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东亚钳蝎氯毒素通过下调PKM2介导的有氧糖酵解抑制神经胶质瘤细胞的增殖活性
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作者 蔡雨晴 杜军 +3 位作者 薄涛 郭田田 付月君 梁爱华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期42-50,共9页
东亚钳蝎氯离子通道毒素(Buthus martensii Karshch chlorion channel toxin,BmK CT)是一类短链神经毒素,在体内和体外均能有效抑制神经胶质瘤细胞侵袭和增殖。然而,BmK CT抑制胶质瘤细胞增殖活性的机制尚不清楚。本研究采用代谢组学的... 东亚钳蝎氯离子通道毒素(Buthus martensii Karshch chlorion channel toxin,BmK CT)是一类短链神经毒素,在体内和体外均能有效抑制神经胶质瘤细胞侵袭和增殖。然而,BmK CT抑制胶质瘤细胞增殖活性的机制尚不清楚。本研究采用代谢组学的方法探索BmK CT抑制人脑神经胶质瘤细胞增殖的分子机制。首先,通过蛋白质表达纯化获得带有谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase, GST)标签的BmK CT蛋白和GST蛋白。利用圆二色谱检测两种蛋白质均具有α-螺旋二级结构,并且融合蛋白质GST-BmK CT热稳定性较好。通过噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT)法检测GST-BmK CT对神经胶质瘤细胞(U251和A172)增殖的影响。结果显示,与GST处理组相比,1μmol/L GST-BmK CT处理组对U251细胞的抑制率更明显(U251细胞19±1.1 vs. 2.25±0.95,P<0.001, 48 h;A172细胞12±1.4 vs. 2.25±1.25,P<0.001, 48 h)。利用气相色谱-质谱联用仪(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)分析鉴定出细胞内的63种代谢物,通过通路分析和聚类分析证实,GST-BmK CT处理影响神经胶质瘤细胞的有氧糖酵解。根据峰面积统计数据显示,GST-BmK CT处理降低胞内丙酮酸的含量。GST-BmK CT处理组相比GST组,明显下调胞外培养基的乳酸分泌(16.33±3.78 vs. 35.6±2.31,P<0.001, 48 h),葡萄糖消耗(2.04±0.09 vs. 2.64±0.04,P<0.05, 48 h)和胞内腺苷三磷酸(ATP)含量(633.79±0.001 vs. 5392.71±266.67,P<0.05, 48 h)。结果表明,GST-BmK CT通过下调胶质瘤细胞有氧糖酵解水平降低ATP的生成。实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹结果显示,GST-BmK CT降低U251细胞丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2, PKM2)在转录水平和翻译水平的表达,进一步发现GST-BmK CT通过下调低氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)降低PKM2在转录水平的表达。以上结果表明,BmK CT通过下调HIF-1α的表达,降低PKM2介导的有氧糖酵解从而抑制神经胶质瘤细胞的增殖活� 展开更多
关键词 蝎氯毒素 神经胶质瘤 代谢组学 糖酵解 丙酮酸激酶
温度和溶解氧对金乌贼精子能量代谢和活性的影响 预览
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作者 王展 王林龙 +1 位作者 李文涛 张秀梅 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期183-192,共10页
为了解金乌贼(Sepia esculenta)精子对外界环境变化的响应和存活机制,分析测定了不同温度(16℃、20℃、24℃)和不同溶解氧(1mg/L、3mg/L、6mg/L)条件下保存36h后精荚能量物质含量、糖脂代谢关键酶活性以及精子激活后的活力变化。结果显... 为了解金乌贼(Sepia esculenta)精子对外界环境变化的响应和存活机制,分析测定了不同温度(16℃、20℃、24℃)和不同溶解氧(1mg/L、3mg/L、6mg/L)条件下保存36h后精荚能量物质含量、糖脂代谢关键酶活性以及精子激活后的活力变化。结果显示,温度和溶氧处理36h后精荚糖原和甘油三酯含量均显著低于未处理组(P<0.05),但蛋白质含量与未处理组无显著差异(P>0.05)。当温度从16℃升高至24℃时,精荚糖原含量逐渐下降,甘油三酯的含量则先降后稳;己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙酮酸脱氢酶(PDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性随温度升高而升高,脂肪酶(LIP)活性先升后稳;精子激活初期运动速度和不运动率随温度升高无显著变化,而快速运动率则先稳后降。当海水溶解氧从1mg/L升至6mg/L时,精荚糖原含量逐渐下降,甘油三酯含量先稳后降;HK、PDH、SDH活性随溶解氧上升呈逐渐上升趋势,LDH先升后降,LIP则先稳后升;精子激活初期运动速度和快速运动率随溶解氧升高呈先升后稳的变化趋势,而不运动率则呈先降后稳趋势。上述结果表明,精荚中的糖原和甘油三酯是精子的主要供能物质,精子较低的能量物质消耗为其长期存活提供了保障,低温和低氧环境可抑制精子的耗能,更利于其在精荚中长期存活。 展开更多
关键词 能量物质 糖酵解 脂肪代谢 精子运动 长期存活
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干扰乳酸脱氢酶A表达对ErbB2高表达乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响
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作者 贺丽 李梦龙 +3 位作者 申越 马雪娇 余蓉 赵玉华 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期55-60,共6页
目的探讨体外干扰乳酸脱氢酶A(LDHA)表达对人类表皮生长因子受体2(ErbB2)高表达乳腺癌SK-BR-3和MDA-MB-453细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法用si LDHA转染(以转染scramble siRNA为阴性对照)SK-BR-3和MDA-MB-453细胞干扰LDHA的表... 目的探讨体外干扰乳酸脱氢酶A(LDHA)表达对人类表皮生长因子受体2(ErbB2)高表达乳腺癌SK-BR-3和MDA-MB-453细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法用si LDHA转染(以转染scramble siRNA为阴性对照)SK-BR-3和MDA-MB-453细胞干扰LDHA的表达;Western blot法检测LDHA蛋白表达水平;Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞的LDH活性;采用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分别测定培养基中的葡萄糖浓度和乳酸浓度,计算细胞对葡萄糖的摄取量和乳酸生成量。结果与阴性对照组比较,si LDHA下调SK-BR-3和MDA-MB-453细胞LDHA的蛋白水平(P<0.01);降低细胞的迁移和侵袭能力(P<0.001);下调SK-BR-3细胞的LDH活性,减少两种细胞葡萄糖摄取量和乳酸生成量,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论干扰LDHA表达通过降低糖酵解从而抑制ErbB2高表达乳腺癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺癌 小干扰RNA 乳酸脱氢酶A 糖酵解 迁移与侵袭
M1型巨噬细胞糖代谢重编程机制及其在炎症启动中的关键作用 预览
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作者 姜晓旭 郑义鹏 +6 位作者 赵九洲 李明哲 朱敬朴 王欣 李永奇 海春旭 于卫华 《癌变.畸变.突变》 CAS 2019年第1期79-81,85共4页
巨噬细胞是机体主要的炎症效应细胞,不仅是机体对抗感染的重要武器,而且与临床上大多数疾病的发生发展密切相关。正常细胞以葡萄糖氧化磷酸化途径代谢产能,在缺氧环境下则以糖酵解途径为主。而肿瘤细胞在氧气充足条件下也通过糖酵解代... 巨噬细胞是机体主要的炎症效应细胞,不仅是机体对抗感染的重要武器,而且与临床上大多数疾病的发生发展密切相关。正常细胞以葡萄糖氧化磷酸化途径代谢产能,在缺氧环境下则以糖酵解途径为主。而肿瘤细胞在氧气充足条件下也通过糖酵解代谢产能,这就是经典的Warburg效应理论。研究表明,M1型极化巨噬细胞可发生与肿瘤细胞类似的糖代谢重编程,表现为有氧糖酵解增强和氧化磷酸化减弱,而阻断糖代谢重编程可有效抑制炎症反应。近年来,免疫和代谢相关性研究成为学术界关注热点,并催生了免疫代谢学的概念,其中巨噬细胞与代谢的关联性研究也取得了丰硕成果。本文重点阐述了M1型极化巨噬细胞糖代谢重编程的可能机制,并分析了它在炎症启动调控中的关键作用,以期为临床上炎症相关疾病防治提供新策略。 展开更多
关键词 M1型巨噬细胞 代谢重编程 炎症反应 糖酵解 氧化磷酸化
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不同浓度氟化钠抗凝血对POCT血糖仪校准结果干扰影响的研究
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作者 李广权 周卫东 +1 位作者 钟培英 徐梦娇 《现代检验医学杂志》 CAS 2019年第1期127-129,132共4页
目的研究不同浓度氟化钠抗凝血对POCT血糖仪结果干扰情况。方法20例研究对象每人采集1支EDTA-K2样本管和6支含不同浓度氟化钠的(NaF)EDTA-K2样本管静脉血,每管2ml,POCT血糖仪与生化仪检测每管血糖水平,比较不同浓度氟化钠组间样本管血... 目的研究不同浓度氟化钠抗凝血对POCT血糖仪结果干扰情况。方法20例研究对象每人采集1支EDTA-K2样本管和6支含不同浓度氟化钠的(NaF)EDTA-K2样本管静脉血,每管2ml,POCT血糖仪与生化仪检测每管血糖水平,比较不同浓度氟化钠组间样本管血糖水平差异及相同氟化钠浓度样本管POCT血糖仪与生化仪检测血糖水平差异。结果POCT血糖仪检测不同浓度氟化钠样本管血糖水平组间比较,其差异有统计学意义(F=12.192,P<0.001);采用LSD法进行多重比较,不含NaF组血糖水平与其它含NaF组血糖水平比较,不含NaF组血糖水平明显高于其它含NaF组血糖水平(t=13.556,14.223,13.512,14.012,13.876,13.864,均P<0.001),含NaF不同组间血糖水平比较,差异无统计学意义(t=0.352,0.412,0.386,0.411,0.395,0.414,均P >0.05);生化仪检测不同浓度氟化钠组间血糖水平比较,其差异无统计学意义(F=0.428,P=0.829)。不含氟化钠样本管两仪器检测血糖水平比较,差异无统计学意义(t=0.457,P=0.358);含相同浓度氟化钠样本管两仪器检测血糖水平比较,生化仪检测血糖水平明显高于POCT血糖仪水平(t=-14.415,-14.746,-13.613,-14.108,-15.253,-14.069,均P<0.01)。结论氟化钠对采用葡萄糖脱氢酶法POCT血糖仪结果有明显抑制作用,抑制程度与氟化钠浓度无明显相关,氟化钠不宜作为葡萄糖脱氢酶法POCT血糖仪比对标本的糖酵解抑制剂。 展开更多
关键词 糖酵解 抑制剂 氟化钠 即时检验 仪比对 干扰
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天麻素在L6肌管中促进葡萄糖消耗的作用和机制研究 预览
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作者 张勇 孔维佳 《中国医药导报》 CAS 2019年第4期22-25,共4页
目的研究天麻素(GSTD)在L6肌管中促进葡萄糖消耗的作用和可能机制。方法体外培养大鼠L6骨骼肌细胞并诱导分化成肌管,血清饥饿后以GSTD单独处理或与浓度为0.05nmol/L的胰岛素联合处理24h,以二甲双胍(Met)为阳性对照药。部分实验中L6肌管... 目的研究天麻素(GSTD)在L6肌管中促进葡萄糖消耗的作用和可能机制。方法体外培养大鼠L6骨骼肌细胞并诱导分化成肌管,血清饥饿后以GSTD单独处理或与浓度为0.05nmol/L的胰岛素联合处理24h,以二甲双胍(Met)为阳性对照药。部分实验中L6肌管先以浓度为100nmol/L的胰岛素处理24h以诱导胰岛素抵抗,再进行药物处理。以试剂盒测定细胞糖消耗、L-乳酸释放和ATP产生,以Westernblot和实时荧光定量反转录PCR检测目标蛋白和基因的表达水平。结果GSTD浓度依赖性地促进L6肌管的基础糖消耗[与对照细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)],并且显著增加胰岛素刺激的糖消耗[与单用胰岛素或GSTD处理的细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05)]。在胰岛素抵抗状态下,浓度为500μmol/L的GSTD仍能有效促进细胞糖消耗(P<0.05)。Met处理后显著增加细胞的L-乳酸释放并抑制ATP产生[与对照细胞比较,差异有高度统计学意义(P<0.01)],但GSTD没有作用。GSTD显著上调L6肌管GLUT4蛋白和mRNA的表达,并且激活AMPK和Akt通路,表现为处理后p-AMPKα和p-Akt的水平显著增加[与对照细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)]。结论GSTD作用于L6肌管显著增加其糖消耗并能克服胰岛素抵抗,其机制可能与GLUT4的上调以及AMPK和Akt通路的激活有关。 展开更多
关键词 天麻素 葡萄消耗 胰岛素抵抗 糖酵解 葡萄转运蛋白4 AMP依赖的蛋白激酶
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左金丸对胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖和糖酵解的抑制作用
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作者 孙梦瑶 王丹丹 +3 位作者 吴秋雪 蔡思 倪振华 汤庆丰 《上海中医药大学学报》 CAS 2019年第1期71-75,共5页
目的:研究左金丸对胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖和糖酵解的影响。方法:取人胃癌细胞株SGC-7901,体外诱导顺铂(DDP)耐药细胞株SGC-7901/DDP。将耐药细胞分为空白对照组和左金丸低、中、高浓度(25、50、100μg/ml)组,各组予以相应干预。... 目的:研究左金丸对胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖和糖酵解的影响。方法:取人胃癌细胞株SGC-7901,体外诱导顺铂(DDP)耐药细胞株SGC-7901/DDP。将耐药细胞分为空白对照组和左金丸低、中、高浓度(25、50、100μg/ml)组,各组予以相应干预。药物干预12 h、24 h、48 h后,CCK-8分别检测各组细胞存活率;药物干预24 h后,试剂盒检测各组细胞葡萄糖摄取率及细胞上清中乳酸含量,同时应用Western blot检测各组细胞中糖酵解途径关键分子C-myc、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)的蛋白表达。结果:(1)与对照组比较,左金丸各浓度组在各检测时间点的细胞存活率均显著降低(P<0.01),且呈时间、浓度依赖性,提示左金丸可显著抑制SGC-7901/DDP细胞增殖。(2)药物干预24 h后,与对照组比较,左金丸各浓度组细胞的葡萄糖摄取率及乳酸含量显著降低(P<0.01),且呈浓度依赖性,提示左金丸可显著抑制SGC-7901/DDP糖酵解。(3)不同浓度左金丸干预24 h后,SGC-7901/DDP细胞中C-myc、HIF-1α、GLUT1、LDHA、HKⅡ的蛋白表达显著下调(P<0.01),且呈浓度依赖性。结论:左金丸可显著抑制胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP的增殖,且这一过程可能与抑制糖酵解相关。 展开更多
关键词 左金丸 胃癌 顺铂耐药 细胞增殖 糖酵解
Meigs’综合征免疫特征及CD4^+T细胞糖酵解相关基因表达水平分析
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作者 尚文雯 姚莎莎 +2 位作者 徐睿 陈献 王芳 《免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期972-977,988共7页
目的探讨Meigs’综合征(MS)患者的外周免疫特征以及CD4~+T细胞糖酵解相关基因的表达水平。方法分析2010至2018年9例MS(MS组),81例卵巢卵泡膜瘤-纤维瘤(OTF组),30例卵巢癌(OC组)和30例健康对照(HC组)的临床特征和实验室指标参... 目的探讨Meigs’综合征(MS)患者的外周免疫特征以及CD4~+T细胞糖酵解相关基因的表达水平。方法分析2010至2018年9例MS(MS组),81例卵巢卵泡膜瘤-纤维瘤(OTF组),30例卵巢癌(OC组)和30例健康对照(HC组)的临床特征和实验室指标参数,并检测1例MS和1例OTF患者手术前后,9例卵巢癌(OC组)以及10例健康对照(HC)的外周血CD4~+T细胞的糖酵解相关基因(HIF1α、GLUT1、ENO1、LDHα)的表达水平。结果 MS组患者血清CA125和HE4水平显著高于OTF组(P〈0.000 1,P〈0.05)和HC组(P〈0.000 1,P〈0.05),而血清HE4较OC组显著降低(P〈0.00 1),血清CA125和HE4水平均与腹水的量呈正相关(P〈0.000 1,P〈0.01);MS组外周血淋巴细胞绝对数和百分比较OTF组(P〈0.05,P〈0.01)和HC组(P〈0.05,P〈0.01)显著降低,并且显著高于OC组(P〈0.01,P〈0.05),此外,NLR、PLR和SII较OTF组(P〈0.05,P〈0.001,P〈0.001)和HC组(P〈0.05,P〈0.001,P〈0.01)显著升高,且NLR显著低于OC组(P〈0.01),PLR和SII均与腹水的量呈正相关(P〈0.01, P〈0.05);术前MS患者HIF1α表达水平显著高于OTF患者(P〈0.000 1),OC组(P〈0.01)和HC组(P〈0.01),GLUT1和LDHα则显著低于OTF患者(P〈0.000 1,P〈0.05),OC组(P〈0.01,P〈0.01)和HC组(P〈0.01,P〈0.05),ENO1表达水平较OC组(P〈0.01)和HC组(P〈0.01)显著降低;MS患者这4个基因的表达水平在手术切除肿瘤后倾向于恢复正常水平(P〈0.000 1)。结论 MS患者外周免疫功能紊乱,且CD4~+T细胞糖酵解过程存在障碍。 展开更多
关键词 Meigs’综合征 卵巢卵泡膜瘤-纤维瘤 免疫紊乱 CD4^+T细胞 糖酵解
慢性无机砷暴露对人皮肤角质形成细胞能量代谢的影响
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作者 胡玉鑫 武夏芳 +3 位作者 孙汝 张嘉芮 皮静波 徐苑苑 《中华地方病学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期775-779,共5页
目的 探讨慢性无机砷暴露对人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)能量代谢方式的影响。方法 HaCaT细胞(对照组)与用0.1 μmol/L亚砷酸钠(NaAsO2)处理HaCaT细胞28周建立的恶性转化细胞模型(砷恶性转化组)由中国医科大学公共卫生学院... 目的 探讨慢性无机砷暴露对人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)能量代谢方式的影响。方法 HaCaT细胞(对照组)与用0.1 μmol/L亚砷酸钠(NaAsO2)处理HaCaT细胞28周建立的恶性转化细胞模型(砷恶性转化组)由中国医科大学公共卫生学院慢病环境基因组学研究室保存。采用细胞体外培养方法,利用细胞能量代谢实时测定仪检测对照组与砷恶性转化组基础耗氧率以及胞外产酸率。采用2?鄄NBDG法检测经长期砷暴露后细胞葡萄糖摄取量的改变。收集处于对数生长期的细胞,采用实时荧光定量PCR法检测细胞糖酵解途径[葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、磷酸果糖激酶(PFKL)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)]和线粒体呼吸链复合体相关酶类[NADH脱氢酶铁-硫蛋白亚基3(NDUFS3)、琥珀酸脱氢酶铁-硫蛋白亚基(SDHB)、细胞色素C(CYTC)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ(COX4L1)、ATP合酶F1亚基(ATP5B)、ATP合酶F0亚基(ATP5G1)]mRNA表达水平。结果 砷恶性转化组基础耗氧率[(44.784 ± 10.159)pMoles/min]与对照组[(66.842 ± 15.756)pMoles/min]比较显著降低(t = 4.914,P 〈 0.05)。在无血清、有血清条件下,砷恶性转化组葡萄糖摄取量(1.592 ± 0.410、1.631 ± 0.323)与对照组(1.000 ± 0.334、1.000 ± 0.196)比较均明显升高(t = 2.916、4.068,P均 〈 0.05)。砷恶性转化组G6PD(0.555 ± 0.009)、NDUFS3(0.623 ± 0.031)和SDHB(0.702 ± 0.094)mRNA表达水平与对照组(1.000 ± 0.027、1.000 ± 0.034、1.000 ± 0.114)比较显著降低(t = 23.690、11.340、2.814,P均 〈 0.05),PFKL(1.787 ± 0.176)、GAPDH(1.466 ± 0.111)、CYTC(2.461 ± 0.179)、ATP5B(1.956 ± 0.161)、ATP5G1(2.055 ± 0.052)mRNA表达水平与对照组(1.000 ± 0.153、1.000 ± 0.069、1.000 ± 0.030、1.000 ± 0.091、1.000 ± 0.237)比较显著增加(t = 4.696、4.985、11.540、7.436、6 展开更多
关键词 砷中毒 能量代谢 糖酵解 皮肤角质形成细胞
酚类污染物对氧化磷酸化毒性效应的研究进展 预览
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作者 黄高峰 徐挺 《安徽农业科学》 CAS 2018年第8期31-35,共5页
综述不同酚类污染物对氧化磷酸化的毒性效应,总结不同酚类污染物对氧化磷酸化的毒性作用机制,同时就目前酚类污染物的氧化磷酸化毒性效应的研究存在的问题和不足进行探讨,以期为此类污染物的相关毒性研究提供参考。
关键词 酚类污染物 氧化磷酸化 解偶联剂 糖酵解
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肿瘤缺氧微环境对光动力疗法抗肿瘤的影响 预览
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作者 王筱冰 谢李芬 +1 位作者 吕明威 刘全宏 《陕西师范大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第6期93-98,共6页
光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)作为一种新技术已被用于多种癌症的临床治疗,其中分子氧在肿瘤治疗过程中发挥着重要的作用。肿瘤缺氧微环境与肿瘤的发生、转移及肿瘤患者预后效果等密切相关,光动力疗法的治疗效果严重受限... 光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)作为一种新技术已被用于多种癌症的临床治疗,其中分子氧在肿瘤治疗过程中发挥着重要的作用。肿瘤缺氧微环境与肿瘤的发生、转移及肿瘤患者预后效果等密切相关,光动力疗法的治疗效果严重受限于肿瘤的缺氧微环境。本文从肿瘤缺氧微环境、缺氧诱导因子、糖酵解途径与光动力疗法的关系等方面就缺氧环境对肿瘤光动力疗法治疗效果的影响进行综合评述,旨在加强和促进对肿瘤缺氧微环境与光动力疗法治疗肿瘤的进一步研究,同时对缺氧环境下肿瘤的光动力疗法治疗进行了展望。 展开更多
关键词 缺氧微环境 光动力疗法 缺氧诱导因子 糖酵解
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CNRIP1启动子区去甲基化对结肠癌细胞糖酵解及增殖、迁移活性的影响
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作者 冯馨园 张婷 +6 位作者 崔戈 王旗春 钱乙 蔡莹 仰舒静 张梦荧 姚嘉诚 《郑州大学学报:医学版》 北大核心 2018年第1期71-75,共5页
目的:探讨CNRIP1启动子区去甲基化对结肠癌细胞糖酵解途径、细胞增殖及迁移活性的影响。方法:采用5-氮杂胞苷(5-aza C)降低结肠癌细胞SW620 CNRIP1启动子区甲基化水平,以未干预细胞作对照。用亚硫酸盐测序法检测细胞CNRIP1启动子区... 目的:探讨CNRIP1启动子区去甲基化对结肠癌细胞糖酵解途径、细胞增殖及迁移活性的影响。方法:采用5-氮杂胞苷(5-aza C)降低结肠癌细胞SW620 CNRIP1启动子区甲基化水平,以未干预细胞作对照。用亚硫酸盐测序法检测细胞CNRIP1启动子区甲基化水平;分别采用qRT-PCR、Western blot法检测细胞中CNRIP1、糖酵解途径关键酶HK2、PKM2、LDH-A mRNA及蛋白表达水平,生化法检测细胞培养液中乳酸水平;分别采用CCK-8比色法、Transwell法检测细胞增殖及迁移能力。结果:与未干预组细胞相比,5-aza C干预组细胞CNRIP1启动子区甲基化水平降低,CNRIP1 mRNA及蛋白表达升高,HK2、PKM2、LDH-A mRNA和蛋白表达水平及细胞培养液中乳酸水平均降低,细胞增殖及迁移能力均减弱(P均〈0.05)。结论:CNRIP1去甲基化可抑制糖酵解途径,从而降低结肠癌细胞的增殖及迁移能力。 展开更多
关键词 结肠癌 大麻素受体互作蛋白1 去甲基化 糖酵解 增殖 迁移
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薯蓣素抑制口腔鳞状细胞癌的机制研究 预览
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作者 李明 赵卿 高峰 《中国现代医学杂志》 2018年第36期12-17,共6页
目的研究薯蓣素对人口腔鳞状细胞癌的抑制作用。方法薯蓣素处理TSCCa和TCa8113细胞,MTS和软琼脂集落实验检测薯蓣素对口腔鳞状细胞癌增殖的影响。蛋白质免疫印迹检测薯蓣素对口腔鳞状细胞癌糖酵解调控蛋白及凋亡调控分子表达的影响。检... 目的研究薯蓣素对人口腔鳞状细胞癌的抑制作用。方法薯蓣素处理TSCCa和TCa8113细胞,MTS和软琼脂集落实验检测薯蓣素对口腔鳞状细胞癌增殖的影响。蛋白质免疫印迹检测薯蓣素对口腔鳞状细胞癌糖酵解调控蛋白及凋亡调控分子表达的影响。检测过表达己糖激酶HK2对薯蓣素诱导细胞凋亡的作用。结果薯蓣素抑制TSCCa和TCa8113细胞的增殖具有剂量和时间依赖性(P<0.05)。薯蓣素抑制口腔鳞状细胞癌糖酵解(P<0.05),并下调HK2和葡萄糖转运蛋白Glut1的表达。薯蓣素能诱导口腔鳞状细胞癌Caspase-3和PARP剪切体表达上调,过表达HK2抑制薯蓣素诱导的细胞凋亡。结论薯蓣素对口腔鳞状细胞癌的抑制作用与其下调HK2和对糖酵解的抑制有关。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 薯蓣素 激酶 糖酵解 细胞凋亡
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下调整合素连接激酶对宫颈癌细胞糖酵解及增殖、凋亡的影响
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作者 史娟 樊霞 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第18期1668-1673,共6页
目的观察下调整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)对宫颈癌细胞糖酵解及增殖、凋亡的影响,探讨其相关作用机制。方法选择宫颈癌细胞Ca Ski,细胞分3组,转染ILK siRNA、siRNA control分别为干扰组和阴性组,以未转染的细胞为对... 目的观察下调整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)对宫颈癌细胞糖酵解及增殖、凋亡的影响,探讨其相关作用机制。方法选择宫颈癌细胞Ca Ski,细胞分3组,转染ILK siRNA、siRNA control分别为干扰组和阴性组,以未转染的细胞为对照组。qRT-PCR、Western blot检测细胞中ILK mRNA、蛋白表达水平。试剂盒检测细胞中丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)、己糖激酶(hexokinase,HK)、三磷腺苷(adenosine triphosphate,ATP)水平和培养液中乳酸水平,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved Caspase-9)、β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc蛋白水平。结果 ILK siRNA能够下调宫颈癌细胞中ILK mRNA和蛋白水平,siRNA control对细胞中ILK mRNA和蛋白水平没有影响。阴性组PK、HK、ATP、乳酸水平、细胞存活率、凋亡率、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9、β-catenin、c-myc表达水平与对照组相比差异均无统计学意义(P〉0.05)。与对照组比较,干扰组PK、HK、ATP、乳酸水平明显降低,细胞存活率明显降低,细胞凋亡率明显升高,细胞中cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达水平升高,β-catenin、c-myc表达水平下降,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论下调ILK抑制宫颈癌细胞糖酵解和细胞增殖,促进细胞凋亡,作用机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 凋亡 糖酵解 下调整合素连接激酶
沉默巨噬细胞Wls表达对小鼠肿瘤细胞糖酵解的影响 预览
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作者 杨阳 朱笑生 +3 位作者 博伦 庞翠 张祺嘉钰 刘文超 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第22期3545-3549,共5页
目的:研究巨噬细胞来源的WNT配体对小鼠肿瘤细胞糖酵解的作用。方法:体外诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞(bone marrow derived macrophages,BMDMs),并进行慢病毒感染以沉默其Wntless(Wls)的表达。确定慢病毒沉默效率并利用ELISA法检... 目的:研究巨噬细胞来源的WNT配体对小鼠肿瘤细胞糖酵解的作用。方法:体外诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞(bone marrow derived macrophages,BMDMs),并进行慢病毒感染以沉默其Wntless(Wls)的表达。确定慢病毒沉默效率并利用ELISA法检测WNT3A为代表的配体分泌变化。收集上述不同处理的巨噬细胞条件性培养基用以孵育不同小鼠肿瘤细胞,48 h后检测糖酵解相关分子及经典WNT信号下游靶分子的表达。结果:小鼠原代巨噬细胞慢病毒感染效率较为理想,q PCR检测Wls基因沉默效率达50%以上,符合后续实验要求。ELISA结果显示沉默Wls后的巨噬细胞上清中WNT3A的分泌可得到抑制,与对照组相比可下降50%左右。提取条件性上清孵育后的肿瘤细胞RNA及蛋白样品,q PCR结果提示参与糖酵解的关键酶类在LLC及hepa1-6两种肿瘤细胞中均有下降趋势。并且葡萄糖转运体Glut1以及经典WNT信号下游分子β-catenin及c-Myc在RNA水平及蛋白水平均有所减少。结论:我们的研究结果初步提示巨噬细胞来源的WNT配体可能通过激活小鼠肿瘤细胞中的经典WNT信号进而参与促进其糖酵解水平。 展开更多
关键词 巨噬细胞 肿瘤细胞 WNT信号 糖酵解
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肿瘤中miRNA调控糖酵解的研究进展 预览
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作者 徐倩岚 蒋伟 《大众科技》 2018年第5期68-70,共3页
大多数肿瘤细胞即使在氧气足够充足的情况下,也可通过高速率糖酵解产生能量,这种特殊的糖代谢现象被称为Warburg效应。近年来,越来越多的研究表明,mi RNA主要通过调控糖酵解关键酶、影响线粒体功能、诱导缺氧环境、调控癌基因抑癌基因... 大多数肿瘤细胞即使在氧气足够充足的情况下,也可通过高速率糖酵解产生能量,这种特殊的糖代谢现象被称为Warburg效应。近年来,越来越多的研究表明,mi RNA主要通过调控糖酵解关键酶、影响线粒体功能、诱导缺氧环境、调控癌基因抑癌基因等诸多方面参与糖代谢过程,从而在肿瘤细胞糖代谢中发挥重要作用。深入了解mi RNA调控肿瘤细胞糖代谢的机制,可以为研究人员更加深入地了解肿瘤的发生机制提供了重要线索,可能为肿瘤的诊治提供有力的证据及新的思路。 展开更多
关键词 肿瘤 MIRNA 糖酵解
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肺癌代谢组学研究进展 预览
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作者 刘吟絮 《临床医学进展》 2018年第2期135-140,共6页
代谢组学研究能灵敏地鉴定出基因和环境因素作用而产生的特定代谢型,在环境变化对机体产生作用的研究中具有优势。本文分别阐述了肺癌在氨基酸代谢、脂代谢、糖代谢方面的研究进展,为临床诊断提供了新途径,更为肺癌治疗提供了新的靶点... 代谢组学研究能灵敏地鉴定出基因和环境因素作用而产生的特定代谢型,在环境变化对机体产生作用的研究中具有优势。本文分别阐述了肺癌在氨基酸代谢、脂代谢、糖代谢方面的研究进展,为临床诊断提供了新途径,更为肺癌治疗提供了新的靶点。此外,应用代谢组学来阐释疾病发生发展的过程, 与中医的整体观念和辨证论治思维方式不谋而合,本文综述了肺癌代谢组学与肺癌中医证型之间的联系,为阐明中医证候及辨证论治的内涵奠定了理论基础。 展开更多
关键词 代谢组学 肺癌 氨基酸 糖酵解 证型
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PI3K/AKT通路在低氧环境下对结肠癌细胞HIF-1α及糖酵解的作用 预览
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作者 周晓黎 舒磊 +4 位作者 廖艳 石拓 梅智谋 杨家耀 时昭红 《华中科技大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第2期203-206,共4页
目的 探讨缺氧环境培养下,阻断磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸苏氨酸激酶(serine-threoninekinase,AKT)信号途径后结肠癌细胞中缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及糖酵解相关蛋白葡... 目的 探讨缺氧环境培养下,阻断磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸苏氨酸激酶(serine-threoninekinase,AKT)信号途径后结肠癌细胞中缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及糖酵解相关蛋白葡萄糖转运蛋白(glucose transporter 1,GLUT-l)和乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDH-A)的表达,分析PI3K/AKT信号通路与结肠癌细胞糖酵解之间的关系。方法 选择人结肠癌SW480细胞予以缺氧环境培养,分为4组:缺氧对照组、PI3K抑制剂组、AKT抑制剂组、PI3K+AKT抑制剂组,培养时间为24 h。采用RT-PCR和Western blot法检测各组结肠癌细胞HIF-1α及糖酵解相关基因(GLUT-1,LDH-A)的表达。比色法测定各组结肠癌细胞培养上清液中的乳酸浓度。结果 与缺氧对照组相比较,PI3K抑制剂组和AKT抑制剂组结肠癌细胞中HIF-1α、GLUT-1、LDH-A表达下降(均P<0.05),结肠癌细胞上清液中乳酸浓度降低(P<0.05)。PI3K+AKT抑制剂组与缺氧对照组及单项抑制剂组相比,各项指标下降明显(P<0.01)。结论 阻断PI3K/AKT信号途径,结肠癌细胞中HIF-1α表达下调,并可导致糖酵解相关基因GLUT-1、LDH-A的表达下降,提示PI3K/AKT信号途径参与了结肠癌细胞的糖酵解过程。 展开更多
关键词 PI3K/AKT信号途径 结肠癌 糖酵解
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miR-451对肝癌细胞增殖、糖酵解及相关基因表达的影响 预览
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作者 周艳华 茅慧 +1 位作者 张鹏飞 戴广海 《现代中西医结合杂志》 CAS 2018年第9期934-937,共4页
目的 研究miR-451对肝癌细胞增殖、糖酵解及相关基因表达的影响。方法实验分为普通组、增强组和抑制组,增强组和抑制组肝癌MHCC97细胞分别转染miR-451的模拟物mimics和阻遏物inhibitors,普通组常规培养。采用RT-PCR法检测3组肝癌细胞中m... 目的 研究miR-451对肝癌细胞增殖、糖酵解及相关基因表达的影响。方法实验分为普通组、增强组和抑制组,增强组和抑制组肝癌MHCC97细胞分别转染miR-451的模拟物mimics和阻遏物inhibitors,普通组常规培养。采用RT-PCR法检测3组肝癌细胞中miR-451和AMPK/mT OR、Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、胰岛素样生长因子(IGF-1)表达情况,噻唑蓝(MTT)法检测3组肝癌细胞增殖情况,通过检测3组细胞葡萄糖摄取和乳酸分泌情况评估肝癌细胞糖酵解情况。结果 增强组肝癌细胞中miR-451表达量明显高于普通组(P〈0.05),抑制组肝癌细胞中miR-451表达量明显低于普通组(P〈0.05)。MTT结果显示转染后各时间点增强组吸光度(OD)明显低于普通组和抑制组(P均〈0.05)。转染后增强组肝癌细胞mT OR、Ki-67、MMP-9、VEGF、IGF-1mR NA表达量和葡萄糖消耗值、乳酸分泌值均明显低于普通组和抑制组(P均〈0.05),而AMPK mR NA表达量明显高于普通组和抑制组(P均〈0.05)。结论 miR-451参与调控肝癌细胞增殖及糖酵解,其调控机制可能通过影响AMPK/mT OR信号通路,进而影响细胞中Ki-67、MMP-9、VEGF、IGF-1的表达而实现。 展开更多
关键词 miR-451 肝癌 糖酵解 细胞增殖
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大气细颗粒物对SH-SY5Y细胞能量代谢的影响
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作者 班红芳 成丽霞 +4 位作者 吕懿 王丹 曹彬 穆箭兵 郑金平 《环境与职业医学》 CSCD 北大核心 2018年第7期607-612,共6页
[目的]研究大气细颗粒物(PM2.5)对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞能量代谢的影响。[方法]用不同质量浓度(下称浓度)PM2.50、20、40、80、160、320mg/L)染毒SH-SY5Y细胞24h,MTT法检测细胞存活率,丙二醛(MDA)试剂盒检测MDA的含量,... [目的]研究大气细颗粒物(PM2.5)对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞能量代谢的影响。[方法]用不同质量浓度(下称浓度)PM2.50、20、40、80、160、320mg/L)染毒SH-SY5Y细胞24h,MTT法检测细胞存活率,丙二醛(MDA)试剂盒检测MDA的含量,XFp细胞能量代谢分析仪检测细胞线粒体呼吸功能及糖酵解功能。[结果]PM2.5各浓度组SH-SY5Y细胞存活率均低于对照组(均P〈0.05);80、160、320mg/LPM2.5组细胞内MDA含量高于对照组(均P〈0.05)。PM2.5各浓度组细胞基础耗氧率、ATP偶联的有氧呼吸速率低于对照组(P〈0.05),分别下降了13.8%、19.7%、25.1%、35.8%、45.2%和17.0%、21.9%、28.3%、39.2%、47.9%;40、80、160、320mg/LPM2.5组细胞有氧呼吸最大值较对照组下降了19.0%、24.2%、28.5%、40.7%(均P〈0.05)。80、160、320mg/LPM2.5组细胞糖酵解水平和糖酵解最大值低于对照组(均P〈0.05),分别下降了15.9%、22.1%、26.1%和16.5%、19.6%、21.5%。SH-SY5Y细胞基础耗氧率、ATP偶联的有氧呼吸速率、质子漏耗氧速率、有氧呼吸最大值、糖酵解水平及糖酵解最大值与细胞存活率呈正相关(r在0.65~0.86之间,P〈0.01),与MDA值呈负相关(r为-0.53~-0.86,P〈0.05或P〈0.01)。[结论]PM2.5可引起SH-SY5Y细胞的氧化损伤,降低细胞线粒体呼吸功能及糖酵解功能。 展开更多
关键词 PM2.5 SH-SY5Y 能量代谢 线粒体呼吸 糖酵解
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