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单纯疱疹病毒Ⅰ型基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒减毒活疫苗Oka株感染小鼠的生物学特性比较
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作者 柳蕾 徐兴丽 +4 位作者 冯敏 何玉凤 王丽春 张莹 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期249-254,共6页
目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫... 目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫苗剂量的VZV Oka株以不同方式(腹腔、肌肉、鼻腔、足垫)感染小鼠后,对小鼠的急性临床反应、体重变化、病毒增殖、组织病理损伤及病毒重激活等生物学特性进行比较。结果 HSV-ⅠM3及VZV Oka组小鼠均未见弓背、倒毛、单侧眼失明等急性临床症状,体重均呈逐渐上升趋势;器官组织中病毒拷贝数均处于较低水平,且两组差异无统计学意义(P> 0. 05);小鼠脑组织出现轻微局部炎症细胞浸润、出血、胶质小结或无异常,两组差异较小,脊髓组织均未出现明显异常;神经组织与Vero细胞共培养,均未观察到细胞病变(CPE)。结论 HSV-ⅠM3株与VZV Oka株感染小鼠后的生物学特征无明显差异。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅰ型 突变 水痘带状疱疹病毒 减毒活疫苗 小鼠 生物学特性
单增李斯特标准菌NrdD基因插入突变株的构建 预览
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作者 舒加乐 郑琳琳 《湖北畜牧兽医》 2019年第5期5-7,共3页
利用同源重组的原理构建了单增李斯特氏菌NrdD基因插入突变株,从大肠杆菌基因组中分别扩增出NrdD基因上下游同源臂,与pKSV7质粒相连,构建成功重组突变载体pKSV7-D1D2,将其电转入单增李斯特菌后,用氯霉素抗性平板筛选得到NrdD基因插入突... 利用同源重组的原理构建了单增李斯特氏菌NrdD基因插入突变株,从大肠杆菌基因组中分别扩增出NrdD基因上下游同源臂,与pKSV7质粒相连,构建成功重组突变载体pKSV7-D1D2,将其电转入单增李斯特菌后,用氯霉素抗性平板筛选得到NrdD基因插入突变株,并对突变菌株序列测定,证明回复突变株构建成功。该突变株可在严格无氧环境中生存,为进一步研究NrdD基因功能、单增李斯特的致病机制和疫苗载体的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 NrdD基因 突变 同源重组
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鸭源鸡杆菌gtxA突变株构建及其生物特性分析
3
作者 王继洋 彭志锋 +5 位作者 刘盼盼 王坤芃 王川庆 陈陆 赵军 杨霞 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期414-420,共7页
为了了解毒素GtxA对鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis,G.anatis)生物学特性及致病性的影响,利用自然转化和正向筛选法构建了1株G.anatis gtxA缺失突变株,初步探究突变株的生物学特性。与亲本菌株比较,突变株溶血活性消失,菌落形态及生... 为了了解毒素GtxA对鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis,G.anatis)生物学特性及致病性的影响,利用自然转化和正向筛选法构建了1株G.anatis gtxA缺失突变株,初步探究突变株的生物学特性。与亲本菌株比较,突变株溶血活性消失,菌落形态及生长速率并未出现显著改变,其对小鼠的致病力下降。外毒素GtxA参与G.anatis致病过程并扮演一定角色;G.anatis gtxA基因突变株的构建及其生物学特性探究为更好的了解其致病机理和研发出更为高效安全疫苗建立了理论基础。 展开更多
关键词 G.anatis gtxA基因 突变 致病性
高致病性猪链球菌双组分系统Ihk/Irr双基因缺失突变株的构建 预览
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作者 郑美玉 张维瑜 +1 位作者 李咏梅 韩慧明 《北华大学学报:自然科学版》 CAS 2018年第3期327-333,共7页
目的构建Ⅱ型猪链球菌05ZYH33菌株双组分系统Ihk/Irr的双基因缺失突变株.方法首先对双组分系统Ihk/Irr基因进行序列分析;选取Ihk/Irr基因的相关片段克隆至p ET30a表达载体,进行可溶表达并注射家兔制备抗体;分别将ihk基因上游irr基因下游... 目的构建Ⅱ型猪链球菌05ZYH33菌株双组分系统Ihk/Irr的双基因缺失突变株.方法首先对双组分系统Ihk/Irr基因进行序列分析;选取Ihk/Irr基因的相关片段克隆至p ET30a表达载体,进行可溶表达并注射家兔制备抗体;分别将ihk基因上游irr基因下游各1 kb的片段扩增,将两个片段连接起来;克隆至温敏型p JRS233的穿梭质粒中;利用两步同源重组法获得突变体;分别提取突变株的基因组DNA,RNA及菌体总蛋白,利用PCR,RT-PCR,Western-blot方法验证突变体.结果成功制备了双组分系统Ihk/Irr可溶性表达的蛋白,成功构建了重组的温敏型ikr-p JRS233重组质粒,成功将重组质粒转入猪链球菌05ZYH33中并获得突变株,基因组PCR,RTPCR及Western-blot分别证实了双组分系统Ihk/Irr双基因被成功敲除.结论成功构建重组温敏型的穿梭质粒,导入到猪链球菌05ZYH33菌株中经两步同源重组获得突变株,在基因组DNA,RNA及蛋白水平上验证了双组分系统Ihk/Irr双基因缺失株的成功构建. 展开更多
关键词 Ⅱ型猪链球菌 双组分系统 Ihk/Irr 突变
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高产梧宁霉素产生菌诱变选育的研究 预览
5
作者 潘红梅 黄静 +2 位作者 邓楷 罗丹 卢付青 《食品与发酵科技》 CAS 2018年第5期1-3,共3页
以不吸水链霉菌(Streptomyees ahygroselens)BLM-55为出发菌株,采用萌动孢子悬浮液进行紫外(UV)、叠氮化钠NaN3等物理化学因子进行独立和复合诱变处理,从复合诱变处理中选育出一株产梧宁霉素较高的突变株UD-86,抑菌效价达28.2m... 以不吸水链霉菌(Streptomyees ahygroselens)BLM-55为出发菌株,采用萌动孢子悬浮液进行紫外(UV)、叠氮化钠NaN3等物理化学因子进行独立和复合诱变处理,从复合诱变处理中选育出一株产梧宁霉素较高的突变株UD-86,抑菌效价达28.2mm/μL以上。 展开更多
关键词 复合诱变 突变
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空肠弯曲菌fliD基因突变株的构建及其生物学特性
6
作者 唐虹 张小燕 +3 位作者 杜雪晴 宋召军 焦新安 黄金林 《微生物学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期219-227,共9页
【目的】研究fliD基因对空肠弯曲菌生物学特性的影响,为阐明该基因的功能和作用机制奠定基础。【方法】利用同源重组技术构建fliD基因的插入失活突变株NCTC11168△fliD,并通过与野生株比较,对∥国突变株生长速率、运动力、黏附力和... 【目的】研究fliD基因对空肠弯曲菌生物学特性的影响,为阐明该基因的功能和作用机制奠定基础。【方法】利用同源重组技术构建fliD基因的插入失活突变株NCTC11168△fliD,并通过与野生株比较,对∥国突变株生长速率、运动力、黏附力和侵袭力等生物学特性进行研究。【结果】与野生型NCTC11168相比,突变株NCTC11168△fliD的生理生化特性不变;突变株的生长速率无明显变化;MH半固体穿刺实验中,突变株只能在接种处生长,运动力明显减弱;在Caco-2细胞黏附、侵袭实验中,fliD突变株的黏附率和侵袭率分别为164.00+19.49、55.00±6.09,fliD基因失活使得突变株的黏附率和侵袭率显著降低(0〈P〈0.01)。【结论】fliD基因是空肠弯曲菌运动能力重要的分子基础,与空肠弯曲菌感染细胞的黏附侵袭作用密切相关,即与空肠弯曲菌的致病性密切相关。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 fliD基因 突变 生物学特性
湖泊微拟球藻高含油突变株的构建及筛选 预览
7
作者 张玲香 陈怡雯 胡晗华 《水生生物学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期416-420,共5页
:研宄旨在建立湖泊微拟球藻(iVawzocWoro/w的的遗传转化体系,然后根据外源基因随机插入的特性,挑取抗性转化子构建突变体库,并从突变体库中筛选高含油突变株。以湖泊微拟球藻自身基因启动子和三角褐指藻终止子驱动和终止来源于细菌的WW... :研宄旨在建立湖泊微拟球藻(iVawzocWoro/w的的遗传转化体系,然后根据外源基因随机插入的特性,挑取抗性转化子构建突变体库,并从突变体库中筛选高含油突变株。以湖泊微拟球藻自身基因启动子和三角褐指藻终止子驱动和终止来源于细菌的WWe抗性选择基因,构建了一个转化载体pPha-Tl-TUB。将线性化后的质粒以电穿孔的方法转化湖泊微拟球藻,通过1Hg/mLzeocin的抗性平板筛选,并经液体培养基连续传代后,得到了可以稳定遗传的转化子。我们从这些转化子中筛选得到了数株油含量高于野生型,且生长也优于野生型的突变株。其中,2个突变株K26和G5的总脂中多不饱和脂肪酸含量更低,其脂肪酸组成更符合作为生物柴油原料的标准。研宄通过随机插入构建突变体库的方法为快速获取优良目的性状的髙产油突变株提供了一个有效手段。 展开更多
关键词 湖泊微拟球藻 三酰基甘油 电转化 突变
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白桦黄叶突变株叶色变化规律及苗高生长特性分析 预览
8
作者 任烁淇 刘冰洋 +6 位作者 李雪莹 邢建辉 李政纶 王楚 冮慧欣 刘桂丰 姜静 《植物研究》 CSCD 北大核心 2018年第6期852-859,共8页
植物叶色突变体是研究植物光合作用机制、叶绿素生物合成分解途径的理想材料。为了研究白桦T-DNA突变株(yl)叶色与叶绿素含量的关系及yl苗高生长特性,实验以yl突变株为材料,测定其叶绿素与叶色的时序变化规律,分析生长特性。实验结果显... 植物叶色突变体是研究植物光合作用机制、叶绿素生物合成分解途径的理想材料。为了研究白桦T-DNA突变株(yl)叶色与叶绿素含量的关系及yl苗高生长特性,实验以yl突变株为材料,测定其叶绿素与叶色的时序变化规律,分析生长特性。实验结果显示,白桦在生长季的不同发育时期,yl突变株的叶色一直呈现深黄绿色,色度计测定发现其叶片黄色程度及亮度均高于对照株系,叶色参数b*值分布于CIELab系统色拼图的黄色区域;从早春到9月中旬,yl突变株的叶绿素SPAD值一直显著低于对照株系(P<0.05),该值与a*值呈显著的负相关。yl突变株苗高显著低于对照株系,苗高年生长仅是对照株系均值的35.15%,其速生期内苗高日生长量均值(GD)也显著低于对照株系,是对照株系均值的58.50%,认为苗高生长量的降低是由于T-DNA插入突变影响了叶绿素生物合成的结果。 展开更多
关键词 白桦 突变 叶色变异 生长
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Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变株的酶学性质及其制备海藻糖的条件优化 预览
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作者 王振栋 宿玲恰 吴敬 《食品与发酵工业》 CSCD 北大核心 2018年第8期14-19,共6页
来源于古细菌嗜酸热硫矿硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909)的麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltooligosyltrehalose trehalohydrolase,MTHase)是双酶法生产海藻糖的关键酶。对1株蛋白表达量提高1.9倍的突变株L202P/L218D/Y323... 来源于古细菌嗜酸热硫矿硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909)的麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltooligosyltrehalose trehalohydrolase,MTHase)是双酶法生产海藻糖的关键酶。对1株蛋白表达量提高1.9倍的突变株L202P/L218D/Y323G进行酶学性质方面的测定和海藻糖转化。对突变株L202P/L218D/Y323G SaMTHase进行最适温度、最适pH值、pH稳定性和60℃半衰期的测定,发现该突变株的酶学性质未发生较大变化。将麦芽四糖基海藻糖为底物,测定突变株L202P/L218D/Y323G SaMTHase酶动力学相关参数。将麦芽糊精(DE值5~7)作为底物,利用嗜酸热硫矿硫化叶菌的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltooligosyl trehalose synthase,MTSase)与突变株L202P/L218D/Y323G SaMTHase以不同比例作用于底物生产海藻糖,海藻糖的转化率最高达到76.0%。 展开更多
关键词 麦芽寡糖基海藻糖水解酶 突变 酶学性质 酶转化 海藻糖
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解淀粉芽孢杆菌所产脂肽丰原素是防治苹果采后青霉病的关键物质 预览
10
作者 付瑞敏 常慧萍 +1 位作者 邢文会 陈五岭 《江苏农业科学》 2018年第3期80-85,共6页
为构建解淀粉芽孢杆菌丰原素合成酶基因fenC缺失突变株,研究丰原素在苹果采后青霉病防治中所起的作用.根据同源重组的原理,采用PCR扩增fenC基因上、下游的同源序列,将其连接至穿梭质粒pMAD,构建含有壮观霉素抗性基因(spc)的同源重组质... 为构建解淀粉芽孢杆菌丰原素合成酶基因fenC缺失突变株,研究丰原素在苹果采后青霉病防治中所起的作用.根据同源重组的原理,采用PCR扩增fenC基因上、下游的同源序列,将其连接至穿梭质粒pMAD,构建含有壮观霉素抗性基因(spc)的同源重组质粒pMAD-Δfen,通过电转化技术,将其转至解淀粉芽孢杆菌BA-16-8,通过抗生素抗性筛选、蓝白斑筛选和高温培养筛选出解淀粉芽孢杆菌fenC基因敲除突变株BA-16-8-Δfen.通过高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,简称HPLC)分析、质谱鉴定和抑菌性试验检测敲除fenC基因对解淀粉芽孢杆菌防治青霉病的影响.结果表明,与野生株相比,突变株菌株细胞及其所产抗生素脂肽对扩展青霉的防治效果显著降低.说明丰原素在解淀粉芽孢杆菌BA-16-8防治青霉病中发挥主要作用. 展开更多
关键词 解淀粉芽胞杆菌 青霉病 丰原素 突变 同源重组 扩展青霉菌
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猪链球菌2型强毒株sly基因敲除株构建及生物学特征分析
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作者 孙雯 郑峰 《生物技术》 CAS 北大核心 2017年第1期45-52,共8页
[目的]构建猪链球菌2型05ZYH33溶血素sly基因敲除突变株,比较突变株与野生株生物学特征。[方法]分别克隆sly上游序列L、下游序列R和壮观霉素抗性基因spcr,构建基因敲除质粒p UC18-LSR,并电转化入05ZYH33感受态细菌。用多重PCR、RT-PCR及... [目的]构建猪链球菌2型05ZYH33溶血素sly基因敲除突变株,比较突变株与野生株生物学特征。[方法]分别克隆sly上游序列L、下游序列R和壮观霉素抗性基因spcr,构建基因敲除质粒p UC18-LSR,并电转化入05ZYH33感受态细菌。用多重PCR、RT-PCR及Southern杂交对sly基因敲除突变株进行鉴定。比较突变株与野生株的生长速率和溶血现象。[结果]多重PCR和RT-PCR分别显示,野生株DNA和c DNA都能扩增出579 bp的sly内部片段,而突变株DNA和c DNA都未能扩增出此片段。Southern杂交显示,突变株中未见sly探针杂交条带。突变株生长速率较野毒株迟缓,溶血能力减弱,但依然存在。[结论]建立了高效稳定的电转化方法,成功构建出溶血能力减弱的双交换同源重组sly基因敲除突变株。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶血素 基因敲除 突变 野生 生长曲线 溶血
炭疽芽孢杆菌sigF缺失株的构建及其对芽孢形成的影响
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作者 洪一平 王东澍 +5 位作者 吕宇飞 陈蒙 冯尔玲 王恒樑 卢瑛 刘先凯 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期199-204,共6页
目的构建炭疽芽孢杆菌sigF基因缺失株,以及缺失株的sigF回复株,分析缺失株、回复株表型特点并明确sigF基因对芽孢形成的影响,为后续研究提供基础。方法采用同源重组技术在炭疽菌A16D2(pXO1+pXO2-)菌株sigF基因处插入大观霉素抗性基因... 目的构建炭疽芽孢杆菌sigF基因缺失株,以及缺失株的sigF回复株,分析缺失株、回复株表型特点并明确sigF基因对芽孢形成的影响,为后续研究提供基础。方法采用同源重组技术在炭疽菌A16D2(pXO1+pXO2-)菌株sigF基因处插入大观霉素抗性基因,取代sigF基因,构建了sigF基因缺失突变株。通过构建回复株质粒并电转到sigF基因缺失株中,构建了sigF基因的回复株。通过生长曲线测定、糖代谢能力比较、显微镜观察芽孢形成及微流控实验实时观察细胞生长等方法分析突变株和回复株的特点。结果获得炭疽菌A16D2菌株sigF基因缺失突变株和相应的回复株。生长曲线测定表明,突变株较出发菌株在繁殖体阶段生长状态无明显差异;糖代谢实验表明,突变株与出发菌株在对碳水化合物的利用上差异不显著;显微镜观察显示,突变株丧失了形成芽孢的能力、回复株恢复了部分形成芽孢的能力;微流控实验观察显示,缺失株细胞保持在不对称分裂的状态,回复株能形成芽孢。结论成功获得了炭疽菌A16D2sigF基因缺失突变株。该研究证明sigF基因为炭疽菌形成芽孢所必需,但不是细胞生长所必需的因子。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 炭疽 芽孢 sigF 突变
双孢蘑菇新菌株蛋白质的营养评价与分析 预览
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作者 韩彦飞 刘苗苗 +1 位作者 徐丽丽 郭立忠 《山东农业科学》 2017年第8期59-62,共4页
本研究测定了双孢蘑菇亲本FA15与突变株FA15-5、FA15-6子实体的氨基酸含量,并利用非生物学指标,以鸡蛋蛋白为标准蛋白,以WHO/FAO必需氨基酸参考模式为评价标准,对双孢蘑菇子实体的蛋白质营养价值进行了全面评价。结果表明:亲本与两个... 本研究测定了双孢蘑菇亲本FA15与突变株FA15-5、FA15-6子实体的氨基酸含量,并利用非生物学指标,以鸡蛋蛋白为标准蛋白,以WHO/FAO必需氨基酸参考模式为评价标准,对双孢蘑菇子实体的蛋白质营养价值进行了全面评价。结果表明:亲本与两个突变株的氨基酸种类齐全,必需氨基酸占氨基酸总量的百分比分别为36.99%、39.31%、36.53%。亲本和突变株的限制性氨基酸均为异亮氨酸。氨基酸评分(AAS)显示,FA15-5、FA15-6比FA15分别低31.71%高25.00%。突变株FA15-6的必需氨基酸指数(EAAI)值较FA15高39.97%,生物价(BV)较FA15高54.73%,营养指数(NI)值较FA15高40.00%。因此,在营养价值方面,FA15-6是优于亲本的良好突变菌株。 展开更多
关键词 双孢蘑菇 突变 氨基酸 蛋白质 营养评价
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国内外商品化猪圆环病毒2型疫苗分类及特点 预览 被引量:1
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作者 魏凤 张文通 +2 位作者 李峰 苗立中 沈志强 《养猪》 2017年第5期111-112,共2页
猪圆环病毒病(Porcine circovirus disease,PCVD)是由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染引起的猪的传染性疾病。1997年Nzyar等率先发现了一种PCV突变株,能够导致猪系统衰竭综合征;此后将分离到的这种区别于以往PC... 猪圆环病毒病(Porcine circovirus disease,PCVD)是由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染引起的猪的传染性疾病。1997年Nzyar等率先发现了一种PCV突变株,能够导致猪系统衰竭综合征;此后将分离到的这种区别于以往PCV的毒株命名为PCV2。目前PCV2已在全球各养猪国家都检测到,分布呈全球性。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 疫苗免疫效果 衰竭综合征 灭活疫苗 PCVD 颈部肌肉注射 免疫期 基础免疫 接种剂量 突变
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铜绿假单胞菌NY3及其突变株好氧降解四溴双酚A特性研究
15
作者 齐慧霞 聂麦茜 +2 位作者 赵碧洁 陈琪 聂红云 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期185-192,共8页
为明确铜绿假单胞菌NY3 2个烷羟化酶基因alk B1和alk B2基因在该菌代谢四溴双酚A中的作用,研究了野生NY3菌及其突变菌株(NB1D、NB2D及NB12DD)对四溴双酚A好氧降解特性.研究表明,NY3、NB1D、NB2D及NB12DD菌株均能以四溴双酚A为单一碳... 为明确铜绿假单胞菌NY3 2个烷羟化酶基因alk B1和alk B2基因在该菌代谢四溴双酚A中的作用,研究了野生NY3菌及其突变菌株(NB1D、NB2D及NB12DD)对四溴双酚A好氧降解特性.研究表明,NY3、NB1D、NB2D及NB12DD菌株均能以四溴双酚A为单一碳源和能源进行生长,并对四溴双酚A进行一定程度上的降解.NY3菌中alk B1基因和alk B2基因的缺失对NY3菌株在四溴双酚A中的生长有抑制作用,而且alk B1基因和alk B2基因在NY3菌降解四溴双酚A中起一定的作用,但不完全,说明NY3菌中还存在其他影响四溴双酚A降解的基因.缺失alk B2基因的突变株NB2D在高浓度的四溴双酚A溶液中降解转化率最少,说明alk B2基因的缺失,对NY3菌降解高浓度四溴双酚A碳源更重要.加入同一易降解共代谢碳源,野生株NY3菌及其各突变株生长特性无明显差异,然而,因共存碳源种类不同,同一菌株细胞生长量、对四溴双酚A降解及其脱溴效率等特性差别明显.加最佳共代谢碳源乳酸钠的体系内,突变株NB2D存在下易积累中间产物3,3’,5-三溴双酚A和2-溴-4(异丙基-溴苯)-苯酚等直接脱溴产物,说明alk B1基因可能为NY3菌株代谢四溴双酚A脱溴时的关键基因. 展开更多
关键词 四溴双酚A 好氧降解 铜绿假单胞菌NY3 突变 ALK B基因
羊种布鲁氏菌Rev.1突变株在BALB/c鼠中的免疫保护评价 预览
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作者 叶锋 马晓菁 +5 位作者 刘丽娅 谷文喜 吐尔洪·努尔 易新萍 马俊杰 钟旗 《中国动物检疫》 CAS 2017年第7期100-104,共5页
为评价Rev.1-ΔKan-VirB12突变株在BALB/c鼠中的免疫保护力,以Rev.1为参照,用Rev.1-ΔKan-VirB12接种BALB/c小鼠,免疫45d后用布鲁氏菌16M强毒株攻毒,15d后取BALB/c鼠脾脏进行克脾指数测定和病理组织学检测。结果显示:BALB/c鼠免疫... 为评价Rev.1-ΔKan-VirB12突变株在BALB/c鼠中的免疫保护力,以Rev.1为参照,用Rev.1-ΔKan-VirB12接种BALB/c小鼠,免疫45d后用布鲁氏菌16M强毒株攻毒,15d后取BALB/c鼠脾脏进行克脾指数测定和病理组织学检测。结果显示:BALB/c鼠免疫攻毒15d后,Rev.1-ΔKan-VirB12免疫组和Rev.1免疫组的克脾指数与对照组之间有显著性差异(P<0.05),而Rev.1免疫组与Rev.1-ΔKan-VirB12免疫组之间的克脾指数差异不显著(P>0.05)。结果表明,羊布鲁氏菌Rev.1-ΔKan-VirB12突变株与其亲本Rev.1株的免疫保护性无明显差异,具备作为布鲁氏菌病标记疫苗的潜力。 展开更多
关键词 羊种布鲁氏菌 Rev.1 突变 免疫保护
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利用紫外诱变选育楸灵素合成缺陷株 被引量:1
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作者 胡丹 唐克轩 苗志奇 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期838-848,共11页
楸树内生真菌菌株FSN002次生代谢产物楸灵素具有优良的抗肝癌性能,选育突变株是研究楸灵素生物合成机制的重要手段。真菌孢子预培养13 h左右,萌发形成4–6个细胞的幼嫩菌丝,适合作为紫外诱变的出发材料。实验发现紫外光强度和照射时间... 楸树内生真菌菌株FSN002次生代谢产物楸灵素具有优良的抗肝癌性能,选育突变株是研究楸灵素生物合成机制的重要手段。真菌孢子预培养13 h左右,萌发形成4–6个细胞的幼嫩菌丝,适合作为紫外诱变的出发材料。实验发现紫外光强度和照射时间对真菌致死率的影响符合线性模型,二者之间不存在明显的交互作用。当紫外光强度为90 000μJ/cm~2,时长为6 s时,真菌的致死率在95%左右。在上述优化选育诱变条件下,获得了1株楸灵素合成能力完全丧失的突变株和1株楸灵素合成能力下降到野生型16%的突变株,为下一步研究楸灵素的生物合成机制以及高效生产楸灵素奠定了基础。 展开更多
关键词 紫外诱变 内生真菌 突变 致死率 楸灵素 抗癌代谢物
单增李斯特菌vip基因缺失菌株的构建与筛选 预览
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作者 李森 牟俊洁 刘武康 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第4期16-22,共7页
单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是广泛存在于自然界及食物中的食源性致病菌,作为胞内寄生菌,它可以引起强烈的细胞免疫,是潜在的优良疫苗载体。”咖是单增李斯特菌的毒力基因,与其侵袭能力密切相关。因此构建vip基因敲除... 单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是广泛存在于自然界及食物中的食源性致病菌,作为胞内寄生菌,它可以引起强烈的细胞免疫,是潜在的优良疫苗载体。”咖是单增李斯特菌的毒力基因,与其侵袭能力密切相关。因此构建vip基因敲除株可为单增李斯特菌疫苗载体的研发打下重要基础。从单增李斯特菌EGDe基因组中扩增出口咖基因上、下游序列,连接到穿梭载体pKSV7中得到敲除载体pKSV7一△口咖,将其以电穿孔的方式转入单增李斯特菌后,通过同源重组利用氯霉素和温度双重压力筛选得到vip基因的敲除突变株,并对敲除菌株的生长曲线进行分析发现∥咖敲除对细菌的生长没有显著影响,为进一步研究vip基因功能、单增李斯特的致病机制和疫苗载体的研发提供参考。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 rip基因敲除 突变 同源重组
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由2种单克隆抗体构成鸡尾酒疗法有效保护猕猴对抗埃博拉病毒Makona突变株 预览
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《生物技术通讯》 CAS 2017年第1期58-59,共2页
2012~2017年,我国研发埃博拉抗体MIL77和重组埃博拉疫苗的阶段性成果陆续在国际期刊上发表,其中不乏《科学》子刊《科学转化医学》、《柳叶刀》等极具国际影响力的期刊。本期特设掠影栏目,呈现论文的中文题名及摘要,附论文作者照... 2012~2017年,我国研发埃博拉抗体MIL77和重组埃博拉疫苗的阶段性成果陆续在国际期刊上发表,其中不乏《科学》子刊《科学转化医学》、《柳叶刀》等极具国际影响力的期刊。本期特设掠影栏目,呈现论文的中文题名及摘要,附论文作者照片、他们对论文的补充说明或媒体评论。让我们一起快速领略他们的科研风采吧。 展开更多
关键词 单克隆抗体 埃博拉病毒 有效保护 突变 鸡尾酒 对抗 猕猴 疗法
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北京棒杆菌Corynebacterium pekinense天冬氨酸激酶P184M酶动力学分析及酶学性质表征
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作者 王锐楠 张芷睿 +2 位作者 方丽 闵伟红 刘春雷 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第5期1750-1756,共7页
目的研究北京棒杆菌天冬氨酸激酶(aspartate kinase,AK)184位点脯氨酸(proline,P)突变为蛋氨酸(DL-methionine,M)对酶动力学及酶学性质的影响。方法对北京棒杆菌AK家族同源序列比对,选择出高度保守且远离底物结合位点的Pro184位点... 目的研究北京棒杆菌天冬氨酸激酶(aspartate kinase,AK)184位点脯氨酸(proline,P)突变为蛋氨酸(DL-methionine,M)对酶动力学及酶学性质的影响。方法对北京棒杆菌AK家族同源序列比对,选择出高度保守且远离底物结合位点的Pro184位点,对其进行饱和定点突变,成功构建突变体P184M。结果动力学和酶学性质研究表明:P184M AK Vmax比WT(wide type)提高了5.06倍;n值为0.19,突变体由WT的正协同性变为负协同性,同时Km(mol/L)值增大;突变体AK最适pH为6.5,低于野生型最适pH 7.0;最适反应温度28℃,低于WT的30℃,适宜温度区间变窄;半衰期由WT的2.1 h降为1.2 h;金属离子、有机溶剂和抑制剂Thr+Met、Lys+Met、Thr+Lys+Met对突变株AK均表现出激活作用。结论突变体天冬氨酸激酶P184M的酶动力学性质和酶学性质改变显著,为构建高产蛋氨酸菌株提供了一定的参考依据。 展开更多
关键词 北京棒杆菌 天冬氨酸激酶 突变 酶学性质
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