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多房棘球蚴感染对小鼠肝脾淋巴细胞及其亚群的影响 认领
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作者 章宁 张传山 +5 位作者 李智德 李亮 王慧 谭雅超 尚琳琳 温浩 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期30-35,共6页
目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量... 目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量多房棘球蚴原头节的混悬液,采用门静脉注射法建立多房棘球蚴感染小鼠模型,对照组注射等量生理盐水。感染后4周,每组各取4只小鼠,取肝脏组织,常规Masson染色,观察病理变化。剩余4只小鼠取肝脏和脾脏,制备肝、脾细胞悬液,流式细胞术检测肝、脾CD3^+T细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4^+CD69^+T细胞、CD8^+CD69^+T细胞绝对数以及初始型CD4^+T (CD4^+Tn)细胞、效应记忆性CD4^+T (CD4^+Tem)细胞、初始型CD8^+T (CD8^+Tn)细胞、效应记忆性CD8^+T(CD8^+Tem)细胞和中心记忆性CD8^+T(CD8^+Tcm)细胞比例的变化。检测数据采用Flow-Jo软件分析,并做流式图。采用Graphad Prism 7.0软件进行作图和统计学分析。结果感染后4周,对照组小鼠肝无明显变化,低、中数量组小鼠肝组织出现急性炎症反应减弱,部分病灶炎性反应逐渐转变为纤维化修复,形成小肉芽肿结节,呈点状或灶状坏死。高数量组小鼠肝内出现小囊泡,可见生发层结构,周围大量炎性细胞浸润。小鼠肝CD3^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(4.10±0.04)×10^5、(3.81±0.14)×10^5、(3.02±0.12)×10^5、(2.98±0.03)×10^5,高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠脾CD3^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(16.01±0.40)×10^5、(11.03±1.21)×10^5、(10.10±1.01)×10^5、(9.71±0.90)×10^5,高数量组高于其他3组(P<0.01)。小鼠肝CD4^+T、CD8^+T细胞和脾B细胞、CD8^+T绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4^+CD69^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(3.23±0.10)×10^4、(1.98±0.11)×10^4、(1.51±0.26)×10^4� 展开更多
关键词 多房棘球蚴 T淋巴细胞 早期 流式细胞术
重组家蚕素Ⅱ促进HepG2细胞的增殖作用 认领
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作者 吴雷 王玲玲 孙博谦 《北华大学学报:自然科学版》 CAS 2020年第1期50-52,共3页
目的探讨重组家蚕素基因(MBbxⅡ)稳定转染HepG2细胞后对细胞的生物学作用.方法将MBbxⅡ基因稳定转染于HepG2细胞中,以转染空质粒及未进行转染的HepG2细胞作为空白对照组,分别应用MTT方法检测细胞生长率,流式细胞术检测细胞周期.结果稳... 目的探讨重组家蚕素基因(MBbxⅡ)稳定转染HepG2细胞后对细胞的生物学作用.方法将MBbxⅡ基因稳定转染于HepG2细胞中,以转染空质粒及未进行转染的HepG2细胞作为空白对照组,分别应用MTT方法检测细胞生长率,流式细胞术检测细胞周期.结果稳定转染MBbxⅡ基因的HepG2细胞增殖能力增强,且细胞多处于G2和S期.结论 MBbxⅡ促进了HepG2细胞增殖,可为研究MBbxⅡ在哺乳动物细胞中的胰岛素样作用奠定基础. 展开更多
关键词 家蚕素 稳定转染 HEPG2 MTT 流式细胞术
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骨髓调节性T细胞在脑梗死患者的表达及与预后的相关性研究 认领
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作者 王浩 张天宇 +2 位作者 滕艳萍 郑宵阳 许德超 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期606-610,617共6页
目的:探讨骨髓调节性T细胞在脑梗死患者中的表达及与预后的相关性。方法:①骨髓调节性T细胞表达。选择2017年5月~2018年3月治疗的脑梗死患者78例作为对象,设为观察组;选择同期治疗的骨髓穿刺者61例,设为对照组。采用流式细胞术(FCM)检... 目的:探讨骨髓调节性T细胞在脑梗死患者中的表达及与预后的相关性。方法:①骨髓调节性T细胞表达。选择2017年5月~2018年3月治疗的脑梗死患者78例作为对象,设为观察组;选择同期治疗的骨髓穿刺者61例,设为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测两组骨髓中Treg所占CD+T细胞数的百分比;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)完成两组白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)浓度;②治疗与预后的相关性。观察组患者均给予常规方法治疗,根据阿托伐他汀剂量分为高剂量组与低剂量组,治疗1个月后评估疗效,治疗后对患者进行6个月随访,完成两组骨髓调节性T细胞测定;采用SPSS Pearson相关性分析软件对骨髓调节性T细胞与脑梗死患者预后进行相关性分析。结果:①观察组脑梗死患者骨髓中Treg所占CD+T细胞数的百分比(3.15±0.69)%、IL-10(30.14±4.51)ng/L及TGF-β1(93.41±7.92)ng/L水平,均低于对照组(t=29.4911、53.1751、53.7731,P均=0.05);②观察组脑梗死患者中轻度患者骨髓中Treg所占CD+T细胞数的百分比、IL-10及TGF-β1水平,均高于中度与重度患者(P<0.05);中度患者骨髓中Treg所占CD+T细胞数的百分比、IL-10及TGF-β1水平,均高于重度患者(P<0.05);③观察组中高剂量组45例,低剂量组33例,高剂量组Treg细胞(10.59±2.15)%、IL-10(69.42±3.51)ng/L、TGF-β1水平为(196.84±13.24)ng/L,均高于低剂量组(t=6.9126、36.9220、24.0747,P均=0.00);④脑梗死患者治疗后进行6个月随访,23例患者死亡,55例患者取得良好预后。SPSS Pearson相关性分析结果表明:脑梗死患者治疗预后与Treg细胞、IL-10、TGF-β1水平均呈正相关性(P<0.05)。结论:骨髓调节性T细胞在脑梗死患者中呈低表达,能参与疾病发展,且与预后呈正相关性,给予高剂量阿托伐他汀有助于改善患者治疗预后,调节骨髓调节性T细胞水平。 展开更多
关键词 骨髓调节性T细胞 脑梗死 T淋巴细胞 FOXP3基因 流式细胞术 酶联免疫吸附试验 治疗预后
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多参数流式细胞术在急性髓细胞白血病患者微小残留病监测中的临床应用及其研究进展 认领
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作者 金焱 汪安友 刘欣 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2020年第2期160-164,共5页
急性髓细胞白血病(AML)是一种具有高度异质性的血液系统恶性肿瘤,大部分AML成年患者经治疗可达到完全缓解(CR),然而相当一部分患者在3~5年内复发。由于微小残留病(MRD)与AML患者复发风险增加,以及生存期缩短有关,因此需要通过有效手段对... 急性髓细胞白血病(AML)是一种具有高度异质性的血液系统恶性肿瘤,大部分AML成年患者经治疗可达到完全缓解(CR),然而相当一部分患者在3~5年内复发。由于微小残留病(MRD)与AML患者复发风险增加,以及生存期缩短有关,因此需要通过有效手段对AML患者进行治疗后MRD监测。多参数流式细胞术(MFC)是一种基于白血病相关免疫表型(LAIP)的MRD检测方法,具有高灵敏度、高性价比,以及实时、快速等优点,适用于绝大部分AML患者,被广泛应用于临床实践中。笔者拟就目前应用MFC监测AML患者MRD的原理及策略、优势及临床意义、面临的挑战及其临床应用的促进方法等进行综述。 展开更多
关键词 白血病 髓样 急性 流式细胞术 免疫表型分型 复发 微小残留病
多参数流式细胞术免疫表型分析在多发性骨髓瘤诊疗中的应用 认领
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作者 林阳 万岁桂 《肿瘤学杂志》 CAS 2020年第2期102-105,共4页
随着多发性骨髓治疗方法快速发展,对于该病的诊断、微小残留病灶监测及预后的判断有了越来越多的方式及方法,多参数流式细胞术免疫表型分析,通过细胞免疫表型的异质性及胞内轻链的克隆性,能够准确、客观的鉴别出良性及恶性浆细胞比例以... 随着多发性骨髓治疗方法快速发展,对于该病的诊断、微小残留病灶监测及预后的判断有了越来越多的方式及方法,多参数流式细胞术免疫表型分析,通过细胞免疫表型的异质性及胞内轻链的克隆性,能够准确、客观的鉴别出良性及恶性浆细胞比例以及抗原表达水平,不仅为多发性骨髓瘤患者的诊断提供依据,同时能够追踪患者的微小残留病灶,这对预测多发性骨髓瘤患者的预后密切相关,全文将对多参数流式细胞术免疫表型分析在多发性骨髓瘤诊断、微小残留病灶监测及预后方面进行综述。 展开更多
关键词 流式细胞术 免疫表型 多发性骨髓瘤 诊断 微小残留病灶
抗体类药物的生物分析方法研究概况 认领
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作者 郑逢佳 贾志君 +2 位作者 谢新遥 韩敏 董立厚 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2020年第2期227-232,共6页
抗体类药物因其靶向性、高度特异性、低毒性等优点成为临床治疗众多疾病的首选药物,但在生物体内的处置机制有其特殊性和复杂性,极大地增加了生物检测的难度,因此必须建立灵敏、准确、可重复的测定方法。本文主要针对该类药物的生物分... 抗体类药物因其靶向性、高度特异性、低毒性等优点成为临床治疗众多疾病的首选药物,但在生物体内的处置机制有其特殊性和复杂性,极大地增加了生物检测的难度,因此必须建立灵敏、准确、可重复的测定方法。本文主要针对该类药物的生物分析方法,介绍酶联免疫吸附分析、电化学发光技术、液质联用技术、流式细胞术以及一些新技术方法的特点和应用概况,以期为研究此类药物提供参考。 展开更多
关键词 单克隆抗体 生物分析方法 液质联用技 流式细胞术
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流式细胞术优化MDCK细胞基因转染效率的研究 认领
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作者 王家敏 王美皓 +5 位作者 马玉梅 靳冬武 赵彩红 李自良 乔自林 马忠仁 《西北民族大学学报:自然科学版》 2020年第1期16-20,共5页
为探究脂质体介导的MDCK细胞基因转染效率,并获得最佳的优化方案,本研究选取不同配比的质粒和脂质体浓度,将p-EGFP-C1质粒转入MDCK细胞.转染后36 h,利用台盼蓝染色法检测细胞活率,流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达... 为探究脂质体介导的MDCK细胞基因转染效率,并获得最佳的优化方案,本研究选取不同配比的质粒和脂质体浓度,将p-EGFP-C1质粒转入MDCK细胞.转染后36 h,利用台盼蓝染色法检测细胞活率,流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况和转染效率,获得优化的转染条件.结果发现,转染后MDCK细胞,实验组细胞活力与阴性对照组差异不显著(P>0.05).当质粒(μg)∶脂质体(μL)浓度配比为0.5∶1.0、0.5∶1.25、0.5∶1.5时,转染率达到了较高水平,分别为(23.4±3.4)%、(24.5±4.5)%、(25.2±3.7)%,从经济因素考虑,脂质体介导的MDCK细胞基因转染质粒(μg)与脂质体(μL)的最佳配比浓度为0.5∶1.0.这为MDCK细胞用于基因转染提供了一定的理论基础. 展开更多
关键词 MDCK细胞 基因转染 脂质体 流式细胞术
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流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义 认领
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作者 金莹 《中国医药指南》 2020年第1期71-72,共2页
目的观察分析流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义。方法选取本院(在2017年2月至2018年1月)搜集的87例急性白血病患者一般资料,所有急性白血病患者均采用流式细胞术加以诊断,采用单激光三色流式细胞仪进行相应检测。采用统计学分... 目的观察分析流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义。方法选取本院(在2017年2月至2018年1月)搜集的87例急性白血病患者一般资料,所有急性白血病患者均采用流式细胞术加以诊断,采用单激光三色流式细胞仪进行相应检测。采用统计学分析87例急性白血病患者的免疫分型。结果 87例急性白血病患者中有50例骨髓性白血病患者(占57.47%),29例淋巴细胞白血病患者(占33.33%),8例(占9.20%),各组数据比较有统计学意义(P <0.05);50例骨髓性白血病中有33例纯骨髓性患者(占66.00%)、17例My阳性混合型(占34.00%),29例淋巴性白血病中有12例纯淋巴性患者(占41.38%)、17例My阳性混合型(占58.62%),各组数据比较有统计学意义(P<0.05)。结论流式细胞术能够显著提高急性白血病免疫分型的临床诊断率。 展开更多
关键词 流式细胞术 急性白血病 免疫分型 临床意义
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CFSE标记法分析番鸭呼肠孤病毒感染对番鸭回肠淋巴细胞归巢的影响 认领
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作者 李明慧 廖吕燕 +6 位作者 刘珍妮 严萍 朱正 吴春琳 李健 黄一帆 吴异健 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期159-169,共11页
旨在建立一种可靠的体外活番鸭淋巴细胞的荧光标记方法,并用于分析番鸭呼肠孤病毒感染对雏番鸭回肠淋巴细胞归巢的影响。选择活细胞荧光染剂5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE,CFSE)对分离的番鸭淋巴细胞进行标记和利用流式细... 旨在建立一种可靠的体外活番鸭淋巴细胞的荧光标记方法,并用于分析番鸭呼肠孤病毒感染对雏番鸭回肠淋巴细胞归巢的影响。选择活细胞荧光染剂5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE,CFSE)对分离的番鸭淋巴细胞进行标记和利用流式细胞术对体外标记的淋巴细胞体内示踪检测分析,并利用该方法对MDRV感染雏番鸭回肠组织的淋巴细胞数量进行流式细胞术和石蜡切片免疫荧光检测分析;结果最终确定CFSE体外标记番鸭淋巴细胞的条件为以PBS为孵育液,终浓度10μmol·L^-1,37℃30 min;试验结果表明番鸭外周血内的CFSE+淋巴细胞率基本稳定在2%~5%,CFSE^+淋巴细胞峰值出现顺序依次为脾、空肠、回肠、盲肠、十二指肠、法氏囊和胸腺;此外,感染MDRV后1~10 d MDRV组中CFSE+淋巴细胞率极显著(P<0.01)高于MOCK组,该结果与α4+淋巴细胞率和石蜡切片免疫荧光检测结果一致。结果表明本试验CFSE标记的淋巴细胞可用于体内淋巴细胞示踪,初步应用结果提示MDRV感染促进番鸭淋巴细胞向回肠归巢,为进一步阐明MDRV感染的肠道组织致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯 番鸭 淋巴细胞 流式细胞术 归巢
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河南地区健康儿童淋巴细胞亚群参考区间的建立 认领
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作者 孟祥颖 石瑛 +2 位作者 李松磊 李静 贾莉婷 《江苏预防医学》 CAS 2020年第1期39-43,共5页
目的建立适合河南地区年龄、性别相关的健康儿童淋巴细胞亚群参考区间。方法采用多阶段分层整群随机抽样的方法,抽取河南省5个地市1 027名<7岁健康儿童,分婴儿组(4~12月龄,n=45)、幼儿组(1~3岁,n=190)和学龄前组(3~7岁,n=792)进行研... 目的建立适合河南地区年龄、性别相关的健康儿童淋巴细胞亚群参考区间。方法采用多阶段分层整群随机抽样的方法,抽取河南省5个地市1 027名<7岁健康儿童,分婴儿组(4~12月龄,n=45)、幼儿组(1~3岁,n=190)和学龄前组(3~7岁,n=792)进行研究。用流式细胞术双平台法检测淋巴细胞亚群百分比和绝对计数。结果学龄前组不同性别健康儿童之间,淋巴细胞免疫亚群CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+、CD4^+/CD8^+和CD3^+CD16^+CD56^+百分比差异均有统计学意义(P值均<0.01),绝对计数CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+、CD3^+CD16^+CD56^+差异均有统计学意义(P值均<0.01);不同年龄组健康儿童之间淋巴细胞亚群百分比和绝对计数差异均有统计学意义(P值均<0.01)。与国内已发表的淋巴细胞亚群百分比相关文献比较,相同年龄段淋巴细胞亚群相对计数参考区间明显不同。结论年龄、性别影响健康儿童淋巴细胞亚群的分布,本研究可为建立河南省健康学龄前儿童年龄和性别相关的淋巴细胞亚群参考区间提供依据。 展开更多
关键词 儿童 淋巴细胞亚群 参考区间 流式细胞术
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高危型HPV感染不孕症女性患者外周血淋巴细胞亚群水平 认领
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作者 李燕华 周少雄 薛家权 《广东医学》 CAS 2020年第3期257-260,共4页
目的通过检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染不孕症女性患者外周血淋巴细胞亚群水平,探讨其免疫功能状态。方法选取妇产科就诊的70例高危型HPV感染[其中24例合并解脲脲原体(UU)感染]的不孕症女性患者为观察组,年龄22~45岁;另选取同期的70... 目的通过检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染不孕症女性患者外周血淋巴细胞亚群水平,探讨其免疫功能状态。方法选取妇产科就诊的70例高危型HPV感染[其中24例合并解脲脲原体(UU)感染]的不孕症女性患者为观察组,年龄22~45岁;另选取同期的70例HPV检测阴性的不孕症女性患者为对照组,年龄22~44岁。研究对象于就诊时,采集静脉血采用流式细胞仪检测外周血中淋巴细胞亚群水平,采集宫颈细胞采用FQ-PCR法检测HPV16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和82共17高危亚型,采集阴道分泌物采用培养法检测生殖道支原体。结果观察组较对照组外周血NK细胞比例显著降低[(12.39±5.87)%vs(16.79±6.12)%,P<0.05],CD3^+细胞比例显著增高[(73.87±6.36)%vs(69.53±7.17)%,P<0.05],B细胞[(12.64±3.51)%vs(12.80±3.76)%]、CD4^+细胞[(38.51±6.00)%vs(37.37±4.59)%]、CD8^+细胞[(28.21±5.92)%vs(27.47±4.59)%]和CD4^+/CD8^+比值(1.45±0.47 vs 1.39±0.25)差异无统计学意义(P>0.05)。χ^2检验表明,观察组中CD4^+/CD8^+比值≤1.1或≥1.9(参考区间1.0~2.0)的异常比例(41.43%)较对照组(10.00%)有非常显著性升高(P<0.01)。观察组中合并UU感染24例(合并感染率34.29%),与单一HPV感染组(未合并UU感染)外周血NK细胞、B细胞、CD3^+、CD4^+细胞、CD8^+细胞和CD4^+/CD8^+比值相比差异均无统计学意义(P>0.05)。合并UU感染组CD4^+/CD8^+比值异常比例(45.83%)较单一HPV感染组(37.00%)稍高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论高危型HPV感染女性不孕症患者存在免疫功能紊乱,主要表现为CD3^+细胞比例增高,NK细胞比例降低和CD4^+/CD8^+比值异常,该紊乱与不孕之间是否存在因果联系有待进一步研究阐明。在本研究的例数范围内,未发现合并UU感染能协同增强高危型HPV感染女性不孕症患者存在的免疫功能紊乱。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 淋巴细胞亚群 女性不孕症 流式细胞术
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基于流式细胞术的海菜花属植物基因组大小测定 认领
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作者 严东莹 李艳 +2 位作者 孙文礼 陈进明 李治中 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期173-180,共8页
利用改良的裂解液P1,以中国古代莲(Nelumbo nucifera Gaertn.Fruct.et Semin)为外标,采用流式细胞术(FCM)对海菜花属(Ottelia Pers.)6个代表性物种及3个存疑类群的基因组大小(C值)进行测定,并对海菜花属系统发育关系进行评估。结果显示... 利用改良的裂解液P1,以中国古代莲(Nelumbo nucifera Gaertn.Fruct.et Semin)为外标,采用流式细胞术(FCM)对海菜花属(Ottelia Pers.)6个代表性物种及3个存疑类群的基因组大小(C值)进行测定,并对海菜花属系统发育关系进行评估。结果显示:所测定的材料中,水菜花(Ottelia cordata(Wall.)Dandy)C值最小(6.759 pg),灌阳水车前(O.guanyangensis Z.Z.Li,S.Wu&Q.F.Wang)C值最大(12.929 pg);对基因组大小与该属系统发育树进行比较分析,结果发现该属植物基因组大小与系统发育关系具有一致性;对海菜花属3个存疑类群进行分子系统学研究,结果发现存疑类群与嵩明海菜花(Ottelia acuminata var.songmingensis Z.T.Jiang,H.Li&Z.L.Dao)及灌阳水车前的关系最近,而与水菜花的关系较远,这与基因组大小变异相一致。根据基因组大小进一步推测3个存疑类群很可能为二倍体。本研究结果可为海菜花属植物的系统学研究提供新资料,同时为该属植物基因组学研究提供基础数据。 展开更多
关键词 海菜花属 基因组大小 系统发育 流式细胞术
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流式细胞术在CAR-T细胞治疗中的应用进展 认领
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作者 李成功 梅恒 胡豫 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期329-332,共4页
嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)是通过基因工程技术将自体或异体T细胞改造成针对肿瘤特异性抗原的新型杀伤细胞,具有特异性强、效率高、非MHC限制等优点,在复发/难治性血液系统肿瘤和部分实体瘤中取得了良... 嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)是通过基因工程技术将自体或异体T细胞改造成针对肿瘤特异性抗原的新型杀伤细胞,具有特异性强、效率高、非MHC限制等优点,在复发/难治性血液系统肿瘤和部分实体瘤中取得了良好的治疗效果。CAR-T细胞制备流程包括细胞分离和纯化、活化和分化、基因修饰、体外扩增、表型质控、保存和回输。近年来,随着流式细胞术的迅速发展,使其广泛应用于CAR-T细胞治疗的各个环节,包括治疗前筛查、体外制备和回输后监测,并在其创新优化过程中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 流式细胞术 CAR-T细胞 治疗前筛查 细胞制备 回输后监测
三种细胞形态学分析方法在体外微核检测中的比较研究 认领
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作者 孙静秋 帅怡 +3 位作者 肖萍 郑卫东 王彦琴 陶功华 《上海预防医学》 CAS 2020年第1期78-83,88共7页
【目的】探讨基于流式细胞术(FCM)和细胞高内涵筛选技术(HCS)的两种高通量体外微核试验方法应用于化学品遗传毒性评价的可行性。【方法】参考经济合作与发展组织(OECD)TG487推荐的程序方法,采用化学品遗传毒性评价的典型阳性剂环磷酰胺(... 【目的】探讨基于流式细胞术(FCM)和细胞高内涵筛选技术(HCS)的两种高通量体外微核试验方法应用于化学品遗传毒性评价的可行性。【方法】参考经济合作与发展组织(OECD)TG487推荐的程序方法,采用化学品遗传毒性评价的典型阳性剂环磷酰胺(CP)、丝裂霉素C(MMC)为受试物,CP剂量范围为5~20 mg/L,MMC剂量范围为0.25~1.0 mg/L,分别设3个剂量组,短时处理(4 h)体外培养的CHL细胞模型,分别建立基于FCM和HCS的高通量体外微核测试方法。平行采用传统胞质分裂阻断微核法,在加/不加代谢活化系统条件下,检测各剂量组细胞的微核形成情况,并分析微核细胞率。实验同步设置阴性对照组(无血清MEM培养液)。【结果】经常规人工显微镜阅片和高通量方法的FCM及HCS得到的CP、MMC体外微核试验结果均为阳性:经CP诱导产生的微核细胞率(CP浓度由低到高)依次为1.9%、7.6%、10.4%(人工阅片),2.8%、2.6%、7.8%(FCM),2.8%、6.2%、9.1%(HCS);经MMC诱导产生的微核细胞率(MMC浓度由低到高)依次为5.9%、11.4%、16.7%(人工阅片),3.2%、3.7%、5.1%(FCM),7.9%、10.1%、10.2%(HCS)。受试物各剂量组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),且呈现剂量-反应关系。【结论】在本试验条件下,流式细胞术、高内涵体外微核检测的方法与传统人工阅片的方法得到的检测结果均一致,提示体外微核高通量方法可以实现细胞微核形成的自动化检测,提高检测效率,可为将高通量体外微核测试方法纳入化学品遗传毒性评价相关标准提供数据支持。 展开更多
关键词 体外微核 高通量 流式细胞术 高内涵筛选
抗O型口蹄疫病毒猪源单链抗体的筛选 认领
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作者 李德山 胡爽 +5 位作者 赵文漾 李青青 郭笑辰 王丹 任桂萍 尹杰超 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期42-49,共8页
为获得抗O型口蹄疫病毒(FMDV)高亲和力猪源单链抗体(scFv),建立抗原抗体(Ag-Ab)共表达细菌展示文库,抗原为FMDV结构蛋白VP1、抗体为高免猪抗体文库。采用细菌展示与流式细胞术结合方法,筛选出14株抗FMDV的scFv。将筛选获得scFv构建至pET... 为获得抗O型口蹄疫病毒(FMDV)高亲和力猪源单链抗体(scFv),建立抗原抗体(Ag-Ab)共表达细菌展示文库,抗原为FMDV结构蛋白VP1、抗体为高免猪抗体文库。采用细菌展示与流式细胞术结合方法,筛选出14株抗FMDV的scFv。将筛选获得scFv构建至pET28a载体中,经E.coli Rosetta表达,目的蛋白长度约为30 ku,与scFv分子质量相符。Western blot结果表明,14株scFv均可与VP1特异性结合。ELISA结果表明,14株scFv均可与灭活O型FMDV特异性结合。应用共表达细菌展示技术,可避免抗原制备,简化操作流程,适用范围广泛;应用流式细胞仪筛选抗体库,可实现准确、快速、高通量筛选。抗FMDV猪源scFv研究可填补同源基因工程抗体空白,为进一步筛选中和抗体奠定基础。 展开更多
关键词 口蹄疫 单链抗体 细菌展示 流式细胞术
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乙型肝炎患者外周血中免疫细胞检测的临床意义 认领
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作者 丁建平 侯远沛 《实验与检验医学》 CAS 2020年第2期377-379,共3页
目的分析乙型肝炎患者免疫细胞的表达水平与患者年龄、HBeAg以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量的关系,探讨其临床应用价值。方法选取2016年1月-10月于本院确诊为乙型肝炎患者173例、同期于本院体检中心的健康对照者40例,分别检测外周血中AL... 目的分析乙型肝炎患者免疫细胞的表达水平与患者年龄、HBeAg以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量的关系,探讨其临床应用价值。方法选取2016年1月-10月于本院确诊为乙型肝炎患者173例、同期于本院体检中心的健康对照者40例,分别检测外周血中ALT、HBeAg含量以及CD4+、CD8+、B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)的绝对数,对检测结果进行回顾性分析。结果乙型肝炎患者与健康对照组相比,除B淋巴细胞表达无显著性差异外(t=1.81,P=0.07),CD4+、CD8+、NK细胞的表达均显著降低(t=4.47,4.21,2.72;P=0.00,0.00,0.01);年龄≥56岁的乙型肝炎患者CD4+、CD8+细胞的表达水平显著低于年龄≤35岁的年轻患者(t=2.30,3.38;P=0.02,0.00),B、NK细胞差异不明显(t=0.87,0.71;P=0.38,0.48);ALT≥200(μ/L)的乙型肝炎患者与ALT<200(μ/L)的患者相比,CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量显著增加(t=2.49,2.36;P=0.01,0.02),B、NK细胞差异不明显(t=0.59,0.18;P=0.56,0.86);HBeAg阳性的乙型肝炎患者CD4+、CD8+T淋巴细胞的表达水平显著高于HBeAg阴性患者(t=2.13,2.17;P=0.03,0.03),B、NK细胞差异不明显(t=1.30,0.49;P=0.19,0.63)。结论乙型肝炎患者尤其是老年患者免疫细胞的含量下降,CD4+、CD8+淋巴细胞的表达水平与肝细胞的损伤程度以及HBeAg的表达相关。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 T淋巴细胞 自然杀伤细胞 流式细胞术
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外周血CD64指数对非瓣膜性心房颤动病人左心房血栓形成的预测价值 认领
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作者 徐建辉 李朋 +4 位作者 杨海珍 李屏 胡威 李雪玉 陈硕 《安徽医药》 CAS 2020年第2期304-307,共4页
目的探讨外周血CD64指数对非瓣膜性心房颤动(Non-Valvular Atrial fibrillation,NVAF)病人左心房血栓形成的预测价值。方法选取2014年1月至2018年1月于武汉科技大学附属孝感医院收治的怀疑存在左心房血栓的NVAF病人280例作为研究对象,... 目的探讨外周血CD64指数对非瓣膜性心房颤动(Non-Valvular Atrial fibrillation,NVAF)病人左心房血栓形成的预测价值。方法选取2014年1月至2018年1月于武汉科技大学附属孝感医院收治的怀疑存在左心房血栓的NVAF病人280例作为研究对象,根据食管心脏超声(TEE)检查结果,分为血栓组(53例)和非血栓组(227例)。记录两组病人一般临床资料及相关实验室检查等指标,分析NVAF病人左心房血栓形成的独立危险因素,绘制受试者工作曲线(ROC)分析外周血CD64指数对NVAF病人左心房血栓形成的预测价值。结果血栓组病人外周血CD64指数显著高于非血栓组病人,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,房颤病程、卒中风险评分(CHADS2评分、CHA2DS2-VASc评分)及CD64指数是病人左心房血栓形成的独立危险因素;相关性分析显示,血栓组病人CD64指数水平与CHADS2评分、CHA2DS2-VASc评分呈正相关(CHADS2评分:r=0.930,P<0.0001;CHA2DS2-VASc评分:r=0.920,P<0.0001)。ROC曲线分析显示,外周血CD64指数曲线下面积为0.852(95%CI:0.736~0.932),其最佳工作点为6.3,此时预测左心房血栓形成的灵敏度和特异度分别为84.8%和85.3%。结论外周血CD64指数在NVAF并发左心房血栓形成的病人中明显升高,其可作为左心房血栓形成的独立危险因素,对于评估NVAF并发左心房血栓形成,具有的一定的临床运用价值。 展开更多
关键词 心房颤动 血栓形成 心房 超声心动描记 经食管 中性白细胞 受体 IgG 流式细胞术 CD64指数 非瓣膜性心房颤动 CHADS2评分 CHA2DS2-VASc评分
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流式细胞术检测在多发性骨髓瘤中对骨髓细胞表面免疫表型的鉴别诊断价值 认领
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作者 李凯 《山西医药杂志》 CAS 2020年第10期1215-1216,共2页
目的 探讨流式细胞术检测在多发性骨髓瘤中对骨髓细胞表面免疫表型的鉴别诊断价值.方法 收集我院2017年4月至2019年3月收治的52例多发性骨髓瘤患者作为观察组,选取同期于我院治疗的34例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者作为对照组,所有... 目的 探讨流式细胞术检测在多发性骨髓瘤中对骨髓细胞表面免疫表型的鉴别诊断价值.方法 收集我院2017年4月至2019年3月收治的52例多发性骨髓瘤患者作为观察组,选取同期于我院治疗的34例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者作为对照组,所有入选者均采用流式细胞技术进行骨髓细胞表面免疫表型检查,对比2组骨髓细胞表面免疫表型荧光强度,分析骨髓瘤患者流式细胞术检查结果.结果 观察组CD19荧光强度较对照组低,CD38、CD138荧光强度较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);CD19阳性率为0;CD38阳性率为100%,属强表达;CD45阳性表达率为4%,属弱表达;CD56阳性率为31%,属高表达;CD138阳性率为100%,属强表达.结论 流式细胞术检测在多发性骨髓瘤中对骨髓细胞表面免疫表型的鉴别诊断价值较高,值得临床推广应用. 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 免疫表型分型 骨髓细胞 流式细胞术
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流式细胞术检测芜菁倍性与相对DNA含量方法 认领
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作者 贾凯 吴慧 +3 位作者 高杰 李雯雯 刘迁杰 杨洁 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1929-1934,共6页
为探究合适的解离液类型用于流式细胞术检测芜菁倍性与相对DNA含量,明确新疆地区主栽芜菁品种的DNA含量和倍性,同时检测游离小孢子培养所获得的再生植株倍性。本研究选取‘阿恰芜菁’、‘温州盘菜’及小孢子培养所获得的再生植株群体为... 为探究合适的解离液类型用于流式细胞术检测芜菁倍性与相对DNA含量,明确新疆地区主栽芜菁品种的DNA含量和倍性,同时检测游离小孢子培养所获得的再生植株倍性。本研究选取‘阿恰芜菁’、‘温州盘菜’及小孢子培养所获得的再生植株群体为试验材料,在常用的10种解离液中筛选适合芜菁的解离液类型。LB01适合作为流式细胞术检测芜菁样品的最适解离液。以四倍体紫花苜蓿‘金皇后’为外标,检测芜菁的DNA含量及倍性后发现‘温州盘菜’的DNA含量为0.657 pg,倍性为二倍体。‘阿恰芜菁’的DNA含量为0.723 pg,倍性为二倍体。小孢子再生群体Ⅰ的DNA含量为0.626 pg,倍性为二倍体。小孢子再生群体Ⅱ的DNA含量为2.225 pg,倍性为四倍体。本研究为流式细胞术检测芜菁倍性和DNA含量的方法提供了数据参考,也将为芜菁群体变异、种质资源评价和新品种选育等研究提供基础。 展开更多
关键词 流式细胞术 芜菁(Brassica rapa) 倍性 DNA含量
初诊多发性骨髓瘤患者CD28、CD34及CD117的表达水平及临床意义 认领
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作者 林火真 马春蓉 《标记免疫分析与临床》 CAS 2020年第4期582-585,594共5页
目的探究初诊多发性骨髓瘤(MM)患者CD28、CD34、CD117表达水平及与病情、预后的关系。方法选择2014年3月至2018年12月我院收治的101例初诊MM患者纳入研究,收集患者临床资料及预后情况,采用四色流式细胞术检测患者CD28、CD34、CD117表达... 目的探究初诊多发性骨髓瘤(MM)患者CD28、CD34、CD117表达水平及与病情、预后的关系。方法选择2014年3月至2018年12月我院收治的101例初诊MM患者纳入研究,收集患者临床资料及预后情况,采用四色流式细胞术检测患者CD28、CD34、CD117表达水平。结果(1)101例MM患者共检出42例(41.58%)CD28阳性,35例(34.65%)CD34阳性,40例(39.60%)CD117阳性;瘤细胞表面CD28、CD117表达与MM患者DS分期、骨质破坏相关(P<0.05),CD28与MM患者β2-MG相关(P<0.05),CD34与β2-MG水平相关(P<0.05)。(2)入组患者随访时间为8~60个月,中位随访时间为32个月,CD28阳性表达组患者生存时间显著短于CD28阴性表达组患者(P<0.05),CD117阳性表达组患者生存率显著高于阴性表达组(P<0.05),CD34表达情况与患者预后情况无相关(P>0.05)。(3)COX多因素分析显示在矫正其他因素后,瘤细胞表面CD28阳性、CD117表达阴性是MM患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论CD28、CD117等表面免疫抗原表达情况与初诊MM患者临床症状及预后相关,可作为评估患者病情及预后的参考指标。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 初诊 免疫抗原 流式细胞术
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