,特异性为95.08%,Youden指数为0.87,Kappa值为0.87,与华支睾吸虫感染者血清交叉反应率为5%。结论斑点免疫金渗滤法试剂盒血清用量少,反应快,敏感性、特异性较高,适用于现场血吸虫抗体检测。 展开更多
关键词 斑点免疫渗滤 血吸虫病 抗体
利用酵母重组SSB抗原建立快速斑点免疫金渗滤法检测抗SSB抗体 预览 被引量:1
20
作者 徐秀云 杨湘越 兰小鹏 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期448-449,共2页
目的建立一种简便、快速、可靠的检测抗SSB抗体的方法。方法将毕赤酵母菌重组表达的SSB抗原包被于硝酸纤维素(NC)膜上,与待检血清中抗SSB抗体反应后,以胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(Staphylococus protein A,SPA)作为显示剂.与截... 目的建立一种简便、快速、可靠的检测抗SSB抗体的方法。方法将毕赤酵母菌重组表达的SSB抗原包被于硝酸纤维素(NC)膜上,与待检血清中抗SSB抗体反应后,以胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(Staphylococus protein A,SPA)作为显示剂.与截留的抗SSB抗体结合,出现肉眼可见的红色斑点。结果本法的敏感性和特异性分别为100%和98.75%,与欧蒙斑点酶免疫法检测结果之间的符合率为99.01%。结论本法快速、简便、准确,具有很好的临床诊断应用前景。 展开更多
关键词 自身免疫性疾病 抗SSB抗体 斑点免疫渗滤
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈