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一种荧光细胞标准计数样片的制备与应用 预览
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作者 邢国杰 梅胜兰 相鸿坤 《中国医疗设备》 2019年第2期38-40,66共4页
目的制备一种用于自动荧光显微分析系统质量控制的荧光细胞标准计数样片。方法利用定制的带有黑色方框的载玻片做载体,载玻片表面使用多聚赖氨酸进行防脱处理后,将一定数量荧光标记的人上皮细胞固定在黑色方框内,然后滴加甘油,最后在四... 目的制备一种用于自动荧光显微分析系统质量控制的荧光细胞标准计数样片。方法利用定制的带有黑色方框的载玻片做载体,载玻片表面使用多聚赖氨酸进行防脱处理后,将一定数量荧光标记的人上皮细胞固定在黑色方框内,然后滴加甘油,最后在四周添加中性树胶封片剂后盖上盖玻片封存。以此方法制得不同细胞浓度的标准样片,用于自动荧光显微分析系统的准确性、精密度和复现性测试。结果制备了空白对照、阳性样片A、阳性样片B三种规格的荧光细胞标准计数样片。该系列标准样片经过计量机构检测确认后的结果为真值,用该系列标准样片上机检测,计算得出自动荧光显微分析系统对阳性样片A和阳性样片B的分析准确性分别为98.96%和97.96%;分析精密度分别为1.92%和2.00%;分析复现性误差分别为0.34%和1.33%。结论设计的荧光细胞标准计数样片性能可靠,可作为自动荧光显微分析系统的成品质控测试工具。 展开更多
关键词 荧光细胞标准计数样片 自动荧光显微分析系统 循环肿瘤细胞 荧光标记 质量控制
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荧光碳点探针的合成、性质及其在生物成像中的应用 预览
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作者 李亚丽 郭靖 +3 位作者 宋娟 朴向民 徐晓龙 王英平 《影像科学与光化学》 CAS 2019年第1期46-56,共11页
荧光碳点探针是近几年来发展起来的一种新型荧光探针,具有传统有机染料、荧光染色蛋白及一般荧光纳米材料无法比拟的独特优势,如具有良好的水溶性、化学惰性、低毒性、易于功能化、抗光漂白性、可调谐和生物相容性等优异性能,因而引起... 荧光碳点探针是近几年来发展起来的一种新型荧光探针,具有传统有机染料、荧光染色蛋白及一般荧光纳米材料无法比拟的独特优势,如具有良好的水溶性、化学惰性、低毒性、易于功能化、抗光漂白性、可调谐和生物相容性等优异性能,因而引起研究者的广泛关注。目前已发展水热法等近十种较为经济便捷的方法,可进行大规模的荧光碳点制备,在细胞功能研究及细胞表面和内部功能分子的探测、组织的成像、病菌的定位等方面得到了较为广泛的应用。笔者对近年来荧光碳点的合成方法、依赖于碳点尺寸和波长等性质的发光性能,以及荧光碳点在生物成像等方面的应用作一简要综述,并对其在药用植物病理方面的应用提出展望,期望为丰富荧光碳点在生物成像领域的应用提供一定的借鉴和参考。 展开更多
关键词 荧光碳点 荧光标记 生物成像
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简述荧光蛋白 预览
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作者 王裕鹏 《生物学教学》 北大核心 2019年第5期73-74,共2页
荧光蛋白的发现为生命科学研究提供了极为有效的方法,具有划时代的意义。本文就荧光蛋白的发现、分类、理化性质和基本应用进行归纳总结。
关键词 荧光蛋白 生色团 荧光标记 蛋白质互作
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高中生物学教材中涉及同位素标记和荧光标记的归纳及拓展——由一道联考题引发的思考 预览
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作者 梁晶 《信息周刊》 2019年第24期0345-0346,共2页
2019届湖北省八校高三第二次联考题的一道选择题中涉及到了生物学实验和研究中常用的两种技术方法——同位素标记法和荧光标记法。高中生物教材中对同位素标记法的介绍较为简略,荧光标记法仅仅是给出了相应的实验结果。通过归纳、整理... 2019届湖北省八校高三第二次联考题的一道选择题中涉及到了生物学实验和研究中常用的两种技术方法——同位素标记法和荧光标记法。高中生物教材中对同位素标记法的介绍较为简略,荧光标记法仅仅是给出了相应的实验结果。通过归纳、整理教材中的相关内容,并对这两种方法的概念和基本原理进行拓展,以期许为教师讲评和学生备考提供理论依据和参考。 展开更多
关键词 高中生物学 同位素标记 荧光标记 归纳总结
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利用荧光SSR分析中国糜子的遗传多样性和群体遗传结构 预览
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作者 寇淑君 霍阿红 +5 位作者 付国庆 纪军建 王瑶 左振兴 刘敏轩 陆平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1475-1487,共13页
[目的]利用荧光SSR研究中国糜子的遗传多样性与群体遗传结构,为糜子品种改良、种质创新和资源利用提供依据。[方法]用不同地理来源且表型差异较大的6份糜子材料对SSR引物进行筛选,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳获得条带清晰、稳定性好、... [目的]利用荧光SSR研究中国糜子的遗传多样性与群体遗传结构,为糜子品种改良、种质创新和资源利用提供依据。[方法]用不同地理来源且表型差异较大的6份糜子材料对SSR引物进行筛选,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳获得条带清晰、稳定性好、多态性高的糜子SSR引物,对筛选出的引物5′末端进行6-FAM、HEX、ROX和TAMRA荧光标记,利用基因分析仪检测不同等位变异的扩增片段大小,并以此来分析131份糜子材料的遗传多样性和群体结构。[结果]从202对SSR引物中共筛选出22对扩增稳定、多态性好的SSR引物,能同时适用于传统变性PAGE胶电泳和荧光SSR标记-全自动分析检测技术。22对SSR引物共检测出128个主要等位变异,平均每个位点5.82个;基因多样性指数变化范围为0.35720.8132,平均0.6284;多态性信息含量为0.29340.8150,平均0.5874;Shannon多样性指数为0.54271.7681,平均1.2062。不同生态区糜子种质间遗传距离的变化范围为0.07640.7251,平均0.3121,遗传一致度的变化范围为0.48430.9265,平均0.7465。其中,北方春糜子区和黄土高原春夏糜子区的遗传距离最小,遗传一致度最高,亲缘关系较近。UPGMA聚类分析显示,北方春糜子区和黄土高原春夏糜子区的材料聚为一类,个体间聚类,东北春糜子区的育成品种和农家种聚类结果一致,黄土高原春夏糜子区的育成品种在多个组群中都有出现。通过绘制K与△K的关系图,K=4时,△K最大,据此将131份糜子材料划分为4个类群,类群Ⅰ代表北方春糜子区;类群Ⅱ主要来自东北春糜子区;类群Ⅲ主要是北方春糜子区,群组Ⅳ主要是黄土高原春夏糜子区。各群体中大部分品种亲缘关系单一,少数品种含有其他组群的遗传成分。基于遗传距离的聚类分析与群体遗传结构分析结果基本一致,表明糜子的遗传差异与地理来源相关。[结论]北方春糜子区和黄土高原春夏糜子区的遗传多� 展开更多
关键词 糜子 SSR 荧光标记 遗传多样性 群体结构
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荧光量子点功能材料在生物医学领域的应用 预览
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作者 俞锴 《医疗装备》 2019年第11期193-195,共3页
荧光量子点功能材料作为一种用于生物示踪的新兴纳米材料,已广泛应用于生物医学研究领域。现介绍了荧光量子点功能材料的基本原理、特点及合成修饰方法,并着重阐述了荧光量子点功能材料在生物大分子和亚细胞结构、生物细胞和生物组织以... 荧光量子点功能材料作为一种用于生物示踪的新兴纳米材料,已广泛应用于生物医学研究领域。现介绍了荧光量子点功能材料的基本原理、特点及合成修饰方法,并着重阐述了荧光量子点功能材料在生物大分子和亚细胞结构、生物细胞和生物组织以及生物体标记中的应用。最后对荧光量子点生物功能材料在生物医学研究领域的发展情况进行总结,指出该材料存在稳定性不足、荧光量子的产率低等诸多问题。但随着荧光量子点加工技术的不断进步,该材料发展前景光明。 展开更多
关键词 荧光标记 量子点功能材料 生物医学 探针
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单颗粒示踪技术及其在动物病毒入侵机制研究中的应用 预览
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作者 余婉婷 王乃东 《经济动物学报》 CAS 2019年第1期57-62,共6页
病毒入侵宿主细胞的分子机制十分复杂,是病毒学界的研究热点。单颗粒示踪技术能够直接观察单个病毒入侵细胞的动态行为,有助于解析病毒入侵宿主细胞的分子机制。综述单颗粒示踪技术用于病毒与宿主细胞相互作用的不同过程,有助于动物病... 病毒入侵宿主细胞的分子机制十分复杂,是病毒学界的研究热点。单颗粒示踪技术能够直接观察单个病毒入侵细胞的动态行为,有助于解析病毒入侵宿主细胞的分子机制。综述单颗粒示踪技术用于病毒与宿主细胞相互作用的不同过程,有助于动物病毒入侵机制研究和新型抗病毒药物与疫苗的研发。文中主要论述单颗粒示踪技术的发展历程,介绍该技术用于病毒和细胞亚结构的标记方法和进展,以及单颗粒示踪技术在动物病毒入侵机制研究中的应用进展,并总结现阶段单颗粒示踪技术在病毒学发展中的优势和局限性。 展开更多
关键词 单颗粒示踪技术 病毒 细胞亚结构 内吞 荧光标记
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用于耐药基因体内转移研究的双荧光标记供体菌的构建 预览
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作者 杨忠委 师丹阳 +7 位作者 金敏 尹静 谌志强 王华然 邱志刚 李君文 付佳伦 杨栋 《解放军预防医学杂志》 CAS 2019年第6期1-4,共4页
目的构建红色荧光基因标记基因组、绿色荧光基因标记RK2质粒的双荧光标记供体菌,以实现对耐药质粒在动物体内接合转移的可视化观察。方法利用RED重组技术,以Td-Tomato基因作为表达红色荧光蛋白(RFP)的基因,将Td-Tomato基因插入asl基因中... 目的构建红色荧光基因标记基因组、绿色荧光基因标记RK2质粒的双荧光标记供体菌,以实现对耐药质粒在动物体内接合转移的可视化观察。方法利用RED重组技术,以Td-Tomato基因作为表达红色荧光蛋白(RFP)的基因,将Td-Tomato基因插入asl基因中间,并敲入到大肠杆菌K12基因组中制备成K12Td-tomato细菌。同时构建带有EGFP基因标记的RK2质粒EGFP-RK2,并电转K12Td-tomato细菌感受态细胞,实现双荧光标记供体菌的构建。结果构建的K12Td-tomato:RK2(EGFP)供体菌能够稳定的同时发出绿色和红色荧光,并且荧光的表达是自发的,不需要底物的诱导。结论利用基因组技术可以构建双荧光标记的供体菌,为对耐药基因在生物体内的转移扩散研究提供了可行性。 展开更多
关键词 荧光标记 RK2质粒 耐药性
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沙蚕蛋白酶的荧光标记及细胞摄取机制研究
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作者 杲亚许 丁国芳 +5 位作者 杨最素 余方苗 黄芳芳 唐云平 陈艳 陈锐 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第2期243-255,共13页
该文利用FITC对沙蚕蛋白酶(NAP)进行荧光标记,并通过薄层色谱法、红外光谱法、紫外光谱法及荧光光谱法对标记物进行表征,紫外分光光度法计算标记度。通过测定NAP与FITCNAP的酶促反应动力学参数来比较NAP在标记前后的活性,同时应用MTT法... 该文利用FITC对沙蚕蛋白酶(NAP)进行荧光标记,并通过薄层色谱法、红外光谱法、紫外光谱法及荧光光谱法对标记物进行表征,紫外分光光度法计算标记度。通过测定NAP与FITCNAP的酶促反应动力学参数来比较NAP在标记前后的活性,同时应用MTT法考察NAP标记前后对NCI-H1299细胞毒性的影响。流式细胞术研究NCI-H1299细胞摄取FITC-NAP的机制,荧光显微镜定性观察NCI-H1299细胞对FITC-NAP的摄取。结果表明,每分子标记物约含1.78分子FITC,其最佳荧光激发波长为490 nm、发射波长为515 nm;荧光标记后NAP的活性未受到显著影响;NCI-H1299细胞对FITC-NAP的摄取与药物浓度、作用时间呈正相关;氧化苯砷组的荧光强度低于FITC-NAP组且有极显著差异(P<0.01),因此NAP的摄取机制为内吞。进一步研究发现, NCI-H1299细胞摄取NAP受到网格蛋白依赖性内吞和小窝/脂筏蛋白介导的内吞共同作用。荧光显微镜观察发现,随着时间的增加,更多的细胞摄入FITC-NAP,且主要分布在细胞膜及细胞质中,细胞核中未见分布。 展开更多
关键词 沙蚕蛋白酶 FITC 荧光标记 细胞摄取 药物动力学
水滴模板法制备PS-b-PHEMA/Eu配合物蜂窝状多孔膜及其性能研究
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作者 刘倩 闫春娜 +1 位作者 王利平 李光 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第4期410-418,共9页
采用可逆加成-断裂链转移(RAFT)聚合法合成了一系列两亲性嵌段共聚物聚苯乙烯-b-聚甲基丙烯酸羟乙酯/Eu配合物(PS-b-PHEMA/Eu配合物),通过凝胶渗透色谱(GPC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振氢谱(1H-NMR)和固体荧光光谱对聚合物进... 采用可逆加成-断裂链转移(RAFT)聚合法合成了一系列两亲性嵌段共聚物聚苯乙烯-b-聚甲基丙烯酸羟乙酯/Eu配合物(PS-b-PHEMA/Eu配合物),通过凝胶渗透色谱(GPC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振氢谱(1H-NMR)和固体荧光光谱对聚合物进行了表征,并采用水滴模板法制备了PS-bPHEMA/Eu配合物蜂窝状多孔膜.研究了溶剂、聚合物浓度、聚合物分子量对蜂窝状多孔膜表面形貌的影响.采用场发射扫描电子显微镜(FESEM)、能量色散X-射线能谱仪(EDX)和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)等研究了多孔膜的表面形貌和元素分布.研究结果表明,溶剂、聚合物浓度、聚合物分子量均会影响多孔膜的表面形貌,沸点较低、挥发性较强且与水不互溶的有机溶剂有利于形成规整度高、孔径大小均一的多孔膜,多孔膜的平均孔径随着溶液浓度的增加和聚合物分子量的增大而逐渐减小.FESEM-EDX分析进一步证实亲水基团(Eu配合物基团)主要分布在孔壁上,这与LSCM结果一致.多孔膜在空气中放置6个月后,原本大部分集中在孔内壁的Eu元素,出现在了膜表面,这可能是由于连接在聚合物分子链上的亲水基团随分子链的自由旋转发生了迁移. 展开更多
关键词 蜂窝状多孔膜 水滴模板法 聚苯乙烯-b-聚甲基丙烯酸羟乙酯/Eu配合物 荧光标记
盐酸四环素标记斑马鱼耳石效果及对抗氧化力的影响 预览
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作者 郭鹤 徐莉佳 +4 位作者 叶勤 陶怡曦 苏英 吴荣华 李云 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第2期33-38,共6页
为了研究四环素标记鱼类的效果及其对抗氧化能力的影响,设置100、150、250mg/L浓度梯度的盐酸四环素(TCH)溶液和不同浸泡时间(18h和24h)对毒理实验常用对象斑马鱼(Danio rerio)进行浸泡标记,通过观察TCH浸泡标记后30d内斑马鱼耳石的标... 为了研究四环素标记鱼类的效果及其对抗氧化能力的影响,设置100、150、250mg/L浓度梯度的盐酸四环素(TCH)溶液和不同浸泡时间(18h和24h)对毒理实验常用对象斑马鱼(Danio rerio)进行浸泡标记,通过观察TCH浸泡标记后30d内斑马鱼耳石的标记效果以及浸泡后第1、3、9、15d时鱼体内三种抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)的活性变化,综合分析其标记鱼类的效果和安全性。结果显示,在150mg/L和250mg/L浓度的TCH溶液中浸泡18h或24h,斑马鱼耳石标记率可达100%,且耳石上可见清晰的黄色标记轮纹。浸泡18h时,中高浓度组(150mg/L和250mg/L)斑马鱼的抗氧化酶活性在浸泡后的第3d显著增加。浸泡24h时,各浓度组的抗氧化酶活性在第1d显著升高,250mg/L浓度组的SOD和GSH-Px活性分别在第1d和第9d显著低于对照组,各组的抗氧化酶活性均在第15d时恢复为对照组水平。结果表明,100mg/L和150mg/L浓度的TCH浸泡液对斑马鱼的抗氧化酶活性起诱导作用,250mg/L浓度的TCH溶液浸泡,对其抗氧化酶活性产生了短期的抑制作用并可能对机体产生可恢复的氧化损伤。 展开更多
关键词 盐酸四环素 荧光标记 斑马鱼(Danio rerio) 耳石 抗氧化酶
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基于DNA链置换构建逻辑计算模型 预览
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作者 吴涛 郭冰洁 董亚非 《计算机技术与发展》 2019年第1期44-48,共5页
近年来,随着电子元器件的微型化趋势,其传统制作工艺所面临的挑战也日益显著,寻找新型手段辅助甚至替代传统硅基计算机已逐渐成为科学家们的研究重点。所以,随着生物化学技术的不断发展,以DNA分子作为存储数据和运算媒介的新型计算模型... 近年来,随着电子元器件的微型化趋势,其传统制作工艺所面临的挑战也日益显著,寻找新型手段辅助甚至替代传统硅基计算机已逐渐成为科学家们的研究重点。所以,随着生物化学技术的不断发展,以DNA分子作为存储数据和运算媒介的新型计算模型引起了研究者的广泛关注。为此,提出了基于DNA链置换与荧光标记的分子逻辑计算模型。该方法利用重金属离子Hg^2+能够引发组成DNA分子中胸腺嘧啶(thymine,T)形成T-Hg^2+-T错配的形式,通过检测荧光信号强度的相对变化,构建了与非逻辑门(NAND)。之后,在前者的基础上利用DNA富含鸟嘌呤(guanine,G)的片段可以形成G-四链体结构的情况下,通过结合氯化血红素(Hemin)形成具有过氧化物酶的活性进而促进过氧化氢(H2O2)氧化四甲基联苯胺(TMB^+)得到蓝色的TMB+,以此构建半加器。 展开更多
关键词 DNA 与非门 半加器 链置换 荧光标记
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嗜酸乳杆菌KLDS1.0901表层蛋白对菌株黏附特性的影响 预览
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作者 占萌 李慧臻 +2 位作者 王娜娜 焦雯姝 霍贵成 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第5期144-150,共7页
采用体外实验探究了嗜酸乳杆菌KLDS1.0901的浓度、生长阶段、表层蛋白对其黏附Caco-2细胞能力的影响。将未处理、去除表层蛋白和热致死的KLDS1.0901采用荧光标记灌胃给小鼠,取不同部位的肠黏膜,进行流式细胞检测。通过透射电镜和SDS-PAG... 采用体外实验探究了嗜酸乳杆菌KLDS1.0901的浓度、生长阶段、表层蛋白对其黏附Caco-2细胞能力的影响。将未处理、去除表层蛋白和热致死的KLDS1.0901采用荧光标记灌胃给小鼠,取不同部位的肠黏膜,进行流式细胞检测。通过透射电镜和SDS-PAGE对表层蛋白粗品进行分析鉴定。结果表明,随着菌体浓度的增加,KLDS1.0901黏附率增大直至浓度为10~8CFU/mL黏附率达到饱和。菌体处于对数生长末期时,黏附特性更优。Caco-2单细胞层与KLDS1.0901表层蛋白共同孵育1 h黏附量显著下降(p <0.05),且加入的表层蛋白浓度越高,对其黏附抑制作用越强。未处理的KLDS1.0901细胞壁外围包裹着表层结构,但除去表层蛋白后表层结构即消失。表层蛋白粗品中表层蛋白含量约为15.6%,分子量在43 kDa左右。综上,嗜酸乳杆菌KLDS1.0901含有丰富的表层蛋白,且能较好的黏附于小鼠肠道,具有益生菌的潜力。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 表层蛋白 黏附 荧光标记
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比较三种检测方法在检测医院高频接触物体表面清洁消毒效果的作用和成本效果
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作者 钟晓 肖丽华 +1 位作者 吴庆飞 汪东篱 《热带医学杂志》 CAS 2018年第1期32-35,共4页
目的比较ATP生物荧光检测法、菌落计数法和荧光标记法在检测医院高频接触物体表面清洁消毒效果中的作用及成本效果。方法将某三级医院重症监护室(ICU)的120个高频接触物体表面随机分为三个检测组,每组共40个采样点,在同一时段分别检... 目的比较ATP生物荧光检测法、菌落计数法和荧光标记法在检测医院高频接触物体表面清洁消毒效果中的作用及成本效果。方法将某三级医院重症监护室(ICU)的120个高频接触物体表面随机分为三个检测组,每组共40个采样点,在同一时段分别检测其清洁消毒前后的相对光单位(RLU)值、细菌总数和清洁消毒后的荧光标记清除情况,比较三种方法检出率的差异,并计算检测成本,比较成本效果比值。结果清洁消毒后,高频接触物表的菌落总数中位数由9.07 cfu/cm~2降至2.47 cfu/cm~2,差异有统计学意义(t=5.844,P〈0.016 7);RLU值中位数由378降至211,差异有统计学意义(t=4.353,P〈0.016 7);菌落计数法检测合格率最高(80%),其次是ATP生物荧光检测法(72.5%),荧光标记法最低(42.5%),三者间差异有统计学意义(χ~2=13.846,P〈0.016 7);三种方法检测合格率两两比较,菌落计数法和ATP生物荧光检测法差异无统计学意义(χ~2=0.621,P〉0.016 7),荧光标记法检测合格率低于菌落计数法和ATP生物荧光检测法,差异有统计学意义(χ~2=11.85、7.366,P〈0.016 7);三种方法成本效果比值由高到低依次为:ATP生物荧光检测法41.45元,菌落计数法35.50元,荧光标记法2.35元。结论三种方法均可用于评价医院高频接触物表清洁消毒效果,但荧光标记法更具有成本效果,值得普遍推广。 展开更多
关键词 高频接触物体表面 荧光标记 ATP生物荧光检测 菌落计数
海参硫酸软骨素的荧光标记方法 预览
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作者 王俊 吴反修 +2 位作者 常耀光 陈丰 续晓琪 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第7期1-6,共6页
海参硫酸软骨素是海参体壁的重要组成物质之一,已被证实具有多种生理调节功能,在功能食品开发方面展现出良好的应用前景。与其他碳水化合物类似,海参硫酸软骨素缺乏特异的发色及发光基团。基于此背景,本研究旨在对海参硫酸软骨素进行荧... 海参硫酸软骨素是海参体壁的重要组成物质之一,已被证实具有多种生理调节功能,在功能食品开发方面展现出良好的应用前景。与其他碳水化合物类似,海参硫酸软骨素缺乏特异的发色及发光基团。基于此背景,本研究旨在对海参硫酸软骨素进行荧光标记。以6-氨基荧光素为荧光染料并配合溴化氢活化法成功对该多糖进行了荧光衍生,每分子标记产物中约含4.4分子荧光染料,其最佳荧光激发波长为495nm、发射波长为520nm。分子质量测定、硫酸根质量分数测定及傅里叶变换红外光谱比较分析的结果表明,标记前后多糖的结构特征未发生明显变化,标记产物在中性及碱性环境中展现出较强的荧光强度及稳定性,溶液环境中的NaCl对标记产物的影响有限。海参硫酸软骨素荧光标记方法的建立为后续研究该多糖的吸收代谢过程、功能机理、生物分子间相互作用等科学问题提供了有利条件。 展开更多
关键词 海参硫酸软骨素 荧光标记 6-氨基荧光 稳定性 海参
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Zn3In2S6-CEA量子点荧光探针对结肠癌细胞株SW480靶向标记及生物毒性研究
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作者 张炎 魏勇 +5 位作者 代义文 宋江鲁奇 王淑慧 赵赫 许小亮 朱立新 《中华肿瘤防治杂志》 北大核心 2018年第9期615-621,共7页
目的量子点荧光探针是量子点-抗体复合物,可用于靶向探测肿瘤细胞并在特定条件下使肿瘤细胞发光成像,同时具有对结肠癌诊断及治疗双重功效。本研究通过Zn3In2S6-CEA量子点荧光探针对结肠癌细胞株SW480靶向标记,并进一步研究其细胞毒性... 目的量子点荧光探针是量子点-抗体复合物,可用于靶向探测肿瘤细胞并在特定条件下使肿瘤细胞发光成像,同时具有对结肠癌诊断及治疗双重功效。本研究通过Zn3In2S6-CEA量子点荧光探针对结肠癌细胞株SW480靶向标记,并进一步研究其细胞毒性。方法用免疫组化法鉴定结肠癌细胞株SW480表达癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA),合成水溶性量子点Zn3In2S6并与抗CEA抗体结合形成Zn3In2S6-CEA荧光探针。用Zn3In2S6-CEA荧光探针对结肠癌细胞株SW480进行荧光标记,并用免疫荧光法检测荧光信号。用MTT法和流式细胞术检测与Zn3In2S6-CEA荧光探针结合后结肠癌细胞的增殖抑制和凋亡情况。结果新型Zn3In2S6-CEA量子点荧光探针可有效与结肠癌细胞株SW480结合,分别在荧光显微镜和共聚焦显微镜下显示其对SW480细胞株成功标记。5%浓度组Zn3In2S6-CEA探针在2、24、48和72h细胞抑制率分别为0.002 262、0.101 111、0.213 652和0.301 923,CuInS2@ZnS-CEA探针分别为-0.014 933、0.111 301、0.235 352和0.303 073。细胞毒性实验析因设计的方差分析结果表明,在48h时,Zn3In2S6-CEA探针组细胞抑制率显著低于CuInS2@ZnS-CEA探针组,t=23.928,P〈0.001;其他时间点两组细胞抑制率差异无统计学意义;且两探针组的细胞抑制率均随着时间的增大而增大,不同时间点之间的细胞抑制率差异有统计学意义,F=4 721.400 1,P〈0.001。探针和时间对细胞抑制率的交互作用差异有统计学意义,F=17.366 0,P〈0.001。模型拟合效果理想,R2=0.999。流式细胞术实验结果与MTT法实验结果基本一致。结论结肠癌细胞株SW480胞膜和胞质中大量表达CEA抗原。新合成Zn3In2S6-CEA探针对其胞质和胞膜有效标记后,证实在孵育到达一定时间点时,Zn3In2S6-CEA探针的细胞毒性相比CuInS2@ZnS-CEA探针较低。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 量子点荧光探针 癌胚抗原 荧光标记 细胞毒性
基于CdSe@ZnS量子点水溶性纳米粒子的制备及荧光性能 预览
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作者 庄庆一 由芳田 彭洪尚 《发光学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1339-1346,共8页
作为一种新型的荧光探针,量子点(QD)已经受到越来越多的重视,制备工艺也显得格外重要。水相中合成的量子点效率低,油相中的量子点经过转相以后效率也大大衰减。本论文利用再沉淀包覆的方法制备了具有良好的水溶性的掺杂绿光CdSe@Zn... 作为一种新型的荧光探针,量子点(QD)已经受到越来越多的重视,制备工艺也显得格外重要。水相中合成的量子点效率低,油相中的量子点经过转相以后效率也大大衰减。本论文利用再沉淀包覆的方法制备了具有良好的水溶性的掺杂绿光CdSe@ZnS的纳米颗粒G-NPs(534 nm)和掺杂红光CdSe@ZnS的纳米颗粒R-NPs(610 nm),具有窄的半峰宽(G-NPs~29 nm,R-NPs~31 nm),较小的粒径(45 nm),并在此基础上通过发射光谱与荧光衰减研究了量子点之间的能量传递现象。该方法保留了量子点原来的性质,基于其优良的光学性质,对人类肝细胞肝癌细胞株(HepG2)进行了荧光标记,从共聚焦成像实验结果看出,纳米颗粒得到了良好的吞噬效果。 展开更多
关键词 CdSe@ZnS量子点 生物兼容性 荧光标记 荧光寿命 能量传递
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空肠弯曲菌荧光偏振抗体检测方法的建立 预览
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作者 王莉 沙洲 +4 位作者 李诗语 卢晓冉 卜昭阳 梁佳茗 王兴龙 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期220-225,共6页
为建立血清中空肠弯曲菌抗体的荧光偏振检测(FPIA)方法,本研究对空肠弯曲菌的黏附蛋白PEBIA进行原核表达。Western blot鉴定显示该重组蛋白具有良好的抗原性;FITC标记空肠弯曲菌黏附蛋白PEBIA形成示踪物,通过确定示踪物的最佳反应浓... 为建立血清中空肠弯曲菌抗体的荧光偏振检测(FPIA)方法,本研究对空肠弯曲菌的黏附蛋白PEBIA进行原核表达。Western blot鉴定显示该重组蛋白具有良好的抗原性;FITC标记空肠弯曲菌黏附蛋白PEBIA形成示踪物,通过确定示踪物的最佳反应浓度、反应时间及血清最佳稀释度,建立空肠弯曲菌的FPIA抗体检测方法。结果显示:本实验建立的空肠弯曲菌FPIA抗体检测方法的检测标准为FP值≥150mP为阳性,FP值〈150为阴性。该方法仅与空肠弯曲菌阳性血清发生特异性反应,与产肠毒素型大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、金黄色葡萄球菌的抗血清均无交叉反应,具有较强的特异性。该方法对抗体的最低检测效价为1:80,批内和批间的重复性试验变异系数均小于10%,具有较好的重复性。表明本研究建立的FPIA方法为血清中空肠弯曲菌抗体的快速检测提供了一种可行的方法。 展开更多
关键词 荧光偏振法 空肠弯曲菌 荧光标记 原核表达
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Array Tomography技术在生命科学研究中的应用与发展
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作者 席超 靳溪 +2 位作者 刘恺 刘进 庞婧 《解剖科学进展》 2018年第5期551-553,共3页
Array tomography是一种基于连续超薄切片方法的高分辨率组织三维成像技术,可将Z轴分辨率提高到50nm,并可以进行多重荧光染色和扫描电镜观察。近年来,该技术和膜片钳、超高分辨率显微技术等联合使用,在生物组织精细结构和功能研究中得... Array tomography是一种基于连续超薄切片方法的高分辨率组织三维成像技术,可将Z轴分辨率提高到50nm,并可以进行多重荧光染色和扫描电镜观察。近年来,该技术和膜片钳、超高分辨率显微技术等联合使用,在生物组织精细结构和功能研究中得到了广泛的应用。 展开更多
关键词 高分辨率 AT ARRAY TOMOGRAPHY 连续超薄切片 免疫标记 三维成像 组织固定 三维重构 荧光标记 免疫电子显微镜
双指标融合Box-Behnken设计优化α-细辛脑荧光脂质纳米粒制备工艺
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作者 陆苑 冯学珍 +6 位作者 陈颖 张静 覃月琦 徐钦英 陈秀婷 李娜 伍善广 《离子交换与吸附》 CSCD 北大核心 2018年第4期365-373,共9页
目的:优化α-细辛脑荧光脂质纳米粒的制备工艺。方法:以卵磷脂、α-细辛脑、荧光素为材料,采用薄膜分散法制备α-细辛脑脂质纳米粒,Box-Behnken设计响应面法优化α-细辛脑脂质纳米粒的制备工艺。采用双指标即α-细辛脑包封率及荧光钙... 目的:优化α-细辛脑荧光脂质纳米粒的制备工艺。方法:以卵磷脂、α-细辛脑、荧光素为材料,采用薄膜分散法制备α-细辛脑脂质纳米粒,Box-Behnken设计响应面法优化α-细辛脑脂质纳米粒的制备工艺。采用双指标即α-细辛脑包封率及荧光钙黄绿素包封率为优化指标,考察卵磷脂用量、卵磷脂/细辛脑用量比、荧光钙黄绿素用量对制备工艺的影响。结果:对α-细辛脑包封率及荧光钙黄绿素包封率建立了回归方程,经过优化后最佳工艺条件为:卵磷脂用量为0.57g、卵磷脂与药物的用量比为20.10、荧光钙黄绿素用量为0.01g。在此工艺条件下,细辛脑包封率预测值为69.21%,荧光钙黄绿素包封率预测值为93.08%。结论:以α-细辛脑包封率及荧光钙黄绿素包封率为双指标,利用Box-Behnken设计优化了α-细辛脑荧光脂质纳米粒的制备工艺,能够得到稳定可靠的工艺条件,为α-细辛脑新剂型的开发提供了思路。 展开更多
关键词 Α-细辛脑 脂质纳米粒 双指标 BOX-BEHNKEN设计 荧光标记
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