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转虎杖芪合酶基因壶瓶枣的抗真菌试验 预览
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作者 罗在柒 吴仕艳 +3 位作者 杨洋 郭辉力 杨亚东 王有年 《贵州林业科技》 2017年第2期43-45,共3页
通过检测白藜芦醇物质以及虎杖芪合酶基因遗传转化的壶瓶枣。并制备粗提液开展抗真菌试验。结果为遗传转化材料中叶片、茎干和茎尖等100 ul提取液(1 g转基因植株鲜重粗提定容得到1 m1)对桃褐腐真菌(Moilinia fructicola)抑菌率分别... 通过检测白藜芦醇物质以及虎杖芪合酶基因遗传转化的壶瓶枣。并制备粗提液开展抗真菌试验。结果为遗传转化材料中叶片、茎干和茎尖等100 ul提取液(1 g转基因植株鲜重粗提定容得到1 m1)对桃褐腐真菌(Moilinia fructicola)抑菌率分别为25.0%、28.57%和16.07%,抑菌效果相当于1 ug白藜芦醇样品(抑菌率为23.08%)。试验证明了遗传转化虎杖芪合酶基因的壶瓶枣具备抗真菌能力。 展开更多
关键词 抗真菌 遗传转化 虎杖基因 壶瓶枣
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农杆菌介导虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣的研究 预览 被引量:2
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作者 罗在柒 郭辉力 +3 位作者 杨亚东 杨明峰 马兰青 王有年 《林业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期101-109,共9页
【目的】白藜芦醇作为植物次生代谢产物不但能提高果树抗真菌能力,还能改善果品质量。遗传转化芪合酶基因能够增强植物的抗真菌能力,虎杖芪合酶基因具有较高的催化合成白藜芦醇的效率,研究虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣,以期获得具有抗... 【目的】白藜芦醇作为植物次生代谢产物不但能提高果树抗真菌能力,还能改善果品质量。遗传转化芪合酶基因能够增强植物的抗真菌能力,虎杖芪合酶基因具有较高的催化合成白藜芦醇的效率,研究虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣,以期获得具有抗真菌能力且改善枣果实品质的遗传转化新材料。【方法】通过组织培养再生体系与目的基因转化技术,优化获得茎诱导丛生芽,构建植物表达载体,优化遗传转化体系,采用农杆菌介导法将虎杖白藜芦醇生物合成关键酶基因Pc PKS5遗传转化壶瓶枣。【结果】优化壶瓶枣茎段诱导得到高分化率的丛生芽遗传转化体系,再生增植率为11.0,为壶瓶枣成功实现遗传转化奠定了基础。将壶瓶枣0.8-1.0 cm含茎尖和茎段的外植体材料置于农杆菌浓度OD600=0.6时侵染菌液中浸泡15.0 min,然后置于培养基上避光共培养3天;随后转入含Cb 300 mg·L^-1,AS 60 mg·L^-1的丛生芽诱导分化培养基中培养5-6周。将分化丛生芽转接至含4.0 mg·L^-1Basta的培养基中,获遗传转化植株173株;经Basta筛选,GUS显色、gDNA PCR、RT-PCR等检测证实,成功获得3个阳性转基因株系,荧光实时定量检测表明株系2表达效率较高。经植物化学成分分析,转化植株中目的基因得以表达,生成了目标产物白藜芦醇,其含量为0.45μg·g^-1(鲜质量)。【结论】本研究成功实现虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣,获得壶瓶枣遗传转化新材料。且Pc PKS5在枣树中异源表达,转基因材料中能够代谢合成白藜芦醇,有望提高转Pc PKS5基因壶瓶枣抗枣树病原真菌病能力。白藜芦醇是否在壶瓶枣遗传转化材料果实中积累,及转基因植株果实品质的影响仍需深入研究。 展开更多
关键词 遗传转化 虎杖基因 枣树 农杆菌介导法 白藜芦醇
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