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INSM1在胃肠胰神经内分泌肿瘤诊断中的价值 预览
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作者 王劲松 王彬 +3 位作者 苟思琪 杨路路 齐琼 黄文斌 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期407-411,共5页
目的探讨胰岛素瘤相关蛋白1(insulinoma-associated protein 1,INSM1)在胃肠胰神经内分泌肿瘤(gastroenteropancreatic neuroendocrine neoplasms,GEP-NEN)中的表达及其在诊断中的应用价值。方法应用免疫组化EnVision法检测48例GEP-NEN... 目的探讨胰岛素瘤相关蛋白1(insulinoma-associated protein 1,INSM1)在胃肠胰神经内分泌肿瘤(gastroenteropancreatic neuroendocrine neoplasms,GEP-NEN)中的表达及其在诊断中的应用价值。方法应用免疫组化EnVision法检测48例GEP-NEN和40例胃肠胰非神经内分泌肿瘤中INSM1、CgA、Syn和CD56的表达,并分析其与GEP-NEN临床病理特征的关系。结果 48例GEP-NEN中,INSM1的阳性率为81.3%,而CgA、Syn和CD56的阳性率分别为50%(24/48)、89.9%(43/48)和66.7%(32/48),INSM1、CgA、Syn和CD56在胃肠胰非神经内分泌瘤中的阳性率分别为0(0/40)、10.0%(4/40)、12.5%(5/40)和10%(4/40),INSM1、CgA、Syn和CD56在GEP-NEN中的表达均明显高于胃肠胰非神经内分泌瘤中的表达( P <0.05);INSM1主要表达于食管、胰腺和结直肠神经内分泌肿瘤中,与CgA、Syn和CD56表达不同,INSM1表达与GEP-NEN分级无关( P >0.05)。INSM1对GEP-NEN诊断的灵敏度高于CgA,特异度与CgA、Syn和CD56差异无统计学意义( P >0.05)。结论 INSM1属于新的神经内分泌标志物,可与CgA、Syn和CD56联合检测用于 GEP-NEN的诊断。 展开更多
关键词 神经内分泌肿 胰岛素瘤相关蛋白1 CgA SYN CD56
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葡萄糖及细胞因子对胰岛素瘤相关蛋白-2表达水平的影响 预览
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作者 刘煜 陈家伟 +4 位作者 刘超 曾丽玲 Alice Ho 朱虎 陈小章 《中国药物与临床》 CAS 2005年第10期 735-738,共4页
目的探讨葡萄糖、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ对胰岛细胞自身抗原胰岛素瘤相关蛋白(IA)-2表达水平及胰岛素分泌水平的影响.方法以不同浓度的葡萄糖(3、7、11、30 mmol/L)、10 ng/mlIFN-γ及100ng/ml TNF-α分别刺激胰岛细胞系... 目的探讨葡萄糖、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ对胰岛细胞自身抗原胰岛素瘤相关蛋白(IA)-2表达水平及胰岛素分泌水平的影响.方法以不同浓度的葡萄糖(3、7、11、30 mmol/L)、10 ng/mlIFN-γ及100ng/ml TNF-α分别刺激胰岛细胞系RIN5F 24 h和48 h,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组RINSF细胞中IA-2的mRNA表达水平,并用放射免疫法检测上清中胰岛素的浓度.结果RT-PCR结果显示以不同浓度葡萄糖(3、7、11、30 mmol/L)分别刺激RIN5F细胞系后IA-2 mRNA水平呈浓度依赖性和时间依赖性增加;TNF-α可抑制IA-2 mRNA的水平,并且作用48 h后IA-2表达水平显著降低(P<0.05);IFN-γ作用24 h及48 h均可显著抑制IA-2的表达(P<0.05).TNF-α或IFN-γ刺激RINSF细胞系后,上清中胰岛素水平均较基础值降低,并且作用48 h后差异有统计学意义(P<0.05).结论葡萄糖可使IA-2的mRNA水平呈剂量依赖性和时间依赖性增加,TNF-α、IFN-γ可抑制IA-2的mRNA表达和胰岛素分泌浓度. 展开更多
关键词 葡萄糖 细胞因子类 胰岛素瘤相关蛋白2 胰岛素瘤相关蛋白-2 分泌水平 细胞因子 葡萄糖 干扰(IFN)-Γ mRNA表达 反转录聚合酶链反应 IFN-γ TNF-α
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胰岛素瘤相关蛋白—2自身抗体酶联免疫吸附测定方法的建立 预览 被引量:1
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作者 贾秀娟 谢晓雁 +5 位作者 张迪 周文中 刘优萍 郑升 杨键 罗敏 《诊断学理论与实践》 2003年第2期 110-112,共3页
目的:建立糖尿病患者血清中胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)自身抗体的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法.方法:以链亲和素预包被的聚苯乙烯微量滴定板为固相载体,原核表达的生物素酰化IA-2胞内段融合蛋白为抗原,辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG... 目的:建立糖尿病患者血清中胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)自身抗体的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法.方法:以链亲和素预包被的聚苯乙烯微量滴定板为固相载体,原核表达的生物素酰化IA-2胞内段融合蛋白为抗原,辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG为二抗,2,2'-连氮-双-[3-乙基苯并噻唑啉磺酸](ABTS)为显色底物建立ELISA.结果:本方法的平均批内变异系数为8.8%,批间变异系数为7.7%.用该方法和Roche公司生产的"Diaplets Anti-IA-2"IA-2自身抗体酶联免疫试剂盒进行对比,共检测218例糖尿病患者,以Roche试剂盒的检测结果为准,本方法的诊断灵敏度为92.1%,特异度为98.9%.结论:本研究建立的IA-2自身抗体ELISA法有较好的灵敏度、特异度和精密度,且操作简单方便,有较广阔的应用前景. 展开更多
关键词 胰岛素瘤相关蛋白-2 自身抗体 酶联免疫吸附测定 糖尿病
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自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2构象表位多肽研究1型糖尿病B和T淋巴细胞交流途径 被引量:1
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作者 管玥琰 李阳阳 +7 位作者 赵明慧 邹婧 赵志媛 赵玲玲 彭静 宋丹丹 张秀娟 刘煜 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2016年第10期608-612,共5页
目的研究T细胞与胰岛素瘤相关蛋白2(IA-2)构象限制性表位之间的相互作用,比较IA-2表位空间构象和氨基酸一级序列在B-T细胞相互作用中所起作用的差别。方法设计合成四种IA-2843-855表位多肽,分别为13折叠结构的野生亲本多肽、改变氨... 目的研究T细胞与胰岛素瘤相关蛋白2(IA-2)构象限制性表位之间的相互作用,比较IA-2表位空间构象和氨基酸一级序列在B-T细胞相互作用中所起作用的差别。方法设计合成四种IA-2843-855表位多肽,分别为13折叠结构的野生亲本多肽、改变氨基酸排列顺序得到的α螺旋结构(构象变异性)、改变氨基酸排列顺序得到的无规则卷曲结构(无序结构型)以及通过引入34"疏水氨基酸得到的更具有B折叠结构的多肽(序列变异型),选取IA-2抗体阳性的I型糖尿病(T1DM)、2型糖尿病(T2DM)患者各12例及健康志愿者12名为研究对象,采取外周血单个核细胞并给予四种不同结构IA-2843-855刺激,分别计算各组的刺激指数(SI)及各组细胞被刺激后分泌细胞因子白细胞介素(IL)4及IL-2的水平,组间比较采用t检验。结果与T2DM组比较,IA-2843-855多肽、d螺旋结构、无规则卷曲结构、更具B折叠结构的刺激指数在T1DM组升高,差异均有统计学意义(分别为1.33±0.05比1.13±0.06,1.27±0.06比1.19±0.05,1.31±0.07比1.21±0.05,1.20±0.07比1.11±0.05,t=-11.60~-2.71,均P〈0.05),TIDM组与健康对照组相比较亦升高,差异亦有统计学意义(t=-12.60- -2.12,均P〈0.05);四种多肽刺激T1DM组T淋巴细胞分泌IL-4水平较T2DM组及健康对照组均降低,差异均有统计学意义(t=2.43~11.75,均P〈0.05);同时这四种多肽刺激T1DM组T淋巴细胞分泌IL-2水平与T2DM组及健康对照组比较均升高,差异均有统计学意义(t=7.20- -2.14,均P〈0.05);序列变异型多肽对T1DM组淋巴细胞的增殖影响与其他三组比较均有所下降(t=2.41-3.72,均P〈0.05),刺激T细胞分泌细胞因子IL-2与其他三组比较均有所下降(t=2.09-4.91,均P〈0.05),刺激T细胞分泌细胞因子IL-4的水平与其他三种多肽相� 展开更多
关键词 糖尿病 1 胰岛素瘤相关蛋白2 自身免疫 B淋巴细胞 T淋巴细胞
1型糖尿病自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2真核表达系统的构建和鉴定 预览 被引量:1
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作者 刘煜 朱虎 +5 位作者 曾丽玲 陈家伟 杨金奎 钟耀华 王若宁 陈小章 《中华糖尿病杂志(1006-6187)》 CSCD 北大核心 2005年第3期 230-233,共4页
目的构建能高效表达自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2(IA-2)的真核表达载体作为预防发生1型糖尿病(T1DM)的基因疫苗. 方法利用基因工程技术构建重组pEGFP/IA-2真核表达系统,并且转染、筛选稳定高表达IA-2的RIN5F胰岛细胞株,用免疫印迹法并在... 目的构建能高效表达自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2(IA-2)的真核表达载体作为预防发生1型糖尿病(T1DM)的基因疫苗. 方法利用基因工程技术构建重组pEGFP/IA-2真核表达系统,并且转染、筛选稳定高表达IA-2的RIN5F胰岛细胞株,用免疫印迹法并在荧光显微镜下鉴定其表达,利用共培养体系检测IA-2刺激淋巴细胞增殖率. 结果双酶切结果表明成功构建了重组pEGFP/IA-2真核表达系统,免疫印迹法证实可在RIN5F细胞内高表达IA-2.并且该表达的IA-2可显著促进NOD小鼠淋巴细胞增殖反应(P<0.05). 结论成功构建的IA-2真核表达系统对于T1DM基因疫苗预防策略和对于IA-2生理功能的研究都具有重要的意义. 展开更多
关键词 1型糖尿病 自身抗原 胰岛素瘤相关蛋白2 真核表达系统 IA-2 疫莳
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人胰岛素瘤相关蛋白-2基因的克隆及原核表达研究 预览 被引量:2
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作者 贾秀娟 陈战 +3 位作者 许光武 谢超 谢晓雁 罗敏 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第3期 196-199,共4页
目的克隆1型糖尿病自身抗原人胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)的编码基因,并从大肠杆菌中表达具有免疫原性的人IA-2重组蛋白.方法抽提胎脑总RNA,通过RT-PCR获得编码IA-2胞内结构域的cDNA,与Pinpoint Xa-1T质粒相连接,构建表达型重组质粒,经转... 目的克隆1型糖尿病自身抗原人胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)的编码基因,并从大肠杆菌中表达具有免疫原性的人IA-2重组蛋白.方法抽提胎脑总RNA,通过RT-PCR获得编码IA-2胞内结构域的cDNA,与Pinpoint Xa-1T质粒相连接,构建表达型重组质粒,经转化、筛选并鉴定后,从大肠杆菌诱导表达生物素酰化融合蛋白,进而用亲和层析纯化之,以dot-blot鉴定其免疫原性.结果重组质粒转化的大肠杆菌经IPTG诱导表达及亲和层析后得到了纯度较高、分子量约为59kd的融合蛋白,表达产物用dot-blot证明具有免疫原性.结论原核表达的生物素酰化人IA-2胞内段融合蛋白具有正确的免疫学构象. 展开更多
关键词 胰岛素瘤相关蛋白-2 克隆 原核表达 1型糖尿病 自身抗原 大肠杆菌 RT-PCR
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