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基于线粒体ND6基因检测犬感染细粒棘球绦虫的粪便PCR方法 预览
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作者 詹佳飞 宋宏宇 +5 位作者 王凝 郭承 李春燕 谢跃 古小彬 杨光友 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期626-632,共7页
目的旨在了解动物包虫病流行区内犬细粒棘球绦虫的感染情况。方法本研究利用Qiagen DNeasy Powersoil试剂盒对犬粪提取DNA,并从细粒棘球绦虫线粒体全基因组中筛选出完整线粒体ND6基因作为靶基因,建立一种可对犬粪中细粒棘球绦虫同时进... 目的旨在了解动物包虫病流行区内犬细粒棘球绦虫的感染情况。方法本研究利用Qiagen DNeasy Powersoil试剂盒对犬粪提取DNA,并从细粒棘球绦虫线粒体全基因组中筛选出完整线粒体ND6基因作为靶基因,建立一种可对犬粪中细粒棘球绦虫同时进行检测及基因分型的PCR方法。结果该法特异性很高,仅能扩增出细粒棘球绦虫的目的条带而对照组均无条带扩增。其灵敏度达到4pg的DNA含量。当犬人工感染约50000只原头蚴时,该法最早可以扩增出感染第13d粪便中的ND6目的基因。同时,对40份随机采自包虫病流行区的待检犬粪进行PCR检测,共有6份样品可扩增出目的条带且其基因型均属G1型,其检测及分型结果均与经典基因分型依据(COX1基因片段)的结果一致。结论本研究建立的粪便PCR方法具有很高的特异性和灵敏度,并可用于检测犬的细粒棘球绦虫早期感染情况。对于PCR检测阳性者,其产物经测序分析后也可用于细粒棘球绦虫的基因分型及种群遗传结构的分析研究。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 线粒体ND6基因 PCR检测 基因分型
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细粒棘球绦虫EgM123蛋白融合霍乱毒素B亚单位疫苗的构建表达及免疫原性研究 预览
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作者 齐文静 何黎 +5 位作者 王甜 郑雪婷 郭宝平 张文宝 况玲 李军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期647-654,共8页
目的构建和表达细粒棘球绦虫成虫特异表达EgM123基因与霍乱毒素B的融合蛋白(CTB-EgM123);并确定CTB-EgM123蛋白的抗原性。方法将合成EgM123基因序列连接到pET28a/CTB原核表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21中。利用IPTG诱导目的基因的表达... 目的构建和表达细粒棘球绦虫成虫特异表达EgM123基因与霍乱毒素B的融合蛋白(CTB-EgM123);并确定CTB-EgM123蛋白的抗原性。方法将合成EgM123基因序列连接到pET28a/CTB原核表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21中。利用IPTG诱导目的基因的表达;用SDS-PAGE及Western-Blotting对表达蛋白进行分析和鉴定;用纯化蛋白免疫小鼠及犬,用ELISA方法对小鼠及犬的血清抗体效价和肠黏液的抗体亚类进行分析。结果PCR和测序确定CTB-EgM123基因片段长度为804bp,pET28a/CTB-EgM123原核表达阅读框序列正确。在37℃条件下,经IPTG0.4mmol/L诱导5h,获得CTB-EgM123高表达的包涵体蛋白,分子质量为37kDa。免疫小鼠结果表明复性CTB-EgM123蛋白具较好免疫原性,抗体效价>320000;以IgG2a为主。检测免疫犬血清效价,结果发现用融合蛋白免疫后的犬血清抗体效价>64000,效价高于EgM123免疫组(t=0.0064,P<0.05);且在4周时,抗体呈上升趋势,并能较长时间维持抗体水平。结论原核表达载体pET28a/CTB-EgM123在大肠杆菌中成功表达,纯化蛋白接种小鼠和犬表明具有高的抗原性。表明CTB可以增强蛋白的免疫原性,并刺激小鼠和犬体内产生高水平的体液和黏膜免疫。本研究为研发犬用包虫病疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 CTB-EgM123 重组蛋白 疫苗
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原头蚴体外形成棘球蚴的优化培养体系研究
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作者 吴宏烨 李锴 +3 位作者 王芬 刘许诺 范俊杰 叶彬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期415-423,共9页
目的建立适合细粒棘球绦虫原头蚴在体外形成棘球蚴的培养体系。方法以RPMI1640或DMEM培养基为基质,胎牛血清或绵羊血清为营养成分,人肝细胞株L02为饲养细胞设计配伍2大类、6个组培养体系;培养细粒棘球绦虫原头蚴45 d,根据各组原头蚴的... 目的建立适合细粒棘球绦虫原头蚴在体外形成棘球蚴的培养体系。方法以RPMI1640或DMEM培养基为基质,胎牛血清或绵羊血清为营养成分,人肝细胞株L02为饲养细胞设计配伍2大类、6个组培养体系;培养细粒棘球绦虫原头蚴45 d,根据各组原头蚴的头节外翻率、成囊率和囊泡大小情况,寻找适合原头蚴形成棘球蚴的体外培养体系最佳配伍;在最佳配伍的培养体系继续培养棘球蚴囊泡至180 d。结果在起初的45 d期间,DMEM体系的E组(DMEM+胎牛血清+人肝细胞株L02)培养的棘球蚴生长最快,20 d起原头蚴成囊率高于其他各组(P<0.05),25 d起棘球蚴囊泡大于其他各组(P<0.05),45 d时原头蚴成囊率达到100%;在其后的46~180 d内,棘球蚴囊泡持续增大,至80 d时肉眼可见透明囊泡,至180 d时最大囊泡直径达2.2 mm。结论添加胎牛血清及人肝细胞株L02的DMEM培养基有利于体外培养的原头蚴发育为棘球蚴囊泡。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 原头蚴 成囊 培养体系
细粒棘球绦虫EgG1Y162-1/2重组蛋白诱导小鼠免疫应答特点的比较 预览
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作者 李玉娇 王红英 +5 位作者 张峰波 刘斌 杨妍 沙桐 庞楠楠 丁剑冰 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第1期6-11,共6页
目的研究和对比经生物信息学分析后重组构建的EgG1Y162-1/2蛋白诱导小鼠产生免疫应答反应的特点。方法随机将60只小鼠分5组,根据所注射抗原的不同分为EgG1Y162-1组、EgG1Y162-2组、GST对照组、佐剂组和正常对照组。每2周免疫1次,共免疫... 目的研究和对比经生物信息学分析后重组构建的EgG1Y162-1/2蛋白诱导小鼠产生免疫应答反应的特点。方法随机将60只小鼠分5组,根据所注射抗原的不同分为EgG1Y162-1组、EgG1Y162-2组、GST对照组、佐剂组和正常对照组。每2周免疫1次,共免疫4次。采集免疫前后的小鼠血清进行Elisa检测抗体效价;流式细胞术检测不同时间点淋巴细胞亚群(CD4^+T细胞和CD8^+T细胞)的动态变化;免疫10周后用细粒棘球蚴感染攻击小鼠,对比小鼠脾淋巴细胞体外刺激后的增殖反应、脾细胞凋亡率和小鼠囊重抑制率的检测结果。结果免疫后第10周,EgG1Y162-2组抗体滴度为1∶20 480高于EgG1Y162-1组抗体滴度1∶5 120。经原头蚴感染攻击的EgG1Y162-2组的淋巴细胞亚群(CD4^+T细胞、CD8^+T细胞)百分比均高于EgG1Y162-1组,且差异有统计学意义(P<0.05),但CD4^+T/CD8^+T细胞比值差异无统计学意义(P>0.05)。免疫后的EgG1Y162-2组小鼠脾淋巴细胞在体外被特异性刺激后增殖水平高于EgG1Y162-1组,差异有统计学意义(P<0.05)。检测显示EgG1Y162-2组的脾细胞凋亡率低于EgG1Y162-1,差异有统计学意义(P<0.05)。疫苗保护实验中发现EgG1Y162-1组的小鼠囊重抑制率比EgG1Y162-2组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EgG1Y162-2抗原比EgG1Y162-1抗原具有更强的免疫优势作用,本研究不仅证明了生物信息学分析表位的准确性,也提示该表位信息丰富的抗原值得作为疫苗的保护性抗原进行深入研究。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 EgG1Y162-1/2 免疫应答
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细粒棘球绦虫蛋白egG1y162-1、egG1y162-2的抗原表位比较 预览
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作者 沙桐 李玉娇 +5 位作者 张峰波 王红英 李智伟 赵骁 周晓涛 丁剑冰 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第1期12-19,共8页
目的分析蛋白egG1y162-1、egG1y162-2的氨基酸序列,了解其理化性质及二级结构特点,预测比较其抗原表位,为包虫病的免疫学诊断及表位疫苗的研制提供理论依据。方法采用生物信息学技术,利用在线软件ProtParam分析egG1y162-1和egG1y162-2... 目的分析蛋白egG1y162-1、egG1y162-2的氨基酸序列,了解其理化性质及二级结构特点,预测比较其抗原表位,为包虫病的免疫学诊断及表位疫苗的研制提供理论依据。方法采用生物信息学技术,利用在线软件ProtParam分析egG1y162-1和egG1y162-2的理化性质,使用DNAstar软件的protean等程序分析egG1y162-1和egG1y162-2蛋白的二级结构特点,运用在线软件IEDB等对egG1y162-1和egG1y162-2蛋白各参数进行综合分析并预测其抗原表位。结果综合分析各参数预测egG1y162-1的优势B细胞表位为9~28位氨基酸残基(LTKELKTTLPEHFRWIHVGS),egG1y162-1上29~36位氨基酸残基(RSLELGWN)区域可能存在人鼠共同T细胞抗原表位;egG1y162-2的优势B细胞表位为25~39位氨基酸残基(EGLKPSTFYEVVVQAFKGGS)、41~60位氨基酸残基(KGGSQVFKYTGFIRTLAPGE),egG1y162-2上26~41位氨基酸残基(GLKPSTFYEVVVQAFK)区域可能存在人鼠共同T细胞抗原表位。结论通过对细粒棘球绦虫蛋白egG1y162-1、egG1y162-2进行抗原表位分析,发现二者均存在评分较高的优势T表位和B表位,且存在人鼠共同T表位,而egG1y162-2的各方面指标要优于egG1y162-1,这对包虫病的诊断和疫苗研究有重要意义。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 egG1y162-1 egG1y162-2 生物信息技术 抗原表位
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抗细粒棘球绦虫疫苗的研究进展
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作者 魏玉环 胡媛 曹建平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期97-101,共5页
细粒棘球蚴病是由细粒棘球蚴寄生引起的人兽共患寄生虫病,在全世界范围内流行,严重威胁经济发展和人民健康。犬是细粒棘球绦虫的终末宿主,牛、羊和人是细粒棘球蚴的中间宿主。目前针对棘球蚴病的药物和手术治疗效果尚不理想,疫苗作为预... 细粒棘球蚴病是由细粒棘球蚴寄生引起的人兽共患寄生虫病,在全世界范围内流行,严重威胁经济发展和人民健康。犬是细粒棘球绦虫的终末宿主,牛、羊和人是细粒棘球蚴的中间宿主。目前针对棘球蚴病的药物和手术治疗效果尚不理想,疫苗作为预防和控制棘球蚴病传播的重要补充手段,研究尤为重要。本文对抗细粒棘球绦虫疫苗的研究进展进行综述,旨在为高效疫苗的进一步研制提供参考。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 基因工程疫苗 DNA疫苗 合成肽疫苗 免疫保护
细粒棘球绦虫Eg95-5蛋白生物信息学分析及鉴定
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作者 胡尊楠 马忠臣 +3 位作者 何金科 徐明国 陈创夫 王震 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期26-30,176,177共7页
为了制备一定纯度和浓度细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg) Eg95-5蛋白,进一步开发新型疫苗和建立新的疾病诊断方法,试验采用生物信息学分析、pMD19-T-Eg95-5与pET30a-Eg95-5载体的构建、Eg95-5蛋白诱导表达及纯化、免疫印迹技... 为了制备一定纯度和浓度细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg) Eg95-5蛋白,进一步开发新型疫苗和建立新的疾病诊断方法,试验采用生物信息学分析、pMD19-T-Eg95-5与pET30a-Eg95-5载体的构建、Eg95-5蛋白诱导表达及纯化、免疫印迹技术(Western-blot)对Eg95-5蛋白序列和反应原性进行研究。结果表明:Eg95-5蛋白无信号肽和跨膜结构,蛋白含有6个抗原决定簇和12个磷酸化位点,二级结构以无规则卷曲(39. 25%)、延伸链(33. 64%)和α-螺旋(21. 50%)为主,并获得了Eg95-5的三级结构模型;成功克隆并构建Eg95-5重组表达载体,获得了高纯度的Eg95-5蛋白,该蛋白可与患病动物血清发生特异性反应。说明Eg95-5蛋白结构较为保守,是无信号肽和非跨膜蛋白,作为抗原可以引起良好的免疫反应。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 Eg95-5 生物信息学 原核表达 WESTERN-BLOT
细粒棘球绦虫脂肪酸去饱和酶1基因序列及不同发育阶段表达分析 预览
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作者 徐梦飞 卢平萍 +5 位作者 马勋 张艳艳 王炜烨 孟季蒙 王正荣 薄新文 《动物医学进展》 北大核心 2019年第6期48-54,共7页
旨在寻找细粒棘球绦虫发育相关基因,为预防和治疗细粒棘球绦虫引起的包虫病而制定相应的措施提供理论基础。通过分析细粒棘球绦虫原头蚴高通量转录组测序数据文库,对Unigene进行KEGG通路分析,筛选出一个脂肪代谢通路,并筛选出该通路中... 旨在寻找细粒棘球绦虫发育相关基因,为预防和治疗细粒棘球绦虫引起的包虫病而制定相应的措施提供理论基础。通过分析细粒棘球绦虫原头蚴高通量转录组测序数据文库,对Unigene进行KEGG通路分析,筛选出一个脂肪代谢通路,并筛选出该通路中主要的调控基因脂肪酸去饱和酶1。通过对Eg-FADS1基因的PCR扩增,分析其核苷酸序列及氨基酸序列,用实时荧光定量PCR和全量组织原位杂交检测Eg-FADS1基因在不同发育阶段的表达情况。结果显示,该基因具有完整的开放阅读框,cDNA全长为819bp,编码272个氨基酸,预测该蛋白分子质量为30.98ku,等电点为7.10。实时荧光定量PCR结果表明,Eg-FADS1基因在原头蚴及成虫阶段均有表达,并且该基因在成虫阶段极显著高于原头蚴阶段的表达量。全量组织原位杂交结果显示,Eg-FADS1mRNA在原头蚴及成虫阶段分布广泛。提示Eg-FADS1具有生物防治作用,值得进一步研究。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 脂肪酸去饱和酶1 基因生物信息学分析 实时荧光定量PCR 全量组织原位杂交
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绵羊肝脏、肺脏细粒棘球蚴原头节miRNA表达特征分析
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作者 付世强 樊海宁 +5 位作者 王海久 周瀛 曹得萍 李衍飞 王志鑫 任利 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期137-143,共7页
目的分析绵羊肝脏及肺脏分离的细粒棘球蚴原头节(HPSC、LPSC)的微小RNA(miRNA)表达情况,筛选出寄生部位特异性miRNA,为后续miRNA生物信息学分析提供依据。方法从西宁市郊屠宰场采集带有包囊的新鲜绵羊肝脏、肺脏,经分离、过滤、沉淀获... 目的分析绵羊肝脏及肺脏分离的细粒棘球蚴原头节(HPSC、LPSC)的微小RNA(miRNA)表达情况,筛选出寄生部位特异性miRNA,为后续miRNA生物信息学分析提供依据。方法从西宁市郊屠宰场采集带有包囊的新鲜绵羊肝脏、肺脏,经分离、过滤、沉淀获得棘球蚴原头节。用TRIzol法提取原头节总RNA,构建HPSC、LPSC小片段RNA(sRNA)文库,采用高通量测序技术进行深度测序,将测序获得的原始数据与miRBase、Pre-miRNA、RFam、Repbase等4个公共数据库进行比对,获得已知miRNA的注释信息。利用mfold软件预测未比对上任何注释信息的miRNA的二级结构。比较HPSC、LPSC中miRNA表达量的差异。结果HPSC和LPSC文库分别获得10182508条和11133735条有效序列,大部分序列长18~22nt。其中22nt的序列最多,分别占20.9%(2128728/10182508)和24.6%(2737570/11133735);19nt及21nt次之,分别占14.0%(1429846/10182508)、18.5%(1880607/10182508)和16.9%(1875698/11133735)、16.9%(1885560/11133735)。在HPSC和LPSC文库中,细粒棘球蚴原头节已知miRNA分别有87条和79条,新miRNA分别占341条和339条,与其他寄生虫(日本血吸虫、曼氏血吸虫、扁虫及三代虫等)保守的miRNA分别有58条和62条。在细粒棘球蚴原头节已知miRNA中,除egr-miR-36a-3p、egr-miR-36b-3p、egr-miR-10229a-5p、egr-miR-10233-5p、egr-miR-10240-3p、egr-miR-10243-5p、egr-mir-10252-5p、egr-mir-10287-5p等8个miRNA在HPSC中特异表达外,其余miRNA在2个文库均表达且表达量一致;在与其他寄生虫保守的miRNA中,有50条在HPSC和LPSC中均表达,有8条和12条分别在2个文库中特异表达。在新的miRNA中,在HPSC和LPSC文库特异表达的分别为78和76条。HPSC和LPSC文库共筛选出miRNA574条,其中392条miRNA在2个文库中均表达,表达量居前10位的为egr-miR-1-5p、egr-miR-2a-3p、egr-miR-2c-3p、egr-miR-2b-3p、egr-miR-7-5p、egr-let-7-5p、egr-miR-7b-5p、egr-miR-9-5p、egr-miR-9-3p、egr-miR-10a-5p。LPSC与HPSC文库相比较,LPSC有12 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 MIRNA 表达特征分析
四川省若尔盖牦牛藏绵羊包虫感染分子流行病学调查 预览
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作者 钟维 唐天才 +3 位作者 刘城成 陈天祥 冯忠勇 郝力力 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期60-61,I0003共3页
细粒棘球蚴病俗称包虫病,是由细粒棘球绦虫的中绦期幼虫-细粒棘球蚴寄生在人和动物体内所致的一种严重的人兽共患寄生虫病。若尔盖县是全国5大牧区之一,牦牛和藏绵羊是该地区主要的经济动物,也是细粒棘球绦虫主要的中间宿主之一,数量分... 细粒棘球蚴病俗称包虫病,是由细粒棘球绦虫的中绦期幼虫-细粒棘球蚴寄生在人和动物体内所致的一种严重的人兽共患寄生虫病。若尔盖县是全国5大牧区之一,牦牛和藏绵羊是该地区主要的经济动物,也是细粒棘球绦虫主要的中间宿主之一,数量分别达100万和150万余头。 展开更多
关键词 分子流行病学调查 若尔盖县 藏绵羊 牦牛 人兽共患寄生虫病 四川省 细粒蚴病 细粒棘球绦虫
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胰蛋白酶和胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴外翻和成虫发育的影响 预览
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作者 刘文英 李军 +3 位作者 王甜 郑雪婷 郭刚 张文宝 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第5期599-603,共5页
目的探讨胰蛋白酶和犬胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴外翻和体外成虫培养发育的影响。方法无菌条件下采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴,用磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗,经胃蛋白酶处理后,用0.1%亚甲基蓝染色,检测虫体活率>98%的原头蚴用不同浓度的犬... 目的探讨胰蛋白酶和犬胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴外翻和体外成虫培养发育的影响。方法无菌条件下采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴,用磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗,经胃蛋白酶处理后,用0.1%亚甲基蓝染色,检测虫体活率>98%的原头蚴用不同浓度的犬胆汁(0.005%~5%)和胰蛋白酶(0.01%~5%)及纯水刺激处理,在不同的培养条件及时间点采集样品,观察原头蚴的死亡率及头节外翻情况。结果当胆汁终浓度为0.02%时,培养48 h头节外翻率最高,可达62.7%;原头蚴可以耐受0.25%的胰蛋白酶,但其浓度为0.5%,原头蚴培养48 h时,死亡率为13.7%。研究发现,原头蚴培养的前3 d,其培养基中添加0.25%的胰蛋白酶和0.02%的犬胆汁,培养3 d后去除胰蛋白酶,仅在培养基中加入0.02%的犬胆汁原头蚴可以保持高的成虫发育率,达60%以上。原头蚴经两次在室温下30 s的刺激,原头蚴外翻率达到100%,但培养24 h后外翻的原头蚴回翻,外翻率与对照无差别(t=0.27,P=0.79)。结论犬胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴的外翻和成虫的维持和发育是必须的。适量(0.25%)胰蛋白酶有利于已外翻原头蚴成虫性状发育。仅纯水刺激原头蚴,可以使原头蚴外翻,但不能提高后成虫的发育率。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 原头蚴 外翻 成虫发育 胰蛋白酶 犬胆汁
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细粒棘球绦虫磷酸丙糖异构酶抗原表位预测与分析
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作者 彭文军 李超群 +3 位作者 张耀刚 姜博璠 刘佳 曹得萍 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期180-183,共4页
目的利用生物信息学的方法对细粒棘球绦虫EgTPI B、T细胞表位进行预测,为细粒棘球绦虫诊断抗原的筛选提供分子生物学依据。方法采用Expasy中的protparam数据库推测EgTPI的理化性质;利用IEDB、ABCpred软件分析B细胞抗原表位。AMPHI法预... 目的利用生物信息学的方法对细粒棘球绦虫EgTPI B、T细胞表位进行预测,为细粒棘球绦虫诊断抗原的筛选提供分子生物学依据。方法采用Expasy中的protparam数据库推测EgTPI的理化性质;利用IEDB、ABCpred软件分析B细胞抗原表位。AMPHI法预测Th细胞的抗原表位;使用Jpred 4软件和SWISS-MODEL构建TPI的二、三级结构;应用MEGA 4.0软件比对细粒棘球绦虫TPI和人类TPI、日本血吸虫TPI、肝片吸虫TPI等7种生物的序列。结果通过分析得出EgTPI二级结构中直链结构占15.6%、α螺旋占38.9%、转角结构占12.0%、其他结构占42.2%;经多序列比对,人类TPI与细粒棘球绦虫TPI-致度仅为40.08%,较大的差异更有利于形成抗原表位。预测可能的T细胞表位有16-30、71-85、98-119、142-154、178-200;可能的B细胞表位有28-39、50-60、70-80、131-139、150-159、213-231。结论 EgTPI可能形成T细胞表位区域有5个,B细胞表位的区域有6个,EgTPI抗原表位预测分析为疾病诊断的候选分子筛选奠定分子生物学理论依据。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 磷酸丙糖异构酶(TPI) 抗原表位 生物信息学
棘球蚴(包虫)病预防疫苗的研制与应用 预览
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作者 张文宝 张壮志 +1 位作者 郑雪婷 李军 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期834-838,共5页
棘球蚴(包虫)病的控制是一个长期的过程。20世纪90年代以前,寄生虫病的防治手段主要是药物防治,但近年来,由于寄生虫耐药风险的增加和不理想的控制效果,以及大面积药物的使用对环境的不良影响等,寄生虫病控制的研究方向逐渐向免疫预防... 棘球蚴(包虫)病的控制是一个长期的过程。20世纪90年代以前,寄生虫病的防治手段主要是药物防治,但近年来,由于寄生虫耐药风险的增加和不理想的控制效果,以及大面积药物的使用对环境的不良影响等,寄生虫病控制的研究方向逐渐向免疫预防转移。本文从棘球绦虫疫苗研制的策略,中间宿主和终末宿主抗虫疫苗的研制,以及所面临的挑战和机遇等做一综述。在我国,EG95已经大面积接种绵羊用于囊性包虫病的控制。但泡球蚴病病原的传播是循环于犬,狐狸和狼等终末宿主和鼠类之间,终末宿主抗虫疫苗研制是泡球蚴病控制研究的方向之一。 展开更多
关键词 蚴(包虫)病 疫苗研制 细粒棘球绦虫 多房绦虫 EG95
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犬细粒棘球绦虫驱虫试验报告 预览 被引量:1
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作者 任殿玉 王连虎 +3 位作者 叶和平 双山 孙殿英 柳瑞云 《中国动物保健》 2018年第2期51-53,共3页
包虫病是一种严重的人畜共患寄生虫病,主要病原体是细粒棘球绦虫,其不仅危害畜牧业的健康发展,对人体健康也造成了很严重的威胁。本试验采用内蒙锡林浩特地区的土种犬作为试验对象,通过饲喂不同形式的吡喹酮探究其对犬的驱虫效果,结果... 包虫病是一种严重的人畜共患寄生虫病,主要病原体是细粒棘球绦虫,其不仅危害畜牧业的健康发展,对人体健康也造成了很严重的威胁。本试验采用内蒙锡林浩特地区的土种犬作为试验对象,通过饲喂不同形式的吡喹酮探究其对犬的驱虫效果,结果表明试验所用两种吡喹酮均对犬具有良好的驱虫效果。 展开更多
关键词 包虫病 细粒棘球绦虫 吡喹酮
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细胞蜡块在诊断棘球蚴病中的应用
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作者 王雪丹 曾赛凡 +3 位作者 李国平 杨代兴 张声 王行富 《中华病理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期463-464,共2页
棘球蚴病又名包虫病,是细粒棘球绦虫幼虫(棘球蚴)寄生于家畜等多种食草动物和人的组织器官内的人兽共患寄生虫病,多发于世界各地牧区。以往该病的诊断是基于普通细胞学,如今,随着细胞蜡块技术的不断发展,大大拓展了细胞病理学诊... 棘球蚴病又名包虫病,是细粒棘球绦虫幼虫(棘球蚴)寄生于家畜等多种食草动物和人的组织器官内的人兽共患寄生虫病,多发于世界各地牧区。以往该病的诊断是基于普通细胞学,如今,随着细胞蜡块技术的不断发展,大大拓展了细胞病理学诊断的实用范围和能力。 展开更多
关键词 细胞病理学诊断 蚴病 细胞蜡块 人兽共患寄生虫病 应用 细粒棘球绦虫 组织器官 包虫病
人工感染细粒棘球蚴犬粪中蛋白质组的分析 预览
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作者 李双男 闫鸿斌 +7 位作者 李立 姚刚 田文俊 李文卉 张念章 吴燕涛 付宝权 贾万忠 《动物医学进展》 北大核心 2018年第1期7-15,共9页
收集感染细粒棘绦虫原头蚴后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,依次进行质谱分析、生物信息学和蛋白质功能富集分析。结果发现,在犬粪中共鉴定出蛋白质3 242个,其中宿主(犬)蛋白有3 107个、细粒棘球绦虫蛋白有135... 收集感染细粒棘绦虫原头蚴后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,依次进行质谱分析、生物信息学和蛋白质功能富集分析。结果发现,在犬粪中共鉴定出蛋白质3 242个,其中宿主(犬)蛋白有3 107个、细粒棘球绦虫蛋白有135个。蛋白质功能富集结果显示,犬感染细粒棘球绦虫后,寄生虫与宿主相互作用,虫体在不同时间分泌特定蛋白,而蛋白质的分子生物学功能存在一定差异。研究结果对建立粪抗原诊断方法和研究细粒棘球绦虫感染宿主后的代谢途径及其生活机制提供了重要依据。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 犬粪 不同时间 蛋白质组 生物信息学分析
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两种棘球绦虫的水通道蛋白基因克隆及功能特性的比较 预览 被引量:1
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作者 刘许诺 王芬 +3 位作者 吴宏烨 李锴 范俊杰 叶彬 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期501-508,共8页
目的探索棘球绦虫水通道蛋白(aquaporin,AQP)在棘球蚴、泡球蚴囊液形成中的作用,为阐明棘球蚴、泡球蚴囊液的形成过程以及筛选棘球蚴病新的药物治疗靶点提供理论依据。方法利用RT-PCR扩增棘球蚴、泡球蚴AQPs基因,构建AQPs体外转录载体... 目的探索棘球绦虫水通道蛋白(aquaporin,AQP)在棘球蚴、泡球蚴囊液形成中的作用,为阐明棘球蚴、泡球蚴囊液的形成过程以及筛选棘球蚴病新的药物治疗靶点提供理论依据。方法利用RT-PCR扩增棘球蚴、泡球蚴AQPs基因,构建AQPs体外转录载体,并在非洲爪蟾(Xenopus laevis)卵母细胞中进行异源表达,以验证其水通道功能。利用生物信息学方法分析两种棘球绦虫水通道蛋白跨膜结构域特点及差异,并对棘球绦虫和人AQPs进行多序列比对,分析棘球绦虫AQPs序列结构与人AQPs的差异。结果通过RT-PCR成功克隆了棘球蚴EgAQP4和EgAQP9、泡球蚴EmAQP4和EmAQP9四个基因,注射了这些基因cRNA的卵母细胞与注射DEPC水的对照组卵母细胞的体积变化率(V/V0)差别无统计学意义(F=1.143,P〉0.05),透水系数差别亦无统计学意义(F=1.416,P〉0.05),这四个AQPs基因在非洲爪蟾卵母细胞中未表现出水通道的功能。跨膜结构域预测及多序列比对结果表明,与经典的水通道蛋白相比,EgAQP4和EmAQP4虽然N和C末端均位于胞质侧,但跨膜结构域数目为4个,NPA基序替换为NPM和NPT;而EgAQP9和EmAQP9虽然具有2个保守的NPA基序,但跨膜结构域数目为5个,N末端位于胞外侧、C末端位于胞质侧。棘球绦虫AQPs蛋白结构存在的这些差异,可能与其在卵母细胞中未表现水通道蛋白的功能有关。结论两种棘球绦虫基因组中都存在编码AQPs的基因,但这些AQPs基因的功能验证试验未见到水通道功能。该结果可能正好说明了囊液的水分子既不能通过AQPs进入生发层细胞而致使细胞肿胀坏死,也不能以AQPs为通道从生发层细胞转移出囊壁,致使囊液累积、棘球蚴包囊或泡球蚴囊泡体积长大。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 多房绦虫 单房 多房 水通道蛋白
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民和县犬细粒棘球绦虫病防治效果调查 预览 被引量:1
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作者 张学忠 李生福 《青海畜牧兽医杂志》 2018年第1期52-52,37共2页
本文采用ELISA检测法对民和县家犬进行了细粒棘球绦虫病防治效果调查,结果表明:家犬细粒棘球绦虫粪抗原检出率为2.8%,控制在5%的防控目标;不同乡镇的防治效果有差异,出现粪抗原阳性犬较多,应加强驱虫工作。
关键词 细粒棘球绦虫 调查
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2011-2016年甘肃省天祝县犬细粒棘球绦虫感染监测分析
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作者 张鹏 蔡开辉 《疾病监测》 CAS 2018年第8期700-702,共3页
目的明确家牧犬通过登记管理和吡喹酮驱虫前后细粒棘球绦虫感染率变化趋势,为下一步制定包虫病防治对策提供依据。方法采集2011—2016年家牧犬粪便进行犬粪细粒棘球绦虫抗原检测,计算并比较干预前后感染率。结果家牧犬细粒棘球绦虫感染... 目的明确家牧犬通过登记管理和吡喹酮驱虫前后细粒棘球绦虫感染率变化趋势,为下一步制定包虫病防治对策提供依据。方法采集2011—2016年家牧犬粪便进行犬粪细粒棘球绦虫抗原检测,计算并比较干预前后感染率。结果家牧犬细粒棘球绦虫感染率由2011年7.38%下降为2016年的3.04%,下降55.64%,并呈逐年下降趋势。2011年与2016年感染率比较,差异有统计学意义(χ~2=47.8,P〈0.001)。结论天祝县家牧犬通过登记管理和吡喹酮驱虫,细粒棘球绦虫感染率呈逐年下降趋势,防治效果显著。感染细粒棘球绦虫的犬作为人间包虫病主要传染源,危害严重,建议相关部门加强传染源犬的控制,进一步落实犬驱虫管理措施。 展开更多
关键词 家牧犬 细粒棘球绦虫 感染率
细粒棘球绦虫原头蚴microRNA表达谱分析 预览
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作者 王正荣 薄新文 +4 位作者 张艳艳 马勋 卢平萍 徐梦飞 孟季蒙 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期2477-2485,共9页
旨在解析miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴中的表达谱特性,为进一步揭示miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用及调控机制提供理论依据。从患病绵羊肝无菌采集细粒棘球绦虫原头蚴,提取总RNA,构建原头蚴miRNA文库,利用RNA sequencing技术进行... 旨在解析miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴中的表达谱特性,为进一步揭示miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用及调控机制提供理论依据。从患病绵羊肝无菌采集细粒棘球绦虫原头蚴,提取总RNA,构建原头蚴miRNA文库,利用RNA sequencing技术进行测序分析。结果表明,本研究从细粒棘球绦虫原头蚴中分离得到109个已知的miRNA分子,同时得到189个新的miRNA发夹前体分子。靶基因的预测结果显示,已知miRNA共有132个靶基因,而新发现的miRNA共有3 152个靶基因。进一步的研究发现这些miRNA分子广泛参与虫体生长发育相关的关键信号通路,诸如wnt、cAMP、Hedgehog、NF-κB、Notch以及胆酸盐等信号通路,研究又进一步采用实时荧光定量PCR以及原位杂交技术对虫体经典wnt信号通路相关的miRNA分子以及其靶标基因进行了差异表达以及组织定位研究。结果提示,HG328413.1_36258和β-catenin、HG328414.1_36364*和dis以及HG328399.1_25846和axin可能存在潜在的调控关系。综上所述,本研究在细粒棘球绦虫原头蚴中发现了大量的新的miRNA分子,丰富了原头蚴miRNA的数据,为进一步解析miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 MICRORNA 原头蚴 表达谱
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