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水蛭治疗下肢闭塞性动脉硬化症的研究进展 预览
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作者 岳昆 曾祥雨 +1 位作者 张洪霞 刘春梅 《中国中医药现代远程教育》 2019年第7期127-129,共3页
下肢闭塞性动脉硬化症是临床常见的难治性周围血管疾病,已经逐渐成为危害中老年生活质量和生命安全的主要疾病之一。水蛭具有破血通经,逐瘀消癓的功效。水蛭中的活性物质具有抗凝、抗血小板聚集、抑制血栓形成、抗纤维化、改善肾功能、... 下肢闭塞性动脉硬化症是临床常见的难治性周围血管疾病,已经逐渐成为危害中老年生活质量和生命安全的主要疾病之一。水蛭具有破血通经,逐瘀消癓的功效。水蛭中的活性物质具有抗凝、抗血小板聚集、抑制血栓形成、抗纤维化、改善肾功能、降脂、抗肿瘤、抗炎等作用,临床应用范围广泛,主要应用于心脑血管、肿瘤、肾病、男科、周围血管病等疾病。本文重点对水蛭治疗下肢闭塞性动脉硬化症的抗凝、抗栓、抑制血小板聚集、降低血脂、保护血管内皮细胞、抗血管平滑肌增生及抗炎、促进创面愈合等作用的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 水蛭 水蛭 下肢闭塞性动脉硬化症 综述 脉痹
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新蛭素和人IgG-Fc融合蛋白的表达纯化和功能评价 预览
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作者 吴祖泽 汪坤 +4 位作者 李世崇 董晓娜 窦桂芳 葛志强 靳继德 《天津大学学报:自然科学与工程技术版》 CSCD 北大核心 2019年第2期136-142,共7页
新蛭素(EH)具有很好的抗凝血效果,但由于半衰期短限制了其在临床上的推广和应用.为延长EH的半衰期,制备人IgG-Fc和EH的融合蛋白,并对其活性和药代动力学进行初步研究.将合成的Fc-EH和Fc-L-EH融合基因克隆至表达载体pcDNAHC上,再将重组... 新蛭素(EH)具有很好的抗凝血效果,但由于半衰期短限制了其在临床上的推广和应用.为延长EH的半衰期,制备人IgG-Fc和EH的融合蛋白,并对其活性和药代动力学进行初步研究.将合成的Fc-EH和Fc-L-EH融合基因克隆至表达载体pcDNAHC上,再将重组表达载体转染CHO细胞.蛋白A亲和柱纯化融合蛋白,用SDS-PAGE和WesternBlot鉴定蛋白表达情况,质谱法检测蛋白的分子质量和C端序列,体外凝块法和大鼠颈静脉血栓模型分别验证融合蛋白的体外抗凝活性和体内抗栓效果,应用化学发光免疫法检测融合蛋白半衰期.结果表明,成功构建了pcDNAHC-Fc-EH和pcDNAHC-Fc-L-EH两个重组表达载体,融合蛋白Fc-EH和Fc-L-EH分子质量分别为68476,u和70542,u,蛋白的C端序列正确,Fc-EH和Fc-L-EH活性分别为256,ATU/mg和64,ATU/mg.大鼠颈静脉血栓实验表明,Fc-EH具有抗血栓作用,体内消除半衰期为39.4,h.融合蛋白Fc-EH能延长EH体内半衰期,为融合蛋白的进一步研究奠定了基础. 展开更多
关键词 水蛭 新蛭 抗凝活性 半衰期 FC融合蛋白
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水蛭素生物学特性的研究进展 预览
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作者 张子文 王尉 +2 位作者 刘胜男 张舒宁 张耀方 《生物化工》 2019年第1期156-157,164共3页
水蛭素是由水蛭唾液腺分泌的一种酸性多肽,能够从一定程度上影响血液凝固和促进纤溶,是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂,在治疗血栓类疾病和心血管疾病具有很好疗效,同时还有良好的抗炎、抗肿瘤作用。本文对水蛭素的结构和作... 水蛭素是由水蛭唾液腺分泌的一种酸性多肽,能够从一定程度上影响血液凝固和促进纤溶,是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂,在治疗血栓类疾病和心血管疾病具有很好疗效,同时还有良好的抗炎、抗肿瘤作用。本文对水蛭素的结构和作用作一综述。 展开更多
关键词 水蛭 凝血酶 抗凝血
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水蛭素对特发性肺间质纤维化大鼠肺组织中纤溶酶原抑制剂-1(PAI-1)mRNA及蛋白表达的干预研究 预览
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作者 李红 谢海彬 +3 位作者 刘敏 沈明霞 王海霞 马玉坤 《中医临床研究》 2019年第5期1-6,共6页
目的:本研究选用天然水蛭素作为研究药物,采用 RT-qPCR、Westernblot方法检测 IPF大鼠肺组织中 PAI-1mRNA及蛋白表达,观察水蛭素干预大鼠 IPF的作用,探讨其可能的作用机制,为临床运用水蛭治疗 IPF提供理论依据,从而拓宽 IPF的治疗途径... 目的:本研究选用天然水蛭素作为研究药物,采用 RT-qPCR、Westernblot方法检测 IPF大鼠肺组织中 PAI-1mRNA及蛋白表达,观察水蛭素干预大鼠 IPF的作用,探讨其可能的作用机制,为临床运用水蛭治疗 IPF提供理论依据,从而拓宽 IPF的治疗途径。方法:选取 180只 SPF级同月龄健康的 Wistar大鼠,随机数字表法抽取 18只大鼠作为空白(K)组,剩余 162只大鼠气管内注射博莱霉素统一造模,造模成功后随机选取 108只分为模型(M)组、激素(J)组、水蛭素高剂量(G)组、水蛭素中剂量(Z)组、水蛭素低剂量(D)组、水蛭素中剂量联合激素(ZJ)组,每组18只,造模成功后第2天开始给药,分别在造模后 7d、14d、28d处死大鼠并收集标本,采用 Westernblot法检测大鼠肺组织中 PAI-1的蛋白表达,RT-qPCR法检测PAI-1的基因表达。结果:不同时间点,M组大鼠肺组织 PAI-1基因和蛋白表达均最强(P<0.01),而且随着时间的推移,表达强度逐渐增强,说明肺纤维化处于发展趋势,28天大鼠肺间质纤维化程度最重。各用药组进行比较发现:在 7d、14d、28d,ZJ组大鼠肺组织 PAI-1基因和蛋白表达均最弱(P<0.01),G组次之(P<0.01),J组表达仅次于 G组(P<0.01),J组表达显著低于 Z组和 D组(P<0.01),而 Z组和 D组相当(P>0.05)。结论:本实验证明,水蛭素具有治疗大鼠肺间质纤维化的作用,通过降低 PAI-1基因和蛋白表达水平从而起到治疗大鼠肺间质纤维化是其作用机理之一。同样发现,水蛭素的治疗作用有明显的剂量依赖性,而水蛭素联合激素治疗大鼠肺间质纤维化的疗效更佳。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 水蛭 纤溶酶原抑制剂-1
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水蛭素对博莱霉素致特发性肺间质纤维化大鼠肺组织中AKT、p-AKT 蛋白表达的影响 预览
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作者 张景容 谢海彬 +4 位作者 沈明霞 王海霞 高绒霞 马玉坤 李红 《中医临床研究》 2019年第11期5-9,共5页
目的:本文以水蛭素为研究药物,通过Western blot法测定蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白在肺中的表达,分析水蛭素对特发性肺间质纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis,IPF)的干预效果及作用机制,为水蛭素的临床运用奠定基础,并拓宽IPF的治疗... 目的:本文以水蛭素为研究药物,通过Western blot法测定蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白在肺中的表达,分析水蛭素对特发性肺间质纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis,IPF)的干预效果及作用机制,为水蛭素的临床运用奠定基础,并拓宽IPF的治疗途径。方法:选取SPF级Wistar大鼠180只,随机选18只为空白组(K组),剩余大鼠统一造模(气管内注射博莱霉素),选取108只造模成功大鼠,随机分为模型组(M组)、激素组(J组)、低剂量组(D组)、高剂量组(G组)、中剂量组(Z组)、中剂量联合激素组(ZJ组),每组18只,初次给药为造模后第2天,在给药的第7d、14d、28d分批处死取材,检测AKT、p-AKT蛋白的表达。结果:AKT蛋白表达量:K组在各时间点AKT蛋白表达量均最低,M组在7d、28d含量明显高于J组(P<0.01);7d时G组低于J组(P<0.01),14、28d时G、ZJ组均低于J组(P<0.01);7d、28d时D、Z组高于J组(P<0.01)。p-AKT蛋白表达量:各时间点K组最低,M组最高;J组低于M组(P<0.01);ZJ组低于J组(P<0.01);7d、14d时G组低于J组(P<0.01);28d时G组高于J组,但P>0.05。结论:IPF发病过程中,PI3K/AKT信号通路中AKT、p-AKT蛋白表达明显升高,说明该信号通路与IPF发病过程有明显相关性;水蛭素能降低AKT、p-AKT蛋白的表达量,减缓IPF病程发展;水蛭素极有可能通过PI3K/AKT通路作用于IPF。 展开更多
关键词 水蛭 特发性肺间质纤维化 AKT P-AKT
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水蛭素对高血压患者凝血功能及内皮功能影响的研究
6
作者 王继娟 王维华 《新中医》 CAS 2019年第5期123-125,共3页
目的:探讨水蛭素对高血压患者凝血功能及内皮功能的影响。方法:随机将86例高血压患者分为治疗组42例和对照组46例。治疗组采用脉血康胶囊联合饮食运动处方,对照组采用淀粉胶囊联合饮食运动处方,连续观察4周。观察治疗0、2、4周后凝血功... 目的:探讨水蛭素对高血压患者凝血功能及内皮功能的影响。方法:随机将86例高血压患者分为治疗组42例和对照组46例。治疗组采用脉血康胶囊联合饮食运动处方,对照组采用淀粉胶囊联合饮食运动处方,连续观察4周。观察治疗0、2、4周后凝血功能及内皮功能的变化。结果:治疗2周、4周后,治疗组活化凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶原时间(PT-INR)、凝血酶时间(TT)水平均较0周显著升高(P <0.05),且高于同期对照组(P <0.05)。治疗2周、4周后,对照组各项指标较0周均无显著性差异(P> 0.05)。治疗2周、4周后,治疗组内皮素(ET)水平均较0周显著降低(P <0.05),NO水平较0周显著升高(P <0.05);且ET水平低于同期对照组(P <0.05),NO水平高于同期对照组(P <0.05)。治疗4周后,对照组ET水平均较0周显著降低(P <0.05),NO水平较0周显著升高(P <0.05)。结论:水蛭素具有抑制凝血酶活性、保护血管内皮的作用,能有效改善高血压患者的凝血功能及内皮功能。 展开更多
关键词 水蛭 高血压 凝血功能 内皮功能
水蛭素对博莱霉素致特发性肺间质纤维化大鼠肺组织病理变化的影响 预览
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作者 李红 谢海彬 +3 位作者 刘敏 沈明霞 王海霞 马玉坤 《中医临床研究》 2019年第7期1-6,共6页
目的:探讨水蛭素对博莱霉素致特发性肺间质纤维化大鼠肺组织病理变化的影响。方法:选取180只SPF级Wistar大鼠,随机抽取18只作为K组,剩余162只气管内推注博莱霉素统一造模,建模成功后随机选取108只分为M组、J组、G组、Z组、D组、ZJ组,每... 目的:探讨水蛭素对博莱霉素致特发性肺间质纤维化大鼠肺组织病理变化的影响。方法:选取180只SPF级Wistar大鼠,随机抽取18只作为K组,剩余162只气管内推注博莱霉素统一造模,建模成功后随机选取108只分为M组、J组、G组、Z组、D组、ZJ组,每组各18只,建模成功后次日开始给药,给药的第7天、14天、28天分批处死大鼠后取右肺组织行HE、Masson染色,并计算肺组织病理损伤及肺纤维化评分。结果:通过比较不同组别不同时间点肺组织病理损伤和肺纤维化评分发现:与K组比较,各组大鼠肺组织纤维化评分在第7天、14天、28天均显著增高(P<0.01);其中M组大鼠评分均最高(P<0.01),ZJ组评分均最低(P<0.01),与G组相当(P>0.05),且显著低于J组、Z组和D组(P>0.05),而J组明显低于Z组和D组,Z组与D组相当(P>0.05)。结论:水蛭素能不同程度地降低大鼠肺组织炎症反应,有抗纤维化的作用;G组与ZJ组水蛭素的治疗效果相当;水蛭素治疗效果有明显的剂量依赖性,与激素联用有协同作用。 展开更多
关键词 水蛭 特发性肺间质纤维化 病理变化
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水蛭素对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的干预研究
8
作者 任桐 朱鹏宇 杨洪涛 《四川中医》 2019年第2期64-68,共5页
目的:观察水蛭素对单侧输尿管梗阻(Unilateral Ureteral Obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探索其作用机制。方法:健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组(SOR组)24只和造模组96只。造模组再分为模型组(UUO组)24只、水蛭素... 目的:观察水蛭素对单侧输尿管梗阻(Unilateral Ureteral Obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探索其作用机制。方法:健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组(SOR组)24只和造模组96只。造模组再分为模型组(UUO组)24只、水蛭素高剂量组(UUO+HI组)24只、水蛭素低剂量组(UUO+LI组)24只、贝那普利组(UUO+LOT组)24只。各组于术后第3天、7天、14天分批随机处死,每次8只。腹主动脉取血以检测血肌酐、血尿素。取梗阻侧肾组织行免疫组织化学技术检测E-Cadherin、FN表达情况,行Western Blot技术检测p38MAPK表达及其磷酸化情况。结果:肾功能检测显示,与UUO组相比:水蛭素低剂量组第7天、第14天,水蛭素高剂量组各时间点血肌酐水平明显降低(P<0.05);水蛭素高剂量组第7天、第14天,水蛭素低剂量组第14天血尿素氮水平降低(P<0.05)。免疫组化半定量分析显示,与UUO组相比:水蛭素高剂量组第7天,水蛭素低剂量组各不同时间点E-Cadherin蛋白质表达水平均显著增加(P<0.01);水蛭素高剂量组第3天FN表达水平显著降低(P<0.01)。West-ern Blot显示,与UUO组相比:水蛭素高剂量组、水蛭素低剂量组、贝那普利组p38MAPK蛋白质相对表达量变化均无统计学意义(P>0.05);水蛭素高剂量组磷酸化p38MAPK蛋白质相对表达量显著降低(P<0.01)。结论:水蛭素能够改善UUO模型大鼠肾功能损伤,抑制促纤维化指标FN的表达,并上调E-Cadherin的表达,其作用机制可能与其抑制了p38蛋白蛋白质的磷酸化有关。 展开更多
关键词 水蛭 肾间质纤维化 肾功能 E-CADHERIN FN P38MAPK
水蛭素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质损伤及MCP-1、ICAM-1的干预效应研究 预览
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作者 任桐 朱鹏宇 杨洪涛 《天津中医药》 CAS 2019年第5期477-481,共5页
[目的]观察水蛭素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探索其作用机制。[方法]健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组24只和造模组96只。造模组再分为模型组24只、水蛭素高剂量组24只、水蛭素低剂量组24只、贝那普利组2... [目的]观察水蛭素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探索其作用机制。[方法]健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组24只和造模组96只。造模组再分为模型组24只、水蛭素高剂量组24只、水蛭素低剂量组24只、贝那普利组24只。各组于术后第3、7、14天分批随机处死。取梗阻侧肾组织行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot)分子技术,检测梗阻侧肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的分子表达变化。[结果]苏木精-伊红(HE)染色显示,与模型组相比:各用药组肾间质损伤及纤维化程度均有不同程度改善。RT-PCR显示,与模型组相比:水蛭素高剂量组各时间点及水蛭素低剂量组第7、14天ICAM-1相对表达量均明显降低(P<0.05);水蛭素高剂量组第7、14天MCP-1表达显著降低(P<0.01);水蛭素高剂量组第3天及水蛭素低剂量组各时间点MCP-1表达量明显降低(P<0.05)。Western Blot显示,与模型组相比:水蛭素高剂量组第7天ICAM-1蛋白表达量显著减少(P<0.01);水蛭素高剂量组第3、14天及水蛭素低剂量组第14天各时间点ICAM-1蛋白表达均明显降低(P<0.05);水蛭素高剂量组第14天MCP-1蛋白表达显著降低(P<0.01);水蛭素高剂量组第3、7天MCP-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。[结论]水蛭素能不同程度地改善UUO大鼠肾间质损伤程度,延缓间质纤维化进展,其机制可能与水蛭素干预了UUO大鼠肾间质MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白质的表达有关。 展开更多
关键词 水蛭 肾间质纤维化 MCP-1 ICAM-1
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中药水蛭对肾病血瘀证的研究及应用 被引量:1
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作者 莫超 史伟 +3 位作者 王夏青 向长玉 胡雯 赵洁 《中华中医药学刊》 北大核心 2018年第1期130-132,共3页
目的:总结归纳肾病血瘀证的中医探讨及水蛭干预治疗作用。方法:查找出近10年来肾病血瘀证的中医探讨及水蛭治疗的相关文献,进行分类总结得出结论。结果:肾病血瘀证与非血瘀证比较提示血瘀证患者肾脏病变更加严重,及其预后差的指标表... 目的:总结归纳肾病血瘀证的中医探讨及水蛭干预治疗作用。方法:查找出近10年来肾病血瘀证的中医探讨及水蛭治疗的相关文献,进行分类总结得出结论。结果:肾病血瘀证与非血瘀证比较提示血瘀证患者肾脏病变更加严重,及其预后差的指标表达率更高,水蛭干预治疗后可以减少化验指标对其肾脏损害。结论:水蛭可以改善肾病血瘀证患者生活质量,延缓肾功能进展,保护肾脏。 展开更多
关键词 水蛭 水蛭 肾病血瘀证 活血化瘀
水蛭对慢性肾脏病疗效及安全性的Meta分析
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作者 莫超 赵洁 +5 位作者 裴燕燕 史伟 谢丽萍 肖恒 苏朝东 刘少会 《辽宁中医杂志》 2018年第6期1126-1130,共5页
目的:系统评价水蛭干预慢性肾脏病的效果及安全性分析,为防治慢性肾脏病提供参考。方法:计算机检索Pub Med、EMbase、CENTRAL、VIP、CBM、CNKI、Wan Fang Data数据库,均从最初检索至2017年3月10日。检索水蛭干预慢性肾脏病的相关文献... 目的:系统评价水蛭干预慢性肾脏病的效果及安全性分析,为防治慢性肾脏病提供参考。方法:计算机检索Pub Med、EMbase、CENTRAL、VIP、CBM、CNKI、Wan Fang Data数据库,均从最初检索至2017年3月10日。检索水蛭干预慢性肾脏病的相关文献,只纳入RCT文献。根据Cochrane协作网评价员手册评价纳入研究的偏倚风险,由2名研究人员独立筛选、评价文献和收集数据。采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入11篇RCT,患者760例,Meta分析结果显示:联合用药组的24 h尿蛋白含量比单用常规治疗下降更明显[MD=-2.81,95%CI(-4.82,-0.80),P〈0.0001];联合用药组的血肌酐含量比单用常规治疗下降更明显[MD=-26.16,95%CI(-46.65,-5.81),P=0.01];血尿素氮水平两组间差异无统计学意义[MD=-2.05,95%CI(-4.28,0.17),P=0.07];不良反应发生率两组间差异无统计学意义[RD=0.03,95%CI(-0.05,0.12),P=0.43]。结论:水蛭联合常规治疗与单用常规治疗比较,更能延缓肾脏损害及保护肾脏。但纳入研究质量限制,上述结论尚待更多高质量RCT予以验证。 展开更多
关键词 水蛭 水蛭 慢性肾脏病 系统评价 META分析
广西特色壮药金边蚂蟥抗痛风活性成分研究 预览
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作者 刘喜华 黄思诗 +4 位作者 黄敏琪 熊万娜 周维海 甄汉深 刘安韬 《世界科学技术:中医药现代化》 CSCD 北大核心 2018年第6期941-946,共6页
目的:研究金边蚂蟥中具有抗痛风作用的活性成分。方法:采用次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型。二甲苯诱导小鼠耳郭肿胀模型,热板法、扭体法筛选金边蚂蟥的活性部位,筛选金边蚂蟥活性成分,观察金边蚂蟥抗抗痛风作用的物质基础。结果... 目的:研究金边蚂蟥中具有抗痛风作用的活性成分。方法:采用次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型。二甲苯诱导小鼠耳郭肿胀模型,热板法、扭体法筛选金边蚂蟥的活性部位,筛选金边蚂蟥活性成分,观察金边蚂蟥抗抗痛风作用的物质基础。结果:金边蚂蟥水溶性部位是其抗痛风的活性部位,可降低次黄嘌呤诱导的高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平,可抑制二甲苯诱导的小鼠耳郭肿胀,可减少醋酸诱导的小鼠扭体反应和增加小鼠热板痛阈;水溶性部位中水蛭素是主要活性成分。金边蚂蟥活性成分(水蛭素)0.8g/ks和O.4g/kg.72.金边蚂蟥续滤粉2.0g/kg可显著降低血清尿酸水平,血清尿酸水平由模型组的232.73±50.93umol/L分别下降到140.70±25.97umol/L、149.07±39.28umol/L、176.45±44.33umol/L(P〈0.01);金边蚂蟥活性成分(水蛭素)0.8g/kg、0.4g/kg和0.2g/kg及金边蚂蟥续滤粉2.0s/ks可明显抑制二甲苯引起小鼠耳郭肿胀,肿胀度由22.80±2.86mg分别抑制到20.10±2.18mg、19.80±2.57mg、20.10±1.66mg、20.85±1.60mg(P〈0.05);金边蚂蟥活性成分(水蛭素)0.8gCkg,可明显降低醋酸引起的小鼠扭体次数,次数由22.80±2.86次降到20.10±2.18次(P〈0.05)。结论:金边蚂蟥抗痛风的活性部位是水溶性部分,其中水蛭素是其主要活性成分。 展开更多
关键词 金边蚂蟥 水蛭 高尿酸 炎症 镇痛
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脉血康胶囊对长期性中心静脉导管功能不良的影响
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作者 窦欣浩 郭民 +1 位作者 刘文倩 孙己晶 《潍坊医学院学报》 2018年第4期262-264,共3页
目的观察脉血康胶囊对长期性中心静脉导管功能不良的临床疗效和应用价值。方法将26例采用长期性中心静脉导管进行血透治疗的患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予常规肝素封管,治疗组在对照组治疗基础上给予服用脉血康胶囊冶疗。观察... 目的观察脉血康胶囊对长期性中心静脉导管功能不良的临床疗效和应用价值。方法将26例采用长期性中心静脉导管进行血透治疗的患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予常规肝素封管,治疗组在对照组治疗基础上给予服用脉血康胶囊冶疗。观察6个月后两组导管功能不良的发生率、首次尿激酶干预时间长短及干预次数、凝血功能及出血事件、导管相关感染发生情况。结果对照组和治疗组导管动脉端功能不良的发生率均高于静脉端,分别为3.32%和2.09%(P〈0.05);各组发生导管功能不良后采用尿激酶治疗,首次尿激酶干预时间分别为(34±8.62)d和(43±12.13)d(P〈0.05);治疗组尿激酶干预次数减少(P〈0.05);治疗组较对照组PT、TT和APTT延长(P〈0.05)。两组均无严重不良反应。结论脉血康胶囊配合常规肝素封管对预防血透长期性中心静脉导管功能不良的效果较好。 展开更多
关键词 脉血康 中心静脉导管 维持性血液透析 水蛭
天然水蛭素对人微血管再生作用的初步研究
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作者 林冠宇 林博杰 +2 位作者 朱江英 潘新元 殷国前 《中国修复重建外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1586-1591,共6页
目的研究天然水蛭素对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMVECs)增殖的影响及其诱导血管再生的机制。方法取HMVECs接种至Matrigel基质胶培养24h,体外建立三维培养模型,于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。然... 目的研究天然水蛭素对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMVECs)增殖的影响及其诱导血管再生的机制。方法取HMVECs接种至Matrigel基质胶培养24h,体外建立三维培养模型,于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。然后将细胞三维培养模型随机分为不同浓度天然水蛭素培养组(1、4、7ATU/mL组)以及单纯含10%FBS的DMEM培养基培养组(对照组)。各组细胞三维培养模型加入对应培养基后,培养24、48、72h采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit8,CCK-8)检测细胞增殖情况;培养24h行成管实验并采用免疫荧光染色法测定细胞VEGF及Notch1表达水平。结果细胞三维培养观察示,HMVECs于基质胶上贴附良好,24h时完全形成管腔样结构。CCK-8检测示,各时间点1、4ATU/mL组A值均高于对照组(P<0.05),其中4ATU/mL组最高;而7ATU/mL组A值显著低于对照组以及1、4ATU/mL组(P<0.05)。细胞成管实验示,1、4ATU/mL组成管数量较对照组及7ATU/mL组明显增多,且4ATU/mL组多于1ATU/mL组,差异有统计学意义(P<0.05);7ATU/mL组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色示,与对照组比较,1、4ATU/mL组Notch1表达量增高,7ATU/mL组降低;其中4、7ATU/mL组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。1、4、7ATU/mL组VEGF表达量均较对照组增高,4ATU/mL组高于1、7ATU/mL组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论低、中浓度天然水蛭素可促进HMVECs增殖使血管再生,高浓度天然水蛭素则对HMVECs增殖及血管再生起抑制作用;其作用机制可能与VEGF-Notch信号通路有关。 展开更多
关键词 水蛭 微血管内皮细胞 三维培养 NOTCH信号通路 血管再生
天然水蛭素联合高压氧治疗对大鼠随意皮瓣成活的影响研究 被引量:1
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作者 蔡洁云 林博杰 +3 位作者 潘新元 崔佳 Pradhan Rohan 殷国前 《中国修复重建外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期484-490,共7页
目的 探讨天然水蛭素联合高压氧治疗对大鼠随意皮瓣成活的影响。方法 取72只SD大鼠,于背部制备面积为10.0 cm×2.5 cm的随意皮瓣移植模型后,随机分为4组(n=18)。对照组术后即刻及之后4 d内注射生理盐水,高压氧组注射生理盐水同时... 目的 探讨天然水蛭素联合高压氧治疗对大鼠随意皮瓣成活的影响。方法 取72只SD大鼠,于背部制备面积为10.0 cm×2.5 cm的随意皮瓣移植模型后,随机分为4组(n=18)。对照组术后即刻及之后4 d内注射生理盐水,高压氧组注射生理盐水同时行高压氧治疗,水蛭素组仅注射天然水蛭素,联合组注射天然水蛭素同时行高压氧治疗。术后大体观察皮瓣成活情况,第6天计算皮瓣成活率;第2、4天取材,HE染色观察皮瓣组织学变化;免疫组织化学染色检测皮瓣微血管密度(microvessel density,MVD)以及TNF-α表达水平。结果 术后各组皮瓣均出现部分坏死,其中联合组皮瓣成活最佳;术后第6天高压氧组、水蛭素组及联合组皮瓣成活率明显高于对照组,联合组高于水蛭素组、高压氧组,比较差异有统计学意义(P〈0.05)。组织学观察示,术后第2天,水蛭素组、高压氧组及联合组微血管结构较对照组多,各组均见炎性细胞浸润;第4天,高压氧组、水蛭素组及联合组中仍可见较多微血管形成,对照组中见大量炎性细胞浸润,其余各组炎性细胞均较术后第2天时明显减少。免疫组织化学染色观察示,术后第2天,高压氧组、水蛭素组及联合组MVD均显著高于对照组、TNF-α蛋白表达量显著低于对照组(P〈0.05)。术后第4天,高压氧组、水蛭素组及联合组MVD均显著高于对照组,联合组及水蛭素组高于高压氧组,比较差异有统计学意义(P〈0.05);高压氧组、水蛭素组及联合组TNF-α蛋白表达量显著低于对照组,联合组低于水蛭素组及高压氧组,比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 高压氧和天然水蛭素干预均能提高随意皮瓣移植后成活率,且两者联合发挥协同效应,可能与促进血管生成和减轻炎性反应有关。 展开更多
关键词 水蛭 高压氧 随意皮瓣 血管生成 炎性反应 皮瓣成活 大鼠
重组水蛭素的原核表达及分离纯化 预览
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作者 黄孔威 李志鹏 +2 位作者 崔奎青 石德顺 刘庆友 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第1期1-13,共13页
为了提高水蛭素的生产效率以适应生物医药应用的需求,试验通过对水蛭素基因进行密码子优化,构建了重组水蛭素原核表达系统,并对D600nm值、诱导时间、诱导剂IPTG浓度和诱导温度4种诱导条件进行了探索,同时通过引入试验设计(design of ex... 为了提高水蛭素的生产效率以适应生物医药应用的需求,试验通过对水蛭素基因进行密码子优化,构建了重组水蛭素原核表达系统,并对D600nm值、诱导时间、诱导剂IPTG浓度和诱导温度4种诱导条件进行了探索,同时通过引入试验设计(design of experiment,DOE)方案将4种因素对诱导效率的影响进行进一步系统的优化,使用His-Trap亲和层析对重组蛋白进行纯化,并通过凝血酶滴定法对重组水蛭素的活性进行测定。结果显示,试验成功构建重组水蛭素原核表达载体,水蛭素蛋白为可溶性表达。单因素变量优化后的诱导条件为:在菌体密度D600nm值为0.4时,加入1mmol/L IPTG,37℃下诱导7h,重组水蛭素蛋白表达效率最高,占菌体总蛋白66.5%;而DOE试验优化结果为:在菌体密度D600nm值为0.6时,加入0.82mmol/L IPTG,31.9℃下诱导7.6h,预测重组水蛭素蛋白表达效率最高,占菌体总蛋白72.7%,显著高于单因子变量法优化结果(P〈0.05)。进一步分析发现,各影响因素之间存在明显的交互效应,影响了单因素试验结果的准确性。通过亲和层析纯化后的重组水蛭素纯度可达99%,抗凝活性为114ATU/mg。研究成功构建了重组水蛭素原核表达载体,对其表达条件进行了优化,并获得了重组水蛭素蛋白,为水蛭素应用于生物医药奠定了基础。 展开更多
关键词 水蛭 原核表达 诱导条件优化 DOE 亲和层析
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水蛭素通过JAK/STAT3信号通路缓解人肾小管上皮细胞纤维化的相关机制研究
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作者 范丽 董正华 +1 位作者 杨海霞 王瑞 《中药材》 北大核心 2018年第4期982-985,共4页
目的:探讨水蛭素抑制人肾小管上皮细胞纤维化的作用机制。方法:将HK-2细胞分为正常对照组、模型组、AG490(3 mg/L)阳性对照组及水蛭素低(1 mg/mL)、中(3 mg/mL)、高(10 mg/mL)浓度组,除正常对照组外其他各组培养基均含5 ng/mL TGF-β1... 目的:探讨水蛭素抑制人肾小管上皮细胞纤维化的作用机制。方法:将HK-2细胞分为正常对照组、模型组、AG490(3 mg/L)阳性对照组及水蛭素低(1 mg/mL)、中(3 mg/mL)、高(10 mg/mL)浓度组,除正常对照组外其他各组培养基均含5 ng/mL TGF-β1。各组细胞培养24、48、72 h时采用MTT测定细胞增殖情况;各组细胞培养72 h时采用双抗体夹心ELISA法检测细胞分泌Ⅰ型胶原(ColⅠ)和纤连蛋白(Fib)含量;各组细胞培养72 h时采用实时荧光定量PCR法以及Western blot法检测细胞α-SMA、ColⅠ、Fib、JAK、STAT3 mRNA和蛋白的表达。结果:水蛭素高、中浓度组细胞在培养24、48、72 h时光密度较模型组显著降低,在培养72 h时细胞培养液中ColⅠ、Fib含量较模型组显著降低,细胞中α-SMA、ColⅠ、Fib、JAK、STAT3 mRNA和蛋白表达较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01)。水蛭素上述作用均具有浓度依赖性。结论:水蛭素可逆转TGF-β1刺激HK-2细胞的增殖和纤维化,其作用机制可能与抑制JAK/STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 水蛭 JAK/STAT3信号通路 转化生长因子-Β1 肾小管上皮细胞纤维化
比伐芦定对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响 预览
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作者 孔令东 王耿 《中国中医药现代远程教育》 2018年第12期103-105,共3页
目的观察比伐芦定对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响。方法将20只ApoE-/-小鼠随机分成模型组和治疗组,10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。模型组和治疗组给予高脂饲料喂养,空白组给予普通饲料喂养。于第9周开始,治疗组给予比伐芦定治... 目的观察比伐芦定对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响。方法将20只ApoE-/-小鼠随机分成模型组和治疗组,10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。模型组和治疗组给予高脂饲料喂养,空白组给予普通饲料喂养。于第9周开始,治疗组给予比伐芦定治疗4周。全自动生化分析仪检测血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C含量,Elisa法检测各组小鼠血清TNF-α、IL-6水平变化,RT-PCR法检测主动脉VEGF、MMP-9、HIF-1αmRNA表达水平。结果与空白对照组比较,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),HDL水平显著降低(P<0.01),VEGF、MMP-9、HIF1-αmRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,治疗组小鼠血清水平、炎症因子水平以及VEGF、MMP-9、HIF1-αmRNA表达水平明显改善(P<0.01)。结论中药水蛭的有效成分水蛭素的人工合成药物比伐芦定能够通过改善血脂水平,血清炎症因子水平及血管新生等方面发挥良好的抗动脉粥样硬化作用。 展开更多
关键词 比伐芦定 水蛭 动脉粥样硬化 APOE基因敲除小鼠
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水蛭素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的干预研究 预览
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作者 杨康 戴璐 +1 位作者 任桐 杨洪涛 《中医药学报》 CAS 2018年第2期36-40,共5页
目的:观察水蛭素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的干预效应,并探索其作用机制。方法:健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组24只、造模组96只,造模组再随机分为:模型组、水蛭素高剂量组、水蛭素低剂量组、贝那普利组,每组24只。... 目的:观察水蛭素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的干预效应,并探索其作用机制。方法:健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组24只、造模组96只,造模组再随机分为:模型组、水蛭素高剂量组、水蛭素低剂量组、贝那普利组,每组24只。各组于术后第3、7、14天分批随机处死。腹主动脉取血,检测Scr、BUN水平;取梗阻侧肾组织行Masson染色,观察肾间质病理损伤程度;Western Blot分子技术检测肾组织PAR-1、NF-κB的蛋白表达变化。结果:各治疗组大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平及肾间质病理损伤程度较模型组均有不同程度改善。与模型组相比,水蛭素高剂量组第3天PAR-1蛋白表达显著降低(P〈0.01),贝那普利组各时间点、水蛭素高剂量组第7及14天PAR-1表达明显降低(P〈0.05)。水蛭素高剂量组第3及7天、贝那普利组第3天NF-κB表达显著降低(P〈0.01);水蛭素高剂量组第14天、水蛭素低剂量组第3天、贝那普利组第7及14天NF-κB表达明显降低(P〈0.05)。结论:水蛭素能在一定程度上改善模型大鼠肾间质损伤程度,延缓肾间质纤维化的进展,其作用机制可能与水蛭素干预了模型大鼠肾间质PAR-1、NF-κB蛋白表达有关。 展开更多
关键词 水蛭 肾间质纤维化 PAR-1 NF-ΚB
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水蛭素对人鼻咽癌细胞增殖的影响及机制 预览
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作者 陶义丰 黄玲莎 +4 位作者 刘冬华 劳明 黄浩 黄文成 谢娟 《山东医药》 2018年第33期43-46,共4页
目的探讨水蛭素对人鼻咽癌细胞(CNE2)增殖的影响及机制。方法 取对数生长期的CNE2细胞随机分为对照组与水蛭素组。对照组常规培养,水蛭素组加入不同浓度的水蛭素进行培养。倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法测算CNE2细胞生长抑制率... 目的探讨水蛭素对人鼻咽癌细胞(CNE2)增殖的影响及机制。方法 取对数生长期的CNE2细胞随机分为对照组与水蛭素组。对照组常规培养,水蛭素组加入不同浓度的水蛭素进行培养。倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法测算CNE2细胞生长抑制率,计算不同时间点半抑制浓度(IC 50);实时荧光定量PCR检测CNE2细胞内Bax、p21 mRNA表达。结果 不同浓度不同时间点水蛭素组生长抑制率均高于对照组,水蛭素组各浓度各时间点生长抑制率比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。药物作用24、48、72 h的IC 50分别为(8.28±2.1)、(5.11±0.7)、(4.83±0.5)ATU/mL,48、72 h时间点IC 50比24 h高(P均<0.05)。与对照组比较,5、8 ATU/mL水蛭素组Bax、p21 mRNA相对表达量高(P均<0.05),8 ATU/mL水蛭素组最高(P均<0.05)。结论 水蛭素可明显抑制CNE2细胞增殖,该作用可能与水蛭素上调Bax、p21 mRNA表达有关。 展开更多
关键词 水蛭 鼻咽肿瘤 CNE2细胞 BAX基因 P21基因
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