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基于活体成像技术初探围绝经期综合征肝郁的方证研究策略
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作者 梁文娜 林雪娟 +2 位作者 李西海 闵莉 李灿东 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1311-1313,共3页
女性生理特点是以血为本、以肝为先天,病理特点是女子多郁。围绝经期综合征以肝郁为病机、以肾虚为基础,肝郁与雌激素紊乱介导的海马、下丘脑神经递质表达异常相关,为中医证病理特点研究提供了方法学依据。因此,基于肝脑相关的中医理论... 女性生理特点是以血为本、以肝为先天,病理特点是女子多郁。围绝经期综合征以肝郁为病机、以肾虚为基础,肝郁与雌激素紊乱介导的海马、下丘脑神经递质表达异常相关,为中医证病理特点研究提供了方法学依据。因此,基于肝脑相关的中医理论,借助活体成像与分子生物学技术,从海马-下丘脑功能网络,探讨活体状态下肝郁神经环路的时空效应,揭示围绝经期综合征肝郁的动态演变规律,旨在丰富肝郁的病机理论,进一步诠释女子多郁的科学内涵。 展开更多
关键词 围绝经期综合征 功能网络 活体成像 肝郁 方证
基于DPP4转导快速建立MERS-CoV假病毒感染小鼠模型
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作者 牛军伟 詹瑛 +1 位作者 邓瑶 谭文杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期250-255,共6页
目的快速建立一种动态便捷的观察中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)假病毒感染小鼠的可视化方法。方法本研究首先采用HeLa细胞体外验证重组腺病毒Ad5-hDPP4及假病毒荧光素酶的表达及功能;然后将表达MERS-CoV受体hDPP4的重组腺病毒通过... 目的快速建立一种动态便捷的观察中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)假病毒感染小鼠的可视化方法。方法本研究首先采用HeLa细胞体外验证重组腺病毒Ad5-hDPP4及假病毒荧光素酶的表达及功能;然后将表达MERS-CoV受体hDPP4的重组腺病毒通过胸腔注射和腹腔注射的方式转导BALB/c小鼠,继而以胸腔注射或腹腔注射的方式接种携带萤火虫荧光素酶报告基因的高滴度(3×10^7 TCID50)MERS-CoV假病毒,并通过荧光活体成像仪观察MERS-CoV假病毒在体内的感染过程与分布特点。结果重组腺病毒Ad5-hDPP4及假病毒荧光素酶在HeLa细胞中能有效表达;重组腺病毒经腹腔转导hDPP4,BALB/c小鼠接种MERS-CoV假病毒48~96 h后,在小鼠的腹部能检测到荧光素酶表达;胸腔转导hDPP4,BALB/c小鼠接种MERS-CoV假病毒后,在48 h左右可检测到荧光素酶在胸腔的表达。结论本研究报道了一种简便快捷建立MERS-CoV感染可视化小鼠模型的方法,为中和抗体或进入抑制剂的体内评价提供了有效手段。 展开更多
关键词 中东呼吸综合征冠状病毒假病毒 动物模型 小鼠 荧光素酶 活体成像
基于临床肿瘤标本的胃癌转移模型建立 预览
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作者 王洁 赵宁宁 +5 位作者 张彩勤 赵勇 谭邓旭 吴朋朋 赵菊梅 师长宏 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期7-12,共6页
目的建立基于临床肿瘤标本的胃癌转移模型,为胃癌的转移研究提供个体化动物模型。方法将胃癌新鲜的手术标本移植到裸鼠皮下,建立胃癌患者异种移植(patient-derived xenograft,PDX)模型。进一步通过手术将皮下瘤组织原位移植到裸鼠胃部肌... 目的建立基于临床肿瘤标本的胃癌转移模型,为胃癌的转移研究提供个体化动物模型。方法将胃癌新鲜的手术标本移植到裸鼠皮下,建立胃癌患者异种移植(patient-derived xenograft,PDX)模型。进一步通过手术将皮下瘤组织原位移植到裸鼠胃部肌层,连续观察裸鼠的体征状态,通过近红外荧光活体成像技术检测肿瘤转移的发生。解剖荷瘤小鼠,将肺部转移灶进一步移植裸鼠皮下获得实体瘤。HE染色观察原发瘤与转移瘤的结构特征,(short tandem repeat)STR分析原发瘤和转移瘤的遗传特性。PCR-Array分析转移瘤和原发瘤中转移相关基因的表达。结果成功建立胃癌PDX模型,移植瘤组织结构与患者保持基本一致;通过胃部原位移植发现编号C19751的小鼠发生肺和肝的转移。其中肺转移灶皮下移植后获得了实体瘤,STR分析显示原发瘤保持了与肺转移瘤一致的遗传特征。PCR-Array结果显示,与原发瘤相比,转移瘤中CXCL12,IGF1和MMP2基因表达均显著上调。结论利用临床肿瘤标本成功建立胃癌转移模型,为胃癌转移研究提供了良好的个体化模型。 展开更多
关键词 胃癌 PDX模型 近红外荧光 活体成像 实时定量PCR 裸鼠
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尼罗红示踪纳米制剂在荷瘤裸鼠体内活体成像的应用 预览
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作者 张凤梅 李可欣 +3 位作者 余忠姝 张景勍 潘永全 韩文莉 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期91-95,共5页
目的拟将尼罗红包裹入纳米制剂中,利用其荧光特性来考察纳米制剂在荷瘤鼠体内的肿瘤靶向性与组织分布情况。方法采用CCK-8法检测尼罗红纳米乳[NRNE(O)]对H1688的细胞毒性。建立BALB/c裸鼠肺癌模型,灌胃给予尼罗红混悬液(NRS)及NRNE(O),... 目的拟将尼罗红包裹入纳米制剂中,利用其荧光特性来考察纳米制剂在荷瘤鼠体内的肿瘤靶向性与组织分布情况。方法采用CCK-8法检测尼罗红纳米乳[NRNE(O)]对H1688的细胞毒性。建立BALB/c裸鼠肺癌模型,灌胃给予尼罗红混悬液(NRS)及NRNE(O),通过小动物活体成像系统观察其在荷瘤裸鼠中荧光强度的动态分布情况。结果NRNE(O)具有较低的细胞毒性和良好的生物相容性,并且在体内的吸收量及肿瘤部位的蓄积量均高于NRS;NR在纳米制剂中能快速、稳定、清晰地反映纳米制剂在小鼠体内的动态分布情况。结论本研究中制备的NRNE(O)的稳定性好,为尼罗红作为示踪剂应用于纳米制剂在动物体内的研究提供了重要的研究手段。 展开更多
关键词 尼罗红 纳米制剂 活体成像
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席夫碱多功能金属离子探针的合成及在生物成像中的应用 预览
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作者 曹亚萍 吴庆 +2 位作者 胡庆红 余光勤 袁泽利 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期38-48,175-190共12页
设计并合成了一个双席夫碱探针L,经1H NMR、13C NMR、HRMS(ESI-MS)及FT-IR等对其结构和组成进行了表征。紫外-可见光谱和荧光光谱研究结果表明,在无水乙醇-Tris-HCl缓冲液(9∶1,V/V,p H 7.40)中,探针L能同时对Ca2+、Cu2+和Zn2+表现出较... 设计并合成了一个双席夫碱探针L,经1H NMR、13C NMR、HRMS(ESI-MS)及FT-IR等对其结构和组成进行了表征。紫外-可见光谱和荧光光谱研究结果表明,在无水乙醇-Tris-HCl缓冲液(9∶1,V/V,p H 7.40)中,探针L能同时对Ca2+、Cu2+和Zn2+表现出较高的灵敏度和选择性。探针L对Cu2+的检测,在335 nm处表现了显著的吸收强度增强;对Ca2+和Zn2+的检测,分别于515和486 nm处表现了特异的荧光增强。对Ca2+、Cu2+和Zn2+的检出限分别为9.00×10!7mol/L、9.23×10!7mol/L和5.14×10!7mol/L。将探针L应用于实际样品(药物、水样和血清)中Ca2+、Cu2+及Zn2+检测,结果令人满意。探针L可用于Hep G2细胞、斑马鱼和活体小鼠中Ca2+和Zn2+的成像检测。 展开更多
关键词 探针 合成 金属离子 活体成像
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基于luciferin-luciferase体系的肼生物发光探针的合成、体外评价及活体成像
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作者 徐峰 海澳 +3 位作者 马雅茹 仇丽颖 李敏勇 杜吕佩 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期886-891,共6页
本文设计合成了一个用于可视化分析检测肼(N2H4)的生物发光探针(bioluminescent probe for hydrazine,BPH),并完成对其光学响应性能和活体成像的评价。本文所描述的肼生物发光探针(BPH)是通过在光学报告基团萤火虫荧光素(firefly lucife... 本文设计合成了一个用于可视化分析检测肼(N2H4)的生物发光探针(bioluminescent probe for hydrazine,BPH),并完成对其光学响应性能和活体成像的评价。本文所描述的肼生物发光探针(BPH)是通过在光学报告基团萤火虫荧光素(firefly luciferin)的适当修饰位点合理设计引入肼的特异性识别基团(乙酰基)以达到检测肼的目的,并且该探针以高选择性和高灵敏度等显著优点成功应用于活体水平对肼的可视化分析。实验结果表明,无论是在复杂的自然环境中还是在动物体内,本研究所发展的生物发光探针BPH是一种具有高创新性和广泛应用价值的检测肼的方法。 展开更多
关键词 肼生物发光探针 萤火虫荧光素 小分子探针 活体成像
VCAM-1~+巨噬细胞引导造血干祖细胞向血管微环境归巢
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作者 李丹彤 薛文志 +2 位作者 李美 李林 潘巍峻 《中国科学基金》 CSCD 北大核心 2019年第1期40-44,共5页
造血干祖细胞可以通过增殖分化产生红细胞、白细胞、血小板等人体内所有类型的血液细胞,维持脊椎动物的终生造血。在发育过程中,造血干祖细胞诞生于动脉—性腺—中肾(AGM)区域后,后通过归巢锚定在特定的微环境中进行自我更新或向下游各... 造血干祖细胞可以通过增殖分化产生红细胞、白细胞、血小板等人体内所有类型的血液细胞,维持脊椎动物的终生造血。在发育过程中,造血干祖细胞诞生于动脉—性腺—中肾(AGM)区域后,后通过归巢锚定在特定的微环境中进行自我更新或向下游各血系分化。复杂的血管结构以及其他基质成份,如基质细胞等,构成了独特的造血微环境,调控造血过程的进行。然而,由于造血过程时空跨度非常大,观察手段十分有限,目前对造血微环境的精细结构以及调控造血干祖细胞归巢的分子细胞机制仍然知之甚少。为攻克这一难题,本团队在优化活体成像技术的基础上,进一步整合活体免疫荧光标记、遗传调控和图像重构计算等方法,对斑马鱼尾部造血组织(相当于哺乳动物胎肝)中的造血干祖细胞的归巢过程进行了解析,揭示了独特的微血管结构对造血干祖细胞停留的调控作用。在研究中,本团队还意外地发现了一种全新的微环境细胞,并将其命名为'先导细胞'。这类细胞是先前未被定义过的巨噬细胞新亚型,存在于归巢'热点区域'中,表现出'巡逻行为',可以识别进入造血组织的造血干细胞并将其引入特定的血管结构中,从而实现造血干细胞的归巢。此项研究为造血干细胞移植相关的转化研究开辟了新的方向。 展开更多
关键词 斑马鱼 活体成像 造血干祖细胞归巢 静脉微血管 VCAM-1+巨噬细胞
DDX46基因对裸鼠食管鳞癌移植瘤生长的影响
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作者 李斌 宋铁牛 +5 位作者 蒋鹏 杨建宝 朱多杰 蔺军平 冯海明 敬涛 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS CSCD 2019年第2期169-174,共6页
目的观察DDX46基因沉默后食管鳞癌Eca-109细胞裸鼠皮下移植瘤的生长变化,在活体动物模型中进一步研究DDX46在食管鳞癌发生发展中的作用。方法 4周龄健康雌性BALB/c裸鼠25只随机分为3组。应用RNA干扰技术通过慢病毒载体构建获得DDX46基... 目的观察DDX46基因沉默后食管鳞癌Eca-109细胞裸鼠皮下移植瘤的生长变化,在活体动物模型中进一步研究DDX46在食管鳞癌发生发展中的作用。方法 4周龄健康雌性BALB/c裸鼠25只随机分为3组。应用RNA干扰技术通过慢病毒载体构建获得DDX46基因沉默的慢病毒颗粒(实验组:DDX46-shRNA-LV,n=10)及空载体慢病毒颗粒(对照组:Control-LV,n=10),分别感染食管鳞癌Eca-109细胞株,每只4×10^6个细胞量注射至BALB/c裸鼠右腋皮下;以人永生化食管鳞状上皮细胞Het-1A为空白对照组(n=5),每侧4×10^6个细胞量分别注射至BALB/c裸鼠双侧腋皮下。检测各组移植瘤生长情况,活体成像仪观察各组荧光表达量。Western blotting检测DDX46基因沉默后移植瘤组织凋亡信号通路关键分子表达的变化。结果与对照组相比,沉默DDX46基因使裸鼠移植瘤体积减小、重量减轻,生长减缓(P<0.001);小动物活体成像显示DDX46-shRNA-LV组荧光区总荧光表达量和平均荧光表达量均明显低于Control-LV组(P<0.001);Het-1A细胞接种裸鼠不成瘤。Western blotting检测显示,与对照组比较,沉默DDX46基因使移植瘤DDX46蛋白表达水平显著下降(P<0.01),而cleaved Caspase-3和cleaved PARP-1蛋白表达水平显著上升(P<0.01)。结论沉默DDX46基因可显著抑制裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是通过激活细胞凋亡信号通路而发挥抑瘤作用。 展开更多
关键词 食管鳞癌 DDX46 移植瘤 凋亡 活体成像
Stomatin样蛋白2(SLP-2)抑制裸鼠食管鳞状细胞癌移植瘤生长的研究
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作者 宋帅 田地 +4 位作者 崔永 高志 王天佑 胡健 常栋 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS CSCD 2018年第10期885-889,共5页
目的观察stomatin样蛋白2(SLP-2)表达降低后裸鼠体内原位移植肿瘤的生长变化,进一步研究SLP-2在食管鳞状细胞癌(鳞癌)发生、发展中的作用。方法采用RNA干扰技术,建立特异性抑制目的基因SLP-2表达和荧光素酶稳定表达的食管鳞癌细... 目的观察stomatin样蛋白2(SLP-2)表达降低后裸鼠体内原位移植肿瘤的生长变化,进一步研究SLP-2在食管鳞状细胞癌(鳞癌)发生、发展中的作用。方法采用RNA干扰技术,建立特异性抑制目的基因SLP-2表达和荧光素酶稳定表达的食管鳞癌细胞株(SLP-2-1质粒感染的细胞、SLP-2-2质粒感染的细胞)。将健康雌性裸鼠(体重19-22g)随机分为3组,每组12只,6只用于建立皮下移植瘤,另6只用于建立原位移植瘤模型;组1为SLP-2-1质粒感染的细胞,组2为SLP-2-2质粒感染的细胞,组3为空载质粒(SHGFP)感染的细胞。当某一只裸鼠开始出现体重减轻、一般情况差后为实验终点。在处死原位移植瘤裸鼠前利用活体成像技术检测肿瘤的荧光素酶值(ROI);处死裸鼠后,将原发肿瘤送病理学检查。结果组1与组2的ROI值差异无统计学意义(P=0.943):组1和组2的ROI值均明显低于组3(P=0.002、O.000)。组1、组2和组3移植肿瘤均有侵袭浸润至食管肌层的表现。结论SLP-2参与食管鳞癌的发生、发展过程,降低SLP-2表达可以抑制食管鳞癌的生长。 展开更多
关键词 Stomatin样蛋白2 食管鳞状细胞癌 原位移植动物模型 活体成像
稳定表达荧光素酶基因的TC-1细胞系的构建 预览
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作者 韩笑笑 刘丽雅 +3 位作者 谭超月 李元 高君碧 韩丽萍 《郑州大学学报:医学版》 北大核心 2018年第4期429-432,共4页
目的:通过表达荧光素酶的慢病毒载体感染TC-1细胞株,建立稳定表达荧光素酶的TC-1细胞株。方法:根据荧光素酶基因设计引物,PCR扩增获得目的基因,构建表达荧光素酶的慢病毒载体并包装重组慢病毒,感染TC-1细胞。嘌呤霉素加压筛选,鉴定。... 目的:通过表达荧光素酶的慢病毒载体感染TC-1细胞株,建立稳定表达荧光素酶的TC-1细胞株。方法:根据荧光素酶基因设计引物,PCR扩增获得目的基因,构建表达荧光素酶的慢病毒载体并包装重组慢病毒,感染TC-1细胞。嘌呤霉素加压筛选,鉴定。用双荧光素酶报告基因检测试剂盒及体外成像系统进行荧光素酶活性检测。结果:经检测证实细胞感染及筛选后,成功构建了稳定高表达荧光素酶的TC-1细胞。结论:获得荧光素酶稳定表达的TC-1细胞,转染效果确切,荧光素酶基因表达稳定。 展开更多
关键词 TC-1细胞 荧光素酶 活体成像 生物发光 宫颈癌
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中药消水方对Lewis肺癌小鼠恶性胸腔积液生成及水通道蛋白1表达的影响 预览
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作者 王兵 颜琳琳 +3 位作者 关江锋 胡作为 王珊 侯炜 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第11期1715-1720,共6页
目的 探讨中药消水方对肺癌小鼠恶性胸腔积液及水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法 将45只C57BL/6小鼠随机分为中药组、模型组、空白组。除空白组小鼠胸腔内注射PBS缓冲液外,其余两组小鼠均采用带荧光标记的Lewis肺癌细胞胸腔注射建... 目的 探讨中药消水方对肺癌小鼠恶性胸腔积液及水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法 将45只C57BL/6小鼠随机分为中药组、模型组、空白组。除空白组小鼠胸腔内注射PBS缓冲液外,其余两组小鼠均采用带荧光标记的Lewis肺癌细胞胸腔注射建立动物模型。连续给药10 d,并在第3、8、13天时进行活体成像观察,第14天处死取材,抽取胸腔积液测量体积,采用Real-Time PCR、Western blot法检测各组小鼠壁层胸膜AQP1 mRNA及蛋白表达水平。结果 中药组小鼠胸腔荧光强度明显低于模型组(P<0.05),胸腔积液体积也明显小于模型组(P<0.01);模型组小鼠壁层胸膜AQP1 mRNA及蛋白表达相比于空白组均显著升高(P<0.01);而中药组相比于模型组能显著降低壁层胸膜AQP1 mRNA及蛋白表达水平(P<0.01)。结论 肺癌恶性胸腔积液小鼠胸膜存在AQP1表达的上调,中药消水方可能通过下调壁层胸膜间皮细胞AQP1 mRNA及蛋白表达,从而促进恶性胸腔积液的转运,减少恶性胸腔积液的生成。 展开更多
关键词 肺癌 恶性胸腔积液 消水方 水通道蛋白1 活体成像
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双氰基二苯代乙烯型双光子荧光铅离子探针 预览
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作者 黄池宝 潘淇 +2 位作者 陈华仕 梁兴 吕国岭 《高等学校化学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期897-903,共7页
以4-甲基-2,5-二氰基-4'-氨基二苯代乙烯(DCS)和双[2-(2-氨基苯基硫基)乙基]胺(BSA)分别作为双光子荧光团和铅离子配体,构建了1个新型的双光子荧光Pb2+探针(DPb),并对其结构和性能进行了表征.结果表明,该探针具有分子尺寸小... 以4-甲基-2,5-二氰基-4'-氨基二苯代乙烯(DCS)和双[2-(2-氨基苯基硫基)乙基]胺(BSA)分别作为双光子荧光团和铅离子配体,构建了1个新型的双光子荧光Pb2+探针(DPb),并对其结构和性能进行了表征.结果表明,该探针具有分子尺寸小、双光子吸收截面大(δ(TPA),1020 GM)、长波长发射(λmax=609 nm)、斯托克斯位移大(209 nm)、光稳定性好、水溶性适宜、细胞渗透性优良、无细胞毒性及在生理环境下对p H不依赖等优点.该探针能选择性地检测细胞与组织中的Pb2+,猝灭常数K(TP)(sv)=7.58×10 5L/mol. 展开更多
关键词 双光子荧光探针 铅离子 活体成像 双光子吸收截面
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活血化瘀中药对介孔硅纳米粒小鼠体内分布的影响 预览
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作者 孙娟 吴文瀚 +3 位作者 高丽娜 何凤军 张蕾 乔宏志 《南京中医药大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期19-24,共6页
目的 制备适宜的介孔硅纳米粒(MSNs)并考察活血化瘀中药对介孔硅纳米粒小鼠体内分布的影响。方法 通过Stober方法制备MSNs,调节不同摩尔比例的正硅酸乙酯(TEOS)和氢氧化钠(NaOH),测定MSNs的粒径、多分散系数(PDI)和Zeta电位,筛... 目的 制备适宜的介孔硅纳米粒(MSNs)并考察活血化瘀中药对介孔硅纳米粒小鼠体内分布的影响。方法 通过Stober方法制备MSNs,调节不同摩尔比例的正硅酸乙酯(TEOS)和氢氧化钠(NaOH),测定MSNs的粒径、多分散系数(PDI)和Zeta电位,筛选出适宜的MSNs制备工艺,并对其表面进行氨基修饰得到MSNs-NH_2。通过动态光散射(DLS)、傅里叶转换红外线光谱(FT-IR)和透射电子显微镜(TEM)等技术表征其结构和形貌。取ICR小鼠每日分别灌服川芎、丹参和水蛭煎液,以灌服生理盐水作为空白对照,10d后尾静脉注射Cy7荧光染料标记的MSNs-NH_2,进行活体成像。结果在TEOS与NaOH摩尔比为20时制备的MSNs,经氨基修饰得到MSNs-NH_2粒径为136.8nm,PDI为0.17,Zeta电位为16mV。荧光标记的MSNs-NH_2静注后主要分布于肝脾,3种活血化瘀中药预处理组的荧光强度高于对照组,其中川芎组荧光的达峰时间早于丹参组。静注24h后,川芎组小鼠的肺中显示有荧光,而其他组肺脏无明显荧光。结论 通过调节TEOS和NaOH的摩尔比可以有效调控MSNs的尺度,得到的MSNs-NH_2可作为探针用于研究中药与纳米粒的作用关系;服用活血化瘀中药会影响MSNs-NH_2在小鼠体内的分布位置和分布时间。 展开更多
关键词 介孔硅纳米粒 活血化瘀 活体成像 体内分布 川芎 丹参 水蛭
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用于活体成像裸鼠肺癌肿瘤模型的建立 被引量:1
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作者 范园园 李铁 +10 位作者 陈爽 李一权 荣凤君 李文杰 尹逊哲 韩继成 李善智 李敏 崔传信 李霄 金宁一 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1177-1184,共8页
本研究构建1株能够稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞,并进行生物学特性鉴定及体内成瘤情况验证。将携带有萤火虫荧光素酶基因的pGL4.50质粒转入A549细胞中,利用G418一直加压筛选出能够表达荧光素酶的阳性细胞克隆,并对阳性细胞克隆进... 本研究构建1株能够稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞,并进行生物学特性鉴定及体内成瘤情况验证。将携带有萤火虫荧光素酶基因的pGL4.50质粒转入A549细胞中,利用G418一直加压筛选出能够表达荧光素酶的阳性细胞克隆,并对阳性细胞克隆进行稳定性和体外活体成像检测。测定A549-luc细胞和A549细胞的生长曲线、迁移、侵袭及细胞周期,确定转染前后细胞生物学特性变化。为检测A549-luc细胞在体内成瘤和发光情况,建立裸鼠皮下荷瘤模型并应用小动物活体成像系统观察。结果表明,通过G418一直加压筛选和荧光素酶活性检测,筛选出2株荧光素酶活性高的克隆Clone20和Clone28,并连续传至40代,每5代检测1次荧光素酶活性,最终保留荧光素酶活性和稳定性最高的Clone28,Clone28通过体外活体成像检测显示生物发光值与细胞数目呈正相关的线性关系(R^2=0.9948)。A549-luc细胞和A549细胞具有相似的生长特性、迁移和侵袭能力以及细胞周期。成功建立了裸鼠皮下荷瘤模型,其发光强度与肿瘤体积呈正相关的线性关系(R^2=0.9715)。本研究稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞的构建并成功建立裸鼠皮下荷瘤模型,可通过活体生物成像系统动态监测肿瘤的变化。 展开更多
关键词 A549细胞 荧光素酶 活体成像 裸鼠 肺癌肿瘤模型
GFP/Luc双标食管癌细胞动物模型建立及其活体成像观察 预览
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作者 柏文 彭晓清 +3 位作者 王佩文 鞠前前 史辉 蒋茂荣 《中国比较医学杂志》 北大核心 2018年第11期89-94,共6页
目的 建立绿色荧光蛋白(GFP)/荧光素酶(Luc)双标的人食管癌ECA109细胞系(ECA109-Luc-GFP),采用一种非侵入性的生物活体成像方法监测食管癌裸鼠肿瘤模型。方法 MTT、流式细胞仪、划痕实验分析法检测ECA109-Luc-GFP细胞系与正常ECA109细... 目的 建立绿色荧光蛋白(GFP)/荧光素酶(Luc)双标的人食管癌ECA109细胞系(ECA109-Luc-GFP),采用一种非侵入性的生物活体成像方法监测食管癌裸鼠肿瘤模型。方法 MTT、流式细胞仪、划痕实验分析法检测ECA109-Luc-GFP细胞系与正常ECA109细胞的生物学特性差异。利用活体成像系统示踪肿瘤。结果 与正常ECA109相比,ECA109-Luc-GFP细胞在细胞活力、增殖和迁移能力方面差异均无显著性(P>0.05)。利用小动物活体成像实验技术观察了肿瘤生长、转移等生物学特性。结论 成功构建了GFP/Luc双标的人食管癌ECA109细胞系(ECA109-Luc-GFP),应用小动物活体成像应用技术并活体观察食管癌动物模型的生长、转移。 展开更多
关键词 荧光素酶 食管癌 移植瘤 肿瘤小鼠模型 活体成像
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人脐带间充质干细胞在Balb/c裸鼠体内的分布情况研究 预览
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作者 谢长峰 马炜 +5 位作者 彭浩 杨晓菲 曾桂芳 刘云城 刘沐芸 胡祥 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2018年第1期6-11,共6页
目的研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)在BalB/c裸鼠体内的分布。方法采用DiR标记hUCMSCs,以MTT法检测标记hUCMSCs体外培养的生长增殖,流式细胞术检测标记hUCMSCs的细胞表型,以诱导分化法检测标记hUCMSCs的成骨、成脂、成软骨诱导分化能... 目的研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)在BalB/c裸鼠体内的分布。方法采用DiR标记hUCMSCs,以MTT法检测标记hUCMSCs体外培养的生长增殖,流式细胞术检测标记hUCMSCs的细胞表型,以诱导分化法检测标记hUCMSCs的成骨、成脂、成软骨诱导分化能力,小动物活体成像法检测DiR标记hUCMSCs尾静脉给药后在小鼠体内的分布情况。采用t检验对测得的hUCMSCs增殖数据进行统计分析。结果0,24,48,72,96,120 h MTT法测得的DiR标记hUCMSCs吸光度值与未标记组相比差异无统计学意义,DiR标记对hUCMSCs细胞表型没有明显影响,对其成骨、成脂、成软骨多向诱导分化能力没有影响,DiR标记hUCMSCs尾静脉给药后,荧光首先分布于肺脏,随时间逐渐迁移至肝脏和脾脏,最终归巢和分布于肝脏、脾脏和肺脏,荧光强度肝脏>脾脏>肺脏,随时间逐渐减弱,至4周时动物肝脏、脾脏和肺脏仍有荧光存在。结论DiR标记不影响hUCMSCs体外增殖、细胞表型表达和多向诱导分化能力,DiR标记hUCMSCs尾静脉注射后首先分布在肺脏,存在明显的首过效应,然后逐渐迁移至肝脏和脾脏,主要分布和归巢在肝脏、脾脏和肺脏。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 分布 归巢 活体成像
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荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建 预览
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作者 钟杨城 陆盼盼 +8 位作者 王亚楠 姜正涛 杨辛毅 杨鹤 潘含雨 赵琳 李博康 周牧涯 朱焕章 《复旦学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第6期725-731,共7页
目前建立的淋巴瘤动物模型大多是通过裸鼠皮下注射淋巴瘤细胞得到的,通过游标卡尺测量肿瘤大小,存在测量数据误差大,不能发现微小病灶,小鼠模型不适应于评估嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法等问题.本研究旨在通过慢病毒载体导入荧光素酶基... 目前建立的淋巴瘤动物模型大多是通过裸鼠皮下注射淋巴瘤细胞得到的,通过游标卡尺测量肿瘤大小,存在测量数据误差大,不能发现微小病灶,小鼠模型不适应于评估嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法等问题.本研究旨在通过慢病毒载体导入荧光素酶基因,经嘌呤霉素筛选得到稳定表达荧光素酶的Raji细胞(Raji-luc+),细胞生物发光强度与细胞数量成正比,NOD-Prkdc^em26Cd52Il2rg^em26Cd22/Nju(NCG)免疫缺陷小鼠尾静脉注射Raji-luc+(1×10^6)细胞,通过活体成像仪连续检测,发现注射Raji-luc+细胞后发光强度逐渐增强,意味着淋巴瘤细胞在小鼠体内逐渐增殖和扩散,并建立生存曲线.这些数据表明成功建立了荧光素酶标记的淋巴瘤小鼠模型. 展开更多
关键词 淋巴瘤 RAJI细胞 荧光素酶 活体成像 NCG 嵌合抗原受体T细胞
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双氰基二苯代乙烯型双光子荧光汞离子探针 预览 被引量:2
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作者 黄池宝 潘淇 +4 位作者 陈晓远 赵光练 陈华仕 梁兴 吕国岭 《高等学校化学学报》 CSCD 北大核心 2017年第10期1751-1756,共6页
分别以双氰基二苯代乙烯(DCS)和双[2-(2-羟乙基硫基)乙基]氨(HSA)为双光子荧光团和汞离子受体,合成了双光子荧光汞离子探针(DHg),并对其结构进行了分析.实验结果表明,DHg在甲苯、乙腈和水中的荧光量子产率(Φ)分别为0.78,0.42... 分别以双氰基二苯代乙烯(DCS)和双[2-(2-羟乙基硫基)乙基]氨(HSA)为双光子荧光团和汞离子受体,合成了双光子荧光汞离子探针(DHg),并对其结构进行了分析.实验结果表明,DHg在甲苯、乙腈和水中的荧光量子产率(Φ)分别为0.78,0.42和0.20,对汞离子的络合常数通过单、双光子荧光滴定分别拟合为lg K=5.47±0.02和lg K=5.34±0.02.DHg在水溶液中对汞离子具有优良的选择性和高的灵敏性,可用于中性环境中汞离子的检测.DHg的双光子吸收截面(δTPA)在水溶液中高达840 GM,可用于细胞中汞离子的检测与成像. 展开更多
关键词 双光子荧光探针 汞离子 活体成像 双光子吸收截面
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近红外荧光蛋白和荧光素酶双标记肝细胞癌移植裸鼠模型的建立 被引量:1
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作者 李红俊 杨天华 +5 位作者 黄艳平 刘明珠 秦中强 储菲 李正红 李永海 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1529-1533,1538共6页
目的建立一种基因稳定表达,可实时监测肿瘤生长的肝癌移植瘤裸鼠模型。方法构建带有荧光素酶(Luc)和近红外荧光蛋白(iRFP)和嘌呤霉素抗性基因的慢病毒,并感染HepG2肝癌细胞系,筛选得到稳定表达Luc和iRFP基因的细胞系;将细胞接种到... 目的建立一种基因稳定表达,可实时监测肿瘤生长的肝癌移植瘤裸鼠模型。方法构建带有荧光素酶(Luc)和近红外荧光蛋白(iRFP)和嘌呤霉素抗性基因的慢病毒,并感染HepG2肝癌细胞系,筛选得到稳定表达Luc和iRFP基因的细胞系;将细胞接种到裸鼠皮下,建立肝癌HepG2细胞移植瘤模型。利用小鼠活体成像系统检测肿瘤的生长情况,并通过HE染色及免疫组织化学染色评估肿瘤组织病理特征及成瘤能力。结果成功构建稳定表达iRFP和Luc的HepG2肝癌细胞系并建立移植瘤动物模型;模型生长周期适中,成瘤率较高;HE染色及免疫组织化学染色表现出典型的肿瘤组织病理特征。结论成功建立了稳定、可实时监测的HepG2-iRFP-Luc肝癌细胞裸鼠模型。 展开更多
关键词 肝癌 荧光 活体成像 移植肿瘤模型
利用活体成像技术研究海茸β-1,3/1,6-葡聚糖在小鼠体内的分布 预览
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作者 赵小亮 刘曦 +5 位作者 杨忆 蔡超 吕友晶 李国云 郝杰杰 于广利 《高等学校化学学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1368-1374,共7页
以海茸β-1,3/1,6-葡聚糖(DAG)为研究对象,首先经还原胺化反应在DAG还原端引入功能氨基,再将其与N-羟基丁二酰亚胺(NHS)活化的荧光染料(Cy7)偶联,获得Cy7标记的DAG分子;利用小动物活体成像技术研究了DAG在小鼠体内的分布.... 以海茸β-1,3/1,6-葡聚糖(DAG)为研究对象,首先经还原胺化反应在DAG还原端引入功能氨基,再将其与N-羟基丁二酰亚胺(NHS)活化的荧光染料(Cy7)偶联,获得Cy7标记的DAG分子;利用小动物活体成像技术研究了DAG在小鼠体内的分布.结果表明,DAG在小鼠体内主要分布于肺、肝和肾,具有靶向小鼠肺部和通过肾排泄的特点.该方法简便、数据可靠,为多糖和寡糖的体内分布与代谢研究提供了参考. 展开更多
关键词 Β-1 3/1 6-葡聚糖 荧光标记 活体成像 组织分布
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