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川崎病内皮细胞模型及其发病机制研究进展 预览
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作者 郑小兰 张怡 《医学研究杂志》 2019年第6期11-13,104共4页
川崎病(Kawasaki disease,KD)是一种急性自限性血管炎症,主要发生于6个月~5岁儿童,其发病机制尚不清楚.研究发现KD患儿存在血管内皮细胞损伤及功能紊乱,因此目前有许多KD体外研究以内皮细胞为模型,其中又以人脐静脉内皮细胞(human umbil... 川崎病(Kawasaki disease,KD)是一种急性自限性血管炎症,主要发生于6个月~5岁儿童,其发病机制尚不清楚.研究发现KD患儿存在血管内皮细胞损伤及功能紊乱,因此目前有许多KD体外研究以内皮细胞为模型,其中又以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)与人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAEC)为主,为KD发病机制研究提供了重要线索.本文就KD体外研究的内皮细胞模型及其在发病机制上的研究现状做了系统性阐述. 展开更多
关键词 川崎病人 静脉内皮细胞 人冠状动脉 内皮细胞 细胞模型
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GM-CSF及其动员的骨髓源性细胞在创伤愈合中的作用研究
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作者 郑巧伟 禚映辰 +5 位作者 马文兵 崔婷 刘炫鳞 唐凤如 程锴 封卫毅 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期517-521,共5页
目的研究粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)及其动员的骨髓源性细胞促进创伤愈合的作用途径。方法采用正常小鼠及化疗、放疗引起的骨髓抑制小鼠模型,背部形成创面,分别给予皮下注... 目的研究粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)及其动员的骨髓源性细胞促进创伤愈合的作用途径。方法采用正常小鼠及化疗、放疗引起的骨髓抑制小鼠模型,背部形成创面,分别给予皮下注射高、低剂量(50,17μg·kg-1) GM-CSF,测量创伤愈合程度;采用MTT观察不同浓度下猪髋动脉内皮细胞(pig iliac endothelium cells,PIECs)增殖状况;采用Matrigel基质胶培养人脐静脉内皮细胞和小鼠动脉环,并给予100 ng·mL-1 GM-CSF,观察其微管结构形成情况。结果在小鼠创伤愈合模型中,高剂量GM-CSF(50μg·kg-1)组创面修复较低剂量更为明显;在小鼠骨髓抑制模型中,低剂量GM-CSF促进骨髓抑制小鼠的创伤愈合;GM-CSF在0.01~781.25 ng·mL-1明显促进PIECs的增殖;GM-CSF 100 ng·mL-1明显促进人脐静脉内皮细胞和动脉环周围微管形成。结论 GM-CSF通过动员骨髓源性细胞和作用于内皮细胞促进创伤愈合。 展开更多
关键词 创伤愈合 GM-CSF 骨髓抑制 静脉内皮细胞 动脉环
BMSCs与VEGF 165-HUVEC局部皮下组织层共移植大鼠缺血皮瓣存活率观察 预览
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作者 明华伟 何芸 +4 位作者 付光新 李彪 甘升远 邵学垒 夏德林 《山东医药》 CAS 2019年第15期37-41,共5页
目的 观察骨髓基质干细胞(BMSCs)与血管内皮生长因子165基因修饰的脐静脉内皮细胞(VEGF165-HUVEC)局部皮下组织层共移植大鼠缺血皮瓣存活率。方法 50只雌性SD大鼠均制备缺血皮瓣模型,后随机分为5组各10只,A组移植BMSCs与VEGF165-HUVEC(1... 目的 观察骨髓基质干细胞(BMSCs)与血管内皮生长因子165基因修饰的脐静脉内皮细胞(VEGF165-HUVEC)局部皮下组织层共移植大鼠缺血皮瓣存活率。方法 50只雌性SD大鼠均制备缺血皮瓣模型,后随机分为5组各10只,A组移植BMSCs与VEGF165-HUVEC(1∶1),B组移植VEGF165-HUVEC,C组移植BMSCs与HUVEC(1∶1),D组移植HUVEC,E组注射等体积0.9%NaCl溶液,比较各组术后第11天皮瓣存活率、皮瓣微血管密度(MVD)及术后第2、4、7、14d血清VEGF蛋白水平。结果 A、B、C、D、E组皮瓣存活率分别为84.3%±4.7%、61.2%±4.5%、50.1%±3.8%、43.8%±2.9%、30.7%±1.9%,两两比较,P均<0.05。A组术后2、4、7、14d血清VEGF蛋白水平分别为(486.3±7.5)、(583.7±13.4)、(682.5±12.6)、(274.2±7.1)pg/mL,B组分别为(352.3±4.8)、(435.2±6.9)、(550.2±9.7)、(215.5±5.8)pg/mL,C组分别为(34.8±2.9)、(35.6±3.2)、(29.1±2.8)、(26.9±1.9)pg/mL,D组分别为(33.1±2.0)、(31.2±3.7)、(27.9±2.8)、(24.7±2.1)pg/mL,E组分别为(33.2±3.6)、(30.7±2.8)、(33.2±2.7)、(25.7±1.8)pg/mL,A组与其余组比较,P均<0.05。A、B、C、D、E组MVD计数分别为62.1±5.2、53.7±4.8、40.5±3.1、25.9±3.0、17.8±1.1,两两比较,P均<0.05。结论 BMSCs与VEGF165-HUVEC共移植可能提高皮瓣存活率、上调血清VEGF蛋白表达、提高局部MVD,进而提升大鼠缺血皮瓣存活能力。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 血管内皮生长因子 静脉内皮细胞 皮瓣存活能力
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Genistein对子痫前期患者离体脐静脉内皮细胞的保护作用及其机制研究
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作者 刘黎星 闵羡慧 +1 位作者 张敏 侯赛榕 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第3期261-266,共6页
目的分析染料木素(Genistein)对子痫前期患者脐静脉内皮细胞(HUVECs)数量及功能变化的影响及其机制。方法选取同期住院、年龄孕周及病变程度无显著差异的子痫前期患者40例,随机分成Genistein干预组及患者组(每组20例),20例正常妊娠孕妇... 目的分析染料木素(Genistein)对子痫前期患者脐静脉内皮细胞(HUVECs)数量及功能变化的影响及其机制。方法选取同期住院、年龄孕周及病变程度无显著差异的子痫前期患者40例,随机分成Genistein干预组及患者组(每组20例),20例正常妊娠孕妇为对照组,分离并培养上述研究对象的HUVECs,采用MTT等方法检测3组内皮细胞的增殖、黏附和迁移能力,采用荧光标记的牛血清白蛋白(BSA)检测3组内皮细胞的单层屏障功能;同时采用ELISA法检测内皮细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,Real-time PCR和Western blot法检测凋亡相关的Bcl-2、Bax基因和蛋白表达的水平。结果与子痫前期患者组比较,Genistein干预组内皮细胞增殖、黏附、迁移能力及其屏障功能明显升高,内皮细胞GSH-Px活性、抗凋亡的Bcl-2基因和蛋白表达水平明显升高,同时,8-OHdG水平及促凋亡的Bax基因和蛋白表达水平明显下降,且差异均有显著性(P<0.01)。而Genistein干预组与正常妊娠组比较,上述差异无显著性。结论 Genistein可能通过抗氧化、抗凋亡,减少子痫前期患者内皮细胞的损伤,提高内皮细胞的增殖能力及屏障功能,从而对子痫前期的发生、发展起预防和治疗的作用。 展开更多
关键词 染料木素 子痫前期 静脉内皮细胞 氧化应激 抗凋亡
骨髓间充质干细胞膜片和脐静脉内皮细胞共培养模型的构建及鉴定 预览
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作者 周震 王亚敏 +3 位作者 任飞 张兆强 曾曙光 杨熙 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期3951-3955,共5页
背景:细胞膜片技术是近年来热门的组织工程学技术,但是膜片中间部位的营养供给和移植后血供问题易导致失败,所以预血管化是提高组织工程材料移植后存活率的关键。目的:比较在不同氧含量下,人骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞共培养形... 背景:细胞膜片技术是近年来热门的组织工程学技术,但是膜片中间部位的营养供给和移植后血供问题易导致失败,所以预血管化是提高组织工程材料移植后存活率的关键。目的:比较在不同氧含量下,人骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞共培养形成预血管化骨髓间充质干细胞膜片的生物学性能。方法:实验分2组:常氧共培养组即常氧(体积分数20%O2)条件下形成人骨髓间充质干细胞膜片,常氧条件下加入人脐静脉内皮细胞共培养;低氧共培养组,即低氧(体积分数2%O2)条件下形成人骨髓间充质干细胞膜片,常氧条件下加入人脐静脉内皮细胞共培养。采用免疫荧光染色技术观察并比较共培养7d两组的微血管生成情况,并通过ELISA法比较不同氧含量下骨髓间充质干细胞膜片内血管内皮生长因子的水平。结果与结论:①与常氧共培养组比较,低氧共培养组的血管更长、血管密度更高、管间交互连接更多(P <0.05);②低氧共培养组的血管内皮生长因子水平高于常氧共培养组(P <0.05);③结果证实,低氧共培养组较常氧共培养组膜片更利于血管生长,对于建立优化的预血管化膜片具有可行性。 展开更多
关键词 低氧 常氧 细胞膜片 骨髓间充质干细胞 免疫荧光染色 静脉内皮细胞 血管内皮生长因子 细胞 血管化 组织工程
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TNF-α增强牙髓干细胞与脐静脉内皮细胞共培养血管生成能力 预览
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作者 安莉 沈帅 +3 位作者 王璐瑶 李勇 牛玉梅 潘爽 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第10期966-969,共4页
目的:研究TNF-α对人牙髓干细胞和人脐静脉内皮细胞共培养体系体外血管生成能力的影响。方法:体外培养hDPSCs,并与HUVECs按1∶5比例行体外共培养。用0、50μg/L TNF-α作用于共培养系统并进行体外血管形成实验,分别在3、6、9 h检测各组... 目的:研究TNF-α对人牙髓干细胞和人脐静脉内皮细胞共培养体系体外血管生成能力的影响。方法:体外培养hDPSCs,并与HUVECs按1∶5比例行体外共培养。用0、50μg/L TNF-α作用于共培养系统并进行体外血管形成实验,分别在3、6、9 h检测各组小管形成的相对长度和节点数目并行细胞活死染色,CCK8法检测50μg/L TNF-α对共培养系统中两种细胞增殖的影响,采用SPSS 20.0软件对数据进行统计学分析。结果:体外小管形成实验结果显示在3、6、9 h,50μg/L TNF-α作用的实验组形成的小管相对长度和分支点数明显高于空白对照组(P<0.05)。CCK8结果表明50μg/L TNF-α对共培养组细胞的增殖与对照组相比,无明显变化(P>0.05)。结论:50μg/L TNF-α增强人牙髓干细胞与人脐静脉内皮细胞共培养体系体外血管生成能力。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 静脉内皮细胞 牙髓再生 血管生成
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PEEK表面修饰VEGF模拟肽对HUVECs增殖及功能活性的影响 预览
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作者 潘晓艺 郑维银 +3 位作者 李焰 黎国英 师嘉程 李云飞 《西南国防医药》 CAS 2019年第4期428-431,共4页
目的探究聚醚醚酮(PEEK)表面修饰血管内皮生长因子(VEGF)模拟肽(QK)对HUVECs增殖及其功能活性的影响。方法用聚多巴胺(PDA)将QK接枝到PEEK表面,然后根据材料的不同分为无修饰的PEEK组、仅修饰PDA的PDA组、修饰QK的QK组,测定各组的接触角... 目的探究聚醚醚酮(PEEK)表面修饰血管内皮生长因子(VEGF)模拟肽(QK)对HUVECs增殖及其功能活性的影响。方法用聚多巴胺(PDA)将QK接枝到PEEK表面,然后根据材料的不同分为无修饰的PEEK组、仅修饰PDA的PDA组、修饰QK的QK组,测定各组的接触角;各组分别与脐静脉内皮细胞(HUVECs)共培养,通过CCK8实验、一氧化氮(NO)含量测定和鬼笔环肽细胞骨架染色等方法,检测各组细胞的增殖和功能活性。结果QK及PDA修饰后的PEEK对HUVECs的生长均无抑制。QK修饰后的PEEK接触角最小,亲水性最佳(P<0.05),且细胞的增殖及功能活性均最好(P<0.05)。结论PDA可将QK接枝在PEEK表面,修饰QK的PEEK亲水性增加,并可促进HUVECs增殖活性,改善材料的成血管活性及骨整合能力,表明这种修饰方法对于改善PEEK的生物学活性很有效,且方法简单。 展开更多
关键词 聚醚醚酮 聚多巴胺 VEGF模拟肽 静脉内皮细胞 接触角 一氧化氮
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IL-35对重度子痫前期孕妇血清诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的作用
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作者 汪洪友 钱雷 +1 位作者 邹应芬 李明 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期552-556,共5页
目的探讨白细胞介素35(IL-35)对子痫前期(PE)孕妇外周血血清诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用。方法收集2016年9月至2018年3月在江苏省滨海县人民医院确诊的重度PE孕妇22例(重度PE组)、轻度PE孕妇24例(轻度PE组),同期24例正常孕... 目的探讨白细胞介素35(IL-35)对子痫前期(PE)孕妇外周血血清诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用。方法收集2016年9月至2018年3月在江苏省滨海县人民医院确诊的重度PE孕妇22例(重度PE组)、轻度PE孕妇24例(轻度PE组),同期24例正常孕妇为对照组,检测3组孕妇的外周血中IL-35水平及诱导型调节性T淋巴细胞35(iTr35)细胞的比例。并于体外分离培养正常孕妇分娩的健康新生儿脐带的HUVEC。(1)分为空白对照组、重度PE血清组和IL-35+重度PE血清组,流式细胞仪检测3组HUVEC的凋亡率;(2)分为空白对照组、肿瘤坏死因子α(TNF-α)组和IL-35+TNF-α组,基因芯片法检测3组HUVEC基因的表达水平;(3)分为空白对照组、TNF-α组、TNF-α+IL-35组、TNF-α+IL-35+shRNA组和TNF-α+IL-35+对照RNA组,实时荧光定量PCR技术和蛋白印迹法检测5组HUVEC中表达水平差异最大的基因;(4)分为空白对照组、重度PE血清组、IL-35+重度PE血清组、IL-35+重度PE血清+shRNA组和IL-35+重度PE血清+对照RNA组,采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐法和荧光亲脂性羰花青染料法检测5组HUVEC中活性氧簇水平和线粒体膜电位水平。结果(1)重度PE组[1.56μg/L(0.40~2.01μg/L)]和轻度PE组[2.83μg/L(1.85~4.11μg/L)]孕妇的外周血IL-35水平与对照组孕妇比较[4.14μg/L(2.14~6.93μg/L)],差异有统计学意义(P<0.05)。重度PE组[0.82%(0.43%~1.54%)]和轻度PE组[1.23%(0.46%~2.03%)]孕妇的外周血iTr35细胞的比例与对照组[1.64%(0.88%~2.43%)]孕妇比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)体外培养HUVEC,与空白对照组及TNF-α组细胞比较,IL-35+TNF-α组细胞上调倍数最大的基因是S100A8;与空白对照组[6.01%(3.46%~9.54%)]细胞比较,重度PE血清组[16.43%(6.25%~22.32%)]细胞的凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与重度PE血清组比较,IL-35+重度PE血清组细胞的凋亡率[分别为16.43%(6.25%~22.32%),10.34%(5.89%~14.56%)]、活性氧簇水平(分别为133.1� 展开更多
关键词 内皮细胞凋亡 孕妇外周血 静脉内皮细胞 IL-35 重度子痫前期 血清诱导 实时荧光定量PCR技术 TNF-α
miR-155通过调节Caspase-3和FADD表达影响TNF-α诱导的HUVEC凋亡
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作者 曹运长 邓洁 +2 位作者 文红波 王兴波 唐旻 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2019年第2期106-113,共8页
目的观察TNF-α处理的脐静脉内皮细胞(HUVEC)中miR-155的表达情况,探讨miR-155的表达与TNF-α诱导的HUVEC凋亡的关系,并探究两者之间的作用机制。方法不同浓度TNF-α分别处理HUVEC不同时间,MTT法检测细胞活性,Hoechst33342荧光染色法检... 目的观察TNF-α处理的脐静脉内皮细胞(HUVEC)中miR-155的表达情况,探讨miR-155的表达与TNF-α诱导的HUVEC凋亡的关系,并探究两者之间的作用机制。方法不同浓度TNF-α分别处理HUVEC不同时间,MTT法检测细胞活性,Hoechst33342荧光染色法检测HUVEC凋亡,qRT-PCR检测细胞中miR-155的表达;通过转染miR-155 mimic和anti-miR-155使HUVEC中miR-155过表达或抑制其表达,Hoechst33342荧光染色和Annexin V-FITC/PI双染法检测过表达miR-155或抑制miR-155表达对HUVEC凋亡的影响;使用miRanda和Tangetscan等分析软件预测miR-155作用的潜在靶基因,Western blot检测靶基因Caspase-3和FADD的表达变化。结果 TNF-α可诱导HUVEC凋亡,且呈剂量和时间依赖性增加;10μg/L TNF-α处理HUVEC 24 h后可以诱导其miR-155表达明显增加;抑制miR-155表达可以增加HUVEC凋亡;miR-155过表达则抑制HUVEC凋亡;miR-155通过调节Caspase-3、FADD和active-Caspase-3表达抑制细胞凋亡。结论 miR-155通过下调FADD和Caspase-3表达调节Caspase凋亡信号通路,抑制TNF-α诱导的HUVEC凋亡。 展开更多
关键词 MIR-155 CASPASE-3 FADD 静脉内皮细胞 细胞凋亡
低剂量X射线对脐静脉内皮细胞分泌vWF的影响
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作者 王一凡 郑盈盈 +1 位作者 解奇 刘炬 《中国辐射卫生》 2018年第1期25-27,共3页
目的探讨低剂量X射线(0.1 Gy)照射对脐静脉内皮细胞分泌vWF的影响。方法采用医用直线加速器对脐静脉内皮细胞进行0、0.1 Gy(剂量率为200 cGy/min)的X射线照射,然后采用MTT法、台盼蓝染色和细胞凋亡实验检测细胞增殖、细胞活力及细... 目的探讨低剂量X射线(0.1 Gy)照射对脐静脉内皮细胞分泌vWF的影响。方法采用医用直线加速器对脐静脉内皮细胞进行0、0.1 Gy(剂量率为200 cGy/min)的X射线照射,然后采用MTT法、台盼蓝染色和细胞凋亡实验检测细胞增殖、细胞活力及细胞凋亡。此外,采用ELISA和Westernblot方法检测受X射线照射后的细胞培养液中vWF的表达。结果以0.1 Gy的低剂量X射线照射脐静脉内皮细胞后,细胞增殖、细胞活力以及细胞凋亡的结果与对照组相比无统计学差异,但照射后的脐静脉内皮细胞培养基中vWF水平明显升高。结论低剂量(0.1 Gy)的X射线剂量照射不会导致脐静脉内皮细胞增殖、凋亡或细胞活性的显著改变,但是促使其分泌vWF的量增多。 展开更多
关键词 X射线 0.1 GY 血管性血友病因子 静脉内皮细胞 血栓形成
小肠黏膜下层促血管内皮细胞体外增殖及成血管化作用 预览
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作者 焦自钊 薛武军 +4 位作者 安茂竹 付海霞 李杨 李凤楼 盛练芬 《西安交通大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第6期805-809,共5页
目的 探讨体外共培养条件下小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)对脐静脉内皮细胞(umbilical vein endothelial cells,UVECs)增殖及成血管化功能的影响。方法 采用胶原酶消化法原代培养获取UVECs并进行细胞形态学及免疫荧光... 目的 探讨体外共培养条件下小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)对脐静脉内皮细胞(umbilical vein endothelial cells,UVECs)增殖及成血管化功能的影响。方法 采用胶原酶消化法原代培养获取UVECs并进行细胞形态学及免疫荧光鉴定。组织工程学方法制备SIS,免疫组化及酶联免疫吸附(ELISA)法检测SIS中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,b-FGF)等。建立UVECs与SIS体外共培养体系,设UVECs单独培养为对照组,比较两组UVECs的增殖状况及成血管化作用。结果 通过原代培养成功获得UVECs。免疫组化检测制备的SIS主要由Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白等细胞外基质成分组成;ELISA检测SIS孵育液中VEGF、b-FGF质量浓度分别为(48.83±5.67)、(72.36±8.71)ng/mL。体外共培养时,UVECs单独培养组无血管样结构形成,UVECs和SIS共培养组较UVECs单独培养组UVECs生长相对致密,且有血管样结构形成;UVECs生长曲线于UVECs和SIS共培养组上移,在对数生长期的第4、5天,UVECs和SIS共培养组UVECs细胞数分别为(7.91±0.42)×104、(9.15±0.48)×104,大于UVECs单独培养组的(4.26±0.27)×104、(6.71±0.31)×104(P<0.01),计算UVECs和SIS共培养组UVECs群体倍增时间短于UVECs单独培养组(P<0.01)。结论 SIS和UVECs体外共培养时,SIS可通过其Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白等细胞外基质成分及所含的血管内皮细胞各生长因子等促进UVECs增殖及成血管化。 展开更多
关键词 小肠黏膜下层 静脉内皮细胞 细胞增殖 成血管化
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模拟体内肿瘤微环境的乳腺癌细胞与脐静脉内皮细胞的体外共培养
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作者 杨艳芳 孟盈盈 +5 位作者 叶军 夏学军 李琳 董武军 王洪亮 刘玉玲 《药学学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期403-409,共7页
为了更好地模拟体内肿瘤组织复杂的微环境特点,本研究采用间接共培养的方法,构建了乳腺癌细胞(human breast adenocarcinoma cells,MCF-7)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的体外共培养模型,以... 为了更好地模拟体内肿瘤组织复杂的微环境特点,本研究采用间接共培养的方法,构建了乳腺癌细胞(human breast adenocarcinoma cells,MCF-7)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的体外共培养模型,以用于后续抗血管生成和诱导肿瘤凋亡的双重疗法的体外研究。分别以同期单独培养的MCF-7和HUVECs细胞为对照,对共培养的MCF-7和HUVECs细胞在培养过程中的细胞活性、形态、电阻、周期和血管内皮生长因子(VEGF)含量进行了考察。结果显示,与单独培养的MCF-7和HUVECs细胞相比,共培养的两种细胞活性更高,且发生了变形、结构变疏松的形貌改变,表现出更低的电阻值,细胞周期活跃、增殖明显(S和G_2/M期比例较大),以及有更高的VEGF表达(约1.4~2倍)。该模型很好地模拟了体内肿瘤细胞与肿瘤血管的相互作用关系,可作为设计肿瘤靶向释药系统的体外研究模型。 展开更多
关键词 肿瘤微环境 乳腺癌细胞 静脉内皮细胞 体外双层细胞模型 非接触共培养
EGFL7和FAK在婴幼儿血管瘤组织中的表达及其相关性
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作者 贺月华 冯雷 +4 位作者 罗亚楠 朱璐 刘清 戚世玲 雷水生 《中国皮肤性病学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期620-623,共4页
目的 探讨表皮生长因子样结构域(EGFL7)和黏着斑激酶(FAK)在婴幼儿血管瘤组织中的表达及相关性。方法 采用免疫组织化学(SP法)方法检测婴幼儿血管瘤和正常皮肤组织中EGFL7和FAK的表达水平; 培养脐静脉内皮细胞(HUVEC),用Western... 目的 探讨表皮生长因子样结构域(EGFL7)和黏着斑激酶(FAK)在婴幼儿血管瘤组织中的表达及相关性。方法 采用免疫组织化学(SP法)方法检测婴幼儿血管瘤和正常皮肤组织中EGFL7和FAK的表达水平; 培养脐静脉内皮细胞(HUVEC),用Western-blot方法,检测在不同重组人EGFL7浓度下,EGFL7和FAK蛋白的表达情况。 结果 婴幼儿血管瘤增生期组织中EGFL7和FAK的表达明显高于消退期和正常皮肤组织(P〈0.05),而消退期组和正常皮肤组比较差异无统计学意义(P〉0.05),EGFL7和FAK蛋白的表达与脐静脉内皮细胞(HUVEC)中重组EGFL7 的浓度呈正相关。结论 EGFL7和FAK可能通过影响血管形成参与了婴幼儿血管瘤的发展,EGFL7蛋白可能成为预测婴幼儿血管瘤的病情发展及指导临床治疗的标志物之一。 展开更多
关键词 婴幼儿血管瘤 静脉内皮细胞 EGFL7 血管形成 FAK
黄芪多糖对缺血再灌注损伤脐静脉内皮细胞抗氧化应激机制探讨
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作者 王红芹 孙明杰 +3 位作者 武乾 石晓路 孙丽华 吴旸 《中国中医基础医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期600-603,共4页
目的:探讨黄芪多糖对缺血再灌注损伤脐静脉内皮细胞氧化应激的影响。方法:将培养至5代的脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组、模型组、模型+黄芪多糖组、模型+美托洛尔组,观察黄芪多糖对缺血再灌注损伤脐静脉内皮细胞活性、ROS、LDH... 目的:探讨黄芪多糖对缺血再灌注损伤脐静脉内皮细胞氧化应激的影响。方法:将培养至5代的脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组、模型组、模型+黄芪多糖组、模型+美托洛尔组,观察黄芪多糖对缺血再灌注损伤脐静脉内皮细胞活性、ROS、LDH、MDA含量、线粒体膜电位的影响。结果:与正常对照组比较,缺血再灌注损伤脐静脉内皮细胞ROS、MDA含量、LDH漏出率均显著升高,线粒体膜电位、细胞活性下降;黄芪多糖干预后,缺血再灌注损伤脐静脉内皮细胞ROS、MDA含量、LDH漏出率降低,线粒体膜电位、细胞活性升高。结论:黄芪多糖可能通过抑制自由基、脂质过氧化产物的生成,减少氧化应激而保护缺血再灌注损伤内皮细胞。 展开更多
关键词 黄芪多糖 缺血再灌注损伤 静脉内皮细胞 氧化应激
miR-146a调控人脐静脉内皮细胞的衰老及机制
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作者 安雪青 吕健东 苏锋 《中国动脉硬化杂志》 2018年第11期1127-1132,共6页
目的 探究miR-146a在人脐静脉内皮细胞衰老中的调节作用,并初步探究其机制。方法 以人脐静脉内皮ECV-304细胞为研究对象,连续传代建立ECV-304细胞复制性衰老模型,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)法检测不同代次(P2、P6、P9、P12、P15... 目的 探究miR-146a在人脐静脉内皮细胞衰老中的调节作用,并初步探究其机制。方法 以人脐静脉内皮ECV-304细胞为研究对象,连续传代建立ECV-304细胞复制性衰老模型,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)法检测不同代次(P2、P6、P9、P12、P15代)细胞中衰老细胞比例,实时定量PCR法检测不同代次(P2、P6、P9、P12、P15代)细胞中miR-146a表达。靶基因预测软件预测miR-146a靶基因。细胞转染建立miR-146a表达上调的P12代细胞(Pre-miR146a组)和miR-146a表达下调的P12代细胞(Anti-miR146a组),并建立相应对照组,SA-β-gal法检测衰老细胞比例,Western blot检测NADPH氧化酶4(NOX4)蛋白表达。结果 P6、P9、P12和P15代细胞的衰老细胞比例明显高于P2代细胞(P<0.05),miR-146a表达则明显低于P2代细胞(P<0.05)。靶基因预测miR-146a的靶基因为NOX4;转染后,Pre-miR146a组衰老细胞比例明显低于对照组(P<0.05),Anti-miR146a组衰老细胞比例明显高于对照组(P<0.05);Pre-miR146a组NOX4蛋白表达明显低于对照组(P<0.05),Anti-miR146a组NOX4蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。结论 miR-146a在衰老的人脐静脉内皮细胞ECV-304中表达下降,上调miR-146a表达能够抑制ECV-304衰老,其机制与调节NOX表达有关。 展开更多
关键词 MIR-146A 衰老 静脉内皮细胞 NADPH氧化酶4
槲皮素通过整合素信号通路调控视网膜脉络膜新生血管生成的机制研究 预览
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作者 岳岩坤 王海伟 +3 位作者 邓禹 田沫 王寅琳 张恩魁 《中华实验眼科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期602-607,共6页
目的探讨槲皮素体外、体内抑制视网膜新生血管及脉络膜新生血管(CNV)生成及发展的作用机制。方法体外研究采用人脐静脉内皮细胞(HUVECs),体内研究采用氧诱导视网膜病变(OIR)动物模型及激光诱导的CNV动物模型。细胞学研究中分为... 目的探讨槲皮素体外、体内抑制视网膜新生血管及脉络膜新生血管(CNV)生成及发展的作用机制。方法体外研究采用人脐静脉内皮细胞(HUVECs),体内研究采用氧诱导视网膜病变(OIR)动物模型及激光诱导的CNV动物模型。细胞学研究中分为正常对照组、血管内皮生长因子165(VEGF-165)处理组和VEGF-165+槲皮素处理组。利用细胞计数试剂盒8(CCK8)及Transwell法检测HUVECs的增生及迁移能力,采用Western blot法检测整合素α5及整合素β3蛋白的表达。体内研究中利用OIR动物模型及激光诱导的CNV动物模型评估腹腔内注射槲皮素在抑制视网膜新生血管及CNV中的效果,C57乳母鼠和6~8周龄C57小鼠各18只,均采用随机数字表法随机分为正常对照组、模型对照组和槲皮素处理组,每组6只,采用Western blot法检测各组视网膜中整合素α5和整合素β3蛋白的表达。结果在体外研究中,20 ng/ml VEGF-165可以促进HUVECs的增生及迁移,而50 μmol/L槲皮素可以抑制HUVECs的增生及迁移,正常对照组、VEGF-165处理组以及VEGF-165+槲皮素处理组细胞增生值和穿过Boyden小室的细胞数量整体比较,差异均有统计学意义(F分组=18.51,P=0.00;F=85.74,P=0.00)。在体内研究中,槲皮素连续腹腔内注射20 mg/(kg·d)可以减少OIR模型视网膜无血管灌注区面积,并减少激光诱导的CNV面积,与模型对照组相比,差异均有统计学意义(t=6.02,P=0.00;t=5.79,P=0.00)。Western blot检测显示,VEGF-165+槲皮素处理24 h组整合素α5和整合素β3蛋白表达量均较VEGF-165处理组明显降低,差异均有统计学意义(t=4.46,P〈0.05;t=5.18,P〈0.01)。VEGF-165+槲皮素处理48 h组整合素α5和整合素β3蛋白的表达量较VEGF-165+槲皮素处理24 h组有所升高,但与VEGF-165处理组相比仍降低,差异均有统计学意义(t=6.54,P〈0.05;t� 展开更多
关键词 槲皮素 视网膜新生血管 脉络膜新生血管 静脉内皮细胞 整合素
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不同条件温阳活血解毒复方血清对人脐静脉内皮细胞增殖的影响
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作者 黄瑞莉 黎智文 +3 位作者 陈爽 赵春晓 梁万洪 洪永敦 《广州中医药大学学报》 CAS 2018年第2期284-289,共6页
【目的】探讨不同条件温阳活血解毒复方含药血清(YBTR)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖影响的差异。【方法】体外培养HUVECs细胞。含药血清制备:将32只SD大鼠(雌雄各半)随机分成生理盐水组及低、中、高剂量组(灌胃剂量分别为10... 【目的】探讨不同条件温阳活血解毒复方含药血清(YBTR)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖影响的差异。【方法】体外培养HUVECs细胞。含药血清制备:将32只SD大鼠(雌雄各半)随机分成生理盐水组及低、中、高剂量组(灌胃剂量分别为10.35、31.05、93.15 g·kg^-1,每日2次)4组,分别在4个时间点(大鼠喂养第4天首次灌胃1 h、2 h后,第6天首次灌胃1 h、2 h后,以下分别用D3H1、D3H2、D5H1、D5H2表示)每组各取1只雌性大鼠和雄性大鼠采血制成含药血清。采用CCK8法观察各组含药血清对HUVECs增殖能力的影响。【结果】自不同性别大鼠和不同时间点采集的药物血清作用HUVECs后的细胞增殖抑制率比较,差异均有统计学意义(P性别=0.000〈0.01,P时间=0.000〈0.01),时间和性别的交互作用有统计学意义(P时间×性别=0.001〈0.01),其中D3H2、D5H1随性别的不同而不同(PD3H2×性别=0.000〈0.01、PD5H1×性别=0.002〈0.01)。随着D3H2雌性含药血清剂量的增加,其对HUVECs的增殖抑制作用也逐渐增加,其组间比较差异有统计学意义(P〈0.05),整体趋势呈浓度依赖性。在雌性大鼠中,不同浓度组的含药血清对HUVECs的增殖抑制作用,在D3H2达到峰值后均出现下降;而在雄性大鼠中,低、中剂量组含药血清在D5H1达到峰值,高剂量组则在D3H1达到峰值。【结论】选择雌性的大鼠在D3H2采血制备的温阳活血解毒复方含药血清对HUVECs的增殖抑制作用最佳。 展开更多
关键词 温阳活血解毒复方 血清药理学 影响因素 静脉内皮细胞 细胞培养
Hcy通过下调VEGF表达而抑制HUVEC的活性及迁移能力
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作者 于剑 李光新 +4 位作者 王坤 王宾 王辉 史作磊 于振海 《血管与腔内血管外科杂志》 2017年第5期955-958,961共5页
目的探究同型半胱氨酸(Hcy)对脐静脉内皮细胞(HUVEC)的活性及迁移能力的影响及其相应的作用机制。方法检测收集的临床标本中Hcy表达量与下肢深静脉血栓形成(DVT)的关系,利用CCK8及Transwell实验检测Hcy对HUVEC活性及迁移能力的影... 目的探究同型半胱氨酸(Hcy)对脐静脉内皮细胞(HUVEC)的活性及迁移能力的影响及其相应的作用机制。方法检测收集的临床标本中Hcy表达量与下肢深静脉血栓形成(DVT)的关系,利用CCK8及Transwell实验检测Hcy对HUVEC活性及迁移能力的影响,并进一步检测其血管内皮生长因子(VEGF)的表达,验证VEGF对Hcy作用的影响。结果 DVT患者血清Hcy浓度显著增高,体外实验证实Hcy可以显著抑制HUVEC的活性及迁移能力,并可以下调其VEGF的表达,且Hcy对HUVEC活性及迁移能力的抑制作用是通过下调VEGF的表达而实现的。结论 Hcy可通过下调VEGF的表达而抑制内皮细胞的活性及迁移能力,这可能是高Hcy血症的患者容易发生DVT的原因。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 下肢深静脉血栓形成 静脉内皮细胞 血管内皮生长因子
槲皮素对转化生长因子诱导人脐静脉内皮细胞内皮-间质转化的影响 预览 被引量:1
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作者 吴微 杨柳 徐翊 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2017年第2期65-69,共5页
目的观察槲皮素对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)-12内皮-间质转化的影响,探讨其作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度槲皮素和/或TGF-β1干预HUVEC-12 72 h后细胞活力;RT-PCR和免疫荧光双染检测内皮及间质... 目的观察槲皮素对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)-12内皮-间质转化的影响,探讨其作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度槲皮素和/或TGF-β1干预HUVEC-12 72 h后细胞活力;RT-PCR和免疫荧光双染检测内皮及间质标记物的转变;Western blot检测信号通路;RT-PCR检测在转变过程中发挥关键调节作用的转录因子。结果 RT-PCR和免疫荧光双染结果均提示,TGF-β1(10 ng/m L)连续刺激HUVEC-12 72 h可诱导其转化为成纤维细胞表型,表现出更多的间质标记物升高,内皮标记物降低;Western blot和RT-PCR结果显示,槲皮素呈浓度依赖性抑制smad2/3的磷酸化;TGF-β1刺激后,下游调控内皮-间质转化的重要转录因子snail1、twist1、twist2、ZEB1、ZEB2均明显升高,而100μmol/L槲皮素则可显著下调下游的5种转录因子。结论槲皮素可抑制TGF-β1诱导的HUVEC-12发生内皮-间质转化而发挥抗纤维化的作用。 展开更多
关键词 槲皮素 内皮-间质转化 静脉内皮细胞 纤维化
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急性肺损伤小鼠肺内热休克蛋白A12B的表达 预览
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作者 董良 刘富兵 陈永琴 《临床与病理杂志》 2017年第8期1560-1564,共5页
目的:观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠肺内热休克蛋白A12B(heat shock protein A 1 2 B,H S PA 1 2 B)的表达改变,以及脂多糖(l i p o p o l y s a c c h a r i d e,L P S)对血管内皮细胞H S PA 1 2 B表达的影响。方... 目的:观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠肺内热休克蛋白A12B(heat shock protein A 1 2 B,H S PA 1 2 B)的表达改变,以及脂多糖(l i p o p o l y s a c c h a r i d e,L P S)对血管内皮细胞H S PA 1 2 B表达的影响。方法:采用气管注射LPS(5 mg/kg)复制小鼠ALI动物模型,6 h后取小鼠肺组织,采用real-time PCR和Western印迹检测肺组织内HSPA12B m RNA和蛋白表达。体外研究采用LPS(1μg/m L)诱导人脐静脉内皮细胞炎症反应,r e a l-t i m e P C R和We s t e r n印迹检测细胞H S PA 1 2 B m R N A和蛋白表达,采用N F-κB信号通路抑制剂P DTC观察L P S诱导H S PA 1 2 B表达的可能分子机制。结果:与正常组相比,LPS诱导的ALI小鼠肺组织HSPA12B m RNA和蛋白含量显著增加,同时LPS可时间依赖性地上调人脐静脉内皮细胞HSPA12B m RNA和蛋白表达,而PDTC预处理可部分逆转LPS诱导的HSPA12B m RNA和蛋白上调。结论:ALI小鼠肺内HSPA12B的表达增加,其机制可能与LPS激活NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 急性肺损伤 热休克蛋白A12B 脂多糖 静脉内皮细胞 小鼠
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