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情系科学春天——访湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室谭蔚泓团队
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作者 蒋晶丽 符婷 《高科技与产业化》 2019年第2期14-19,共6页
近年来,随着人们生活品质的快速提升,对于应用安全的需求更为迫切。光谱分析应用逐渐向生物医学、环境生态、社会安全、国防建设等领域拓展。中国科学院院士、湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室主任谭蔚泓教授带领团队在光谱... 近年来,随着人们生活品质的快速提升,对于应用安全的需求更为迫切。光谱分析应用逐渐向生物医学、环境生态、社会安全、国防建设等领域拓展。中国科学院院士、湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室主任谭蔚泓教授带领团队在光谱化学分析领域做出了开创性的贡献,特别是在针对癌症的分子诊疗方面取得了突破性进展。2018年,谭蔚泓教授又收获了两项重量级的奖项——ACS光谱化学分析奖和何梁何利基金科学与技术进步奖。 展开更多
关键词 谭蔚泓 光谱化学分析 大学化学 核酸 核酸适配 功能核酸 生物传感 计量学 国家重点实验室
基于核酸适配体的荧光传感器用于检测双酚A 预览
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作者 何珊 陈卓亨 +2 位作者 赵静怡 马小明 李勋 《赣南师范大学学报》 2019年第3期65-68,共4页
双酚A(Biphenol A,BPA)是一类酚类环境雌激素,在塑料制品中广泛存在,长期接触BPA会对人体造成一系列的危害.基于核酸适配体与目标物之间的特异性识别等特点,结合SYBR Green I荧光染料在单双链DNA之间荧光信号的变化,构建了一种简单快速... 双酚A(Biphenol A,BPA)是一类酚类环境雌激素,在塑料制品中广泛存在,长期接触BPA会对人体造成一系列的危害.基于核酸适配体与目标物之间的特异性识别等特点,结合SYBR Green I荧光染料在单双链DNA之间荧光信号的变化,构建了一种简单快速、灵敏和高选择性的适配体传感器用于BPA分子的检测.实验结果表明,在优化条件下,当BPA的浓度在10 nM-10~5 nM范围内时,荧光信号差值与目标物浓度的对数值呈良好的线性关系,最低检测限(LOD)可达3.261 nM. 展开更多
关键词 双酚A 核酸适配 荧光 适配传感器
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DNA纳米技术在凝血酶适配体分子设计中的应用进展
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作者 唐林林 黄承志 +1 位作者 左华 毛诚德 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1018-1026,共9页
DNA纳米技术是纳米生物技术的一个重要研究领域,近年来发展迅猛.通过合理的设计,利用DNA或其他核酸的分子性质构建出可操控的新型纳米尺度的结构或机器,在生物医学应用领域中有广泛应用.本文介绍了利用DNA纳米技术对凝血酶适配体结构合... DNA纳米技术是纳米生物技术的一个重要研究领域,近年来发展迅猛.通过合理的设计,利用DNA或其他核酸的分子性质构建出可操控的新型纳米尺度的结构或机器,在生物医学应用领域中有广泛应用.本文介绍了利用DNA纳米技术对凝血酶适配体结构合理设计的相关进展. 展开更多
关键词 DNA纳米技术 凝血酶 可逆调控 核酸适配 二价适配
子体铅诱导T30695构象改变N-甲基卟啉二丙酸Ⅸ(NMM )荧光探针检测氡 预览
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作者 刘红文 刘士蒙 +3 位作者 李诗雅 杨桂英 刘然 吕昌银 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期643-648,共6页
氡衰变形成稳定的子体铅只需约3.82d,且衰变产生的210Pb非常稳定,其半衰期为21年。基于氡辐射衰变最终形成稳定的子体铅的特点,探讨了子体铅诱导富鸟嘌呤核苷酸序列形成G-四链体的特性,建立了一种基于子体铅诱导T30695构象改变的荧光传... 氡衰变形成稳定的子体铅只需约3.82d,且衰变产生的210Pb非常稳定,其半衰期为21年。基于氡辐射衰变最终形成稳定的子体铅的特点,探讨了子体铅诱导富鸟嘌呤核苷酸序列形成G-四链体的特性,建立了一种基于子体铅诱导T30695构象改变的荧光传感器。氡的子体铅诱导T30695形成的G-四链体结构能与N-甲基卟啉二丙酸Ⅸ(NMM)荧光染料结合发出较强荧光,在一定范围内,荧光强度与Pb2+的浓度和氡累积辐射剂量浓度成正相关。Pb2+离子浓度在5.13×10^-9~1.25×10^-7mol/L范围内与体系的ΔIF值呈现良好的线性关系,回归方程为ΔIF=77.30+5.05c,r=0.9950,对铅的检出限为1.54×10^-9mol/L,对氡的检出限为1.07×10^4Bq·h/m^3。 展开更多
关键词 核酸适配 G-四链 构象转变 荧光传感
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基于核酸适配体的生物分析新方法研究进展
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作者 季兆洁 王雷 +3 位作者 陈云娜 张文静 王飘飘 陈卫东 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第7期1387-1391,共5页
核酸适配体是从随机文库中采用SELEX技术筛选所得的单链短链寡核苷酸片段(通常为15-80个ss DNA或ss RNA)。其能够折叠形成独特稳定的三维结构,通过静电相互作用,氢键,范德华力,碱堆叠或多种作用力组合特异性地与多种靶标结合。适配体因... 核酸适配体是从随机文库中采用SELEX技术筛选所得的单链短链寡核苷酸片段(通常为15-80个ss DNA或ss RNA)。其能够折叠形成独特稳定的三维结构,通过静电相互作用,氢键,范德华力,碱堆叠或多种作用力组合特异性地与多种靶标结合。适配体因具有构象变化能力而被用作生物分析中的理想识别配体。目前,基于适配体的生物分析新方法得到广泛研究,并用于蛋白多肽类药物分析、疾病标志物诊断、外泌体检测、循环肿瘤细胞检测和病毒检测等方面。本文综述了核酸适配体用于生物分析方法开发的最新进展,比较和讨论不同分析方法,并对基于适配体的生物分析新方法提出了设想和展望,为开发新的生物分析方法和检测技术提供了思路和借鉴。 展开更多
关键词 核酸适配 生物分析 纳米金 G-四链
毛细管区带电泳技术研究龙血竭有效单体与核酸适配体及凝血酶之间的相互作用 预览
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作者 李玉娟 孙欣欣 +2 位作者 李盼盼 欧婉露 屈锋 《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期106-110,共5页
利用毛细管区带电泳技术(CZE)研究5个龙血竭有效单体与牛凝血酶(B-Thr)、29碱基凝血酶核酸适配体(Apt29)之间的相互作用.电泳条件为有效长度是40cm的非涂层石英毛细管,气压进样3.45kPa,进样时间5s,分离电压+15kV,分离温度15℃,检测波长... 利用毛细管区带电泳技术(CZE)研究5个龙血竭有效单体与牛凝血酶(B-Thr)、29碱基凝血酶核酸适配体(Apt29)之间的相互作用.电泳条件为有效长度是40cm的非涂层石英毛细管,气压进样3.45kPa,进样时间5s,分离电压+15kV,分离温度15℃,检测波长分别为214nm(牛凝血酶体系)和330nm(核酸适配体体系).结果表明,龙血素A和B-Thr之间的结合常数Kb为4.73×10^4L/mol,白藜芦醇、龙血素B、7,4′二羟基黄酮、龙血素C与B-Thr没有显著结合;龙血素B和7,4′二羟基黄酮与核酸适配体的结合常数Kb分别为1.98×10^4,1.83×10^4L/mol,白藜芦醇、龙血素A、龙血素C与核酸适配体之间没有表现出明显的结合现象.本文结果对进一步研究龙血竭在凝血酶上的潜在结合位点,以及核酸适配体能否向凝血酶靶向转运龙血竭,提供了科学数据支持. 展开更多
关键词 龙血竭 有效单 核酸适配 凝血酶 毛细管区带电泳
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miRNA-17核酸适配体阻断致癌性非编码RNA突变抑制神经胶质瘤细胞增殖 预览
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作者 林莉 王帮华 +2 位作者 张晓雯 胡美纯 张涛 《湖北科技学院学报:医学版》 2019年第2期102-104,共3页
目的探讨miRNA-17(miR-17)核酸适配体对神经胶质瘤的潜在治疗作用。方法设计合成miR-17核酸适配体(miR-17-apt)并转染12h后检测其对miR-17的阻断作用。采用神经胶质瘤细胞株U251、 SGH44、H4及BT-325作为体外模型,转染miR-17-apt 48h后... 目的探讨miRNA-17(miR-17)核酸适配体对神经胶质瘤的潜在治疗作用。方法设计合成miR-17核酸适配体(miR-17-apt)并转染12h后检测其对miR-17的阻断作用。采用神经胶质瘤细胞株U251、 SGH44、H4及BT-325作为体外模型,转染miR-17-apt 48h后用噻唑蓝实验检测细胞增殖。结果 400nmol/L的miR-17-apt可显著抑制miR-17基因的表达水平并具有广谱的抑制多种神经胶质瘤细胞增殖的作用。结论 miR-17-apt可被进一步开发为抗神经胶质瘤基因治疗的潜在载体。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 miRNA-17 核酸适配 肿瘤基因治疗
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基于核酸适配体功能化石墨纳米颗粒荧光探针的17β-雌二醇快速检测方法
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作者 朴云仙 祁小丽 +4 位作者 王湘 康博泉 史玉玺 胡慧 杨悦锁 《吉林大学学报:地球科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1137-1144,共8页
为构建一种能够简单、快速、特异性检测复杂环境水体中雌激素污染的方法,利用石墨纳米颗粒作为荧光淬灭剂、核酸适配体作为识别元素、1-芘丁酸N-羟基琥珀酰亚胺酯作为异型双功能交联剂,构建了一种新型纳米荧光探针;并探究了构建荧光探... 为构建一种能够简单、快速、特异性检测复杂环境水体中雌激素污染的方法,利用石墨纳米颗粒作为荧光淬灭剂、核酸适配体作为识别元素、1-芘丁酸N-羟基琥珀酰亚胺酯作为异型双功能交联剂,构建了一种新型纳米荧光探针;并探究了构建荧光探针时核酸适配体初始投加量和荧光探针投加量对雌二醇检测的影响及最佳实验条件下检测雌二醇的效果和特异性。实验结果表明:核酸适配体能成功修饰在石墨纳米颗粒表面形成的稳定荧光探针;构建荧光探针时核酸适配体的最佳初始投加量为1.0μmol/L;检测雌二醇时,荧光探针的最佳投加量为4μg/mL;最佳实验条件下,相对荧光强度与雌二醇的质量浓度在50~800ng/mL范围内成正比,最低检测限为34.5ng/mL,且该荧光探针能实现对雌二醇的简单、快速、特异性检测。 展开更多
关键词 石墨纳米颗粒 核酸适配 17Β-雌二醇 探针 快速检测
基于核酸适配体的PCR法检测溶藻弧菌及其灭活菌 预览
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作者 汤学敏 林文燕 +5 位作者 鄢庆枇 刘慧敏 彭英林 赵铨 林旭俊 郑江 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期391-396,共6页
溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)分布广,数量多,发病率高,是水产养殖中常见的条件致病菌,而对溶藻弧菌进行快速准确的识别鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体,因为具有较高的亲和特异性,在微生物的识别鉴定方面展现出了巨大的优... 溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)分布广,数量多,发病率高,是水产养殖中常见的条件致病菌,而对溶藻弧菌进行快速准确的识别鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体,因为具有较高的亲和特异性,在微生物的识别鉴定方面展现出了巨大的优势。本文利用核酸适配体和适配体筛选产物,通过结合、洗涤、加热分离、PCR扩增以及电泳检测等步骤,对溶藻弧菌进行了检测鉴定。结果表明,适配体和筛选产物都能对溶藻弧菌及其灭活菌进行较好的识别鉴定,适配体筛选产物对溶藻弧菌的检测下限为10~3cfu/mL,而对其灭活菌的检测下限为10~2cfu/mL,适配体对溶藻弧菌及其灭活菌的检测下限都可达到10 cfu/mL。该方法对溶藻弧菌有较好的亲和特异性,并能较好地区分溶藻弧菌与哈维氏弧菌等水产常见病原菌,在水产病害的检测中显示了较好的应用前景。 展开更多
关键词 核酸适配 溶藻弧菌 PCR 灭活 检测
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百草枯核酸适配体的筛选及其比色检测研究 预览
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作者 冉旭东 吴远根 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期567-575,共9页
核酸适配体具有类似蛋白抗体的性质,在靶标特异性识别与检测中引起越来越广泛的关注。小分子物质通常与环境污染和人类健康密切相关,然而小分子物质与核酸文库在性质上差异较小,在筛选过程中没有足够的活性位点,难以固定,因而其核酸适... 核酸适配体具有类似蛋白抗体的性质,在靶标特异性识别与检测中引起越来越广泛的关注。小分子物质通常与环境污染和人类健康密切相关,然而小分子物质与核酸文库在性质上差异较小,在筛选过程中没有足够的活性位点,难以固定,因而其核酸适配体筛选难度更大。本研究采用体外合成一条生物素修饰的碱基序列,通过氢键与随机文库3′-末端进行互补配对,将其固定在链霉亲和素修饰的纳米磁珠上。随后,加入不同浓度的百草枯靶分子孵育,洗脱得到百草枯特异性的亲和性ssDNA,对其进行非对称PCR扩增后,得到下一轮筛选所需的富集ssDNA库。经过9轮筛选后,将所得亲和性ssDNA进行克隆测序,最终得到15条百草枯的亲和ssDNA序列。对亲和性序列进行聚类分析和二级结构预测,再根据同源性等条件从中筛选出6条ssDNA序列进行亲和力测定。结果表明,PQ-15序列对百草枯的亲和力最高,解离常数(K_d)为(54±4) nmol/L。最后,利用PQ-15核酸适配体作为百草枯的识别分子,以阳离子化合物聚集的纳米金作为传感信号,建立了基于核酸适配体识别的百草枯农药比色检测方法,检出限为25.2 nmol/L,其它竞争性分子对百草枯检测无明显干扰,实际样品中百草枯的加标回收率为91.1%~99.6%。 展开更多
关键词 核酸适配 百草枯 筛选 比色检测 纳米金
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核酸适配体分子信标探针在肿瘤研究中的应用进展 预览
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作者 黄晨 李婉明 《癌症进展》 2019年第4期373-375,414共4页
核酸适配体是从随机寡核苷酸文库中筛选出来,可以高特异性和高亲和力与靶点结合的寡核苷酸序列,具有靶点范围广、相对分子质量小、化学稳定性高、易于合成和修饰等优点。分子信标是一种具有特殊发夹结构的新型荧光探针,具有背景信号低... 核酸适配体是从随机寡核苷酸文库中筛选出来,可以高特异性和高亲和力与靶点结合的寡核苷酸序列,具有靶点范围广、相对分子质量小、化学稳定性高、易于合成和修饰等优点。分子信标是一种具有特殊发夹结构的新型荧光探针,具有背景信号低、灵敏度高、特异性识别强、操作简单以及不必与未反应的探针分离即可实时检测等优点。将核酸适配体的分子识别特性和分子信标的光学检测性能相结合,在生命科学研究领域有着良好的应用前景。但核酸适配体的应用研究仍处于初级阶段,还有许多问题需要解决,为解决这些问题,进一步拓展核酸适配体分子信标在生命科学领域,特别是肿瘤领域的应用,需要科学工作者不断的努力和突破。同时随着核酸适配体的发展,越来越多与不同靶点特异性结合的核酸适配体将被筛选出来,并被应用于生命科学研究领域。本文主要对以核酸适配体为基础的分子信标探针在肿瘤研究中的应用进展进行综述。 展开更多
关键词 核酸适配 SELEX技术 分子信标 肿瘤研究 肿瘤监测
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分子模拟指导核酸适配体文库设计
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作者 雷云霞 李招发 林俊生 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期251-258,共8页
核酸适配体是利用配体指数富集的系统进化技术(SELEX)从随机文库中筛选获得一段有功能的单链寡核苷酸。但因筛选过程中的文库选择、洗涤次数、分离效率、缓冲液离子含量和pH值等多种因素的影响,迄今所报道的亲和力与特异性都很高的核酸... 核酸适配体是利用配体指数富集的系统进化技术(SELEX)从随机文库中筛选获得一段有功能的单链寡核苷酸。但因筛选过程中的文库选择、洗涤次数、分离效率、缓冲液离子含量和pH值等多种因素的影响,迄今所报道的亲和力与特异性都很高的核酸适配体为数不多。初始文库是核酸适配体筛选的源头,作为SELEX技术的根本,其设计是否合理直接影响到筛选的成败和效率。分子模拟能以核酸适配体文库为主体,计算机为主要工具,发展多种结构模拟与分析工具,辅助核酸适配体文库的合理设计。本文综述了现阶段利用分子模拟进行核酸适配体初始文库设计的相关方法,希望能为从源头上提高核酸适配体筛选的成功率提供线索。 展开更多
关键词 核酸适配 指数富集的系统进化技术(SELEX) 文库设计 分子模拟 分子对接
基于cell-SELEX技术筛选高转移胃癌细胞系HGC-27核酸适配体 预览
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作者 刘涛 王进军 +4 位作者 方晓娜 何磊 杨伟丽 罗昭锋 王亚雷 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第6期933-937,共5页
目的筛选针对高转移胃癌细胞(HGC-27)的核酸适配体。方法以HGC-27为靶细胞,以AGS为反筛细胞,利用Cell-SELEX技术逐轮次筛选,从文库中挑选能与HGC-27结合的核酸适配体LW-25。用流式细胞术检测核酸适配体测富集程度,核酸适配体与HGC-27的... 目的筛选针对高转移胃癌细胞(HGC-27)的核酸适配体。方法以HGC-27为靶细胞,以AGS为反筛细胞,利用Cell-SELEX技术逐轮次筛选,从文库中挑选能与HGC-27结合的核酸适配体LW-25。用流式细胞术检测核酸适配体测富集程度,核酸适配体与HGC-27的亲和力及特异性。结果流式细胞仪显示随着筛选轮数的增加,次级文库与靶细胞结合的荧光强度增强。从次级文库中成功挑选出一条能与HGC-27结合的核酸适配体LW-25。并且LW-25能特异性识别HGC-27。胰蛋白酶处理HGC-27后,LW-25与HGC-27的结合能力较处理前明显下降。结论核酸适配体LW-25能特异性识别HGC-27,是潜在具有诊断胃癌转移的分子探针。 展开更多
关键词 核酸适配 胃癌 转移
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一种核酸适配体高敏检测方法的建立及应用评价 预览
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作者 陈连娣 朱雯婷 +5 位作者 李振华 袁中文 陈亦清 林彩燕 程媛媛 严鹏科 《中南医学科学杂志》 CAS 2019年第2期198-201,共4页
本文建立一种基于免疫印迹的核酸适配体高敏定量分析的检测方法,并探讨其在适配体药物靶向性研究中的应用价值。首先用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行核酸适配体的分离,然后利用电转的方法将凝胶上的核酸适配体转移至PVDF膜上,先后孵育Rabbit A... 本文建立一种基于免疫印迹的核酸适配体高敏定量分析的检测方法,并探讨其在适配体药物靶向性研究中的应用价值。首先用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行核酸适配体的分离,然后利用电转的方法将凝胶上的核酸适配体转移至PVDF膜上,先后孵育Rabbit Anti-Biotin和HRP-Streptavidin抗体,最后利用化学发光仪进行成像。结果显示核酸适配体可以通过该方法进行定量检测分析,且该方法检测灵敏度高,能够识别荧光染料法检测不到的浓度范围。此外,该方法只识别被生物素修饰的核酸适配体,特异性强。结果提示,核酸免疫印记法可以作为核酸适配体药物靶向性研究的一个定量检测手段。 展开更多
关键词 核酸适配 免疫印记 荧光染色 生物素-亲和素系统
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肝癌不同靶标核酸适配体的筛选研究进展 预览
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作者 袁红霞 王维君 +3 位作者 田彩平 毛爱红 何科基 廖世奇 《西北国防医学杂志》 CAS 2019年第7期397-402,共6页
早发现、早治疗是改善肝癌患者预后和降低病死率的关键。筛选具有高灵敏度和高特异性的分子识别探针对肝癌的早期诊断、预警、转移和疗效评估等具有重要意义。利用体外指数富集配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exp... 早发现、早治疗是改善肝癌患者预后和降低病死率的关键。筛选具有高灵敏度和高特异性的分子识别探针对肝癌的早期诊断、预警、转移和疗效评估等具有重要意义。利用体外指数富集配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选获得的核酸适配体,能够高特异性、高亲和力地与多种靶标(包括小分子、蛋白质、细胞、组织、微生物等)结合,为肝癌的特异识别、早期诊断、病理分型提供了有效方法。本研究主要阐述以肝癌细胞系、肝癌血清、临床肝癌组织为靶标的核酸适配体的筛选研究进展。 展开更多
关键词 核酸适配 肝癌 筛选靶标 指数富集配系统进化技术
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核酸适配体功能化的脂质体负载上转换颗粒用于肿瘤靶向成像
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作者 肖射华 梁玲 +2 位作者 李丹 苏元野 袁荃 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1067-1075,共9页
核酸适配体是一类能够与靶标物高特异性地结合的寡核苷酸序列,可作用于金属离子、小分子化合物、蛋白质及细胞等.由于对靶标物具有高选择性,核酸适配体可赋予递送体系靶向特异性,同时增加递送药物及成像试剂在肿瘤组织内的富集,在分子... 核酸适配体是一类能够与靶标物高特异性地结合的寡核苷酸序列,可作用于金属离子、小分子化合物、蛋白质及细胞等.由于对靶标物具有高选择性,核酸适配体可赋予递送体系靶向特异性,同时增加递送药物及成像试剂在肿瘤组织内的富集,在分子诊断和体内靶向治疗等生物医学领域具有很大的应用潜能.本文基于聚丙烯酸(PAA)修饰的NaYF4:Yb/Er/Nd@NaYF4:Nd上转换纳米颗粒(UCNPs-PAA),将其封装于AS1411核酸适配体修饰的脂质体(Apt-Lip)中,构建了一种近红外(NIR)光激发的光学成像及靶向识别的UCNPs@Apt-Lip多功能纳米平台.透射电子显微镜、水合粒径、Zeta电势及共聚焦实验图表明成功制备了具有独特的核@空腔@壳构造的纳米体系.流式细胞仪和靶向细胞荧光共聚焦成像实验结果表明UCNPs@Apt-Lip材料对人乳腺癌细胞具有很强的靶向识别及荧光成像的能力.该多功能纳米平台具有上转换发光成像的可动核心,中空内腔和靶向壳层等独特性能,有望推动其在光催化纳米反应器、药物输送、肿瘤治疗等领域的发展. 展开更多
关键词 上转换纳米颗粒 核酸适配 脂质 肿瘤靶向 荧光成像
雌激素受体核酸适配体在乳腺癌免疫组织化学检测中的应用
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作者 何煦 陈杰 +4 位作者 叶尚勉 董丹丹 李科 周陶友 赵连三 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期385-389,共5页
目的筛选出能应用于乳腺癌免疫组织化学检测的雌激素受体(ER)核酸.方法制备ER蛋白,用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术筛选出对ER具有高亲和力和特异性的核酸适配体.采用配体-受体相互反应实验来测定合成的ER适配体复合物的亲和力,用... 目的筛选出能应用于乳腺癌免疫组织化学检测的雌激素受体(ER)核酸.方法制备ER蛋白,用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术筛选出对ER具有高亲和力和特异性的核酸适配体.采用配体-受体相互反应实验来测定合成的ER适配体复合物的亲和力,用生物素化ER适配体和ER单克隆抗体分别作为一抗对105例乳腺癌组织进行免疫组化染色,以检测合成的ER适配体在癌组织中的特异性表达.用Kappa检验进行一致性检验.结果线性回归法计算获得生物素化适配体与ER复合物的解离常数Kd值为(0.34±0.05)nmol/L(n=3,r=0.989),最大结合力(Bmax)为769.23fmol/(mg prot·nmol^-1·L^-1).实验结果表明,分别用生物素化ER适配体和ER单克隆抗体分别作为一抗进行免疫组化染色的结果具有高度一致性.其中ER阳性和阴性样本n=105,kappa值=0.943,95%可信区间=0.879~1.006,P<0.05;而ER弱阳性和中度/强表达样本n=75,kappa值=0.805,95%可信区间=0.642~0.967,P<0.05.进一步观察发现,ER适配体和ER抗体能使乳腺癌组织同一部位出现阳性表达,而阴性对照组均无表达.2例子宫内膜癌用生物素化ER适配体检测,癌细胞ER表达均为阳性.结论我们合成的ER适配体在体外能高度结合ER,ER适配体和ER抗体都能检测乳腺癌组织中ER的特异性表达. 展开更多
关键词 雌激素受 核酸适配 乳腺癌 免疫组织化学
基于核酸适配体的上转换荧光纸基传感器用于测定茶水中的黄曲霉毒素B1
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作者 金碧瑞 杨叶欣 +2 位作者 卢天健 徐峰 林敏 《中国科学:化学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期353-359,共7页
黄曲霉毒素大量存在于花生、玉米、稻米、大豆、小麦和茶叶中,其毒性、致癌力在霉菌毒素中都居首位,是对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素.本研究使用上转换纳米材料为荧光标记物,在其表面修饰可特异性地结合黄曲霉毒素B1的核酸适配... 黄曲霉毒素大量存在于花生、玉米、稻米、大豆、小麦和茶叶中,其毒性、致癌力在霉菌毒素中都居首位,是对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素.本研究使用上转换纳米材料为荧光标记物,在其表面修饰可特异性地结合黄曲霉毒素B1的核酸适配体,构建出一种基于竞争法的荧光侧流试纸检测技术.该技术可实现对黄曲霉毒素B1的快速检测,在0.1~100 ng/mL的浓度范围内具有良好的线性度,最低检出限为0.03 ng/mL,并实现了对实际茶水样品的定量检测.该方法灵敏度高、特异性强、适用于现场的快速检测,具有良好的经济价值和应用前景. 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 上转换纳米颗粒 核酸适配 侧流试纸
基于磁性纳米材料和适配体的荧光传感器检测牛奶中黄曲霉毒素M1 预览
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作者 郭婷 林淑凤 +2 位作者 马良 谭红霞 张宇昊 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期218-223,共6页
根据荧光共振能量转移原理,利用磁性纳米材料的磁性分离技术及荧光猝灭能力,构建了基于磁性纳米材料和适配体的荧光传感器,用于高灵敏检测牛奶中黄曲霉毒素M 1(aflatoxin M 1, AFM 1)。标记羧基荧光素(carboxy-fluorescein, FAM)的适配... 根据荧光共振能量转移原理,利用磁性纳米材料的磁性分离技术及荧光猝灭能力,构建了基于磁性纳米材料和适配体的荧光传感器,用于高灵敏检测牛奶中黄曲霉毒素M 1(aflatoxin M 1, AFM 1)。标记羧基荧光素(carboxy-fluorescein, FAM)的适配体通过静电作用吸附在Fe 3O 4磁性纳米颗粒表面,并与Fe 3O 4发生能量共振转移,导致荧光猝灭;当体系中存在AFM 1时,适配体与AFM 1特异性识别并形成折叠结构,适配体从Fe 3O 4磁性纳米颗粒表面脱附,使得荧光信号恢复,据此可实现对FAM 1的定量检测。该研究对所制备的Fe 3O 4磁性纳米颗粒进行表征,透射电镜结果表明,Fe 3O 4磁性纳米颗粒粒径在10~15 nm。在优化的实验条件下,该传感器的线性范围为0.05~0.70 μg/L,检测限为0.02 μg/L。利用荧光传感器检测牛奶中AFM 1的回收率为82.5%~102.3%。 展开更多
关键词 核酸适配 黄曲霉毒素M1 Fe3O4磁性纳米颗粒 荧光传感器
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雌激素受体核酸适配体抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖
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作者 何煦 陈杰 +2 位作者 叶尚勉 董丹丹 李科 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期83-90,共8页
目的 :筛选雌激素受体(estrogen receptor,ER)核酸适配体,并探讨其对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。方法 :采用亲和层析技术制备ER蛋白,并用指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,S... 目的 :筛选雌激素受体(estrogen receptor,ER)核酸适配体,并探讨其对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。方法 :采用亲和层析技术制备ER蛋白,并用指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选出ER核酸适配体。采用Scatchard作图法分析ER蛋白和ER核酸适配体的结合亲和力。MTT法检测不同浓度的ER核酸适配体、他莫昔芬和氟维司群处理24、48和72 h后对MCF-7细胞增殖的影响以及不同浓度的雌二醇单药或联合ER核酸适配体、他莫昔芬和氟维司群作用于MCF-7细胞72h后对其增殖的影响。MTT法检测不同浓度的ER核酸适配体对人正常乳腺上皮HMEC细胞增殖的影响。结果 :合成的ER核酸适配体在体外能高度结合ER。不同浓度的ER核酸适配体(10、100和1 000μmol/L)作用72h时,MCF-7细胞的存活率分别为72%、66%和19%,与阴性对照DNA相比,差异均有统计学意义(P值均<0.05);在相同剂量他莫昔芬作用下MCF-7细胞的存活率分别为86%、82%和40%(P值均<0.05),氟维司群作用下MCF-7细胞的存活率分别为53%、9%和4%(P值均<0.05);ER核酸适配体对MCF-7细胞的抑制作用强于他莫昔芬,但弱于氟维司群。ER核酸适配体能显著抑制雌二醇诱导的MCF-7细胞增殖(P <0.05)。ER核酸适配体对人正常乳腺上皮HMEC细胞的增殖无抑制作用(P> 0.05)。结论 :ER核酸适配体可作为ER拮抗剂,其对MCF-7细胞增殖的抑制作用为对ER的选择性拮抗作用,有望用于乳腺癌的治疗。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 雌激素受 雌激素反应元件 核酸适配
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