期刊文献+
共找到91篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
miR-369-3p通过调控VEGFC基因表达对膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响
1
作者 赵振伶 邵焕军 +1 位作者 郝丽娜 刘军 《中国医师杂志》 CAS 2018年第1期92-95,99共5页
目的观察miR-369-3p对膀胱癌细胞EJ和5637中血管内皮细胞生长因子c(VEG-FC)基因的调控作用,并观察其对细胞增殖及凋亡的影响。方法转染miR.NC(对照组)或转染miR-369-3p(观察组)至膀胱癌细胞株EJ和5637;采用Targetscan靶基因预... 目的观察miR-369-3p对膀胱癌细胞EJ和5637中血管内皮细胞生长因子c(VEG-FC)基因的调控作用,并观察其对细胞增殖及凋亡的影响。方法转染miR.NC(对照组)或转染miR-369-3p(观察组)至膀胱癌细胞株EJ和5637;采用Targetscan靶基因预测软件预测miR-369-3p的靶基因;采用荧光实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测VEGFCmRNA表达变化;Westernblotting检测VEGFC、p-Raf-1和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERKl/2)在蛋白水平的变化;采用细胞计数试剂盒(CCK-8法)和克隆形成实验检测miR-369-3p对膀胱癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测miR-369-3p对细胞凋亡的影响。结果转染miR-369-3p后,EJ、5637细胞中VEGFC在mRNA水平和蛋白水平的表达均明显下降(P〈0.05),P-Raf-1和p-ERKl/2蛋白表达明显降低,细胞的增殖能力明显降低(P〈0.05),细胞形成的克隆数明显减少(P〈0.05),细胞凋亡明显增加(P〈0.01)。结论miR-369-3p可通过干扰VEGFC基因的表达,抑制膀胱癌细胞的增殖及促进膀胱癌细胞的凋亡,可能为膀胱癌的生物治疗提供一个新的靶标。 展开更多
关键词 微RNAs/理学 血管内皮生长因子c/药物作用/代谢 膀胱肿瘤/药物疗法/病 理学/代谢 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用
雷公藤甲素诱导卵巢癌SKOV-3细胞株凋亡的实验研究 被引量:1
2
作者 刁幼林 于建华 《中国医师杂志》 CAS 2017年第6期889-892,共4页
目的研究雷公藤甲素(TP)对卵巢癌SKOV一3细胞株凋亡的调节作用及分子机制。方法培养卵巢癌SKOV-3细胞株并用不同剂量的TP(1×10~mg/ml、1×10^-5mg/ml、1×10-mg/ml、1×10^-3mg/m1)进行处理,以不含TP的IMEM... 目的研究雷公藤甲素(TP)对卵巢癌SKOV一3细胞株凋亡的调节作用及分子机制。方法培养卵巢癌SKOV-3细胞株并用不同剂量的TP(1×10~mg/ml、1×10^-5mg/ml、1×10-mg/ml、1×10^-3mg/m1)进行处理,以不含TP的IMEM培养基作为阴性对照。处理后12、24、48h时,采用原位末端标记法(TUNEL)测定细胞凋亡率;处理后48h时,采用荧光定量PCR测定凋亡分子、侵袭分子的mRNA表达量。结果(1)不同剂量TP处理后12、24、48h时,同一处理时间点,rrP处理剂量越大、SKOV-3细胞的凋亡率越高,同一处理剂量,TP处理时间越久、SKOV-3细胞的凋亡率越高,TP能够以剂量依赖性和时间依赖性的方式增加细胞凋亡率;(2)不同剂量TP处理后48h时,TP处理剂量越大,细胞色素C(CytC)、Bax、Caspase-3的mRNA表达量越高,Bcl-2、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP7、MMP9、N—cadherin、Vimentin的mRNA表达量越低;TP能够以剂量依赖性的方式增加CytC、Bax、Caspase-3的mRNA表达量,降低Bcl-2、MMP2、MMP7、MMP9、N—cadherin、Vimentin的mRNA表达量。结论TP能够诱导卵巢癌细胞株凋亡,激活线粒体凋亡途径、抑制细胞侵袭是TP发挥促凋亡作用的分子机制。 展开更多
关键词 雷公藤内酯/理学 卵巢肿瘤/药物疗法/病理学 细胞凋亡/药物作用
2-甲氧基雌二醇联用抗坏血酸诱导白血病K562细胞凋亡机制研究
3
作者 张苏伟 曾嫦 林祥伟 《中国校医》 2017年第8期609-614,共6页
目的研究2-ME联合抗坏血酸在诱导白血病细胞凋亡中的作用以及相关作用机制。方法用显微镜观察K562细胞凋亡情况;通过流式细胞术分析凋亡率;通过EMSA检测NF-κB的活性。结果 2μmol/L2-ME+62.5μmol/LAA组可诱导K562细胞凋亡。2-ME+AA... 目的研究2-ME联合抗坏血酸在诱导白血病细胞凋亡中的作用以及相关作用机制。方法用显微镜观察K562细胞凋亡情况;通过流式细胞术分析凋亡率;通过EMSA检测NF-κB的活性。结果 2μmol/L2-ME+62.5μmol/LAA组可诱导K562细胞凋亡。2-ME+AA以剂量依赖性方式诱导凋亡,在浓度(2~8μmol/L)时凋亡呈时间-剂量依赖。2-ME可诱导NF-κBDNA结合活性以剂量依赖性方式降低。结论 2-ME联合抗坏血酸可诱导白血病细胞以时间-剂量依赖式凋亡,其诱导凋亡的机制与NF-κB通路有关。 展开更多
关键词 白血病 髓内 慢性 BCR-ABL阳性/治疗 K562细胞 细胞凋亡/药物作用 NF-κB/拮抗剂和抑制剂 2-甲氧雌二醇 谷胱甘肽 抗坏血酸 电泳迁移位移实验/方法 流式细胞术/方法
脑源性神经营养因子对大鼠颅脑损伤后继发氧化应激及细胞凋亡的影响 被引量:5
4
作者 孙长忠 朱平 《中国医师杂志》 CAS 2016年第2期240-244,共5页
目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)干预对大鼠颅脑损伤后继发氧化应激和细胞凋亡的变化及其可能机制。方法成年健康雄性SD大鼠84只,按随机数字表法分为对照组(n=42)和BDNF组(n=42)。通过改良Feeney法建立颅脑损伤模型苏醒后BDNF... 目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)干预对大鼠颅脑损伤后继发氧化应激和细胞凋亡的变化及其可能机制。方法成年健康雄性SD大鼠84只,按随机数字表法分为对照组(n=42)和BDNF组(n=42)。通过改良Feeney法建立颅脑损伤模型苏醒后BDNF组即予以腹腔注射0.5μg/μlBDNF,对照组则用同等剂量的生理盐水代替BDNF。根据伤后处死时间分为1、3、6、12、24h.3d和7d共7个亚组,每亚组各6只。每亚组随机取3只大鼠处死,取挫伤灶周围组织行脑组织匀浆液超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽(GSH)测定;剩余的3只大鼠采用免疫组织化学方法检测挫伤灶周围脑组织中NF—κBp65的表达情况,同时采用TUNEL法观察脑挫伤灶周围细胞凋亡情况。结果BDNF组颅脑损伤后1h可见NF—κB065蛋白明显表达,3—12h表达逐渐加强,并于24h达到高峰,3~7d表达稍减弱,但仍为高表达状态;BDNF组各时间点均低于对照组(P〈0.05);对照组颅脑损伤后凋亡细胞数较BDNF组多,而BDNF组各时点MDA、SOD、GSH含量水平均低于对照组(P〈0.05);两组脑组织NF—κBp65蛋白表达阳性率与MDA含量水平均呈正相关(r1=0.947,P〈0.01;r2=0.961,P〈0.01)。结论颅脑损伤后脑源性神经营养因子可能通过降低NF-KBp65活性,抑制氧化应激水平,控制细胞凋亡,减少或减轻继发性脑损伤。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子/代谢/理学 颅脑损伤/代谢/药物疗法 氧化性应激/药物 作用 细胞凋亡/药物作用
下调COX-2对胃癌细胞系SGC7901增殖的影响
5
作者 张奥雪 彭健 《中国医师杂志》 CAS 2016年第4期579-582,共4页
目的 探讨小RNA干扰COX-2表达后对胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)的方法检测胃癌细胞系SGC7901和胃正常上皮细胞系GES中的COX-2的mRNA表达水平;蛋白电泳印记技术(Western blot)检测CO... 目的 探讨小RNA干扰COX-2表达后对胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)的方法检测胃癌细胞系SGC7901和胃正常上皮细胞系GES中的COX-2的mRNA表达水平;蛋白电泳印记技术(Western blot)检测COX-2的蛋白表达情况;MTT法检测SGC7901、GES及转染COX-2 siRNA后SGC7901的增殖曲线;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 qRT-PCR结果显示:COX-2在胃癌细胞系SGC7901中的表达明显高于胃正常上皮细胞系GES(P<0.01).Western blot结果显示相对于转染COX-2阴性对照(NC)组,转染COX-2siRNA组COX-2表达降低(P<0.01);MTT结果显示细胞系SGC7901转染COX-2 siRNA后,细胞增殖能力明显降低.流式细胞术检测凋亡结果显示,COX-2的表达下调后,SGC7901细胞的凋亡明显增加(P<0.01).抑制COX-2的表达可以下调Bcl-2及上调Bax的表达(P<0.01).结论 COX-2具有促进胃癌SGC7901细胞系的增殖能力. 展开更多
关键词 RNA 小分子干扰 环氧化酶2/遗传学/代谢 胃肿瘤/药物疗法/遗传学/代谢 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用
双氢青蒿素抗肿瘤分子生物学机制研究进展
6
作者 曹鹏 冷东瑾 +3 位作者 李滢 张紫薇 刘磊 李晓岩 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期501-507,共7页
青蒿素作为抗疟特效药在临床应用中存在水溶性小、口服效果差等缺点,因此研究人员开发了保留其母核的多种衍生物。其中双氢青蒿素(DHA)的抗疟活性更强,且具有在体内代谢速度快、水溶性好等优点,同时DHA对肿瘤细胞也有良好的抑制效... 青蒿素作为抗疟特效药在临床应用中存在水溶性小、口服效果差等缺点,因此研究人员开发了保留其母核的多种衍生物。其中双氢青蒿素(DHA)的抗疟活性更强,且具有在体内代谢速度快、水溶性好等优点,同时DHA对肿瘤细胞也有良好的抑制效果,且其分子生物学作用机制与自身结构中的过氧桥密切相关。由于肿瘤细胞比正常细胞需要摄取更多的铁离子,因此肿瘤细胞膜上存在大量的转铁蛋白受体。DHA能在亚铁离子的存在下使过氧桥发生断裂,产生自由基从而对肿瘤细胞发挥杀伤作用,并能使转铁蛋白受体发生内吞,阻止肿瘤细胞从外界摄入必需的铁离子。本文主要从DHA加速细胞氧化损伤、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长增殖和侵袭转移以及逆转肿瘤细胞多药耐药等方面对其抗肿瘤的分子生物学机制进行综述。 展开更多
关键词 青蒿素/类似物和衍生物 青蒿素/理学 抗肿瘤(中)/治疗应 细胞凋亡/药物作用 细胞增殖/药物作用 肿瘤侵润 肿瘤转移 综述
在线阅读 免费下载
外源性白介素24促进C6细胞凋亡的体外研究 被引量:1
7
作者 李明辉 赵静雅 +1 位作者 闫蕴力 冯运章 《实用肿瘤杂志》 CAS 2016年第2期122-126,共5页
目的探讨外源性白细胞介素24(interleukin 24,IL-24)体外抑制胶质瘤细胞增殖及促凋亡的相关机制。方法应用MTT体外观察转染IL-24对胶质瘤C6细胞增殖的抑制作用。应用Hoechst 33258荧光染色体外观察IL-24对C6细胞的促凋亡作用。Western... 目的探讨外源性白细胞介素24(interleukin 24,IL-24)体外抑制胶质瘤细胞增殖及促凋亡的相关机制。方法应用MTT体外观察转染IL-24对胶质瘤C6细胞增殖的抑制作用。应用Hoechst 33258荧光染色体外观察IL-24对C6细胞的促凋亡作用。Western blot法检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和caspase-3蛋白的表达变化情况。结果 IL-24能使C6细胞的体外增殖能力降低,转入IL-24的C6细胞(C6/IL-24)增殖能力下降。经Hochest 33258染色,转入IL-24的C6细胞凋亡后出现核固缩、染色质凝集呈块或碎裂状改变。与转入空载体的C6细胞(C6/pLXSN)及C6细胞比较,C6/IL-24细胞的JNK和caspase-3蛋白表达均增高(均P〈0.05)。C6/pLXSN与C6细胞比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论外源性IL-24基因可抑制C6胶质瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,该诱导凋亡的作用可能与其上调并激活JNK及caspase-3表达有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤/病理学 细胞介素类/理学 细胞 肿瘤 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 JNK丝裂原活化蛋白激酶类 细胞凋亡/药物作用 细胞增殖/药物作用
Cathepsin L在大鼠短暂性前脑缺血中的作用 被引量:1
8
作者 彭旭 张创 +5 位作者 张智搏 孙李晴 王婷 唐敏 唐璐 周颖 《中国医师杂志》 CAS 2016年第3期375-379,共5页
目的 探讨Cathepsin L在大鼠短暂性前脑缺血中的作用.方法 选取周龄为10-12周的清洁级健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠60只,体重(280 ±20)g,依据随机数字表法将大鼠分为假手术组(Sham组)10只;脑缺血再灌注组(IRI组)25只;C... 目的 探讨Cathepsin L在大鼠短暂性前脑缺血中的作用.方法 选取周龄为10-12周的清洁级健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠60只,体重(280 ±20)g,依据随机数字表法将大鼠分为假手术组(Sham组)10只;脑缺血再灌注组(IRI组)25只;Cathepsin L抑制剂Z-FY-DMK干预组(CLI组)25只;IRI组、CLI组大鼠分别按3、6、12及24h四个时间点每个时间点分为四个亚组.采用改良longa线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤(MCAO)模型,CLI组于术前30 min侧脑室穿刺注入Z-FY-DMK(20 μg/μl)&#215;5μl,Sham组及IRI组于术前30 min侧脑室注入浓度为10 ml/L的二甲基亚砜(DMSO)5μl.对大鼠运用Longa&#39;s 5级标准评分法评分;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测各组大鼠24h时间点相对脑梗死体积;Western blotting法检测半暗带区相应时间点Cathepsin L的蛋白表达变化.结果 IRI组Cathepsin L在大鼠脑缺血再灌注后3、6、12 h呈上升趋势,12 h达到高峰,24 h下降,均高于Sham组(P<0.05);CLI组各相应时间点Cathepsin L蛋白的表达较IRI组表达减少(P<0.05).结论 Cathepsin L可能参与了大鼠短暂性前脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡. 展开更多
关键词 组织蛋白酶类/拮抗剂和抑制剂/代谢 脑缺血/代谢/病理学/药物疗法 细胞凋亡/药物作用
硒代胱氨酸协同增敏顺铂诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡 被引量:1
9
作者 袁启霞 张毅芳 +1 位作者 范丰田 王琨 《实用肿瘤杂志》 CAS 2015年第4期330-334,共5页
目的探讨硒代胱氨酸(selenocystine,SeC)增强抗肿瘤药物顺铂(cisplatin,cis)对子宫颈癌HeLa细胞的生长抑制作用及其机制。方法体外培养人子宫颈癌HeLa细胞,MTT法检测SeC联合Cis对HeLa细胞的生长抑制。倒置光学显微镜观察细胞形... 目的探讨硒代胱氨酸(selenocystine,SeC)增强抗肿瘤药物顺铂(cisplatin,cis)对子宫颈癌HeLa细胞的生长抑制作用及其机制。方法体外培养人子宫颈癌HeLa细胞,MTT法检测SeC联合Cis对HeLa细胞的生长抑制。倒置光学显微镜观察细胞形貌的改变。流式细胞术和TUNEL-DAPI双染检测细胞凋亡。Caspase荧光底物检测半胱氨酸蛋白酶caspase-3、caspase-8和caspase-9的活性。JC-1探针检测线粒体膜电位。Western blot检测caspase-3、caspase-9和Bcl-2家族蛋白的表达。结果SeC(5μmol/L)预处理HeLa细胞24小时,再联合Cis(5和10μmol/L)共处理24小时,可显著增强Cis对HeLa细胞的生长抑制,细胞形貌表现为凋亡性改变。机制研究表明,SeC联合Cis对HeLa细胞的生长抑制主要是通过诱导线粒体介导的凋亡来实现的,表现为Sub-G,峰的升高,caspase-3、caspase-8和caspase-9的激活,TUNEL阳性细胞的增多,线粒体膜电位的耗散和Bcl-2家族蛋白表达的失衡。结论SeC可协同增敏Cis诱导HeLa细胞凋亡,为子宫颈癌的治疗提供新策略。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤/病理学 宫颈肿瘤/药物疗法 HeLa细胞/药物作用 硒代胱氨酸/理学 顺铂/理学 抗肿瘤/理学 药物协同作用 细胞凋亡/药物作用 线粒体 细胞 肿瘤
TRPM8对人膀胱移行细胞癌细胞T24凋亡和细胞增殖的影响 被引量:2
10
作者 梁平 郁兰芳 《中国医师杂志》 CAS 2015年第10期1509-1512,共4页
目的 探讨瞬时受体电位M8(TRPM8)对人膀胱癌细胞T24细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用荧光定量PCR检测人膀胱移行细胞癌细胞MGH-U1、T24、BIU-87以及EJ中TRPM8的表达水平;设计并合成靶向TRPM8的特异性shRNA,通过脂质体转染法转染TRPM8... 目的 探讨瞬时受体电位M8(TRPM8)对人膀胱癌细胞T24细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用荧光定量PCR检测人膀胱移行细胞癌细胞MGH-U1、T24、BIU-87以及EJ中TRPM8的表达水平;设计并合成靶向TRPM8的特异性shRNA,通过脂质体转染法转染TRPM8表达最高的人膀胱癌细胞T24以构建稳定低表达TRPM8细胞株,通过免疫印迹法和荧光定量PCR来验证shRNA的干扰效率;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测干扰后细胞的增殖能力;通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况;免疫印迹法检测PI3K、细胞周期素DI(Cyclin D1)以及Bcl-2的表达水平.结果 T24的TRPM8表达量在4株膀胱移行细胞癌细胞中最高;特异性靶向TRPM8的shRNA能够有效下调T24细胞中TRPM8的表达;特异性shRNA干扰组细胞较其他两组细胞增殖显著减慢(F=64.73,P<0.01);此外,干扰组的凋亡率显著高于空白组和对照组(F =84.73,P<0.01);最后,TRPM8干扰组细胞的PI3K、Cyclin D1以及Bcl-2蛋白的表达较空白组和对照组显著下调.结论 采用RNA干扰技术能够有效沉默T24细胞的TRPM8基因,并致使其细胞增殖能力下降以及细胞凋亡率升高,其中可能的机制为通过调节细胞因子PI3K来调控人膀胱移行细胞癌细胞的增殖和凋亡.TRPM8在膀胱癌的发生发展中起着较为重要作用,TRPM8可能成为治疗膀胱癌的新靶点. 展开更多
关键词 瞬时受体电位通道/生物合成/理学 RNA干扰 膀胱肿瘤/治疗/代谢/病理学 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用
丹皮酚抑制帕金森病模型细胞凋亡的作用 被引量:1
11
作者 王浩 耿赵铭 +2 位作者 胡智伟 王舒燕 赵冰 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期30-36,共7页
目的:观察丹皮酚对帕金森病模型细胞凋亡的影响。方法:采用1-甲基-4-苯基吡啶( MPP+)处理具有多巴胺能神经元特性的PC12细胞建立帕金森病体外模型,并分为正常对照组、空白对照组、1μmol/L丹皮酚组、3μmol/L丹皮酚组和9μmo... 目的:观察丹皮酚对帕金森病模型细胞凋亡的影响。方法:采用1-甲基-4-苯基吡啶( MPP+)处理具有多巴胺能神经元特性的PC12细胞建立帕金森病体外模型,并分为正常对照组、空白对照组、1μmol/L丹皮酚组、3μmol/L丹皮酚组和9μmol/L丹皮酚组。以四甲基偶氮唑蓝比色法和乳酸脱氢酶法检测细胞损伤,以赫斯特荧光染剂染色及流式细胞术检测细胞凋亡,以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯法检测细胞活性氧生成,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、Bcl-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果:与正常对照组比较,空白对照组细胞存活率显著降低,乳酸脱氢酶漏出率升高,凋亡细胞增多,活性氧生成增加,凋亡相关分子caspase-3活性上调、Bax/Bcl-2比值升高,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。与空白对照组比较,各浓度丹皮酚预处理后细胞存活率显著升高,乳酸脱氢酶漏出率降低,凋亡细胞减少,并抑制活性氧生成,降低Bax/Bcl-2的比值及caspase-3蛋白水平,差异均具有统计学意义( P<0.05或P<0.01)。结论:丹皮酚能抑制帕金森病模型PC12细胞凋亡,其发挥保护作用的机制可能与改善氧化应激、降低Bax/Bcl-2比值、抑制caspase-3活化有关。 展开更多
关键词 1-甲基-4-苯基吡啶 帕金森病 细胞凋亡/药物作用 牡丹酚/理学 牡丹酚/投和剂量 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3/药物作用 BCL-2相关X蛋白质 基因 bcl-2 活性氧
在线阅读 免费下载
芍药苷对黑色素瘤A-375细胞凋亡的影响 被引量:1
12
作者 林春玲 赵延明 《医学临床研究》 CAS 2015年第6期1162-1164,共3页
【目的】探讨芍药苷对黑色素瘤 A‐375细胞凋亡的影响。【方法】采用不同浓度(0.5、1、2 mg/mL)芍药苷处理黑色素瘤 A‐375细胞后继续培养24 h ,MTT 法检测细胞抑制率,Hoechst 染色检测细胞形态, Western Blot 检测抑癌基因 Bax... 【目的】探讨芍药苷对黑色素瘤 A‐375细胞凋亡的影响。【方法】采用不同浓度(0.5、1、2 mg/mL)芍药苷处理黑色素瘤 A‐375细胞后继续培养24 h ,MTT 法检测细胞抑制率,Hoechst 染色检测细胞形态, Western Blot 检测抑癌基因 Bax 、细胞增殖抗原(PCNA)、核因子κB(NF‐κB) p65蛋白表达。【结果】随着给药浓度的增加,芍药苷对 A‐375细胞的抑制率逐渐增高,在48 h 达到高峰;Hoechst 染色结果表明随着浓度的逐渐增高,细胞裂解强度增大;Western Blot 结果表明芍药苷上调 Bax 表达,下调 PCNA 表达,抑制 NF‐κB p65表达,且呈剂量依赖性。【结论】芍药苷诱导黑色素瘤 A‐375细胞凋亡,可能是通过 NF‐κB 信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 甙/理学 黑色素瘤/病理学 肿瘤细胞 培养的 细胞凋亡/药物作用
三尖杉酯碱通过下调Mcl-1蛋白诱导NB4细胞凋亡 被引量:2
13
作者 邬春晓 沈红强 夏大静 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期431-436,共6页
目的:考察三尖杉酯碱(HT)对人急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用,并探讨其杀伤白血病细胞的作用机制。方法:采用台盼兰染色法,细胞计数,考察HT对NB4细胞的生长抑制作用和细胞毒性作用;采用AO... 目的:考察三尖杉酯碱(HT)对人急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用,并探讨其杀伤白血病细胞的作用机制。方法:采用台盼兰染色法,细胞计数,考察HT对NB4细胞的生长抑制作用和细胞毒性作用;采用AO—EB荧光染色法和细胞形态学观察,考察HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;采用PI染色的流式细胞术,考察HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;采用WesternBlotting技术,考察HT对NB4细胞凋亡相关蛋白的影响;采用siRNA干扰技术,沉默目的蛋白证明推论;提取APL患者血液样本,验证HT的凋亡诱导作用及作用机制。结果:HT能够呈剂量依赖和时间依赖地抑制NB4细胞生长并杀伤NB4细胞,HT处理72h后GI钔为(32.0±2.5)nmol/L;HT能够呈现剂量依赖和时间依赖的诱导NB4细胞凋亡,HT处理6h后其诱导凋亡百分率为66%;HT诱导NB4细胞凋亡,引起PARP蛋白裂解,并不下调Bcl-2,不影响Bax和Bak的表达,但显著下调McI.1蛋白水平;siRNA沉默Mcl-1的蛋白表达可以显著提高HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;HT诱导APL患者白血病样本细胞凋亡,并下调Mcl-1蛋白。结论:HT通过抑制细胞生长和诱导细胞凋亡杀伤NB4细胞,HT可能通过下调Mcl-1蛋白发挥诱导NB4细胞凋亡的抗白血病作用。 展开更多
关键词 三尖杉酯碱/理学 白血病 早幼粒细胞 急性/药物疗法 细胞凋亡/药物作用 NB4细胞 MCL-1
在线阅读 免费下载
人参皂苷Rg1经线粒体通路抗Aβ(25-35)致原代大鼠皮层神经元凋亡 被引量:9
14
作者 吴佳莹 沈圆圆 +5 位作者 朱闻杰 程梅园 王志强 刘琰 朱丹雁 楼宜嘉 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期393-401,共9页
目的:通过人参皂苷Rg1与原代培养大鼠皮层神经元预培养,评价抗β淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)所致神经元损伤,并探讨Rg1的神经保护作用及相关分子机制。方法:原代神经元培养7 d成熟后,分别以1、10、20μmol/L Rg1预处理24 h,加... 目的:通过人参皂苷Rg1与原代培养大鼠皮层神经元预培养,评价抗β淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)所致神经元损伤,并探讨Rg1的神经保护作用及相关分子机制。方法:原代神经元培养7 d成熟后,分别以1、10、20μmol/L Rg1预处理24 h,加入Aβ毒性片段Aβ25-3510μmol/L模拟阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)脑组织局部微环境。孵育72 h后,光镜观察细胞形态学改变,评价Rg1是否具有神经保护作用及相关量效关系。采用JC-1染色,考察神经元线粒体膜电位(ΔΨm)变化,并运用Western blot技术,检测凋亡相关蛋白的表达变化。结果:Aβ25-35作用72 h严重损伤原代皮层神经元,引起神经元碎裂和死亡。Rg1预处理能对抗Aβ25-35的细胞损伤作用,显著提高神经元存活率,并呈现剂量依赖性,其中Rg1(20μmol/L)活性最强。Aβ25-35处理24 h能降低神经元的线粒体ΔΨm,下调Bcl-2/Bax的比值,引起细胞色素c从线粒体释放入胞浆,活化caspase 3和caspase 9,从而引起神经元凋亡。而Rg1预培养能保护原代神经元,减轻或避免上述损伤作用,且其抗凋亡效应可被雌激素受体(ER)拮抗剂ICI182,780和糖皮质激素受体(GR)拮抗剂RU486部分拮抗。结论:Rg1在1μmol/L至20μmol/L浓度具有抗Aβ25-35损伤原代培养大鼠皮层神经元作用,该活性与抑制线粒体凋亡通路相关联。 展开更多
关键词 大脑皮质/病理学 神经元/药物作用 细胞凋亡/药物作用 人参皂苷/理学 人参皂苷RG1 原代皮层神经元 神经保护 β淀粉样肽 细胞凋亡 线粒体
在线阅读 免费下载
组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA联合伊马替尼对K562细胞的协同杀伤作用 被引量:1
15
作者 刘燕燕 尤良顺 +1 位作者 钱文斌 童茵 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期473-478,共6页
目的:观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂SAHA联合伊马替尼(imatinib,IM)对人慢性髓系白血病(CML)细胞株的协同杀伤作用,并探讨其分子学机制。方法:将不同浓度的SAHA和IM分别或联合作用于对数生长期的K562细胞,MTT比色法检测药... 目的:观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂SAHA联合伊马替尼(imatinib,IM)对人慢性髓系白血病(CML)细胞株的协同杀伤作用,并探讨其分子学机制。方法:将不同浓度的SAHA和IM分别或联合作用于对数生长期的K562细胞,MTT比色法检测药物对细胞的生长抑制作用;应用Hoechst荧光染色法和流式细胞仪(FACS)检测细胞凋亡,Western blot法检测药物处理后Bcr-Abl及其下游信号途径蛋白的表达、Caspase途径活化和凋亡相关蛋白表达的改变。结果:SAHA和IM单独作用K562细胞呈剂量依赖性抑制细胞生长(SAHA:F=433.8,P〈0.001;IM:F=54.14,P〈0.001);两药联合对细胞的生长有协同杀伤作用,联合指数CI〈1。FACS分析和Hoechst荧光染色证实,SAHA和IM两药联合能加速K562细胞的凋亡,激活Caspase-3、Caspase-8和PARP,下调抗凋亡蛋白Mcl-1表达。此外,SAHA和IM联用能抑制Bcr-Abl及其磷酸化水平,下调JAK2和磷酸化STAT5表达。结论:HDAC抑制剂SAHA联合IM能协同杀伤CML细胞、加速细胞凋亡。其作用机制可能是两药联用协同抑制了Bcr-Abl及其磷酸化水平,抑制JAK2/STAT5信号途径和下调下游靶基因Mcl-1。 展开更多
关键词 K562细胞/药物作用 白血病 髓系 慢性 Bcr-Abl阳性/药物疗法 组蛋白脱乙酰基酶类/分析 伊马替尼/治疗应用 融合蛋白质类 Bcr-Abl/分析 细胞凋亡/药物作用 肿瘤细胞 培养的
在线阅读 免费下载
高三尖杉酯碱对人急性髓系白血病干细胞的杀伤作用 被引量:7
16
作者 沈建平 杨宏 +1 位作者 倪万茂 钱文斌 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期485-490,共6页
目的:观察高三尖杉酯碱(HHT)对人急性髓系白血病(AML)干细胞的杀伤作用,探讨其分子学机制。方法:用流式细胞仪(FACS)分析AML细胞株白细胞干细胞(LSC)的表型特征,用MTT法检测HHT对具有LSC特征的KG-1细胞的生长抑制作用,用FACS... 目的:观察高三尖杉酯碱(HHT)对人急性髓系白血病(AML)干细胞的杀伤作用,探讨其分子学机制。方法:用流式细胞仪(FACS)分析AML细胞株白细胞干细胞(LSC)的表型特征,用MTT法检测HHT对具有LSC特征的KG-1细胞的生长抑制作用,用FACS观察HHT对CD34+CD38-CD96+的KG-1细胞数量的影响,Western blot法检测药物处理后Caspase途径和凋亡相关蛋白的改变。结果:KG-1和Kasumi-1细胞CD34+CD38-CD96+分别为69%和26.7%,U937细胞不表达CD96。HHT能显著抑制KG-1细胞的生长,并呈剂量依赖性(r2=0.9971,P〈0.05)。48 h的半数抑制浓度为16.9 ng/ml。HHT作用KG-1细胞后,CD34+CD38-CD96+细胞的比例从63.6%下降到17.1%。HHT能显著激活Caspase-3、Caspase-9和PARP,抑制磷酸化Akt和Bcl-2的表达。结论:HHT能显著抑制人AML细胞KG-1的增殖,减少CD34+CD38-CD96+白血病干细胞数量;对Akt活性和Bcl-2的调控可能是其重要的作用机制。 展开更多
关键词 白血病 髓样 急性/药物疗法 白血病 髓样 急性/病理学 三尖杉酯碱类/治疗应用 肿瘤干细胞/药物作用 细胞凋亡/药物作用 肿瘤细胞 培养的
在线阅读 免费下载
Evn-50对人乳腺癌MCF-7耐三苯氧胺细胞株生长和凋亡的影响 被引量:3
17
作者 胡会永 周俊 +5 位作者 万芳 董力枫 张峰 王一刻 陈芳芳 陈益定 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期498-505,共8页
目的:通过研究黄荆子的乙酸乙酯提取物Evn-50在体外对人乳腺癌MCF-7和耐三苯氧胺细胞株(MCF-7/TAM-R)的生长和凋亡的影响,探索Evn-50在逆转乳腺癌耐药中的作用及其可能机制。方法:构建MCF-7/TAM-R细胞系,分别用DMSO、5μmol/L TAM、... 目的:通过研究黄荆子的乙酸乙酯提取物Evn-50在体外对人乳腺癌MCF-7和耐三苯氧胺细胞株(MCF-7/TAM-R)的生长和凋亡的影响,探索Evn-50在逆转乳腺癌耐药中的作用及其可能机制。方法:构建MCF-7/TAM-R细胞系,分别用DMSO、5μmol/L TAM、5μmol/L TAM+50μg/ml Evn-50和50μg/ml Evn-50处理细胞。然后,采用MTT法测定细胞存活率,PI单染流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布情况,免疫蛋白印记法观察Evn-50和TAM单独或联合作用时的机制。结果:Evn-50单药或与TAM联合均可以降低人乳腺癌MCF-7和三苯氧胺耐药细胞株MCF-7/TAM-R的存活率,两药联合作用更为明显,同单用TAM组相比差异有统计学意义(P〈0.01)。Evn-50单药或与TAM联合应用对两株细胞的凋亡均有明显影响,且随着作用时间的延长细胞凋亡逐渐增多,其中以72 h时细胞凋亡率和G2期细胞比例最为明显(P〈0.01)。TAM和Evn-50联合处理无论是对MCF-7细胞还是对三苯氧胺耐药细胞MCF-7/TAM-R,均能明显下调p-AKT(Ser473)和p-MAPK44/42(Thr202/Tyr204)蛋白水平。结论:Evn-50能够抑制MCF-7和MCF-7/TAM-R细胞株的生长并诱导细胞凋亡,尤其在Evn-50与TAM联合处理时更为明显。其作用机制可能与AKT和MAPK信号通路的下调相关,但需要进一步研究证实。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/病理学 乳腺肿瘤/中疗法 Evn-50/理学 牡荆属 植物提取物/理学 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用 肿瘤细胞 培养的
在线阅读 免费下载
神经生长因子诱导肝星状细胞凋亡及其相关机制的研究 被引量:2
18
作者 舒建昌 邓延梅 +4 位作者 朱海燕 吕霞 何雅军 陈莲香 叶国荣 《中国医师杂志》 CAS 2012年第2期 151-154,158,共5页
目的观察神经生长因子(nerve growthfactor,NGF)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellatecell,HSC)凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC—T6,将HSC—T6与100ng/mlNGF孵育24h后,流式细胞术检测细... 目的观察神经生长因子(nerve growthfactor,NGF)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellatecell,HSC)凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC—T6,将HSC—T6与100ng/mlNGF孵育24h后,流式细胞术检测细胞凋亡;细胞免疫化学法检测HSC中凋亡相关基因P^53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的情况;免疫荧光法检测NGF、神经生长因子低亲和力受体p75NTR表达的情况。结果NGF作用HSC后凋亡率较对照组明显增高[(22.364±9.51)%VS(5.88±1.36)%,P〈0.05]。凋亡相关蛋白P^53、Caspase-3的阳性细胞百分率与对照组比较明显增高[(78.41±4.00)%、(39.26±1.57)%VS(34.96±3.84)%、(9.27±1.01)%,P〈0.05],而Bcl-2表达实验组阳性细胞百分率较对照组降低[(18.12±1.38)%vs(91.53±2.98)%,P〈0.05]。NGF作用HSC后NGF表达增多(6.53±1.40vs1.77±0.17,P〈0.05),而p75NTR表达无明显变化(3.52±0.36VS4.24±0.38,P〉0.05)。结论NGF可能通过使凋亡相关基因p、Caspase-3表达上调、Bcl-2表达下调,而诱导HSC凋亡。NGF作用HSC后可作为始动因子和效应因子增加NGF的表达,而对p75NTR表达无影响。 展开更多
关键词 神经生长因子/理学 细胞/药物作用/病理学 细胞凋亡/药物作用
Aurora激酶抑制剂ENMD-2076对人急性髓系白血病细胞的杀伤作用
19
作者 曹慧 李敏 钱文斌 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期479-484,共6页
目的:观察Aurora激酶抑制剂ENMD-2076对人急性髓系白血病(AML)细胞株的杀伤作用。方法:将不同浓度的ENMD-2076分别作用于对数生长期的AML细胞24 h、48 h,采用MTT比色法检测药物对细胞的生长抑制作用;应用Hoechst荧光染色法检测细胞... 目的:观察Aurora激酶抑制剂ENMD-2076对人急性髓系白血病(AML)细胞株的杀伤作用。方法:将不同浓度的ENMD-2076分别作用于对数生长期的AML细胞24 h、48 h,采用MTT比色法检测药物对细胞的生长抑制作用;应用Hoechst荧光染色法检测细胞凋亡率,Western blot法检测药物处理后Caspase途径和凋亡相关蛋白的改变。结果:ENMD-2076能显著抑制AML细胞株THP-1和Kasumi-1的生长(P〈0.001),24 h时对THP-1和Kasumi-1的半数抑制浓度分别是9.32μmol/L和7.23μmol/L。Hoechst荧光染色证实ENMD-2076能使THP-1细胞发生染色质浓缩等凋亡改变。Western blot检测证实,ENMD-2076能激活Caspase-3、Caspase-9、Caspase-8和PARP,上调促凋亡蛋白Bak、Bax、Bad和Bim,下调抗凋亡蛋白Mcl-1的表达。结论:Aurora激酶抑制剂ENMD-2076能显著抑制人AML细胞株THP-1和Kasumi-1的增殖并促进其凋亡,对凋亡相关蛋白的调控是其作用机制之一。 展开更多
关键词 白血病 髓样 急性/药物疗法 白血病 髓样 急性/病理学 蛋白激酶抑制剂/化学 细胞凋亡/药物作用 肿瘤细胞 培养的
在线阅读 免费下载
组蛋白去乙酰化抑制剂SBHA对急性髓细胞白血病细胞的杀伤作用 被引量:3
20
作者 徐燕华 杨春梅 钱文斌 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期491-497,共7页
目的:观察组蛋白去乙酰化抑制剂suberic bishydroxamate(SBHA)对人急性髓系白血病(AML)细胞株的杀伤作用。方法:将不同浓度的SBHA分别作用于对数生长期的AML细胞24 h,MTT比色法检测药物对细胞的生长抑制作用;应用流式细胞术(FAC... 目的:观察组蛋白去乙酰化抑制剂suberic bishydroxamate(SBHA)对人急性髓系白血病(AML)细胞株的杀伤作用。方法:将不同浓度的SBHA分别作用于对数生长期的AML细胞24 h,MTT比色法检测药物对细胞的生长抑制作用;应用流式细胞术(FACS)检测细胞凋亡率,Western blot法检测药物处理后Caspase途径和凋亡相关蛋白的改变。结果:SBHA能显著抑制AML细胞株U937、KG-1及Kasumi-1细胞的生长。AnnexinV-PI双标记法及FACS分析结果证实,SBHA能显著诱导白血病细胞的凋亡,激活Caspase-3、Caspase-9、Caspase-8,下调抗凋亡蛋白Bcl-2及Bcl-xl的表达,下调Survivin、XIAP及cIAP的表达。结论:组蛋白去乙酰化抑制剂SBHA能显著抑制人AML细胞株的增殖、促进其凋亡,对凋亡相关蛋白的调控是其作用机制之一。 展开更多
关键词 白血病 髓样 急性/药物疗法 白血病 髓样 急性/病理学 蛋白激酶抑制剂/化学 细胞凋亡/药物作用 肿瘤细胞 培养的
在线阅读 免费下载
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈