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骆越壮酒对正常小鼠免疫功能的影响 预览
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作者 李耀燕 张曼 +4 位作者 闫国跃 白燕远 杜俊芳 谢阳姣 李彤 《中国中医药科技》 CAS 2019年第2期185-188,共4页
目的:观察骆越壮酒对正常小鼠免疫功能的影响。方法:小鼠灌胃不同剂量的骆越壮酒28 d后,采用绵羊红细胞(SRBC)诱导小鼠迟发型超敏反应(足跖增厚法)以及ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)检测细胞免疫功能;采用抗体生成细胞(PFC)和... 目的:观察骆越壮酒对正常小鼠免疫功能的影响。方法:小鼠灌胃不同剂量的骆越壮酒28 d后,采用绵羊红细胞(SRBC)诱导小鼠迟发型超敏反应(足跖增厚法)以及ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)检测细胞免疫功能;采用抗体生成细胞(PFC)和血清溶血素测定方法测定体液免疫情况;以小鼠碳廓清实验和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测定单核巨噬细胞免疫功能。结果:骆越壮酒可显著促进小鼠的迟发型超敏反应和脾淋巴细胞的增值能力(P<0.01);显著提高SRBC免疫后的正常小鼠抗体生成细胞(PFC)数量和血清溶血素含量(P<0.01);显著提高小鼠碳廓清吞噬指数和腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数(P<0.01)。结论:骆越壮酒对正常小鼠特异性和非特异性免疫机能均有显著的调节作用。 展开更多
关键词 骆越壮酒 免疫功能 迟发型超敏反应 淋巴细胞增殖 抗体生成细胞 血溶血素 碳廓清实验 吞噬率和吞噬指数 小鼠
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黄芩汤对支气管哮喘大鼠外周血淋巴细胞CaN活性与淋巴细胞增殖及气道炎症影响
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作者 张毓娴 李静 +1 位作者 齐薛浩 王凤 《四川中医》 2019年第4期44-47,共4页
目的:探讨黄芩汤对支气管哮喘大鼠外周血淋巴细胞钙调神经磷酸酶(CaN)活性与淋巴细胞增殖及气道炎症影响。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠30只,随机数字表法将大鼠分成三组,模型组(10只)、中药组(10只)与正常组(10只),模型组和中药组大... 目的:探讨黄芩汤对支气管哮喘大鼠外周血淋巴细胞钙调神经磷酸酶(CaN)活性与淋巴细胞增殖及气道炎症影响。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠30只,随机数字表法将大鼠分成三组,模型组(10只)、中药组(10只)与正常组(10只),模型组和中药组大鼠制备哮喘模型,末次给药后将麻醉,取腹部正中切口,采集静脉抗凝血8ml,流式细胞术检测其细胞周期变化,CaN试剂盒检测其活性,ELISA法检测血清IL-4、IL-2含量,并大鼠取右肺叶使用蒸馏水冲洗,甲醛固定,常规包埋切片后行HE染色。结果:模型组大鼠G0/G1期淋巴细胞含量较正常组显著降低,S及G2/M期较正常组显著升高,中药组大鼠G0/G1期淋巴细胞含量较模型组显著升高,S及G2/M期较模型组显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠CaN活性、IL-4含量较正常组显著升高,IL-2含量较正常组显著降低,中药组大鼠CaN活性、IL-4含量较模型组显著降低,IL-2含量较模型组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芩汤可使支气管哮喘大鼠淋巴细胞CaN活性及血清IL-4含量降低,抑制淋巴细胞增殖,使气道炎症反应减轻。 展开更多
关键词 支气管哮喘 大鼠模型 炎症因子 淋巴细胞增殖 黄芩汤
不同刺激剂对淋巴细胞中PD-1与TIM3蛋白表达的影响 预览
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作者 李凌 来芳芳 +3 位作者 杜婷婷 张森 刘盈 陈晓光 《中国医药生物技术》 2019年第2期127-135,共9页
目的研究不同刺激剂对人外周血淋巴细胞中 PD-1 与TIM3 蛋白表达的影响。方法采用密度离心法分离人外周血淋巴细胞,并通过Western blot 检测在抗 CD3/CD28 抗体、PHA、SEB、ConA4 种不同刺激剂下人外周血淋巴细胞 PD-1 与 TIM3 总蛋白... 目的研究不同刺激剂对人外周血淋巴细胞中 PD-1 与TIM3 蛋白表达的影响。方法采用密度离心法分离人外周血淋巴细胞,并通过Western blot 检测在抗 CD3/CD28 抗体、PHA、SEB、ConA4 种不同刺激剂下人外周血淋巴细胞 PD-1 与 TIM3 总蛋白的变化情况,并通过流式细胞技术检测 4 种刺激条件下T 淋巴细胞及其 CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+亚群膜表面的PD-1 与 TIM3 的改变。结果 Western blot 结果显示,4 种刺激剂均能刺激总的PD-1 蛋白的表达,减少总 TIM3 蛋白的表达。流式细胞分析仪结果显示,在 4 种刺激剂作用下,人外周血 T 淋巴细胞表面及其 CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T 细胞亚群膜表面的PD-1 与 TIM3 蛋白表达均呈现升高趋势。结论 4 种常见刺激剂均可诱导总 PD-1 蛋白和细胞膜上PD-1 蛋白的表达,降低 TIM3 总蛋白的表达以及诱导淋巴细胞表面 TIM3 蛋白的表达。其中 PHA 较其他 3 种刺激剂展现出较好的剂量关系。 展开更多
关键词 程序性细胞死亡受体1 T细胞免疫球蛋白黏液素3 淋巴细胞增殖 流式细胞
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螺旋藻多糖铁(Ⅲ)配合物的制备、抗氧化及淋巴细胞增殖活性
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作者 张喜峰 崔晶 +2 位作者 王文琴 罗光宏 杨生辉 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1097-1103,共7页
以三氯化铁为原料,通过络合反应,对螺旋藻多糖(SP)进行结构修饰,制得有机铁化合物〔螺旋藻多糖铁(Ⅲ)配合物SP-Fe(Ⅲ)〕。采用FTIR、DSC、TGA、XRD和SEM对其结构进行了表征,采用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基法、羟自由基法等5... 以三氯化铁为原料,通过络合反应,对螺旋藻多糖(SP)进行结构修饰,制得有机铁化合物〔螺旋藻多糖铁(Ⅲ)配合物SP-Fe(Ⅲ)〕。采用FTIR、DSC、TGA、XRD和SEM对其结构进行了表征,采用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基法、羟自由基法等5种方法和MTT(四唑盐)法分析了SP和SP-Fe(Ⅲ)的抗氧化活性和淋巴细胞增殖活性的影响。制备的SP-Fe(Ⅲ)中Fe(Ⅲ)质量分数为16.42%±1.17%。采用5轴蛛网图对SP-Fe(Ⅲ)的抗氧化活性进行了综合评价。结果表明,SP-Fe(Ⅲ)相比SP具有较高的抗氧化活性。在模拟人工胃液消化后,随着消化时间的延长,在pH=6.8的人工肠液中释放出的Fe(Ⅲ)质量分数达到83.64%;在31.25×10–3 g/L的质量浓度下,与SP相比,SP-Fe(Ⅲ)配合物对淋巴细胞增殖提高了44.35%。 展开更多
关键词 多糖铁(Ⅲ)配合物 抗氧化 淋巴细胞增殖 生物工程
水貂阿留申病的危害及防控对策 预览
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作者 曲文燕 李永芳 《山东畜牧兽医》 2019年第2期76-77,共2页
水貂阿留申病是由阿留申病毒感染水貂引起的以终生毒血症、全身淋巴细胞增殖、肾小球肾炎为特征的一种慢性病毒病。各品系水貂都可以感染,是世界公认的水貂的三大疫病之一。该病既可以通过飞沫、粪便、尿液、血液、配种等水平传播,又可... 水貂阿留申病是由阿留申病毒感染水貂引起的以终生毒血症、全身淋巴细胞增殖、肾小球肾炎为特征的一种慢性病毒病。各品系水貂都可以感染,是世界公认的水貂的三大疫病之一。该病既可以通过飞沫、粪便、尿液、血液、配种等水平传播,又可以通过母婴垂直传播。 展开更多
关键词 水貂阿留申病 防控 危害 淋巴细胞增殖 病毒感染 肾小球肾炎 水平传播 垂直传播
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芪板青颗粒对雏鸡免疫功能的作用研究 预览
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作者 张传津 尹玲玲 +1 位作者 张志民 陆庆泉 《畜牧兽医杂志》 2019年第3期18-21,共4页
用芪板青颗粒对疫苗免疫后的鸡进行试验,以分析其功能作用。结果表明,芪板青颗粒药物高、中剂量组、散剂对照组和药物对照组在多数时间点的血清ND和IBD抗体效价、淋巴细胞增殖、血清IFN-γ和IL-2含量及免疫器官指数高于或显著高于免疫... 用芪板青颗粒对疫苗免疫后的鸡进行试验,以分析其功能作用。结果表明,芪板青颗粒药物高、中剂量组、散剂对照组和药物对照组在多数时间点的血清ND和IBD抗体效价、淋巴细胞增殖、血清IFN-γ和IL-2含量及免疫器官指数高于或显著高于免疫对照组和药物低剂量组(P?0.05),药物高、中剂量组和散剂对照组的增重效果显著优于免疫对照组、药物对照组和药物低剂量组(P?0.05)。表明芪板青颗粒高、中剂量具有较好增强免疫作用。 展开更多
关键词 芪板青颗粒 抗体效价 淋巴细胞增殖 IFN-γ和IL-2含量 雏鸡
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甘草黄酮抗氧化及免疫活性
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作者 张福欣 宋佳烜 +1 位作者 刘晓东 单虎 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1180-1183,共4页
为了研究甘草黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定甘草总黄酮的抗氧化活性,通过测定不同浓度的甘草总黄酮刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、小鼠脾脏淋巴细胞抗体形成的影响,研究甘草... 为了研究甘草黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定甘草总黄酮的抗氧化活性,通过测定不同浓度的甘草总黄酮刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、小鼠脾脏淋巴细胞抗体形成的影响,研究甘草黄酮的免疫调节作用。结果显示,甘草黄酮对DPPH自由基清除率为25%,对超氧阴离子自由基清除率为79.07%,对羟基自由基清除率为29.51%。各试验组小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力均显著高于对照组;IL-2水平试验中,各试验组均显著高于对照组,试验3组极显著高于对照组,显著高于1,2组;在IgG抗体水平分析中,甘草黄酮各试验组均极限著高于对照组。说明甘草黄酮具有较好的抗氧化及免疫活性。 展开更多
关键词 甘草黄酮 抗氧化活性 淋巴细胞增殖 IL-2 IGG抗体
缺铁性贫血患儿淋巴细胞体外增殖及细胞因子分泌水平研究
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作者 胡洪波 郭虹 +2 位作者 石祖亮 秦柳 李雪梅 《中国儿童保健杂志》 CAS 2019年第7期786-788,共3页
目的评估铁缺乏对患儿淋巴细胞增殖功能及细胞因子分泌水平的影响,初步探讨缺铁性贫血(IDA)导致儿童免疫功能下降的原因。方法 2018年3月4日-2018年4月28日选取IDA患儿和健康体检患儿各20例,作为IDA组和正常对照组,MTT比色法检测两组儿... 目的评估铁缺乏对患儿淋巴细胞增殖功能及细胞因子分泌水平的影响,初步探讨缺铁性贫血(IDA)导致儿童免疫功能下降的原因。方法 2018年3月4日-2018年4月28日选取IDA患儿和健康体检患儿各20例,作为IDA组和正常对照组,MTT比色法检测两组儿童T、B淋巴细胞在10、20、50μmol/L铁浓度培养液下淋巴细胞体外刺激指数(SI),ELISA法检测两组儿童在不同铁浓度培养液下单个核细胞(PBMC) INF-γ、IL-2、IL-6、IL-10的分泌水平。结果 1)对照组20μmol/L铁浓度培养液下B、T淋巴细胞SI值高于其他浓度组,且高于同浓度组IDA患儿,IDA组在给予生理浓度铁补充下SI值有所升高;2)IDA组各铁浓度下INF-γ、IL-2分泌水平均显著低于对照组,同组中20μmol/L浓度组显著高于10μmol/L浓度组;3)IDA组10、20μmol/L浓度组IL-6、IL-10分泌水平均显著高于对照组。结论 IDA患儿T、B淋巴细胞增殖功能障碍以及细胞因子分泌水平的改变可能是导致患儿免疫功能失衡,免疫力下降的原因之一。 展开更多
关键词 缺铁性贫血 淋巴细胞增殖 细胞因子 儿童
茶树油提取物粉对小鼠免疫功能的影响 预览
9
作者 庞艳华 郝福星 +4 位作者 韩玲玲 韦芊含 赵泽婷 陈昕 张雨梅 《中国兽药杂志》 2019年第3期72-78,共7页
研究茶树油提取物粉对小鼠免疫功能的影响,为茶树油产品的研发及作为畜禽养殖添加剂的应用积累资料。茶树油提取物粉对小鼠的经口急性毒性LD50﹥5000 mg/kg b.w.。茶树油提取物粉分别以1250、250、50 mg/kg b.w.灌胃给予连续10 d,分别... 研究茶树油提取物粉对小鼠免疫功能的影响,为茶树油产品的研发及作为畜禽养殖添加剂的应用积累资料。茶树油提取物粉对小鼠的经口急性毒性LD50﹥5000 mg/kg b.w.。茶树油提取物粉分别以1250、250、50 mg/kg b.w.灌胃给予连续10 d,分别进行腹腔巨噬细胞吞噬活性和脾淋巴细胞增殖试验,测定免疫器官指数、血清溶血素水平及外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群水平。结果表明茶树油提取物粉高、中、低剂量组能极显著增加小鼠脾脏指数(P<0.01),中剂量能显著增加肝脏指数和胸腺指数(P<0.05)。中、高剂量能显著提高腹腔巨噬细胞吞噬活性和血清溶血素水平(P<0.05)。三个剂量组均能显著提高小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激指数(P<0.05)。中剂量组能显著增加小鼠CD4+/CD8+比值(P<0.05)。因此,茶树油提取物粉在一定程度上能够提高小鼠细胞免疫和体液免疫,具有增强小鼠免疫功能的作用。 展开更多
关键词 茶树油提取物 小鼠 免疫功能 淋巴细胞增殖 血清溶血素 巨噬细胞吞噬
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Ghrelin在哺乳动物免疫系统中的作用研究进展 预览
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作者 程玲玲 刘婷宇 +4 位作者 李莉莉 裴辰辰 李任峰 马金友 余燕 《动物医学进展》 北大核心 2019年第8期89-92,共4页
Ghrelin是一种具有多种生物学功能的生长激素释放肽,近年来其在哺乳动物免疫系统中的作用研究日益丰富,而在禽类免疫系统中的研究相对较少。论文就Ghrelin在调节哺乳动物淋巴细胞增殖、细胞因子分泌、炎症及组织损伤等方面的研究进展进... Ghrelin是一种具有多种生物学功能的生长激素释放肽,近年来其在哺乳动物免疫系统中的作用研究日益丰富,而在禽类免疫系统中的研究相对较少。论文就Ghrelin在调节哺乳动物淋巴细胞增殖、细胞因子分泌、炎症及组织损伤等方面的研究进展进行了综述,同时将禽类Ghrelin在免疫系统中的研究与之进行比较,为深入探索禽类Ghrelin在免疫系统中的功能及机制提供参考。 展开更多
关键词 GHRELIN 免疫系统 细胞因子 炎症 损伤 淋巴细胞增殖
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黄党银淫甘组方对鸡免疫器官指数和淋巴细胞增殖的影响 预览
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作者 李美莹 宋依 +5 位作者 王艳萍 闫伊狄 杜航 臧静楠 李敬双 于洋 《现代畜牧兽医》 2018年第10期7-11,共5页
为了探讨黄芪、党参、银杏外种皮、淫羊藿和甘草(简称黄党银淫甘)组方对鸡免疫功能的影响,本研究用1日龄健康海兰褐公鸡雏,设空白对照组、阳性对照组、25、50和100 g/L黄党银淫甘组。自由采食、饮水,按常规免疫程序进行免疫。1日龄在... 为了探讨黄芪、党参、银杏外种皮、淫羊藿和甘草(简称黄党银淫甘)组方对鸡免疫功能的影响,本研究用1日龄健康海兰褐公鸡雏,设空白对照组、阳性对照组、25、50和100 g/L黄党银淫甘组。自由采食、饮水,按常规免疫程序进行免疫。1日龄在阳性对照组饮水中按50 mg/L加入左旋咪唑,25、50和100 g/L黄党银淫甘组饮水中分别按25、50和100 g/L加入黄党银淫甘。在28日龄,采用称重法检测黄党淫银甘对胸腺指数、法氏囊指数和脾指数的影响;采用MTT法检测黄党银淫甘对脾淋巴细胞增殖的影响。结果显示,黄党银淫甘能够提高鸡胸腺、法氏囊和脾刺激指数,促进鸡脾淋巴细胞增殖。表明黄党银淫甘能够提高鸡的免疫功能。 展开更多
关键词 中药 免疫器官指数 淋巴细胞增殖
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复方中药组方对鸡新城疫疫苗免疫增强效果的研究 预览
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作者 魏恒 李娟娟 《陕西农业科学》 2018年第11期48-51,共4页
为研究黄芪、党参、仙鹤草、茯苓、金银花、黄芩、板蓝根、甘草8味中药组成的复方中药组方对鸡新城疫疫苗的免疫增效作用。将14日龄非免疫海兰褐蛋雏鸡400羽随机分为5组,第1组为空白对照组,第2组为疫苗对照组,第3~5组为试验组。除空白... 为研究黄芪、党参、仙鹤草、茯苓、金银花、黄芩、板蓝根、甘草8味中药组成的复方中药组方对鸡新城疫疫苗的免疫增效作用。将14日龄非免疫海兰褐蛋雏鸡400羽随机分为5组,第1组为空白对照组,第2组为疫苗对照组,第3~5组为试验组。除空白对照组外,其余各组雏鸡均在14日龄时首免鸡新城疫活疫苗(Clone30株),28日龄时重复免疫;在首次免疫同时,第3~5组试验组饮水中加入复方中药组方提取液,添加量分别为0.5%,1%和2%,连用14d。然后分别于免疫前和免疫后7、14、21、28和35d,各组随意挑5羽鸡进行采血,用HA-HI试验(微量法)方法测定鸡新城疫抗体效价,MTT法测定外周血淋巴细胞增殖效果;免疫后35d,各组随意挑5羽鸡,称取体重、剖杀、摘取法氏囊和脾脏并称重,测定法氏囊指数和脾脏指数。结果显示饮水中添加1%复方中药组方提取液的试验组抗体效价、外周血淋巴细胞增殖、法氏囊指数和脾脏指数均明显高于免疫对照组。研究结果表明由黄芪、党参、仙鹤草、茯苓、金银花、黄芩、板蓝根、甘草8味中药组成的复方中药组方提取液对鸡新城疫疫苗具有免疫增效作用。 展开更多
关键词 中药组方 鸡新城疫 抗体效价 淋巴细胞增殖 免疫器官指数
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口蹄疫病毒样颗粒活化的肥大细胞对淋巴细胞的调节作用
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作者 梁慧婷 赵骏楠 +5 位作者 田晓云 李平 杨路达 常枨 李丽敏 王家鑫 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第10期1214-1221,共8页
为探讨负载口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的肥大细胞对脾初始淋巴细胞增殖的影响,收集小鼠腹腔肥大细胞(pMCs),以VLPs负载的pMCs为对照组,以丹参酮ⅡA处理后再负载VLPs的pMCs为试验组,不做任何处理的pMCs为空白组。6 h后收集各组pMCs上清... 为探讨负载口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的肥大细胞对脾初始淋巴细胞增殖的影响,收集小鼠腹腔肥大细胞(pMCs),以VLPs负载的pMCs为对照组,以丹参酮ⅡA处理后再负载VLPs的pMCs为试验组,不做任何处理的pMCs为空白组。6 h后收集各组pMCs上清液,分别作用于脾初始淋巴细胞,用CCK-8试剂盒检测淋巴细胞增殖,并对pMCs进行甲苯胺蓝染色,观察脱颗粒现象。结果显示,VLPs刺激pMCs可引起明显的脱颗粒,pMCs上清液对脾总淋巴细胞的增殖具有一定的促进作用。丹参酮ⅡA可抑制VLPs诱导的pMCs脱颗粒,并降低pMCs上清液促进淋巴细胞增殖的作用,但VLPs刺激pMCs后的上清液对脾T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用,丹参酮ⅡA处理组pMCs的上清液使脾T淋巴细胞增殖进一步降低。结果表明,VLPs诱导的pMCs脱颗粒产物具有促进脾初始淋巴细胞增殖的作用,但其分泌成分则对脾T淋巴细胞增殖具有抑制作用。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒样颗粒 肥大细胞 丹参酮ⅡA 淋巴细胞增殖
甘肃棘豆黄酮抗氧化活性及免疫活性的研究 预览 被引量:1
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作者 张福欣 宋佳烜 刘晓东 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第12期3387-3394,共8页
为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2(IL-2)和免疫球... 为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2(IL-2)和免疫球蛋白G(IgG)抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示,甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%,略高于维生素E(28.55%),低于维生素C(97.05%);对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%,高于维生素E(69.70%),低于维生素C(98.69%);对羟基自由基清除率最高为30.39%,低于维生素C(98.98%)、略低于维生素E(32.57%)。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中,随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高,脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高,当其浓度为200μg/mL时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%;200μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组(P〈0.01),50和100μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异(P>0.05);各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组(P<0.01),其中,50μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200μg/mL甘肃棘豆黄酮组(P<0.01),100μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200μg/mL甘肃棘豆黄酮组(P<0.01)。综上所述,甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。 展开更多
关键词 甘肃棘豆黄酮 抗氧化活性 免疫活性 淋巴细胞增殖 IGG抗体
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CCK-8法在淋巴细胞增殖检测中最佳实验条件的筛选 预览 被引量:3
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作者 王瑾 马肖容 张王刚 《中国医药导报》 CAS 2018年第23期13-16,共4页
目的筛选CCK-8法在淋巴细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法采用正交实验设计,对初始细胞浓度、培养时间、LPS浓度、显色时间这4个主要因素各水平对人外周血单个核细胞(PBMC)和小鼠脾细胞增殖的影响进行试验研究,对各实验组合测得的... 目的筛选CCK-8法在淋巴细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法采用正交实验设计,对初始细胞浓度、培养时间、LPS浓度、显色时间这4个主要因素各水平对人外周血单个核细胞(PBMC)和小鼠脾细胞增殖的影响进行试验研究,对各实验组合测得的刺激指数进行方差分析。结果 CCK-8检测人PBMC增殖试验的最佳条件:初始细胞浓度为2.5×10~6/mL,培养时间为48 h,LPS浓度为1μg/mL,加入CCK-8后孵育4.5 h;检测小鼠脾细胞增殖试验的最佳条件:初始细胞浓度为5.0×10~6/mL,培养时间为48 h,LPS浓度为1μg/mL,加入CCK-8后孵育4.5 h。结论 CCK-8法便捷、灵敏、重复性好,可作为检测淋巴细胞增殖的稳定方法。本研究建立的CCK-8最佳实验条件可为免疫调节作用的药物体外筛选和免疫药理学作用的研究提供依据。 展开更多
关键词 CCK-8 PBMC 淋巴细胞增殖 正交实验
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蓝莓花色苷对小鼠淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的免疫调节作用 预览 被引量:1
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作者 刘玉晨 李敬双 于洋 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第19期296-301,共6页
为探讨蓝莓花色苷对淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。无菌分离淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,制备淋巴细胞和腹腔巨噬细胞悬液,以终浓度为4、8、16、32、64 mg/m L的蓝莓花色苷作用于体外培养的淋巴细胞(48 h)和腹腔巨噬细胞(24 h)... 为探讨蓝莓花色苷对淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。无菌分离淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,制备淋巴细胞和腹腔巨噬细胞悬液,以终浓度为4、8、16、32、64 mg/m L的蓝莓花色苷作用于体外培养的淋巴细胞(48 h)和腹腔巨噬细胞(24 h),采用MTT法检测蓝莓花色苷对淋巴细胞增殖率及中性红吞噬实验检测腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,ELISA法检测蓝莓花色苷对淋巴细胞(IL-6白细胞介素-6)、(TNF-α肿瘤坏死因子-α)和腹腔巨噬细胞(IL-4白细胞介素-4)、(IL-12白细胞介素-12)分泌的影响。结果显示,蓝莓花色苷各浓度组淋巴细胞增殖率、腹腔巨噬细胞的吞噬活性、培养上清中淋巴细胞IL-6、TNF-α及腹腔巨噬细胞IL-12的分泌高于空白组(p 〈0.05),各浓度组与阳性组腹腔巨噬细胞IL-4分泌量均低于空白对照组(p 〈0.05)。蓝莓花色苷可能通过促进淋巴细胞增殖和提高腹腔巨噬细胞吞噬及分泌功能,提高机体免疫功能。 展开更多
关键词 蓝莓花色苷 淋巴细胞增殖 巨噬细胞吞噬 细胞因子 免疫调节
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玉米赤霉烯酮对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖的影响 预览 被引量:6
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作者 蔡国栋 孙凯 +7 位作者 项自来 王玲 邹辉 顾建红 袁燕 刘学忠 刘宗平 卞建春 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第7期1357-1364,共8页
为揭示镰刀菌毒素之一的玉米赤霉烯酮(ZEA)的免疫抑制作用机制,作者拟研究ZEA对刀豆蛋白A(Con A)介导的小鼠离体T淋巴细胞体外活化、增殖的影响。以Con A作为T淋巴细胞活化刺激剂,以不同浓度ZEA(0、10、20、40μmol·L^(-1)... 为揭示镰刀菌毒素之一的玉米赤霉烯酮(ZEA)的免疫抑制作用机制,作者拟研究ZEA对刀豆蛋白A(Con A)介导的小鼠离体T淋巴细胞体外活化、增殖的影响。以Con A作为T淋巴细胞活化刺激剂,以不同浓度ZEA(0、10、20、40μmol·L^(-1))染毒处理细胞后,利用流式细胞术检测T淋巴细胞早期活化标志CD69分子及中期活化标志CD25分子表达情况,用CCK-8法检测T淋巴细胞的增殖情况。结果显示:细胞分别培养48、72、96h后,Con A组与细胞空白组相比均产生了明显的刺激增殖效应(P〈0.01)。与Con A对照组相比,ZEA染毒可明显抑制Con A刺激引起的T淋巴细胞的增殖作用。除10μmol·L^(-1) ZEA组在72和96h时间段差异显著外(P〈0.05),其余染毒组在各时间段均差异极显著(P〈0.01),并呈浓度-效应关系。细胞加入Con A分别活化6、30h后,Con A组与细胞空白组相比,早期活化分子CD69和中期活化分子CD25明显升高,提示细胞发生明显的活化效应。与Con A对照组相比,当ZEA染毒浓度为10μmol·L^(-1)时,T细胞早期活化标志分子CD69和中期活化分子CD25的表达明显抑制,差异均极显著(P〈0.01),当ZEA浓度为20、40μmol·L^(-1)时,CD69和CD25的表达进一步抑制(P〈0.01),并呈剂量依赖性。研究结果表明,ZEA对动物免疫抑制作用的产生与其可直接抑制对小鼠T淋巴细胞的活化和增殖有关。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 T淋巴细胞增殖 T淋巴细胞活化 Con A CCK-8 流式细胞 CD69 CD25
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CCK-8法检测小鼠淋巴细胞增殖的条件探讨 被引量:6
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作者 王园园 谭小燕 +3 位作者 胡明华 马方励 黄芝瑛 梁金强 《药物评价研究》 CAS 2017年第2期206-209,共4页
目的探索CCK-8法检测小鼠脾淋巴细胞增殖的最佳条件。方法采用交叉设计或两因素完全随机设计探索分裂素刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)刺激的脾细胞增殖实验的细胞制备方法、细胞浓度、分裂素浓度、刺激时间、培养基中胎牛血清(FBS... 目的探索CCK-8法检测小鼠脾淋巴细胞增殖的最佳条件。方法采用交叉设计或两因素完全随机设计探索分裂素刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)刺激的脾细胞增殖实验的细胞制备方法、细胞浓度、分裂素浓度、刺激时间、培养基中胎牛血清(FBS)浓度、是否预培养等条件。结果制备方法中以轻压制备的脾细胞增殖率高于轻磨;脾细胞浓度以5×10^6/m L为最佳;ConA浓度为2、5、10μg/m L,LPS浓度为10、20、50μg/m L细胞增殖率未见明显差异;刺激时间在48和72 h间脾细胞增殖率未见明显差异;用含10%、15%和20%FBS的培养基培养的脾细胞增殖率未见明显差异;制备的脾细胞当天刺激比第二天刺激增殖率更高。结论 ConA和LPS刺激的Balb/C小鼠脾细胞增殖实验的最佳条件为,轻压制备脾细胞,脾细胞浓度为5×10^6/m L,制备当天直接种板,ConA的刺激浓度为2-10μg/m L,LPS的刺激浓度为10-50μg/m L。 展开更多
关键词 CCK-8 淋巴细胞增殖 细胞制备 刀豆蛋白 脂多糖
Compound 48/80活化的肥大细胞对树突状细胞归巢的影响 预览
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作者 任书荣 王秋波 +3 位作者 张艳丽 路翠秀 李文丽 胡文娟 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期1146-1151,共6页
目的:检测compound 48/80(C48/80)活化的肥大细胞对树突状细胞(DC)向局部引流淋巴结迁移的影响,初步探讨C48/80增强适应性免疫应答的机制。方法:体外培养C57BL/6小鼠骨髓来源的DC(BM-DC)和MC/9肥大细胞,Transwell趋化小室实验检... 目的:检测compound 48/80(C48/80)活化的肥大细胞对树突状细胞(DC)向局部引流淋巴结迁移的影响,初步探讨C48/80增强适应性免疫应答的机制。方法:体外培养C57BL/6小鼠骨髓来源的DC(BM-DC)和MC/9肥大细胞,Transwell趋化小室实验检测C48/80处理的MC/9细胞对BM-DC向趋化因子CCL21迁移的影响。甲苯胺蓝染色法检测小鼠肩背部皮肤注射C48/80后肥大细胞脱颗粒状态;流式细胞术检测肩上和腋窝淋巴结CD11c+DC的数量。小鼠肩背部两侧各注射荧光微球标记的BM-DC,制备局部引流淋巴结冷冻切片,荧光显微镜观察C48/80处理对外源性DC归巢的影响。采用负载卵白蛋白的BM-DC(OVA-DC)免疫C48/80处理及对照小鼠,WST-8试剂检测局部引流淋巴结淋巴细胞的增殖活性。结果:采用小鼠骨髓细胞成功培养并获得大量典型的BM-DC。MC/9肥大细胞活化上清可促进BM-DC向CCL21迁移(P〈0.01)。皮内注射C48/80后30 min可诱导局部皮肤明显肥大细胞脱颗粒。C48/80注射部位24 h出现明显炎细胞浸润,局部引流淋巴结细胞总数和DC细胞数量增多。注射荧光微球标记的BM-DC后48 h淋巴结冷冻切片显示C48/80处理侧荧光阳性的DC细胞数量明显多于C48/80未处理侧。OVA-DC免疫小鼠显示C48/80处理组抗原特异性淋巴细胞增殖能力较对照组明显增高(P〈0.05)。结论:C48/80诱导的肥大细胞活化能够促进DC向局部引流淋巴结归巢,增强特异性淋巴细胞增殖能力,参与适应性免疫应答。 展开更多
关键词 肥大细胞 COMPOUND 48/80 树突状细胞归巢 淋巴细胞增殖
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多糖-硒化多糖复方增强鸡免疫功能的比较研究 预览 被引量:1
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作者 刘宽辉 田卫军 +6 位作者 高珍珍 候冉冉 岳婵娟 王德云 刘家国 武毅 胡元亮 《南京农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期521-528,共8页
[目的]验证多糖-硒化多糖复方的增强免疫活性,筛选出活性最强的复方,为研制新型免疫增强剂提供试验依据。[方法]在前期研究筛选出增强免疫活性较强的当归多糖(CAP)、党参多糖(CPP)、大蒜多糖(GP)、硒化当归多糖(sCAP)、硒化党... [目的]验证多糖-硒化多糖复方的增强免疫活性,筛选出活性最强的复方,为研制新型免疫增强剂提供试验依据。[方法]在前期研究筛选出增强免疫活性较强的当归多糖(CAP)、党参多糖(CPP)、大蒜多糖(GP)、硒化当归多糖(sCAP)、硒化党参多糖(sCPP)和硒化大蒜多糖(s GP)的基础上,以其为组分药,按照多糖与硒化多糖质量比9∶1的比例组成CAP-sCPP、CAP-s GP、CPP-sCAP、CPP-s GP、GP-sCAP和GP-sCPP共6个复方,比较它们的体内/外增强免疫活性能力。体外试验,用MTT法测定6个复方对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响;体内试验,进一步比较了筛选出的3个复方对新城疫苗免疫雏鸡淋巴细胞增殖,血清抗体效价,IL-2、IL-6和IFN-γ含量的影响。[结果]体外试验结果显示:单独或与植物血凝素(PHA)共同刺激时,6个复方均有不同程度的增强免疫活性,CAP-sCPP、GP-sCPP和CPP-sCAP的活性较强;体内试验结果显示:在免疫后7、14、21和28 d,GP-sCPP高剂量促进T淋巴细胞增殖的作用最强,血清抗体效价和IL-2、IL-6及IFN-γ含量均为最高,且均显著高于免疫对照组。[结论]GP-sCPP的增强免疫活性最强,可以考虑作为新型免疫增强剂的候选方。 展开更多
关键词 多糖-硒化多糖复方 淋巴细胞增殖 抗体效价 细胞因子
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