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上海地区猴免疫缺陷病毒和猴D型逆转录病毒感染的血清学调查
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作者 周洁 杨燕飞 +2 位作者 陶凌云 胡建华 高诚 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第1期91-92,共2页
为了解上海地区实验用猴感染猴免疫缺陷病毒(SIV)和猴D型逆转录病毒(SRV)的情况,用间接ELISA方法对2012—2015年上海各实验用猴生产单位送检的475份猴血清进行了检测。结果显示SIV抗体阳性血清20份,阳性率4.21%;SRV抗体阳性血清1份... 为了解上海地区实验用猴感染猴免疫缺陷病毒(SIV)和猴D型逆转录病毒(SRV)的情况,用间接ELISA方法对2012—2015年上海各实验用猴生产单位送检的475份猴血清进行了检测。结果显示SIV抗体阳性血清20份,阳性率4.21%;SRV抗体阳性血清1份,阳性率0.21%,阳性率与送检年份和无相关性。本研究为上海地区实验用猴SIV和SRV的预防提供参考依据。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 D型逆转录病毒 血清学调查 酶联免疫吸附试验
我国艾滋病疫苗取得新进展
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作者 邓鑫 123RF(图) 《健康之家》 2018年第12期12-13,共2页
日前,中国科学院广州生物医药与健康研究院等单位联手,在艾滋病预防i生疫苗研究中取得种重要进展。人类免疫缺陷病毒(HIV)猴免疫缺陷病毒(SIV)已被发现三十多年,其中HIV仍是造成人类死亡的第四大病因。虽然药物疗法可以帮助控制病情,但... 日前,中国科学院广州生物医药与健康研究院等单位联手,在艾滋病预防i生疫苗研究中取得种重要进展。人类免疫缺陷病毒(HIV)猴免疫缺陷病毒(SIV)已被发现三十多年,其中HIV仍是造成人类死亡的第四大病因。虽然药物疗法可以帮助控制病情,但却没有办法根治,病人需终生服药。 展开更多
关键词 艾滋病疫苗 人类免疫缺陷病毒 免疫缺陷病毒 中国科学院 艾滋病预防 生物医药 药物疗法 HIV
中国恒河猴感染SIV后T淋巴细胞免疫活化及其肠粘膜归巢受体的表达
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作者 张远芬 徐培平 +2 位作者 熊思艺 张清仲 符林春 《中国热带医学》 CAS 2018年第1期11-16,共6页
目的研究中国恒河猴感染SIV后T淋巴细胞免疫活化及其肠粘膜归巢受体表达的情况。方法选用12只健康中国恒河猴,分为正常动物组(对照组)4只,模型感染组(模型组)8只,静脉接种SIVmac239病毒株,分别于感染前、感染后1周、2周、3周、4周、... 目的研究中国恒河猴感染SIV后T淋巴细胞免疫活化及其肠粘膜归巢受体表达的情况。方法选用12只健康中国恒河猴,分为正常动物组(对照组)4只,模型感染组(模型组)8只,静脉接种SIVmac239病毒株,分别于感染前、感染后1周、2周、3周、4周、8周、11周、14周采用免疫组化技术检测猴模型回肠组织中的肠淋巴归巢相关受体(intestinal lymphatic homing receptor)a47、CCR9、aE7、CD62L及肠淋巴组织活化分子CD69的表达;real-time PCR检测病毒载量,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群、CD4T淋巴细胞活化水平、外周血肠淋巴归巢受体表达水平;ELISA检测血清CD62L。结果中国恒河猴感染SIV两周后,模型组和对照组的血液学指标(WBC、LYM%、LYM、RBC)均在正常范围值里,两组差异无统计学意义(P〉0.05)。模型组CD4/CD8低于对照组,CD8计数高于对照组(P〈0.01)。模型组病毒载量显著高于对照组(P〈0.01)。AIDS猴感染模型在感染2周起,CD4百分比开始逐渐下降,于感染8周后下降明显(P〈0.05)。感染11周后(亚急性期),CD4计数在下降明显(P〈0.05)。AIDS猴感染模型在感染1周(急性期)开始,CD4^+HLA-DR^+出现一过性上升,随即下降,但感染14周时又骤然升高。CD4^+CD45^+HLA-DR^+和CD3^+HLA-DR^+在感染1周时呈现波动上升趋势,随后逐渐下降。血浆中CD62L在感染1周时开始逐渐上升,并在感染到第8周左右到达一个高峰期,随后开始出现下降(P〈0.01)。中国恒河猴感染SIV后,肠淋巴归巢受体47、CCR9、E7的表达升高,L-选择素的表达降低,同时E7、CCR9在外周血CD4^+T细胞上的表达及肠道淋巴组织免疫活化分子CD69的表达升高。结论中国恒河猴感染SIV后,效应性T淋巴细胞的肠淋巴归巢增强,初始T淋巴细胞肠淋巴归巢受到抑制,肠粘膜免疫系统出现过度活化现象。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 T淋巴细胞 肠归巢受体 免疫活化 中国恒河
SIVmac239病毒感染CEMx174细胞过程分析 预览
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作者 李想 童玲 +1 位作者 丛喆 薛婧 《中国比较医学杂志》 北大核心 2018年第7期7-11,共5页
目的 运用不同的技术方法,观察SIVmac239感染CEMx174细胞的全过程。方法 SIVmac239病毒感染CEMx174细胞后,分别在不同的时间点收集培养上清和细胞,应用实时荧光定量PCR方法检测培养上清中的病毒载量;IFA检测并用激光扫描共聚焦显微镜观... 目的 运用不同的技术方法,观察SIVmac239感染CEMx174细胞的全过程。方法 SIVmac239病毒感染CEMx174细胞后,分别在不同的时间点收集培养上清和细胞,应用实时荧光定量PCR方法检测培养上清中的病毒载量;IFA检测并用激光扫描共聚焦显微镜观察病毒定位及复制情况;胞内流式、Western blot检测细胞内病毒蛋白p27的表达量。结果 SIVmac239吸附并感染CEMx174后,第0.5 h时,细胞胞膜上检测到病毒颗粒;第12 h时,培养上清中的病毒RNA水平出现下降;此后至第96 h,病毒持续复制,细胞胞浆内病毒蛋白p27表达量逐渐增加,培养上清中病毒RNA水平持续升高。结论 病毒感染细胞时,首先吸附在细胞膜上,然后进入细胞持续复制和表达。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 CEMx174细胞 病毒蛋白p27 吸附 感染
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猴免疫缺陷病毒抗体免疫梳检测方法的建立及应用 预览 被引量:1
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作者 李丹丹 王绥家 +4 位作者 陈平亚 张体银 杨俊兴 刘忠梅 高慎阳 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期217-223,共7页
目的 以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV的抗体IgG。方法 应用原核表达载体pGEX-4T-1构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达... 目的 以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV的抗体IgG。方法 应用原核表达载体pGEX-4T-1构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达,将该重组蛋白纯化后作为诊断抗原,建立免疫梳标准化检测程序,并应用于临床检测。结果 最佳抗原包被量为0.02 mg/mL;制备好的IC均能够特异性检测到相应的SIV阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,SIV30蛋白能够敏感地检测到1∶400倍稀释的SIV阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对10份可疑猴血清样品进行检测,IC与ELISA检测结果 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 SIV30蛋白 免疫 快速检测方法 抗体
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SIV感染猴外周血CD14^+单核细胞CD169分子表达的变化 预览 被引量:1
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作者 李想 薛婧 +2 位作者 陈霆 丛喆 魏强 《中国比较医学杂志》 北大核心 2018年第5期75-80,共6页
目的研究正常恒河猴感染SIVmac239前后外周血单核细胞以及各亚群单核细胞表面CD169分子表达量的变化及可能的原因。方法正常恒河猴在静脉攻毒后,流式细胞术检测感染前后外周血单核细胞比例及其表面分子CD169表达量的变化;SIVmac239直接... 目的研究正常恒河猴感染SIVmac239前后外周血单核细胞以及各亚群单核细胞表面CD169分子表达量的变化及可能的原因。方法正常恒河猴在静脉攻毒后,流式细胞术检测感染前后外周血单核细胞比例及其表面分子CD169表达量的变化;SIVmac239直接感染和不同细胞因子刺激流式分选出的正常恒河猴外周血CD14+单核细胞,流式细胞术检测细胞表面CD169和细胞因子IFN-α表达量的变化。结果 SIVmac239感染正常恒河猴后,CD14+单核细胞的比例下降,CD14+单核细胞表面分子CD169表达量升高;外周血中不同单核细胞亚群CD169的表达量均显著增加,CD14+CD16++单核细胞中CD169表达量的升高更为明显。正常恒河猴外周血CD14+单核细胞经细胞因子M-CSF、IL-4和IL-13刺激后,细胞表面不表达CD169;经细胞因子IFN-α刺激后,高表达CD169;SIVmac239病毒直接感染CD14+单核细胞,细胞表面CD169与胞内细胞因子IFN-α的表达均无变化。结论 SIVmac239病毒感染恒河猴后,可引起外周血单核细胞CD169分子表达量的升高,其表达与病毒直接感染单核细胞无关,与体内其它细胞分泌的细胞因子IFN-α相关。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 单核细胞 IFN-Α CD169
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淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素体外抑制猴免疫缺陷病毒复制作用
7
作者 谢延峥 莫雨晓 +2 位作者 吴胜男 何金洋 葛文华 《中国艾滋病性病》 CSCD 北大核心 2018年第1期5-9,共5页
目的观察淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素体外对猴免疫缺陷病毒的抑制作用。方法用CCK-8检测不同浓度的淫羊藿苷与代谢产物脱水淫羊藿素对CEMx174细胞的毒性;以SIVmac251感染CEMx174细胞为模型,观察细胞病变效应(CPE);实时套式反转... 目的观察淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素体外对猴免疫缺陷病毒的抑制作用。方法用CCK-8检测不同浓度的淫羊藿苷与代谢产物脱水淫羊藿素对CEMx174细胞的毒性;以SIVmac251感染CEMx174细胞为模型,观察细胞病变效应(CPE);实时套式反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内猴免疫缺陷病毒(SIV)核糖核酸(RNA)相对量和上清中病毒载量三个指标,来评估淫羊藿苷与代谢产物脱水淫羊藿素对SIV复制的抑制作用。结果淫羊藿苷和脱水淫羊藿素的最大无毒浓度分别是50μg·mL~(-1),16μg·mL~(-1)。在细胞内,淫羊藿苷(50,25,12.5μg·mL~(-1))和脱水淫羊藿素(16,8,4μg·mL~(-1))组SIV RNA相对量都明显比病毒对照组低(P〈0.01,P〈0.05),且具有一定的量效关系。同时在上清中,淫羊藿苷(50,25μg·mL~(-1))和脱水淫羊藿素(16,8,4μg·mL~(-1))组病毒载量明显比病毒对照组低(P〈0.01,P〈0.05),也存在一定的量效关系。以上药物浓度与病毒对照组比较均具有统计学差异。结论淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素均对SIV的复制起到抑制作用,具有深入研究和开发的前景。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 脱水淫羊藿素 免疫缺陷病毒
大黄蒽醌抗猴免疫缺陷病毒作用靶点与转导信号通路研究 预览
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作者 王仕衍 罗伟生 +5 位作者 马长菊 张扬武 黄瑞 张夏 禤传凤 陈珊 《中医学报》 CAS 2018年第1期1-5,共5页
目的:探索大黄蒽醌化合物抗猴免疫缺陷病毒可能的作用靶点与转导信号通路。方法:大黄蒽醌化合物干预48 h后,提取两组细胞的总蛋白,利用iTRAQ技术对表达差异的蛋白进行筛选后,使用GO数据库、KEGG数据库进行分析,确定差异蛋白涉及的生... 目的:探索大黄蒽醌化合物抗猴免疫缺陷病毒可能的作用靶点与转导信号通路。方法:大黄蒽醌化合物干预48 h后,提取两组细胞的总蛋白,利用iTRAQ技术对表达差异的蛋白进行筛选后,使用GO数据库、KEGG数据库进行分析,确定差异蛋白涉及的生物学过程、细胞组件及分子功能,分析目标蛋白质参与的主要疾病和信号转导途径。结果:两组共筛选出235个差异蛋白,其中可能与艾滋病相关的差异蛋白18个,7个蛋白表达上调,11个蛋白表达下调。差异蛋白主要涉及免疫反应、白细胞介素-1的合成与应答、病毒感染等8种生物学过程;参与蛋白结合、DNA结合、RNA结合等11个方面的细胞功能;涉及胞外区、细胞质、质膜、细胞核等11个方面的细胞组件;并主要参与系统性红斑狼疮、金黄色葡萄球菌感染、吞噬作用等9条信号转导通路。结论:利用iTRAQ技术筛选、鉴定差异蛋白表达,诠释大黄蒽醌化合物抗猴免疫缺陷病毒可能的作用靶点与转导信号通路,为临床治疗提供新的研究思路。 展开更多
关键词 大黄蒽醌化合物 差异蛋白 蛋白质组学 信号转导通路 免疫缺陷病毒
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中国恒河猴SIV急性感染期模型CD4细胞和MBL的变化
9
作者 陈剑涛 熊思艺 +3 位作者 张清仲 张苗苗 周红燕 符林春 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期181-185,共5页
目的研究中国恒河猴猴免疫缺陷病毒(SIV)mac239急性期感染模型外,周血CD4^+T淋巴细胞(简称CD4细胞)、淋巴结CD4细胞和血清甘露糖结合凝集素(MBL)的变化情况,探索感染早期固有免疫与适应性免疫的病理变化。方法选用5只健康中国... 目的研究中国恒河猴猴免疫缺陷病毒(SIV)mac239急性期感染模型外,周血CD4^+T淋巴细胞(简称CD4细胞)、淋巴结CD4细胞和血清甘露糖结合凝集素(MBL)的变化情况,探索感染早期固有免疫与适应性免疫的病理变化。方法选用5只健康中国恒河猴,静脉接种SIVmac239病毒株,分别于感染前、感染后2周、4周和10周检测血常规、血浆病毒载量,流式细胞仪分析外周血淋巴细胞亚群,免疫组织化学染色法观察淋巴结CD4细胞,酶联免疫吸附试验法检测血清MBL。结果感染后CD4细胞比值较感染前降低27.3%(P〈0.05),CD8细胞比值较感染前升高44.3%(P〈0.05),外周血CD4细胞绝对数下降23.6%,淋巴结CD4细胞上升14.9%,但是差异无统计学意义。血清MBL在感染后10周内持续下降至感染前水平的24.5%(P〈0.01)。结论SIV急性感染期固有免疫破坏显著,适应性免疫主要表现为体液免疫与细胞免疫的失衡。 展开更多
关键词 甘露糖结合凝集素 淋巴结细胞 急性期 中国恒河 免疫缺陷病毒
青蒿琥酯对猴免疫缺陷病毒感染中国恒河猴模型T淋巴细胞活化的调节作用 预览
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作者 陈剑涛 熊思艺 +3 位作者 林子峰 李钱锋 唐琴 符林春 《中医学报》 CAS 2017年第11期2029-2034,共6页
目的:观察注射用青蒿琥酯对猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)感染中国恒河猴模型免疫异常激活的改善情况,探讨青蒿琥酯对艾滋病的干预作用。方法:选用8只SIV感染平台期中国恒河猴模型,随机分为治疗组和对照组,每... 目的:观察注射用青蒿琥酯对猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)感染中国恒河猴模型免疫异常激活的改善情况,探讨青蒿琥酯对艾滋病的干预作用。方法:选用8只SIV感染平台期中国恒河猴模型,随机分为治疗组和对照组,每组各4只,治疗组按每天3 mg·kg^-1剂量肌肉注射青蒿琥酯注射液8周,对照组肌肉注射等剂量生理盐水。分别于给药前,给药后2周、4周、6周、8周,停药后4周、8周检测血浆病毒载量、全血细胞计数、淋巴细胞亚群及免疫活化相关标记物CD(69)^+、CD(25)^+、HLA-DR^+和CD(38)^+表达情况。结果:青蒿琥酯可在4周内下调CD8^+细胞CD(69)^+、HLA-DR^+和CD(38)^+表达水平(P〈0.05),对CD4^+细胞影响较小。给药第4周出现一过性嗜中性粒细胞下降,后回升至正常水平。结论:青蒿琥酯可改善SIV感染中国恒河猴细胞毒性T细胞免疫异常激活,嗜中性粒细胞下降是可逆的。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 中国恒河 免疫缺陷病毒 艾滋病
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艾可清复方对艾滋病模型猴不同组织病毒载量及T细胞亚群的影响
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作者 张苗苗 符卓韬 +4 位作者 朱伯强 成业 陈剑涛 周红燕 符林春 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期868-872,共5页
目的评价艾可清复方对艾滋病模型猴的干预效果。方法 8只同期猴免疫缺陷病毒(SIV)感染的恒河猴随机分为中药组和抗病毒药组,每组4只。中药组给予艾可清复方浸膏1 g/(kg·d)灌胃,抗病毒药组给予替诺福韦30 mg/(kg·d)背部... 目的评价艾可清复方对艾滋病模型猴的干预效果。方法 8只同期猴免疫缺陷病毒(SIV)感染的恒河猴随机分为中药组和抗病毒药组,每组4只。中药组给予艾可清复方浸膏1 g/(kg·d)灌胃,抗病毒药组给予替诺福韦30 mg/(kg·d)背部皮下注射。各组均每天1次,共给药8周。给药前后留取外周血、浅表淋巴结以及实验结束时胃、胸腺、脾脏等不同组织,检测各样本中CD3、CD4、CD8水平,病毒载量和趋化因子受体CCR5水平,并进行病理观察。结果中药组外周血CD4水平及胃、肠系膜淋巴结、直肠中趋化因子受体CCR5表达高于抗病毒药组(P〈0.05),且对胸腺、脾脏、浅表淋巴结组织病理结构保存更完整。抗病毒药组肠系膜淋巴结中病毒载量低于中药组(P〈0.05)。结论艾可清复方对艾滋病模型猴有一定免疫调节作用。 展开更多
关键词 艾滋病 免疫缺陷病毒 艾可清复方 病毒载量 T细胞亚群
中药复方提取物HNA-1对SIV慢性感染恒河猴单核细胞各亚群的影响
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作者 宁兴旺 陈颂 +3 位作者 陈滢宇 刘洋 朱惠斌 葛金文 《中华中医药杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期5543-5547,共5页
目的:探讨中药复方提取物湘A-1(HNA-1)对猴免疫缺陷病毒(SIV)慢性感染恒河猴单核细胞亚群的影响,以进一步了解HNA-1促进胸腺输出、提升初始型CD4的机制。方法:采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴慢性感染16-21个月,随机分为对照组... 目的:探讨中药复方提取物湘A-1(HNA-1)对猴免疫缺陷病毒(SIV)慢性感染恒河猴单核细胞亚群的影响,以进一步了解HNA-1促进胸腺输出、提升初始型CD4的机制。方法:采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴慢性感染16-21个月,随机分为对照组和治疗组,每组4只。治疗组给予HNA-1灌胃治疗,每日1次;对照组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。两组给药2个月。在治疗第0、28、56天采集血液检测血常规,并采用流式细胞法检测外周血单核细胞CD14++CD16-(经典型)、CD14++CD16+(中间型)和CD14dim CD16+(非经典型)亚群的比例、各亚群表达HLA-DR、趋化因子CCR5和CCR7的情况,以及外周血单个核细胞(PBMC)表达白细胞介素(IL)-17、IL-10及转化生长因子(TGF-β)的比例。并采用酶消化法从胸腺分离所有细胞,检测胸腺内CD3+、CD68+细胞的比例。结果:治疗组外周血单核细胞比例及数量无明显改变;但CD14++CD16+亚群的比例明显增高(P<0.05)。该亚群高表达HLA-DR、CCR5和CCR7。同时,治疗组胸腺内巨噬细胞标记CD68+细胞的比例显著高于对照组(P<0.05)。治疗后PBMC表达IL-10显著降低(P<0.05)。结论:治疗后CD14++CD16+单核细胞增加、归巢进入胸腺并分化为巨噬细胞,可能是HNA-1提高外周初始型CD4、促进胸腺输出的疗效基础;其临床价值尚有待进一步研究评估。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 中间型单核细胞 人CC趋化因子受体7 中药提取物 湘A-1
猴免疫缺陷病毒实时荧光环介导等温扩增快速检测方法的建立 预览
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作者 刘助红 王静 +4 位作者 黄碧洪 尹雪琴 张钰 郭鹏举 黄韧 《中国动物传染病学报》 北大核心 2017年第5期37-41,共5页
以猴免疫缺陷病毒(Simianimmunodeficiencyvirus,SIV)的核心蛋白Gag区域的部分保守基因序列为检测乾标,通过软件设计内、外引物和环引物,借助恒温荧光扩增仪建立SIV实时荧光环介导等温扩增快速检测方法(real-timeloop-mediatedisotherma... 以猴免疫缺陷病毒(Simianimmunodeficiencyvirus,SIV)的核心蛋白Gag区域的部分保守基因序列为检测乾标,通过软件设计内、外引物和环引物,借助恒温荧光扩增仪建立SIV实时荧光环介导等温扩增快速检测方法(real-timeloop-mediatedisothermalamplification,Realamp),根据有无“S”型#■增曲线判断检测结果。Realamp方法对含有敗免疫缺陷病毒目标片段的质粒标准品的检测灵敏度为300copies/pL,对猴类的其他常见病原如猴D型逆转录病毒、猴T淋巴细胞趋向性病毒、猴B病毒等无非特异性扩增。通过33份临床样本的检测,Realamp检出的阳性2例,qPCR检出的阳性率为1例,两种检测方法的符合率为97%。本研究建立的Realamp检测技术所需设备简单、反应效率快、检测灵敏度高和特异性强,可用于偏远地区猴养殖单位相关病原的检测。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 实时荧光环介导等温扩增技术 检测
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The V1 region of gp120 is preferentially selected during SIV/HIV transmission and is indispensable for envelope function and virus infection
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作者 Yanpeng Li Ulf Dittmer +3 位作者 Yan Wang Jiping Song Binlian Sun Rongge Yang 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2016年第3期207-218,共12页
A transmission bottleneck occurs during each human immunodeficiency virus(HIV) transmission event, which allows only a few viruses to establish new infection. However, the genetic characteristics of the transmitted vi... A transmission bottleneck occurs during each human immunodeficiency virus(HIV) transmission event, which allows only a few viruses to establish new infection. However, the genetic characteristics of the transmitted viruses that are preferentially selected have not been fully elucidated. Here, we analyzed amino acids changes in the envelope protein during simian immunodeficiency virus(SIV)/HIV deep transmission history and current HIV evolution within the last 15–20 years. Our results confirmed that the V1V2 region of gp120 protein, particularly V1, was preferentially selected. A shorter V1 region was preferred during transmission history, while during epidemic, HIV may evolve to an expanded V1 region gradually and thus escape immune recognition. We then constructed different HIV-1 V1 mutants using different HIV-1 subtypes to elucidate the role of the V1 region in envelope function. We found that the V1 region, although highly variable, was indispensable for virus entry and infection, probably because V1 deletion mutants exhibited impaired processing of gp160 into mature gp120 and gp41. Additionally, the V1 region affected Env incorporation. These results indicated that the V1 region played a critical role in HIV transmission and infection. 展开更多
关键词 HIV-1 病毒感染 传播过程 包络函数 SIV 人类免疫缺陷病毒 免疫缺陷病毒 蛋白氨基酸
实时荧光定量PCR技术快速评价恒河猴外周血SIV病毒储存库的方法学建立 被引量:1
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作者 朱丽妍 范雪营 +2 位作者 谢喆 沈弢 邵一鸣 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期305-309,共5页
目的:实时荧光定量PCR( real-time fluorescent quantitative PCR)技术快速评估恒河猴外周血细胞中的猴免疫缺陷病毒( SIV)病毒储存库的方法学及初步应用。方法以SIVmac239毒株序列为标准,在gag保守区设计1对引物和TaqMan探针,用... 目的:实时荧光定量PCR( real-time fluorescent quantitative PCR)技术快速评估恒河猴外周血细胞中的猴免疫缺陷病毒( SIV)病毒储存库的方法学及初步应用。方法以SIVmac239毒株序列为标准,在gag保守区设计1对引物和TaqMan探针,用于实时定量PCR扩增。 EcoRⅠ和SpeⅠ酶切含有SIVmac239毒株5′端长片段(含SIV-gag区)的质粒p239SpSp5,得到长度为2090 bp的SIV-gag区保守片段,纯化后定量系列标准品以绘制标准曲线。测定SIVmac239毒株感染恒河猴急性期和慢性期的外周血单个核细胞中SIV DNA拷贝数以反映病毒储存库水平,并分析该水平在不同感染状态中的病毒学特征。结果标准品浓度在10~1010拷贝/μl之间与Ct值呈线性正相关。 SIV急性期感染14~22 d可测出高水平的SIV病毒DNA,急性期病毒DNA水平高于慢性期1~2个log水平。相同动物样本的每106个细胞中的病毒DNA水平较其血清中病毒载量低将近1个log左右。 SIV病毒DNA水平与病毒载量比值( DNA/RNA)在慢性感染期显著高于急性期。结论本研究制备的SIV病毒DNA荧光探针定量RT-PCR方法特异性、敏感性高,线性范围广,可用于评估猴免疫缺陷病毒潜伏的病毒储存库水平。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 病毒储存库
急性感染期内恒河猴外周血中人/猴嵌合免疫缺陷病毒包膜蛋白的N糖基化位点分析
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作者 石银 万延民 +5 位作者 陈健 王婧 任艳琴 魏强 从喆 徐建青 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期869-873,共5页
目的:分析人/猴嵌合免疫缺陷病毒(SHIVSF162P3)包膜蛋白N糖基化位点的数量和分布及病毒传播能力。方法两只雌性成年(4周岁)中国恒河猴,编号Rh1和Rh2,体重分别为4和5 kg。通过静脉攻毒的方式向Rh1和Rh2接种SHIVSF162P3,每只剂量... 目的:分析人/猴嵌合免疫缺陷病毒(SHIVSF162P3)包膜蛋白N糖基化位点的数量和分布及病毒传播能力。方法两只雌性成年(4周岁)中国恒河猴,编号Rh1和Rh2,体重分别为4和5 kg。通过静脉攻毒的方式向Rh1和Rh2接种SHIVSF162P3,每只剂量为300半数组织培养感染剂量,在攻毒后第3、7、10、14、17、21、24、28、35、42、49、56、63、70和77天采集血液样本。对样本进行病毒RNA抽提和cDNA合成,采用实时荧光定量PCR测定病毒RNA水平。对攻毒后第7、14、28和77天的血浆样本进行单基因组扩增,使用Bio-edit中的Clustal W软件进行包膜蛋白全长多序列比对,用MEGA6.06软件计算配对差异距离,采用HIV Databases中的软件计算包膜蛋白N糖基化位点和可变区氨基酸数目,比较序列多样性、N糖基化位点数量的差异。结果从接种的病毒中共扩增得到55条包膜蛋白全长序列,其核苷酸序列平均配对差异距离为(0.1666±0.0963)%。病毒载量在攻毒后第10天达到峰值,lg转换值分别为7.68和7.49拷贝/ml;在攻毒后第42天,病毒载量达到调定点,lg转换值分别为4.27和4.81拷贝/ml。攻毒后第7天,Rh1和Rh2血样中包含25个N糖基化位点的病毒包膜蛋白序列的比例分别达到83%(20/24)和94%(29/31),高于接种病毒中的比例[49%(27/55)]。随着感染时间的延长,Rh1和Rh2血浆中SHIVSF162P3病毒包膜序列的多样性逐渐增大,包含25个N糖基化位点的包膜蛋白序列比例逐渐降低,包含27个N糖基化位点病毒所占比例逐渐升高;在第28天Rh1体内包含27个N糖基化位点的序列比例达到29%(6/21),Rh2在第77天达到35%(13/37)。V1~V5区糖基化位点分析发现,N糖基化位点数目的变化主要来自于V4区。与包含27个糖基化位点的包膜蛋白序列相比,包含25个糖基化位点的病毒包膜蛋白序列在V4区缺失7个氨基酸(TWNNTIG),导致V4区在392位和39 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 感染 病毒包膜蛋白质类 糖基化
中药复方提取物HNA-1对SIV慢性感染中国恒河猴胸腺输出功能的影响
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作者 朱惠斌 陈颂 +2 位作者 陈滢宇 卢芳国 宁兴旺 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期351-358,共8页
目的探讨中药复方提取物湘A-1(Hu Nan A-1,HNA-1)对猴免疫缺陷病毒(Simian immunodeficiency virus,SIV)慢性感染中国恒河猴胸腺输出功能的影响。方法采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴进行感染16~21个月,随机分为对照组和治疗组... 目的探讨中药复方提取物湘A-1(Hu Nan A-1,HNA-1)对猴免疫缺陷病毒(Simian immunodeficiency virus,SIV)慢性感染中国恒河猴胸腺输出功能的影响。方法采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴进行感染16~21个月,随机分为对照组和治疗组,每组4只。治疗组给予HNA-1灌胃20 m L治疗,每日1次;对照组给予等体积生理盐水灌胃。两组给药2个月。观察两组一般情况、体重,采用实时荧光定量PCR方法检测两组血浆病毒载量,采用流式细胞法检测CD4比例及数量、CD4的初始亚群,实时荧光定量PCR法检测T细胞受体DNA重排删除环(TREC),常规HE染色后观察胸腺组织的病理情况。分析胸腺组织病变情况与CD4细胞数、初始型CD4细胞数及TREC的关联性。结果治疗后两组体重、病毒载量、CD4比例绝对数比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。对照组TREC改变倍数明显呈下降趋势,治疗组总体呈明显的上升趋势,两组间差异有统计学意义(P〈0.05)。两组动物的胸腺组织均可见结构破坏、粉红色无结构样物质填充、结缔组织增多、细胞密度降低、排列紊乱等病理改变,未见明显区别。TREC含量与初始型CD4去除极值后,呈正相关(r=0.926,P=0.001);而初始型CD4数量与CD4数量呈正相关(r=0.961,P=0.005)。结论检测TREC含量来测定新胸腺迁出细胞数量可作为评价胸腺输出功能的检测方法,且HNA-1可增加胸腺的输出功能,而TREC、初始型CD4数量及胸腺组织病理情况之间存在一定相关关系,在感染晚期尤为明显。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 T细胞受体DNA重排删除环 初始型CD4 中药提取物
Allglo探针与TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测猴免疫缺陷病毒的比较 预览 被引量:1
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作者 吴胜男 谢延峥 +1 位作者 刘翠华 何金洋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1496-1501,共6页
目的比较Allglo探针和TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测SIV的灵敏度下限和重复性。方法把SIV标准品进行梯度稀释成6个浓度,每个浓度同时提取12个标本进行批内差异分析,每个标本提取12次进行批间差异分析之后进行逆转录并用TaqMan探针和All... 目的比较Allglo探针和TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测SIV的灵敏度下限和重复性。方法把SIV标准品进行梯度稀释成6个浓度,每个浓度同时提取12个标本进行批内差异分析,每个标本提取12次进行批间差异分析之后进行逆转录并用TaqMan探针和Allglo探针进行定量PCR检测。批内差异分析者每个标本同时进行逆转录和上机检测,批间差异分析者分12次进行逆转录和检测,对这两种探针的PCR结果利用ABI7300定量PCR仪所携带的软件和相关的统计学方法进行分析。结果 TaqMan探针和Allglo探针法检测SIV标准品的灵敏度下限均为50 copies/m L。重复性结果显示:批内结果差异分析显示Allglo探针法最大变异系数为0.63%,最小变异系数为0.33%,TaqMan探针法最大变异系数为1.33%,最小变异系数为0.2%;批间结果差异分析显示Allglo探针法最大变异系数为1.77%,最小变异系数为0.95%,TaqMan探针法最大变异系数为1.86%,最小变异系数为1.03%。结论在荧光定量RT-PCR法检测猴免疫缺陷病毒中,Allglo探针法可能优于TaqMan探针法。 展开更多
关键词 Allglo探针 TAQMAN探针 免疫缺陷病毒 实时荧光定量PCR
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猴免疫缺陷病毒感染引起以天然免疫为主的部分基因表达情况 被引量:1
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作者 柳娇娇 李宏军 焦艳梅 《北京医学》 CAS 2015年第9期882-884,共3页
非灵长类动物(nonhumanprimates,NHP)在组织结构、免疫及代谢等方面与人类相似性很大。NHP能被猴免疫缺陷病毒(simianimmunodeficiencvvi—rlls,SIV)和人/猴嵌合免疫缺陷病毒(simian—humanimmunode6ciencvvirus,SHIV)所感染... 非灵长类动物(nonhumanprimates,NHP)在组织结构、免疫及代谢等方面与人类相似性很大。NHP能被猴免疫缺陷病毒(simianimmunodeficiencvvi—rlls,SIV)和人/猴嵌合免疫缺陷病毒(simian—humanimmunode6ciencvvirus,SHIV)所感染,感染后会出现类似人AIDS的症状,可以根据相应原理对检测周期、病毒接种的剂量以及病毒感染途径进行人为干预控制. 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒感染 免疫缺陷病毒 天然免疫 表达情况 基因 病毒感染途径 灵长类动物 组织结构
生命的歌者——记吉林大学艾滋病与病毒研究所于晓方创新团队 预览
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作者 王辉 《中国科技奖励》 2015年第11期70-73,共4页
1981年6月5日,美国疾病预防控制中心在《发病率与死亡率周刊》上登载了5例艾滋病病人的病例报告,这是世界上第一次有关艾滋病的正式记载。 尽管艾滋病病毒基因组结构简单,仅编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白(HIV-1/2),却一直是严重威... 1981年6月5日,美国疾病预防控制中心在《发病率与死亡率周刊》上登载了5例艾滋病病人的病例报告,这是世界上第一次有关艾滋病的正式记载。 尽管艾滋病病毒基因组结构简单,仅编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白(HIV-1/2),却一直是严重威胁人类健康的重大传染病之一,短短30余年,就成为如今纠缠全世界的噩梦。面对这样一个威胁人类生命健康的"杀手",有人讳莫如深,有人谈"艾"色变,避之唯恐不及,但还有一些人却将之当成终生追求的科研目标,只为更多的人能够免于疾病的纠缠。吉林大学艾滋病与病毒研究所所长于晓方和他的创新团队,恰好就是这样一群人。 展开更多
关键词 创新团队 非结构蛋白 科研目标 基因组结构 病毒研究 免疫缺陷病毒 吸毒人群 美国疾病预防 逆转录病毒 学术杂志
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