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长链非编码RNA FLJ37505对膀胱癌细胞增殖和迁移影响的作用机制 认领
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作者 向涵 刘铮 +3 位作者 周毅彬 姚裘 金露 薛波新 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期1249-1254,共6页
目的检测膀胱癌组织及细胞株中长链非编码RNA(lncRNA)FLJ37505的表达,分析FLJ37505对膀胱癌细胞增殖和迁移影响的作用机制。方法实时荧光定量PCR(qPCR)分析63例膀胱癌和癌旁组织(来自2018年1月至2019年3月苏州大学附属第二医院泌尿外科... 目的检测膀胱癌组织及细胞株中长链非编码RNA(lncRNA)FLJ37505的表达,分析FLJ37505对膀胱癌细胞增殖和迁移影响的作用机制。方法实时荧光定量PCR(qPCR)分析63例膀胱癌和癌旁组织(来自2018年1月至2019年3月苏州大学附属第二医院泌尿外科膀胱癌手术切除的标本)和膀胱癌细胞株(T24、J82、5637、BIU-87和UM-UC-3,均购自上海生命科学院细胞所)中FLJ37505的相对表达。将FLJ37505相对表达最少的膀胱癌细胞株根据随机数字法分为对照组(转染空白质粒)和FLJ37505组(转染载有FLJ37505序列的质粒)。MTS法和划痕实验分别检测上调FLJ37505的表达对细胞增殖和迁移能力的影响。生物信息学预测FLJ37505的靶基因。双荧光素酶报告基因系统检测FLJ37505与靶基因的结合。qPCR和Western印迹分别检测上调FLJ37505对靶基因表达的影响。结果与癌旁组织相比,FLJ37505在膀胱癌组织表达较低[(4.90±0.79)比(0.89±0.28),P<0.05]。与人正常膀胱上皮细胞相比,FLJ37505在膀胱癌细胞株表达较低(P<0.05),其中FLJ37505在UM-UC-3细胞中的表达最低(P<0.01)。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞中FLJ37505表达较高[(0.79±0.04)比(9.92±1.17),P<0.01]。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞的增殖能力和迁移能力均被抑制(均P<0.01)。生物信息学显示,FLJ37505的靶基因是miR-203a-3p,miR-203a-3p的靶基因是二型磷脂酰肌醇4磷酸酶(INPP4B)。双荧光素酶报告基因系统显示FLJ37505可互补结合miR-203a-3p(P<0.01),miR-203a-3p可互补结合INPP4B mRNA(P<0.01)。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞中miR-203a-3p的表达较低[(1.00±0.05)比(0.20±0.02),P<0.01],INPP4B在mRNA和蛋白水平的表达均明显增加(均P<0.01)。结论膀胱癌组织和膀胱癌细胞中FLJ37505的表达较低,上调FLJ37505可显著抑制膀胱癌UM-UC-3细胞的增殖能力和迁移能力,其作用机制可能是通过吸附miR-203a-3p进而上调INPP4B基因的表达。 展开更多
关键词 膀胱癌 长链非编码RNA 细胞增殖 细胞迁移
LncRNA HNF1A-AS1在胶质瘤中的表达及功能研究 认领
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作者 邱云 郭中叶 +6 位作者 吴学潮 侯鹏 王清 陈牧 廖克曼 魏云玉 鲁晓杰 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 2020年第3期126-131,共6页
目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)HNF1A-AS1在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法运用实时定量PCR技术检测HNF1A-AS1在胶质瘤组织与正常脑组织以及胶质瘤细胞与正常胶质细胞之间的表... 目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)HNF1A-AS1在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法运用实时定量PCR技术检测HNF1A-AS1在胶质瘤组织与正常脑组织以及胶质瘤细胞与正常胶质细胞之间的表达差异。利用特异小干扰RNA(siRNA)构建低表达的胶质瘤细胞系A172和U251。通过CCK-8实验、EDU实验、Transwell、流式实验研究胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭、细胞凋亡情况,Western blot研究与细胞迁移、侵袭及凋亡相关蛋白的表达变化。结果LncRNA HNF1A-AS1在胶质瘤组织和胶质瘤细胞系中高表达。抑制HNF1A-AS1表达后,胶质瘤细胞增殖、侵袭、迁移能力降低,细胞凋亡率增加。Western Blot结果显示:抑制HNF1A-AS1表达后,一些与细胞迁移、侵袭、凋亡相关蛋白的表达水平明显改变。结论LncRNA HNF1A-AS1在胶质瘤中高表达,抑制HNF1A-AS1表达能降低胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力,同时增加胶质瘤细胞的凋亡比率。因此,HNF1A-AS1可以作为脑胶质瘤的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 HNF1A-AS1 细胞迁移 细胞侵袭 细胞增殖 细胞凋亡
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miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移 认领
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作者 林志金 张长青 +3 位作者 陈新琦 许伯明 李颖怡 陈雅妮 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1212-1216,共5页
目的:探究miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移的机制。方法:体外培养人胃癌细胞SGC-7901,并分为:Ctrl组、miR-NC组、miR-149-3p mimic组、pLV-FOXM1组和pLV-FOXM1+miR-149-3p mimic组;使用RT-PCR分别检测正常组织、... 目的:探究miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移的机制。方法:体外培养人胃癌细胞SGC-7901,并分为:Ctrl组、miR-NC组、miR-149-3p mimic组、pLV-FOXM1组和pLV-FOXM1+miR-149-3p mimic组;使用RT-PCR分别检测正常组织、原位肿瘤组织和转移后肿瘤组织中miR-149-3p和FOXM1 mRNA的表达水平并分析miR-149-3p与FOXM1的线性关系;使用miR-NC、miR-149-3p mimic转染细胞后检测miR-149-3p和FOXM1 mRNA表达水平;双荧光素酶检测miR-149-3p与FOXM1的靶向关系;CCK-8检测细胞增殖情况,体外侵袭实验检测细胞侵袭情况,划痕实验检测细胞迁移情况;蛋白质印迹检测N-cadherin、E-cadherin、MMP-2、MMP-9、FOXM1、PCNA、p21的表达水平。结果:相比原位肿瘤组织和转移后肿瘤组织,正常组织中FOXM1 mRNA表达较低、miR-149-3p表达较高。荧光素酶报告实验表明miR-149-3p序列上有FOXM1的结合位点。相比空白对照组(Ctrl),miR-149-3p mimic组细胞增长受到显著抑制,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。相比Ctrl组,pLV-FOXM1组细胞生长受到促进,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。相比pLV-FOXM1组,miR-149-3p+pLV-FOXM1组细胞增长受到显著抑制,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:miR-149-3p可以靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长侵袭和迁移,其机制与调控细胞生长侵袭和迁移的蛋白有关。 展开更多
关键词 胃癌 miR-149-3p 细胞迁移 细胞生长
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CDCP1基因重组慢病毒表达载体的构建及其对宫颈癌细胞增殖与迁移的影响 认领
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作者 戚晓瑜 王青霞 +1 位作者 李婉 卢春 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2020年第2期144-148,153共6页
目的:构建含CUB结构域包含蛋白1(CUB domain containing protein 1,CDCP1)基因的重组慢病毒表达载体,研究CDCP1蛋白对宫颈癌细胞增殖与迁移的影响。方法:以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)cDNA为模板... 目的:构建含CUB结构域包含蛋白1(CUB domain containing protein 1,CDCP1)基因的重组慢病毒表达载体,研究CDCP1蛋白对宫颈癌细胞增殖与迁移的影响。方法:以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)cDNA为模板,采用PCR法扩增出CDCP1基因,将其克隆至pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen载体中,构建重组慢病毒表达载体pHAGE-CDCP1。将重组质粒pHAGE-CDCP1以及对照质粒pHAGE分别与包装质粒psPAX2以及包膜质粒pMD2.G共转染入人胚肾上皮细胞(293 T细胞),48 h后收集病毒悬液,并采用梯度稀释法测定病毒滴度。将重组慢病毒CDCP1感染人宫颈癌HeLa细胞,通过免疫印迹法检测CDCP1蛋白的表达,采用CCK-8实验检测过表达CDCP1对HeLa细胞增殖的影响;采用划痕实验和Transwell细胞迁移实验观察过表达CDCP1对HeLa细胞迁移能力的影响。结果:质粒双酶切鉴定以及核酸测序比对结果证实重组质粒pHAGE-CDCP1构建成功。重组pHAGE-CDCP1慢病毒感染宫颈癌HeLa细胞后细胞状态良好,CDCP1蛋白表达水平明显增加。高表达CDCP1可以显著提高HeLa细胞的增殖和迁移能力。结论:过表达CDCP1能够促进宫颈癌HeLa细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 CUB结构域包含蛋白1 宫颈癌细胞 慢病毒 细胞增殖 细胞迁移
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siRNA沉默FOXF2基因对宫颈癌Hela细胞迁移与增殖的影响研究 认领
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作者 唐兆前 蒋胜 《中国妇幼保健》 CAS 2020年第4期741-743,共3页
目的 探究siRNA沉默FOXF2基因对宫颈癌Hela细胞迁移与增殖的影响研究。方法 在该院于2018年1月-2018年12月检测siRNA沉默FOXF2,选择Western Blot、Real Time-PCR法,之后Hela细胞中蛋白表达、FOXF2基因mRNA的变化。siRNA沉默FOXF2后细胞... 目的 探究siRNA沉默FOXF2基因对宫颈癌Hela细胞迁移与增殖的影响研究。方法 在该院于2018年1月-2018年12月检测siRNA沉默FOXF2,选择Western Blot、Real Time-PCR法,之后Hela细胞中蛋白表达、FOXF2基因mRNA的变化。siRNA沉默FOXF2后细胞增殖,选择CCK8检测;siRNA沉默FOXF2后细胞迁移选择划痕试验检测。结果 多重对比各组,选择Dunnett T3,结果显示:3条siRNA链沉默FOXF2后,相较于Hela细胞SNC组合Hela细胞,siRNA-FOXF2 mRNA显著降低(65%~85%),对比差异有统计学意义(P<0.05);相较于Hela细胞SNC组及Hela细胞组,Hela细胞FOXF2蛋白表达水平出现显著降低;在siRNA沉默FOXF2基因后,经细胞划痕试验显示,相较于Hela细胞SNC组及Hela细胞组,Hela细胞的迁移能力显著较高;较Hela细胞SNC组及Hela细胞组,siRNA-FOXF21415组增殖率显著较高,对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宫颈癌患者针对其Hela细胞的迁移与增殖能力,选择SiRNA沉默FOXF2基因有极大的促进作用,具有临床应用价值。 展开更多
关键词 细胞迁移 细胞增殖 宫颈癌 FOXF2
抑制lncRNA LINC01503通过靶向调控miR-335-5p对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其机制研究 认领
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作者 杨栋勇 徐源 +2 位作者 樊冀闽 朱志兴 张华平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期619-627,共9页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01503对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:将人肺癌H1299细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01503组(转染si-LINC01503)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01503组(转染pcDNA-LINC... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01503对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:将人肺癌H1299细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01503组(转染si-LINC01503)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01503组(转染pcDNA-LINC01503)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-335-5p组(转染miR-335-5p mimics)、si-LINC01503+anti-miR-NC组(共转染si-LINC01503和anti-miR-NC)、si-LINC01503+anti-miR-335-5p组(共转染si-LINC01503和anti-miR-335-5p)、miR-NC+WT-LINC01503组(共转染miR-NC和WT-LINC01503)、miR-NC+MUT-LINC01503组(共转染miR-NC和MUT-LINC01503)、miR-335-5p+WT-LINC01503组(共转染miR-335-5p和WT-LINC01503)和miR-335-5p+MUT-LINC01503组(共转染miR-335-5p和MUT-LINC01503)。采用RT-qPCR检测miR-335-5p和LINC01503的表达水平;Western blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞活力;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化;双萤光素酶报告基因实验验证LINC01503与miR-335-5p的靶向关系。结果:与正常肺组织相比,肺癌组织中LINC01503表达水平显著升高,miR-335-5p表达水平显著降低(P<0.05);与Ⅰ/Ⅱ期阶段相比,Ⅲ/Ⅳ期肺癌组织中LINC01503表达水平显著升高,miR-335-5p表达水平显著降低(P<0.05);LINC01503高表达的患者短期生存率显著低于LINC01503低表达的患者(P<0.05)。与正常支气管上皮细胞系BEAS-2B相比,肺癌细胞系H1299、A549和SPC-A-1中miR-335-5p的表达水平显著降低,LINC01503的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-335-5p、抑制LINC01503表达均可抑制H1299细胞的活力、迁移和侵袭,抑制细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。LINC01503靶向调控miR-335-5p的表达,干扰miR-335-5p表达能逆转抑制LINC01503表达对H1299细胞活力、迁移和侵袭的抑制作用。结论:抑制lncRNA LINC01503表达可抑制肺癌细胞的活力、迁移和侵袭,其机制可能与靶向调控miR-335-5p有关。 展开更多
关键词 LINC01503 微小RNA-335-5p 肺癌 细胞活力 细胞迁移 细胞侵袭
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姜黄素协同顺铂对T24膀胱癌细胞增殖和迁移的影响 认领
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作者 陈欢 朱佳斌 +2 位作者 赵晓瑾 董传江 董自强 《临床和实验医学杂志》 2020年第11期1145-1149,共5页
目的观察姜黄素(Curc)与顺铂(CDDP)协同对T24膀胱癌细胞增殖、迁移抑制作用,并探讨其作用机制。方法姜黄素(Curc,15μM)和化疗药物顺铂(CDDP,0.4μM)单独使用或者联合使用处理T24膀胱癌细胞。对照组中加入不含任何干预剂的培养液。用细... 目的观察姜黄素(Curc)与顺铂(CDDP)协同对T24膀胱癌细胞增殖、迁移抑制作用,并探讨其作用机制。方法姜黄素(Curc,15μM)和化疗药物顺铂(CDDP,0.4μM)单独使用或者联合使用处理T24膀胱癌细胞。对照组中加入不含任何干预剂的培养液。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法和平板克隆形成实验检测Curc和CDDP对T24细胞增殖抑制作用及半数抑制浓度(IC 50);采用细胞划痕和穿透小室(transwell)侵袭实验检测姜黄素联合顺铂对T24细胞迁移的影响;采用免疫印迹试验(Western blotting)检测T24细胞中金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、神经钙粘蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达。结果与对照组相比,姜黄素组和顺铂组均能够明显降低T24细胞的增殖和迁移能力,并可降低MMP-2、N-Cadherin、Vimentin蛋白的表达以及提高TIMP-2蛋白的表达。姜黄素和顺铂联合组可协同减弱T24细胞的增殖和迁移能力,使得IC 50提高3.4倍(P<0.05),以及协同降低MMP-2、N-Cadherin、Vimentin蛋白的表达以及提高TIMP-2蛋白的表达。结论姜黄素联合顺铂可协同降低T24膀胱癌细胞的增殖迁移侵袭能力。 展开更多
关键词 T24膀胱癌细胞 姜黄素 顺铂 细胞增殖 细胞迁移
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p62基因敲除后食管鳞状细胞癌EC109细胞生物学行为变化 认领
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作者 陈秀英 于莉 +2 位作者 周君阳 丁妍 谭玉洁 《山东医药》 CAS 2020年第2期10-13,21共5页
目的观察p62基因敲除后对食管鳞状细胞癌EC109细胞生物学行为的影响。方法使用CRISPR/Cas9技术构建p62敲除的EC109细胞株作为敲除组,选择野生型EC109细胞作为对照组。采用T7E1核酸内切酶检测打靶效果,Western blotting法检测细胞p62蛋白... 目的观察p62基因敲除后对食管鳞状细胞癌EC109细胞生物学行为的影响。方法使用CRISPR/Cas9技术构建p62敲除的EC109细胞株作为敲除组,选择野生型EC109细胞作为对照组。采用T7E1核酸内切酶检测打靶效果,Western blotting法检测细胞p62蛋白,倒置显微镜下观察细胞形态变化,实时无标记动态细胞分析技术观察细胞增殖能力,细胞划痕实验观察细胞的迁移能力,流式细胞仪检测细胞周期。结果T7E1酶切后,敲除组在800 bp左右有敲除后的特异性条带,对照组只在870 bp左右有一条带。敲除组p62蛋白相对表达量低于对照组,细胞合胞体数量多于对照组(P均<0.01);敲除组细胞形态与对照组相比,细胞较圆且边界不清。敲除组10~80 h细胞增殖的CI值均低于同时点的对照组,细胞克隆数量少于对照组(P均<0.05);敲除组96 h划痕愈合率低于对照组,细胞周期中阻滞于G 0/G 1期的细胞比例高于对照组(P均<0.05)。结论p62基因敲除后食管鳞状细胞癌EC109细胞形成较多合胞体,且细胞的恶性行为受到抑制;p62有望成为治疗食管癌的有效基因靶点。 展开更多
关键词 食管癌 p62基因 基因敲除 细胞形态 细胞增殖 细胞迁移 细胞周期
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干扰TBL1XR1表达对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响及其机制 认领
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作者 王小芳 贾培增 《山东医药》 CAS 2020年第7期49-52,共4页
目的探讨干扰转导素β1X连锁受体蛋白1(TBL1XR1)表达对口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法取OSCC细胞Cal-27,常规培养、传代。取传2代、对数生长期、生长状态良好的Cal-27细胞,随机分为无关序列组、TBL1XR1干扰组,分别转... 目的探讨干扰转导素β1X连锁受体蛋白1(TBL1XR1)表达对口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法取OSCC细胞Cal-27,常规培养、传代。取传2代、对数生长期、生长状态良好的Cal-27细胞,随机分为无关序列组、TBL1XR1干扰组,分别转染TBL1XR1 shRNA、scramble shRNA,采用RT-qPCR法鉴定转染效率。收集两组转染72 h细胞,采用MTS法检测细胞增殖活性,采用平板克隆实验检测细胞增殖能力,采用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力,采用Western blotting法检测JAK2/STAT3信号通路关键蛋白表达。结果TBL1XR1干扰组TBL1XR1 mRNA相对表达量低于无关序列组(t=30.53,P<0.05)。转染72 h细胞后,TBL1XR1干扰组再培养48、72、96 h时细胞增殖活性均低于无关序列组(P均<0.05),但再培养24 h时细胞增殖活性与无关序列组比较P>0.05。TBL1XR1干扰组细胞增殖和迁移能力均低于无关序列组(t分别为18.74、20.57,P均<0.05)。TBL1XR1干扰组JAK2/STAT3信号通路关键蛋白p-JAK2、p-STAT3相对表达量均低于无关序列组(P均<0.05),而JAK2、STAT3相对表达量比较P均>0.05。结论干扰TBL1XR1表达可能通过调控JAK2/STAT3信号通路关键蛋白表达,抑制OSCC细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞 转导素β1X连锁受体蛋白1 细胞增殖 细胞迁移
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长链非编码RNA HOTTIP对肺腺癌A549细胞侵袭转移能力及上皮间质转化的影响 认领
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作者 金文静 杨华 +2 位作者 王林宣 李珊珊 顾文超 《山东医药》 CAS 2020年第2期18-21,共4页
目的观察长链非编码RNA HOTTIP对肺腺癌A549细胞侵袭转移能力的影响,通过上皮间充质转化(EMT)相关蛋白变化探讨其机制。方法将A549细胞分为HOTTIP-shRNA组、HOTTIP组和空载对照组,分别感染携带HOTTIP-shRNA的慢病毒、HOTTIP全长序列的... 目的观察长链非编码RNA HOTTIP对肺腺癌A549细胞侵袭转移能力的影响,通过上皮间充质转化(EMT)相关蛋白变化探讨其机制。方法将A549细胞分为HOTTIP-shRNA组、HOTTIP组和空载对照组,分别感染携带HOTTIP-shRNA的慢病毒、HOTTIP全长序列的慢病毒和空白慢病毒;采用Transwell实验观察细胞侵袭能力,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞间质标志蛋白Vimentin、上皮标志蛋白E-cadherin。结果HOTTIP-shRNA组、HOTTIP组、空载对照组穿膜细胞的数量分别为(12.85±3.25)、(305.65±53.45)、(45.25±10.75)个,细胞迁移率为35.62%±10.45%、13.84%±4.12%、64.52%±14.24%,HOTTIP-shRNA组穿膜细胞数量、细胞迁移率低于空载对照组,而HOTTIP组穿膜细胞数量、细胞迁移率均高于HOTTIP-shRNA组和空载对照组(P均<0.05)。与空载对照组比较,HOTTIP-shRNA组细胞Vimentin表达减少、E-cadherin表达增加(P均<0.05);与HOTTIP-shRNA组和空载对照组比较,HOTTIP组细胞Vimentin表达增加、E-cadherin表达减少(P均<0.05)。结论HOTTIP可增强肺腺癌A549细胞侵袭转移能力,与其调控E-cadherin、Vimentin蛋白表达促进EMT形成有关。 展开更多
关键词 肺癌 长链非编码RNA HOTTIP 上皮间充质转化 细胞侵袭 细胞迁移 E-CADHERIN蛋白 Vimentin蛋白
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miR-181a-5p调控IGF2BP2表达对胎盘滋养层细胞浸润、迁移能力的影响及机制 认领
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作者 万淑梅 彭萍 高妍 《山东医药》 CAS 2020年第2期22-26,共5页
目的分析microRNA-181a-5p(miR-181a-5p)靶向调控胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白(IGF2BP2)的关系,以及对胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo浸润、迁移能力的影响和机制。方法采用Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验,预测并验证miR... 目的分析microRNA-181a-5p(miR-181a-5p)靶向调控胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白(IGF2BP2)的关系,以及对胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo浸润、迁移能力的影响和机制。方法采用Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验,预测并验证miR-181a-5p对IGF2BP2基因的靶向调控作用。收集子痫前期(PE)和正常妊娠妇女胎盘组织各30例,以qRT-PCR法检测miR-181a-5p和IGF2BP2 mRNA,并分析二者表达的关系。将HTR-8/SVneo细胞分为NC组、miR-181a-5p过表达组和miR-181a-5p+IGF2BP2过表达组,用Lip2000分别转染无关序列、miR-181a-5p mimic、miR-181a-5p mimic+IGF2BP2过表达质粒12 h;qRT-PCR法检测细胞中的IGF2BP2 mRNA,Boyden实验观察细胞浸润能力,Transwell实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中的Wnt1和β-catenin蛋白。结果Targetscan7.1预测软件显示,miR-181a-5p与IGF2BP2 mRNA的3′UTR之间具有潜在的碱基互补结合位点;双荧光素酶报道基因试验显示,miR-181a-5p能降低野生型IGF2BP2 mRNA 3′UTR荧光素酶报告基因活性(P<0.05)。与正常妊娠妇女胎盘组织比较,PE胎盘组织中miR-181a-5p表达下降、IGF2BP2表达增加(P均<0.05),且两者表达呈负相关(r=-0.601,P<0.05)。与NC组比较,miR-181a-5p过表达组和miR-181a-5p+IGF2BP2过表达组细胞浸润和迁移的穿膜细胞数减少,细胞中IGF2BP2 mRNA、Wnt1和β-catenin蛋白表达减少(P均<0.05);与miR-181a-5p过表达组比较,miR-181a-5p+IGF2BP2过表达组细胞浸润和迁移的穿膜细胞数增多,细胞中IGF2BP2 mRNA、Wnt1和β-catenin蛋白表达增加(P均<0.05)。结论miR-181a-5p的靶基因为IGF2BP2,对其有负向调控作用;miR-181a-5p靶向调控IGF2BP2表达可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路降低胎盘滋养层细胞浸润和迁移能力。 展开更多
关键词 子痫前期 胎盘滋养层细胞 微小RNA-181a-5p 胰岛素样生长因子 细胞浸润 细胞迁移
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ELA经PI3K/AKT和MARK通路促进MSCs增殖和迁移 认领
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作者 杨欢 符佳颖 +5 位作者 陈旭翔 许岱诗 刘欣 周长青 吴海东 王彤 《岭南急诊医学杂志》 2020年第1期30-33,42共5页
目的:观察ELABELA(ELA)对骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和迁移能力的影响,并探讨可能调控机制。方法:将体外培养的MSCs分为Control组、ELA处理组(50 nM、500 nM、5μM、10μM)。MTS法检测细胞增殖,Transwell... 目的:观察ELABELA(ELA)对骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和迁移能力的影响,并探讨可能调控机制。方法:将体外培养的MSCs分为Control组、ELA处理组(50 nM、500 nM、5μM、10μM)。MTS法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移。Western Blot法检测Control组、5μM ELA、5μM ELA+LY294002(PI3K/AKT通路抑制剂)组、5μM ELA+U0126(MARK通路抑制剂)组中AKT、p?AKT、ERK1/2、p?ERK1/2、CyclinD1的表达情况。结果:与Control组相比,ELA处理组(50 nM、500 nM、5μM)MSCs的增殖及迁移能力显著增加(P<0.01),其中以5μM ELA处理MSCs增殖及迁移能力最佳;与Control组相比,5μM ELA组p?AKT/AKT、p?ERK/ERK、CyclinD1的蛋白水平显著增加(均为P<0.01),然而此效应可被LY294002及U0126阻断。结论:5μM ELA处理MSCs增值及迁移能力最佳,此效应可能与激活PI3K/AKT通路及MARK通路相关。 展开更多
关键词 ELABELA 骨髓间充质干细胞 细胞增殖 细胞迁移
过氧化物酶体增殖物激活受体α对人绒毛滋养层细胞功能的影响 认领
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作者 管纯一 马旭 夏红飞 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期213-221,共9页
人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo)是胎盘建立血液循环的重要组成部分,过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)是调节脂代谢的关键转录因子亚型,本研究旨在研究PPARα对人绒毛滋养层细胞功能的影响。将构建的PPARα表达载体和PPARα小干扰... 人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo)是胎盘建立血液循环的重要组成部分,过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)是调节脂代谢的关键转录因子亚型,本研究旨在研究PPARα对人绒毛滋养层细胞功能的影响。将构建的PPARα表达载体和PPARα小干扰RNA分别转染HTR8/SVneo细胞,检测细胞功能的变化。本实验采取EdU法和MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,transwell小室法检测细胞迁移和浸润能力。结果显示,PPARα过表达能抑制滋养层细胞增殖、迁移和浸润能力,促进细胞凋亡能力;敲低PPARα能促进细胞的增殖、迁移和浸润能力,抑制细胞凋亡能力。PPARα表达水平与其对细胞生长和迁移的影响负相关。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体Α 人绒毛滋养层细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移
S1pr1沉默对弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-LY1细胞增殖和迁移的影响 认领
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作者 周颖 罗婷 +1 位作者 袁韵 龚玉萍 《河北医药》 CAS 2020年第10期1519-1522,共4页
目的探讨S1pr1沉默对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)OCI-LY1细胞增殖和迁移的影响。方法收集确诊为DLBCL的患者和健康体检者各10例,测定外周血S1pr1 mRNA的含量,用S1pr1特异性siRNA和阴性对照(negative control,NC)转染到OCI-LY1细胞,用RT-PC... 目的探讨S1pr1沉默对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)OCI-LY1细胞增殖和迁移的影响。方法收集确诊为DLBCL的患者和健康体检者各10例,测定外周血S1pr1 mRNA的含量,用S1pr1特异性siRNA和阴性对照(negative control,NC)转染到OCI-LY1细胞,用RT-PCR和Western Blot法检测OCI-LY1细胞中S1pr1的表达,以鉴定S1pr1特异性siRNA沉默效果。检测OCI-LY1细胞增殖率和细胞迁移能力,同时检测STAT3和p-STAT3蛋白表达水平。结果DLBCL患者外周血单个核细胞中S1pr1 mRNA相对中位表达水平高于健康者(P<0.05);给予S1pr1特异性siRNA干预后,S1pr1沉默组OCI-LY1细胞中S1pr1 mRNA和蛋白表达较空白对照组和阴性对照组显著降低(P<0.05);S1pr1沉默组OCI-LY1细胞增殖率和迁移细胞数较空白对照组和阴性对照组显著降低(P<0.05);S1pr1沉默组OCI-LY1细胞STAT3和p-STAT3蛋白表达较空白对照组和阴性对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论S1pr1在DLBCL患者外周血中高表达,对S1pr1基因沉默后,OCI-LY1细胞增殖率和迁移细胞数显著降低,特异性抑制了STAT3的活性。 展开更多
关键词 S1pr1 弥漫大B细胞淋巴瘤 OCI-LY1细胞 细胞增殖 细胞迁移
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C-藻蓝蛋白对乳腺癌细胞的抗癌作用研究 认领
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作者 褚静 周小兰 +3 位作者 王立芹 曹国芬 李腾 张海苗 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期934-940,共7页
C-藻蓝蛋白具有抗癌、抗氧化、抗炎活性等多种功能,然而其对乳腺癌细胞的抗癌作用及机制尚不明确。本研究应用不同浓度(0~500μg/mL)的C-藻蓝蛋白处理人乳腺癌细胞系MDA-MB-468。研究显示,C-藻蓝蛋白以剂量依赖性方式抑制MDA-MB-468细... C-藻蓝蛋白具有抗癌、抗氧化、抗炎活性等多种功能,然而其对乳腺癌细胞的抗癌作用及机制尚不明确。本研究应用不同浓度(0~500μg/mL)的C-藻蓝蛋白处理人乳腺癌细胞系MDA-MB-468。研究显示,C-藻蓝蛋白以剂量依赖性方式抑制MDA-MB-468细胞的增殖并降低细胞的菌落形成能力。C-藻蓝蛋白通过上调了Fas和cleaved-caspase 3的表达并下调Bcl-2的表达来诱导细胞凋亡。C-藻蓝蛋白处理以剂量依赖性方式显著降低COX-2的表达并抑制细胞迁移能力。C-藻环蛋白以剂量依赖性方式促进p38 MAPK和JNK的磷酸化,p38 MAPK和JNK抑制剂处理可显著抑制C-藻红蛋白诱导的细胞死亡。本研究表明C-藻蓝蛋白能够抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞迁移能力。C-藻蓝蛋白的抗癌机制可能与激活p38 MAPK和JNK信号传导有关。 展开更多
关键词 C-藻蓝蛋白 乳腺癌 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移 MAPK
褪黑素通过激活典型Wnt/β-catenin信号通路促进许旺细胞迁移 认领
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作者 吕建伟 马剑雄 马信龙 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第31期5030-5037,共8页
背景:褪黑素主要是由松果体分泌的一种神经内分泌激素,能够促进许旺细胞增殖并促进周围神经损伤后再生。目的:探究褪黑素对许旺细胞迁移活性的影响及其相关分子机制。方法:体外培养大鼠许旺细胞RSC96细胞株并鉴定;CCK-8检测褪黑素对许... 背景:褪黑素主要是由松果体分泌的一种神经内分泌激素,能够促进许旺细胞增殖并促进周围神经损伤后再生。目的:探究褪黑素对许旺细胞迁移活性的影响及其相关分子机制。方法:体外培养大鼠许旺细胞RSC96细胞株并鉴定;CCK-8检测褪黑素对许旺细胞增殖活性的影响;采用Transwell细胞迁移小室,观察0,100 nmol/L,1μmol/L,10μmol/L褪黑素作用20 h对许旺细胞迁移活性的影响;采用qRT-PCR和Western-blot检测褪黑素受体1,2在许旺细胞上的表达情况;通过Transwell细胞迁移实验,观察褪黑素受体拮抗剂luzindole或典型Wnt/β-catenin信号通路抑制剂IWR-1对褪黑素促进许旺细胞迁移活性的影响。Western-blot检测褪黑素对许旺细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性的调控作用。结果与结论:①贴壁培养的RSC96细胞具有许旺细胞的典型形态,细胞呈纺锤状或三角形,细胞两极伸出细长的突起;许旺细胞标志物S-100免疫荧光染色阳性;②相较于空白对照组,1,10μmol/L褪黑素能够显著促进许旺细胞迁移,对其产生化学性吸引作用,其中1μmol/L褪黑素作用最显著;③许旺细胞主要表达褪黑素受体1;Transwell细胞迁移实验表明,和单纯褪黑素处理组比较,luzindole和褪黑素共同干预组迁移的细胞数无显著性改变,而IWR-1和褪黑素共同干预组许旺细胞迁移的细胞数显著低于单纯褪黑素处理组(P<0.05);④qRT-PCR和Western-blot结果表明,相较于空白对照组,褪黑素组许旺细胞中P-Lrp6,LEF-1和细胞核β-catenin蛋白表达水平显著上调(P<0.05);⑤单纯褪黑素组和IWR-1+褪黑素组许旺细胞中LEF-1和核β-catenin蛋白表达量均显著高于空白对照组和单纯IWR-1组(P<0.05),表明褪黑素在一定程度上拮抗IWR-1对Wnt/β-catenin信号通路活性的抑制作用;⑥上述数据证实,褪黑素能够通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进许旺细胞迁移。 展开更多
关键词 褪黑素 许旺细胞 因子 通路 细胞迁移 周围神经再生 蛋白 实验
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非肌细胞肌球蛋白ⅡA在肿瘤中的研究进展 认领
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作者 杨玉轩 王医术 +1 位作者 李法平 周洪澜 《中国实验诊断学》 2020年第1期175-178,共4页
肿瘤是世界范围内导致患者死亡的重要原因之一[1]。肿瘤转移作为恶性肿瘤主要生物学特征,涉及过程极其复杂,90%以上的恶性肿瘤患者死亡与肿瘤转移相关[2],肿瘤细胞的侵袭和转移是治愈肿瘤的重大难题。侵袭性细胞迁移主要由五个步骤完成... 肿瘤是世界范围内导致患者死亡的重要原因之一[1]。肿瘤转移作为恶性肿瘤主要生物学特征,涉及过程极其复杂,90%以上的恶性肿瘤患者死亡与肿瘤转移相关[2],肿瘤细胞的侵袭和转移是治愈肿瘤的重大难题。侵袭性细胞迁移主要由五个步骤完成:①细胞骨架产生极化,细胞前缘突起形成伪足。 展开更多
关键词 肿瘤转移 侵袭和转移 细胞迁移 细胞骨架 细胞 恶性肿瘤 肌球蛋白 侵袭性
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内毒素耐受对小鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1、MMP-7及细胞迁移能力的影响 认领
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作者 汪悦 顾建雨 +2 位作者 朱奕名 张尧尧 孙颖 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期21-25,55共6页
目的:观察牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的耐受对小鼠腹腔巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1和MMP-7的影响,以及耐受巨噬细胞对小鼠成纤维细胞L... 目的:观察牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的耐受对小鼠腹腔巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1和MMP-7的影响,以及耐受巨噬细胞对小鼠成纤维细胞L929迁移能力的影响。方法:采用1μg/mL P.gingivalis LPS重复刺激小鼠腹腔巨噬细胞,构建内毒素耐受模型,并以1μg/mL大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)LPS作为阳性对照。收集细胞条件培养液上清,采用ELISA技术检测MMP-1和MMP-7表达水平。观察耐受巨噬细胞条件培养液对L929细胞划痕创伤构建后细胞迁移能力的影响。结果:P. gingivalis LPS重复刺激后,巨噬细胞MMP-1分泌水平较单次刺激组降低(P <0.05),MMP-7分泌水平无明显变化(P> 0.05)。P. gingivalis LPS诱导的耐受巨噬细胞培养液上清刺激12、24 h后,L929细胞划痕修复面积大于单次刺激组培养液上清刺激后(P <0.05)。结论:P. gingivalis LPS诱导的耐受能抑制小鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1,促进L929细胞迁移。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 内毒素耐受 巨噬细胞 基质金属蛋白酶-1 基质金属蛋白酶-7 细胞迁移
脂多糖改变牙髓干细胞的生物学特性 认领
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作者 刘影 高杰 吴补领 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第13期2028-2033,共6页
背景:龋病发生时,包括细菌在内的各种刺激沿牙本质小管传导至牙髓,牙髓组织中的牙髓干细胞受到刺激后增殖迁移至受损的牙本质下方,形成修复性牙本质以补充和修复受损组织。在此过程中,脂多糖作为细菌的主要毒力因子,是否可以影响牙髓干... 背景:龋病发生时,包括细菌在内的各种刺激沿牙本质小管传导至牙髓,牙髓组织中的牙髓干细胞受到刺激后增殖迁移至受损的牙本质下方,形成修复性牙本质以补充和修复受损组织。在此过程中,脂多糖作为细菌的主要毒力因子,是否可以影响牙髓干细胞增殖、迁移及成牙本质向分化等生物学行为,还有待研究。目的:观察脂多糖对牙髓干细胞增殖能力、迁移能力和成牙本质向分化能力的影响。方法:组织块酶消化法培养牙髓干细胞,给予0,0.1,1,10 mg/L脂多糖刺激后,采用MTT法检测牙髓干细胞增殖情况,划痕实验和Transwell实验检测牙髓干细胞的迁移能力;给予1 mg/L脂多糖和矿化诱导液刺激21 d后,茜素红染色检测细胞矿化结节形成能力,RT-PCR检测成牙本质相关基因的表达。结果与结论:①0.1,1,10 mg/L脂多糖组的吸光度值在第1,3,5,7天4个时间点均低于0 mg/L脂多糖组(P<0.01),迁移能力均高于0 mg/L脂多糖组;②牙髓干细胞矿化诱导21 d后,1 mg/L脂多糖刺激组所形成的矿化结节数量和面积明显小于0 mg/L脂多糖组(P<0.01),成牙本质相关基因OCN、BSP、ALP表达量显著低于0 mg/L脂多糖组(P<0.01);③结果表明,脂多糖刺激牙髓干细胞后其增殖能力和成牙本质向分化能力降低,迁移能力明显增强。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 脂多糖 细胞增殖 细胞迁移 成牙本质向分化
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人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人滋养层细胞的作用 认领
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作者 张珦 李惠 +3 位作者 章宜芬 范竞 李长印 蔡金洋 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第7期1253-1258,共6页
目的:探讨人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞凋亡的影响。方法:通过CCK8细胞活力检测试剂盒测定白藜芦醇及其与人脐带间充质干细胞条件培养基共同处理人绒毛膜外滋养层细胞HTR8后对细胞增殖及活性的影响... 目的:探讨人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞凋亡的影响。方法:通过CCK8细胞活力检测试剂盒测定白藜芦醇及其与人脐带间充质干细胞条件培养基共同处理人绒毛膜外滋养层细胞HTR8后对细胞增殖及活性的影响;细胞迁移试验检测白藜芦醇和人脐带间充质干细胞条件培养基对细胞迁移能力的影响;显微镜观察细胞形态,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测白藜芦醇和人脐带间充质干细胞条件培养基对细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及迁移相关蛋白MMP-9表达的影响。结果:白藜芦醇能够抑制HTR8细胞增殖,抑制细胞迁移及MMP-9蛋白的表达,改变Bax和Bcl-2蛋白表达诱导细胞凋亡的作用。而人脐带间充质干细胞条件培养基能够逆转白藜芦醇对细胞的抑制作用。结论:人脐带间充质干细胞条件培养基能够通过调控Bax、Bcl-2、MMP-9的蛋白表达逆转白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞的抑制作用。人脐带间充质干细胞条件培养基可作为潜在的治疗人绒毛膜外滋养层细胞功能障碍的临床手段,孕妇需要小心使用白藜芦醇。 展开更多
关键词 白藜芦醇 人脐带间充质干细胞条件培养基 人绒毛膜外滋养层细胞 细胞迁移 细胞凋亡
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