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植物根际芽胞杆菌菌种资源采集及其具有过水解催化活性水解酶基因的克隆 认领
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作者 王倩 李欢 +5 位作者 郑琳 贾文敬 黄建忠 李欣 董思圳 舒正玉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期76-87,共12页
[背景]芽胞杆菌源枯草杆菌蛋白酶(subtilisin carlsberg)、乙酰基木聚糖酯酶(acetyl xylan esterase)和头孢菌素乙酰水解酶(cephalosporin acetyl hydrolase)具有较高的过水解催化活性,有商业开发价值。[目的]挖掘芽胞杆菌菌株中具有过... [背景]芽胞杆菌源枯草杆菌蛋白酶(subtilisin carlsberg)、乙酰基木聚糖酯酶(acetyl xylan esterase)和头孢菌素乙酰水解酶(cephalosporin acetyl hydrolase)具有较高的过水解催化活性,有商业开发价值。[目的]挖掘芽胞杆菌菌株中具有过水解酶催化活性的水解酶蛋白基因,为后续制备过水解酶及酶法合成过氧乙酸奠定基础。[方法]利用定向筛选培养基,从植物根际及纳豆产品中筛选产蛋白酶芽胞杆菌候选菌株,并利用RFLP及16S rRNA基因对其进行鉴定。从蛋白酶高产芽胞杆菌菌株中克隆枯草杆菌蛋白酶、乙酰木聚糖醋酶和头孢菌素乙酰水解酶的全长基因。[结果]从植物根际土壤及纳豆产品中共分离到85个候选菌株,RFLP及16S rRNA基因鉴定结果表明候选菌株均为芽胞杆菌,分别属于Bacillus subtilis、Bacillus cereus、Bacillus pumilus和Bacillus megaterium四个类群。从B.subtilis NSYT-3克隆的枯草杆菌蛋白酶基因编码的多肽链全长381个氨基酸,从B.pumilus OSLJ-3克隆得到的乙酰基木聚糖酯酶基因编码的多肽链全长320个氨基酸,从B.subtilis NSYT-3克隆的头孢菌素乙酰水解酶基因编码的多肽链全长318个氨基酸,3D结构模拟表明这3个酶蛋白均具有α/β水解酶折叠家族蛋白结构特点。[结论]芽胞杆菌源具过水解催化活性水解酶基因的克隆,为后续开发酶法合成过氧乙酸工艺奠定了基础。 展开更多
关键词 根际细菌 芽胞杆菌 过水解催化活性 枯草杆菌蛋白酶 乙酰木聚糖酯 头孢菌素乙酰水解
PCSK9抑制剂生物多效性的全面阐述 认领
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作者 张长磊 占小锋(综述) 李刚(审校) 《河北医科大学学报》 CAS 2020年第5期614-618,共5页
最新的中国心血管疾病报告表明,我国心血管疾病患病率处于上升阶段,而血脂代谢紊乱是导致心血管疾病的危险因素之一。低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein chesterol,LDL-C)早已成为了心血管事件的重要预测因子。新型药物,特别... 最新的中国心血管疾病报告表明,我国心血管疾病患病率处于上升阶段,而血脂代谢紊乱是导致心血管疾病的危险因素之一。低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein chesterol,LDL-C)早已成为了心血管事件的重要预测因子。新型药物,特别是可显著降低LDL-C水平的前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin-9(proprotein convertase subtilisin/kexin Type 9,PCSK9)抑制剂的出现,标志着血脂靶向治疗的一个划时代进步。 展开更多
关键词 枯草杆菌蛋白酶 蛋白 LDL 炎症
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In vitro and in silico studies on fibrinolytic activity of nattokinase: A clot buster from Bacillus sp. 认领
3
作者 V. Mohanasrinivasan. A. Mohanapriya +5 位作者 Swaroop Potdar Sourav Chatterji Srinath Konne Sweta Kumari S. Merlyn Keziah. C. Subathra Devi 《生物学前沿:英文版》 CAS CSCD 2017年第3期219-225,共7页
Nattokinase (NK ) 是 subtilisin 家庭的丝氨酸朊酶酶。它展出一项强壮的 fibrinolytic 活动。从杆菌 sp 的 fibrinolytic 酶。因为他们的效率,包括胞质素激活在 fibrinolytic 过程作为 thrombolytic 代理人吸引了兴趣。在礼品的方法... Nattokinase (NK ) 是 subtilisin 家庭的丝氨酸朊酶酶。它展出一项强壮的 fibrinolytic 活动。从杆菌 sp 的 fibrinolytic 酶。因为他们的效率,包括胞质素激活在 fibrinolytic 过程作为 thrombolytic 代理人吸引了兴趣。在礼品的方法学习, VIT 花园土壤对隔离过程镇定、使 NK 生产遭到以便为屏蔽。为 NK 酶屏蔽被光线的 caseinolytic 试金执行。NK 酶的生产在比较研究的二不同生产媒介被做。NK 酶被胶化浸透层析净化。净化的 NK 的活动被块细胞溶解和酷蛋白消化试金检查。为了调查 NK 和纤维蛋白原相互作用并且也的结构的基础识别,最好的有约束力的模式,分子的动力学和停靠研究被执行。基于词法、生物化学的描述的结果, isolate 作为杆菌 sp 被识别。NK 的全面纯化褶层与 664U/mg 的特定的活动是大约 3, 9.9% 让步。净化的酶的同质被在 SDS 页获得的单身的乐队分析并且证实。净化的朊酶的分子的重量作为 25 kDa 被估计。净化的 NK 酶展出了 97% 有效的块细胞溶解活动。NK 被停靠在到在它用船坞服务者的有约束力的地点的纤维蛋白原的旋钮区域。纤维蛋白原的 26 残余和 NK 的 29 残余的一个总数组成接口区域。然而,纤维蛋白原(THR238, MET264, LYS266, ARG275, THR277, ALA279, ASN308, MET310,和 LYS321 ) 的 9 残余和 NK (GLY61 SER63 THR99, PHE189, LEU209, TYR217, ASN218,和 MET222 ) 的 8 残余涉及未经触动的绑定NK 酶的重要数量从杆菌 sp 被获得的结论。停靠分析表明 NK 和纤维蛋白原采用一个扩大有约束力的模式并且与关键残余交往展出他们的活动。 展开更多
关键词 纳豆激 Bacillus 纤溶活性 活性硅 枯草杆菌蛋白酶 氨基酸残基 纤维蛋白 SDS-PAGE
alirocumab添加治疗血脂异常随机对照临床试验的系统评价 认领 被引量:1
4
作者 李和教 钟小燕 +3 位作者 杨旭平 刘远志 余彬 黄毅岚 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期412-418,共7页
目的 系统评价alirocumab添加治疗血脂异常的有效性和安全性。方法 计算机检索Pub Med、Sciencedirect、Embase、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库、维普数据库中筛选alirocumab添加治疗血脂... 目的 系统评价alirocumab添加治疗血脂异常的有效性和安全性。方法 计算机检索Pub Med、Sciencedirect、Embase、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库、维普数据库中筛选alirocumab添加治疗血脂异常的随机对照试验。由两位研究人员根据纳入和排除标准筛选文献、提取数据并对文献进行质量评价,采用RevMan 5.3和Stata 12软件进行Meta分析。结果 共纳入13项研究,包括5 051例患者。Meta分析结果显示alirocumab添加治疗血脂异常在降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、载脂蛋白B(Apo B)、脂蛋白a(Lpa)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)水平和升高HDL-C水平方面均优于安慰剂。alirocumab在降低LDL-C、TC、Apo B、Lpa和non-HDL-C水平和升高HDL-C水平方面均优于依折麦布,在降低TG方面与依折麦布相当。alirocumab在降低LDL-C、TC、Apo B、Lpa和non-HDL-C水平方面均优于他汀类,在降低TG和升高HDL-C水平方面与他汀类相当。在总不良反应发生率方面,试验组和对照组无显著差异,但alirocumab引起注射部位挫伤高于对照组。结论 当前证据显示,alirocumab添加治疗血脂异常安全、有效,但其对临床心血管终点事件的影响仍有待论证。 展开更多
关键词 alirocumab 蛋白转化 枯草杆菌蛋白酶 血脂异常 META分析
Characterizing proteases in an Antarctic Janthinobacterium sp. isolate: Evidence of a protease horizontal gene transfer event 认领
5
作者 Cecilia Martinez-Rosales Juan José Marizcurrena +3 位作者 Andres Iriarte Natalia Fullana Héctor Musto Susana Castro-Sowinski 《极地科学进展:英文版》 2015年第1期88-95,共8页
We report the isolation of a cold-adapted bacterium belonging to the genus Janthinobacterium(named AU11), from a water sample collected in Lake Uruguay(King George Island, South Shetlands). AU11(growth between 4℃ and... We report the isolation of a cold-adapted bacterium belonging to the genus Janthinobacterium(named AU11), from a water sample collected in Lake Uruguay(King George Island, South Shetlands). AU11(growth between 4℃ and 30℃) produces a single cold-active extracellular protease(Ex PAU11), differentially expressed at low temperature. Ex PAU11 was identified by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry(MALDI-To F MS) as an alkaline metallo-protease(70% coverage with an extracellular protease of Janthinobacterium sp. PI12), and by protease-inhibitor screening identified as a serine-protease. To the best of our knowledge this is the first experimental evidence of a cold-active extracellular protease produced by Janthinobacterium. Furthermore, we identified a serine-protease gene(named JSP8A) showing 60% identity(98% query coverage) to subtilisin peptidases belonging to the S8 family(S8A subfamily) of many cyanobacteria. A phylogenetic analysis of the JSP8 A protease, along with related bacterial protein sequences, confirms that JSP8 A clusters with S8 A subtilisin sequences from different cyanobacteria, and is clearly separated from S8 A bacterial sequences of other phyla(including its own). An analysis of the genomic organization around JSP8 A suggests that this protease gene was acquired in an event that duplicated a racemase gene involved in transforming L- to D-amino acids. Our results suggest that AU11 probably acquired this subtilisin-like protease gene by horizontal gene transfer(HGT) from a cyanobacterium. We discuss the relevance of a bacterial protease-HGT in the Antarctic environment in light of this hypothesis. 展开更多
关键词 胞外蛋白酶 实验证据 南极环境 基因水平转移 事件 枯草杆菌蛋白酶 MALDI-TOF 蛋白酶基因
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柑橘类枯草杆菌蛋白酶基因CcSubtilisin的克隆及遗传转化 认领
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作者 吴天利 李菊 +6 位作者 张永艳 胡敏伦 闫化学 姜波 谢丹 袁超力 钟广炎 《西南大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期59-66,共8页
以克里曼丁橘[Citrus clementina]叶片RNA为材料,采用RT-PCR技术克隆获得了一个编码类枯草杆菌蛋白酶的基因,命名为CcSubtilisin.该基因的开放阅读框(ORF)长度为2 337bp,预测可编码778个氨基酸残基的多肽.分析发现CcSubtilisin与拟南... 以克里曼丁橘[Citrus clementina]叶片RNA为材料,采用RT-PCR技术克隆获得了一个编码类枯草杆菌蛋白酶的基因,命名为CcSubtilisin.该基因的开放阅读框(ORF)长度为2 337bp,预测可编码778个氨基酸残基的多肽.分析发现CcSubtilisin与拟南芥、蓖麻、番茄、毛果杨、大豆、挪威云杉、欧洲桤木、百合等18个物种的同源蛋白具有相同的4个保守区域,属于枯草杆菌蛋白酶.通过构建该基因的超表达载体并以沙田柚为材料进行遗传转化,获得了该基因的9个转基因沙田柚株系.实时定量PCR结果表明,4个用于检测的株系中有3株的表达量明显高于对照. 展开更多
关键词 丝氨酸蛋白酶 枯草杆菌蛋白酶 基因克隆 序列分析 遗传转化
Inhibition of Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9: A Novel Mechanism of Berberine and 8-hydroxy Dihydroberberine against Hyperlipidemia~ 认领
7
作者 刘德亮 徐丽君 +6 位作者 董慧 陈广 黄召谊 邹欣 王开富 罗运环 陆付耳 《中国结合医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期132-138,共7页
在老鼠为 hyperlipidemia 的处理调查效果和 8-hydroxy dihydroberberine (Hdber ) 的不同剂量的分子的机制。
关键词 枯草杆菌蛋白酶 高脂血症 分子机制 转化 羟基 类型 固醇调节元件结合蛋白 小檗碱
枯草杆菌蛋白酶的纯化及酶学性质 认领
8
作者 牛树壹 韩宝芹 《生物技术世界》 2014年第3期11-12,共2页
本文利用实验室保存的枯草杆菌发酵产生枯草杆菌蛋白酶,并经(NH4)2SO4盐析和CM-sepharose Fast Flow对枯草杆菌蛋白酶进行纯化,用SDSPAGE检测纯化效果,显示该酶分子量低于14kDa,并对蛋白酶的酶学性质、体外溶栓特性及溶栓机理进行初步探... 本文利用实验室保存的枯草杆菌发酵产生枯草杆菌蛋白酶,并经(NH4)2SO4盐析和CM-sepharose Fast Flow对枯草杆菌蛋白酶进行纯化,用SDSPAGE检测纯化效果,显示该酶分子量低于14kDa,并对蛋白酶的酶学性质、体外溶栓特性及溶栓机理进行初步探讨,其最适反应温度为60-70℃,但50℃以下稳定性良好,最适反应pH为7,pH6-8稳定。 展开更多
关键词 枯草杆菌蛋白酶 分离纯化 学性质
Four residues of propeptide are essential for precursor folding of nattokinase 认领 被引量:1
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作者 Yan Jia Xinhua Cao +5 位作者 Yu Deng Wei Bao Changyan Tang Hanjing Ding Zhongliang Zheng Guolin Zou 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2014年第11期957-964,共8页
Subtilisin propeptide 作为指导先锋合拢的 intramolecular 女伴工作。Nattokinase, subtilisin 家庭的一个成员,当由信号肽, propeptide,和一个 subtilisin 领域组成的一位先锋,和它的合拢的机制尚待被理解,被综合。在这研究,... Subtilisin propeptide 作为指导先锋合拢的 intramolecular 女伴工作。Nattokinase, subtilisin 家庭的一个成员,当由信号肽, propeptide,和一个 subtilisin 领域组成的一位先锋,和它的合拢的机制尚待被理解,被综合。在这研究,贡献先锋合拢的 nattokinase propeptide 的必要残余是坚定的。删除分析证明在 propeptide 的保存区域为先锋合拢是重要的。单个地点并且多地点 mutagenesis 研究证实了 Tyr10, Gly13, Gly34,和 Gly35 的角色。在期间上演(i) 并且(ii ) 将先锋合拢, Tyr10 和 Gly13 形成 subtilisin 的接口的部分域。当 Gly34 和 Gly35 与将稳定 propeptide 的结构的一个螺旋连接了时。四倍的翼变化, Y10A/G13A/G34A/G35A,为 propeptide 导致了女伴功能的损失。这个工作为先锋经由第二等的结构和运动参数分析合拢显示出 propeptide 的必要残余。 展开更多
关键词 纳豆激 前肽 折叠 前体 残基 枯草杆菌蛋白酶 多点突变 动力学参数
枯草杆菌蛋白酶嗜热性改造单突变效果评判方法研究 认领
10
作者 夏翾 马帅 +1 位作者 王勤 李晓琴 《生物信息学》 2014年第3期171-178,共8页
对蛋白质进行嗜热性改造是蛋白质工程的主要问题之一,残基突变方法被广泛运用于其中。本文以枯草杆菌蛋白酶(SUBTILISIN BPN')为研究对象,旨在建立评判嗜热性改造效果的方法,选取了有可靠实验资料的9个突变点,运用分子动力学模拟方法... 对蛋白质进行嗜热性改造是蛋白质工程的主要问题之一,残基突变方法被广泛运用于其中。本文以枯草杆菌蛋白酶(SUBTILISIN BPN')为研究对象,旨在建立评判嗜热性改造效果的方法,选取了有可靠实验资料的9个突变点,运用分子动力学模拟方法,在四种不同模拟条件下,对其中的6个突变体和1个野生型蛋白进行了多种参量的对比分析,提取4个特征有效参量,建立了蛋白酶嗜热性改造单突变效果评判方法;利用该方法对其它3个突变效果进行评判,评判结果与实验资料完全吻合,证明该方法可用于枯草杆菌蛋白酶嗜热性改造单突变效果的评判。 展开更多
关键词 枯草杆菌蛋白酶 热稳定性改造 残基突变 分子动力学模拟 评判方法
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枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联合乳果糖治疗肝性脑病疗效分析 认领 被引量:3
11
作者 李新立 徐力力 《中国肝脏病杂志(电子版)》 CAS 2013年第3期18-20,共3页
目的探讨枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联合乳果糖口服溶液治疗肝性脑病患者的临床疗效。方法将160例肝性脑病患者随机分为治疗组(84例)和对照组(76例)。治疗组给予枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联合乳果糖口服溶液口服,对照组给予谷氨酸... 目的探讨枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联合乳果糖口服溶液治疗肝性脑病患者的临床疗效。方法将160例肝性脑病患者随机分为治疗组(84例)和对照组(76例)。治疗组给予枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联合乳果糖口服溶液口服,对照组给予谷氨酸钠、谷氨酸钾静脉输注。两组疗程均为14天。观察患者肝性脑病症状的改善及治疗前后血氨水平。结果治疗组总有效率为83.3%,其症状改善和降低血氨均优于对照组(P=0.044、0.038),差异有统计学意义。结论枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联合乳果糖治疗肝性脑病具有较好的疗效。 展开更多
关键词 肝性脑病 枯草杆菌蛋白酶 乳果糖
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酶促反应的“诱导契合-锁钥”模式 认领 被引量:8
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作者 张子剑 潘荣 +1 位作者 周园 赫荣乔 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第5期418-426,共9页
在酶学理论中,阐释酶识别底物专一性的代表性学说有"锁钥"和"诱导契合"模型等.作者此前研究了蚯蚓蛋白酶Ⅰ(Eisenia fetida proteaseⅠ,EfP-Ⅰ)的底物专一性,提出了"诱导契合-锁钥"反应模式.然而,采用EfP-Ⅰ建立的模式是否具有... 在酶学理论中,阐释酶识别底物专一性的代表性学说有"锁钥"和"诱导契合"模型等.作者此前研究了蚯蚓蛋白酶Ⅰ(Eisenia fetida proteaseⅠ,EfP-Ⅰ)的底物专一性,提出了"诱导契合-锁钥"反应模式.然而,采用EfP-Ⅰ建立的模式是否具有普遍的酶学意义需要进一步论证.以蚯蚓蛋白酶Ⅱ(Eisenia fetida proteaseⅡ,EfP-Ⅱ)、枯草杆菌蛋白酶(subtilisin,Sub)以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)为材料,分别研究了底物反应后酶与其他底物的相互作用.结果显示,经过凝血酶底物chromozym TH(CTH)反应后,蚯蚓蛋白酶Ⅱ和枯草杆菌蛋白酶与尿激酶底物(chromozym U,CU)的反应活性显著降低(P〈0.05),表现出符合"诱导契合-锁钥"反应的模式.蚯蚓蛋白酶Ⅱ和枯草杆菌蛋白酶先与CU反应后,却仍能与CTH反应,但后续不能与CU发生反应,仍然表现为"诱导契合-锁钥"模式.另外,丙酮酸反应后的LDH,对乳酸的反应活力显著降低(P〈0.05),而乳酸反应后的LDH对丙酮酸的活性却无显著变化.这可能是丙酮酸诱导的LDH构象具有相对的刚性,而乳酸诱导的酶构象具有相对柔性所致. 展开更多
关键词 蚯蚓蛋白酶 枯草杆菌蛋白酶 乳酸脱氢 锁钥模型 诱导契合模型 诱导契合-锁钥模型 底物专一性
溶栓新药——纳豆激酶 认领 被引量:2
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作者 马子川 张英锋 范林 《化学世界》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期 126-128,共3页
纳豆激酶(Nattokinase,NK;也称Subtilisin NAT,Subtilisin BSP)是由纳豆菌(Bacilius subtilis var.natto)产生的一种具有强烈溶栓功能的蛋白酶,是一种枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)。1987年日本的须见洋行博士从200余种食品中... 纳豆激酶(Nattokinase,NK;也称Subtilisin NAT,Subtilisin BSP)是由纳豆菌(Bacilius subtilis var.natto)产生的一种具有强烈溶栓功能的蛋白酶,是一种枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)。1987年日本的须见洋行博士从200余种食品中筛选出的有很强溶解纤维蛋白作用的纳豆食品。并从其中提取纯化出这种酶,由于是从纳豆中获得因此称为纳豆激酶。纳豆是一种日本的传统食品,大豆经过蒸煮后,接上纳豆芽孢杆菌(Bicillus subtilis var.natto),经发酵后制成的发酵产物。 展开更多
关键词 纳豆激 溶栓 枯草杆菌蛋白酶 新药 传统食品 纳豆芽孢杆菌 发酵产物 纤维蛋白
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非水相体系中枯草杆菌蛋白酶-表面活性剂离子对的形成条件 认领
14
作者 王树根 谷家栋 +1 位作者 张颖 范雪荣 《化工进展》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1798-1802,1807共6页
枯草杆菌蛋白酶在水相pH值小于其等电点条件下带正电,能与异辛烷中带负电的阴离子表面活性剂二辛基丁二酸磺酸钠(AOT)通过静电引力结合形成离子对进入有机相。详细研究了两相接触方式、水相初始pH值、水相离子强度等因素对酶转移率... 枯草杆菌蛋白酶在水相pH值小于其等电点条件下带正电,能与异辛烷中带负电的阴离子表面活性剂二辛基丁二酸磺酸钠(AOT)通过静电引力结合形成离子对进入有机相。详细研究了两相接触方式、水相初始pH值、水相离子强度等因素对酶转移率的影响。采用120r/min磁力搅拌使两相混合能得到较好的酶转移率,作用时间为6h。水相初始pH值5.0有利于离子对的形成及酶蛋白的转移。水相中CaCl2的加入有利于消除两相混合过程中的乳化;但是过高的CaCl2浓度会减弱酶分子与AOT间的静电引力,不利于酶分子与AOT的结合。水相中酶浓度不变,随着有机相中AOT初始浓度的增加,酶的转移率呈现增长趋势。固定异辛烷中AOT浓度,随着水相中初始酶浓度的增加,转移至有机相中酶量先增加后减少。进入异辛烷的酶分子仍旧保持活性,能催化转酯化反应的进行,但随着反应时间的延长,酶的催化效率出现下降。 展开更多
关键词 疏水性离子对 枯草杆菌蛋白酶 非水相 表面活性剂
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Biosynthesis of selenosubtilisin: A novel way to target selenium into the active site of subtilisin 认领
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作者 LI Jing LIU XiaoMan +6 位作者 JI YueTong QI ZhenHui GE Yan XU JiaYun LIU JunQiu LUO GuiMin SHEN JiaCong 《中国科学通报:英文版》 SCIE CAS 2008年第16期2454-2461,共8页
谷胱甘肽过氧物(GPx, EC1.11.1.9 ) ,重要抗氧化的 selenoenzyme,能对氧化损坏与伴随物谷胱甘肽,从而保护的房间和另外的生物问题催化有害水疗院过氧化物的减小。它作为一种抗氧化剂为机制学习或药理学开发在它的函数的重新设计捕... 谷胱甘肽过氧物(GPx, EC1.11.1.9 ) ,重要抗氧化的 selenoenzyme,能对氧化损坏与伴随物谷胱甘肽,从而保护的房间和另外的生物问题催化有害水疗院过氧化物的减小。它作为一种抗氧化剂为机制学习或药理学开发在它的函数的重新设计捕获可观的兴趣。以便为明确地在酶的活性部位指向和操作的硒开发一般策略,催化联盟者必需品残余 selenocysteine (秒) 成功地是第一使用一个营养缺陷型的表示系统合并到 subtilisin 的催化中心的简历。催化活性和不变的动力学的研究证明 selenosubtilisin 是优秀象 GPx 一样简历催化剂。与化学上修改的方法比较,生合成展出明显的优点:秒能地点直接被合并到酶的活性部位克服化学修正产生的非特性。这研究为明确地在酶的活性部位指向和操作的硒提供重要策略。 展开更多
关键词 生物合成 非金属元素 枯草杆菌蛋白酶
前导序列工程 认领
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作者 李素霞 辛爱洁 袁勤生 《药物生物技术》 CAS CSCD 2008年第3期 219-222,共4页
在传统的蛋白质工程中,为了改变酶的特陛,常采用诱变等方法在蛋白酶结构域中引入突变。在前导序列调节蛋白折叠机制的基础上,文章介绍了一种新的蛋白质工程技术——“前导序列工程”。前导序列工程是指当前导序列发生突变时,同一种... 在传统的蛋白质工程中,为了改变酶的特陛,常采用诱变等方法在蛋白酶结构域中引入突变。在前导序列调节蛋白折叠机制的基础上,文章介绍了一种新的蛋白质工程技术——“前导序列工程”。前导序列工程是指当前导序列发生突变时,同一种多肽链可以折叠成具有不同高级结构、稳定性或特异性改变的构型。前导序列工程不仅是研究蛋白质折叠机理的重要工具,更是创造新型蛋白酶的一种十分有前途的新技术。文章以枯草杆菌蛋白酶为例,介绍了前导序列工程的意义与应用。例如,枯草杆菌蛋白酶在突变前导序列作用下可以得到底物特异性改变的酶,并且可以提高自动处理效率。—个枯草杆菌蛋白酶同族的前导序列可以作为变性枯草杆菌蛋白酶折叠的分子内伴侣帮助其折叠。 展开更多
关键词 前导序列 前导序列工程 分子内伴侣 蛋白折叠 蛋白记忆 枯草杆菌蛋白酶
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鲤鱼酶解液化技术研究 认领 被引量:4
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作者 殷金莲 孙卉 +3 位作者 谢顺虎 杨阳 张红勇 徐怀德 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2007年第6期 60-64,共5页
为了确定木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶酶解鲤鱼的最佳酶解条件及其酶解效果,应用正交试验和对比试验对鲤鱼酶解液化技术进行了研究,并对酶解前后游离氨基酸含量进行了分析。结果表明,胰蛋白酶酶解鲤鱼的最佳酶解条件为:酶用量... 为了确定木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶酶解鲤鱼的最佳酶解条件及其酶解效果,应用正交试验和对比试验对鲤鱼酶解液化技术进行了研究,并对酶解前后游离氨基酸含量进行了分析。结果表明,胰蛋白酶酶解鲤鱼的最佳酶解条件为:酶用量24 g/kg,酶解温度50℃,pH值7.0,在此条件下酶解3 h后氨基态氮含量为59.2 mg/L;枯草杆菌蛋白酶的最佳酶解条件为:酶用量0.16 g/kg,酶解温度45℃,pH值8.0,在此条件下酶解4 h后氨基态氮含量为44.6 mg/L;木瓜蛋白酶的最佳酶解条件为:酶用量10 g/kg,酶解温度60℃,pH值7.0,在此条件下酶解4 h后氨基态氮含量为102.6 mg/L。枯草杆菌蛋白酶酶解鲤鱼后,游离氨基酸含量由185.91 mg/L增加到779.91 mg/L,增加了76.16%。通过对3种蛋白酶在最佳条件下酶解鲤鱼的比较可知,枯草杆菌蛋白酶酶解效果较好。 展开更多
关键词 鲤鱼 蛋白酶 木瓜蛋白酶 枯草杆菌蛋白酶 氨基态氮
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枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解钝化研究 认领 被引量:1
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作者 万娟 陈中 +1 位作者 杨晓泉 周伟伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期 42-45,共4页
研究了枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)对大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)酶解活性的影响。实验在50℃,pH7.5条件下反应1h,并以BAPNA为底物,采用改进的方法测定枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解钝化程度,用SDS-PAGE方法和分子排... 研究了枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)对大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)酶解活性的影响。实验在50℃,pH7.5条件下反应1h,并以BAPNA为底物,采用改进的方法测定枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解钝化程度,用SDS-PAGE方法和分子排阻色谱法研究其蛋白酶钝化敏感性。结果证明,枯草杆菌蛋白酶可以水解大部分的抑制剂,并通过SDS-PAGE进一步证实了比色法得出的结论。而由分子排阻色谱图可以分析得出抑制剂经枯草杆菌蛋白酶酶解后,活性降低。分析认为,可能是由于抑制剂中二硫键被打断使得其结构发生改变,同时生成大量复杂的小分子多肽物质。因此,可以推断大豆胰蛋白酶抑制剂的稳定性与二硫键的存在有关。 展开更多
关键词 大豆胰蛋白酶抑制剂 枯草杆菌蛋白酶 水解 钝化
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预热处理对SPI水解过程多肽稳定性的影响 认领
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作者 于泓鹏 吴克刚 柴向华 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期 32-34,共3页
研究了预热处理对大豆分离蛋白(SPI)水解多肽溶液稳定性的影响.采用浊度法监测聚集过程,结果表明预热处理后的SPI蛋白在水解过程的聚集速率明显升高,但过度的热处理不利于酶促聚集速率进一步提高.采用差示扫描量热法分析其热力学性质... 研究了预热处理对大豆分离蛋白(SPI)水解多肽溶液稳定性的影响.采用浊度法监测聚集过程,结果表明预热处理后的SPI蛋白在水解过程的聚集速率明显升高,但过度的热处理不利于酶促聚集速率进一步提高.采用差示扫描量热法分析其热力学性质,结果显示11S经90℃热处理解聚并和解聚的7S通过疏水相互作用形成聚集物,聚集物的形成一方面导致水解液浊度的增大,另一方面减少了酶反应位点,不利于酶的作用. 展开更多
关键词 大豆分离蛋白 枯草杆菌蛋白酶 聚集 稳定性
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Reverse micelles extraction of nattokinase: From model system to real system 认领 被引量:2
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作者 LIU Junguo XING Jianmin +1 位作者 CHANG Tianshi LIU Huizhou 《中国科学通报:英文版》 SCIE CAS 2006年第7期796-801,共6页
Nattokinase 是新奇 fibrinolytic 酶,它对 SubtilisinCarlsberg 相应。在这篇论文, Subtilisin Carlsberg 作为 nattokinase 的模型蛋白质被拿。Effectsof 酸碱值,离子强度, Subtilisin Carlsberg withAOT/isooctane 颠倒微粒系统... Nattokinase 是新奇 fibrinolytic 酶,它对 SubtilisinCarlsberg 相应。在这篇论文, Subtilisin Carlsberg 作为 nattokinase 的模型蛋白质被拿。Effectsof 酸碱值,离子强度, Subtilisin Carlsberg withAOT/isooctane 颠倒微粒系统的抽取上的 isopropanol 的集中被调查。进一步,从发酵肉汤的 nattokinase 的反向的微粒抽取的过程被学习。由作为提炼之物拿反向的微粒 ofAOT/isooctane 执行一个完整的抽取周期,在发酵肉汤的 nattokinase 的大约百分之八十项全部的活动能被恢复,纯化因素是大约 2.5,这被发现。相应蛋白质能相当被用作目标蛋白质的模型蛋白质。 展开更多
关键词 反转胶束提取法 枯草杆菌蛋白酶 蛋白质净化 模拟系统 真实系统 纳豆激
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