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一起非典型新城疫的诊断与防治 预览
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作者 刘英吉 《山东畜牧兽医》 2019年第9期27-28,共2页
经过新城疫疫苗免疫的鸡群,由于环境因素、其他病原体感染、免疫抑制、疫苗质量、免疫的时间、免疫程序等多种原因,导致新城疫抗体水平不高,当鸡群受新城疫病毒侵袭时,多数呈现非典型、缓发型经过,临床上表现为不同的症状如吐水、呼吸... 经过新城疫疫苗免疫的鸡群,由于环境因素、其他病原体感染、免疫抑制、疫苗质量、免疫的时间、免疫程序等多种原因,导致新城疫抗体水平不高,当鸡群受新城疫病毒侵袭时,多数呈现非典型、缓发型经过,临床上表现为不同的症状如吐水、呼吸道、排黄绿色粪便、羽毛粗乱、精神沉郁等,而不会表现典型新城疫的临床症状和病理变化,但是非典型新城疫发生后,常常导致鸡群的抵抗力下降,能引起死淘率升高,产蛋下降,继发感染其他疾病,给养鸡业造成巨大的经济损失。 展开更多
关键词 非典型新城疫 新城疫 新城疫病毒 产蛋下降 程序 继发感染 苗质量 病原体感染
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鸽Ⅰ型副黏病毒病研究进展 预览
2
作者 古静 党安坤 兰邹然 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期95-97,共3页
鸽I型副黏病毒(Pigeon Paramyxovirus I,PPMV-I),是由禽I型副黏病毒(Avian Paramyxovirus I,APMV-I)流行于鸽群,并突变为适应鸽群的新城疫病毒,通过F基因分析,显示出是APMV-I的抗原变异株,因此命名为鸽I型副黏病毒(PPMV-I)。该病毒引起... 鸽I型副黏病毒(Pigeon Paramyxovirus I,PPMV-I),是由禽I型副黏病毒(Avian Paramyxovirus I,APMV-I)流行于鸽群,并突变为适应鸽群的新城疫病毒,通过F基因分析,显示出是APMV-I的抗原变异株,因此命名为鸽I型副黏病毒(PPMV-I)。该病毒引起的鸽新城疫在鸽群传播迅速、发病急,发病率和死亡率极高,发病鸽以拉稀和出现神经症状为特征,对鸽危害大,对养鸽业影响严重。了解该病的致病机理、诊断技术和防治措施,为预防和控制该病具有一定的理论指导意义。 展开更多
关键词 Ⅰ型副黏病毒 鸽群 新城疫病毒 基因分析 新城疫 神经症状 致病机理 诊断技术
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当前新城疫高发原因与对策 预览
3
作者 李红兵 《北方牧业》 2019年第10期27-27,29共2页
随着我国家禽养殖数量的增加,养殖水平的提高,虽然烈性新城疫的发病已经得到控制,但非典型新城疫发病仍呈高发状态,给养殖业带来不少损失。下面来探讨一下,当下新城疫高发的原因及对策。1概论新城疫是由禽副黏病毒I型引起的禽一种急性... 随着我国家禽养殖数量的增加,养殖水平的提高,虽然烈性新城疫的发病已经得到控制,但非典型新城疫发病仍呈高发状态,给养殖业带来不少损失。下面来探讨一下,当下新城疫高发的原因及对策。1概论新城疫是由禽副黏病毒I型引起的禽一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病。1.1临床症状常见发病鸡只精神不振,体温升高,采食量下降,口腔内有黏液流出. 展开更多
关键词 新城疫 混合感染 新城疫病毒
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一例非典型新城疫的诊断与防治 预览
4
作者 王永磊 《江西饲料》 2019年第4期41-43,共3页
经过新城疫疫苗免疫的鸡群,由于环境因素、其他病原体感染、免疫抑制、疫苗质量、免疫的时间、免疫程序等多种原因,导致新城疫抗体水平不高,当鸡群受新城疫病毒侵袭时,多数呈现非典型、缓发型经过。
关键词 非典型新城疫 防治 诊断 苗免 病原体感染 新城疫病毒 环境因素 抑制
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鸡新城疫的综合防控措施 预览
5
作者 郭吉利 龙福庆 +2 位作者 李卫华 陈丽 褚颜姣 《河南畜牧兽医:市场版》 2019年第2期43-44,共2页
鸡新城疫是由新城疫病毒引起的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病。一旦出现鸡新城疫,鸡只就会出现呼吸困难、黏膜和浆膜出血、神经机能紊乱等问题。新城疫的有效免疫需综合考虑免疫对象及其养殖环境,选择有效的疫苗,制定合理... 鸡新城疫是由新城疫病毒引起的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病。一旦出现鸡新城疫,鸡只就会出现呼吸困难、黏膜和浆膜出血、神经机能紊乱等问题。新城疫的有效免疫需综合考虑免疫对象及其养殖环境,选择有效的疫苗,制定合理的免疫程序。 展开更多
关键词 新城疫 综合防控 接触性传染病 有效免 新城疫病毒 呼吸困难 养殖环境 程序
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IBDV和NDV共感染对DF-1细胞的协同致病作用
6
作者 钱晶 欧阳伟 +4 位作者 王晶宇 王晓丽 夏兴霞 诸玉梅 王永山 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1269-1274,共6页
为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)共感染对DF-1细胞的致病作用,本试验将IBDV和NDV以单独/共同形式感染DF-1细胞,镜下观察可见共感染组最早在感染48h后出现细胞病变现象(CPE),其他感染组在72h后出现明显CPE;细胞活性检... 为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)共感染对DF-1细胞的致病作用,本试验将IBDV和NDV以单独/共同形式感染DF-1细胞,镜下观察可见共感染组最早在感染48h后出现细胞病变现象(CPE),其他感染组在72h后出现明显CPE;细胞活性检测结果显示共感染组在48h出现明显下降,在72h显著低于其他组。感染上清中共感染组与单感染组病毒增殖曲线基本一致,均表现为24~72h处于病毒增殖期。荧光定量PCR检测结果显示,共感染组细胞内NDV核酸载量均显著高于单感染组,其IBDV核酸载量在48h高于单感染组;共感染组MDA5转录水平在24h显著低于其他组,在48h显著高于其他组;各感染组Ⅰ型IFN转录水平受到明显抑制,其中共感染组IFN-β转录水平显著低于单感染组。本研究结果表明IBDV与NDV共感染导致细胞病变加剧并促进胞内病毒复制,明确了病毒共感染具有协同致病作用;还发现病毒共感染导致MDA5-IFN信号通路出现异常,这为下一步解析IBDV与NDV共感染对宿主天然免疫系统的影响及协同致病机制奠定基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 新城疫病毒 共感染 协同致病
基于恒定链载体不同抗原表位串联嵌合体免疫原性分析
7
作者 熊冉 艾珊珊 萧晟 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1460-1465,共6页
为研究多抗原表位串联在恒定链(inviraint chain,Ii)功能片段载体增强免疫作用中的特性,自行设计一系列引物,克隆新城疫病毒HN和鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因片段,用连接序列将其串联,并进一步连接小鼠Ii功能片段Cyt/TM,构建HN/VP2、Cyt... 为研究多抗原表位串联在恒定链(inviraint chain,Ii)功能片段载体增强免疫作用中的特性,自行设计一系列引物,克隆新城疫病毒HN和鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因片段,用连接序列将其串联,并进一步连接小鼠Ii功能片段Cyt/TM,构建HN/VP2、Cyt/TM/VP2、Cyt/TM/HN、Cyt/TM/HN/VP2和Cyt/TM/VP2/HN共5个嵌合体,定向插入pET-32a原核表达载体,转化大肠杆菌诱导表达并纯化融合蛋白,分别免疫小鼠,经间接ELISA法测定血清抗体效价。结果显示,Ii功能片段可增强小鼠分泌特异性抗体,无论是Ii功能片段连接单一抗原表位,还是Ii功能片段连接多抗原表位串联,均比单用抗原表位免疫组提高抗体效价3倍以上,而多抗原表位串联不同试验组之间差异不明显。结果表明,Ii功能片段(Cyt/TM)具有增强免疫的作用,其连接的抗原表位串联不影响其免疫原性。 展开更多
关键词 恒定链载体 串联基因 原性 新城疫病毒 鸡传染性法氏囊病病毒 HN VP2
中药牛皮消多糖体外抗新城疫病毒作用的研究 预览
8
作者 布合丽倩穆·依明 赛福丁·阿不拉 +3 位作者 艾克拜尔·依明 胡安古丽·努尔别克 阿克珠利·努尔包 李昊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第9期2737-2744,共8页
为探讨牛皮消多糖(CAP)对体外抗新城疫病毒(NDV)能力的影响,本试验用水提醇沉法提取牛皮消多糖,通过苯酚硫酸法和红外光谱对牛皮消多糖进行检测,采用MTT法测定牛皮消多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度,多糖的安全浓度统一为625μg/mL... 为探讨牛皮消多糖(CAP)对体外抗新城疫病毒(NDV)能力的影响,本试验用水提醇沉法提取牛皮消多糖,通过苯酚硫酸法和红外光谱对牛皮消多糖进行检测,采用MTT法测定牛皮消多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度,多糖的安全浓度统一为625μg/mL,选择安全浓度范围内的(39.06~625μg/mL)5种浓度的各级多糖,用3种加药方式(先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒感作后加药)检测牛皮消多糖对NDV的阻断、抑制及直接杀灭作用。结果显示,先接病毒后加多糖组和多糖与病毒感作后加药组CAP 50、CAP 30、CAP t、CAP 80和CAP 70均能显著抑制NDV感染CEF的能力,两组各级多糖抑制率分别为131.23%、110.12%、108.15%、100.24%、93.07%和61.76%、43.73%、44.51%、29.02%、37.45%;先加多糖后接病毒组CAP 50、CAP 30能显著抑制NDV感染CEF的作用(P<0.05),阻断作用下对NDV的抑制率可达到15.82%、8.33%,其余各组在安全浓度范围内对NDV无抑制作用。各组中药牛皮消多糖均有较好的抗NDV活性,其中对NDV的抑制作用和直接杀灭作用强于对其阻断作用。CAP 50及CAP 30的抗NDV活性较强,可作为进一步研究材料并具备一定的研究价值。 展开更多
关键词 牛皮消多糖 鸡胚成纤维细胞 新城疫病毒 病毒
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鸡源AID基因的克隆及其抗新城疫病毒作用
9
作者 徐腾飞 张耀丹 +9 位作者 李继红 汪伟 孟春春 孙英杰 谭磊 宋翠萍 廖瑛 丁铲 仇旭升 刁有祥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期975-981,共7页
APOBEC家族成员中AID蛋白具有DNA/RNA编辑酶功能,同时具有抑制病毒增殖的作用,但具体机制尚不明了。本研究首先根据NCBI公布的鸡全基因组序列进行生物信息学分析,预测鸡AID的基因序列并通过设计PCR引物,成功在鸡法氏囊cDNA样品中扩增出... APOBEC家族成员中AID蛋白具有DNA/RNA编辑酶功能,同时具有抑制病毒增殖的作用,但具体机制尚不明了。本研究首先根据NCBI公布的鸡全基因组序列进行生物信息学分析,预测鸡AID的基因序列并通过设计PCR引物,成功在鸡法氏囊cDNA样品中扩增出鸡AID基因(chAID)。通过建立并优化chAID的实时定量RT-PCR(rRT-PCR)检测方法,对鸡体内AID基因的表达以及其分布情况进行检测;同时通过Western blot试验对chAID蛋白在鸡细胞中的表达进行检测。试验显示,chAID基因能够在鸡细胞以及组织脏器中正常表达。新城疫病毒(NDV)感染鸡原代成纤维细胞、淋巴细胞后能够引起内源性chAID基因水平的上调;SPF鸡感染NDV后,chAID基因在不同组织脏器中均出现上调现象,以免疫器官最为显著。为了进一步验证chAID基因对NDV增殖的影响,进一步检测在细胞中过表达chAID基因对NDV增殖的影响。研究结果表明:重组chAID蛋白具有抗NDV病毒活性,本研究为进一步研究鸡chAID奠定了基础。 展开更多
关键词 活化诱导胞嘧啶脱氨酶 新城疫病毒 基因编辑酶 病毒作用
金银花不同器官提取液抗鸡新城疫病毒效果研究
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作者 徐萍 徐小博 +4 位作者 王三虎 李任峰 郑玉姝 Tatiana Fotina 赵坤 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第10期138-140,共3页
为了研究金银花不同器官(花、叶、茎)提取物的抗鸡新城疫病毒效果,试验制备了金银花不同器官提取液,在给SPF鸡胚接种鸡新城疫病毒前、接种后、接种同时接种金银花不同器官提取液,收取鸡胚尿囊液测定其血凝效价。结果表明:在3种不同的加... 为了研究金银花不同器官(花、叶、茎)提取物的抗鸡新城疫病毒效果,试验制备了金银花不同器官提取液,在给SPF鸡胚接种鸡新城疫病毒前、接种后、接种同时接种金银花不同器官提取液,收取鸡胚尿囊液测定其血凝效价。结果表明:在3种不同的加药方式中,金银花不同器官提取液均能有效降低新城疫病毒感染鸡胚尿囊液的血凝效价,且作用效果与提取液浓度呈正相关。金银花不同器官提取液的抑制效果为:花>茎>叶。说明金银花不同器官的提取液均能够抑制新城疫病毒在鸡胚尿囊液中的增殖,其抑制效果与金银花的不同器官提取液加药方式和浓度有关。 展开更多
关键词 新城疫病毒 金银花 提取物 不同器官 病毒
两种过硫酸氢钾复合物对禽流感病毒和新城疫病毒的灭活效果观察
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作者 张玉霞 蔡李萌 +2 位作者 孟凯 袁小远 王友令 《中国消毒学杂志》 CAS 2019年第7期484-486,共3页
目的观察过硫酸氢钾复合盐对禽流感病毒和新城疫病毒的灭活效果。方法采用鸡胚培养法,对2种过硫酸氢钾复合物灭活禽流感病毒和新城疫病毒的效果进行观察。结果用浓度为313 mg/L的复方过硫酸氢钾复合盐水溶液对悬液内H9N2型禽流感病毒作... 目的观察过硫酸氢钾复合盐对禽流感病毒和新城疫病毒的灭活效果。方法采用鸡胚培养法,对2种过硫酸氢钾复合物灭活禽流感病毒和新城疫病毒的效果进行观察。结果用浓度为313 mg/L的复方过硫酸氢钾复合盐水溶液对悬液内H9N2型禽流感病毒作用5 min可达到完全灭活。用浓度为1 250 mg/L的复方过硫酸氢钾水溶液对悬液内新城疫病毒作用10 min可达到完全灭活。结论 2种复合过硫酸氢钾粉剂对禽流感病毒和新城疫病毒均具有良好的灭活效果,新城疫病毒对该消毒剂的抗力稍强于禽流感病毒。 展开更多
关键词 过硫酸氢钾复合盐 禽流感病毒 新城疫病毒 灭活效果
H9N2亚型禽流感病毒和新城疫病毒混合感染环介导间接PCR鉴别方法的建立与评估
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作者 郑鸣 郭宏伟 +5 位作者 李华玮 赵绪永 王老七 魏露露 郑保亮 王永芬 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1085-1090,共6页
根据GenBank中禽流感病毒(AIV)的HA基因和新城疫病毒(NDV)的F基因序列保守性,分别设计2条序列相邻的特异性探针,标记于不同大小的拟南芥TOC1基因片段两端,作为报告基因,建立了AIV和NDV双重环介导间接PCR鉴别方法,AIV和NDV扩增片段大小... 根据GenBank中禽流感病毒(AIV)的HA基因和新城疫病毒(NDV)的F基因序列保守性,分别设计2条序列相邻的特异性探针,标记于不同大小的拟南芥TOC1基因片段两端,作为报告基因,建立了AIV和NDV双重环介导间接PCR鉴别方法,AIV和NDV扩增片段大小分别为200,270 bp。结果表明,所建立的方法对AIV和NDV核酸样品可扩增出特异性目的片段,而传染性法氏囊病病毒(IBDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡痘病毒(FPV)和鸡马立克病病毒(MDV)的核酸样品未见明显扩增;对AIV和NDV核酸样品检测的最低极限质量浓度分别为25.0,12.5μg/L;该方法特异性好、灵敏度高,2种病原同时检测不影响检测特异性和灵敏性。97份临床样本检测结果表明,环介导间接PCR对AIV和NDV的检出率分别为15.5%和27.8%,分别高于常规PCR的12.4%和23.7%,接近于SybrGreen实时PCR的15.5%和28.9%;Kappa一致性检验显示,环介导间接PCR、SybrGreen实时PCR 2种方法对AIV和NDV检测的结果高度符合,Kappa值分别为κ=0.92和κ=0.87。本试验成功建立了AIV/NDV双重环介导间接PCR检测方法,适用于临床上2种病原的快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 禽流感病毒 新城疫病毒 双探针 环介导间接PCR
新城疫病毒抗恶性肿瘤研究进展 预览
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作者 徐婷婷 韩继武 《医学综述》 2019年第6期1123-1127,共5页
溶瘤病毒疗法是临床治疗恶性肿瘤的新突破,其通过感染肿瘤细胞,引起病毒性细胞病变反应并诱发宿主抗肿瘤免疫,从而选择性杀死肿瘤细胞。新城疫病毒(NDV)是一种禽副黏病毒,对小鼠和人的抗肿瘤和免疫刺激作用已在临床前及临床研究中被证实... 溶瘤病毒疗法是临床治疗恶性肿瘤的新突破,其通过感染肿瘤细胞,引起病毒性细胞病变反应并诱发宿主抗肿瘤免疫,从而选择性杀死肿瘤细胞。新城疫病毒(NDV)是一种禽副黏病毒,对小鼠和人的抗肿瘤和免疫刺激作用已在临床前及临床研究中被证实,是最具潜力的溶瘤病毒之一。随着反向遗传学技术的不断成熟,使用该技术构建的以NDV为载体的插入外源基因重组NDV在免疫活性肿瘤模型中的研究成为热点。重组NDV不但可以稳定表达外源治疗基因,还可以增强病毒杀伤肿瘤和诱导宿主抗肿瘤免疫应答的能力。但其治疗恶性肿瘤的效果未来需大量临床试验验证。 展开更多
关键词 溶瘤病毒 新城疫病毒 恶性肿瘤
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河南省某蛋鸡场新城疫病毒ZK1/18毒株的分离鉴定 预览
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作者 贾松涛 刘炜 +1 位作者 周婷婷 张军 《中国动物检疫》 CAS 2019年第6期88-91,共4页
对河南省某蛋鸡场病死鸡中分离的一株鸡源新城疫病毒(NDV)进行血凝性、鸡胚平均致死时间(MDT)、F基因测序和遗传进化分析。结果显示,该分离株HA效价平均为1:128,HI效价为1:1024,MDT为55h。F基因测序表明:其编码区长度为1662bp,共编码55... 对河南省某蛋鸡场病死鸡中分离的一株鸡源新城疫病毒(NDV)进行血凝性、鸡胚平均致死时间(MDT)、F基因测序和遗传进化分析。结果显示,该分离株HA效价平均为1:128,HI效价为1:1024,MDT为55h。F基因测序表明:其编码区长度为1662bp,共编码553个氨基酸;F基因裂解位点氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,具有典型的NDV强毒分子特征,表明该分离株为强毒株,将其命名为A/Chicken/China/zhoukou1/18(简称ZK1/18)。遗传进化分析表明,该分离株属于Ⅶ型,是引起河南省新城疫疫情的主导基因型。该疫情提示,属于基因II型的LaSota疫苗株不能完全抵御基因Ⅶ型野毒的侵袭,在鸡群抵抗力降低时,可造成鸡群感染发病,需要加强综合防控。 展开更多
关键词 新城疫病毒 致病指数 VII型 分离鉴定
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新城疫病毒荧光RT-PCR检测方法的建立 预览
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作者 郭莹莹 王世状 《中国畜禽种业》 2019年第9期64-65,共2页
本文使用荧光PCR仪建立一种基于Taqman技术的荧光RT-PCR方法,检测新城疫病毒毒性的强弱。结果表明,在所有疑似病例中,只有农户家甲为阳性强毒,其他几种均为阴性弱毒或无毒,与经典的鸡胚病毒分离结果相一致,说明此法可用于强弱毒株的区分... 本文使用荧光PCR仪建立一种基于Taqman技术的荧光RT-PCR方法,检测新城疫病毒毒性的强弱。结果表明,在所有疑似病例中,只有农户家甲为阳性强毒,其他几种均为阴性弱毒或无毒,与经典的鸡胚病毒分离结果相一致,说明此法可用于强弱毒株的区分,同时也显示了其快速、灵敏、准确及操作简单的优点。 展开更多
关键词 荧光RT-PCR 新城疫病毒 检测
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一起鸡新城疫病的诊断 预览
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作者 李文娟 《畜禽业》 2019年第7期72-72,74共2页
万州某养殖场饲养的一批3月龄鸡发病,发病率50%,死亡率50%,发病鸡体温升高至43℃~44℃,精神沉郁,食欲不振,部分鸡鸡冠发紫、发绀,病鸡常常做吞咽和甩头的动作。病鸡下痢,排黄绿色和黄白色的稀粪,有的混有纤维蛋白和坏死组织。剖解病死... 万州某养殖场饲养的一批3月龄鸡发病,发病率50%,死亡率50%,发病鸡体温升高至43℃~44℃,精神沉郁,食欲不振,部分鸡鸡冠发紫、发绀,病鸡常常做吞咽和甩头的动作。病鸡下痢,排黄绿色和黄白色的稀粪,有的混有纤维蛋白和坏死组织。剖解病死鸡发现喉头、支气管黏膜出血,心包有少量积液,腺胃乳头出血、肿胀,腺胃和肌胃之间有大块的带状及斑点状出血,有的形成溃疡。根据病鸡的临床症状和剖检症状及血清学试验,确诊为鸡新城疫病毒感染。 展开更多
关键词 新城疫病毒 血凝与血凝抑制试验
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应用CRISPR/Cas9敲除HeLa细胞DDX21基因对新城疫病毒复制的影响 预览
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作者 武炜 王飒 +7 位作者 孟春春 仇旭升 廖瑛 谭磊 宋翠萍 刘炜玮 孙英杰 丁铲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1433-1440,共8页
解旋酶家族是一类对所有生物都至关重要的酶,主要功能是基因解旋,DEAD/H-box家族RNA解旋酶是一类重要的解旋酶。DEAD-box RNA解旋酶DDX21被证实可能调控宿主细胞先天性免疫。新城疫病毒(NDV)是一种对养禽业危害严重的病原,NDV能够通过... 解旋酶家族是一类对所有生物都至关重要的酶,主要功能是基因解旋,DEAD/H-box家族RNA解旋酶是一类重要的解旋酶。DEAD-box RNA解旋酶DDX21被证实可能调控宿主细胞先天性免疫。新城疫病毒(NDV)是一种对养禽业危害严重的病原,NDV能够通过多种手段调控宿主先天性免疫,为了探讨DDX21如何调控NDV复制,本研究应用CRISPR/Cas9系统建立DDX21基因敲除的HeLa细胞系,并验证其对NDV复制的影响。针对DDX21基因共设计6条sgRNA,构建敲除载体并电转染细胞,通过药物筛选、亚克隆筛选后,以PCR和Western blot进行敲除效率的双重鉴定,并比较野生型和DDX21敲除细胞中NDV的复制效率。结果显示,由于DDX21对细胞生长至关重要,因此仅获得一株DDX21杂合子敲除细胞,Western blot结果显示DDX21表达量被显著抑制,NDV对在敲除细胞上的复制滴度明显低于野生型细胞,说明DDX21发挥正调控NDV复制的作用,本试验为DDX21调控抗病毒先天性免疫研究奠定了基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 DDX21 新城疫病毒 复制
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M蛋白携带TC标签的重组新城疫病毒的构建及生物学特性鉴定 预览
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作者 范振 孙军峰 +2 位作者 赵冉 韩宗玺 刘胜旺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期777-782,共6页
基质蛋白(M)是新城疫病毒(NDV)重要的结构蛋白。为监测NDV感染后M蛋白在细胞中的动态分布,本研究利用反向遗传操作技术,在NDV La Sota株全长c DNA中M基因编码区的C端插入由18个核苷酸编码的TC (Tetracysteine)标签,转染细胞经筛选获得携... 基质蛋白(M)是新城疫病毒(NDV)重要的结构蛋白。为监测NDV感染后M蛋白在细胞中的动态分布,本研究利用反向遗传操作技术,在NDV La Sota株全长c DNA中M基因编码区的C端插入由18个核苷酸编码的TC (Tetracysteine)标签,转染细胞经筛选获得携带TC标签的重组病毒La Sota-M-CTC。生长曲线测定结果显示,La Sota-M-CTC能够在鸡胚中有效复制,其生长曲线与亲本病毒La Sota相似。通过接种鸡胚测定鸡胚平均死亡时间检测La Sota-M-CTC的毒力。结果显示,La Sota-M-CTC的毒力与La Sota基本一致。此外,TC标签能够在重组病毒中稳定存在。将La Sota-M-CTC感染的细胞用双砷绿色染料FlAsH-EDT2染色后经激光共聚焦检测M蛋白在细胞中的分布。结果显示,在La Sota-M-CTC感染细胞后1 h~2 h时,M蛋白主要分布于细胞质中,而在病毒感染4 h后M蛋白进入细胞核中,并持续存在至病毒感染后的12 h。本研究为监测M蛋白在NDV感染过程中的动态分布以及阐明M蛋白在NDV感染中的作用机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 新城疫病毒 TC标签 M蛋白 细胞定位
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二氯异氰脲酸钠和过氧乙酸消毒剂对新城疫病毒灭活效果研究
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作者 刘梅 沈欣悦 +2 位作者 李建梅 俞燕 戴亚斌 《中国家禽》 北大核心 2019年第4期64-66,共3页
采用悬液定量法和鸡胚接种试验研究了二氯异氰脲酸钠和二元型过氧乙酸消毒剂杀灭新城疫病毒效果及稳定性。在试验条件下,二氯异氰脲酸钠和过氧乙酸对新城疫病毒均有良好的杀灭效果,其杀灭病毒的最低浓度分别为0.1 g/L异氰脲酸钠和1 mL/... 采用悬液定量法和鸡胚接种试验研究了二氯异氰脲酸钠和二元型过氧乙酸消毒剂杀灭新城疫病毒效果及稳定性。在试验条件下,二氯异氰脲酸钠和过氧乙酸对新城疫病毒均有良好的杀灭效果,其杀灭病毒的最低浓度分别为0.1 g/L异氰脲酸钠和1 mL/L过氧乙酸消毒工作液保持杀毒效果的时间分别不超过1 d和5 d。 展开更多
关键词 二氯异氰脲酸钠 过氧乙酸 新城疫病毒 消毒效力 稳定性
鸡TIGAR基因真核表达质粒的构建及其抗凋亡功能评价 预览
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作者 栗永华 车路平 +8 位作者 仇旭升 谭磊 孙英杰 刘炜炜 宋翠萍 廖瑛 丁铲 王金泉 孟春春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1102-1109,共8页
【背景】TP53诱导的糖酵解和凋亡调节因子(TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR)是p53下游的靶基因,具有调节糖酵解水平和去除活性氧(Reactive oxygen species,ROS)并降低由活性氧诱发的细胞凋亡水平。【目的】构建... 【背景】TP53诱导的糖酵解和凋亡调节因子(TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR)是p53下游的靶基因,具有调节糖酵解水平和去除活性氧(Reactive oxygen species,ROS)并降低由活性氧诱发的细胞凋亡水平。【目的】构建鸡源TIGAR基因的真核表达质粒,并检测TIGAR基因在DF1细胞中的抗凋亡作用,为建立稳定表达鸡TIGAR基因的细胞系做准备。【方法】根据GenBank(登录号:XM417232.6)中预测基因设计引物,利用RT-PCR的方法从SPF鸡脾脏中扩增鸡TIGAR基因,将扩增产物克隆至载体(Flag-CMV14)后送公司测序验证;随后构建进化树对鸡TIGAR基因与其他哺乳动物及水生动物的TIGAR基因进行同源性分析。将重组质粒(Flag-TIGAR)转染入DF1细胞24 h后,使用新城疫病毒诱导细胞凋亡,利用Western Blot检测重组质粒表达情况以及Poly ADP-Ribose Polymerase(PARP)裂解情况。此外还将重组质粒(Flag-TIGAR)转染入DF1细胞,并于收样前2 h使用Staurosporine刺激细胞发生凋亡,分别在转染后24、48 h收集样品,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。【结果】RT-PCR扩增TIGAR基因,在843 bp处出现目的条带与预测相符,构建的TIGAR真核表达质粒(Flag-TIGAR)经测序,结果显示其序列与GenBank上预测的基本一致。Western Blot结果显示在30 h、36 h收集的样品中PARP均被裂解且转染重组质粒(Flag-TIGAR)的实验组与未转染质粒(MOCK)组或转染空载体(Flag-CMV14)组的样品相比,裂解的PARP表达量明显降低,且差异极显著(P<0.01)。流式结果显示:24 h检测转染Flag-CMV14后细胞总凋亡率为11%(早期凋亡7.8%,晚期凋亡3.2%),而转染Flag-TIGAR后细胞总凋亡率仅为4%(早期凋亡3.7%,晚期凋亡0.3%),转染Flag-CMV14的早期凋亡率和晚期凋亡率均高于转染Flag-TIGAR组,且差异显著(P<0.05)。48 h转染Flag-CMV14后细胞总凋亡率为20.3%(早期凋亡14.3%,晚期凋亡6.0%),而转染Flag-TIGAR后细胞总凋亡率为6.4%(早期凋亡4.8%,晚� 展开更多
关键词 TIGAR 真核表达质粒 新城疫病毒 抗凋亡
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