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豆制品转基因检测中不同DNA提取方法的比较 预览
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作者 孙梦梦 黄欢欢 +1 位作者 沈晓芳 庞月红 《江苏农业科学》 2019年第4期47-50,共4页
高品质的DNA是分子生物学研究的关键,大豆及豆制品中含有较多的蛋白质、酚类、糖类和脂类物质,从中提取高品质的DNA比较困难。拟采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称SDS)法、改良CTAB法、十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl tr... 高品质的DNA是分子生物学研究的关键,大豆及豆制品中含有较多的蛋白质、酚类、糖类和脂类物质,从中提取高品质的DNA比较困难。拟采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称SDS)法、改良CTAB法、十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,简称CTAB)法、SDS-聚乙烯吡咯烷酮(简称SDS-PVP)法和TIANGEN试剂盒法对大豆MON89788、小黄豆、豆腐及大豆油中的DNA进行提取,对试验过程中的蛋白酶K、RNA酶A的浓度进行优化,并对DNA浓度及纯度进行综合分析。结果表明,对于大豆MON89788、小黄豆和豆腐,用SDS法提取的DNA的D260nm/D280nm值在1.8左右,DNA产量最高,用改良CTAB法提取的DNA的D260nm/D280nm值在1.8左右,用TIANGEN试剂盒法提取的DNA的D260nm/D280nm值在1.75左右,2种方法的DNA产量均比SDS法低,而用SDS-PVP法与CTAB法提取的DNA含有较多杂质。综合分析可知,大豆油的最佳DNA提取方法为改良CTAB法。 展开更多
关键词 大豆MON89788 豆制品 DNA提取 琼脂糖凝胶电泳
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甜菜SSR扩增产物不同检测方法的比较研究 预览
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作者 邹奕 刘乃新 +2 位作者 马龙彪 吴则东 李红侠 《中国农学通报》 2018年第35期44-47,共4页
利用16对甜菜SSR引物对12个不同的甜菜品种进行扩增,分别采用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、3%的Metaphor琼脂糖电泳以及3%的普通琼脂糖电泳对SSR扩增产物进行检测,比较不同检测结果的差异性。结果表明:8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶分辨... 利用16对甜菜SSR引物对12个不同的甜菜品种进行扩增,分别采用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、3%的Metaphor琼脂糖电泳以及3%的普通琼脂糖电泳对SSR扩增产物进行检测,比较不同检测结果的差异性。结果表明:8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶分辨细小条带的差异远高于3%的Metaphor琼脂糖和普通琼脂糖,而Metaphor琼脂糖的分辨率高于普通琼脂糖;但对于条带较少的引物,3种凝胶未显现出差异;对于条带数较多的引物,如果条带比较集中,3种检测方法差异显著,如果条带比较分散,3种凝胶之间的差异较小。由于Metaphor琼脂糖价格偏高、胶软不易操作且分辨率低于聚丙烯酰胺凝胶,因此不建议使用。而8%的聚丙烯酰胺凝胶则适合于指纹图谱的构建以及遗传多样性分析等,普通琼脂糖可以应用在品种纯度的鉴定。 展开更多
关键词 甜菜 SSR 琼脂糖凝胶电泳 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 指纹图谱
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一种快速提取土壤微生物DNA的方法
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作者 陶兴玲 雷琼 马立安 《长江大学学报:自然科学版》 CAS 2018年第2期54-58,共5页
对文献已报道的一种提取土壤微生物DNA方法进行了优化,与原方法相比,优化后的方法实验时间缩短了250min,省去了异硫氰酸胍试剂。结果表明该方法是一种经济、快速、简单的土壤微生物DNA提取方法。
关键词 土壤微生物 DNA提取 琼脂糖凝胶电泳
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琼脂糖凝胶电泳实验规范管理的实践与探索 预览
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作者 王秋霞 王智慧 +2 位作者 郑颖 唐玲 周少霞 《高校实验室工作研究》 2018年第3期63-65,共3页
琼脂糖凝胶电泳技术是农业科学、生物化学和分子生物学实验中常用的方法,在高校实验室被广泛应用。常用溴化乙锭是一种有毒试剂,操作过程必须规范严格。由于高校琼脂糖凝胶电泳实验室人员繁杂,在使用过程中普遍存在操作不规范现象。针... 琼脂糖凝胶电泳技术是农业科学、生物化学和分子生物学实验中常用的方法,在高校实验室被广泛应用。常用溴化乙锭是一种有毒试剂,操作过程必须规范严格。由于高校琼脂糖凝胶电泳实验室人员繁杂,在使用过程中普遍存在操作不规范现象。针对此问题,我们对该实验操作过程中的注意事项和规范管理进行了积极的实践和探索,取得了一定的成效,希望能为其他实验室管理者提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 琼脂糖凝胶电泳 规范 管理
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基于PCR技术的DNA marker的研制
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作者 李梅 廖龙 +3 位作者 林惠超 郑杏枝 王锐 李丹 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第7期769-771,共3页
20世纪70年代末至80年代初,由于近代生物学的不断发展,分子生物学、基因工程、DNA重组技术等的问世,基于生物遗传物质DNA为基础,从微观角度阐释生命活动规律成为研发的热点。在这些涉及核酸物质DNA的研发中,DNA marker是使用最为广泛的... 20世纪70年代末至80年代初,由于近代生物学的不断发展,分子生物学、基因工程、DNA重组技术等的问世,基于生物遗传物质DNA为基础,从微观角度阐释生命活动规律成为研发的热点。在这些涉及核酸物质DNA的研发中,DNA marker是使用最为广泛的试剂之一,其能判断和指示核酸大小, 展开更多
关键词 PCR扩增 琼脂糖凝胶电泳 DL2000 DNA MARKER DL4500 DNA MARKER
南瓜糖蛋白的分离纯化及其糖链结构鉴定 预览
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作者 张琳 陈俊华 +3 位作者 王小雪 马明兰 谭珺隽 刘阳 《食品研究与开发》 北大核心 2017年第16期61-65,共5页
采用水提醇沉法从南瓜粉中提取南瓜糖蛋白,分别用硫酸铵、乙醇分级沉淀及琼脂糖凝胶电泳法对南瓜糖蛋白进行分离纯化,定性检测后用碱性β-消除反应及核磁共振氢谱(Proton Nuclear Magnetic Resonance,-1H NMR)、核磁共振碳谱(Carbon ... 采用水提醇沉法从南瓜粉中提取南瓜糖蛋白,分别用硫酸铵、乙醇分级沉淀及琼脂糖凝胶电泳法对南瓜糖蛋白进行分离纯化,定性检测后用碱性β-消除反应及核磁共振氢谱(Proton Nuclear Magnetic Resonance,-1H NMR)、核磁共振碳谱(Carbon 13Nuclear Magnetic Resonance,-(13)C NMR)技术测定糖肽键的结构。结果显示:纯化后的糖蛋白不含游离还原糖和淀粉,其在紫外240 nm附近南瓜糖蛋白碱水解液吸光度值发生了明显的变化,证明南瓜糖蛋白的糖肽键主要为O-糖肽键;其多糖的-1H NMR和-(13)C NMR谱图表明,该多糖组分的单糖残基中包含α-和β-两种糖苷键类型,且南瓜多糖主要含有3种端基碳分别为→4)-α-D-半乳糖-(1→、T-α-D-半乳糖-(1→和→2)-α-L-鼠李糖-(1→,在175.57和171.25处的共振吸收峰说明多糖中含有糖醛酸和脂类结构。 展开更多
关键词 南瓜 蛋白 琼脂糖凝胶电泳 核磁共振
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Construction and Characterization of Gal-Chitosan Graft Methoxy Poly(Ethylene Glycol)(Gal-CS-mPEG) Nanoparticles as Efficient Gene Carrier 预览
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作者 JIN Jiting FU Wandong +3 位作者 LIAO Miaofei HAN Baoqin CHANG Jing YANG Yan 《中国海洋大学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第5期873-881,共9页
在现在的学习, galactosylated chitosan (Gal-CS ) poly 与 methoxy 被结合(乙烯乙二醇)(mPEG ) 作为一个吸水的组。Gal-CS-mPEG 聚合物的结构被描绘, nanoparticles (NP ) 用具有讽刺意味的冻结方法被准备。学习被设计调查 Gal-CS-m... 在现在的学习, galactosylated chitosan (Gal-CS ) poly 与 methoxy 被结合(乙烯乙二醇)(mPEG ) 作为一个吸水的组。Gal-CS-mPEG 聚合物的结构被描绘, nanoparticles (NP ) 用具有讽刺意味的冻结方法被准备。学习被设计调查 Gal-CS-mPEG NP 的特征和功能。Gal-CS-mPEG NP 的形态学被 SEM 观察,它是一个协议和球形的形状。NP 的尺寸是在在理想的进程参数下面的直径的约 200 nm。在 Gal-CS-mPEG NP 和 pDNA 之间的相互作用,和对 DNase 的 pDNA 的保护我和由 Gal-CS-mPEG NP 的浆液降级被评估。Agarose 胶化电气泳动结果证明 Gal-CS-mPEG NP 在 12:1, 4:1 和 2:1 的重量比率与 pDNA 有强壮的相互作用并且能保护 pDNA 免受 DNase 的伤害我和浆液降级。Gal-CS-mPEG NP 展出了装载效率的高度并且在 vitro 持续版本。血相容性研究证明 Gal-CS-mPEG NP 以聚集度和溶血水平与红血球有优异相容性。Gal-CS-mPEG NP 没在是一个肝癌症房间的房间,是一个正常老鼠结缔组织成纤维细胞,但是在 Bel-7402 房间的增长上显示出禁止的效果,衬里的 L929 上显示出 cytotoxicity。在结论, Gal-CS-mPEG NP 是有在基因交货的潜在的申请的一个对简历安全、有效的基因搬运人。 展开更多
关键词 甲氧基聚乙二醇 纳米粒子 半乳 表征 琼脂糖凝胶电泳 壳聚 DNASE 强相互作用
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男性胎儿DNA含量低的孕妇的无创产前检测 预览
8
作者 宋春林 刘正平 +2 位作者 钟进 伍秋艳 陈淑芬 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第20期2827-2828,2831共3页
目的探讨外周血中胎儿DNA含量低的孕妇的无创产前检测(NIPT)。方法回顾分析2015年4月至2016年3月间在佛山市妇幼保健院行NIPT的3240例孕妇实验数据与随访资料,根据其Y染色体m值,筛选出胎儿为男性且胎儿DNA含量低于8P的样品共150例,... 目的探讨外周血中胎儿DNA含量低的孕妇的无创产前检测(NIPT)。方法回顾分析2015年4月至2016年3月间在佛山市妇幼保健院行NIPT的3240例孕妇实验数据与随访资料,根据其Y染色体m值,筛选出胎儿为男性且胎儿DNA含量低于8P的样品共150例,利用琼脂糖凝胶电泳富集法提高胎儿DNA含量,进行NIPT,对比非整倍体筛查结果的准确率。结果琼脂糖凝胶电泳富集法将样品中的胎儿DNA含量从平均5P提高到9.2%&对比胎儿DNA含量提高前后的NIPT结果是一致的。结论当胎儿DNA含量高于5%时,胎儿DNA含量不会影响NIPT结果的准确率& 展开更多
关键词 游离胎儿DNA 无创产前检测 琼脂糖凝胶电泳 准确率
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Development of SNP markers using RNA-seq technology and tetraprimer ARMS-PCR in sweetpotato 预览
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作者 KOU Meng XU Jia-lei +6 位作者 LI Qiang LIU Ya-ju WANG Xin TANG Wei YAN Hui ZHANG Yun-gang MA Dai-fu 《农业科学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期464-470,共7页
The information of single nucleotide polymorphisms(SNPs) is quite unknown in sweetpotato. In this study,two sweetpotato varieties(Xushu 18 and Xu 781) were sequenced by Illumina technology,as well as de novo transcrip... The information of single nucleotide polymorphisms(SNPs) is quite unknown in sweetpotato. In this study,two sweetpotato varieties(Xushu 18 and Xu 781) were sequenced by Illumina technology,as well as de novo transcriptome assembly,functional annotation,and in silico discovery of potential SNP molecular markers. Tetra-primer Amplification Refractory Mutation System PCR(ARMS-PCR) is a simple and sufficient method for detecting different alleles in SNP locus. Total 153 sets of ARMS-PCR primers were designed to validate the putative SNPs from sequences. PCR products from 103 sets of primers were different between Xu 781 and Xushu 18 via agarose gel electrophoresis,and the detection rate was 67.32%. We obtained the expected results from 32 sets of primers between the two genotypes. Furthermore,we ascertained the optimal annealing temperature of 32 sets of primers. These SNPs might be used in genotyping,QTL mapping,or marker-assisted trait selection further in sweetpotato. To our knowledge,this work was the first study to develop SNP markers in sweetpotato by using tetra-primer ARMS-PCR technique. This method was a simple,rapid,and useful technique to develop SNP markers,and will provide a potential and preliminary application in discriminating cultivars in sweetpotato. 展开更多
关键词 SNPs 甘薯品种 分子标记 测序技术 单核苷酸多态性 PCR引物 琼脂糖凝胶电泳 徐薯18
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新型钛铜合金对牙龈卟啉单胞菌超微结构及基因组DNA影响研究
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作者 张燕婷 谢艳婷 +6 位作者 顾舒扬 何晶 江鹭鹭 张翀 邓春富 张二林 赵宝红 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2017年第10期605-608,共4页
目的研究新型钛铜合金对牙龈卟啉单胞菌超微结构和基因组DNA的影响。方法制备含铜量质量分数依次为2%、5%和10%的钛铜合金样片作为实验组,分别命名为Ti-2%Cu组、Ti-5%Cu组和Ti-10%Cu组;以商业纯钛样片作为对照组,命名为cp-Ti... 目的研究新型钛铜合金对牙龈卟啉单胞菌超微结构和基因组DNA的影响。方法制备含铜量质量分数依次为2%、5%和10%的钛铜合金样片作为实验组,分别命名为Ti-2%Cu组、Ti-5%Cu组和Ti-10%Cu组;以商业纯钛样片作为对照组,命名为cp-Ti组。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)菌悬液接种于置有各组样片的6孔细胞培养板中培养24h。透射电镜观察各组样片作用后Pg超微结构的变化;应用琼脂糖凝胶电泳观察细菌基因组DNA的变化。结果(1)透射电镜结果显示:随着含铜量的增加,菌体结构破坏的细菌数随之增多;且Ti-2%Cu组、Ti-5%Cu组和Ti-10%Cu组的P譬均出现细胞壁破裂,细胞膜模糊不清、内陷、断裂,细胞质外溢出现空泡,细胞内出现黑色沉淀物;而Cp—Ti组的细菌未出现明显的菌体超微结构改变,细胞壁和菌毛、细胞膜和细胞质结构清晰。(2)琼脂糖凝胶电泳结果显示:对照组与实验组的P髯经钛铜合金作用24h后相比较,基因组DNA含量没有明显差别。结论铜离子可引起Pg超微结构的变化,但短时间内不造成细菌基因组DNA的降解。 展开更多
关键词 钛铜合金 抗菌机制 牙龈卟啉单胞菌 透射电镜 琼脂糖凝胶电泳
两种茄科植物基因组提取方法的比较 预览
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作者 刘秀丽 吕红 范小峰 《陇东学院学报》 2017年第1期53-56,共4页
以番茄和马铃薯的幼叶、嫩茎组织作为实验材料,使用CTAB提取DNA法、SDS法和尿素提取法提取基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳法检测基因组提取效果,筛选出适合不同组织的最优基因组提取方法。结果表明,采用不同的方法提取植物基因组DNA的质... 以番茄和马铃薯的幼叶、嫩茎组织作为实验材料,使用CTAB提取DNA法、SDS法和尿素提取法提取基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳法检测基因组提取效果,筛选出适合不同组织的最优基因组提取方法。结果表明,采用不同的方法提取植物基因组DNA的质量不同而差异很大,CTAB法提取植物叶片基因组效果较好,SDS法提取植物嫩茎基因组效果较好,而尿素法提取效果均不佳。基因组提取方法的筛选与改良为这两种茄科作物的分子研究奠定了基础。 展开更多
关键词 植物基因组 CTAB法 SDS法 尿素法 琼脂糖凝胶电泳
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牛源性硫酸软骨素鉴定 预览
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作者 马剑宁 张志杰 《黑龙江医药》 CAS 2017年第5期969-971,共3页
目的:硫酸软骨素来源的研究。方法:从不同物种来源的硫酸软骨素中提JRDNA,然后应用PCR方法扩增特异片段。再用琼脂糖凝胶电泳对PCR的产物进行分析,确定硫酸软骨素的物种来源。结果:在猪源性硫酸软骨素样品中检测出猪特异·DNA... 目的:硫酸软骨素来源的研究。方法:从不同物种来源的硫酸软骨素中提JRDNA,然后应用PCR方法扩增特异片段。再用琼脂糖凝胶电泳对PCR的产物进行分析,确定硫酸软骨素的物种来源。结果:在猪源性硫酸软骨素样品中检测出猪特异·DNA片段,而在牛源性硫酸软骨素样品中分别检测出猪、牛特异性的DNA片段。结论:经过调查为厂家在硫酸软骨素生产过程中使用了猪的胰酶,所以该方法灵敏度高且可靠。 展开更多
关键词 硫酸软骨素 PCR 琼脂糖凝胶电泳
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A simple and efficient method for CRISPR/Cas9-induced mutant screening
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作者 Yufeng Hua Chun Wang +1 位作者 Jian Huang Kejian Wang 《遗传学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期207-213,共7页
The clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9) system provides a technological breakthrough in mutant generation. Several methods such as the polymerase chain r... The clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9) system provides a technological breakthrough in mutant generation. Several methods such as the polymerase chain reaction(PCR)/restriction enzyme(RE) assay, T7 endonuclease I(T7EI) assay, Surveyor nuclease assay, PAGE-based genotyping assay, and high-resolution melting(HRM) analysis-based assay have been developed for screening CRISPR/Cas9-induced mutants. However, these methods are timeand labour-intensive and may also be sequence-limited or require very expensive equipment. Here, we described a cost-effective and sensitive screening technique based on conventional PCR, annealing at critical temperature PCR(ACT-PCR), for identifying mutants. ACT-PCR requires only a single PCR step followed by agarose gel electrophoresis. We demonstrated that ACT-PCR accurately distinguished CRISPR/Cas9-induced mutants from wild type in both rice and zebrafish. Moreover, the method can be adapted for accurately determining mutation frequency in cultured cells. The simplicity of ACT-PCR makes it particularly suitable for rapid, large-scale screening of CRISPR/Cas9-induced mutants in both plants and animals. 展开更多
关键词 突变体筛选 诱导 常规PCR 琼脂糖凝胶电泳 限制性内切酶 聚合酶链反应 精确测定 核酸检测
Genomic DNA Extraction Method for Mulberry Varieties in Anhui Province
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作者 Wang Yuting Li Ruixue +1 位作者 Wang Wei Wang Taichu 《动物与饲料科学:英文版》 CAS 2017年第3期135-137,共3页
[Objective] The paper aimed to get a efficient,stable and low-priced DNA extraction method of mulberry leaves. [Method] With tender leaves of mulberry varieties in Anhui Province as materials,genomic DNA was extracted... [Objective] The paper aimed to get a efficient,stable and low-priced DNA extraction method of mulberry leaves. [Method] With tender leaves of mulberry varieties in Anhui Province as materials,genomic DNA was extracted with CTAB method,and further identified by ultraviolet spectrophotometer,agarose gel electrophoresis and PCR methods. [Result] The A260/A280 ratio of extracted DNA was 1. 80-1. 90,and the yield was 0. 187-0. 275 μg/mg. With extracted DNA as the template,clear target bands were obtained by PCR. [Conclusion]Extracted DNA was good in quality,which could satisfy the needs of follow-up molecular biological operation. 展开更多
关键词 DNA提取方法 基因组DNA 桑树品种 安徽省 DNA提取方法 紫外分光光度法 琼脂糖凝胶电泳 CTAB法
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三个喹啉银(Ⅰ)配合物的抗肿瘤活性研究 预览 被引量:1
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作者 蒙婷 覃其品 +2 位作者 张运良 伍宸旋 梁月兰 《广东化工》 CAS 2016年第9期50-51,共2页
采用MTT法测定配合物1~3对5种肿瘤细胞株(T-24、SK-OV-3、SK-OV-3/DDP、BEL-7402、HCT-8)和1种人正常肝细胞HL-7702进行体外活性测试,并利用琼脂糖凝胶电泳实验初步探讨了配合物1~3与p UC19 DNA相互作用。实验结果表明,相对于正常细胞... 采用MTT法测定配合物1~3对5种肿瘤细胞株(T-24、SK-OV-3、SK-OV-3/DDP、BEL-7402、HCT-8)和1种人正常肝细胞HL-7702进行体外活性测试,并利用琼脂糖凝胶电泳实验初步探讨了配合物1~3与p UC19 DNA相互作用。实验结果表明,相对于正常细胞HL-7702,配合物1~3对5种肿瘤细胞的生长均表现出不同程度的抑制作用,其IC50范围为5.7~40.1μM。同时,研究还发现配合物1~3以插入作用方式与DNA作用。 展开更多
关键词 银(Ⅰ)配合物 抗肿瘤活性 MTT法 插入作用 琼脂糖凝胶电泳
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水貂犬瘟热病毒RT-PCR检测方法建立及应用 预览 被引量:1
16
作者 于红鸽 《中国畜禽种业》 2016年第10期72-73,共2页
水貂犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)属于副黏病毒科(Paramyxoviridae)麻疹病毒属(Morbillivirus)。形状多种,病毒直径大小多在150-300nm。本实验通过RTPCR技术检测了水貂病料中犬瘟热病毒的感染情况,建立具有快速、灵敏... 水貂犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)属于副黏病毒科(Paramyxoviridae)麻疹病毒属(Morbillivirus)。形状多种,病毒直径大小多在150-300nm。本实验通过RTPCR技术检测了水貂病料中犬瘟热病毒的感染情况,建立具有快速、灵敏的RT-PCR检测方法。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 RT-PCR检测方法 DISTEMPER 副黏病毒科 参考毒株 麻疹病毒属 AGAROSE 瘟热 琼脂糖凝胶电泳 下游引物
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肝素样品前处理方法比较及荧光定量PCR法鉴定肝素原料种属来源 预览 被引量:2
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作者 周朝东 白海娇 黄哲甦 《中国生化药物杂志》 CAS 2016年第6期197-199,共3页
目的比较肝素原料的3种前处理方法,即磁珠吸附法、琼脂糖凝胶回收法和肝素酶降解法的优劣,并对肝素原料的种属来源进行鉴别。方法分别用磁珠提取试剂盒、琼脂糖凝胶回收试剂盒和肝素酶对肝素原料进行前处理,用商业化的猪、牛、羊种属鉴... 目的比较肝素原料的3种前处理方法,即磁珠吸附法、琼脂糖凝胶回收法和肝素酶降解法的优劣,并对肝素原料的种属来源进行鉴别。方法分别用磁珠提取试剂盒、琼脂糖凝胶回收试剂盒和肝素酶对肝素原料进行前处理,用商业化的猪、牛、羊种属鉴别试剂盒进行检测。采用荧光定量PCR法对3批肝素原料进行种属来源的鉴别,同时对猪源肝素中掺入的不同比例羊源肝素进行检出限的检测。结果 3种不同的前处理方法以肝素酶降解法最快捷、最省时和最经济;种属来源鉴别结果准确。荧光定量PCR法检测猪源肝素中掺入羊源肝素的检出限是0.01%。结论肝素酶降解法能简捷、快速、经济的解决肝素原料中样品前处理的技术难点,结合商业化的猪、牛、羊鉴别试剂盒与荧光定量PCR仪能够简便、快速、准确的对肝素原料种属来源进行鉴别。 展开更多
关键词 磁珠提取 琼脂糖凝胶电泳 肝素酶 荧光定量PCR 肝素原料 种属鉴别 质量控制
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白术根茎的总RNA提取方法的比较
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作者 刘小丽 朱梦晴 +3 位作者 蔡雯洁 刘亚男 石亚男 屈长青 《阜阳师范学院学报:自然科学版》 2016年第1期46-49,共4页
探讨提取白术根茎总RNA的最优方案。以新鲜白术的根茎为实验材料,采用三种方法提取其根茎总RNA。用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳检测RNA样品完整性,用RT-PCR方法验证RNA质量。用多糖多酚植物总RNA提取试剂盒的方法,获得了完整性最好... 探讨提取白术根茎总RNA的最优方案。以新鲜白术的根茎为实验材料,采用三种方法提取其根茎总RNA。用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳检测RNA样品完整性,用RT-PCR方法验证RNA质量。用多糖多酚植物总RNA提取试剂盒的方法,获得了完整性最好、质量最高的总RNA样品。提取白术根茎总RNA的三种方法中,多糖多酚植物总RNA提取试剂盒的方法最理想。 展开更多
关键词 白术根茎 RNA提取 完整性 RT-PCR 琼脂糖凝胶电泳.
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高糖对神经干细胞凋亡的影响
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作者 张俊涛 刘志贞 +1 位作者 刘丹 张悦红 《中西医结合心脑血管病杂志》 2016年第14期1610-1613,共4页
目的 探讨高糖环境是否可以诱导神经干细胞凋亡。方法 从C57大鼠海马组织提取培养神经干细胞,分为3组:正常对照组、低糖组(5mmol/L)、高糖组(50mmol/L),不同浓度葡萄糖作用48h后,运用琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状条带、流式细胞术检测细... 目的 探讨高糖环境是否可以诱导神经干细胞凋亡。方法 从C57大鼠海马组织提取培养神经干细胞,分为3组:正常对照组、低糖组(5mmol/L)、高糖组(50mmol/L),不同浓度葡萄糖作用48h后,运用琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状条带、流式细胞术检测细胞凋亡。结果 培养的神经干细胞具有形成神经球的能力,Nestin免疫荧光染色呈阳性反应,可分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。琼脂糖凝胶电泳显示高糖组提取的DNA出现特征性梯状条带,正常对照组和低糖组未出现。流式细胞术检测正常对照组细胞凋亡率(5.83±0.36)%,低糖组细胞凋亡率(6.25±0.52)%,两组比较差异无统计学意义(P >0.05);高糖组细胞凋亡率(20.97±1.21)%,与正常对照组和低糖组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 高糖环境可以诱导神经干细胞凋亡。 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞凋亡 琼脂糖凝胶电泳 Nestin免疫荧光染色
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一种适用于不同发育期山楂果实总RNA提取的方法 被引量:1
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作者 闫述模 袁媛 +1 位作者 杨滨 陈敏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期39-43,共5页
目的:筛选从不同发育期山楂果实中提取RNA的最佳方法。方法:对不同发育期山楂果实总RNA提取方法进行了探索,考察了Trizol法、改良Trizol法、经典十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和改良CTAB法提取RNA的效果,采用琼脂糖凝胶电泳和核酸... 目的:筛选从不同发育期山楂果实中提取RNA的最佳方法。方法:对不同发育期山楂果实总RNA提取方法进行了探索,考察了Trizol法、改良Trizol法、经典十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和改良CTAB法提取RNA的效果,采用琼脂糖凝胶电泳和核酸蛋白定量仪检测RNA质量。结果:Trizol法、改良Trizol法对成熟期山楂果实RNA提取效果不佳,琼脂糖凝胶电泳检测几乎看不到条带;经典CTAB法对各发育期样本RNA提取质量均不理想;改良CTAB法对不同发育期山楂果实总RNA有良好的提取效果,A260 nm/A280 nm均在2.0左右,28 S和18 S条带完整,满足反转录和聚合酶链式反应(PCR)扩增反应的需求。结论:建立的改良CTAB法是一种有效的山楂果实总RNA提取方法,适用于不同发育期山楂果实RNA的提取,为开展山楂有效成分的生物合成研究奠定了基础。 展开更多
关键词 山楂果实 不同发育期 改良CTAB法 RNA提取 琼脂糖凝胶电泳
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