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γH2AX和53BP1蛋白在肺正常上皮细胞DNA氧化损伤反应中的表达 预览
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作者 王竹 杨丽艳 +1 位作者 刘圆圆 徐克前 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第2期142-147,共6页
目的探讨肺正常上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)中磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated H2AX,γH2AX)和p53结合蛋白1(p53-Binding protein 1,53BP1)在DNA氧化损伤反应中的表达。方法用0、25、50、100、200、400μmo... 目的探讨肺正常上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)中磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated H2AX,γH2AX)和p53结合蛋白1(p53-Binding protein 1,53BP1)在DNA氧化损伤反应中的表达。方法用0、25、50、100、200、400μmol/L过氧化氢(H2O2)处理HBE细胞1 h,对其造成氧化损伤引起DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs);CCK-8比色法检测H2O2对HBE细胞活性的影响,流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光显微镜检测HBE细胞核内γH2AX和53BP1蛋白的聚集情况,western blot检测γH2AX、53BP1、BRCA1蛋白的表达水平。结果与对照组比较,25μmol/L H2O2处理组细胞活性(1.07±0.01)升高,50、100、200、400μmol/L H2O2处理组细胞活性(分别为0.97±0.01,0.96±0.01,0.95±0.01和0.94±0.01)降低,差异具有统计学意义(F=50.35,P〈0.01)。细胞凋亡检测结果显示,与对照组[(4.65±0.32)%]比较,50、100、200、400μmol/L H2O2处理组细胞凋亡率[分别为(7.54±0.57)%、(7.84±0.68)%、(8.40±0.50)%和(14.03±1.03)%]升高(F=35.879,P〈0.01)。与对照组比较,经25、50、100、200、400μmol/L H2O2处理后γH2AX的平均荧光强度升高(F=223.97,P〈0.01),而经50、100、200、400μmol/L H2O2处理后53BP1的平均荧光强度降低(F=117.78,P〈0.01);western blot结果显示,随着H2O2浓度升高,γH2AX蛋白表达水平升高,BRCA1和53BP1的表达水平下降,差异均具有统计学意义(F分别为96.20,11.55,21.92,P均〈0.01)。结论在H2O2导致HBE细胞的氧化损伤中,γH2AX可作为DNA氧化损伤标志物,但53BP1的表达下降提示HBE细胞可能通过其他途径进行DNA氧化损伤的修复。 展开更多
关键词 磷酸化组蛋白H2AX P53结合蛋白1 DNA双链断裂 氧化应激 HBE细胞
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^56Fe^17+重离子束对人淋巴细胞磷酸化组蛋白H2AX表达影响研究
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作者 董娟聪 原雅艺 +5 位作者 张睿凤 党旭红 张忠新 刘建功 左雅慧 段志凯 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2016年第4期471-474,共4页
目的探讨^56Fe^17+重离子束对人淋巴细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达的影响。方法取非洲淋巴细胞瘤病毒转化正常人B淋巴细胞(Peng-EBV细胞),分别予照射剂量为0.0(对照组)、0.1、0.3、0.5、0.7、1.0、2.0Gy的^56Fe^17+重离子照... 目的探讨^56Fe^17+重离子束对人淋巴细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达的影响。方法取非洲淋巴细胞瘤病毒转化正常人B淋巴细胞(Peng-EBV细胞),分别予照射剂量为0.0(对照组)、0.1、0.3、0.5、0.7、1.0、2.0Gy的^56Fe^17+重离子照射,照射剂量率为0.23-0.55 Gy/min,分别于照射后0、2、4、8、48及72 h采用流式细胞术检测细胞γH2AX的表达量。结果γH2AX表达水平在56Fe12+重离子照射剂量与照射后处理时间之间存在交互效应(P〈0.01)。照射后2-72 h,γH2AX的表达水平在照射剂量为0.3-2.0 Gy时均高于同时间点对照组(P〈0.05)。在0.3-2.0 Gy范围内,γH2AX的表达水平在照射后8-72 h均低于同组照射后2和4 h时间点的表达水平(P〈0.05)。当照射剂量为0.5、1.0或2.0 Gy时,γH2AX的表达水平照射后72 h内呈随着照射后时间的延长而下降的趋势(P〈0.05)。在照射后2-4 h,当照射剂量为0.0-1.0 Gy时,γH2AX表达水平随照射剂量增加而增加(P〈0.01)。结论在照射剂量为0.0-1.0时,^56Fe^17+重离子诱导的Peng-EBV细胞γH2AX表达水平于照射后2-4 h内存在剂量-响应关系。 展开更多
关键词 ^56Fe^17+重离子 DNA损伤修复 淋巴细胞 磷酸化组蛋白H2AX
头孢噻肟钠对斑马鱼SOD活性、MDA含量及DNA损伤的影响 被引量:3
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作者 沈洪艳 焦晓会 武彤 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期2626-2632,共7页
研究了不同浓度头孢噻肟钠溶液暴露15 d对斑马鱼肌肉组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)含量的影响.结果表明,低浓度组(1、5 mg·L^-1)暴露时,斑马鱼肌肉组织SOD活性呈现不规则变化;... 研究了不同浓度头孢噻肟钠溶液暴露15 d对斑马鱼肌肉组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)含量的影响.结果表明,低浓度组(1、5 mg·L^-1)暴露时,斑马鱼肌肉组织SOD活性呈现不规则变化;随着暴露浓度增加(25 mg·L^-1),SOD活性在实验初期(3 d)被抑制,后期逐渐被诱导,并在12 d达到峰值;高浓度(125 mg·L^-1)头孢噻肟钠显著抑制了鱼体内SOD活性,6 d时活性达到最小值.进一步测定了斑马鱼肌肉组织中MDA含量的变化,发现其与SOD活性呈负相关性,且在1 mg·L^-1和125 mg·L^-1暴露时尤为明显.在所选暴露浓度,斑马鱼肌肉中γ-H2AX含量均呈现先升高后降低的变化趋势.1、5、25 mg·L^-1浓度组在6 d时达到峰值,125 mg·L^-1浓度组在9 d时达到峰值.随着暴露时间的增加,γ-H2AX含量均降至空白水平,表明鱼体对产生的DNA损伤有自我修复功能.本研究表明,斑马鱼对头孢噻肟钠的氧化胁迫反应可能是导致其DNA损伤的重要机制之一. 展开更多
关键词 斑马鱼 头孢噻肟钠 超氧化物歧化酶 丙二醛 磷酸化组蛋白H2AX DNA损伤
磷酸化组蛋白H2AX介导的DNA损伤精子受精卵内修复 被引量:2
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作者 刘婉敏(综述) 刘容菊(综述) 李志凌(审校) 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期349-353,共5页
成熟精子易受外界影响产生DNA损伤,却缺乏DNA损伤修复系统。由于DNA损伤精子仍具有受精能力和发育潜力,其损伤修复可能发生在受精后。遗憾的是,DNA损伤精子受精后的修复机制尚不清楚。研究发现磷酸化组蛋白H2AX(histone H2AX phosphory... 成熟精子易受外界影响产生DNA损伤,却缺乏DNA损伤修复系统。由于DNA损伤精子仍具有受精能力和发育潜力,其损伤修复可能发生在受精后。遗憾的是,DNA损伤精子受精后的修复机制尚不清楚。研究发现磷酸化组蛋白H2AX(histone H2AX phosphorylation,γH2AX)参与了DNA损伤精子受精后的修复。本综述主要探讨DNA损伤精子受精后受精卵内经由γH2AX介导修复的可能机制。 展开更多
关键词 精子 受精卵 DNA损伤 磷酸化组蛋白H2AX
重离子所致DNA双链断裂损伤修复的γH2AX焦点响应 预览
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作者 隋丽 王豫 +2 位作者 关华 孔福全 周平坤 《载人航天》 CSCD 2017年第2期245-251,共7页
DNA双链断裂(DSB)是电离辐射所致基因组DNA的主要和最严重的损伤类型,磷酸化组蛋白γH2AX能比较特异地在DSB处形成焦点,是DSB的分子标志物之一。比较了重离子^7Li、^12C与γ射线辐照小鼠MEF细胞诱发γH2AX焦点的规律特征。结果显示,... DNA双链断裂(DSB)是电离辐射所致基因组DNA的主要和最严重的损伤类型,磷酸化组蛋白γH2AX能比较特异地在DSB处形成焦点,是DSB的分子标志物之一。比较了重离子^7Li、^12C与γ射线辐照小鼠MEF细胞诱发γH2AX焦点的规律特征。结果显示,诱发形成的平均每个细胞的γH2AX焦点数目与照后时间相关,表达峰值出现在照后2 h,但不同类型辐射高表达的持续时间不同。在相同剂量下,致焦点形成率与辐射的LET值相关,LET值越高,形成率越大。γ射线诱发的γH2AX焦点尺寸随照后时间无明显变化,高LET重离子诱发的γH2AX焦点尺寸随时间变化先增加后减小;与低LET的γ射线相比,高LET辐射诱发的焦点平均尺寸明显变大,LET越高焦点尺寸越大且保持时间越长。 展开更多
关键词 基因稳定性 DNA双链断裂 DNA修复 磷酸化组蛋白H2AX聚焦点 重离子 γ射线
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